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Tesis (Doctorado en Ciencias en Innovación Ganadera) El objetivo de este trabajo fue contribuir a la caracterización genética de la raza bovina Romosinuano, mediante estudios utilizando diferentes herramientas estadísticas y genómicas. En un primer estudio, se analizó el crecimiento de las hembras mediante modelos no lineales mixtos, obteniendo una curva de crecimiento distintiva para la población estudiada, además de obtener el valor estimado del peso maduro (430.2 a 466.2 kg) en esta población. Estos resultados indican que el Romosinuano puede considerarse como una raza de tamaño pequeño o mediano. La edad al primer parto, intervalo entre partos y la tasa de parición también fueron estimados. Las hembras con menor tamaño maduro estimado presentaron edades más precoces que vacas más pesadas. En un segundo estudio se utilizó el genotipado, obteniéndose la prevalencia de marcadores genéticos asociados con enfermedades en la población. Marcadores para desmielinización espinal bovina, miocardiopatía dilatada bovina, sindactilia, citrulinemia, leucinosis, miocardiopatía y síndrome del pelo lanoso, deficiencia de factor VIII, lipofuscinosis neuronal ceroidea, α-manosidosis y bocio familiar fueron encontrados de forma polimórfica en la población; además, se identificaron animales portadores homocigotos del marcador relacionado con la sindactilia. En un tercer estudio se evaluó la frecuencia de marcadores genéticos asociados con características de crecimiento. Los bovinos Romosinuano presentaron marcadores polimórficos que pueden ser utilizados como herramienta adicional para la selección y mejoramiento genético en características de crecimiento. Finalmente, considerando también información de Criollo Lechero Tropical, se evaluó la estructura genética y la diversidad entre y dentro de estas poblaciones, comparándolas con otras razas posiblemente asociadas con sus ancestros. Aunque las razas estudiadas mostraron estar ligadas genéticamente con poblaciones ancestrales, como las españolas, otras razas criollas y algunas razas europeas y cebuinas, los bovinos Romosinuano y Criollo Lechero Tropical tienen su propia identidad y estructura genética. Se concluyó que ambas poblaciones pueden considerarse reservorios genéticos con potencial para desarrollar programas de conservación y mejoramiento. Universidad Autónoma Chapingo, CONACyT

En España existe una gran riqueza varietal de olivo (Olea europaea subsp. europaea var europaea) que ha sido ampliamente caracterizada y evaluada. Aun así, varios estudios recientes han evidenciado la presencia de variedades locales de olivo desconocidas, poniendo de manifiesto la necesidad de profundizar en trabajos de prospección, conservación y caracterización varietal. Por ello, en los últimos años, se están llevando a cabo trabajos de prospección en diferentes puntos del país (Andalucía, Aragón, Cataluña y La Rioja). Dichos trabajos han permitido la localización de 290 olivos cultivados de interés y recogida de material vegetal para su posterior identificación. Dicho material ha sido discriminado mediante un conjunto de 96 EST-SNPs recientemente desarrollado en el Banco Mundial de Germoplasma de Olivo del IFAPA (BGMO, Córdoba). El empleo de los marcadores EST-SNPs permitió la identificación de un total de 154 nuevas variedades en las cuatro regiones prospectadas y la detección de casos de sinonimias y homonimias. Además, los marcadores empleados pusieron en evidencia la presencia de una variabilidad relativamente amplia con unos rangos de heterocigosidad esperada y observada de 0,31-0,5 y 0,29-0,81, y valores medios de 0,46 y 0,53, respectivamente. El estudio de las relaciones genéticas entre las variedades prospectadas y el conjunto de variedades nacionales conservadas en el BGMO reveló una clara agrupación de variedades andaluzas y variedades del norte de España, indicando de esta manera una posible selección local de variedades de olivo en nuestro país. En concordancia con estudios anteriores en olivo, estos resultados ponen de manifiesto la eficiencia del conjunto de 96 EST-SNPs para la identificación varietal en olivo y su utilidad para mejorar el manejo de colecciones de recursos genéticos del cultivo.

[ES] Las leguminosas son capaces de colonizar ambientes desfavorables para otras especies vegetales por lo que suelen utilizarse con éxito para la repoblación y restauración de ambientes áridos y degradados. El establecimiento y crecimiento de estas plantas se ve favorecido por la simbiosis efectiva con una variedad de microorganismos del suelo comúnmente conocidos como rhizobios. De este modo, juegan un rol importante en la disponibilidad de nitrógeno y en su potencial utilización como biofertilizantes para restaurar e incrementar la fertilidad de suelos degradados (Requena et al. 2001; Rodríguez-Echevarría y Pérez-Fernández 2005). Para el desarrollo de este trabajo, se cultivaron, en macetas, plantas de diferentes especies de leguminosas del ambiente mediterráneo, en dos tipos de suelos; Sierra Calderona y Cañada. Transcurrido el tiempo necesario para un adecuado crecimiento, se extrajo un determinado número de plantas y se estudió la nodulación que se produjo en las raíces, así como las características macro y microscópicas de los nódulos. A partir de dichos nódulos se realizó una caracterización genética de los microrganismos nodulantes mediante una amplificación del gen rRNA 16S y nodC. La caracterización de las bacterias implicadas facilitaría la futura selección de cepas eficientes para establecer simbiosis, aumentar la disponibilidad de nitrógeno y mejorar el desarrollo vegetal., [EN] Leguminous plants are capable of colonizing environments unfavourable to other plant species and are therefore often used successfully for the repopulation and restoration of arid and degraded environments. The establishment and growth of these plants is favoured by effective symbiosis with a variety of soil microorganisms commonly known as rhizobia. In this way, they play an important role in the availability of nitrogen and its potential use as biofertilizers to restore and increase the fertility of degraded soils (Requena et al. 2001; Rodríguez-Echevarría and Pérez-Fernández 2005). For the development of this work, plants of different leguminous species from the Mediterranean environment were cultivated in pots in two types of soils: Sierra Calderona and Cañada. Once the time required for adequate growth has elapsed, a certain number of plants was extracted and the nodulation produced in the roots was studied, as well as the macro and microscopic characteristics of the nodules. From these nodules, a genetic characterization of the nodulating microorganisms was carried out by means of an amplification of the 16S rRNA gene. The characterization of the bacteria involved would facilitate the future selection of efficient strains to establish symbiosis, increase nitrogen availability and improve plant development.

