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Summary: Early diagnosis of congenital toxoplasmosis (CT) is necessary to prevent serious complications. The CT is diagnosed by the identification of the parasite in amniotic fluid during pregnancy or at birth by detection of antibodies synthesized by the fetus. The aim of this study was to determine the clinical and biological particularities of CT in a cohort of 11 cases observed in Tunisia and to evaluate the performance of the prenatal and neonatal diagnostic techniques that were used. In all patients, the presumed date of maternal contamination was determined based on the mother''s serological data. Neonatal serological screening included assays for immunoglobulins (Ig) G and IgM by enzyme-linked-immuno-sorbent assay (ELISA), IgM by immuno-sorbent-agglutination-assay (ISAGA), and comparison of the mother–baby immunological profile by western blot IgG and IgM. Seven out of the 11 cases had been diagnosed prenatally; only 3 (43%) had a positive polymerase chain reaction (PCR) test. Ten newborns out of 11 had serological criteria of fetal infection; western blot results were positive in all of them, ISAGA was positive in 2 and ELISA in none. The newborn who had a negative serology had been treated in utero. The date of positivity of the western blot test varied: 6 cases at birth, 2 at 12 days of life and 2 at 1month of life. The 2 patients who had positive ISAGA results had been contaminated during the 3rd trimester of gestation. [Copyright &y& Elsevier]

Objective – The epidemiological variations of visceral leishmaniasis (VL) in Tunisia are studied along with the clinical specificity of the disease in adults.Patients and methods – Six cases of parasitologically confirmed adult VL are described.Results – All patients tested negative for HIV. Clinical manifestations were not always evocative. In fact, two patients were apyretic and splenomegaly was absent in three. Biological disorders were more frequently noted, especially increase of erythrocyte sedimentation rate, anemia, and hyper γ globulinemia.Conclusion – The epidemiological profile of VL in Tunisia is slowly becoming identical to the North Mediterranean model characterized by a high proportion of adult cases. This may be due to the multiplication of immunodepressing factors and the decrease of specific immunization following the less frequent human-parasite contact during childhood. [Copyright &y& Elsevier]

Les derniers cas de paludisme autochtone remontent en Tunisie à 1979. Depuis, seuls des cas d’importation et quelques cas post-transfusionnels sont répertoriés. L’intensification L’intensification récente des échanges avec l’Afrique subsaharienne (lignes aériennes directes, immigration) s’est accompagnée d’une augmentation de l’incidence annuelle des cas. Cet élargissement du réservoir potentiel de parasite associé à la persistance de l’anophélisme pose le problème de la reprise de la transmission de la maladie. Quatre-vingt dix-huit cas de paludisme, tous importés, ont été répertoriés à l’Institut Pasteur de Tunis entre janvier 1999 et décembre 2006. Ils représentent environ 30 % des cas nationaux. 96,5 % des contaminations ont eu lieu dans des pays d’Afrique subsaharienne. Les tunisiens ont représenté 24,5 % des cas contre 75,5 % d’étrangers principalement des Ivoiriens (23 cas) et des Maliens (8 cas). 34,7 % des cas étaient asymptomatiques confirmant l’intérêt du dépistage systématique instauré chez les populations à risque dans le cadre du programme national de contrôle du paludisme. Parmi les 64 sujets symptomatiques, la fièvre (67,2 %) et les troubles digestifs (29,7%) ont été les signes les plus relevés. Comme attendu, Plasmodium falciparum a été l’espèce la plus identifiée (71,4 %). Deux données témoignent plus particulièrement du risque représenté par ces cas d’importation : le portage de gamétocytes par 9,2 % d’entre eux et la concentration de 54 % des cas entre mai et octobre, soit la saison chaude d’activité des anophèles dans le pays. L’augmentation de l’incidence des cas de paludisme d’importation et leur concentration pendant la saison d’activité des anophèles incitent au renforcement de la vigilance vis-à-vis de la maladie, particulièrement dans la perspective du réchauffement climatique favorable au cycle des plasmodiums. [Copyright &y& Elsevier]

Matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight MALDI- TOF mass spectrometry ( MS) is now widely recognized as a powerful tool with which to identify bacteria and fungi at the species level, and sometimes in a rapid and accurate manner. We report herein an approach to identify, at the species level, Leishmania promastigotes from in vitro culture. We first constructed a reference database of spectra including the main Leishmania species known to cause human leishmaniasis. Then, the performance of the reference database in identifying Leishmania promastigotes was tested on a panel of 69 isolates obtained from patients. Our approach correctly identified 66 of the 69 isolates tested at the species level with log (score) values superior to 2. Two Leishmania isolates yielded non-interpretable MALDI- TOF MS patterns, owing to low log (score) values. Only one Leishmania isolate of Leishmania peruviana was misidentified as the closely related species Leishmania braziliensis, with a log (score) of 2.399. MALDI- TOF MS is a promising approach, providing rapid and accurate identification of Leishmania from in vitro culture at the species level. