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Dissertação (mestrado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2022. Introdução: O tratamento de lesões crônicas acarreta elevados custos aos sistemas de saúde, como também reduz a qualidade de vida das pessoas por elas acometidas. Visando a melhoria no tratamento de lesões crônicas é possível que o uso da FLA proporcione resposta clínica favorável, com maior precocidade no reparo tecidual, uma vez que os concentrados plaquetários autólogos podem potencializar a estimulação do processo fisiológico da cicatrização e auxiliar na regeneração de diversos tecidos. Objetivo: Avaliar o efeito da aplicação tópica semanal da fibrina leucoplaquetária autóloga no processo de reparação de lesões crônicas. Metodologia: Trata-se de um estudo clínico experimental, controlado, randomizado, descritivo, comparativo e sem cegamento, realizado no Serviço Ambulatorial de Enfermagem em Estomaterapia (SAEE) do Hospital Universitário de Brasília, UnB – DF. O estudo foi composto por dois grupos, sendo eles: o grupo Controle (n=15) e o grupo Intervenção / FLA (n=15). Os parâmetros qualitativos e quantitativos das lesões de ambos os grupos eram obtidos pelo mesmo observador, uma vez por semana e ao longo de três meses. Nas análises qualitativas foram considerados os tecidos expostos (superficiais e/ou profundos), sua mensuração (área, perímetro e borda das lesões), as características macroscópicas das lesões e a evolução do desfecho (cura das lesões). Resultados: A análise dos dados mostrou que: 1) houve predomínio de mulheres em ambos os grupos, controle e FLA; 2) não houve diferenças entre os grupos quanto à faixa etária, índice de massa corporal, total de lesões, etiologia das lesões e presença de comorbidades; 3) o tratamento convencional ou FLA, bem como o tempo de tratamento não afetaram as características macroscópicas das lesões relativas à presença e intensidade da dor, odor, borda das lesões, área perilesão, exsudato; 4) o tratamento com a FLA aumentou o percentual de epitelização das lesões com 4, 8 ou 12 semanas de tratamento e com 8 semanas para o grupo controle; 5) o tratamento convencional não afetou o tecido de granulação, enquanto que no grupo tratado com a FLA houve maior percentual de tecido de granulação com 12 semanas; 6) não houve diferença na área das lesões para os indivíduos do grupo tratado convencionalmente, enquanto que para o grupo tratado com a FLA houve redução na área das lesões decorridos 4 ou 8 semanas do tratamento; 7) a FLA aumentou o percentual de indivíduos que tiveram redução na área das lesões, mas não alterou o tempo para o fechamento das lesões/cura até 12 semanas de tratamento. Conclusão: O conjunto dos resultados indicou que a fibrina leucoplaquetária autóloga favorece o processo de cicatrização/reparação de lesões crônicas vasculares antecipando a cura. Por se tratar de um tratamento de baixo custo e de performance potencialmente superior aos tratamentos convencionais, pode diminuir o quadro álgico dos indivíduos tratados com consequente melhoria na qualidade de vida desses pacientes. Introduction: The treatment of chronic injuries entails high costs for health systems, as well as reducing the life quality of people affected by them. Aiming at improving the treatment of chronic wounds, it is possible that the use of L-PRF provides a favorable clinical response, with greater precocity in tissue repair, since autologous platelet concentrates can potentiate the stimulation of the physiological healing process and assist in the regeneration of various tissues. Objective: Evaluate the effect of weekly topical application of Leukocyte- and Platelet-Rich Fibrin in the repair process of chronic wounds. Methodology: This is an experimental, controlled, randomized, descriptive, comparative and unblinded clinical study, carried out at the Outpatient Service of Nursing in Stomatherapy (SAEE) of the University Hospital of Brasília, UnB - DF. The study was composed of two groups, namely: Control group (n=15) and Intervention/L-PRF group (n=15). The qualitative and quantitative parameters of the wounds in both groups were obtained by the same observer, once a week and for three months. In the qualitative analysis, the exposed tissues (superficial and/or deep), their measurement (area, perimeter and edge of the wounds), the macroscopic characteristics of the wounds and the evolution of the outcome (healing of the wounds) were considered. Results: Data analysis showed that: 1) there was a predominance of women in both groups, control and L-PRF; 2) there were no differences between the groups in terms of age, body mass index, total number of wounds, etiology of lesions and presence of comorbidities; 3) conventional or L-PRF treatment, as well as treatment time, did not affect the macroscopic characteristics of the wounds regarding the presence and intensity of pain, odor, lesion edges, periwound area, exudate; 4) treatment with L-PRF increased the percentage of epithelialization of wounds at 4, 8 or 12 weeks of treatment and at 8 weeks for the control group; 5) the conventional treatment did not affect the granulation tissue, while in the group treated with L-PRF there was a higher percentage of granulation tissue at 12 weeks; 6) there was no difference in the wound’s area for individuals in the conventional treatment group, while for the group treated with L-PRF there was a reduction in the area of wounds after 4 or 8 weeks of treatment; 7) L-PRF increased the percentage of individuals who had a reduction in the wound area, but did not change the time for wound closure/healing up to 12 weeks of treatment. Conclusion: The set of results indicated that Leukocyte- and Platelet-Rich Fibrin favors the healing/repair process of chronic vascular lesions, anticipating healing. Because it is a low-cost treatment and potentially superior to conventional treatments, can reduce the pain of treated individuals with a consequent improvement in the quality of life of these patients.