Ecuador posee una amplia biodiversidad en cuanto a especies zootécnicas, siendo las gallinas de campo una de las de mayor demanda en el país; pero en la actualidad existen pocos estudios sobre caracterización. El objetivo de la presente investigación fue caracterizar morfológica, productiva y genética de la Gallina Criolla del Ecuador con vistas a su definición, descripción, y puesta en valor; a través de 15 medidas zoométricas cuantitativas univariadas y con capacidad discriminante en la especie. Se trabajó una muestra de 207 gallinas (84,84%) y 37 gallos (15,16%); Región Sierra: Bolívar (31), Chimborazo (70), Tungurahua (35), Cotopaxi (32); Región Costa: Guayas (28); Región Amazónica: Morona Santiago (38). Los datos se procesaron con el programa estadístico SAS 9.4 Software. Se obtuvieron estadísticos descriptivos: media y desviación típica para toda la población, por provincia y por sexo, donde se realizó una ADEVA con separación de medias a través de la prueba de Duncan (P ≤0,05). Durante el análisis univariado, se encontraron diferencias significativas para las medidas morfométricas con relación al sexo según las cuales, los machos alcanzaron unas mayores dimensiones corporales de manera general, sobre todo en lo referente a las variables longitud de la cabeza, longitud de pico, longitud de cuello, longitud dorsal, perímetro toráxico, longitud de muslo, longitud de pierna, longitud dedo medio. Por el contrario, las variables longitud de cresta, longitud ventral, longitud ala proximal húmero, longitud ala media-radio-cúbito, longitud aladistal- falanges, circunferencia de pierna, longitud de caña-tarso-metatarso no atestiguaron dicho dimorfismo sexual. En cuanto al análisis discriminante canónico por pasos, y al cálculo de las distancias de Mahalanobis a efectos de clasificar los animales en poblaciones según la provincia a la que pertenecen; se concluye que las variables cuantitativas morfométricas evaluadas, poseen elevados niveles de variabilidad fenotípica. Existe diversidad interna en la población de aves de campo por provincias que representan las Zonas agroecológicas, así como también se observa una diferenciación de las aves provenientes de la Provincia de Cotopaxi y Tungurahua, las cuales se encuentran separadas de la otras provincias; pero según el gráfico de los centroides, Morona Santiago se encuentra levemente apartada de las provincias de Guayas, Chimborazo y Bolívar. Es decir, las aves de las provincias de Cotopaxi y Tungurahua se diferencian en cuanto a sus caracteres morfométricos de las otras provincias. Las distancias de Mahalanobis y variables canónicas discriminantes son significativas entre las seis provincias muestreadas. Las aves de Ecuador destacan sus medidas de altura sobre la longitud, valores que son superiores a las gallinas livianas; por lo que se consideran gallinas de doble propósito, siendo favorables para ejecutar programas de selección, ya sea para producción de huevos o carne, de acuerdo a las medidas morfológicas obtenidas por provincia y por localidad. En cuanto a las características fanerópticas, mediante observación directa, los datos recogidos fueron tabulados en el programa estadístico SPSS versión Statistic 19, como estadísticos descriptivos se obtuvo frecuencias; además se realizó, la prueba Chi-cuadrado de Pearson y La V de Cramer (P ≤0,05). La provincia de Bolívar parroquia Chimbo, obtuvo los mayores valores de la mediana para color de plumas, tipo de cresta, color de piel y presencia de plumas en el cuello 6,50; 1,00; 1,00; 1,00 respectivamente. La coloración del plumaje que se presentó fue marrón café 17,21%, seguido del jaspeado 16,80%, negro 14,34% y barrado 10,25%. La forma más frecuente de las crestas fue la sencilla con 76,74%, seguida de tipo nuez 8,20%. La piel de las aves presentó una coloración amarilla en la mayoría de los casos 52,46%. El mayor porcentaje de los animales presenta emplumado de tipo normal 94,26 % y 5,74 % cuello desnudo. Las aves estudiadas son poblaciones heterogéneas con gran variabilidad en cuanto a características fanerópticas, que permitiría la creación de líneas productivas que conserven su fenotipo y rusticidad, tomando en consideración la preferencia de los consumidores y productores que ejecuten bajo sistemas de producción tradicionales, culturales, sociales y económicamente sustentables en beneficio de las familias campesinas salvaguardando la soberanía alimentaria y los saberes ancestrales. Para el análisis genético, cuyo objetivo fue medir el nivel de diversidad genética y su posición filogenética en comparación con otras razas de grupos externos por medio de información de microsatélites y marcadores mitocondriales. Los resultados mostraron que estas poblaciones de aves representan un gran reservorio de variabilidad genética, pero la fragmentación genética debida también a la alta diversidad geográfica del país, podría comprometer el estado de conservación y, por lo tanto, se necesita la configuración de un programa oficial de cría para la conservación y valoración de Estas poblaciones de aves son esta caracterización genética un primer paso. Las aves latinoamericanas generalmente no se caracterizan, como es el caso de Ecuador, donde la falta de información científica está contribuyendo a su extinción. Por lo que se desarrolla una caracterización genética de los recursos avícolas ecuatorianos, ubicados en los tres agroecosistemas continentales del país (Pacífico costero, andino y amazónico). Por lo que se recogieron muestras de sangre de 234 animales no relacionados en seis provincias de Ecuador: Bolívar, Chimborazo, Cotopaxi, Guayas, Morona Santiago, Tungurahua, para realizar una caracterización genética y una evaluación de la estructura de la población utilizando el panel de microsatélites del proyecto AVIANDIV (30 loci) y D-loop. secuencias de ADN mitocondrial que también se comparan con datos de referencia de otras razas o líneas genéticas. Los resultados más importantes indican que los pollos criollos ecuatorianos son el resultado de la mezcla de diferentes grupos genéticos ocurridos durante los últimos cinco siglos. Si bien se demuestra la influencia, en la época colonial, de las razas del sur de España, las relaciones genéticas con otras razas no pueden descartarse (Leghorn, Combatiente Español). La conformación geográfica del país y la variabilidad climática extrema, han influido en el aislamiento genético de grupos, que constituyen un estado genético homogéneo en toda la población; ésta es una fuente de variación genética, pero también un punto crítico porque la deriva genética produce una pérdida de variantes genéticas. Ecuador has a wide biodiversity in respect of zootechnical species, the creole chicken represents some of the largest demand in the country, but there are currently very few studies about their characterization. The aim of this research was the morphological, and genetic characterization of the creole chicken of Ecuador with a view to its definition, description, and valuation. The morphological characterization was performed through the recording of 15 quantitative morphological univariate traits with discriminant capacity in the species. A sample of 207 hens (84.84%) and 37 roosters (15.16%) were recorded in six municipalities of the three continental regions of Ecuador; Sierra Region: Bolívar (31), Chimborazo (70), Tungurahua (35), Cotopaxi (32); Coast Region: Guayas (28); Amazon Region: Morona Santiago (38). Data were processed with the statistical software SAS 9.4. Descriptive statistics were obtained: mean and standard deviation for the entire population, by province and by sex, where an ADEVA was performed with separation of means through the Duncan test (P ≤0.05). Univariate analysis showed significant differences for morphometric measurements in relation to sex according to which the males reached greater body dimensions in general, especially in relation to the variables head length, peak length, length of neck, dorsal length, thoracic perimeter, thigh length, leg length, middle finger length. On the contrary, the variables crest length, ventral length, humeral proximal wing length, mid-radius-ulnar wing length, wing-distal-phalange length, leg circumference, cane-tarsal-metatarsal length did not show such sexual dimorphism. Regarding the canonical discriminant analysis results, the Mahalanobis distances were calculated in order to classify the individuals into populations according to the province to which they are assigned; it is concluded that the evaluated morphometric quantitative variables have high levels of phenotypic variability. There is internal diversity in the population of creole chicken by provinces that represent the agroecological zones, as well as a differentiation of the creole chicken coming from the Province of Cotopaxi and Tungurahua, which are separated from the other provinces; but according to the centroid chart, Morona Santiago is labelled apart from the provinces of Guayas, Chimborazo and Bolívar. That is, the birds of the provinces of Cotopaxi and Tungurahua differ in their morphometric characters from the other provinces. Mahalanobis distances and discriminating canonical variables are significant between the six sampled provinces. Ecuadorian chicken highlight height measures over length, values that are higher than light hens; Therefore, they are considered dual-purpose hens, being favourable, after characterization, to execute selection programs, either for the production of eggs or meat. Regarding the phenotypic characteristics, through direct observation, the data collected were tabulated in the statistical program SPSS Statistic version 19, obtaining descriptive statistics frequencies; In addition, the Chi-square test of Pearson and V de Cramer (P ≤ 0.05) were performed. The province of Bolívar parish Chimbo, obtained the highest values of the median for feather colour, crest type, skin colour and presence of feathers in the neck 6.50; 1.00; 1.00; 1.00, respectively. The colour of the plumage that was presented was brown 17.21%, followed by marbled 16.80%, black 14.34% and barred 10.25%. The most frequent form of the ridges was the simple one with 76.74%, followed by a nutty type 8.20%. The skin of the birds presented a yellow coloration in most cases 52.46%. The largest percentage of animals has feathers of normal type 94.26% and 5.74% bare neck. The chicken studied are heterogeneous populations with great variability in terms of phenotypic characteristics, which would allow the creation of productive lines that retain their phenotype and rusticity, taking into consideration the preference of the consumers and producers whom are under traditional cultural, social and productive systems economically sustainable, for the farming families benefits and safeguarding of food sovereignty and ancestral knowledge. For the genetic analysis, the aim was to measure the level of genetic diversity of the Ecuadorian Creole populations and its phylogenetic position in respect to other breeds belonging to external groups, by using information of microsatellites and mitochondrial DNA markers. According to the results, these Ecuadorian chicken populations represent a great reservoir of genetic diversity, but their genetic fragmentation also due to the high geographical diversity of the country could compromise their conservation status due to the absence of an oficial conservation program. The assessment of these chicken populations genetic characterization is a first stage of their breeding programs. Latin American chickens are generally not characterized, such is the case of Ecuador, where the lack of scientific information is contributing to the Creole breeds´ extinction. Blood samples were collected from 234 unrelated animals in the six provinces of Ecuador mentioned before (Bolívar, Chimborazo, Cotopaxi, Guayas, Morona Santiago, Tungurahua) to perform their genetic characterization and the definition of the population structure by using the panel of microsatellites of the AVIANDIV project (30 loci) and D-loop Mitochondrial DNA sequences. These information was compared with reference data from other races or genetic lines. The most important results indicate that Ecuadorian Creole chickens are the result of the mixing of different genetic groups that have occurred during the last five centuries. While the influence of colonial races in southern Spain is demonstrated, genetic relationships with other races cannot be ruled out (Leghorn, Spanish Fighter). The geographical conformation of the country and the extreme climatic variability have influenced the genetic isolation of groups, which constitute a homogeneous genetic state in the entire population; This is a source of genetic variation, but also a critical point because genetic drift causes a loss of genetic variants.

En la actualidad existen muchas variedades de pavo doméstico, todas ellas derivan del hoy extinto Meleagris gallopavo gallopavo que es originario de México. El pavo (Meleagris gallopavo gallopavo) es un ave que se domestico en México, era utilizada por las antiguas civilizaciones para satisfacer sus necesidades alimenticias y para algunos rituales, fue la única especie doméstica que los colonos europeos trasladaron de México a Europa. En la actualidad esta ave no dispone de un programa de conservación y a través de más de 500 años de adaptación en el continente europeo, africano y asiático, han surgido diversas variedades de pavo doméstico que son un recurso genético importante para preservar en la actualidad. Dada la situación de la introducción de variedades industriales y el desplazamiento de las razas autóctonas, estas están en peligro de desaparecer, se considera necesario realizar un estudio de caracterización genética y mitocondrial para el reconocimiento oficial de estas poblaciones y con ello favorecer la implantación de programas de conservación que garanticen su supervivencia. En la actualidad, ningún estudio importante se ha desarrollado hasta el momento en España y México. Sólo comunidades españolas como la Extremeña y la Balear han mencionado entre sus recursos genéticos a esta especie. Los Objetivos del presente trabajo fue el diseño de un panel de microsatélites para estudios de biodiversidad en poblaciones de Meleagris gallopavo , la caracterización genética, el análisis de la diversidad y estructura intrapoblacional de las poblaciones de Meleagris gallopavo; el análisis de la diversidad interpoblacional entre poblaciones de diversos países (México, España, Italia, Estados Unidos, Brasil, Egipto e Irán)y su foco de domesticación (México y Estados Unidos); además de un análisis mitocondrial para comprender mejor el proceso de domesticación e identificar conexiones inter o intraespecíficas entre poblaciones de pavos, para determinar sus orígenes, rastrear su expansión global y definir el valor genético de la especie. Se rediseñaron un total de 39 microsatélites para el diseño de un panel de biodiversidad, se contó con un total de 7 poblaciones de pavo domestico de España, Italia, México, Brasil, Egipto, Irán y Estados Unidos, y se diseñó un primer para el estudio de ADN mitocondrial. Como resultados del análisis mitocondrial, se analizaron Noventa y tres pavos domésticos de poblaciones de Brasil, México, Estados Unidos, España, Italia, Irán y Egipto. También se incluyeron secuencias disponibles públicamente de estudios anteriores. Se identificaron sesenta y seis sitios polimórficos. Los pavos de México mostraron la mayor cantidad de sitios polimórficos (40), mientras que los pavos de Italia y Brasil reportaron solo un sitio cada uno. La diversidad de nucleótidos también fue más alta en México y Estados Unidos (π = 0.0175 y 0.0102, respectivamente) y más baja en Brasil e Italia. De los seis haplogrupos principales definidos, la población mexicana y estadounidense son más estables y diversas que las otras poblaciones. De los 39 microsatélites que se analizaron para el diseño del panel de Biodiversidad, todos los microsatélites eran polimórficos, con al menos 4 alelos y no más de 19 alelos. Además, la riqueza alélica varió de 3.810 a 17.985, la heterocigosidad media varió de 0.452 ± 0.229 a 0.667 ± 0.265, los valores de PIC variaron de 0.213 (MNT264) a 0.850 (RHT0024), y el valor medio de Fis fue 0.322. En general, el panel fue altamente polimórfico. En el estudio de la población de México todos los microsatélites utilizados han resultado polimórficos, los estadísticos F muestran los siguientes valores en el total de la muestra: FIS 0.128 (P