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Résumé: Objectifs: Les objectifs de cette étude sont d’estimer le risque de transmission materno-fœtale de la toxoplasmose ainsi que ses conséquences pour le fœtus et de rappeler l’importance du suivi des nouveau-nés en Tunisie. Patientes et méthodes: Il s’agit d’une étude rétrospective de 94 cas de séroconversions toxoplasmiques pergravidiques diagnostiqués et suivis au laboratoire de parasitologie de l’institut Pasteur de Tunis entre 2005 et 2010. Résultats: Dans notre série, l’amniocentèse a été réalisée pour 60 parturientes. Parmi les liquides amniotiques testés, la recherche de Toxoplasma gondii par PCR a été positive dans 12 cas (12/60, 20 %). Vingt-six cas de toxoplasmose congénitale ont été diagnostiqués dont 14 en postnatal. Le taux de transmission materno-fœtale de T. gondii a donc été de 27,6 % (26/94). Ce risque augmente avec l’âge gestationnel, allant de 19 % lors d’une séroconversion du 1er trimestre à 29,4 % au 2e trimestre et 44,4 % au 3e trimestre. Le suivi des nouveau-nés atteints de toxoplasmose congénitale a montré que 3 seulement étaient symptomatiques. Il s’agissait de 2 cas de choriorétinites toxoplasmiques et d’un cas d’atteinte cérébrale. Dans le cadre de la surveillance sérologique des nouveau-nés, 21 cas ont été perdus de vue et le suivi interrompu dans 29 autres cas après décroissance des IgG antitoxoplasmiques. Discussion et conclusion: Le diagnostic anténatal a permis de diminuer les formes sévères de la toxoplasmose congénitale en Tunisie. Néanmoins, il faut toujours soulever le problème du nombre important des nouveau-nés dont le suivi est incomplet. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Résumé: But: Trois formes de leishmaniose cutanée (LC) sont décrites en Tunisie. L’identification des espèces en cause est utile aussi bien pour préciser les données épidémiologiques que pour la prise en charge des cas. L’objectif de ce travail est d’évaluer la technique de PCR-RFLP dans l’identification des espèces de leishmanies responsables des 3 formes de LC rencontrées en Tunisie et de confronter les résultats de cette technique à ceux de l’électrophorèse des isoenzymes. Patients et méthodes: Soixante et une lésions de LC ont été prélevées. Les prélèvements dermiques ont été mis en culture sur milieu NNN et analysés par PCR ciblant la région ITS1 de l’ADN ribosomal. L’identification d’espèce a été réalisée par électrophorèse des isoenzymes pour les cultures positives et par analyse du profil de restriction des produits de PCR. Résultats: La culture était positive pour 38 (62 %) prélèvements. Le typage iso-enzymatique de 32 isolats a identifié 3 L. infantum, 23 L. major MON-25 et 6 L. tropica MON-8. La PCR était positive pour 60 prélèvements (98,4 %). L’analyse du profil de restriction a permis d’identifier l’espèce dans 56 cas : 12 L. infantum, 38 L. major et 6 L. tropica. Les résultats de la PCR-RFLP étaient concordants avec ceux du typage iso-enzymatique pour les 32 souches identifiées par les 2 techniques. Toutes les identifications étaient compatibles avec la distribution géographique des 3 formes de LC endémiques en Tunisie. Conclusion: Les résultats de la PCR-RFLP sont parfaitement corrélés à ceux du typage iso-enzymatique dans l’identification des leishmanies responsables de LC en Tunisie. Cette technique se confirme une alternative de choix grâce à sa simplicité, sa rapidité d’exécution et surtout sa pratique directement sur les prélèvements lésionnels. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Abstract: Aim: Intestinal microsporidiosis are among the most frequent opportunistic diseases in immunocompromised subjects. This study aimed to evaluate the contribution of PCR for a better detection and species identification of microsporidia in stool specimens of HIV-infected patients. Patients and methods: Stool samples obtained from 119 HIV-infected Tunisian subjects were screened for intestinal microsporidiosis by light microscopy using Weber''s modified Trichrome stain and by a PCR method using universal primers V1/PMP2 which amplified a common fragment of the small subunit rRNA gene of microsporidia. The obtained PCR products were then sequenced using an ABI PRISM 377 DNA sequencer. Results: The results showed a better sensitivity of PCR in the detection of microsporidia with an infection rate of 14.3% significantly higher than that of 6.7% obtained by light microscopy (p =0.03). As previously described, intestinal microsporidiosis was associated with low CD4 cell counts; 23.9% infection rate in patients having CD4 cell count under 200/mm3 against 5.6% in patients with higher CD4 cell count (p =0.008). The sequencing of 15 out of the 17 positive PCR products has confirmed in all cases the species identified based on the PCR fragment size i.e., 250pb for Enterocytozoon bieneusi (seven cases) and about 270pb for Encephalitozoon intestinalis (nine cases); one case revealed a double infection. Conclusion: PCR proved to be more effective than classical Trichrome stain for the diagnosis of intestinal microsporidiosis. Moreover, the ability of PCR to identify the species involved could also be useful for cases management. [Copyright &y& Elsevier]

