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For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-1 and 1.0 mg mL-1 MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-1). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-1, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA. Resumo Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-1 e 1,0 mg mL-1 foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-1 de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-1, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

In this study, the toxic effects of melittin on Madin-Darby Bovine Kidney cells (MDBK) were analyzed with respect to mitochondrial functionality by reduction of MTT and flow cytometry, apoptosis potential, necrosis, oxygen reactive species (ROS) production, lipid peroxidation, and DNA fragmentation using flow cytometry and cell membrane destabilization by confocal microscopy. The toxicity presented dose-dependent characteristics and mitochondrial activity was inhibited by up to 78.24 ±3.59% (P

Among the immune system cells, macrophages have an important role. Apamin, a bee venom constituent, is important in the defense of these insects. Thus, we aimed to evaluate the metabolism of J774 1.6 macrophage cell line when exposed to isolated and purified apamin, using cytotoxicity tests by MTT reduction and analysis by flow cytometry (apoptosis / necrosis, production of reactive oxygen species (ROS), membranous lipoperoxidation (LPO), electrical potential of the mitochondrial membrane (mMP) and DNA fragmentation). None of the tested concentrations (10 to 100μg/mL) were cytotoxic according to MTT reductions. Apoptosis rates decreased at concentrations of 2.5, 5.0, and 10.0μg/mL (P0.05). Apamin did not alter ROS, LPO, or DNA fragmentation. Therefore, all analyzed concentrations (1.25 to 10μg/mL) decreased mMP. Such decrease in apoptosis might be due to a suppression of mitochondrial pro-apoptotic messengers, as this peptide causes no oxidative stress, lipid peroxidation, and DNA damage. Highly sensitive techniques are majorly important for proper interpretation of cellular toxicity mechanisms, combined with routine laboratory methods. RESUMO Das células do sistema imunológico, macrófagos desempenham um papel fundamental. Apamina, constituinte do veneno de abelhas, é importante na defesa destas. Objetivou-se avaliar o metabolismo da linhagem de macrófagos J774 1.6 expostos à apamina isolada e purificada, avaliando-se citotoxicidade por redução de MTT e análise por citometria de fluxo (apoptose / necrose, produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), lipoperoxidação membranosa (LPO), potencial elétrico da membrana mitocondrial (MMP) e fragmentação do DNA). Nenhuma concentração testada (10 a 100μg / mL) foi citotóxica. As taxas de apoptose diminuíram nas concentrações 2,5, 5,0 e 10,0μg / mL (P0,05). A apamina não alterou as ERO, a LPO nem a fragmentação do DNA. Portanto, todas as concentrações analisadas (1,25 a 10μg / mL) diminuíram a mMP. Tal diminuição na apoptose pode ser por uma supressão de mensageiros pró-apoptóticos mitocondriais, já que este peptídeo não causa estresse oxidativo, peroxidação lipídica nem dano ao DNA. Técnicas altamente sensíveis são importantes para adequada interpretação dos mecanismos de citotoxicidade.

Flavoring additives are of great technological importance for the food industry. However, there is little information regarding the toxicological properties of these micro-ingredients, especially at the cellular level. The present study used meristematic root cells of Allium cepa L. to evaluate the toxicity of a liquid, aroma and flavor synthetic chocolate additive, manufactured and widely marketed throughout Brazil and exported to other countries in South America. The flavoring concentrations evaluated were 100.00; 50.00; 25.00; 1.00; 0.50 and 0.25 µL/L, where the highest concentration established was one-hundred times lower than that commercially suggested for use. The concentration 100 µL/L substantially reduced cell division of meristems within 24- and 48-hours exposure. Concentrations from 100.00 to 0.50 µL/L resulted in a significant number of prophases to the detriment of the other phases of cell division, indicating an aneugenic activity, and induced a significant number of cellular changes, with emphasis on micronuclei, nuclear buds and chromosomal breaks. Under the established analysis conditions, with the exception of concentration 0.25 µL/L, the flavoring of chocolate caused cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to root meristems. Resumo Os aditivos aromatizantes têm grande importância tecnológica para a indústria de alimentos. Contudo, poucas são as informações quanto as propriedades toxicológicas desses microingredientes, especialmente, em nível celular. No presente estudo avaliou-se, sobre as células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., a toxicidade de um aditivo sintético líquido de aroma e sabor de chocolate, fabricado e amplamente comercializado em todo Brasil, e exportado para outros países da América do Sul. As concentrações de aromatizante avaliadas foram 100,00; 50,00; 25,00; 1,00; 0,50 e 0,25 µL/L, onde a maior concentração estabelecida foi cem vezes menor que a sugerida comercialmente para uso. Com base na interpretação dos resultados, a concentração 100 µL/L reduziu substancialmente a divisão celular dos meristemas nas 24 e 48 horas de exposição. As concentrações 100,00 a 0,50 µL/L demonstraram número significativo de prófases em detrimento as outras fases da divisão celular, indicando ação aneugênica, e induziram número significativo de alterações celulares, com ênfase a micronúcleos, broto nucleares e quebras cromossômicas. Nas condições de análises estabelecidas, com exceção a concentração 0,25 µL/L, o aromatizante de chocolate causou citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade aos meristemas radiculares.

O Glifosato (GLY) foi sintetizado no ano de 1950, inicialmente com propriedades fitotóxicas e com capacidade herbicida reconhecida somente em 1970. O GLY é um organofosfato, formado por apenas uma molécula de glicina e uma de fosfonometila, denominado N-(fosfonometil) glicina, usado em todo o mundo para diminuir perdas de produtividade agrícola. O Round-up® é o herbicida a base de GLY mais conhecido no mercado. Muitos estudos demonstram a citotoxicidade de GLY e Round-up® em células de câncer. Os Glioblastomas (GBMs) são os tumores primários mais comuns no Sistema Nervoso Central (SNC), que correspondem a 16 % de todos os tumores cerebrais primários e neoplasias do SNC. GBMs são mais frequentes na população adulta, geralmente a partir dos 60 anos de idade, apresentando os piores diagnósticos, resultando em uma sobrevida muito baixa. Os principais tratamentos para esta neoplasia são ressecção cirúrgica, radioterapia e quimioterapia com Temozolamida. Mesmo utilizando estas estratégias terapêuticas, pacientes com GBM tem alta taxa de recorrência deste tumor e uma sobrevida muito baixa após 5 anos de tratamento. Dessa forma, a busca por estratégias que possam ser mais eficientes em aumentar a sobrevida ou mesmo curar este tumor são necessárias. Nesse estudo, foi avaliada a citotoxicidade do tratamento agudo (24, 48 e 72 horas) e crônico (5 dias de tratamento mais 23 dias de intervalo) do GLY e do Round-up® em linhagens de GBMs humano e de rato bem como a indução de senescência celular. Demonstramos pela primeira vez que o GLY e o Round-up® (nas concentrações de 0,0025 %, 0,005% e 0,001%) apresentaram efeitos citotóxicos em linhagens de GBMs, diminuindo a viabilidade celular, o número de células, a formação de colônias e a duplicação populacional. Não foi observado indução de senescência celular. Os resultados também apontaram que os efeitos citotóxicos foram mais pronunciados ao realizar o tratamento com Round-up® do que com o GLY. Dessa forma, este estudo indica pela primeira vez um potencial citotóxico do GLY e do Round-up, que precisa ser melhor compreendido a fim de se buscar um potencial mecanismo de ação e segurança para futuramente incluir como possível estratégia terapêutica.

The objective of this study was to evaluate the hepatoprotective effect of the honey bee Apis mellifera ethanolic extract of the red propolis, obtained in four municipalities of the Rio Grande do Norte semi-arid region, through an in vitro evaluation of the antineoplastic potential in human hepatic carcinoma (HepG2) and normal cell lines (L929), and from the comet assay in hepatic cell lines (ZF-L hepatocytes) to evaluate the genoprotective potential of the extract. The hepatoprotective effect was also evaluated in vivo by the induction of chronic experimental hepatic lesions in rodents (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769), Wistar line, by intraperitoneal administration of thioacetamide (TAA) at the dose of 0.2g/kg. The animals were distributed in the following experimental groups: G1 (control), G2 (treated with 500mg/kg ethanolic extract of propolis), G3 (treated with 500mg/kg of ethanolic extract and TAA) and G4 (treated with TAA). All rats were submitted to serum biochemical, macroscopic, histological and stereological biochemical exams of the liver. It was verified the genoprotective effect of red propolis since the mean damages promoted to DNA in cells tested with the extract were significantly lower than the mean of the positive control damage (hydrogen peroxide). The red propolis extract did not present cytotoxic activity to the tumor cells of human liver cancer, as well as to normal ones. The absence of cytotoxicity in normal cells may indicate safety in the use of the propolis extract. The results of the serum biochemical evaluation showed that the serum levels of the aminotransferase enzymes (AST) did not differ significantly between G1, G2 and G3 when compared to each other. G4 showed significant increase in levels compared to the other groups, indicating that the administration of the extract did not cause liver toxicity, as well as exerted hepatoprotective effect against the hepatic damage induced by TAA. The G3 and G4 animals developed cirrhosis, but in G3 the livers were characterized by the presence of small regenerative nodules and level with the surface of the organ, whereas in G4 the livers showed large regenerative nodules. The livers of the G1 and G2 animals presented normal histological appearance, whereas the livers of the G3 animals showed regenerative nodules surrounded by thin septa of connective tissue, and in G4 the regenerative nodules were surrounded by thick septa fibrous connective tissue. The analysis of the hepatic tissues by means of stereology showed that there was no statistical difference between the percentage of hepatocytes, sinusoids, and collagens in G1 and G2. In G3 the percentage of hepatocytes, sinusoids, and collagen did not differ significantly from the other groups. It was concluded that the ethanolic extract of the red propolis exerted a hepatoprotective effect, because it promoted in vitro reduction of the damage to the DNA of liver cells, antineoplastic activity in human hepatocellular carcinoma cell line (HepG2) and did not exert cytotoxic effect in normal cells or was able to reduce liver enzyme activity and the severity of cirrhosis induced by TAA in vivo. RESUMO: Este estudo objetivou avaliar o efeito hepatoprotetor do extrato etanólico da própolis vermelha da abelha Apis mellifera, obtido em quatro municípios do semiárido do Rio Grande do Norte, mediante avaliação in vitro do potencial antineoplásico em linhagens de células de carcinoma hepático humano (HepG2) e em linhagens de células normais (L929), além do ensaio cometa em linhagens de células hepáticas (hepatócitos ZF-L) para avaliar o potencial genoprotetor do extrato. O efeito hepatoprotetor também foi avaliado in vivo através da indução de lesões hepática experimental crônica em roedores da espécie Rattus norvegicus (Berkenhout, 1769), linhagem Wistar, pela administração intraperitoneal de tioacetamida (TAA) na dose de 0,2g/kg. Os animais foram distribuídos nos seguintes grupos experimentais: G1 (controle), G2 (tratados com 500mg/kg de extrato etanólico da própolis), G3 (tratados com 500mg/kg de extrato etanólico e TAA) e G4 (tratados com TAA). Todos os ratos foram submetidos aos exames bioquímico sérico, anatomopatológico macroscópico, histológico e esteriológico do fígado. Foi constatado o efeito genoprotetor da própolis vermelha uma vez que as médias dos danos promovidos ao DNA em células testadas com o extrato foram significativamente inferiores à média dos danos do controle positivo (peróxido de hidrogênio). O extrato da própolis vermelha não apresentou atividade citotóxica para células tumorais de câncer de fígado humano, bem como para normais. A ausência de citotoxicidade em células normais, tal como constatado, pode indicar segurança no uso do extrato da própolis. Os resultados da avaliação bioquímica sérica demonstraram que os níveis séricos das enzimas aminotransferase (AST) não diferiram significativamente entre G1, G2 e G3, quando comparadas entre si. No G4 houve aumento significativo dos níveis em relação aos demais grupos, indicando que a administração do extrato não causou toxicidade hepática, bem como exerceu efeito hepatoprotetor frente ao dano hepático induzido pela TAA. Os animais dos G3 e G4 desenvolveram cirrose, porém no G3 os fígados caracterizaram-se pela presença de pequenos nódulos regenerativos e nivelados com a superfície do órgão, enquanto que no G4 os fígados apresentaram grandes nódulos regenerativos. Os fígados dos animais G1 e G2 apresentaram aspecto histológico normal, enquanto que os fígados dos animais do G3 apresentaram nódulos regenerativos circundados por finos septos de tecido conjuntivo, e nos do G4 os nódulos regenerativos foram circundados por espessos septos de tecido conjuntivo fibroso. A análise dos tecidos hepáticos por meio de estereologia mostrou que não houve diferença estatística entre o percentual de hepatócitos, sinusoides e colágenos nos G1 e G2. No G3 o percentual de hepatócitos, sinusoides e colágeno não diferiu significativamente dos demais grupos. Concluiu-se que o extrato etanólico da própolis vermelha exerceu efeito genoprotetor, por promover in vitro redução do dano ao DNA de células hepáticas, atividade antineoplásica em linhagem celular de carcinoma hepatocelular humano (HepG2) e não exerceu efeito citotóxico em células normais ou efeito hepatoprotetor in vivo com diminuição da gravidade da cirrose induzida por TAA.