Ecuador posee una amplia biodiversidad en cuanto a especies zootécnicas, siendo las gallinas de campo una de las de mayor demanda en el país; pero en la actualidad existen pocos estudios sobre caracterización. El objetivo de la presente investigación fue caracterizar morfológica, productiva y genética de la Gallina Criolla del Ecuador con vistas a su definición, descripción, y puesta en valor; a través de 15 medidas zoométricas cuantitativas univariadas y con capacidad discriminante en la especie. Se trabajó una muestra de 207 gallinas (84,84%) y 37 gallos (15,16%); Región Sierra: Bolívar (31), Chimborazo (70), Tungurahua (35), Cotopaxi (32); Región Costa: Guayas (28); Región Amazónica: Morona Santiago (38). Los datos se procesaron con el programa estadístico SAS 9.4 Software. Se obtuvieron estadísticos descriptivos: media y desviación típica para toda la población, por provincia y por sexo, donde se realizó una ADEVA con separación de medias a través de la prueba de Duncan (P ≤0,05). Durante el análisis univariado, se encontraron diferencias significativas para las medidas morfométricas con relación al sexo según las cuales, los machos alcanzaron unas mayores dimensiones corporales de manera general, sobre todo en lo referente a las variables longitud de la cabeza, longitud de pico, longitud de cuello, longitud dorsal, perímetro toráxico, longitud de muslo, longitud de pierna, longitud dedo medio. Por el contrario, las variables longitud de cresta, longitud ventral, longitud ala proximal húmero, longitud ala media-radio-cúbito, longitud aladistal- falanges, circunferencia de pierna, longitud de caña-tarso-metatarso no atestiguaron dicho dimorfismo sexual. En cuanto al análisis discriminante canónico por pasos, y al cálculo de las distancias de Mahalanobis a efectos de clasificar los animales en poblaciones según la provincia a la que pertenecen; se concluye que las variables cuantitativas morfométricas evaluadas, poseen elevados niveles de variabilidad fenotípica. Existe diversidad interna en la población de aves de campo por provincias que representan las Zonas agroecológicas, así como también se observa una diferenciación de las aves provenientes de la Provincia de Cotopaxi y Tungurahua, las cuales se encuentran separadas de la otras provincias; pero según el gráfico de los centroides, Morona Santiago se encuentra levemente apartada de las provincias de Guayas, Chimborazo y Bolívar. Es decir, las aves de las provincias de Cotopaxi y Tungurahua se diferencian en cuanto a sus caracteres morfométricos de las otras provincias. Las distancias de Mahalanobis y variables canónicas discriminantes son significativas entre las seis provincias muestreadas. Las aves de Ecuador destacan sus medidas de altura sobre la longitud, valores que son superiores a las gallinas livianas; por lo que se consideran gallinas de doble propósito, siendo favorables para ejecutar programas de selección, ya sea para producción de huevos o carne, de acuerdo a las medidas morfológicas obtenidas por provincia y por localidad. En cuanto a las características fanerópticas, mediante observación directa, los datos recogidos fueron tabulados en el programa estadístico SPSS versión Statistic 19, como estadísticos descriptivos se obtuvo frecuencias; además se realizó, la prueba Chi-cuadrado de Pearson y La V de Cramer (P ≤0,05). La provincia de Bolívar parroquia Chimbo, obtuvo los mayores valores de la mediana para color de plumas, tipo de cresta, color de piel y presencia de plumas en el cuello 6,50; 1,00; 1,00; 1,00 respectivamente. La coloración del plumaje que se presentó fue marrón café 17,21%, seguido del jaspeado 16,80%, negro 14,34% y barrado 10,25%. La forma más frecuente de las crestas fue la sencilla con 76,74%, seguida de tipo nuez 8,20%. La piel de las aves presentó una coloración amarilla en la mayoría de los casos 52,46%. El mayor porcentaje de los animales presenta emplumado de tipo normal 94,26 % y 5,74 % cuello desnudo. Las aves estudiadas son poblaciones heterogéneas con gran variabilidad en cuanto a características fanerópticas, que permitiría la creación de líneas productivas que conserven su fenotipo y rusticidad, tomando en consideración la preferencia de los consumidores y productores que ejecuten bajo sistemas de producción tradicionales, culturales, sociales y económicamente sustentables en beneficio de las familias campesinas salvaguardando la soberanía alimentaria y los saberes ancestrales. Para el análisis genético, cuyo objetivo fue medir el nivel de diversidad genética y su posición filogenética en comparación con otras razas de grupos externos por medio de información de microsatélites y marcadores mitocondriales. Los resultados mostraron que estas poblaciones de aves representan un gran reservorio de variabilidad genética, pero la fragmentación genética debida también a la alta diversidad geográfica del país, podría comprometer el estado de conservación y, por lo tanto, se necesita la configuración de un programa oficial de cría para la conservación y valoración de Estas poblaciones de aves son esta caracterización genética un primer paso. Las aves latinoamericanas generalmente no se caracterizan, como es el caso de Ecuador, donde la falta de información científica está contribuyendo a su extinción. Por lo que se desarrolla una caracterización genética de los recursos avícolas ecuatorianos, ubicados en los tres agroecosistemas continentales del país (Pacífico costero, andino y amazónico). Por lo que se recogieron muestras de sangre de 234 animales no relacionados en seis provincias de Ecuador: Bolívar, Chimborazo, Cotopaxi, Guayas, Morona Santiago, Tungurahua, para realizar una caracterización genética y una evaluación de la estructura de la población utilizando el panel de microsatélites del proyecto AVIANDIV (30 loci) y D-loop. secuencias de ADN mitocondrial que también se comparan con datos de referencia de otras razas o líneas genéticas. Los resultados más importantes indican que los pollos criollos ecuatorianos son el resultado de la mezcla de diferentes grupos genéticos ocurridos durante los últimos cinco siglos. Si bien se demuestra la influencia, en la época colonial, de las razas del sur de España, las relaciones genéticas con otras razas no pueden descartarse (Leghorn, Combatiente Español). La conformación geográfica del país y la variabilidad climática extrema, han influido en el aislamiento genético de grupos, que constituyen un estado genético homogéneo en toda la población; ésta es una fuente de variación genética, pero también un punto crítico porque la deriva genética produce una pérdida de variantes genéticas. Ecuador has a wide biodiversity in respect of zootechnical species, the creole chicken represents some of the largest demand in the country, but there are currently very few studies about their characterization. The aim of this research was the morphological, and genetic characterization of the creole chicken of Ecuador with a view to its definition, description, and valuation. The morphological characterization was performed through the recording of 15 quantitative morphological univariate traits with discriminant capacity in the species. A sample of 207 hens (84.84%) and 37 roosters (15.16%) were recorded in six municipalities of the three continental regions of Ecuador; Sierra Region: Bolívar (31), Chimborazo (70), Tungurahua (35), Cotopaxi (32); Coast Region: Guayas (28); Amazon Region: Morona Santiago (38). Data were processed with the statistical software SAS 9.4. Descriptive statistics were obtained: mean and standard deviation for the entire population, by province and by sex, where an ADEVA was performed with separation of means through the Duncan test (P ≤0.05). Univariate analysis showed significant differences for morphometric measurements in relation to sex according to which the males reached greater body dimensions in general, especially in relation to the variables head length, peak length, length of neck, dorsal length, thoracic perimeter, thigh length, leg length, middle finger length. On the contrary, the variables crest length, ventral length, humeral proximal wing length, mid-radius-ulnar wing length, wing-distal-phalange length, leg circumference, cane-tarsal-metatarsal length did not show such sexual dimorphism. Regarding the canonical discriminant analysis results, the Mahalanobis distances were calculated in order to classify the individuals into populations according to the province to which they are assigned; it is concluded that the evaluated morphometric quantitative variables have high levels of phenotypic variability. There is internal diversity in the population of creole chicken by provinces that represent the agroecological zones, as well as a differentiation of the creole chicken coming from the Province of Cotopaxi and Tungurahua, which are separated from the other provinces; but according to the centroid chart, Morona Santiago is labelled apart from the provinces of Guayas, Chimborazo and Bolívar. That is, the birds of the provinces of Cotopaxi and Tungurahua differ in their morphometric characters from the other provinces. Mahalanobis distances and discriminating canonical variables are significant between the six sampled provinces. Ecuadorian chicken highlight height measures over length, values that are higher than light hens; Therefore, they are considered dual-purpose hens, being favourable, after characterization, to execute selection programs, either for the production of eggs or meat. Regarding the phenotypic characteristics, through direct observation, the data collected were tabulated in the statistical program SPSS Statistic version 19, obtaining descriptive statistics frequencies; In addition, the Chi-square test of Pearson and V de Cramer (P ≤ 0.05) were performed. The province of Bolívar parish Chimbo, obtained the highest values of the median for feather colour, crest type, skin colour and presence of feathers in the neck 6.50; 1.00; 1.00; 1.00, respectively. The colour of the plumage that was presented was brown 17.21%, followed by marbled 16.80%, black 14.34% and barred 10.25%. The most frequent form of the ridges was the simple one with 76.74%, followed by a nutty type 8.20%. The skin of the birds presented a yellow coloration in most cases 52.46%. The largest percentage of animals has feathers of normal type 94.26% and 5.74% bare neck. The chicken studied are heterogeneous populations with great variability in terms of phenotypic characteristics, which would allow the creation of productive lines that retain their phenotype and rusticity, taking into consideration the preference of the consumers and producers whom are under traditional cultural, social and productive systems economically sustainable, for the farming families benefits and safeguarding of food sovereignty and ancestral knowledge. For the genetic analysis, the aim was to measure the level of genetic diversity of the Ecuadorian Creole populations and its phylogenetic position in respect to other breeds belonging to external groups, by using information of microsatellites and mitochondrial DNA markers. According to the results, these Ecuadorian chicken populations represent a great reservoir of genetic diversity, but their genetic fragmentation also due to the high geographical diversity of the country could compromise their conservation status due to the absence of an oficial conservation program. The assessment of these chicken populations genetic characterization is a first stage of their breeding programs. Latin American chickens are generally not characterized, such is the case of Ecuador, where the lack of scientific information is contributing to the Creole breeds´ extinction. Blood samples were collected from 234 unrelated animals in the six provinces of Ecuador mentioned before (Bolívar, Chimborazo, Cotopaxi, Guayas, Morona Santiago, Tungurahua) to perform their genetic characterization and the definition of the population structure by using the panel of microsatellites of the AVIANDIV project (30 loci) and D-loop Mitochondrial DNA sequences. These information was compared with reference data from other races or genetic lines. The most important results indicate that Ecuadorian Creole chickens are the result of the mixing of different genetic groups that have occurred during the last five centuries. While the influence of colonial races in southern Spain is demonstrated, genetic relationships with other races cannot be ruled out (Leghorn, Spanish Fighter). The geographical conformation of the country and the extreme climatic variability have influenced the genetic isolation of groups, which constitute a homogeneous genetic state in the entire population; This is a source of genetic variation, but also a critical point because genetic drift causes a loss of genetic variants.