O uso dos raios X no diagnóstico e para guiar procedimentos intervencionistas trouxe inúmeras vantagens à assistência ao paciente, mas agregou riscos à saúde ocupacional da equipe envolvida. Esses profissionais são expostos aos raios X e devem ter o acompanhamento de sua saúde ocupacional. A legislação trabalhista brasileira prevê a realização de exames de hemograma completo com contagem de plaquetas na admissão e semestralmente, embora não existam evidências de que esse biomarcador é adequado para avaliar as exposições em baixas doses de radiação. Torna-se essencial avaliar se a dose dos trabalhadores ocupacionalmente expostos à radiação X em ambiente hospitalar são significativas e possuem relação para alteração nas contagens de leucócitos e plaquetas dos exames de hemograma. Para isso foi realizado um estudo observacional retrospectivo considerando uma amostra de 5.968 exames de hemograma e 62.088 doses efetivas mensais dos 766 trabalhadores que exerceram atividades em radiologia diagnóstica e intervencionista, no período de 2009 a 2019. Apenas 5,58% (IC95% 5,41 – 5,77) das doses avaliadas foram acima do nível de registro, 1,03% (IC95% 0,95 – 1,12) foram acima do nível de investigação e 0,78% (IC95% 0,29 – 1,70) atingiram o limite de dose anual. Quando observado os exames de hemograma, 1,09% (IC95% 0,84 – 1,39) destes apresentaram leucopenia e 2,13% (IC95% 1,78 – 2,53) apresentaram trombocitopenia. Quando analisada a dose acumulada em 12 meses e a dose mensal do mês anterior à coleta de sangue, não foi identificada relação estatisticamente significativa para contagem de leucócitos - (b = -0,01 (IC95% -0,03 - 0,01); p = 0,254) e (b = -0,04 (IC95% -0,02 - 0,12); p = 0,606) respectivamente, nem para contagem de plaquetas - (b = -0,52 (IC95% -1,09 - 0,05); p = 0,072) e (b = -0,69 (IC95% -3,63 - 2,25); p = 0,646), respectivamente. Avaliando a relação entre a dose mensal e os exames de hemograma dos IOEs, verifica-se relação estatisticamente significativa, para contagem de leucócitos (b = -0,12 (IC95% -0,19 - -0,04); p = 0,002), mas o mesmo não ocorreu para contagem de plaquetas (b = -1,91 (IC95% -4,93 - 1,11); p = 0,215). A avaliação quanto à probabilidade de doses acima do nível de investigação mensal ou do limite de dose efetiva anual ocasionar alterações no hemograma não mostrou diferença estatisticamente significativa em relação às médias leucocitárias ou plaquetárias. Foi identificada exceção, com diferença estatisticamente significativa, para a associação das doses acumuladas em 12 meses em relação à média da 8 contagem de leucócitos. No entanto, os dois grupos (dose acumulada menor que 20 mSv e dose acumulada maior ou igual a 20 mSv) estão entre os valores de referência normais para contagem de leucócitos. Os achados do presente estudo demonstraram não haver uma relação estatisticamente significativa, com validade clínica, entre as doses efetivas individuais e a contagem de leucócitos e de plaquetas no hemograma em todas as análises realizadas. The use of X-rays to diagnose and to guide interventional procedures brought numerous advantages to patient care, but added risks to the occupational health of the staff involved. These professionals are exposed to X-rays and must monitor their occupational health risk. Brazilian Labor Law provides for complete blood count tests with platelet counts at admission and every six months, although studies have shown that this biomarker does not show evidence of low-dose radiation. It is essential to assess whether the occupational radiation X dose to workers in a hospital environment is significant and has a relationship with changes in the leukocyte and platelet counts of the blood count tests. For this purpose, a retrospective observational study was carried out considering a sample of 5,968 blood tests and 62,088 effective monthly doses of the 766 persons who worked in diagnostic and interventional radiology, in the period from 2009 to 2019. Only 5.58% (95% CI, 5.41 - 5.77) of the doses evaluated were above the recording level, 1.03% (95% CI, 0.95 - 1.12) were above the investigation level and 0.78% (95% CI 0.29 - 1, 70) reached the annual dose limit. When analyzing the blood count tests, we observed that 1.09% (95% CI, 0.84 - 1.39) had leukopenia and 2.13% (95% CI, 1.78 - 2.53) had thrombocytopenia. When analyzing the accumulated dose in 12 months and the monthly dose in the month prior to blood collection, no statistically significant relationship was identified with leukocyte count - (b = -0.01 (95% CI -0.03 - 0.01); p = 0.254) and (b = -0.04 (95% CI, -0.02 - 0.12); p = 0.606) respectively, nor for platelet count - (b = -0.52 (95% CI, -1,09 - 0.05); p = 0.072) and (b = -0.69 (95% CI, -3.63 - 2.25); p = 0.646), respectively. Assessing the relationship between the monthly dose and the worker CBC tests, we found a statistically significant association with the leukocyte count (b = -0.12 (95% CI, -0.19 - -0.04); p = 0.002), but the same did not occur for platelet count (b = -1.91 (95% CI, -4.93 - 1.11); p = 0.215). The evaluation regarding the probability of doses above the monthly investigation level or the annual effective dose limit causing changes in the blood count did not show any statistically significant difference in relation to leukocyte or platelet averages. An exception was identified, with a statistically significant difference, for the association of doses accumulated in 12 months in relation to the average of leukocytes count. However, the two groups (accumulated dose less than 20 mSv and the accumulated dose higher than or equal to 20 mSv) are among the normal reference values for leukocyte count. The findings of the present study demonstrated that there is no statistically 10 significant relationship, with clinical validity, between the individual effective doses and the leukocyte and platelet count in the blood count in all analysis performed.