Summary: Background: In Tunisia, Cryptosporidium is frequently identified in diarrheic stools of children and immunocompromised patients. The infection is usually self-limited in immunocompetent populations, but can be severe and life-threatening in immunocompromised individuals. Cryptosporidiosis is well-documented in patients with the human immunodeficiency virus; however, few data are available concerning children with primary immunodeficiencies (PIDs). Patients and methods: A retrospective study was conducted on 5 cryptosporidiosis cases diagnosed in 11 children with PIDs. Cryptosporidium was systematically investigated when patients presented chronic diarrhea. Stool samples were examined for the parasite oocysts by modified Ziehl-Neelsen staining, and DNA was systematically extracted for a nested polymerase chain reaction (PCR). The species were identified by the analysis of restriction patterns. Epidemiological and clinicobiological data were presented for each patient. Results: All cryptosporidiosis cases presented a CMH class II deficiency syndrome. Chronic diarrhea was associated with failure to thrive in all cases. PCR provided the diagnosis in all patients, while Ziehl-Neelsen staining revealed Cryptosporidium oocysts in only 3 cases. Species identification yielded Cryptosporidium hominis in 2 cases, Cryptosporidium meleagridis in 1 case, and Cryptosporidium parvum in 1 case; a C. hominis/C. meleagridis co-infection was observed in the last case. C. hominis was isolated in children from rural areas, suggesting that the infection could have been contracted in the hospital and thus a probability of nosocomial transmission. One of the C. hominis carriers developed sclerosing cholangitis with a high parasite load. Conclusion: Cryptosporidiosis with serious clinical symptoms is observed in PID patients, particularly those with CMH class II deficiency syndrome. Early, regular, and repeated screening, improved by PCR, is recommended in this group of patients. The predominance of C. hominis, the anthropophilic species, in children from rural areas should emphasize hygiene measures in care centers where PID cases are treated. [Copyright &y& Elsevier]

Abstract: Cutaneous and visceral leishmaniasis (VL, CL) represent the most frequent vector-borne diseases in Tunisia. Their biological confirmation is necessary before the administration of restricting, expensive and toxic specific treatments. Retrospective evaluation of the contribution of Leishmania cultures on NNN medium in leishmaniasis diagnosis have been done using the data of 375 cultures concerning 214 CL cases and 125 VL cases consecutively recruited in Pasteur Institute of Tunisia between 1995 and 2007. The global sensitivity of the culture in the course of CL was of 68.2%. It was significantly higher during zoonotic CL (78.8%) compared to that during sporadic CL (54.9%); p <0.001. This difference is explained by the easier thrust in NNN medium of Leishmania (L.) major, the agent of zoonotic CL than that of L. infantum, particularly its zymodeme MON-24, agent of sporadic CL. In the course of VL, and in spite of the better sensitivity of bone marrow aspirates (BMA) culture (70.8%), the blood buffy-coat, which permit to avoid the trauma induced by BM aspiration gave promising results (58.2%), the difference being not significant. Besides, in the course of both CL and VL, the direct examination of smears is revealed more sensitive, respectively 89.7% and 93.4% (p <0.01 and p <0.01). Although, systematic cultures practise, in parallel with direct examination, is recommended. In fact, in addition of straightening out some diagnosis, 22 cases in our series, the culture provide the isolation and the isoenzymatic identification of the causative species and strains allowing a better comprehend of parasite life cycles and a disposing of important epidemiological data for suitable control measures. As known with all cultures, those of Leishmania are also exposed to the contamination problem, which reached 5.9% in our study. In conformity with previsions, the contamination concerned much more cutaneous samples (8.4%) than blood or BM ones (2.5%; p =0.015). [Copyright &y& Elsevier]