Enterococcus spp. es flora habitual de la microbiota intestinal de humanos y animales, así como importantes patógenos nosocomiales. Desde principios del siglo XX, se conoce que causan infecciones en humanos. Enterococcus faecalis y Enterococcus faecium son las especies más relevantes clínicamente, particularmente en infecciones invasivas humanas. Estas especies se consideran patógenas oportunistas, ya que las infecciones graves se han asociado principalmente a pacientes inmunocomprometidos. Las infecciones invasivas causadas por enterococos pueden tener un origen alóctono o endógeno. Además, los enterococos presentan resistencia intrínseca a varios antibióticos, como los β-lactámicos, trimetoprima-sulfametoxazol y los aminoglucósidos que podrían mejorar su selección en el tracto gastrointestinal humano. E. faecium y E. faecalis han adquirido resistencia a la mayoría de las familias de antibióticos utilizados en terapia humana, en las últimas tres décadas. Esto llevó a la selección de clones enterocócicos resistentes a múltiples fármacos, lo que complica enormemente el tratamiento antimicrobiano, particularmente en el caso de infecciones graves. La adquisición de resistencia a vancomicina, una de las opciones terapéuticas de primera línea para las infecciones por enterococos, es uno de los problemas más preocupantes para la salud humana. El primer enterococo vancomicina resistente (EVR) reportado en América Latina fue una cepa de E. faecium de Argentina en 1998. Posteriormente, se realizaron estudios epidemiológicos para detectar EVR en diferentes hospitales de Argentina. El linaje clonal más frecuente de E. faecium vancomicina resistente (EFMVR) que circula en los hospitales argentinos parece ser el ST17. Se han realizado varios estudios de vigilancia epidemiológica aplicando técnicas moleculares en nuestro país, sin embargo se limitan principalmente a cepas EVR. No hay documentación de los perfiles de resistencia a los antimicrobianos y de la estructura poblacional de E. faecalis y E. faecium aislados de infecciones invasivas humanas en el Hospital Público de Tandil, Argentina hasta la fecha. El objetivo general de este trabajo de tesis fue caracterizar fenotípicamente y genotípicamente Enterococcus spp. aislados de líquidos obtenidos por punción, de infecciones invasivas humanas, de pacientes ingresados en el Hospital Municipal Ramón Santamarina (HMRS) de Tandil. Además, el segundo objetivo general fue detectar la resistencia a los antimicrobianos y evaluar in vitro varias opciones terapéuticas en enterococos resistentes a múltiples fármacos (MDR). Las cepas de Enterococcus spp. se recuperaron de forma retro-prospectiva a través de un estudio transversal a partir de infecciones invasivas de pacientes hospitalizados en el HMRS entre 2010 y 2014. Todas las cepas fueron identificadas con métodos convencionales fenotípicos y confirmadas por MALDI TOF-MS. Cuarenta y cuatro fueron identificadas como E. faecalis (69,8 %) y 19 como E. faecium (30,2 %). La caracterización molecular y la relación clonal se determinaron mediante electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE) y tipificación de secuencias multilocus (MLST). La susceptibilidad a 15 antimicrobianos ampicilina, penicilina, ampicilina/sulbactam, cloranfenicol, vancomicina, teicoplanina, estreptomicina (resistencia de alto nivel: RAN), gentamicina (RAN), ciprofloxacina, levofloxacina, quinupristin-dalfopristin, clindamicina, eritromicina, linezolid y tigeciclina fue determinada por el método de difusión de disco y por concentraciones inhibitorias mínimas (CIM). El genotipo de resistencia a glucopéptidos fue determinado por PCR. La actividad antimicrobiana se evaluó in vitro mediante estudios de cinética de muerte utilizando curvas de letalidad. Este trabajo de tesis contribuye a generar conocimiento para continuar avanzando en la temática de la resistencia antimicrobiana y su estrategia de control en Argentina en el contexto de “Una Salud’’. Además, reconoce que, la detección y el control epidemiológico de los enterococos MDR es necesario realizarlo tanto en reservorios humanos como no humanos, para evitar su diseminación e impacto en salud pública., Enterococcus spp. are normal inhabitants of the gut microbiota of human and animals as well as important nosocomial pathogens and were first known to cause human infections in the early 1900s. Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium are the most clinically relevant species, particularly in human invasive infections (e. g. bloodstream and peritoneal infections, abscess, endocarditis, etc.). These species are considered opportunist pathogens as severe infections have been mostly associated with immunocompromised patients. Invasive infections caused by Enterococci can have either an indigenous or allochthonous origin. Furthermore, Enterococci are intrinsic resistance to several antibiotics, such as β-lactams, trimethoprim-sulfamethoxazole and aminoglycosides that might enhance their selection in the human gastrointestinal tract. E. faecium and E. faecalis have acquired resistance to the majority of antibiotics families used in human therapy, in the last three decades. This led to the selection of multidrug resistant enterococcal clones, greatly complicating antimicrobial treatment, particularly in the case of severe infections. Acquisition of vancomycin resistance, one of the first line therapeutic options for enterococcal infections, is one of the most worrisome problems in human health. The first vancomycin resistant Enterococcus (VRE) reported in Latin America was an E. faecium strain from Argentina in 1998. After that, epidemiological studies to detect VRE in different hospitals in Argentina have been performed. The most frequent clonal lineage of vancomycin-resistant E. faecium (VREfm) in Argentinean hospitals appears to be Sequence Type (ST) 17. Even though, several surveillance molecular epidemiology studies have been performed in our country, those associated with Enterococcus spp. are mostly limited to VRE strains. There is no documentation of antibiotic resistance profiles and population structure of E. faecalis and E. faecium isolated of human invasive infections in the Public Hospital from Tandil, Argentina. The objective of this thesis work was to characterize phenotypically and genotypically Enterococcus spp. isolated from fluids obtained by puncture, from human invasive infections, of patients admitted to the Hospital Municipal Ramón Santamarina of Tandil (HMRS). Additionally, the second general objective was to detect antimicrobial resistance and to evaluate in vitro several therapeutic options in multi-drug resistant (MDR) strains. All Enterococcus spp. strains were recovered retro-prospectively through a cross-sectional study from invasive infections of hospitalized patients in the HMRS between 2010 and 2014. All strains were identified with phenotypic conventional methods and confirmed by MALDI-TOF MS. Forty-four were identified as E. faecalis (69.8 %) and 19 as E. faecium (30.2 %). Molecular characterization and clonal relatedness were realized by Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE) and Multilocus Sequence Typing (MLST). Susceptibility to 15 antibiotics ampicillin, penicillin, ampicillin/sulbactam, chloramphenicol, vancomycin, teicoplanin, streptomycin (high level resistance: HLR), gentamicin (high level resistance), ciprofloxacin, levofloxacin, quinupristin-dalfopristin, clindamycin, erythromycin, linezolid and tigecycline was determined by the disc diffusion method and minimal inhibitory concentrations (MICs). Glycopeptide resistance genotype was determined by PCR. Finally, the in vitro antimicrobial activity was was assessed by time-kill studies. This thesis work contributes to generate knowledge to continue advancing in the topic of antimicrobial resistance and its control strategy in Argentina in the "One health context". Also, recognizes that the detection and epidemiological control of the MDR enterococci strains is necessary in both human and non-human reservoirs, to avoid their dissemination and impact in Public Health., Facultad de Ciencias Médicas