BACKGROUND: Biomarkers from routine complete blood count are known predictive factors of long-term outcomes in cancer patients. The value of these biomarkers in the setting of trimodal therapy for esophageal cancer in predicting early postoperative outcomes is not studied. OBJECTIVE: The present study evaluated the value of cellular blood components changes during neoadjuvant chemoradiotherapy followed by curative intent esophagectomy for cancer in predicting postoperative mortality and morbidity. METHODS: A cohort of 149 consecutive patients that underwent chemoradiotherapy using platinum- and taxane-based regimens followed by esophagectomy was analyzed. Cellular components of blood collected before neoadjuvant therapy (period A) and before surgery (period B) were assessed for postoperative mortality and complications. Univariate and multivariate Cox regression models were applied to evaluate the independent prognostic significance of blood count variables. RESULTS: Postoperative morbidity was present in 46% of the patients. On multiple regression analysis platelet volume (B) (OR: 1.53; 95% CI: 1.2-2.33) was an independent predictor of general complications. Severe postoperative surgical complications were present in 17% of the patients. On multiple regression analysis, lymphocyte decrease between B-A periods (OR: 0.992; 95% CI: 0.990-0.997) was related to higher risk for severe complications. Cervical anastomotic leakage was present in 25.6% of the patients. On univariate analysis eosinophil count in A and B periods was related to cervical anastomotic leakage. For this outcome, multivariate joint model could not identify independent risk variables of cellular components of blood. The 30-day mortality rate was 7.4%. On univariate analysis, platelet count in period B was associated to higher risk for mortality. The multivariate joint model could not accurately predict mortality due to the few number of patients in the mortality group. CONCLUSION: This is the first study to assess the relationship between peripheral blood count variables changes during neoadjuvant chemoradiotherapy using a platinum- and taxane-based regimen followed by curative intent esophagectomy for cancer in predicting postoperative complications. The platelet volume prior to surgery is related to postoperative complications and the lymphocyte count change prior to surgery predicts severe postoperative complications in the setting of trimodal therapy for esophageal cancer. RESUMO CONTEXTO: Os biomarcadores obtidos do hemograma completo são fatores prognósticos a longo prazo em pacientes com câncer. No entanto, o valor desses biomarcadores no contexto da terapia trimodal para o câncer de esôfago na predição de resultados pós-operatórios precoces não é estudado. OBJETIVO: O presente estudo avaliou o papel dos componentes celulares do sangue na predição de mortalidade e morbidade pós-operatória. MÉTODOS: Uma coorte de 149 pacientes consecutivos submetidos à quimiorradioterapia usando esquemas baseados em platina e taxano seguidos por esofagectomia foi analisada. Os componentes celulares do sangue coletados antes da terapia neoadjuvante (período A) e antes da cirurgia (período B) foram avaliados quanto à mortalidade e complicações pós-operatórias. Modelos de regressão de Cox univariada e multivariada foram aplicados para avaliar a significância prognóstica independente das variáveis da contagem sanguínea. RESULTADOS: A morbidade pós-operatória esteve presente em 46% dos pacientes. Na análise de regressão múltipla, o volume plaquetário (B) (OR: 1,53; IC95%: 1,2-2,33) foi um preditor independente de complicações gerais. Complicações cirúrgicas pós-operatórias graves estavam presentes em 17% dos pacientes. Na análise de regressão múltipla, a diminuição de linfócitos entre os períodos B-A (OR: 0,992; 95% CI: 0,990-0,997) esteve relacionada ao maior risco de complicações graves. Fístula da anastomose cervical esteve presente em 25,6% dos pacientes. Na análise univariada, a contagem de eosinófilos nos períodos A e B relacionou-se com a fístula da anastomose cervical. Para este resultado, o modelo multivariado de articulação não conseguiu identificar variáveis de risco independentes entre os componentes celulares do sangue. A taxa de mortalidade em 30 dias foi de 7,4%. Na análise univariada, a contagem no período B foi associada a maior risco de mortalidade. O modelo multivariado de articulação não pôde predizer mortalidade devido ao pequeno número de pacientes no grupo de mortalidade. CONCLUSÃO: Este é o primeiro estudo a avaliar o papel das variáveis do hemograma durante a quimiorradioterapia neoadjuvante para câncer na predição de complicações pós-operatórias. Volume plaquetário e variação da contagem de linfócitos séricos antes da cirurgia podem ser utilizados como biomarcadores preditivos de complicações pós-operatórias nos pacientes com neoplasia de esôfago submetidos a terapia trimodal.

RESUMEN Con el objetivo de establecer los límites de referencia de analitos hematológicos de cabras adultas de razas productoras de leche clínicamente sanas, sujetas al manejo y a las características de los sistemas de producción intensiva del Altiplano Mexicano, se recolectaron y analizaron muestras de sangre de cabras de 2 o más años de edad en diferentes etapas de producción. Con los resultados se obtuvieron los límites de referencia para hematocrito, cuenta de eritrocitos, volumen globular medio (VGM), plaquetas, sólidos totales, fibrinógeno, cuenta de leucocitos, neutrófilos segmentados, neutrófilos en banda, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos. Las medias obtenidas para cada analito fueron: hematocrito (0,22-0,36 L/L), cuenta de eritrocitos (9,07-18,47 x1012/L), volumen globular medio (VGM) (14,44-27,91), plaquetas (229-3 1 63 x109/L), solidos totales (65,64-84,64 g/L), fibrinógeno (0-6 g/L), cuenta de leucocitos (3,75-11,47 x109/L), neutrófilos segmentados (0,95-4,98 x109/L), neutrófilos en banda (0-0,16 x109/L), linfocitos (1,76-6,44 x109/L), monocitos (0-0,65 x109/L), eosinófilos (0-1,36 x109/L) y basófilos (0 - 0,37 x109/L). Estos valores se compararon con los obtenidos en otros estudios similares, y se encontraron algunas diferencias mayoritariamente en los valores obtenidos para hematocrito, eritrocitos, VGM, plaquetas, leucocitos y linfocitos, lo cual se debe a las diferencias en condiciones medioambientales y de alimientación entre los estudios. ABSTRACT With the aim to establish the hematological analyte reference limits of clinically healthy adult goats of dairy producing breeds, subjected to the handling and characteristics of intensive production systems in the Mexican Plateau, the blood samples of 2-year old and older goats at different production stages were collected and analyzed. Reference limits (interval in brackets) for hematocrit (0.22-0.36 L/L), erythrocyte count (9.07-18.47 x1012/L), mean cell volume (MCV) (14.44-27.91 fL), platelets (229-3163 x109/L), total solids (65.64-84.64 g/L), fibrinogen (0-6 g/L), leukocyte count (3.75-11.47 x109/L), segmented neutrophils (0.95-4.98 x109/L), band neutrophils (0-0.16 x109/L), lymphocytes (1.76-6.44 x109/L), monocytes (0-0.65 x109/L), eosinophils (0-1.36 x109/L) and basophils (0-0.37 x109/L) were obtained. These values were compared with similar study results. Differences were found mainly in the values for hematocrit, erythrocytes, MCV, platelets, total leukocytes, and lymphocytes; this is due to environmental and feeding differences between the studies.