Background Cancer constitutes group of diseases responsible for the second largest cause of global death, and it is currently considered one of the main public health concerns nowadays. Early diagnosis associated with the best choice of therapeutic strategy, is essential to achieve success in cancer treatment. In women, breast cancer is the second most common type, whereas ovarian cancer has the highest lethality when compared to other neoplasms of the female genital system. The present work, therefore, proposes the association of methylene blue with citrate-coated maghemite nanoparticles (MAGCIT–MB) as a nanocomplex for the treatment of breast and ovarian cancer. Results In vitro studies showed that T-47D and A2780 cancer cell lines underwent a significant reduction in cell viability after treatment with MAGCIT–MB, an event not observed in non-tumor (HNTMC and HUVEC) cells and MDA-MB-231, a triple-negative breast cancer cell line. Flow cytometry experiments suggest that the main mechanism of endocytosis involved in the interiorization of MAGCIT–MB is the clathrin pathway, whereas both late apoptosis and necrosis are the main types of cell death caused by the nanocomplex. Scanning electron microscopy and light microscopy reveal significant changes in the cell morphology. Quantification of reactive oxygen species confirmed the MAGCIT–MB cytotoxic mechanism and its importance for the treatment of tumor cells. The lower cytotoxicity of individual solution of maghemite nanoparticles with citrate (MAGCIT) and free methylene blue (MB) shows that their association in the nanocomplex is responsible for its enhanced therapeutic potential in the treatment of breast and ovarian cancer in vitro. Conclusions Treatment with MAGCIT–MB induces the death of cancer cells but not normal cells. These results highlight the importance of the maghemite core for drug delivery and for increasing methylene blue activity, aiming at the treatment of breast and ovarian cancer. Graphic Abstract

Mango industry processing disposes 40-60% of this fruit as residues, such as peels and kernels. The exploration of bioproducts from these industrial rejects can reduce environmental impact besides of producing high value-added materials. In this scenario, carboxymethyl starch nanoparticles were produced from mango (Mangifera indica L.) kernel starch. These nanoparticles were then decorated with thermoresponsive chains of the amino terminated poly(N-isopropylacrylamide) (PNIPAM‑NH2), with the intention of evaluating their applicability in the biomedical area. Elemental analysis, Fourier transform infrared (FTIR) and 1H nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy confirmed successful grafting of PNIPAM-NH2 onto the carboxymethyl starch backbone. Scanning electron microscopy (SEM) images and dynamic light scattering (DLS) data showed sizes of 100 and 112 nm in the dry state and of 744 and 598 nm in the hydrated state, when the grafting degree (GD) was of 6 and 14.3%, respectively. The degree of swelling was of 41,100 and 15,100% for GD of 6 and 14.3% respectively, suggesting that the nanogels are suitable for drug incorporation. The toxicity of the nanogels to human adipose-derived stem cells (ADSCs) and red blood cells (RBCs) was evaluated by lactate dehydrogenase (LDH), alamarBlue and hemolysis assays. Both nanogels were non-cytotoxic and non-hemolytic, suggesting the suitability of these biomaterials for cell- and blood-contacting applications.

This study reviews the use of Apocynaceae species for cancer and tumor treatment in the Amazon. Databases and books were searched for ethnobotanical and phytochemical evaluations of the cytotoxic and anticancer activities of Apocynaceae species. The literature reports the use of several Amazonian species, such as Asclepias curassavica, Himatanthus articulates, and Macoubea sprucei, in treating tumors and cancers. Phytochemical studies on A. curassavica and H. articulatus have shown their chemical compositions to be variable, possessing cardenolides, iridoids, flavonoids, steroids, and terpenes. Most of the species have not been subjected to in vitro experiments for anticancer activity, and the evaluated species showed moderate-to-weak responses or were inactive. Other studies have shown that iridoids, flavonoids, and steroids are promising as antitumor treatments. The following action mechanisms have been attributed to iridoids: topoisomerase I-DNA complex stabilization, cellular cytoskeleton alteration, and induction of apoptosis. The activities of flavonoids have been reported to include apoptosis induction in liver tumor cells. Some authors suggest that flavonoids reduce oxidative stress cellular response which reduces mitochondrial dysfunction and cell death. In summary, Apocynaceae species appear to be promising as a source for antitumor agents; however, further studies are required to confirm their antitumor activities and to better elucidate the underlying mechanisms involved. Este estudio revisa el uso de especies de Apocynaceae para el tratamiento del cáncer y tumores en la Amazonía. Se buscaron bases de datos y libros para realizar evaluaciones etnobotánicas y fitoquímicas de las actividades citotóxicas y anticancerígenas de las especies de Apocynaceae. La literatura reporta el uso de varias especies amazónicas, como Asclepias curassavica, Himatanthus articulate y Macoubea sprucei, en el tratamiento de tumores y cánceres. Los estudios fitoquímicos sobre A. curassavica y H. articulatus han demostrado que sus composiciones químicas son variables y poseen cardenólidos, iridoides, flavonoides, esteroides y terpenos. La mayoría de las especies no se han sometido a experimentos in vitro para determinar la actividad anticancerosa, y las especies evaluadas mostraron respuestas de moderadas a débiles o estuvieron inactivas. Otros estudios han demostrado que los iridoides, flavonoides y esteroides son prometedores como tratamientos antitumorales. Se han atribuido a los iridoides los siguientes mecanismos de acción: estabilización del complejo topoisomerasa I-ADN, alteración del citoesqueleto celular e inducción de apoptosis. Se ha informado que las actividades de los flavonoides incluyen la inducción de apoptosis en células tumorales hepáticas. Algunos autores sugieren que los flavonoides reducen la respuesta celular al estrés oxidativo, lo que reduce la disfunción mitocondrial y la muerte celular. En resumen, las especies de Apocynaceae parecen prometedoras como fuente de agentes antitumorales; sin embargo, se requieren más estudios para confirmar sus actividades antitumorales y para dilucidar mejor los mecanismos subyacentes involucrados. Este estudo revisa o uso de espécies de Apocynaceae para o tratamento de câncer e tumores na Amazônia. Bancos de dados e livros foram pesquisados para avaliações etnobotânicas e fitoquímicas das atividades citotóxicas e anticâncer de espécies de Apocynaceae. A literatura relata o uso de várias espécies amazônicas, como Asclepias curassavica, Himatanthus articulatus e Macoubea sprucei, no tratamento de tumores e cânceres. Estudos fitoquímicos em A. curassavica e H. articulatus mostraram que suas composições químicas são variáveis, possuindo cardenolideos, iridoides, flavonoides, esteroides e terpenos. A maioria das espécies não foi submetida a experimentos in vitro para atividade anticâncer, e as espécies avaliadas apresentaram respostas moderadas a fracas ou eram inativas. Outros estudos mostraram que iridoides, flavonoides e esteroides são promissores nos tratamentos antitumorais. Os seguintes mecanismos de ação foram atribuídos aos iridóides: estabilização do complexo topoisomerase I-DNA, alteração do citoesqueleto celular e indução de apoptose. Foi relatado que as atividades dos flavonoides incluem a indução de apoptose em células tumorais do fígado. Alguns autores sugerem que os flavonoides reduzem a resposta celular ao estresse oxidativo, o que reduz a disfunção mitocondrial e a morte celular. Em resumo, as espécies Apocynaceae parecem ser promissoras como fonte de agentes antitumorais; no entanto, mais estudos são necessários para confirmar suas atividades antitumorais e para melhor elucidar os mecanismos subjacentes envolvidos.

The objective of this work was to evaluate the antiparasitic potential and cytotoxic effect of extracts by the leaves and roots of S. tuberosa. The results show that the extracts of S. tuberosa have low antipromastigote activity against strains of L. braziliensis, since there was no action at concentrations ≤ 500 µg/mL. While for L. infantum there was a significant action of the hydroalcoholic extract of the roots against promastigote forms, since there was 29.33 ± 1.94% of mortality for the treatment of 1000 µg/mL. The same extract showed antiepimastigote action against T. cruzi at a concentration ≥ 1000 µg/mL. Despite the low antiparasitic activities, it is possible to observe that the extracts of S. tuberosa have no cytotoxic action, except the hydroalcoholic extract of the roots. In this extract there was a total of 27.85 ± 2.41% of cytotoxicity against fibroblastic cells, in the highest concentration evaluated (1000 µg/mL). El objetivo de este trabajo fue evaluar el potencial antiparasitario y efecto citotóxico de extractos de hojas y raíces de S. tuberosa. Los resultados muestran que los extractos de S. tuberosa tienen baja actividad antipromastigota contra cepas de L. braziliensis, ya que no hubo acción a concentraciones ≤ 500 µg/mL. Mientras que para L. infantum hubo una acción significativa del extracto hidroalcohólico de las raíces contra las formas de promastigote, ya que hubo 29.33 ± 1.94% de mortalidad para el tratamiento de 1000 µg / mL. El mismo extracto mostró acción antiepimastigota contra T. cruzi a una concentración ≥ 1000 µg/mL. A pesar de las bajas actividades antiparasitarias, es posible observar que los extractos de S. tuberosa no tienen acción citotóxica, excepto el extracto hidroalcohólico de las raíces. En este extracto hubo un total de 27.85 ± 2.41% de citotoxicidad contra células fibroblásticas, en la concentración más alta evaluada (1000 µg/mL). O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antiparasitário e o efeito citotóxico de extratos de folhas e raízes de S. tuberosa. Os resultados mostram que os extratos de S. tuberosa apresentam baixa atividade antipromastigota contra cepas de L. braziliensis, uma vez que não houve ação em concentrações ≤ 500 µg/mL. Já para L. infantum houve uma ação significativa do extrato hidroalcoólico das raízes contra as formas promastigotas, já que houve 29,33 ± 1,94% de mortalidade para o tratamento de 1000 µg/mL. O mesmo extrato apresentou ação antiepimastigota contra T. cruzi na concentração ≥ 1000 µg/mL. Apesar da baixa atividade antiparasitária, é possível observar que os extratos de S. tuberosa não apresentam ação citotóxica, exceto o extrato hidroalcoólico das raízes. Neste extrato houve um total de 27,85 ± 2,41% de citotoxicidade contra células fibroblásticas, na maior concentração avaliada (1000 µg/mL).

This study was financed in part by the Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior?Brazil (CAPES)?Finance Code 001 and supported by the Brazilian National Council for Scientific and Technological Development (CNPq). Federal University of Par?. Institute of Biological Science. Laboratory of Functional and Structural Biology. Bel?m, PA, Brazil. Minist?rio da Sa?de. Secretaria de Vigil?ncia em Sa?de. Instituto Evandro Chagas. Laborat?rio de Cultura Celular e Citogen?tica. Ananindeua, PA, Brasil. Federal University of Par?. Institute of Biological Science. Laboratory of Functional and Structural Biology. Bel?m, PA, Brazil. Minist?rio da Sa?de. Secretaria de Vigil?ncia em Sa?de. Instituto Evandro Chagas. Laborat?rio de Cultura Celular e Citogen?tica. Ananindeua, PA, Brasil. Federal University of Par?. Institute of Biological Science. Laboratory of Functional and Structural Biology. Bel?m, PA, Brazil. Federal University of Par?. Institute of Biological Science. Laboratory of Functional and Structural Biology. Bel?m, PA, Brazil. Federal University of Par?. Institute of Biological Science. Laboratory of Functional and Structural Biology. Bel?m, PA, Brazil. Minist?rio da Sa?de. Secretaria de Vigil?ncia em Sa?de. Instituto Evandro Chagas. Laborat?rio de Cultura Celular e Citogen?tica. Ananindeua, PA, Brasil. Federal University of Par?. Institute of Biological Sciences. Laboratory of Experimental Neuroprotection and Neuroregeneration. Bel?m, PA, Brazil. Federal University of Par?. Institute of Biological Science. Laboratory of Functional and Structural Biology. Bel?m, PA, Brazil. Minocycline has been proposed as a neuroprotective agent with pleiotropic effects on several experimental models of neurodegenerative diseases, including microglial inhibition. However, although most studies have focused on the central actions of minocycline in affecting microglial functions, other central nervous system (CNS) cell types may also be affected by this drug toxicity. Hence, considering that glial cells play a pivotal role on CNS physiology and are the main responsible for neuronal integrity, a comprehensive investigation on the effects of minocycline treatment on human glial cells is mandatory before translational studies to afford neuroprotection in humans. Therefore, we explored the cytotoxic and genotoxic effects of minocycline at different concentrations in glial cells using an in vitro model. To achieve this, U87 glial cell were exposed to 10?50 ?g/mL for 24 h. After exposure, cell viability, general metabolic status and genotoxic assays were performed. No changes were observed in cell viability, however, the general metabolic status decreased over 20 ?g/mL. In addition, although no chromossome aberrations were observed, evidences of genotoxicity, such as increase on micronucleus, buds and bridges, were observed from 10 ?g/mL. These results suggest that minocycline may induce genotoxic effects even at concentrations considered previously safe and should be used with caution in translational studies.