El sistema Rh es el grupo sanguíneo más complejo y polimórfico de la membrana eritrocitaria. Presenta un gran interés clínico en Medicina Transfusional, Obstetricia y Hematología, debido a la participación de sus anticuerpos en los procesos de destrucción inmune de los glóbulos rojos. Los antígenos Rh desempeñan un papel central en las reacciones hemolíticas transfusionales, en la inmunización de pacientes politransfundidos, en la patogénesis de la Enfermedad Hemolítica Fetoneonatal y en algunas Anemias Hemolíticas Autoinmunes. El locus RH está compuesto por dos genes denominados RHD y RHCE que codifican para las proteínas transmembranales RhD y RhCE portadoras de los antígenos D y C, c, E, e, respectivamente. La presencia o ausencia del gen RHD en el ADN humano determina las bases moleculares del polimorfismo asociado a los fenotipos D positivo y D negativo. Los individuos D positivo poseen uno o dos genes RHD por célula; mientras que el fenotipo D negativo resulta de la ausencia del gen RHD, siendo las personas D negativo homocigotas para la deleción de este gen. Sin embargo, se ha reportado que existen numerosas variantes alélicas responsables de un fenotipo D negativo que dan origen a proteínas RhD que no expresan los epitopes del antígeno D o no se ensamblan en la membrana eritrocitaria. Además, se han descripto fenotipos D variante (Dvar) generados por distintos eventos moleculares que conducen a una expresión alterada de la proteína RhD. Dentro del fenotipo Dvar, las variantes cualitativas o fenotipo D parcial se caracterizan por la ausencia de algunos epitopes D mientras que las variantes cuantitativas, fenotipo D débil, presentan una expresión disminuida de todos los epitopes D. Los individuos con fenotipo D parcial pueden desarrollar aloanticuerpos anti-D hacia los epitopes que no poseen si son desafiados con eritrocitos D positivo. Por el contrario, las personas con fenotipo D débil no son susceptibles de desencadenar eventos de aloinmunización. Debido a la incapacidad de los métodos serológicos para discriminar entre fenotipo D parcial y D débil, los pacientes con un fenotipo Dvar deben ser considerados D negativo para transfusiones o embarazos. Por otro lado, el fenotipo DEL se caracteriza por presentar una expresión mínima del antígeno D en la membrana del glóbulo rojo. Debido a la dificultad para identificar el fenotipo DEL mediante las técnicas serológicas convencionales, la mayoría de los donantes portadores de estas variantes son tipificados erróneamente como D negativo, con el riesgo potencial de inducir una aloinmunización en receptores D negativo. El gran número de variantes fenotípicas descriptas y la elevada variabilidad en los patrones de reactividad que éstas presentan con los antisueros monoclonales restringen la aplicación de métodos serológicos para su correcta determinación. La caracterización molecular de las variantes alélicas resulta un recurso apropiado para resolver los problemas en aquellas situaciones clínicas donde la serología presenta limitaciones. Debido a la elevada variabilidad genética interpoblacional del sistema Rh, es de fundamental importancia establecer el polimorfismo molecular del locus RH en individuos de nuestro país con miras a implementar un abordaje inmunohematológico basado en estudios moleculares. En este trabajo de Tesis hemos investigado las bases genéticas del locus RH en nuestra población para aportar nuevos conocimientos sobre los mecanismos moleculares responsables del fenotipo D negativo y fenotipos con expresión débil del antígeno D. Se analizaron 1120 muestras de donantes que concurrieron a bancos de sangre y efectores de salud de Tucumán, Córdoba, Rosario, La Plata y CABA. Dentro de este grupo, se estudiaron 796 muestras con fenotipo D negativo portadoras de los antígenos C y/o E y 324 muestras con fenotipo D variante. Además, se investigó la presencia del marcador genético RHDΨ, característico de individuos de la etnia africana, en 221 muestras con fenotipo dccee provenientes de Tucumán y 1200 de Rosario, y el alelo DI*A, marcador genético de la etnia amerindia en 178 muestras de Tucumán y 150 provenientes de Rosario. En todas las muestras se realizaron estudios serológicos y moleculares. Se evaluó la presencia de los antígenos del sistema Rh mediante técnicas de hemaglutinación. Los fenotipos DEL fueron identificados por ensayos de adsorción y elución. Además, se realizaron estudios de los niveles de expresión del antígeno D por citometría de flujo. Se investigó la presencia del gen RHD mediante una estrategia de PCR multiplex basada en el polimorfismo de longitud del intrón 4 y en la presencia de una secuencia específica en la región 3' no codificante del gen RHD. Se diseñaron diferentes estrategias moleculares de PCR para caracterizar los mecanismos moleculares responsables de los fenotipos D observados. También se utilizaron técnicas de microarreglos de ADN y secuenciación para definir nuevos polimorfismos. Los estudios de detección del gen RHD por la estrategia de PCR multiplex realizados en este trabajo de Tesis permitieron identificar la presencia de fragmentos del gen RHD en 133 (16,71%) de las 796 muestras con fenotipo D negativo estudiadas (muestras D-/RHD+). Estos resultados mostraron que el fenotipo D negativo no es generado sólo por un evento de deleción del gen RHD en individuos de nuestra población. A través de las distintas estrategias moleculares utilizadas en este trabajo se caracterizaron variantes RHD nulas y DEL generadas por eventos de conversión génica entre alelos RHD y RHCE, deleción e inserción de nucleótidos, mutaciones de cambio de sentido y mutaciones sin sentido en muestras D negativo C/E positivo. Los estudios realizados detectaron 98 individuos (12,31%) portadores de alelos RHD nulos y 19 (2,39%) portadores de alelos DEL. Dentro de este grupo se caracterizaron las variantes alélicas no reportadas RHCE(1-2)-RHD(3361_371del11-10), RHD(329T>C)-CE(3-9)-D, RHD(581insG) y RHD(1001T>A) responsables de un fenotipo D negativo y el alelo RHD*1248insG que origina un fenotipo DEL. Se observó que la prevalencia de individuos portadores del nuevo alelo nulo RHD*581insG, responsable de la generación de la una proteína RhD truncada que no expresa epitopes D en la membrana eritrocitaria, fue significativamente mayor en las muestras provenientes de Tucumán que en las del resto de las regiones analizadas. Por otro lado, en este trabajo de Tesis se analizó la distribución del marcador genético DI*A, característico de la etnia amerindia con ascendencia asiática, en muestras provenientes de Tucumán y de Rosario. Los resultados mostraron una proporción significativamente mayor de individuos portadores de la variante DI*A en muestras de Tucumán, sugiriendo un aporte superior de la etnia amerindia a esta población. Considerando que la variante RHD*581insG no ha sido reportada en poblaciones caucásicas europeas, africanas ni asiáticas y que fue detectada con una alta prevalencia en una región donde el aporte amerindio al acervo genético de la población es mayor que en otras áreas geográficas, el nuevo alelo RHD*581insG podría asociarse a la etnia amerindia. Por otro lado, la variante alélica híbrida RHD-CE-Ds, característica de individuos de la etnia africana, fue detectada en el 43,61% de las muestras D-/RHD+ de todas las regiones estudiadas, siendo Tucumán la región con el mayor porcentaje observado. Además, los estudios de secuenciación permitieron caracterizar los mecanismos moleculares responsables del alelo DEL RHD*46C en muestras con expresión del antígeno E. Esta variante alélica fue detectada con mayor prevalencia en muestras provenientes de Rosario y Tucumán. En el grupo de muestras con fenotipo D negativo C/E positivo se detectaron también 15 portadoras del alelo híbrido RHD-CE(3-9)-D. En 7 de estas muestras se identificó el SNP característico del alelo RHD*DVII. Estos hallazgos permiten suponer que la nueva variante híbrida RHD(329T>C)-CE(3-9)-D es producto de una conversión génica entre los alelos RHD*DVII y RHCE*Ce. Debido a que ambas variantes son características de individuos caucásicos, los resultados sugieren que el nuevo alelo surge del aporte europeo a la población de nuestro país. Por otro lado, en este trabajo de Tesis se caracterizaron los eventos moleculares responsables de la generación de las nuevas variantes alélicas RHCE(1-2)-RHD(3361_371del11-10) y RHD*1001A, responsables de un fenotipo D negativo. Hemos demostrados por estudios de adsorción elución que ambas variantes codifican para un polipéptido RhD aberrante y no expresan epitopes D. Estos nuevos alelos fueron incorporados al grupo de las variantes RHD nulas. Además, se identificó una muestra portadora del nuevo alelo RHD*1248insG responsable de un fenotipo DEL. Esta variante alélica genera una proteína RhD de mayor tamaño. Estudios de adsorción-elución permitieron detectar cantidades mínimas del antígeno D en la membrana eritrocitaria. Estos hallazgos sugieren que la proteína RhD aberrante sería capaz de integrarse en la membrana del glóbulo rojo y expresar epitopes D. Los resultados obtenidos en este trabajo de Tesis demuestran la importancia de conocer la variabilidad alélica que subyace en el locus RH de individuos de nuestra población para desarrollar estrategias de genotipificación RHD que disminuyan la posibilidad de obtener resultados falsos positivos. El diseño de estudios moleculares que incluyan la caracterización de alelos RHD nulos optimizará el diagnóstico prenatal no invasivo del genotipo RHD, asegurando una estricta correlación entre el genotipo y el fenotipo fetal. Además, el conocimiento de las bases moleculares de los alelos DEL asociados a los diferentes grupos étnicos resulta fundamental para desarrollar estrategias de genotipificación en individuos D negativo. En este trabajo de Tesis hemos identificado un 2,39% de individuos portadores de alelos DEL. Estos hallazgos demuestran la importancia de implementar estrategias moleculares en las muestras D negativo C/E positivo para detectar polimorfismos responsables de fenotipos aparentes D negativo capaces de generar una aloinmunización en receptores D negativo. Por otro lado, hemos investigado los mecanismos moleculares del polimorfismo del locus RH en individuos portadores de variantes alélicas RHD responsables de fenotipos con expresión débil del antígeno D en nuestra población. Utilizando estrategias de biología molecular se identificaron alelos D parcial generados por conversión génica entre alelos RHD y RHCE o por SNPs y alelos D débil producto de mutaciones de cambio de sentido. Debido a la dificultad para discriminar serológicamente a las variantes cualitativas, actualmente los pacientes portadores de un fenotipo Dvar se consideran en riego de desarrollar una inmunización anti-D y por lo tanto, son tratados como D negativo para transfusiones o embarazos. Sin embargo, numerosas evidencias clínicas han demostrado que individuos portadores de los alelos D débil tipo 1, 2 y 3 no son susceptibles de aloinmunización anti-D ante una exposición a glóbulos rojos D positivo. Los estudios moleculares de las muestras con fenotipo Dvar mostraron que un 58,02% de los individuos resultaron portadores de alelos D débil tipo 1, 2 o 3. Los resultados indican que más del 60% de los individuos pertenecientes a las ciudades de la región central del país presentaron una expresión aberrante del antígeno D producto de estas variantes alélicas. Sin embargo, en Tucumán la distribución fue menor al 37%. Los análisis estadísticos indicaron que la probabilidad de encontrar un individuo portador de estos alelos en las muestras provenientes de Tucumán fue significativamente menor que para las otras 4 ciudades analizadas donde esta proporción no mostró diferencias significativas. El predominio de alelos D débil tipo 1, 2 y 3, característicos de caucásicos, indicaría un mayor aporte de europeos al acervo genético de la población de la región central del país. La implementación de estrategias moleculares que permitan detectar estas variantes en pacientes que presentan un fenotipo Dvar permitirá optimizar el uso de las escasas unidades D negativo disponibles en los servicios de Medicina Transfusional y reservarlas exclusivamente para los pacientes que se encuentran en riesgo real de desarrollar una respuesta aloinmune hacia el antígeno D. Además, en el grupo de muestras con fenotipo Dvar se caracterizaron los mecanismos moleculares responsables de variantes alélicas D parcial. Los resultados obtenidos mostraron una alta prevalencia de individuos portadores de alelos RHD parcial RHD*DVI (4,63%). Debido a que estas variantes alélicas generan una proteína RhD que carece de algunos epitopes D, los individuos portadores de estos alelos son susceptibles de desarrollar aloinmunización anti-D. La caracterización molecular de las variantes cualitativas en los servicios de Medicina Transfusional de nuestra población evitará posibles incompatibilidades Rh. Por otro lado, se identificaron variantes genéticas RHD producto de mutaciones de cambio de sentido no reportadas. Uno de los nuevos alelos identificados fue registrado y denominado D débil tipo 93 por la Sociedad Internacional de Transfusión Sanguínea (ISBT). Cabe destacar que, de las 31 muestras portadoras de la nueva variante hallada en este trabajo de Tesis, 20 (64,52%) corresponden a donantes provenientes de Tucumán. Teniendo en cuenta que el marcador genético DI*A demostró una mayor influencia amerindia en la región norte del país, la presencia de este alelo podría atribuirse al aporte de esta etnia al acervo genético de la población tucumana. Además, se identificaron 4 nuevas variantes alélicas RHD*325G, RHD*763A, RHD*764A y RHD*911A. Las sustituciones aminoacídicas generadas por estos SNPs provocarían alteraciones en el plegamiento de la proteína RhD que modificarían el correcto ensamblaje del polipéptido RhD en el complejo Rh alterando la expresión de los epitopes D. La discriminación entre variantes cuantitativas y cualitativas es de fundamental importancia en los bancos de sangre para optimizar la compatibilidad transfusional y garantizar la provisión de sangre segura, y en Obstetricia para definir estrategias de intervención médica en las embarazadas. Los hallazgos obtenidos en este trabajo de tesis sobre los mecanismos genéticos responsables de la variabilidad alélica del locus RH en la población argentina, tendrán su correlato en la implementación de estrategias moleculares como herramientas de laboratorio para la asignación precisa e inequívoca de las variantes antigénicas de importancia clínica. Teniendo en cuenta los estudios sobre el polimorfismo molecular del locus RH en nuestra población realizados en este trabajo de Tesis, se diseñó y evaluó un protocolo de genotipificación RHD fetal no invasivo con el objetivo de implementar a futuro una estrategia que contribuya al diagnóstico de la EHFN en embarazadas aloinmunizadas con anti-D y que permita optimizar el uso de la inmunoprofilaxis en mujeres D negativo no sensibilizadas. Considerando la alta prevalencia de alelos RHD silentes y DEL en nuestra población, el diseño de la estrategia de genotipificación prenatal debe tener en cuenta la variabilidad alélica del locus RH para asignar un correcto fenotipo. El algoritmo diseñado en este trabajo propone el estudio del ADN genómico materno para detectar mujeres embarazadas portadoras de alelos RHD y el análisis del ADN genómico paterno en aquellas situaciones donde los resultados obtenidos en el estudio del ADN libre por PCR en tiempo real no son concluyentes. Se realizaron estudios serológicos y moleculares en la sangre de los recién nacidos para correlacionar con los hallazgos moleculares obtenidos en el ADN libre con el fenotipo D eritrocitario de los neonatos. Los resultados obtenidos permitieron asignar el genotipo RHD fetal en el 98,99% de las muestras de plasma materno estudiadas. La correlación entre los resultados moleculares y serológicos mostró que la estrategia de genotipificación RHD prenatal presenta una sensibilidad del 100% al no obtener resultados falsos negativos y una especificidad del 98,81% al detectarse sólo un falso positivo, debido a la presencia de una variante alélica responsable de un fenotipo D negativo. El protocolo diseñado para la detección del gen RHD en ADN fetal libre en plasma materno demostró ser una herramienta útil para la determinación del estatus D del feto en nuestra población. La correcta genotipificación RHD prenatal permitirá diagnosticar fetos en riesgo real de EHFN y definir estrategias de administración de la profilaxis con inmunoglobulina anti-D exclusivamente a embarazadas cuyos fetos son D positivo. Fil: Trucco Boggione, Carolina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Área Inmunología. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.