Background: Cell-derived microvesicles (MVs) are vesicles released from activated or apoptotic cells. However, the levels of MVs in myocardial infarction have been found inconsistent in researches. Objective: To assess the association between MVs and myocardial infarction by conducting a meta-analysis. Methods: A systematic literature search on PubMed, Embase, Cochran, Google Scholar electronic database was conducted. Comparison of the MVs levels between myocardial infarction patients and healthy persons were included in our study. Standard Mean Difference (SMD) and 95% confidence interval (CI) in groups were calculated and meta-analyzed. Results: 11 studies with a total of 436 participants were included. Compared with the health persons, AMVs [SMD = 3.65, 95% CI (1.03, 6.27)], PMVs [SMD = 2.88, 95% CI (1.82, 3.93),] and EMVs [SMD = 2.73, 95% CI (1.13, 4.34)], levels were higher in patients with myocardial infarction. However, LMVs levels [SMD = 0.73, 95% CI (-0.57, 2.03)] were not changed significantly in patients with myocardial infarction. Conclusions: AMVs, PMVs and EMVs might be potential biomarkers for myocardial infarction. Resumo Fundamentos: As microvesículas derivadas de células (MVs) são vesículas liberadas de células ativadas ou apoptóticas. No entanto, os níveis de MVs no infarto do miocárdio foram encontrados inconsistentes nas pesquisas. Objetivo: Avaliar a associação entre MV e infarto do miocárdio por meio de uma meta-análise. Métodos: Foi realizada uma pesquisa sistemática na literatura em PubMed, Embase, Cochran e no banco de dados eletrônico do Google Scholar. Uma comparação dos níveis de MV entre pacientes com infarto do miocárdio e pessoas saudáveis foi incluída no nosso estudo. A Diferença Média Padrão (DMP) e o intervalo de confiança (IC) de 95% nos grupos foram calculadas e meta-analisadas. Resultados: Foram incluídos 11 estudos com um total de 436 participantes. Em comparação com as pessoas saudáveis, as MVA [DMP = 3,65, IC 95% (1,03, 6,27)], MVPs [DMP = 2,88, IC 95% (1,82, 3,93)] e MVEs [DMP = 2,73, IC 95% (1,13, 4.34)], foram maiores em pacientes com infarto do miocárdio. No entanto, os níveis de MVL [DMP = 0,73, IC 95% (-0,57, 2,03)] não foram alterados significativamente em pacientes com infarto do miocárdio. Conclusões: MVAs, MVPs e MVEs podem ser biomarcadores potenciais para o infarto do miocárdio.