Resumo Introdução A Punica granatum L. (PG), utilizada como medicamento fitoterápico, apresenta propriedades terapêuticas, anti-inflamatórias e antioxidante. Embora diversos estudos já tenham sido realizados com este fitoterápico, seus possíveis efeitos citotóxicos nos tecidos humanos ainda não são claros. Objetivo Avaliar a citotoxicidade da PG por meio de cultura celular com duas linhagens: fibroblastos humanos de mucosa oral (FLM) e células de carcinoma epidermoide oral humano (KB). Material e método As células foram submetidas ao teste de viabilidade celular por 24 horas nas concentrações da PG 1%, 0,50%, 0,25%, 0,125%, 0,062% e 0,031%, e aos testes de citotoxicidade celular em 4 horas, 1, 3, 5 e 7 dias, em diferentes concentrações, realizados em triplicata. Foi utilizado um controle negativo (Triton 1%) e um controle positivo sem o extrato de PG. Os dados obtidos foram submetidos à ANOVA (p < 0,05). Resultado Foi possível observar que o extrato da PG possui efeitos inibitórios, apresentando-se maior nas células KB em relação às FLM. Os testes de citotoxicidade e viabilidade mostraram inibição e morte das células KB e FLM nas concentrações 1%, 0,50% e 0,25%. Conclusão O efeito inibitório da PG foi dose-dependentes, mostrando-se maior nas células KB em relação às FLM. Abstract Introduction Punica granatum L. (PG), used as a herbal medicine, has therapeutic, anti-inflammatory and antioxidant properties, although several studies have already been carried out with this herbal medicine, its possible cytotoxic effects on human tissues are still unclear. Objective To evaluate the cytotoxicity of PG through cell culture with two strains: human oral mucosa fibroblasts (LFM) and human oral squamous cell carcinoma (KB) cells. Material and method The cells were submitted to the cell viability test for 24 hours in the concentrations of PG 1%, 0.50%, 0.25%, 0.125%, 0.062% and 0.031% and the cell cytotoxicity tests in 4 hours, 1, 3, 5 and 7 days in different concentrations, performed in triplicate. A negative control (Triton 1%) and a positive control without the PG extract were used. The data obtained were submitted to ANOVA (p

The red seaweed species Gelidium sesquipedale and Pterocladiella capillacea are commercially explored as one of the main seaweed resources in Portugal. However, they are essentially harvested for extraction of agar, leaving a large biomass share needing an adequate valorization. The two studied red seaweed species were characterized by a large share of saturated fatty acids (SFA) in the vicinity of 60% (of the total FAs). Concerning ω3 highly unsaturated FAs, only EPA reached a significant percentage in P. capillacea and G. sesquipedale, 13.0 ± 0.5% and 7.7 ± 0.1%, respectively. In comparison with other seaweeds, the phenolic content was low for both species and aqueous and ethanolic extracts. The antioxidant activity was also low or even undetected. Regarding anti-inflammatory activity, as measured by inhibition of cyclooxygenase-2, it was not detected in the aqueous extracts of the seaweed, but was significant in the ethanolic extracts, 69 ± 3% and 54 ± 6%, for P. capillacea and G. sesquipedale, respectively. Concerning cytotoxicity, while ethanolic extracts did not cause any detectable cytotoxicity, the biomass and the aqueous extracts reduced HeLa cell viability. Finally, the elemental composition showed differences between the two seaweed species. In particular, G. sesquipedale contained a higher I level than P. capillacea, 807 ± 51 mg/kg dw vs 435 ± 18 mg/kg dw. On the whole, attained results were promising and warrant further study. This work was supported by the following Grants: Ref.: SFRH/BPD/102689/2014 (“Fundação para a Ciência e a Tecnologia”, FCT) for Carlos Cardoso, DIVERSIAQUA (MAR2020, Ref.: 16-02-01-FEAM-66) for Cláudia Afonso, and (SFRH/BD/129795/2017; FCT) for Joana Matos. The experimental work was funded by the projects AQUAMAX (Ref.: 16-02-01-FMP-0047) and I9+ PROALGA (Ref.: 16-01-03-FMP-0011). info:eu-repo/semantics/publishedVersion

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico O complexo ternário de Cobre(II), 1,10-fenantrolina e doxiciclina [Cu(dox)(phen)]2+, desenvolvido como um candidato a droga antitumoral, mostrou alta citotoxicidade e atividade de clivagem do DNA por mecanismo oxidativo e intercalação à molécula, sugerindo estudos que auxiliem na melhor compreensão de seu mecanismo de ação. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi investigar sua atividade citotóxica e potencial genotóxico em células tumorais e não-tumorais cultivadas in vitro e sua atividade antitumoral in vivo utilizando camundongos BALB/C inoculados com as linhagens celulares de sarcoma 180 e tumor de Ehrlich, bem como avaliar os efeitos mutagênicos e recombinogênicos do [Cu(dox)(phen)]2+ utilizando o teste para detecção de mutação e recombinação somática (SMART) em Drosophila melanogaster. O coeficiente de partição de [Cu(dox)(phen)]2+ foi determinado em sistema água octanol em pH 7,4. A avaliação da citotoxicidade foi realizada usando o ensaio de resazurina em três linhagens de células tumorigênicas (sarcoma TG180, sarcoma S180 e melanoma B16F10) e uma linhagem não tumorigênica (macrófagos RAW 264.7) em diferentes concentrações. A atividade genotóxica foi avaliada pelo Teste de Micronúcleo in vitro nas concentrações de 1; 0,25; 0,1; e 0,05μM. O teste de atividade antitumoral in vivo foi realizado utilizando sarcoma S180 nas concentrações de 5, 10 e 15 mg/Kg de animal e foi determinado o tempo de sobrevivência e alterações no peso de camundongos usando um modelo de tumor ascítico de Ehrlich nas concentrações de 1 e 8mg/Kg de animal. O teste SMART foi realizado com larvas de 72h nos cruzamentos padrão e de alta bioativação em três concentrações de [Cu(dox)(phen)]2+ (6,92; 13,84 ou 27,6mM). Foram analisados indivíduos trans-heterozigotos marcados e heterozigotos balanceados para determinar os eventos mutacionais e recombinogênicos ocorridos nas células. Os resultados obtidos em linhagens celulares mantidas in vitro indicaram que o composto apresenta moderado potencial citotóxico, com inibição de crescimento celular seletiva para células tumorais, especialmente B16F10. Seu mecanismo de ação principal parece ser por meio da geração de EROs. [Cu(dox)(phen)]2+ reduziu significativamente o tamanho do tumor implantado no modelo animal, sugerindo grande potencial antitumoral. [Cu(dox)(phen)]2+ é seletivamente citotóxico para B16F10 e mostrou elevado potencial quimioterápico in vivo contra sarcoma S180 e tumor ascítico de Ehrlich. Em relação aos efeitos mutagênicos e recombinogênicos foi verificado que [Cu(dox)(phen)]2+ aumentou significativamente as frequências de células mutantes em ambos os cruzamentos de D. melanogaster, principalmente por recombinação. Esses dados mostram que [Cu(dox)(phen)]2+ é um agente recombinogênico direto, independente da bioativação. Os resultados obtidos indicam que [Cu(dox)(phen)]2+ é um candidato promissor para o desenvolvimento de novas drogas quimioterápicas, uma vez que apresentou comportamento seletivo para células tumorais e possui seletividade satisfatória para atravessar a membrana e chegar ao DNA, seu principal alvo de ação. The ternary complex of Copper(II), 1,10-phenanthroline and doxycycline [Cu(dox)(phen)]2+, developed as a candidate for the antitumoral drug, showed high cytotoxicity and DNA cleavage activity by oxidative mechanism and interleaving to the molecule, suggesting studies that help to better understand its mechanism of action. In this context, the aim of the present study was to investigate its cytotoxic activity and genotoxic potential in tumor and non-tumor cells cultured in vitro and its antitumoral activity in vivo using BALB/C mice inoculated with the cell lines of sarcoma 180 and Ehrlich's tumour, as well as evaluating the mutagenic and recombinogenic effects of [Cu(dox)(phen)]2+ using the somatic mutation and recombination test (SMART) on Drosophila melanogaster. The partition coefficient of [Cu(dox)(phen)]2+ was determined in octanol water at pH 7.4. Cytotoxicity was assessed using the resazurin test on three lines of tumorigenic cells (sarcoma TG180, sarcoma S180 and melanoma B16F10) and a non-tumogenic lineage (macrophages RAW 264.7) in different concentrations. Genotoxic activity was evaluated by in vitro Micronucleus Test at concentrations of 1; 0.25; 0.1; and 0.05μM. The in vivo antitumoral activity test was performed using sarcoma S180 at concentrations of 5, 10 and 15 mg/Kg of animal and the survival time and changes in weight of mice were determined using an Ehrlich ascitic tumor model at concentrations of 1 and 8 mg/Kg of animal. The SMART test was performed with 72h larvae at standard and high bioactivation crossings at three concentrations of [Cu(dox)(phen)]2+ (6.92; 13.84 or 27.6mM). Marked trans-heterozygous and balanced heterozygous individuals were analyzed to determine the mutational and recombinogenic events that occurred in the cells. The results obtained from cell lines maintained in vitro indicated that the compound presents moderate cytotoxic potential, with selective cell growth inhibition for tumor cells, especially B16F10. Its main mechanism of action seems to be through the generation of EROs. [Cu(dox)(phen)]2+ significantly reduced the size of the tumor implanted in the animal model, suggesting great antitumor potential. [Cu(dox)(phen)]2+ is selectively cytotoxic to B16F10 and showed high in vivo chemotherapy potential against S180 sarcoma and Ehrlich's ascitic tumor. Regarding the mutagenic and recombinogenic effects it was verified that [Cu(dox)(phen)]2+ significantly increased the frequencies of mutant cells in both crossings of D. melanogaster, mainly by recombination. These data show that [Cu(dox)(phen)]2+ is a direct recombinogenic agent, independent of bioactivation. The results obtained indicate that [Cu(dox)(phen)]2+ is a promising candidate for the development of new chemotherapeutic drugs, once it has shown selective behavior for tumor cells and has satisfactory selectivity to cross the membrane and reach the DNA, its main target of action. Tese (Doutorado)

Substances with cytotoxic activity present in vaccines against the foot-and-mouth disease may interfere with methods used to detect residual live virus in the product or cause undesirable postvaccination reactions. This study describes a rapid in vitro test to detect cytotoxic activity in water-in-oil vaccines against foot-and-mouth disease using a commercial saponin as a cytotoxic agent and a solution of sheep’s red blood cells as substrate. Hemolytic and cytotoxic activity was analyzed using experimental and commercial vaccines prepared with and without saponin. The hemolytic and cytotoxic potential of preparations containing saponin was evident. In contrast, hemolytic and cytotoxic activities were not observed in vaccines without saponin in their composition. The method described here allows to easily detect if the vaccine under study has cytotoxic activity, making it possible to select the most appropriate method to process the sample to be used for the innocuity test. Additionally, due to undesirable effects that may be observed in animals receiving vaccines containing saponin in their formulation, the use of the rapid test described here allows to identify those vaccines with cytotoxic activity and to verify the presence of saponin on them, through the mass spectrometry method. RESUMO Substâncias com atividade citotóxica presentes em vacinas contra febre aftosa podem interferir com o método utilizado para a detecção de vírus ativo residual no produto ou causar reações pós-vacinais indesejáveis. O presente trabalho descreve uma prova rápida in vitro para detectar atividade citotóxica em vacinas oleosas contra febre aftosa utilizando uma saponina comercial como agente citotóxico e uma solução de hemácias de carneiro como substrato. Analisaram-se as atividades hemolítica e citotóxica utilizando-se vacinas experimentais e comerciais preparadas com e sem saponina. O potencial hemolítico e citotóxico dos preparados que continham saponina na sua formulação foi evidente. Em contraste, não se observou atividade hemolítica e citotóxica nas vacinas sem saponina. O método descrito permite conhecer rapidamente se a vacina em estudo apresenta atividade citotóxica e, dessa maneira, selecionar o método mais adequado para processar a amostra que será utilizada para investigar a presença de vírus ativo residual. Adicionalmente, devido aos efeitos indesejáveis que podem ser observados em animais que recebem vacinas que contêm saponina na sua formulação, o uso da prova rápida descrita permite selecionar aquelas vacinas com atividade citotóxica para posteriormente verificar a presença de saponina através de técnicas analíticas como a espectrometria de massas.

Stemodia maritima L., is a shrub of the Plantaginaceae family, with some biological activities already described, such as: larvicide, antimicrobial, and anti-inflammatory. Thus, the objective of this work was to evaluate the antioxidant, and gastroprotective activities of the ethyl acetate extract from S. maritima. The phytochemical profile was investigated through the quantification of total phenolic compounds, flavonoids, and CCD analysis. The toxicity of the extract was performed through cell viability using L929 line cell, and acute toxicity by the OECD Guide 423. The antioxidant activity was analyzed by the methods of reduction of the ferric ion (FRAP), total antioxidant activity (TAA), and the gastroprotective activity by the absolute ethanol-induced gastric ulcer model, with analysis of NO, MDA, GSH and MPO levels in the stomach tissues. In the phytochemical profile it was possible to identify the presence of flavonoids, triterpenes, steroids, mono, and sesquiterpenes. The extract was not cytotoxic against L929 lineage, maintaining cell viability above 70% at the doses tested, and in acute toxicity it did not show physiological changes indicative of toxicity compared to the control group. The extract presented antioxidant activity of 157.3 ± 9.7 mg equivalent of Trolox/g of extract in the FRAP method, and 50.0 ± 1.1 % by TAA. The ethyl acetate extract of S. maritima, at the doses tested, reduced the ulcerative lesion index compared to the injured control group, increased the levels of NO and GSH, and was able to decrease the concentrations of MDA and MPO, enhancing their gastroprotective activity. Stemodia maritima L., es un arbusto de la familia Plantaginaceae, con algunas actividades biológicas ya descritas, tales como: larvicidas, antimicrobianas y antiinflamatorias. Así que, el objetivo de este trabajo fue evaluar las actividades antioxidantes y gastroprotectoras del extracto de acetato de etilo de S. marítima. El perfil fitoquímico se investigó a través de la dosificación de compuestos fenólicos totales, flavonoides y análisis de CCD. La toxicidad del extracto se realizó a través de la viabilidad celular con L929 y toxicidad aguda utilizando la Guía 423 de la OCDE. La actividad antioxidante se analizó mediante los métodos de reducción del ion férrico (FRAP) y la actividad antioxidante total (AAT), y la actividad gastroprotectora por el modelo de úlcera gástrica inducida por etanol absoluto, con evaluación de niveles de NO, MDA, GSH y MPO de los tejidos estomacales. En el perfil fitoquímico fue posible identificar flavonoides, triterpenos, esteroides, mono y sesquiterpenos. El extracto no fue citotóxico contra el linaje L929, manteniendo la viabilidad celular por encima del 70% en las dosis probadas y en la toxicidad aguda no mostró cambios fisiológicos que indicaran toxicidad en comparación con el control. El extracto presentó una actividad antioxidante de 157,3 ± 9,74 mg equivalentes de Trolox/g de extracto en el método FRAP y 50,0 ± 1,1 % por AAT. El extracto de acetato de etilo de S. maritima, a las dosis probadas, redujo el índice de lesión ulcerosa en relación con el grupo control lesionado, aumentó los niveles de NO y GSH y fue capaz de disminuir las concentraciones de MDA y MPO, destacando su actividad gastroprotectora. Stemodia maritima L., é um arbusto da família Plantaginaceae, com algumas atividades biológicas já descritas, como: larvicida, antimicrobiana e anti-inflamatória. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades antioxidante e gastroprotetora do extrato acetato de etila de S. maritima. O perfil fitoquímico foi investigado através da dosagem de compostos fenólicos totais, flavonoides e análise por CCD. A toxicidade do extrato foi feita por meio da análise de viabilidade celular com linhagem L929 e a toxicidade aguda pelo Guia OECD 423. A atividade antioxidante foi analisada pelos métodos de redução do íon férrico (FRAP) e atividade antioxidante total (AAT), e a atividade gastroprotetora pelo modelo de úlcera gástrica induzida por etanol absoluto, com avaliação dos níveis de NO, MDA, GSH e MPO nos tecidos dos estômagos. No perfil fitoquímico foi possível identificar a presença de flavonoides, triterpenos, esteroides, mono e sesquiterpenos. O extrato não foi citotóxico frente à linhagem L929, mantendo a viabilidade celular acima de 70% nas doses testadas, e na toxicidade aguda não apresentou alterações fisiológicas indicativas de toxicidade em comparação com o grupo controle. O extrato apresentou atividade antioxidante de 157,3 ± 9,7 mg equivalente de Trolox/g de extrato no método de FRAP, e de 50,0 ± 1,1 % pelo AAT. O extrato acetato de etila de S. maritima, nas doses testadas, reduziu o índice de lesão ulcerativa em relação ao grupo controle lesionado, aumentou os níveis de NO e GSH e foi capaz de diminuir as concentrações de MDA e MPO, acentuando sua atividade gastroprotetora.