Póster presentado a las II Jornadas del Grupo de Viticultura y Enología (SECH), celebradas en Madrid el 3 y 4 de noviembre de 2016., El presente trabajo trata de esclarecer el origen del cultivo, así como la nomenclatura, de dos variedades que comparten una historia similar: Maturana Tinta de La Rioja y Batista de Mallorca. Sus nombres figuran en la colección nacional de referencia y existe constancia de la región de procedencia de dichas accesiones a inicios del s. XX. Pero los genotipos de dichas accesiones antiguas no coinciden con los genotipos de accesiones recientes cuya denominación local sí es coincidente. Además, en las prospecciones llevadas a cabo durante los últimos años en los lugares de origen, no se ha encontrado ninguna accesión correspondiente a las variedades que figuran como Maturana Tinta o Batista en la colección nacional. Atendiendo a los estudios ampelográficos y a la caracterización genética, se considera más acertada la nomenclatura de Maturana Tinta y Batista para aquellas accesiones encontradas recientemente en La Rioja y Mallorca respectivamente, en lugar de las accesiones preservadas en la colección nacional que tienen dicho nombre y que se corresponden con las variedades francesas Trousseau Noir y Canari Noir respectivamente.

El cuy, Cavia porcellus es un mamífero roedor que se encuentra distribuido a lo largo de lacordillera de los Andes, ligado íntimamente a los humanos no solo como fuente de carne de altacalidad proteica y baja en grasa, sino también ligado a las creencias religiosas y culturales delpueblo preincaico desde hace 7000 años (Wing, 1986). La justificación de este trabajo se basa enla necesidad de caracterizar las poblaciones nativas de cuyes andinos, con el objeto de describirlos recursos genéticos que en la actualidad se encuentran en grave peligro de extinción. Los cuyesdomésticos nativos de Ecuador están siendo absorbidos sin ningún control por la introducciónagresiva de líneas comerciales mejoradas, que en un principio entraron desde el Perú a mediadosdel siglo XX. Las conclusiones de este trabajo servirán para la toma de decisiones en el ámbito dela conservación y utilización de dichos recursos, que juegan un importante papel en el sustentoeconómico y nutricional de la familias de las áreas rurales de los países andinos. Se obtuvieronaleatoriamente muestras de pelo provenientes de la grupa de los cuyes de las líneas comercialesAndina (AND), Perú (LPR) e Inti (INTI) y de cuyes nativos ecuatorianos (NTVE) de las diezprovincias Andinas del Ecuador: Carchi, Imbabura, Pichincha, Cotopaxi, Tungurahua, Bolívar,Chimborazo, Cañar, Azuay y Loja. En el caso de las líneas comerciales, los animalesmuestreados se clasificaron de acuerdo a las características fenotípicas, en base al tamaño ycaída de sus orejas, a la conformación del cuerpo en forma de un paralelepípedo y al color delpelaje característico de cada línea: Andina (94) color blanco completo, Inti (94) bayo-amarillo,Perú (94) alazán-rojo. Se muestrearon 94 animales de cuyes nativos del Ecuador de acuerdo a sumorfología tipo: orejas de tamaño variado y erectas; conformación de cuerpo angulosa y devarios colores como el negro, gris, moro, alazán, lobo, violeta, bayo, blanco y sus combinaciones.Se obtuvieron muestras de cuyes nativos de los países andinos que consumen carne de cuyactualmente: Colombia, COL (17); Perú, PERU (41) y Bolivia, BOL (13). Como outgroup seincluyeron 29 muestras de España, SPAIN. Se diseñó un panel de 20 microsatélites específicopara estudiar la diversidad genética del cuy doméstico. La eficiencia del panel se probó en 100muestras de animales no relacionades de Ecuador, Colombia, Perú, Bolivia y España. Laamplificación de los microsatélites se realizó mediante la reacción en cadena de la polimerasa(PCR) y los fragmentos obtenidos en la PCR se separaron mediante electroforesis en unsecuenciador automático ABI 3130. El análisis de los fragmentos y la tipificación alélica serealizó mediante los programas Genescan 3.1.2 y Genotyper 2.5 respectivamente. Se detectó un..., The guinea pig, Cavia porcellus is a rodent mammal that is distributed along the Andes, closelylinked to humans not only as a source of high quality meat protein and low in fat but also linkedto pre-Inca people religious and cultural beliefs since 7000 years (Wing, 1986) ago. Thejustification for this work is based on the need to characterize the native populations of theAndean guinea pigs, in order to describe the genetic resources that currently suffer a seriousendangerment risk of extinction. Native of ecuadorean domestic guinea pigs are being absorbedwithout any control by the aggressive introduction of improved commercial lines, which initiallyentered Perú since the mid-twentieth century. The conclusions of this work will serve fordecision-making in the field of the conservation and utilization of these resources, which play animportant role in the economic and nutritional livelihood of families in rural areas of the Andeancountries. Random samples of hair from the rump of the guinea pigs from commercial linesAndina (AND), Peru (LPR) and Inti (INTI) and Ecuadorian native guinea pigs (NTVE). TenAndean provinces from Ecuador were obtained: Carchi, Imbabura , Pichincha, Cotopaxi,Tungurahua, Bolivar, Chimborazo, Canar, Azuay and Loja. For commercial lines, the sampledanimals were classified according to their phenotypic characteristics, based on the size and hangof their ears, to the body shape in the form of a parallelepiped and characteristic coat color ofeach line: Andina (94) white full, Inti (94) bay-yellow, Peru (94) sorrel-red. 94 native fromEcuador guinea pigs were sampled according to their morphology type: erect ears varied size;Angled body conformation and various colors like black, grey, moro, sorrel, wolf, violet, fawn,white and their combinations. Samples from native Andean guinea pigs from currently guinea pigmeat consuming countries were obtained: Colombia, COL (17); Peru, PERU (41) and Bolivia,BOL (13). As an outgroup 29 samples from Spain, SPAIN were included. A panel of 20 specificmicrosatellite was designed to study the genetic diversity of domestic guinea pig. The panelefficiency was tested on 100 samples of animals unrelated to Ecuador, Colombia, Peru, Boliviaand Spain. Microsatellite amplification was performed through polymerase chain reaction (PCR)and the PCR fragments obtained were separated through electrophoresis in an automatedsequencer ABI 3130. The analysis of the fragments and allelic typing were performed using 3.1.2Genescan and Genotyper 2.5 programs respectively. A total of 216 allele (10.8 alleles per locus)was detected. The 20 microsatellites have been polymorphic, with an expected heterozygosity of0.778 and 0.589 observed. The average value of PIC (0.746) and heterozygosity values indicated...

RESUMEN. Dada la capacidad de hibridación entre Mytilus edulis platensis y M. galloprovincialis, se planteó evaluar la variabilidad genética de la descendencia híbrida en relación a las especies puras a partir de 8 loci de microsatélites. Se observaron diferencias genéticas entre la descendencia híbrida en comparación a las especies puras, siendo la descendencia híbrida la que presenta los mayores valores de heterocigosidad observada promedio (Ho = 0,63 ± 0,28), con valores de endogamia que tienden mayoritariamente hacia valores de Fis negativos, evidenciando un exceso de heterocigotos en los híbridos en comparación a los individuos puros, quienes presentaron desvíos significativos hacia valores de Fis positivos. El análisis de componentes principales muestra tres grupos claramente diferenciados entre las muestras analizadas, identificando a la descendencia híbrida como un grupo intermedio entre las especies puras.

Actualmente se desarrolla el relevamiento de distintas poblaciones de abejas melíferas (Apis mellifera) pertenecientes a las regiones de mayor producción apícola de la provincia de Buenos Aires para la caracterización genética de linajes maternos por técnicas de PCR- RFLP a partir de la utilización de ADN mitocondrial. Además, se evalúa la inocuidad de plaguicidas de uso agrícola como glifosato, neonicotinoides, imidacloprid, tiametoxam y clorpirifos para los distintos haplotipos y, la respuesta diferencial frente a las enfermedades virales más prevalentes en la provincia, el microsporidio Nosema sp. y el ácaro Varroa, frecuentes entre las poblaciones de abejas. Finalmente se propone extender a los productores los resultados del estudio para posibilitar la resolución de problemas regionales puntuales y generar con los datos recabados, estrategias factibles de aplicación para disminuir el riesgo de invasión y colonización de las abejas africanizadas, posibilitando herramientas que mejoren la producción y permitan, a su vez, la conservación de la diversidad de abejas melíferas de la provincia.

Las cardiopatías congénitas se encuentran entre las anomalías congénitas más frecuentes y tienen un gran impacto en la morbilidad y la mortalidad pediátricas. Se estima que su prevalencia mundial oscila entre 4 y 9 por 1.000 nacimientos, dependiendo de factores genéticos y ambientales, entre otros, de cada región. Muchas de ellas son difíciles de identificar prenatalmente y/o no se manifiestan clínicamente durante las primeras horas de vida. Con el objetivo de obtener datos confiables sobre las variables clínico-genéticas y sociodemográficas locales, se propuso realizar, a un grupo de pacientes con cardiopatía congénita, cariotipo, FISH para 22q11, valoración clínica por genetista, y cuestionario para evaluar variables sociodemográficas y exposiciones ambientales de interés. Maestría MAGISTER EN CIENCIAS BIOMÉDICAS

Stevia rebaudiana es una planta herbácea perenne que pertenece a la familia Asteraceae. Es originaria del norte de Paraguay y crece en climas tropicales y subtropicales. Debido a la dulzura natural de sus hojas, se le conoce como edulcorante natural, sin calorías y con muchas aplicaciones en la industria alimentaria. Por lo tanto, resulta de gran importancia comercial contar con técnicas que permitan determinar la calidad y pureza de la materia prima procesada en polvo para la producción de edulcorantes. Se ha recurrido a la implementación de técnicas moleculares mediante marcadores ISSR, que permiten amplificar las secuencias que se encuentran entre los microsatélites, con lo que se obtiene un patrón de bandas característico de cada organismo. En este estudio se analizó la amplificación de los ISSR S3, S4, S5, S10, S11, S12 y S15 a partir de muestras de ADN de S. rebaudiana, provenientes de plantas cultivadas en invernadero. Las muestras de ADN se obtuvieron mediante tres diferentes protocolos de extracción a partir de material seco y fresco de la planta. De acuerdo con los resultados obtenidos, los ISSR S3, S4, S5 y S11 representan una buena opción para la detección de polimorfismos en esta especie, y por tanto para la identificación molecular de la especie. Se debe comprobar si los ISSR S10, S12 y S15 son capaces de amplificar segmentos de ADN de Stevia, ya que bajo las condiciones de trabajo de esta investigación no se logró la amplificación de ADN con estos imprimadores. Se considera que los ISSR son marcadores universales y se podría identificar individualmente cada cultivar de Stevia que vaya a destinarse a la producción comercial de esteviósidos, pero es necesario repetir los protocolos descritos con diferentes variedades e incluso se puede trabajar con diferentes especies del género Stevia, para obtener una caracterización general. Stevia rebaudiana is a herbaceous and perennial plant belonging to the Asteraceae family, it is native of Paraguay and grows in tropical and subtropical climates. Due to the natural sweetness of its leaves, is known as a natural sweetener with no calories and with many applications in food industry. Therefore, it is of great commercial importance to have techniques for determinate the quality and purity of the raw material processed into powder for the production of sweeteners. Been used for the implementation of molecular markers ISSR, enabling amplify sequences that are between the microsatellites, which yields a characteristic banding pattern for each organism. In this study we examined the amplification of ISSR S3, S4, S5, S10, S11, S12 and S15 from DNA samples of S. rebaudiana, from greenhouse-grown plants. DNA samples were obtained by three different extraction protocols from dry and fresh material from the plant. According to the results, the ISSR S3 , S4, S5 and S11 are a good choice to detect polymorphisms in this species, and therefore the molecular identification of the species. It is necessary to check whether the ISSR S10, S12 and S15 are able to amplify DNA segments in stevia , since under the conditions of this research work was not successful DNA amplification with these primers. It is considered that ISSR markers are universal and could be used to identify every stevia cultivate for commercial production of stevioside , but it is necessary to repeat the protocols described with different varieties and work with different species of the genus Stevia sp., to obtain a general characterization.