Una segona generació de PRP ha estat proposada com a biomaterial per cirurgia humana. Aquesta substancia es nomenada Fibrina Rica en Plaquetes i Leucòcits (L-PRF) i s’obté de sang venosa recollida en tubs sense anticoagulants i centrifugada d’immediat a baixes acceleracions. Durant el procés hi ha activació plaquetària quan les plaquetes entren en contacte amb el vidre dels tubs i la fibrina polimeritza. Algunes cèl·lules queden atrapades dins d’aquesta malla de fibrina, predominantment plaquetes i leucòcits I part de les investigacions en aquesta tesi porten a conclusions importants sobre el comportament d’aquests continguts en el rol de la curació tissular. Aquests estudis preliminars en sang equina han mostrat que varis factors de creixement que inclouen PDGF-BB, IGF-1, TGF-β1 son secretats dels coàguls de manera sostinguda durant les 2 ó 3 setmanes d’incubació estudiades, que aquests coàguls poden ser modelats en diferents formes i adaptats per diferents aplicacions dins del camp de cirurgia actuant com a malles per augmentar la curació dels teixits. Encara que el L-PRF s’utilitza sovint en cirurgia maxil·lofacial en humans i per el tractament d’úlceres cròniques encara no hi ha informació bàsica sobre aquest biomaterial dins del camp de la medicina regenerativa equina. Aquests estudis contribueixen a esbrinar la composició i biologia bàsica del L-PRF en cavalls i dona suport a la informació biològica traslacional a humans i altres mamífers. TNF-α, IL-4 així com IL-1ra varen ser produïts per leucòcits dels coàguls del PRF clots, mentre que PDGF-BB i TGF-β1 varen ser produïts per desgranulació plaquetària encara que ambdues troballes suggereixin de que tots dos factors de creixement van ser també produïts per leucòcits atrapats dins la malla de fibrina del coàguls de PRF. Això demostra el rol fonamental dels leucòcits dins de la cicatrització tant sigui induïda com modificada per coàguls de PRF dins dels mamífers. A més es molt important considerar que el TNF-α hauria de ser considerat com una citocina regula tòria e inclús beneficiosa dins dels coàguls ja que augmenta la síntesi de citocines antiinflamatòries d’aquest biomaterial. Les hipòtesi varen ser corroborades ja que els coàguls de PRF van produir i deixar anar citocines i factors de creixement en el temps i pràcticament no es van detectar diferències en els patrons de secreció proteica entre els diferents protocols de elaboració avaluats. Es recomana l’ús clínic dels sobre nadants del procés de producció ja que son una font molt important en factors de creixement anabòlics., A second generation of PRP has been recently proposed as a biomaterial for human surgery. This substance is named leukocyte and platelet rich fibrin (L-PRF) and is obtained from venous blood collected in tubes without anticoagulant and immediately centrifuged at low acceleration. This is a production process in which platelet activation occurs gradually when platelets contact with the tube wall and fibrin polymerizes. Several cells are trapped within the fibrin mesh, predominantly platelets and leucocytes and investigations performed have led to elucidate the role of these components in the tissue healing process. These preliminary studies in equine blood have shown that several growth factors including PDGF-BB, IGF-1, TGF-β1 are released from the clots in a sustained manner over a period of 2-3 weeks of incubation, that the clots can be moulded into different shapes and adapted for potential different uses in surgery acting as scaffolds for wound healing augmentation. Although, L-PRF is frequently used in human maxillofacial surgery and for the treatment of recalcitrant chronic wounds there is no basic or clinical information about this biomaterial in equine regenerative medicine. This study contributes about PRF basic biology in horses and supports biologic translational information to humans and other mammals. TNF-α, IL-4 and IL-1ra were produced by resident leukocytes from PRF clots, whereas PDGF-BB and TGF-β1 were mostly produced by platelet degranulation, although these findings were suggestive that both GF were also produced by leukocytes enmeshed in PRF clots. These findings demonstrate a paramount role of leukocytes in wound healing, either induced or modified by PRF clots in mammals. Furthermore, it is important to consider that TNF-α should be considered a regulatory and consequently beneficial cytokine in PRF clots, because it increases the release of anti-inflammatory cytokines from this biomaterial. The hypotheses were corroborated, because PRF clots produced and released cytokines and GFs over a long term and no practical differences for protein release pattern were noticed between equine PRF clots obtained with the two centrifugation protocols evaluated. However, it is recommendable to incorporate the clinical use of serum supernatant which is a by-product obtained during PRF processing, because it is extremely rich in anabolic GF.

Evaluar el volumen de edema y el recuento leucocitario, plaquetario y de fibrinógenos de quemadura periférica en un modelo animal. Se introdujo en agua a 60 °C y durante 60 s, la pata posterior izquierda de Rattus rovergicus (grupo experimental) o a temperatura ambiente (grupo control). Se realizó el análisis antes y después de la quemadura inducida (a las 4, 8, 12 y 24 h). El volumen del edema se determinó por fotografía ortogonal, los leucocitos y el recuento plaquetario, en un equipo automatizado, y el fibrinógeno por el método gravimétrico. El valor máximo del edema se obtuvo a las 4 h, y de leucocitos a las 24 h. El recuento plaquetario no varió a los diferentes intervalos de tiempo posinflamación. El fibrinógeno se incrementó a las 4 h y 24 h. Este modelo animal induce inflamación sistémica caracterizada por leucocitosis, nivel elevado de fibrinógeno y edema localizado en la zona de inducción. To evaluate the edema volume and leukocyte, platelet, and fibrinogen count of peripheral burn in an animal model. The back left leg of Rattus norvegicus (experimental group) was placed in water at 60 °C for 60 seconds or at room temperature (control group). An analysis was carried out before and after the induced burn (at 4, 8, 12, and 24 h). The edema volume was determined by an orthogonal photo, the leukocyte and platelet counts were determined using automated equipment, and the fibrinogen count was determined using the gravimetric method. The maximum value of the edema was recorded at 4 h and leukocytes at 24 h. The platelet count did not vary at different post-edema time intervals. The fibrinogen level increased at 4 h and 24 h. In this animal model we induced systemic inflammation characterized by leukocytosis and elevated fibrinogen levels, combined with edema located at the induction area.

Os mecanismos envolvidos no processo de reparo de tecidos estão revisados nesse trabalho. O processo de cicatrização ocorre fundamentalmente em três fases: inflamação, formação de tecido de granulação e deposição de matriz extracelular e remodelação. Os eventos celulares e tissulares de cada uma dessas fases estão descritos e discutidos. Os mediadores químicos estão correlacionados com os eventos do processo de cicatrização e as células envolvidas. Especial ênfase é dada à participação dos fatores de crescimento.The mechanisms involved in tissue repair are revised. The wound healing process occurs basically in three phases: inflammation, formation of granulating tissue and extracellular tissue deposition, and tissue remodeling. The cellular and tissue events of each phase are described and discussed. The chemical mediators and their interplay with the wound healing events and cells involved are also discussed. However, especial attention was given to the role played by the growth factors in the tissue repair process.