Bacteria of Streptomyces genus are a promising source of biologically active products, with applications in medicine, industry and agriculture. Therefore, the objective of this work was to evaluate the cytotoxic, antioxidant and antimicrobial activities of fermented rice extract and their semipurified fractions from Streptomyces spp. isolated of the rhizosphere of Paullinia cupana, Amazon-Brazil. For this, a bioguided study was carried out by the cytotoxic activity with methanolic extract of Streptomyces sp. ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) partitioned with n-hexane, ethyl acetate and 2-butanol. The antioxidant activity was analyzed using the DPPH, ABTS and phosphomolybdenum methods, while the antimicrobial activity was investigated by microdilution method to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against species of bacteria and yeast. In the cytotoxicity test, the butanolic phase (FbuOH-12H) presented IC50 of 1.1 µg/mL against MOLT-4, with cell death probably by apoptosis, but did not cause cytotoxicity on peripheral blood mononuclear cell (PBMC) or human erythrocytes. Chemical prospecting detected the presence of saponins and reducing sugars on 2-butanol fraction (FBuOH-12H), which can be related to cytotoxicity. On the antioxidant activity by ABTS, the partition with ethyl acetate (FAcOEt-12H) showed antioxidant capacity of 1161.7 ± 0.04 µM of Trolox/g of extract, indicating an expressive reactivity of the phase with this radical. The aqueous phases (from hexane, ethyl acetate and methanol extracts) were active in all tested microorganisms, except E. faecalis. Las bacterias del género Streptomyces son una fuente prometedora de productos biológicamente activos, con aplicaciones en medicina, industria y agricultura. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue evaluar las actividades citotóxicas, antioxidantes y antimicrobianas de los extractos y fracciones semipurificadas de Streptomyces spp. aislada de la rizósfera de Paullinia cupana, Amazonas-Brasil. Para ello, se realizó un estudio bioguiado de la actividad citotóxica con extracto metanólico de Streptomyces sp. El extracto ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) fue fraccionado con n-hexano, acetato de etilo y 2-butanol. La actividad antioxidante fue analizada a través de los métodos de DPPH, ABTS y fosfomolibdeno, mientras que la actividad antimicrobiana fue investigada por el método de microdilución para determinar la concentración minima inhibitoria (MIC) contra especies de bacterias y levaduras. En la prueba de citotoxicidad la fase butanólica (FbuOH-12H) presentó una IC50 de 1.1 µg/mL contra MOLT-4, con muerte celular probablemente por apoptosis, pero no causó citotoxicidad en las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) o en eritrocitos humanos, La prospección química detectó la presencia de saponinas y azúcares reductores en la fracción de 2-butanol (FBuOH-12H), que pueden estar relacionados con la citotoxicidad. Sobre la actividad antioxidante por ABTS, la fracción de acetato de etilo (FAcOEt-12H) mostró una capacidad antioxidante de 1161.7 ± 0.04 µM de Trolox/g de extracto, indicando una expresiva reactividad de la fase con este radical. Las fases acuosas (de los extractos de hexano, acetato de etilo y metanol) fueron activas en todos los microorganismos probados, excepto E. faecalis. As bactérias de gênero Streptomyces são fontes promissoras de produtos biologicamente ativos, com aplicações na medicina, indústria e agricultura. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades citotóxica, antioxidante e antimicrobiana do extrato fermentado em arroz e suas frações semipurificadas de Streptomyces spp. isolado da rizosfera de Paullinia cupana, Amazônia, Brasil. O estudo bioguiado foi realizado através da atividade citotóxica com o extrato metanólico de Streptomyces sp. ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) particionado com n-hexano, acetato de etila e 2-butanol. A atividade antioxidante foi analizada pelos métodos do DPPH, ABTS e fosfomilibidênio, enquanto que a atividade antimicrobiana foi feita pelo método da microdiluição para determinar a concentração inibitória minima (MIC) frente a espécies de bactérias e levedura. No teste de citotoxicidade, a fase butanólica (FbuOH-12H) apresentou IC50 de 1,1 µg/mL frente à linhagem MOLT-4, com morte celular provavelmente por apoptose, mas não causou citotoxicidade em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) nem em eritrócitos humanos. A prospecção fitoquímica detectou a presença de saponinas e açúcares redutores na fração 2-butanol (FBuOH-12H), e estes compostos podem estar relacionados à citotoxicidade. Na atividade antioxidante pelo ABTS, a partição com acetato de etila (FAcOEt-12H) apresentou capacidade antioxidante de 1161,7 ± 0,04 µM de Trolox/g do extrato, indicando uma expressiva reatividade da fase com este radical. A fase aquosa (dos extratos hexano, acetate de etila e metanol) foi ativa para todos os microrganismos testados, exceto E. faecalis.

Anthropogenic activities in tropical rivers favor the eutrophication process, which causes increased concentration of heavy metals. The presence and bioaccumulation of metals are directly related to the presence of genotoxic damage in aquatic organisms. Thus, we evaluated the presence of heavy metals (Fe, Zn, Cr, Cu and Al) and performed toxicogenetic tests in surface (S) and bottom (B) of water samples of the Poti river (Piaui/Brazil). Cytotoxicity and genotoxicity tests were performed in Allium cepa, and micronucleus (MN) and comet assay were performed in Oreochromis niloticus. The chemical analysis showed concentrations above the limit for Cu, Cr, Fe and Al according to Brazilian laws, characterizing anthropogenic disturbance in this aquatic environment. Toxicogenetic analysis presented significant cytotoxic, mutagenic and genotoxic effects in different exposure times and water layers (S and B), especially alterations in mitotic spindle defects, MN formations, nuclear bud and DNA strand breaks. Correlations between Fe and cytotoxicity, and Al and mutagenicity were statistically significant and point out to the participation of heavy metals in genotoxic damage. Therefore, Poti river water samples presented toxicogenetic effects on all bioindicators analyzed, which are most likely related to heavy metals pollution. As atividades antrópicas em rios tropicais favorecem o processo de eutrofização, que causa aumento da concentração de metais pesados. A presença e bioacumulação de metais estão diretamente relacionadas à presença de danos genotóxicos em organismos aquáticos. Assim, avaliamos a presença de metais pesados ​​(Fe, Zn, Cr, Cu e Al) e realizamos testes toxicogenéticos em amostras de superfície (S) e de fundo (B) de água do rio Poti (Piauí/Brasil). Testes de citotoxicidade e genotoxicidade foram realizados em Allium cepa, e micronúcleo (MN) e ensaio cometa foram realizados em Oreochromis niloticus. A análise química mostrou concentrações acima do limite para Cu, Cr, Fe e Al de acordo com a legislação brasileira, caracterizando perturbação antrópica neste ambiente aquático. A análise toxicogenética apresentou efeitos citotóxicos, mutagênicos e genotóxicos significativos em diferentes tempos de exposição e camadas de água (S e B), especialmente alterações nos defeitos do fuso mitótico, formações de MN, brotos nucleares e quebras de fitas de DNA. As correlações entre Fe e citotoxicidade, e Al e mutagenicidade foram estatisticamente significativas e apontam para a participação de metais pesados ​​nos danos genotóxicos. Portanto, as amostras de água do rio Poti apresentaram efeitos toxicogenéticos em todos os bioindicadores analisados, que provavelmente estão relacionados à poluição por metais pesados.

Introduction Light-cured resin cements are the first choice for the cementation of laminate veneers. Ideally, they should be biocompatible and offer minimum risks to patients. Objective The aim of this study was to evaluate, in vitro, the cytotoxicity of three resin cements: Variolink II, Ivoclar Vivadent (C1), Allcem Veneer, FGM (C2), and Rely X Veneer, 3M ESPE (C3). Material and method Twenty four samples of each of the cements were fabricated in a standardized metal mold, light activated, and transferred to a 96-well cell plate with culture of fibroblasts. After 24, 48, and 72h of incubation, cytotoxicity was assessed and cell viability was calculated by the methyl-thiazol-tetrazolium (MTT) colorimetric assay. Absorbance was measured at 570 nm using a microplate spectrophotometer. Result The following results were found: Variolink II presented viability of 72.24% (SD 6.80) after 24h, 83.92% (SD 5.26) after 48h, and 92.77% (SD 5.59) after 72h; Allcem Veneer exhibited viability of 70.46% (SD 12.91) after 24h, 85.03% (SD 21.4) after 48h, and 70.46% (SD 12.91) after 72h; Rely X Veneer showed viability of 5.06% (SD 0.88) after 24h, 5.84% (SD 1.18) after 48h, and 6.99% (SD 1.34) after 72h. Conclusion Under these testing conditions, Rely X Veneer presented significantly higher cytotoxicity compared with those of the other light-cured resin cements assessed. Resumo Introdução Cimentos resinosos fotopolimerizáveis são materiais de eleição para a cimentação de facetas laminadas. Devem ser biocompatíveis oferencendo riscos mínimos ao uso clínico em pacientes. Objetivo O objetivo desse trabalho foi avaliar in vitro a citotoxicidade de três cimentos resinosos: Variolink II (Ivoclar Vivadent), Allcem Veneer, (FGM) e Rely X Veneer (3M ESPE). Material e método Vinte e quatro corpos de prova de cada cimento foram confeccionados em matrizes metálicas padronizadas e inseridos em placa de cultura de células de noventa e seis poços contendo fibroblastos da linhagem 3T3. As células foram cultivadas em meio de cultivo celular RPMI 1640 com 5% de soro fetal bovino, com 0,1% de penicilina/estreptomicina em estufa a 37◦C, em atmosfera úmida com 5% de CO2. O grau de citotoxicidade de cada cimento foi avaliado após os tempos de contato de 24h, 48h e 72h através do método MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5- difenil brometo de tetrazolina), que avalia a viabilidade celular pela função mitocondrial. Após os tempos estabelecidos, as amostras foram removidas, tratadas e levadas ao espectofotômetro de microplaca para leitura da absorbância em 570nm. Resultado O cimento Variolink apresentou em 24h viabilidade de 72,24% (±6,80), em 48h de 83,92% (± 5,26) e de 92,77% (±5,59) em 72h. Allcem Veneer apresentou viabilidade de 70,46% (± 12,91) em 24h; 85,03% (± 21,4) em 48h e 70,46% (± 12,91) em 72h. O RelyX Veneer demonstrou viabilidade de 5,06% (± 0,88) em 24h; 5,84% (± 1,18) em 48h e 6,99% (± 1,34) em 72h. Conclusão Estes resultados demonstraram que o cimento Rely-X se apresentou significativamente mais citotóxico nas condições testadas.