La raza bovina Carora de Venezuela, se originó mediante cruces empíricos entre las razas Criollo Amarillo de Quebrada Arriba y Pardo Suizo, principalmente. Es la raza bovina criolla que más contribuye a la economía ganadera de Venezuela y forma parte de un escaso número de razas locales que son parte de nuestro invaluable patrimonio genético. El conocimiento exhaustivo de sus características genéticas es primordial si se quiere contribuir con su preservación en el tiempo. El presente estudio tuvo como objetivo principal la realización de una caracterización genética de la raza Carora, el estudio de su variabilidad genética, así como de las relaciones genéticas con sus ancestros conocidos. Dado que el criollo Amarillo de Quebrada Arriba ya se extinguió se utilizaron muestras de la raza Criollo Limonero, pariente más cercano de esta y muestras de ejemplares de la raza Pardo Suizo para evaluar la estructura poblacional y fi logenia. Se analizaron 35 muestras de la raza Carora, 20 de la raza Criollo Limonero y 20 de la raza Pardo Suizo, utilizando 10 marcadores microsatélites recomendados por FAO/ISAG, mediante los cuales fue posible estimar variables genético poblacionales, realizar pruebas de equilibrio de Hardy y Weinberg , para detectar la conformación de grupos genéticamente diferenciados. Como resultado se observó que la raza Carora posee una alta variabilidad genética, encontrándose cinco subtipos. Este estudio también evidenció, que la raza Carora a pesar de ser un hibrido producto de dos razas, ha evolucionado y desarrollado una identidad propia. Cattle Carora breed originated from empirical crossing of cattle breeds Criollo Amarillo de Quebarada Arriba and Brown Swiss. Carora is the creole cattle breed that makes the greatest contribution to local cattle farming economy and it is part of a scarce number of local breeds that form Venezuela’s invaluable genetic patrimony. The exhaustive knowledge of its genetic characteristics is indispensable to contribute to its preservation. Main objective of present study was to undertake a genetic characterization, genetic variability determining and establishing of philogenetic relationships with its known ancestors. Since Criollo Amarillo of Quebrada Arriba is extinct 20 samples of closest relative Criollo Limonero were used among 35 of Carora and 20 Brown Swiss blood samples. 10 DNA molecular markers recommended by FAO/ISAG microsatellites were used to estimate a number of population genetic variables, test for Hardy and Weinberg, and to detect the formation of genetically distinct groups. Results show that the Carora breed possesses a high genetic variability. Five subtypes were observed. It can be concluded that despite of being a hybrid product of at least two races, Carora cattle has evolved and developed a proper identity.

La investigación tuvo como objetivo evaluar morfológica y genéticamente a los equinos (Equus caballus) autóctonos de las comunidades de Atillo y Guayllabamba a fin de estandarizar la raza. Para este efecto, se estudiaron 70 equinos autóctonos (Equus caballus), en los cuales se tomaron 11 medidas zoométrica y se calculó 7 índices zoométricos, utilizando el análisis estadístico descriptivo. Para el análisis genético se seleccionaron 22 animales que se inscribieron dentro del biótipo criollo, a los que se les estudió 25 microsatélites amplificados por PCR, analizándose los fragmentos y la tipificación alélica mediante los software Genescan Analisys 3.1.2 y Genotyper 2.5 respectivamente, en el Laboratorio de Genética Molecular Aplicada de la empresa Animal Breeding Consulting, S.L. de la Universidad de Córdoba en España. Los índices calculados permitieron clasificar a los equinos de estas zonas como dolicocéfalos (47,1%), longilíneos (58,6%), dolicotorácicos (57,1%), dolicomorfos (85,7%), con correlación baja (42,9%), mesopélvicos (41,4%) y de proporcionalidad larga (78,6%). La diversidad genética inter-racial presentó una elevada variabilidad alélica en cada microsatélite la heterocigosis esperada más alta se encontró para el marcador ASB17 con un valor de 0,8837 y la más baja para el TKY344 con un valor de 0,6821 5 de los 25 marcadores se desvían significativamente del equilibrio Hardy-Weinberg, el coeficiente de consanguinidad (Fis) muestra que el marcador VHL20 detecta un exceso significativo de homocigotos en la población, mientras que los marcadores ASB2 y TKY343 detectan un defecto significativo de homocigotos, presentando una elevada diversidad genética intra-racial, observándose que la raza no se desvía significativamente del equilibrio de Hardy-Weinberg. Concluyéndose que la estructura y diversidad genética inter-racial se encuentran en el mismo cluster del caballo Marismeño y del Pura Raza Gallega. The investigation was to evaluate the morphological and genetically autochthonous equines (Equus caballus) from Atillo and Guayllabamba communities, to standardize the breed. For this purpose, 70 autochthonous horses (Equus caballus), were studied, 11 zoometric measures were taken 7 zoometrics indexes were calculated by using the descriptive-statistical analysis. For the genetic analysis, 22 animals were selected and entered in the creole biotype, they were studied in 25 microsatellites amplified by PCR, and the fragments and alethic typification were analyzed by means of Genescan Analysis 3.1.2 software and Genotyper 2.5, respectively, at the laboratory of Molecular Genetics Applied Animal Breeding Company Consulting, SL, of the University of Cordova in Spain. The calculates indexes allowed to classify horses at the area, such as: dolichocephals (47,1%) longilineal (58,6%), dolicothoracics (57,1%), dolicomorphs (85,7%), low correlation (42,9%), mesopelvics (41,4%) and long proportional (78,6%), The inter-breed genetic diversity presented high alethics variability at each microsatellite, the higher expected heterozygosity was found in the marker ASB17 a value of 0,8837 and lowest for TKY344 with a value of 0,6821; 5 from the 25 markers became significantly diverted from Hardy-Weinberg equilibrium, the inbreeding coefficient (Fis) showed that marker VHL20 detects significant excess of homozygotes in the population, while the marks ASB2 and TKY343 detect a significant defect of homozygotes, showed a high intra-breed genetical diversity, observing that the breed did not divert from Hardy-Weinberg equilibrium. It is concluded that structure and inter-breed genetic diversity are at the same cluster of Marismeño horse and Gallego Pure Breed. Further investigations are recommended to establish standards breed and expand the genetic variability within this breed.

[ES] Los tratamientos pregerminativos (priming) son una interesante herramienta para reducir la dormancia en las semillas. Con el priming adecuado muchas las semillas con dormancia pueden germinar en pocos días y de manera homogénea, ahorrando costes de producción. Esta herramienta es muy importante de cara a la conservación de semillas silvestres, ya que estas poseen habitualmente elevados niveles de dormancia. Succisa pratensis es una planta herbácea que está presente en toda Europa. Posee altos niveles de dormancia, lo que complica los proyectos de restauración que se están realizando con esta especie en el ¿Millenium Seed Bank¿ de Wakehurst Place (UK). Por ello, este proyecto tiene como fin investigar cuál es el priming mas adecuado para estas semillas y mejorar los métodos y conocimientos sobre su germinación. Estos tratamientos se realizaron con polietilenglicol 0.1g/ml, 0.2g/ml, Fluridone y agua a modo de control. Los tratamientos se aplicaron durante 3, 6, 9 y 12 semanas y se germinaron las semillas después a 10ºC, 15ºC, 20ºC y 25ºC. Como resultado se identificó que las mejores condiciones de acondicionamiento de semilla implican larga duración (6 semanas) y una temperatura de tratamiento de 20ºC. Con estas condiciones se optimiza la germinación final, la velocidad de germinación y la uniformidad de germinación de esta especie. Respecto al tipo de priming aplicado, los tratamientos de priming con agua o con PEG a una concentración de 0,1g/ml son los más efectivos Por otra parte, se evaluó el efecto del priming sobre la resistencia a estrese abióticos con el estrés salino como modelo. Para ello se emplearon poblaciones de distinto origen (Escocia e Inglaterra) tratadas con y sin priming (0,1g/ml PEG) y se regaron con agua y diferentes concentraciones salinas. Se observó que no había diferencias entre las plantas tratadas y las plantas control cuando se regaban con agua respecto al vigor inicial de las plántulas, aunque en estadíos más avanzados las plantas con priming mostraban un crecimiento más rápido). Por otra parte, en el caso de las plantas procedentes de semillas tratadas con priming y regadas con agua salina se desarrollaban más rápido que las plantas procedentes de semillas sin tratamiento. Por último, empleando una serie de marcadores moleculares ISSR se han caracterizado dos poblaciones de Succisa pratensis provenientes de Escocia e Inglaterra divididas a su vez en dos grupos: germinación temprana y germinación tardía. De esta manera se pudo evaluar a la vez si existe variación genética entre ambas poblaciones y si hay diferencias genéticas entre las semillas que germinan primero y las que lo hacen más tarde. Como resultado de los análisis realizados se concluyo que si que existe variación genética entre poblaciones, pero que sería conveniente emplear más marcadores para poder discriminar entre semillas de germinación temprana y tardía, [EN] Pregerminative treatments (priming) is an interesting tool to reduce seed dormancy. With proper priming many seeds with dormancy can germinate in a homogeneously in a few days, saving production costs. This tool is very important for the conservation of wild seeds, as these usually have high levels of dormancy. Succisa pratensis is an herbaceous plant that is present throughout Europe. It has high levels of dormancy. This dormancy makes complicated the restoration projects being carried out with this species in the "Millennium Seed Bank" of Wakehurst Place (UK). Therefore, this project aims to investigate what is the most appropriate priming for these seeds and improve methods and knowledge on seed germination. These treatments were performed with polyethylene glycol 0.1g/ml, 0.2g/ml, Fluridone and water as control. The treatments were applied for 3, 6, 9 and 12 weeks and after the seeds were germinated at 10 º C, 15 º C, 20 º C and 25 º C. As a result it was found that the best conditions involve seed conditioning long duration (6 weeks) and a treatment temperature of 20 ° C. With these conditions are optimized final germination, germination rate and uniformity of germination of this species. Regarding the type of priming applied priming treatments with PEG or water at a concentration of 0.1 g / ml are most effective Furthermore, we evaluated the effect of priming on the resistance to saline stress. For this propose we use species from England and Scotland treated with and without priming (0.1 g / ml PEG) and irrigated with saline water at different concentrations. We did not observe differences between the treated plants and control plants when they were irrigated with water when compared to initial seedling vigor, even in more advanced stages primed plants showed faster growth). In the case of plants from seed treated with priming and irrigated with saline water plants developed faster than plants from untreated seed. Finally, using ISSR molecular markers have characterized two Succisa pratensis populations from Scotland and England divided into two groups: early and late germination. In this way it was possible to assess whether there is both genetic variation between the two populations and whether there are genetic differences between seeds that germinate first and they do later. As a result of the analysis it was concluded that if there is genetic variation between populations, but it would be more convenient to use more markers to discriminate between early and late germination.