En condiciones fisiológicas, la activación de las plaquetas circulantes es limitada de manera constitutiva a través de la liberación, a partir del endotelio vascular, de potentes inhibidores de la función plaquetaria tales como el óxido nítrico y prostaciclina. Frente a una injuria vascular, las plaquetas se adhieren firmemente a proteínas expuestas del subendotelio permitiendo la formación del trombo y la detención de la hemorragia. Sin embargo, durante las últimas dos décadas numerosas evidencias revelaron que, además, en ausencia de un aparente daño morfológico pero en situaciones inflamatorias, las plaquetas son capaces de interactuar con el endotelio debido tanto a la disminución de los mecanismos fisiológicos inhibitorios como a un aumento en la expresión de moléculas de adhesión en la superficie de las células endoteliales activadas. Estos descubrimientos no sólo han creado un nuevo paradigma en la biología vascular sino también han abierto un novedoso y extenso campo de estudio asociado a las consecuencias fisio-patológicas de la interacción entre las plaquetas y el endotelio. Fil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina Fil: Schattner, Mirta Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina

Para analisar a variação circadiana dos leucócitos, fibrinogênio e plaquetas, foram utilizados 20 cães machos, sem raça definida, os quais foram divididos em dois grupos de 10 animais. Os cães do grupo I foram tratados com 1,3mg/kg de escina de 12 em 12 horas e os do grupo II sem nenhum tratamento. Goletas de sangue foram feitas em todos os animais às 0 (zero), 4, 8, 12, 16, 20 e 24h do dia para exame dos leucócitos, fibrinogênio e plaquetas. A escina determinou eosinopenia às 8 e 12 horas, monocitopenia às 24h e linfocitose em relação aos animais sadios às 8, 16 e 20h. Na taxa de fibrinogênio houve aumento às 20 e 24h e nas plaquetas diminuição às 0 (zero), 8, 12, 16 e 20h. Pode-se concluir que a escina determina variações circadianas instáveis do número de alguns tipos de leucócitos, plaquetas e quantidade de fibrinogênio em cães sadios. Twenty mongrel male dogs were used to anlyse the circadian variations of leucocyte, fibrinogen and platelet values. They were divided into two groups of ten animals. The first group was treated with 1.3mg/kg of Aescin every 12 hours while the second group was left without treatment. Blood samples were collected in all animals at 0 (zero), 4am, 8am, 12am 4pm, 8pm and 12pm hours of the day to determine leucocyte and platelet count and to evaluate fibrinogen. Aescin produced: eosinopenia at 4am, 8am, 12am and 4pm hours; neutrophilia at 8am, 12am, 8pm, and 12pm hours; monocytopenia at 12pm hour and lymphopenia at 8am, 4am, 8pm an 12pm hours. There was an increase in fibrinogen level at 8pm and 12pm and a decrease in the platelet number at 0 (zero), 8am, 12am, 4pm and 8pm hours. Aescin determines unstable circadian variations in the number of leucocytes, platelets and in the amount of fibrinogen in health dogs.

Los Greyhounds tienen valores hematológicos y bioquímicos diferentes a los de perros de otras razas, incluyendo alto hematocrito (HCT), recuento de eritrocitos, concentración de hemoglobina (HGB), aumento de la viscosidad sanguínea y bajo recuento de leucocitos y plaquetas. Estas diferencias se han atribuido a la propia idiosincrasia de la raza, ya que están presentes en individuos normales. El objetivo del estudio era determinar si esta diferencia en los valores hematológicos se presenta en el Galgo español para poder establecer un rango de referencia para esta raza. Evaluamos hemogramas de 35 Galgos Españoles normales utilizando un dispositivo diagnóstico (LaserCyte, IDEXX). El HCT, recuento de eritrocitos, y HGB tendían a ser más altas y el recuento de plaquetas más bajo que los valores de referencia del dispositivo.

OBJETIVO: Avaliar a importância da interação entre a integrina Mac-1 dos leucócitos (a Mb 2) e a glicoproteína (GP) Iba das plaquetas para o recrutamento de leucócitos após a lesão vascular e o efeito da neutralização da interação Mac-1-GPIba sobre a proliferação celular e a hiperplasia neointimal desencadeadas por lesão vascular. MÉTODOS: Um peptídeo denominado M2 ou anticorpo anti-M2 foi desenvolvido para bloquear a interação Mac-1-GPIba . Esse peptídeo foi injetado e comparado com anticorpo-controle em camundongos C57B1/6J submetidos a lesão vascular da artéria femoral com corda-guia. Um, cinco ou 28 dias após a lesão vascular, as artérias femorais foram retiradas para a realização de morfometria e imuno-histoquímica. RESULTADOS: O bloqueio da interação Mac-1-GPIba promoveu uma redução estatisticamente significativa do número de leucócitos na camada média no primeiro dia após a lesão vascular (controle: 7,9±5,0% do total de células versus anti-M2: 2,0±1,6%, p=0,021), bem como determinou uma diminuição estatisticamente significativa do acúmulo de leucócitos na neoíntima em cinco e 28 dias (controle: 42,3±12,9% versus anti-M2: 24,6±10,8%, p=0,047 e controle: 7,9±3,0% versus anti-M2: 3,3±1,3%, p=0,012; respectivamente). A proliferação celular na camada média do vaso em cinco dias pós-lesão foi reduzida com o bloqueio da interação Mac-1-GPIba (controle: 5,0±2,9% do total de células versus anti-M2: 1,8±0,5%; p=0,043), assim como houve diminuição significativa da proliferação celular na camada íntima do vaso em 28 dias (controle: 3,8±1,7% versus anti-M2: 2,0±1,2%; p=0,047). O bloqueio da interação Mac-1-GPIba também determinou uma redução estatisticamente significativa do espessamento intimal em 28 dias pós-lesão (controle: 10.395±3.549 µm² versus anti-M2: 4.561±4.915 µm²; p=0,012). CONCLUSÃO: O recrutamento de leucócitos após a lesão vascular é dependente da interação Mac-1-GPIba e a neutralização dessa interação inibe a proliferação celular e a formação neointimal. OBJECTIVE: To assess the importance of the interaction between leukocyte integrin Mac-1 (a Mb 2) and platelet glycoprotein (GP) Ib-a for leukocyte recruitment after vascular injury and the effect of the neutralization of the Mac-1-GPIba interaction on cell proliferation and the neointimal hyperplasia triggered by the vascular injury. METHODS: A peptide called M2 or anti-M2 antibody was developed to block the Mac-1-GPIba interaction. This peptide was injected and compared to a control-peptide in C57B1/6J mice submitted to vascular injury of the femoral artery with a guide wire. One, five or 28 days after the vascular injury, the femoral arteries were removed for morphometric and immunohistochemical analyses. RESULTS: The blocking of the Mac-1-GPIba interaction promoted a statistically significant reduction in the number of leukocytes in the neointimal layer on the first day after the vascular injury (control: 7.9±5.0% of the cell total versus anti-M2: 2.0±1.6%, p=0.021), as well as determined a statistically significant decrease in leukocyte accumulation in the neointimal layer on days 5 and 28 (control: 42.3±12.9% versus anti-M2: 24.6±10.8%, p=0.047 and control: 7.9±3.0% versus anti-M2: 3.3±1.3%, p=0.012; respectively). Cell proliferation in the neointimal layer of the vessel five days post-injury was reduced with the blocking of the Mac-1-GPIba interaction (control: 5.0±2.9% of the cell total versus anti-M2: 1.8±0.5%; p=0.043), along with a significant decrease in cell proliferation in the vessel neointimal layer 28 days post-injury (control: 3.8±1.7% versus anti-M2: 2.0±1.2%; p=0.047). The blocking of the Mac-1-GPIba interaction also determined a statistically significant decrease of the intimal thickening 28 days post-injury (control: 10,395±3,549 µm² versus anti-M2: 4,561±4,915 µm²; p=0.012). CONCLUSION: Leukocyte recruitment after a vascular injury depends on the Mac-1-GPIba interaction and the neutralization of this interaction inhibits cell proliferation and neointimal formation.