Vernonanthura polyanthes, popularly known as assa-peixe, is a medicinal plant that has been widely used by Brazilian Cerrado population for treatment of diseases without a detailed evaluation of their effectiveness, toxicity, and proper dosage. Thus, more studies investigating the safety of V. polyanthes aqueous extract before the use are needed. The purpose of this study was to evaluate the toxicity, cytotoxicity and genotoxicity of V. polyanthes leaves aqueous extract using the Artemia salina and Allium cepa assays. For the A. salina assay, three groups of 10 larvae were exposed to V. polyanthes leaves aqueous extract at the concentrations of 5, 10, 20, 40, and 80 mg/ml. For the A. cepa assay, 5 onion bulbs were exposed to V. polyanthes leaves aqueous extract at 10, 20, and 40 mg/ml, and then submitted to macroscopic and microscopic analysis. As result it was identified a toxicity and cytotoxicity of V. polyanthes dependent on the extract concentration. The A. salina assay suggests that the concentration of 24 mg/ml of the V. polyanthes extract is able to kill 50% of naupllis; while the A. cepa assay suggests that V. polyanthes leaves aqueous extract is toxic at concentrations higher than 20 mg/ml; however the cytotoxic effect in A. cepa root cells was observed at 40 mg/ml of the extract. It is important to say that the V. polyanthes leaves aqueous extract concentration commonly used in popular medicine is 20 mg/ml. Thus, the popular concentration used is very close to toxicity limit in A. salina model (24 mg/ml) and is the concentration which showed toxic effect in A. cepa root cells (20 mg/ml). No genotoxic activity of V. polyantes leaves aqueous extract was observed in the conditions used in this study. Because of the antiproliferative action and no genotoxic activity, V. polyanthes leaves aqueous extract may present compounds with potential use for human medicine. However more detailed studies need to be performed to confirm this potential. Resumo Vernonanthura polyanthes, popularmente conhecida como assa-peixe, é uma planta medicinal amplamente utilizada pela população brasileira do Cerrado para o tratamento doenças, sem uma avaliação detalhada de sua eficácia, toxicidade e dosagem adequada. Dessa forma, são necessários estudos para investigar a segurança do uso do extrato aquoso de V. polyanthes. O objetivo deste estudo foi avaliar a toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade do extrato aquoso de folhas de V. polyanthes utilizando os ensaios de Artemia salina e Allium cepa. Para o ensaio de A. salina, três grupos de 10 larvas foram expostos ao extrato aquoso de folhas de V. polyanthes nas concentrações de 5, 10, 20, 40 e 80 mg/ml. Para o ensaio de A. cepa, 5 bulbos de cebola foram expostas ao extrato aquoso de folhas de V. polyanthes nas concentrações de 10, 20 e 40 mg/ml, e então submetidos a análise macroscópica e microscópica. O ensaio de A. salina sugere que a concentração de 24 mg/ml do extrato de V. polyanthes é capaz de matar 50% dos náuplios; enquanto o ensaio de A. cepa sugere que o extrato aquoso das folhas de V. polyanthes é tóxico em concentrações superiores a 20 mg/ml. O efeito citotóxico nas células da raiz de A. cepa foi observado apenas na concentração de 40 mg/ml. É importante dizer que a concentração de extrato aquoso de folhas de V. polyanthes comumente usada na medicina popular é de 20 mg/ml. Assim, a concentração popular utilizada está muito próxima do limite de toxicidade no modelo de A. salina (24 mg/ml) e é a mesma concentração que apresentou efeito tóxico nas células da raiz de A. cepa (20 mg/ml). Não foi observada atividade genotóxica do extrato aquoso de folhas de V. polyantes nas condições utilizadas neste trabalho. Por causa da ação antiproliferativa e ausência de atividade genotóxica, o extrato aquoso de folhas de V. polyanthes pode ser uma boa fonte natural de compostos antitumorais e pode apresentar potencial para uso na medicina. No entanto, estudos mais detalhados precisam ser realizados para confirmar esse potencial.

O veneno de abelha (VA) ou apitoxina é um produto apícola que tem sido utilizado desde os tempos ancestrais para múltiplas finalidades, nomeadamente em medicina tradicional na apiterapia. Trata-se de uma mistura complexa de substâncias que lhe conferem propriedades bioativas. No presente trabalho, analisaram-se cinco amostras de VA obtidas a partir de Apis mellifera iberiensis de dois apiários diferentes (Aveleda e Milhão, na região de Bragança). Foram, caracterizadas quimicamente e avaliadas quanto às suas propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e citotóxicas. A análise das amostras por LC-DAD-ESI/MSn demonstrou que a melitina (MEL) era o composto maioritário, seguido da fosfolipase A2 (PLA2) e da apamina (APA). Todas as amostras demonstraram atividade antioxidante, medida pela capacidade captadora de radicais livres, poder redutor e inibição da peroxidação lipídica, e anti-inflamatória, determinada pela capacidade de diminuir a formação de NO em macrófagos de rato (RAW 264,7). No entanto, não foi observada uma relação direta entre as propriedades bioativas mencionadas e o perfil químico (qualitativo ou quantitativo) das amostras. Os resultados obtidos evidenciam, sim, que existem concentrações específicas, nas quais estes compostos são mais ativos (e.g., presentes na única amostra obtida no apiário de Aveleda). As amostras de VA demonstraram também propriedades citototóxicas semelhantes para todas as linhas celulares tumorais testadas (MCF-7, NCI-H460, HeLa e HepG2), sendo as linhas MCF-7 (carcinoma de mama) e HeLa (carcinoma cervical) as mais suscetíveis. Apesar disso, as amostras estudadas parecem não ser adequadas para o tratamento de carcinoma de mama, hepatocelular e cervical porque, nas concentrações ativas, as amostras também foram tóxicas para células não tumorais (cultura primária de células de fígado de porco, PLP2). Relativamente ao carcinoma do pulmão, o VA deve ser utilizado abaixo da concentração tóxica para as células não tumorais. Em geral, o presente estudo evidenciou o enorme potencial bioativo do VA, sendo o primeiro trabalho realizado com amostras Portuguesas., Revista de Ciências Agrárias, vol. 40 n.º spe (2017)

The objective of this study was to evaluate the action of Hymenaea stigonocarpa bark hydroalcoholic extract against a mutagenic compound using A. cepa meristematic root cells as a test system. The treatment groups were: Negative Control (NC) – distilled water; Positive Control (PC) – paracetamol at a concentration of 0.008 mg/mL, Jatoba Control (JC) – aqueous fraction jatobá-do-cerrado at 0.5 or 1.0 or 1.5 mg/mL, and Simultaneous Treatment (ST) - jatobá-do-cerrado aqueous fraction at a concentration of 0.5 or 1.0 or 1.5 mg/mL associated with paracetamol solution at a concentration of 0.008 mg/mL. All groups were analyzed at 24 and 48 h. Five onion bulbs (five replications) were used for each treatment group. The root tips were fixed in Carnoy and slides prepared by the crush technique. Cells were analyzed throughout the cell cycle, totaling 5,000 for each treatment group at each exposure time. Mitotic indices were subjected to statistical analysis using the chi-square test (p

O osteossarcoma canino é o tumor ósseo mais comum em cães. Ele apresenta intensa capacidade metastásica e a sobrevida do paciente é baixa nessa doença. A curcumina, o composto mais importante derivado da planta Curcuma longa L., tem sido amplamente estudada e mostrou efeitos antineoplásicos consideráveis contra vários tumores. Este estudo tem por objetivo identificar a ativação de proteínas específicas de vias de apoptose, sobrevivência tumoral e mau prognóstico dessa doença em células OSC da linhagem D-17. Para isso, as células foram cultivadas e tratadas com a curcumina nas concentrações de 20μM, 50 μM e 100 μM em lâminas, que foram preparadas e fixadas. Posteriormente, foi realizada a técnica de imucitoquímica, com os anticorpos anti-caspase3, anti-JNK, anti-AMPK, anti-p53, anti-AKT e anti-mTOR. Foi observado que a curcumina ativou em células de osteossarcoma canino in vitro as proteínas de morte celular caspase-3, JNK e AMPK, reduziu a expressão da proteína p53 mutada e não alterou as proteínas AKT e mTOR. Assim, verificou-se que a curcumina promove apoptose extrínseca mediada por caspase, JNK e cAMP/AMPK em células de osteossarcoma canino. Além disso, tem o potencial de melhorar o prognóstico tumoral dessa doença por inativação da p53 mutada. No entanto, ela não interfere na expressão de AKT/mTOR, relacionado a proliferação e sobrevivência tumoral. Tais resultados servirão de base para estudos futuros que analisem o efeito da curcumina in vivo nessa doença.

The goal of this study was to analyze cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to bone marrow cells of mice of nature identical synthetic flavorings, passion fruit and strawberry, and artificial synthetic flavorings, vanilla, chocolate, tutti-frutti and cookie, at doses 0.5; 1.0; 2.0; 5.0 and 10.0 mL/kg. The additives were given to the animals by gavage in a single daily application for seven days. Data were subjected to analysis of variance (ANOVA) followed by post Tukey’s post hoc test, p

Hyposalivation and dental root exposure in the elderly are problems that require special oral care. In this context, the characteristics of certain toothpastes are of particular importance. Thus, the aim of this study was to evaluate the cytotoxicity and dentin wear caused by seven different toothpastes. For dentin wear analysis, 40 root dentin specimens were submitted to 20,000 brushing cycles with the different toothpastes and distilled water (control group-CG), using a brushing machine. Dentin surface loss (SL) was measured by contact profilometer. The cytotoxicity of each toothpaste was tested using cultured fibroblasts submitted to a cell-culture-conditioned medium. Fresh medium served as the control. Cell viability was assessed by MTT assay after 24 h of contact with the conditioned media. The data were analyzed statistically by ANOVA, followed by Tukey’s test (p < 0.05). The SL of the CG was minimal and significantly lower than that of the Oral B Pro Health (OBPH) group (p < 0.05). All other groups presented SL in between that of the CG and the Oral B Pro Health OBPH group, except for the Sensodyne (SEN) group, which presented SL similar to that of CG (p = 0.05). The SEN group presented a percentage of viable cells similar to that of CG: between 60-89%. All the other toothpastes showed high cytotoxicity, with cell viability less than 50% of the CG. Considering study limitations, we concluded that only one of the seven tested toothpastes exhibited the most desirable toothpaste characteristics for the worldwide growing elderly population (e.g. low cytotoxicity and low-abrasive potential).

A number of studies has shown that antioxidants, fatty acids and trace minerals may modulate different immune cell activities, and that their deficiency may be associated with diseases and impaired immune responses. In innate immunity, natural killer (NK) cells have a central role, killing virally infected and cancerous cells, and also secreting cytokines that shape adaptive immune responses. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of enriched diets in selenium plus vitamin E and/or canola oil on complete blood count and on NK cell cytotoxicity from blood lymphocytes of Nellore bulls. Bulls that received selenium plus vitamin E had (P=0.0091) higher NK cell cytotoxicity than control bulls. This result positively correlated with serum selenium levels. To the best of our knowledge, this is the first study that showed immunostimulatory effects of selenium plus vitamin E on NK cell cytotoxicity of Nellore bulls. Vários estudos demonstraram que antioxidantes, ácidos graxos e minerais podem modular a atividade de diferentes células do sistema imunológico e que as suas carências podem estar associadas a doenças e a respostas imunes comprometidas. Na imunidade inata, os linfócitos natural killer (NK) têm um papel central matando células infectadas por vírus e células cancerígenas, ao mesmo tempo em que também secretam citocinas que modulam as respostas imunes adaptativas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de dietas enriquecidas em selênio e vitamina E e/ou óleo de canola no hemograma e na citotoxicidade das células NK do sangue de bovinos da raça Nelore. Os animais que receberam selênio e vitamina E tiveram (P = 0,0091) maior citotoxicidade das células NK do que os animais do grupo controle. Este resultado foi positivamente correlacionado com os níveis de selênio no sangue. Para o melhor do nosso conhecimento, este é o primeiro estudo que mostrou efeitos imunoestimulatórios do selênio e vitamina E sobre a citotoxicidade das células NK de bovinos Nelore.

Aniba riparia (Lauraceae) is an important medicinal plant found in the Amazon region and presents alkaloids of the type alkamide known as riparins. Riparin A is structurally represented as the fundamental core of all Amazon riparins. This work aimed to assess the in vitro antioxidant, antitumor and antileishmanial effects of riparin A. Riparin A presented weak antioxidant capacity by tecniques of DPPH• (EC50 of 296.2 μg mL-1) and ABTS•+ (EC50 of 450.1 μg mL-1), showed moderate activity against colon carcinoma (HCT-116: IC50 of 21.7 μg mL-1) and leishmanicidal activity on promastigotes of L. amazonensis (IC50 of 307.0 ± 79.6, 193.7 ± 44.3 and 81.8 ± 11.2 μg mL-1, respectively, after 24, 48 and 72 h of incubation). Then, in addition to its structural simplicity, riparin A revealed promising biological activities and remarkable in vitro leishmanicidal action, an important result in epidemiological point of view to control leishmaniasis in Brazil, including in the Amazon region. RESUMO Aniba riparia (Lauraceae) é uma importante planta medicinal encontrada na região amazônica que apresenta alcaloides do tipo alcamida e conhecidos como riparinas. Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos antioxidantes, antitumorais e leishmanicidas in vitro da riparina A. Riparina A apresentou fraca capacidade antioxidante pelas técnicas do DPPH• (CE50 de 296,2 μg mL-1) e ABTS•+ (CE50 de 450,1 μg mL-1), mostrou moderada atividade contra carcinoma de cólon (HCT-116: CI50 de 21,7 μg mL-1) e atividade leishmanicida sobre formas promastigotas de Leishmania amazonensis (CI50 de 307,0 ± 79,6; 193,7 ± 44,3 e 81,8 ± 11,2 μg mL-1, respectivamente, após 24, 48 e 72 h de incubação). Assim, além de sua simplicidade estrutural, a riparina A revelou atividades biológicas promissoras e significativa ação leishmanicida in vitro, resultado importante diante da relevância epidemiológica para controle da leishmaniose no Brasil, inclusive na região amazônica.

Mesenchymal stem cells (MSCs) are known for their important properties involving multilineage differentiation potential., trophic factor secretion and localization along various organs and tissues. On the dark side, MSCs play a distinguished role in tumor microenvironments by differentiating into tumor-associated fibroblasts or supporting tumor growth via distinct mechanisms. Cisplatin (CIS) is a drug widely applied in the treatment of a large number of cancers and is known for its cytotoxic and genotoxic effects, both in vitro and in vivo. Here we assessed the effects of CIS on MSCs and the ovarian cancer cell line OVCAR-3, by MTT and comet assays. Our results demonstrated the resistance of MSCs to cell death and DNA damage induction by CIS, which was not observed when OVCAR-3 cells were exposed to this drug.