ilustraciones, fotografías, gráficas, tablas El Moho gris causado por Botrytis cinerea es una de las principales enfermedades que afectan al cultivo de rosa en Colombia. Este pa´togeno causa lesiones en diferentes tejidos de la planta, lo que reduce la producción y calidad de las rosas. El manejo de la enfermedad se realiza de manera integrada, considerando prácticas culturales, físicas y un intensivo programa de aplicaciones de fungicidas, no obstante esto no es suficiente para su control. Una de las posibles razones podría ser consecuencia de la diversidad presente en B. cinerea producto de eventos de anastomosis que pueden producirse entre las hifas del hongo y que dan lugar a células multinucleadas y generalmente heterocarióticas y/o a la presencia/ausencia de los elementos genéticos transponibles Boty y Flipper. Hasta el momento existen antecedentes de la caracterización de poblaciones de B. cinerea en diferentes cultivos en el mundo pero no en Rosa sp. en Colombia. Es por ello que el objetivo principal de estudio fue caracterizar fenotípica y genéticamente poblaciones del hongo recuperadas a partir de flores, tallos y hojarasca, procedentes de seis fincas de producción de rosa (cv. Tressor2000) localizadas en la Sabana de Bogotá. Los parámetros fenotípicos evaluados fueron: tipo de micelio, capacidad para formar esclerocios, nivel de esporulación en medio PDA y virulencia sobre pétalos de Rosa sp. La caracterización genética comprendió correspondencia genotípica mediante amplificaciones parciales de los transposones Boty y Flipper y pertenencia de los aislamientos al Grupo I (Botrytis pseudocinerea) y Grupo II (Botrytis cinerea sensu stricto) mediante PCR-RFLP y enzima HhaI. En total se analizaron 270 aislamientos monospóricos (45 por finca y 15 por tipo de tejido). Se encontró una alta variabilidad morfológica aunque esta no estuvo asociada al origen del aislamiento (flor, tallo y hojarasca) pero si con el factor finca. En cuanto a virulencia, se presentaron diferencias significativas (p0,05) por origen de la muestra y por finca, evidenciando que los aislamientos provenientes de tallo son más virulentos que los de flor y hojarasca, y que la virulencia es diferencial por finca. En cuanto a la variabilidad genética, los ensayos de PCR señalan al Grupo II (Botrytis cinerea sensu stricto) como el único presente en la población colombiana. No se detectó el Grupo I (Botrytis pseudocinerea). La variabilidad encontrada en los aislamientos no se encontró asociada con el origen de la muestra pero si con la finca de donde provienen., El genotipo transposa estuvo presente en el 59% de los aislamientos analizados, seguido por boty con el 31% y el 10% por los genotipos vacuma y flipper. Los resultados obtenidos confirman por primera vez en el cultivo de rosas en Colombia la existencia de variabilidad biológica y genotípica de poblaciones de B. cinerea lo cual podría explicar por qué las estrategias de control no otorgan los resultados esperables y señala la necesidad de profundizar más en el conocimiento de éstas con el fin de optimizar el control y con ello obtener una mayor rentabilidad del cultivo de rosa. (Texto tomado de la fuente). Botrytis cinerea (Bc) is the main pathological problem in colombian rose production systems. The damage caused by this pathogen on the petals reduces the marketable product value. Currently, gray mold control is based on an integrated disease management, that includes cultural practices and intensive fungicide program. Nonetheless, the problems associated with this disease have increased over time. Despite the economic impact of gray mold on the Colombian rose production, the knowledge on Bc populations is scarce. The variability in B. cinerea can be the result of hyphae anastomosis that give rise to multinucleated and heterokaryotic cells. Also, the genetic variation could be attributed to the presence of transposable elements (TE) boty/flipper on the Bc fungal genome. There are reports about the genetic characterization of Bc populations in other South American regions, but not on the Colombian rose/B. cinerea pathosystem. The objective of this study was to characterize the biological and genetically variability of the Bc populations recovered from different rose tissue (flowers, stems, and leaf litter) from six rose greenhouses located in three geographical areas of Colombian Andean highlands. Cultivar Tressor 2000 was the object of sampling. The variables evaluated were virulence on rose petals, type of mycelium, sclerotia formation and sporulation in culture medium. The genotypic characterization and Bc group correspondence, was obtained by means of PCR amplification of the boty and flipper TE, and PCR-RFLP of the Bc-hch gene, respectively. 270 single-spore isolates were analyzed. High morphological variability was found but this was not associated with the source of the isolate whether it was flower, stem and leaves. However, this variability was found associated with the greenhouse of origen. Regarding virulence, significant differences (p 0.05) were found and associated with the isolate origin of rose tissue and with the greenhouse. Isolates originated from rose stems are more virulent than from flower and leaves. Virulence was also associated with greeinhouse. All isolates belong to group II (B. cinerea sensu stricto) none of the isolates were B. pseudocinerea. 39% of isolates corresponded to transposa genotype (flipper+/boty+), 31% to boty (flipper-/boty+), 5% to vacuma (flipper-/boty-) and the remaining to flipper (flipper+/boty-). Genotypes could not be differentiated neither by origin of rose tissue nor by greenhouse. This is the first genetic study carried out in Botrytis spp. populations in rose in Colombia. Maestría Magíster en Ciencias Agrarias Fitopatología Ciencias Agronómicas

2 Pags., 2 Fots., Esta colección de cartografía de variedades frutales de hueso y pepita es el resultado de una estrecha colaboración entre un equipo de investigación del Departamento de Pomología de la Estación Experimental de Aula Dei y la biblioteca del instituto para dar a conocer en la web una colección emblemática para el estudio las variedades frutales españolas desarrollada en el periodo 1959·1964. María Herrero, entrevistada por la Oficina Técnica Digital.CSIC, cuenta el origen y desarrollo del proyecto ya culminado y en difusión en abierto. Ver la colección documental con descripciones frutales en: http://digital.csic.es/handle/10261/81055

Resumen. El objetivo de la investigación fue determinar la asociación del polimorfismo (C/T) del intrón 6 del gen de la bLTF, con la incidencia de algunas enfermedades en ganado lechero. Para ello fueron observadas 482 vacas Holstein, durante al menos una lactancia, determinando la incidencia de algunas de las enfermedades mas importantes en la ganaderia de leche. La genotipificación para el polimorfismo de bLTF, se hizo usando la técnica de PCR-RFLP con DNA extraído de sangre periférica mediante la técnica de salting out. Para estudiar la asociación de los alelos del gen LTF, se utilizó el alelo B como control y se determinó el Odds Ratio (OR). Como resultados se obtiene que las frecuencias de los alelos A y B para el gen bLTF fueron 0,78 y 0,22 respectivamente. Las frecuencias genotípicas fueron 0,60, 0,36 y 0,04 para AA, AB y BB respectivamente. Una asociación altamente significativa (P≤0,001) fue hallada entre la incidencia de mastitis clínica y el polimorfismo del gen LTF. Los individuos portadores del alelo B tuvieron una probabilidad de incidencia de mastitis dos veces superior a los portadores del alelo A (OR=2.115 IC del 95%, 1.392-3.213). En el caso de la mastitis subclínica la probabilidad de incidencia fue de 1,6 veces más en los portadores del alelo B, con un OR=1.637 IC del 95% 1.184-2.264. Para la incidencia de enfermedades metabólicas, reproductivas, respiratorias, parasitarias, cáncer y cojeras, no se halló diferencia significativa (P>0,05) y se encontró asociación del alelo B del polimorfismo del intrón 6 del gen bLTF con la incidencia de mastitis clínica y subclínica. Abstract. The research objective was to determine the association of polymorphism (C/T) of intron 6 bLTF gene, with the incidence of some diseases on dairy cattle. A total of 482 Holstein cows located in different herds in the department of Antioquia - Colombia, were used to follow the incidence of disease, for at least a full lactation. Genotyping was performed using PCR-RFLP with DNA extracted from peripheral blood by salting out technique. DNA amplification was obtained of the 482 samples with frequencies of alleles A and B of 0.78 and 0.22 respectively. The genotype frequencies were 0.60, 0.36 and 0.04 for AA, AB and BB respectively. This study find a significant association (P ≤ 0.001) between the incidence of clinical mastitis and LTF gene polymorphism. It was found a two fold risk of infection in animals that had the B allele compared with those with the A allele (OR = 95% 2115, 1392-3213). Shared situation in the case of subclinical mastitis with an OR = 95% 1637 1184-2264. In the case of metabolic diseases, reproductive, respiratory, parasitic, cancer and lameness, there were no significant difference (P>0.05). It was found association of B allele of ribosomal gene 6 intron of the bLTF with the incidence of clinical and subclinical mastitis.

A total of 72 Trypanosoma cruzi isolates from different hosts and geographical regions of western Venezuela, where Chagas disease is endemic, were typed using ribosomal and mini-exon gene markers. The isolates were obtained from wild, peridomestic and domestic sources including triatomine-bugs, human acute chagasic patients and other mammals. Results showed that T. cruzi two major phylogenetic lineages, T. cruzi I and T. cruzi II were present. However, a remarkable predominance of T. cruzi I (96%) over T. cruzi II (4%) was observed. The present results suggest that in western Venezuela circulation of both T. cruzi I and T. cruzi II isolates is independent from the source of isolation and the geographical area where they occur, with predominance of T. cruzi I. The epidemiological significance of the present results is discussed. Un total de 72 aislados de Trypanosoma cruzi obtenidos de diferentes hospedadores y regiones geográficas del occidente de Venezuela, donde la enfermedad de Chagas es endémica, fueron caracterizados genéticamente utilizando marcadores moleculares de los genes ribosomales y del mini-exón. Los aislados fueron obtenidos de fuentes silvestres y domésticas, incluyendo triatominos-vectores, pacientes chagásicos agudos y otros mamiferos. Los resultados mostraron la presencia de los dos linajes reconocidos para T. cruzi (TcI y TcII) en la mayoría de los aislados provenientes de los diferentes hospedadores estudiados. Sin embargo, fue observada una marcada predominancia de T. cruzi I (96%) sobre T. cruzi II (4%). Los presentes resultados sugieren que en el occidente de Venezuela la circulación de aislados de los linajes TcI y TcII es independiente de la fuente biológica de aislamiento y del área geográfica de procedencia, siendo predominante los aislados TcI. Se discute la significación epidemiológica de los presentes resultados.

Determinar la validez para estudios de paternidad de los loci STRs. D3S1358, vWa, FGA, TH01, TPOX, CSF1P0, D5S818, D13S1317, D7S820, en los departamentos de Boyacá, Norte de Santander y Santander.