Os mecanismos envolvidos no processo de reparo de tecidos estão revisados nesse trabalho. O processo de cicatrização ocorre fundamentalmente em três fases: inflamação, formação de tecido de granulação e deposição de matriz extracelular e remodelação. Os eventos celulares e tissulares de cada uma dessas fases estão descritos e discutidos. Os mediadores químicos estão correlacionados com os eventos do processo de cicatrização e as células envolvidas. Especial ênfase é dada à participação dos fatores de crescimento. The mechanisms involved in tissue repair are revised. The wound healing process occurs basically in three phases: inflammation, formation of granulating tissue and extracellular tissue deposition, and tissue remodeling. The cellular and tissue events of each phase are described and discussed. The chemical mediators and their interplay with the wound healing events and cells involved are also discussed. However, especial attention was given to the role played by the growth factors in the tissue repair process.

El diagnóstico de las tendencias suicidas en pacientes con depresión ha sido un problema para los especia- listas en la salud mental, por lo cual es deseable definir marcadores bioquímicos para identificar a los pacientes con tendencias suicidas. En el presente trabajo se analizaron ocho variables bioquímicas en pacientes psiquiátricos con y sin intento de suicidio, así como en un grupo control de voluntarios normales. Las determinaciones bioquímicas en la sangre fueron: triacilgliceroles, colesterol, colesterol asociado a las lipoproteínas de alta densidad (HDL-colesterol), proteínas totales, leucocitos, eritrocitos, plaquetas y receptores plaquetarios a serotonina. Con excepción de las proteínas y los triacilgliceroles, todas las variables mostraron diferencias significativas entre los grupos (ANDEVA o Kruskal-Wallis; p0.05). Los pacientes deprimidos, con y sin intento de suicidio, mostraron valores (pruebas DMS o U de Mann Whitney; p0.05) menores de colesterol, HDL-colesterol y de eritrocitos, así como superiores de plaquetas (p0.01), que el grupo control normal. En contraste, los pacientes con intento de suicidio mostraron valores mayores (p0.001) de leucocitos pero meno- res (p0.001) niveles de receptores plaquetarios a serotonina que los observados en pacientes deprimidos sin intento de suicidio o en los voluntarios normales. El análisis de riesgo relativo, comparado con los voluntarios normales, mostró que cinco variables fueron asociadas con el incremento de riesgo suicida y dos variables con su disminución. No obstante, al refinar el contraste con los pacientes deprimidos sin intento de suicidio, solamente el valor bajo de receptores plaquetarios a serotonina aumentó el riesgo de suicidio (razón entre grupos 13.39; p0.001), mientras que valores menores de leucocitos disminuyeron el riesgo de suicidio (0.0; p0.001). El análisis de leucocitos y de receptores plaquetarios a serotonina abre la posibilidad de que sean utilizados como indicadores potenciales del riesgo suicida en pacientes deprimidos.

El diagnóstico de las tendencias suicidas en pacientes con depresión ha sido un problema para los especialistas en la salud mental, por lo cual es deseable definir marcadores bioquímicos para identificar a los pacientes con tendencias suicidas. En el presente trabajo se analizaron ocho variables bioquímicas en pacientes psiquiátricos con y sin intento de suicidio, así como en un grupo control de voluntarios normales. Las determinaciones bioquímicas en la sangre fueron: triacilgliceroles, colesterol, colesterol asociado a las lipoproteínas de alta densidad (HDL-colesterol), proteínas totales, leucocitos, eritrocitos, plaquetas y receptores plaquetarios a serotonina. Con excepción de las proteínas y los triacilgliceroles, todas las variables mostraron diferencias significativas entre los grupos (ANDEVA o Kruskal-Wallis; p0.05). Los pacientes deprimidos, con y sin intento de suicidio, mostraron valores (pruebas DMS o U de Mann Whitney; p0.05) menores de colesterol, HDL-colesterol y de eritrocitos, así como superiores de plaquetas (p0.01), que el grupo control normal. En contraste, los pacientes con intento de suicidio mostraron valores mayores (p0.001) de leucocitos pero menores (p0.001) niveles de receptores plaquetarios a serotonina que los observados en pacientes deprimidos sin intento de suicidio o en los voluntarios normales. El análisis de riesgo relativo, comparado con los voluntarios normales, mostró que cinco variables fueron asociadas con el incremento de riesgo suicida y dos variables con su disminución. No obstante, al refinar el contraste con los pacientes deprimidos sin intento de suicidio, solamente el valor bajo de receptores plaquetarios a serotonina aumentó el riesgo de suicidio (razón entre grupos 13.39; p0.001), mientras que valores menores de leucocitos disminuyeron el riesgo de suicidio (0.0; p0.001). El análisis de leucocitos y de receptores plaquetarios a serotonina abre la posibilidad de que sean utilizados como indicadores potenciales del riesgo suicida en pacientes deprimidos.