Liquid-Crystalline Systems represent active compounds delivery systems that may be able to overcome the physical barrier of the skin, especially represented by the stratum corneum. To obtain these systems, aqueous and oily components are used with surfactants. Of the different association structures in such systems, the liquid-crystalline offer numerous advantages to a topical product. This manuscript presents the development of liquid-crystalline systems consisting, in which the oil component is olive oil, its rheological characterizations, and the location of liquid crystals in its phase map. Cytotoxic effects were evaluated using J-774 mouse macrophages as the cellular model. A phase diagram to mix three components with different proportions was constructed. Two liquid crystalline areas were found with olive oil in different regions in the ternary diagram with two nonionic surfactants, called SLC1 (S1) and SLC2 (S2). These systems showed lamellar liquid crystals that remained stable during the entire analysis time. The systems were also characterized rheologically with pseudoplastic behavior without thixotropy. The texture and bioadhesion assays showed that formulations were similar statistically (p < 0.05), indicating that the increased amount of water in S2 did not interfere with the bioadhesive properties of the systems. In vitro cytotoxic assays showed that formulations did not present cytotoxicity. Olive oil-based systems may be a promising platform for skin delivery of drugs. RESUMO Os cristais líquidos representam um sistema de liberação de substâncias ativas capazes de vencer a barreira cutânea, representada especialmente pelo estrato córneo. Água, óleo e tensoativos são misturados para se obter esses sistemas. Diferentes estruturas podem ser formadas nesses sistemas, as quais oferecem muitas vantagens para os produtos de uso tópico. Esse trabalho visou ao desenvolvimento de sistemas líquido-cristalinos preparados com óleo de oliva, sua caracterização reológica e a identificação das fases cristalinas no diagrama ternário. Efeitos citotóxicos foram avaliados usando células de rato como modelo celular. Construiu-se um diagrama de fases que mistura três componentes em diferentes proporções. Duas áreas de cristal líquido, denominadas SLC1 (S1) e SLC2 (S2), foram encontradas com óleo de oliva em diferentes regiões no diagrama ternário preparado com dois diferentes tensoativos não-iônicos. Esses sistemas mostraram fase cristalina lamelar, que permaneceu estável durante o tempo estudado. Os sistemas foram também caracterizados reologicamente e apresentaram comportamento pseudoplástico com tixotropia. Os ensaios de textura e bioadesão mostraram que as formulações foram similares (p < 0.05), indicando que o aumento da quantidade de água em S2 não interferiu nas propriedades bioadesivas dos sistemas. Os ensaios de citotoxicidade mostraram que as formulações não foram citotóxicas. Sistemas à base de óleo de oliva são interessantes para a liberação de fármacos na pele.

The mouth and oropharynx cancer is the 6th most common type of cancer in the world. The treatment may involve surgery, chemotherapy and radiotherapy. More than 50% of drugs against cancer were isolated from natural sources, such as Catharanthus roseus and epipodophyllotoxin, isolated from Podophyllum. The biggest challenge is to maximize the control of the disease, while minimizing morbidity and toxicity to the surrounding normal tissues. The Erythroxylum suberosum is a common plant in the Brazilian Cerrado biome and is popularly known as "cabelo-de-negro". The objective of this study was to evaluate the cytotoxic activity of Erythroxylum suberosum plant extracts of the Brazilian Cerrado biome associated with radiotherapy in human cell lines of oral and hypopharynx carcinomas. Cells were treated with aqueous, ethanolic and hexanic extracts of Erythroxylum suberosum and irradiated at 4 Gy, 6 Gy and 8 Gy. Cytotoxicity was evaluated by MTT assay and the absorbance was measured at 570 nm in a Beckman Counter reader. Cisplatin, standard chemotherapy, was used as positive control. The use of Erythroxylum suberosum extracts showed a possible radiosensitizing effect in vitro for head and neck cancer. The cytotoxicity effect in the cell lines was not selective and it is very similar to the effect of standard chemotherapy. The aqueous extract of Erythroxylum suberosum, combined with radiotherapy was the most cytotoxic extract to oral and hypopharynx carcinomas. Resumo O câncer de boca e de orofaringe emerge como o 6º tipo de câncer mais comum no mundo. O tratamento pode envolver cirurgia, quimioterapia e radioterapia. Mais de 50% das drogas com atividade de combate ao câncer foram isoladas de fontes naturais, tais como a Catharanthus roseus e a epipodofilotoxina, isolada de Podophyllum. O maior desafio é maximizar o controle da doença, enquanto minimiza a morbidade e toxicidade para os tecidos normais circundantes. O Erythroxylum suberosum é uma planta comum no bioma Cerrado brasileiro e é popularmente conhecida como "cabelo-de-negro". O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade dos extratos da planta Erythroxylum suberosum do bioma Cerrado brasileiro, associados à radioterapia em linhagens celulares humanas de carcinomas de língua e de hipofaringe. As células foram tratadas com os extratos aquoso, etanólico e hexânico do Erythroxylum suberosum e irradiadas com 4 Gy, 6 Gy e 8 Gy. A citotoxidade foi avaliada pelo ensaio de MTT e a absorvância foi medida a 570 nm em uma leitora Beckman. A cisplatina, quimioterápico padrão, foi utilizada como controle positivo. O uso de extratos de Erythroxylum suberosum mostrou potencial efeito radiosensibilizante in vitro no câncer de cabeça e pescoço. O efeito da citotoxicidade nas linhagens foi de forma não seletiva e muito semelhante ao efeito da quimioterapia padrão. O extrato aquoso de Erythroxylum suberosum, combinado com radioterapia, foi o extrato mais citotóxico para os carcinomas de língua e hipofaringe, associados à radioterapia.

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:26:15Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:47:27Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-84859494413.pdf: 157067 bytes, checksum: d670e87351aa7fd9ddc270543eedb525 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:26:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-01 The aim of the present study was to investigate a cytotoxic oxidative cell stress related and the antioxidant profile of kaempferol, quercetin, and isoquercitrin. The flavonol compounds were able to act as scavengers of superoxide anion (but not hydrogen peroxide), hypochlorous acid, chloramine and nitric oxide. Although flavonoids are widely described as antioxidants and this activity is generally related to beneficial effects on human health, here we show important cytotoxic actions of three well known flavonoids. They were able to promote hemolysis which one was exacerbated on the presence of hypochlorous acid but not by AAPH radical. Therefore, despite they expected scavenger action over free radicals an oxidants, these compounds could be very lesive to living organisms by acting over erythrocytes and maybe other cellular types. UEPG Paraná State University of Ponta Grossa Graduate Program in Pharmaceutical Sciences, General Carlos Cavalcanti Avenue, 4748, Uvaranas, Ponta Grossa-PR, 84030-900 Biochemistry and Tecnology Chemistry Department Chemistry Institute São Paulo State University, Araraquara-SP Organic Chemistry Department Chemistry Institute São Paulo State University, Araraquara-SP UNICENTRO Pharmacy Department, Guarapuava-PR IFG Goiás Federal Institute, Formosa-GO Biochemistry and Tecnology Chemistry Department Chemistry Institute São Paulo State University, Araraquara-SP Organic Chemistry Department Chemistry Institute São Paulo State University, Araraquara-SP

Thirty-six plant extracts from the brazilian Atlantic Forest were tested for their antimycobacterial activity against Mycobacterium tuberculosis H37Rv and M. kansasii, using the method REMA in seriate concentrations of 100 to 0.20 µg/mL. Among the thirty six extracts tested, five were active against M. tuberculosis, and three of these extracts also showed activity against M. kansasii. Cytotoxicity test with VERO cells was performed with the five extracts active against M. tuberculosis. Only the extract of Peschiera affinis was identified as non-toxic in the concentration of 100µg/mL. Trinta e seis extratos vegetais originários da Mata Atlântica foram testados quanto à sua atividade antimicobacteriana frente ao M. tuberculosis H37Rv e M. kansasii, utilizando o método REMA em concentrações seriadas de 100 a 0,20 µg/mL. Dentre os trinta e seis extratos testados, cinco mostraram atividade frente ao M. tuberculosis, e destes apenas, três mostraram atividade ao M. kansasii, que apresentou susceptibilidade a outros dez. O teste de citotoxicidade com células VERO foi realizado com os cinco extratos ativos frente ao M. tuberculosis em que identificou-se a não toxicidade em apenas um extrato (Peschiera affinis) na concentração de 100 µg/mL.

Twenty species of marine invertebrates from the Brazilian coast were screened for hemagglutinating/hemolytic activity. In at least twelve tested species, hemagglutinating activity was different for different blood types, suggesting the presence of lectins. Extracts from four species showed hemolytic activity. Two new lectins were purified from the marine sponge Cliona varians (CvL-2) and sea cucumber Holothuria grisea (HGL). CvL-2 was able to agglutinate rabbit erythrocytes and was inhibited by galactosides. The hemagglutinating activity was optimal in pH neutral and temperatures below 70 °C. CvL-2 is a trimeric protein with subunits of 175 kDa. On the other hand, HGL showed both hemagglutinating and hemolytic activity in human and rabbit erythrocytes, but hemolysis could be inhibited by osmotic protection, and agglutination was inhibited by mucin. HGL was stable in pH values ranging from 4 to 10 and temperatures up to 90 °C. In electrophoresis and gel filtration, HGL was a monomeric protein with 15 kDa. CvL-2 and HGL showed different levels of toxicity to Artemia naplii. CvL-2 showed LC50 of 850.1 μg/mL, whereas HGL showed LC50 of 9.5 µg/mL. Vinte espécies de invertebrados marinhos, coletados na costa brasileira, foram avaliados quanto à presença de atividade hemaglutinante/hemolítica. Em pelo menos doze espécies testadas, a atividade hemaglutinante foi diferencial para diferentes grupos sanguíneos, sugerindo a presença de lectinas. Extratos de quatro espécies apresentaram atividade hemolítica. Duas novas lectinas foram purificadas da esponja marinha Cliona varians (CvL-2) e do pepino-domar Holothuria grisea (HGL). CvL-2 foi capaz de aglutinar eritrócitos de coelho e foi inibida por galactosídeos. A atividade hemaglutinante foi estável em pH neutro e temperaturas abaixo de 70 °C. CvL-2 é uma proteína trímero com subunidades de 175 kDa. Por outro lado, HGL apresentou atividade hemaglutinante e hemolítica em eritrócitos humanos e de coelho, mas a hemólise pôde ser inibida por proteção osmótica, enquanto que a aglutinação foi inibida por mucina. HGL mostrou-se estável em valores de pH de 4-10 e temperaturas até 90 °C. Em eletroforeses e gel filtração, HGL foi uma proteína monômero de 15 kDa. CvL-2 e HGL mostraram diferentes níveis de toxicidade contra náuplios de Artemia. CvL-2 apresentou LC50 de 850,1 μg/mL, enquanto que HGL apresentou LC50 de 9,5 μg/mL.

Background: Local anesthetics (LAs) are generally considered as safe, but cytotoxicity has been reported for several local anesthetics used in humans, which is not well investigated. In the present study, the cytotoxicity of lidocaine, ropivacaine and the combination of lidocaine and ropivacaine were evaluated on human melanoma cell lines. Melphalan, a nitrogen mustard alkylating agent, was used as a control agent for comparison of cytotoxic activity. Methods: Melanoma cell lines, A375 and Hs294T, were exposed to 1 h to different concentrations of above agents. Cell-viability after exposure was determined by flow cytometry. Results: Investigated LAs showed detrimental cytotoxicity on studied melanoma cell lines in time- (p

Eleven phthalimide derivatives were evaluated with regards to their antiproliferative activity on tumor and normal cells and possible toxic effects. Cytotoxic analyses were performed against murine tumors (Sarcoma 180 and B-16/F-10 cells) and peripheral blood mononuclear cells (PBMC) using MTT and Alamar Blue assays. Following, the investigation of cytotoxicity was executed by flow cytometry analysis and antitumoral and toxicological potential by in vivo techniques. The molecules 3b, 3c, 4 and 5 revealed in vitro cytotoxicity against Sarcoma 180, B-16/F-10 and PBMC. Since compound 4 was the most effective derivative, it was chosen to detail the mechanism of action after 24, 48 and 72 h exposure (22.5 and 45 µM). Sarcoma 180 cells treated with compound 4 showed membrane disruption, DNA fragmentation and mitochondrial depolarization in a time- and dose-dependent way. Compounds 3c, 4 and 5 (50 mg/kg/day) did not inhibit in vivotumor growth. Compound 4-treated animals exhibited an increase in total leukocytes, lymphocytes and spleen relative weight, a decreasing in neutrophils and hyperplasia of spleen white pulp. Treated animals presented reversible histological changes. Molecule 4 had in vitro antiproliferative action possibly triggered by apoptosis, reversible toxic effects on kidneys, spleen and livers and exhibited immunostimulant properties that can be explored to attack neoplasic cells. Onze derivados da ftalimida foram avaliados quanto a sua atividade antiproliferativa em células tumorais e normais e possíveis efeitos tóxicos. Avaliou-se a citotoxicidade contra tumores murinos (células de Sarcoma 180 e B-16/F-10) e células mononucleares do sangue perférico (CMSP) usando os ensaios de MTT e Alamar Blue. Em seguida, a investigação de citotoxicidade foi executada por citometria de fluxo e potencial antitumoral e toxicológico por meio de métodos in vivo. As moléculas 3b, 3c, 4 e 5 revelaram citotoxicidade in vitro contra Sarcoma 180, B-16/F-10 e PBMC. Uma vez que o composto 4 foi o derivado mais efetivo, ele foi escolhido para detalhar o mecanismo de ação após 24, 48 e 72h de exposição (22.5 e 45 µM). Células de Sarcoma 180 tratadas com o composto 4 mostraram desintegração de membrana, fragmentação de DNA e despolarização mitocondrial de maneira tempo e concentracão dependente. Os compostos 3c, 4 e 5 (50 mg/kg/dia) não inibiu o crescimento tumoral in vivo. Os animals tratados com o composto 4 exibiram aumento do total de leucócitos, linfócitos e no peso relativo do baço, diminuição de neutrófilos e hiperplasia da polpa branca esplênica. Os animais tratados apresentaram alterações histológicas reversíveis. A molécula 4 tem ação antiproliferativa in vitro provavelmente por ativação de apoptose, efeitos tóxicos reversíveis e exibiu propriedades imunoestimulantes que podem ser exploradas para atacar células neoplásicas.