Tesis (Tecnólogo Médico) Durante el almacenamiento en el Banco de Sangre, las plaquetas sufren una serie de cambios físicos, metabólicos y fisiológicos que se denominan lesión por almacenamiento (LA). La LA depende de varios factores, entre los que destacan: métodos de preparación del concentrado, tipo de bolsa utilizado para su almacenamiento, la concentración de plaquetas y el número de leucocitos presentes en la unidad, acumulación de citoquinas, etc. Todos estos factores podrían producir activación plaquetaria y así afectar la calidad del producto, con lo cual se reflejaría en la sobreviva acortada de las plaquetas transfundidas. Basándose en lo anterior, la hipótesis de trabajo fue que la remoción precoz de los leucocitos atenuará la LA en los CPs obtenidos por aféresis. Por tanto, el objetivo de esta investigación fue determinar el papel que juegan los leucocitos en la LA, su contribución al fenómeno de activación de las plaquetas e inducción de la muerte celular prematura. Se estudiaron veinte CP obtenidos mediante dos métodos de aféresis que difieren en el número de leucocitos residuales que permanecen en el producto final, obteniéndose así un CP leucorreducido (Cobe Spectra) y otro estándar (Baxter CS 3000 plus). Las determinaciones se realizaron el día cero (pre-almacenamiento) y el quinto día de almacenamiento. La evaluación de la LA incluía marcadores de la membrana plaquetaria como p-selectina (CD62-P), glicoproteína Ib (CD42b), Fosfatidilserina (Ax. V) y Factor Tisular (CD142) y formación de MPs, los cuales se analizaron por citometría de flujo y citoquinas liberadas por los leucocitos y10 plaquetas activadas (IL-1, IL-6, FNT y RANTES), las cuales se analizaron por la técnica de ELISA. El principal marcador de activación de las plaquetas (p-selectina) se encontró significativamente aumentado en los CP leucorreducidos (p: 0.001) y en los obtenidos en forma estándar (p: 0.02). La expresión de GPIb disminuyó significativamente sólo en las plaquetas no leucorreducidas (p: 0.01). En relación a la actividad procoagulante de las plaquetas, se observó un aumento significativo en la expresión de FS sobre la cara externa de la membrana (p: 0.019) y de MP plasmáticas (p: 0.025) sólo en las plaquetas leucorreducidas; estos cambios se acompañaron de un muy leve aumento en la expresión de FT (p: 0.055). La determinación de citoquinas solubles no mostró cambios significativos con el almacenamiento de plaquetas. Nuestros resultados demuestran que los leucocitos presentes en los concentrados de plaquetas obtenidas por aféresis, no juegan un papel importante en la llamada lesión por almacenamiento. Por otra parte, encontramos que, si bien existen cambios en las plaquetas durante su envejecimiento in vitro, éstos son muy leves e inesperadamente fueron más significativos en las unidades leucorreducidas.

Foram utilizados 20 cães machos, sem raça definida, divididos em dois grupos de 10 para análise da variação circadiana dos leucócitos, fibrinogênio e plaquetas. Todos os cães foram submetidos a um processo inflamatório subcutâneo induzido pela administração de Terebentina. Após 24 horas os animais do grupo 1 foram tratados com duas doses de 1,3mg/kg de escina com intervalos de 12 horas e os cães do grupo II mantidos como testemunha. Coletas de sangue foram feitas em todos os animais às 0, 4, 8, 12, 16, 20 e 24 horas do dia para determinação dos leucócitos, fibrinogênio e plaquetas. A escina determinou nos animais do grupo I monocitose às 0, 8, 12, 16 e 24 horas, linfopenia às 12, 16 e 24 horas, leucocitose às 0, 20 e 24 horas, aumento da taxa de fibrinogênio às 16 e 24 horas e uma diminuição das plaquetas durante todo o dia. Conclui-se que a escina determina variações circadiana instáveis do número de leucócitos, plaquetas e quantidade de fibrinogênio em cães com processo inflamatório. To analyse the circadian variations of the leucocyte, fibrinogen and platelet 20 mongrel male dogs were used divided into two groups of ten animals. The first group was exposed to an inflamatory process induced by the administration of turpentine and after 24 hours the animals were treated with Aesein 1.3mg/kg from 12 to 12 hours. The second group was only exposed to the inflamatory process. Blood samples were performed in all the animals at 0,4am, 8am, 12am, 4pm, 8pm and 12pm hours of the day to examine the parameters. Aescin has determined monocytose at 0,8am, 12am, 4pm and 12pm; linfopenia at 4pm and 12pm; leucocitosis at 0,8pm and 12 pm, as well as an increase in the amount of fibrinogen at 4pm and 12pm; and a decrease in the platelets during all day. Aescin determines unstable circadian variations in the number of leucocyte, platelet and in the amount of fibrinogen in dogs with inflamatory process.