The Guandu River is the main source of water supply for the metropolitan region of Rio de Janeiro and has been facing serious environmental problems due to increasing population and industrial pollution, as well as the presence of polluted tributaries. This study analyzed the cytotoxic and genotoxic potential of the Guandu River's waters, through the use of the Allium cepa test system. Collection points were chosen at the greatest confluences of pollutant sources. The sampling included two different seasons: the rainy season (January and February) and the dry season (June and July). The analyses of 5000 cells per treatment showed that all the points studied had some degree of cytotoxicity and/or genotoxicity. Two sampling locations, which receive major influxes from the polluted waters of the Poços/Queimados and Cabuçu/Ipiranga Rivers, stood out for the strong presence of micronuclei, sticky chromosomes, mitotic spindle abnormalities, necrotic cells and nucleolar changes compared to the negative control. At least two locations also found changes in the mitotic index. The existence of variations in the number of cytotoxic and genotoxic changes between periods of rain and drought indicates that the cytotoxic and genotoxic potential of the water pollutants varies according to time, depending on the discharges of the tributary rivers and the increase of contaminated effluents. The results highlight the importance of bio-monitoring to assist managers in the control of effluent discharge. O Rio Guandu é a principal fonte de água para abastecimento da região metropolitana do Rio de Janeiro e enfrenta sérios problemas ambientais devido à crescente poluição tanto de origem populacional quanto industrial acentuada pela presença de afluentes com águas poluídas. Este trabalho teve por objetivo analisar o potencial citotóxico e genotóxico das águas do Rio Guandu, utilizando para isto o sistema teste de Allium cepa. Foram escolhidos pontos de coleta nos quais ocorrem as maiores confluências de fontes poluidoras. As coletas foram realizadas em duas épocas distintas: na estação chuvosa (Janeiro e Fevereiro) e na estação de estiagem (Junho e Julho). As análises realizadas em 5000 células por tratamento demonstraram que todos os pontos estudados apresentaram algum nível de citotoxicidade e ou genotoxicidade. Dois locais de coleta, os quais recebem maiores influências das águas poluídas dos rios Poços/Queimados e Cabuçu/Ipiranga, se destacaram quanto à presença acentuada de micronúcleos, aderência cromossômica, anormalidades no fuso mitótico, células em necrose e alterações nucleolares em relação ao controle negativo. Foram encontradas também alterações no índice mitótico em pelo menos dois locais. A existência de variações no número de alterações citotóxicas e genotóxicas entre os períodos chuvosos e de seca indicam que o potencial citotóxico e ou genotóxico dos poluentes na água variam em função do tempo, dependendo das descargas vindas dos afluentes e do aumento na emissão de efluentes contaminados. Estes resultados ressaltam a importância de estudos de biomonitoramento que auxiliem as ações de manejo visando o controle do lançamento de efluentes.

Ethnobotanical surveys of Cerrado native plants show that leaves of Celtis iguanaea (Jacq.) Sargent (Cannabaceae), popularly known in Brazil as “esporão de galo”, are used in folk medicine for body pain, asthma, cramps, poor digestion, urinary infection, kidney dysfunctions, as well as a stimulant and diuretic. This work aimed at evaluating possible C. iguanaea aqueous leaf extract (CALE) cytotoxicity, genotoxicity, and antigenotoxicity using the mouse bone marrow micronucleous test. To assess CALE genotoxicity, Swiss mice were orally treated with three different extract concentrations (100, 300, and 500 mgkg−1). To evaluate its antigenotoxicity, the same doses were used simultaneously with a single i.p. dose of mitomycin C (MMC, 4mg.kg−1). The frequencies of micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCE) were evaluated 24 h and 48 h after administration except for the negative control (24 h). Genotoxicity was evaluated using the frequency of micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCE), whereas cytotoxicity was assessed by the polychromatic and normochromatic erythrocytes ratio (PCE/NCE). The results showed that CALE did not exhibit a significant reduction in the PCE/NCE ratio, neither a considerable increase in the frequency of MNPCE. Nonetheless, CALE reduced bone marrow toxicity (increased PCE/NCE ratio) and decreased the micronuclei frequency induced by MMC. We can conclude that CALE presented no cytotoxic and genotoxic effects, but showed antigenotoxic and anticytotoxic actions under the experimental conditions applied in this study. Levantamentos etnobotânicos de plantas nativas do cerrado evidenciam que as folhas de Celtis iguanaea (Jacq.) Sargent (Cannabaceae), popularmente conhecidas como “esporão-de-galo” são usadas na medicina popular para dores no corpo, asma, cólicas, má-digestão, infecções urinárias, disfunções renais, como estimulante ou como diurético. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as possíveis atividades citotóxica, genotóxica e antigenotóxica do extrato aquoso das folhas de C. Iguanaea (CALE) através do teste do micronúcleo em medula óssea de camundongos. Para avaliar a genotoxicidade de CALE, os camundongos foram tratados por via oral com três diferentes concentrações de extrato (100, 300 e 500 mg.kg−1). Para a investigação da atividade antigenotóxica, foram utilizadas as mesmas doses concomitantemente a uma única dose i.p. de Mitomicina C (MMC, 4mg.kg−1). Com exceção do controle negativo (apenas 24h), todas as outras doses tiveram as frequências de eritrócitos policromáticos micronucleados (EPCMN) avaliadas em 24 e 48 horas após o tratamento. A Genotoxicidade foi avaliada por meio da frequência de eritrócitos policromáticos micronucleados (MNPCE), enquanto que a citotoxicidade foi mensurada pela razão entre eritrócitos policromáticos e normocromáticos (PCE / NCE). Os resultados mostraram que CALE não apresentou uma redução significativa na razão PCE/NCE, nem um aumento considerável na frequência de EPCMN. No entanto, CALE reduziu a toxicidade na medula óssea (aumento na razão PCE/NCE) e diminuiu a frequência de micronúcleos induzidos pela MMC. Nos resultados obtidos, CALE não apresentou efeitos citotóxicos e genotóxicos, contudo apresentou ações antigenotóxicas e anticitotóxicas nas condições experimentais aplicadas neste estudo.

Manihot multifida (L.) Crantz (Euphorbiaceae) is widely used in popular medicine for the treatment of infected wounds. This study evaluated thein vitro antioxidant and antimicrobial potential of this species against strains of Gram-positive and Gram-negative bacteria and fungi, known to cause infections in humans. The extracts showed minimal inhibitory concentration (MIC) varying from 39 to 2500 µg/mL for antimicrobial activity. The methanolic extract of fruits, aqueous and hexane extracts of leaves showed a very strong activity against Candida albicans(ATCC 18804) with MIC of 39 µg/mL. Furthermore, the methanolic extract of M. multifida leaves exhibited DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) scavenging potential with inhibitory concentration (IC50) values of 46.9 μg/mL, followed by hexane extract of leaves with IC50 values of 59.2 μg/mL. The cytotoxic activity against brine shrimp was stronger for the methanolic extract of leaves (lethal concentration - LC50 of 15.6 µg/mL). These results suggest that M. multifida has interesting antimicrobial and antioxidant activities. Moreover, these results corroborate the popular use of this specie in treating fungal infections since it demonstrates significant activity againstC. albicans. Manihot multifida(L.) Crantz (Euphorbiaceae) é amplamente utilizada na medicina popular no tratamento de feridas infectadas. Esse estudo avaliou o potencial antioxidante e antimicrobiano in vitrode extratos dessa espécie frente às cepas bacterianas Gram-positiva e Gram-negativa e fungo que causam infecções em humanos. Os extratos mostraram concentração inibitória mínima (CIM) variando de 39 a 2500µg/mL para a atividade antimicrobiana. O extrato metanólico de frutos, hexânico e aquoso de folhas mostraram atividade muito forte para Candida albicans (ATCC 18804), com CIM de 39µg/mL. Além disso, o extrato metanólico de folhas deM. multifidamostrou potencial antioxidante contra o radical DPPH com valor de concentração inibitória (CI50) de 46,9μg/mL, seguido pelo extrato hexânico de folhas, com valor de CI50 de 59,2μg/mL. A atividade citotóxica foi maior no extrato hexânico de folhas com concentração letal (CL50) de 15,6μg/mL. Esses resultados sugerem que M. multifida possui atividades antimicrobiana e antioxidante interessantes. Sendo assim, corroboram o uso popular dessa espécie no tratamento de infecções fúngicas, uma vez que demonstrou uma atividade significativa frente à C. albicans.

a b s t r a c t In vitro cytotoxicity testing of dental acrylic resins is fundamental to establish clinical safety limits, requiring suitable cell models that closely simulate physiological processes. This study’s main aim is to evaluate the viability of an untransformed human gingival fibroblast cell line, as an oral cell model for acrylic resin cytotoxicity tests. For this purpose, cell viability was compared to a control cell line (Chinese hamster lung fibroblast), following exposure to increasing concentrations of methyl methacrylate and formaldehyde (acrylic resins’ leachable compounds). Additionally, because of the volatile nature of these compounds and their harmful effects on the respiratory tract, a human fetal lung fibroblast line was also tested. Two-way ANOVA of generated data (p < 0.05) showed that all cell types are significantly affected in a dose dependent manner by these chemicals. Further characterization of the human gingival fibroblast line shall be addressed in future biocompatibility studies.

Annona crassiflora (araticum), Eugenia dysenterica (cagaita), and Caryocar brasiliense (pequi) are tropical fruits of the second biggest Brazilian biome: the cerrado. Nowadays, the cerrado faces two different realities: 1) the great possibility of food production since it is considered as the biggest storehouse of the world; and 2) the rich biodiversity that has been newly discovered and known. Previous studies showed that certain cerrado fruits demonstrate high content of total phenols and excellent antioxidant activity in in vitro models. Moreover, using fingerprinting analysis, important bioactive molecules were identified as probably responsible for their antioxidant activity. In this study, the cytotoxicity and phototocixity of ethanolic extracts from cerrado fruits were evaluated using the in vitro Neutral Red Uptake (NRU). Regarding cytotoxicity, the extracts of araticum peel and cagaita seed did not shown any cytotoxic potential up to 300 µg.mL-1. Ethanolic extracts of araticum seed and pequi peel presented low cytotoxic potential and, according to linear regressions, the estimated LD50 were de 831.6 and 2840.7 mg.kg-1, respectively. In the evaluated conditions, only the araticum peel extract presented a phototoxic potential. This is the first attempt to screen the toxicity of cerrado fruits with high antioxidant activity. Annona crassiflora (araticum), Eugenia dysenterica (cagaita) e Caryocar brasiliense (pequi) são frutas do segundo maior bioma brasileiro: o cerrado. Atualmente, o cerrado enfrenta duas realidades diferentes: 1) a grande possibilidade de produção de alimentos, sendo considerado o maior celeiro do mundo; e 2) a riquíssima biodiversidade recentemente descoberta e conhecida. Estudos prévios demonstraram que algumas frutas do cerrado possuem alto conteúdo fenólico e excelente atividade antioxidante em modelos in vitro. Adicionalmente, por meio de análises de fingerprinting, importantes moléculas bioativas foram identificadas como prováveis responsáveis pela atividade antioxidante. Neste estudo, foram avaliadas a citotoxicidade e a fototoxicidade dos extratos etanólicos de frutas do cerrado usando o método in vitro de Neutral Red Uptake (NRU). Em relação à citotoxicidade, os extratos de casca de araticum e semente de cagaita não apresentaram potencial citotóxico até a concentração de 300 µg.mL-1. Extratos etanólicos de semente de araticum e casca de pequi apresentaram baixo potencial citotóxico e por meio de regressões lineares, as LD50 estimadas foram de 831,6 e 2840,7 mg.kg-1, respectivamente. Nas condições avaliadas, somente o extrato de casca de araticum apresentou potencial fototóxico. Esse estudo representa a primeira abordagem para screening de toxicidade de frutos do cerrado com alto poder antioxidante.

Curatella americana L., commonly known as "lixeira" in Brazil, has been used in folk medicine to treat ulcers and inflammations. The purpose of the present work was to evaluate the cytotoxic and genotoxic potential of the ethanolic extract of C. americana stem bark using the prophage λ induction test (SOS inductest). To evaluate the cytotoxicity of this plant, after treatment with different concentrations of the extract, Escherichia coli WP2s(λ) cultures were diluted in M9 buffer, inoculated into LB plates, and incubated for 24 h at 37 °C. To assess genotoxicity, the lysogenic strain E. coli WP2s(λ) was treated with different concentrations of the extract. Then, the lysogenic strain was added to the indicator strain (RJF013), LB(1/2)(malt/amp), seeded into plates with the matches, and incubated for 24 h at 37 °C. After this period, the total number of colonies and the number of plaques were counted to evaluate C. americana cytotoxicity and genotoxicity, respectively. Our results showed that although the extract of "lixeira" did not modify the survival of bacteria (p > 0.05), it caused a significant increase in prophage λ induction, especially at the higher concentrations (p 0,05), provocou aumento significativo (p < 0,05) na indução do profago λ, especialmente nas concentrações mais altas. Assim, concluiu-se que o extrato etanólico das cascas de C. americana não apresentou atividade citotóxica, mas foi observada ação genotóxica direta.

Made available in DSpace on 2019-09-12T16:25:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 Este trabalho é parte de uma investigação sobre o potencial citotóxico e genotóxico da água do Rio Paraíba do Sul (Brasil) utilizando raízes de Allium cepa. Foi analisado um parâmetro anátomo-morfológico (crescimento das raízes), bem como o índice mitótico e a frequência de micronúcleos. Aleatoriamente oito bulbos foram submetidos aos tratamentos de 24 a 120 horas com água do Rio proveniente dos pontos de coleta das cidades de Tremembé e Aparecida nos anos de 2005 e 2006. O comprimento das raízes de cada bulbo foi acompanhado diariamente ao longo do experimento. O índice mitótico (IM) e a frequência de micronúcleos (MN) foram determinados pela análise de 2.000 células por raiz, sendo utilizadas 3-5 raízes de outros bulbos (7-10). Somente as raízes tratadas com amostras de água coletadas em 2005 na cidade de Tremembé, apresentaram decréscimo no comprimento das raízes quando comparadas com o controle. Entretanto, foi observada redução do IM nas raízes tratadas com água de ambos os pontos de coleta no mesmo ano. Considerando os dados de crescimento de raiz e especialmente IM, um potencial citotóxico é sugerido para a água do Rio Paraíba do Sul em Tremembé e Aparecida, no ano de 2005. Por outro lado, para este mesmo ano, a frequência de micronúcleos não foi alterada; assim, a genotoxicidade não foi assumida para a água do Rio nos pontos mencionados. This work investigated the cytotoxic and genotoxic potential of water from the River Paraíba do Sul (Brazil) using Allium cepa roots. An anatomo-morphological parameter (root length), mitotic indices, and frequency of micronuclei were analysed. Eight bulbs were chosen at random for treatment for 24 to 120 hours with the River water collected in the years of 2005 and 2006 from sites in the cities of Tremembé and Aparecida (São Paulo state, Brazil). Daily measurements of the length of the roots grown from each bulb were carried out throughout the experiment. Mitotic index (MI) and frequency of micronuclei (MN) were determined for 2000 cells per root, using 3-5 root tips from other bulbs (7-10). Only in the roots treated with samples of the River water collected in 2005 in Tremembé city was there a decrease in the root length growth compared to the respective control. However, a reduction in MI values was verified for both sites analysed for that year. Considering the data involving root length growth and especially MI values, a cytotoxic potential is suggested for the water of the River Paraíba do Sul at Tremembé and Aparecida, in the year of 2005. On the other hand, since in this year the MN frequency was not affected with the river water treatments, genotoxicity is not assumed for the river water sampled at the aforementioned places. [Barbério, A.; Voltolini, JC.] Universidade de Taubaté, Brazil Barbério, A.; Barros, L.; Mello, MLS.] Universidade Estadual de Campinas, Brazil

Bromelia antiacantha (known as wild banana) is traditionally used to treat coughs, as an emollient and antitussive, and to treat mouth and skin ulcers. To investigate the radical scavenger properties, DPPH and phosphomolybdenium were used, with low antioxidant activity being observed for both (below 5 mg/ml of extract presented no activity for both techniques). An HPLC fingerprint of phenolic compounds was developed and total phenolics through Folin-Ciocalteau method was an average of 500 µg/g of fresh fruits. Any cytotoxicity was observed on L929 fibroblasts cells for aqueous, methanol and lipid extracts between 500 and 0.01 µg/ ml. The wild banana extract (1000 µg/mL) shown a lower genotoxicity when compared to the negative and positive (MMS) controls. Abundant calcium oxalate crystals and sucrose were found and characterized through NMR and X-ray diffraction respectively. Its centesimal composition indicated abundant carbohydrates (45%) and lipids (18%). The carbohydrate analysis showed acidic monosaccharides, and the lipid analysis shown palmitic and linoleic acids in similar quantities (30% each) and oleic acid 20%, among others, through GC-FID. The viscosity of the water-soluble polysaccharide sub-fraction (5 g/L) was similar to that of water. O chá dos frutos maduros de Bromelia antiacantha (banana-de-bugre; banana-do-mato) é usado tradicionalmente para tratar desordens respiratórias, como antitussígeno e também para tratar ulceras de pele e boca. Neste trabalho pesquisou-se o potencial de captação de radicais livres do extrato aquoso e extrato metanólico através da reação de redução do DPPH e do fosfomolibdenio, sendo encontrada baixa atividade nos dois modelos (abaixo de 5 mg/ml nenhuma atividade foi detectada em ambos extratos). Os compostos fenólicos totais foram determinados através de Folin-Ciocalteau, sendo encontrados 500 µg/g de fruto maduro fresco, e foi desenvolvido fingerprint dos compostos fenólicos através de CLAE-DAD. Nenhuma citotoxicidade foi observada em fibroblastos L929 para extratos aquoso, metanólico e lipídico entre 500 e 0,01 µg/ml, assim como baixa genotoxicidade (1000 µg/mL) quando comparados aos controles negativo e positivo (MMS). Abundantes cristais de oxalato de cálcio e de sacarose foram observados e caracterizados por RMN e difração de Raios-X respectivamente, e a composição centesimal do fruto indicou abundantes carboidratos (45%) e lipídeos (18%). A analise de carboidratos encontrou componentes monosacarídicos ácidos e foram encontrados acido palmítico e linoléico em quantidades similares (30% cada) e 20% de acido oléico, entre outros ácidos graxos através de CG-DIC. A viscosidade da sub-fração polissacarídica solúvel em água (5 g/L) foi semelhante a da água.

A leishmaniose é considerada uma importante causa de morbidade e mortalidade a nível mundial, principalmente nos países tropicais. As formas cutânea e mucocutânea são causadas, entre outras espécies, por Leishmania braziliensis. Na procura de compostos leishmanicidas de origem natural, foi estudada a atividade da mistura de alcalóides de Ervatamia coronaria (Apocynaceae) contra amastigotas de L. braziliensis em 6 concentrações diferentes (1, 10, 20, 25, 50 e 100 µg/mL). Foram tratados macrófagos de ratos da linha J774, infectados com promastigotas de L. braziliensis, com a mistura de alcalóides 1 hora após-infecção e diariamente por 3 dias sem mudança de meio. As experiências de citotoxicidade foram efetuadas sobre os macrófagos com azul tripam. Todos os cultivos foram feitos de forma triplicada e os grupos de controle não foram submetidos à mistura de alcalóides. Foi obtido que o composto adicionado exerce atividade doses/dependente sobre a parasita. No entanto, as concentrações mais altas (50 e 100 µg/mL), adicionado durante 3 dias, mostraram os maiores índices de infecção, provavelmente devido a diminuição no número de macrófagos, sobre os quais não foi observado efeito tóxico do tratamento durante 24 horas DL50/24h = 233,52 µg/mL. Os resultados dessa pesquisa revelaram uma nova atividade farmacológica de alcalóides da espécie Ervatamia coronaria sobre a forma amastigota de Leishmania braziliensis, com IC50 = 2,6 e 12,4 µg/mL sem mostrar toxicidade sobre a célula hospedeira. Leishmaniasis, caused by Leishmania sp., is one of the mean reason of considerable mortality and morbidity throughout the world, especially in the tropics. Cutaneous and mucocutaneous manifestations are caused by Leishmania braziliensis, and the cutaneous form is the most common one in Colombia. In the search for antileishmanial compounds from natural sources, we studied the alkaloids mixture from Ervatamia coronaria against L. braziliensis at six different concentrations (1.0, 10, 20, 25, 50 and 100 µg/mL). Macrophages J774 infected with L. braziliensis were treated with alkaloids one hour, and once a day for three days, after parasitic infection and preserving the same culture medium. Cytotoxicity with trypan blue was undertaken in macrophages J774 by using the same concentrations. Three different cultures samples were carried out. As a control we used medium alone. The alkaloids mix showed a dose/dependent activity on amastigote, but by increasing concentrations from 50 to 100 µg/mL for three days, we saw a high index of infection, probably caused by cellular death. We did not see any toxic effect on macrophages J774 at 100 µg/mL, LD50/24h= 233.52 µg/mL. These results revealed a novel pharmacological activity of alkaloids from E. coronaria against amastigotes of L. braziliensis IC50 = 2.6 and 12.4 µg/mL without toxicity on host cells.

O objetivo do autor do presente trabalho foi comparar duas metodologias, avaliando in vitro a biocompatibilidade de elásticos ortodônticos intra-orais através de teste de citotoxicidade em cultivo de células HEp-2 (carcinoma de laringe humana),comparando duas metodologias: ensaio de difusão em ágar e ensaio de incorporação do vermelho neutro. Foram utilizados elásticos ortodônticos de duas diferentes marcas comerciais American Orthodontic (American Orthodontic, Sheboygon, USA) e Morelli (Sorocaba, São Paulo, Brasil). Os resultados conseguidos utilizando-se ambas metodologias demonstraram baixa citotoxicidade para os elásticos das marcas American Orthodontic e alta para marca Morelli. De acordo com os resultados obtidos pode-se concluir que ambas metodologias podem ser utilizadas quando deseja-se testar elásticos ortodônticos.

Ginkgo biloba L. é uma planta medicinal amplamente utilizada pela população mundial para o tratamento de insuficiência cerebral, doenças vasculares e outras enfermidades. No presente trabalho foi avaliada a atividade clastogênica e/ou aneugênica do extrato das folhas de Ginkgo biloba L. (EGb 761) pelo teste de micronúcleo em eritrócitos policromáticos da medula óssea de camundongos. Grupos de cinco animais foram tratados com extrato EGb 761 por via gavage com doses de 50 mg/kg, 100 mg/kg e 200 mg/kg. Para todas as doses utilizadas, a freqüência de eritrócitos policromáticos micronucleados (EPCMN) foi avaliada no tempo de 24 horas pós-tratamento. A preparação citológica foi realizada de acordo com a metodologia de Heddle. citotoxidade foi avaliada pela relação de eritrócitos policromáticos e normocromáticos (EPC/ENC). Os resultados mostraram que o EGb 761 não provocou aumento significativo (p>0,05) na freqüência de EPCMN em relação ao grupo controle negativo. Não foi observada citotoxicidade para todas as concentrações utilizadas (P>0,01) em relação ao grupo controle negativo. Dessa maneira, pode-se sugerir que EGb 761 não apresentou atividade mutagênica e/ou citotóxica nas condições experimentais executadas.

Mundialmente, muitas espécies de plantas medicinais são utilizadas para o tratamento de doenças. No entanto, a maioria dessas espécies não foram suficientemente estudadas, principalmente quanto à presença de substâncias citotóxicas/mutagênicas em sua composição ou decorrentes do próprio metabolismo e podem causar danos à saúde da população. A presença de substâncias mutagênicas nas espécies vegetais que causam alterações cromossômicas podem ser detectadas durante o ciclo celular de uma espécie. O sistema teste de Allium cepa é freqüentemente utilizado para avaliação do potencial genotóxico de extratos de plantas medicinais através da análise de células meristemáticas provenientes de pontas de raízes tratadas com infusões medicinais (chás). O conhecimento do potencial genotóxico destas espécies medicinais, através da análise do ciclo celular de Allium cepa serve como indicativo de segurança para a população que utiliza chás medicinais como única alternativa para o tratamento de doenças. Essa revisão, objetiva informar a respeito da importância do teste de Allium cepa para avaliação preliminar da genotoxicidade de infusões de plantas medicinais. All over the world, many species of medicinal plants are used for disease treatments. However, most of them were not deeply studied; and the presence of cytotoxic or mutagenic substances in their composition or resulting from their metabolism may be harmful to human beings. The mutagenic effects caused by such substances result in chromosomal changes which are detecTable during the cell cycle of a species through cytogenetic analysis. The Allium cepa test system is widely used for evaluating the genotoxic potential of infusions (tea) made of medicinal plants, through the cell cycle analysis. The knowledge of the genotoxic potential of such species through the Allium cepa test serves as a warning and safety bioindicator for the population who uses medicinal tea quite often as the unique alternative for disease treatment of its people. In the review article, we intend to inform people about the importance of the Allium cepa test for evaluating the genotoxicity of infusions of medicinal plants.

Malaria causes important functional alterations of the immune system, but several of them are poorly defined. To evaluate thoroughly the natural killer cell cytotoxicity in patients with malaria, we developed a technique capable to assess both the dynamics and the kinetics of the process. For the kinetics assay, human peripheral blood mononuclear cells were previously incubated with K562 cells and kept in agarose medium, while for the dynamics assay both cells were maintained in suspension. NK activity from patients with vivax malaria presented a kinetics profile faster than those with falciparum malaria. NK cytotoxicity positively correlated with parasitemia in falciparum malaria. The dynamics of NK cytotoxicity of healthy individuals was elevated at the beginning of the process and then significantly decreased. In contrast, malaria patients presented successive peaks of NK activity. Our results confirmed the occurrence of alteration in NK cell function during malaria, and added new data about the NK cytotoxicity process.A malária causa importantes alterações do sistema imunitário, muitas ainda mal definidas. Para permitir uma avaliação abrangente da atividade citotóxica das células natural killer em pacientes com malária, desenvolvemos um teste capaz de avaliar concomitantemente a dinâmica e a cinética do processo. Para a avaliação da cinética, células mononucleares do sangue periférico interagiram com células K562 e foram mantidas em agarose, enquanto para avaliar a dinâmica as células eram mantidas em suspensão. A cinética da atividade citotóxica das células NK foi mais rápida em pacientes com Plasmodium vivax, do que naqueles infectados com P. falciparum. Nestes, houve correlação positiva entre a atividade citotóxica das células NK e a parasitemia. O padrão da dinâmica da atividade citotóxica nos pacientes com malária foi bem diferente daquele apresentado pelos indivíduos sadios. Enquanto nestes, a atividade estava muito aumentada no início da incubação das células, sofrendo posteriormente uma redução, nos indivíduos infectados foram detectados sucessivos picos de atividade citotóxica. Nossos resultados confirmam a ocorrência de alteração funcional das células NK na malária humana e acrescentam novos dados sobre a dinâmica e a cinética da atividade citotóxica.

Thirteen essential oils from Colombian plants, obtained by hydrodistillation or microwave-assisted hydrodistillation of total plant, stem, leaves, and flowers were analyzed by gas-chromatography-mass spectrometry techniques. Cytotoxicity of essential oils was assessed using the brine shrimp assay, and their antioxidant activities measuring their effects on the levels of thiobarbituric acid reactive substances on rat liver microsomes induced by Fe2+/H2O2. Five oils showed high cytotoxicity (LC501000 µg/mL). Treze óleos essenciais de plantas da Colômbia, obtido por hidrodestilação ou hidrodestilação assistida por microondas, da planta inteira, caule, folhas e flores, foram analisados por técnicas de espectrometria de massa acoplada a cromatografia gasosa. Foi avaliada a citotoxicidade de óleos essenciais utilizando o ensaio com Artemia salina e suas atividades antioxidantes medindo seus efeitos sobre os níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico em microssomas de fígado de rato induzida por Fe2+/H2O2. Cinco óleos apresentaram alta citotoxicidade (LC501000 µg/mL).