Summary: Monthly serological screening of non immune pregnant women is recommended for prevention of congenital toxoplasmosis. However, this screening is often interrupted before delivery. We report a case of congenital toxoplasmosis following infection occurring late in pregnancy. This documented case highlights the need for a final routine serological test, 2–3 weeks post-partum for all seronegative pregnant women. In fact, the screening of congenital toxoplasmosis cases allows the early administration of specific treatment that avoids later severe complications such as chorioretinitis. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Summary: Microsporidiosis and cryptosporidiosis are emerging opportunistic infections responsible for intestinal manifestations that are often severe in immunocompromised patients. A case of microsporidiosis-cryptosporidiosis coinfection is reported in an HIV-infected newborn. The patient was a 17-day-old female, exclusively breastfed and with no contact with animals. Microsporidiosis and cryptosporidiosis were diagnosed after systematic screening in stool samples using both specific staining and PCR. Two species of microsporidia, Encephalitozoon intestinalis and Enterocytozoon bieneusi, and Cryptosporidium hominis were identified. The contamination of the newborn probably resulted from direct human-to-human transmission during close contact with the mother (who had diarrhea and refused stool sampling). This report highlights the usefulness of the screening of intestinal microsporidiosis and cryptosporidiosis in HIV-infected subjects for better management. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Introduction Trois formes de leishmaniose cutanée (LC) sont endémiques au Maghreb : la LC sporadique due à Leishmania infantum , la LC zoonotique due à L . major et la LC dite chronique due à L . tropica . Ces formes sont restées longtemps cantonnées à des étages bioclimatiques distincts. Des extensions récentes de leurs aires de répartition ont induit l’émergence de foyers mixtes où plus d’une espèce coexistent, empêchant la distinction entre ces différentes formes sur la base des seuls critères géographiques. L’objectif de ce travail est d’identifier des critères cliniques qui seraient associés à chacune des formes en question. Matériels et méthodes Cent cinquante et un cas de LC ont été étudiés. Tous ont été confirmés biologiquement à l’examen direct et/ou en culture. L’espèce de Leishmania en cause a été systématiquement identifiée par électrophorèse des iso-enzymes et/ou par PCR-RFLP (ITS 1). Le nombre et la localisation des lésions, ainsi que leur aspect morphologique et le mois de leur apparition ont été systématiquement relevés. Résultats L’âge des patients a varié de 8 mois à 74 ans avec une moyenne de 28,6 années ; 81 (53,6 %) étaient de sexe féminin. Parmi les isolats identifiés, 36 correspondaient à L . infantum , 97 à L . major et 18 à L . tropica . Les lésions de LCS et de LCC semblent se déclarer plus tardivement, 61,1 % (22/36) entre décembre et février, que celles de LCZ, uniquement 20,6 % (20/97), p < 0,001. Les lésions de LCZ étaient souvent multiples 73,2 % (71/97) et localisées aux membres 63,9 % (62/97), alors que celles de LCS et LCC étaient plutôt uniques (91,7 % (33/36) et 83,3 % (15/18) respectivement) et touchaient le visage 86,1 % (31/36) et 77,8 % (14/18), ( p < 0,001). Les aspects morphologiques des lésions étaient également différents ; celui ulcéro-croûteux prédominant avec L . major 73,4 % (69/94) alors que celui érythémateux infiltré était plus fréquent avec L . infantum 71,8 % (23/32), ( p < 0,001). Conclusion La localisation des lésions, leur nombre, leur aspect morphologique et le mois de leur apparition facilitent l’identification de la forme de LC en cause, particulièrement dans les régions où plus d’une espèce parasitaire sont endémiques. Une telle donnée étant fort utile pour la prise en charge des patients et l’adaptation des mesures de contrôle à engager. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Introduction L’amélioration des techniques chirurgicales et des protocoles d’immunosuppression a permis une augmentation exponentielle du nombre de transplantations d’organes mais aussi des complications infectieuses associées dont la leishmaniose viscérale (LV). Nous rapportons 2 cas de LV diagnostiqués chez des patients transplantés du rein (TR) avec les particularités clinico-biologiques, diagnostiques, thérapeutiques et évolutives associées. Observation Il s’agit de 2 hommes âgés de 29 et de 35 ans dont les TR respectives ont été réalisées 1 an et demi et 6 ans auparavant et compliquées de dysfonction chronique du greffon. Le diagnostic de LV a été réalisé par le myélogramme, indiqué pour le premier patient dans le cadre du bilan d’extension d’un lymphome B hépatique et du greffon et dans le 2 e cas devant une pancytopénie avec fièvre intermittente. Dans les 2 cas, le taux des gammaglobulines était bas, une réduction du traitement immunosuppresseur était nécessaire et l’utilisation d’Antimoniate de Méglumine était rapidement compliquée de pancréatite aiguë motivant son arrêt. L’évolution était rapidement favorable après un traitement par Amphotéricine B (AmB) liposomale chez le 1 er patient alors qu’une rechute (diagnostiquée par le suivi régulier de la charge parasitaire par PCR dans le sang périphérique) était survenue chez le 2 e patient 2 mois après l’arrêt du traitement par AmB, nécessitant le recours à une 2 e cure. Conclusion La LV après TR est une infection opportuniste rare mais redoutable du faite de sa présentation souvent déroutante et des multiples effets secondaires et interactions avec les immunosuppresseurs des thérapeutiques conventionnels (antimoniés et AmB). Une meilleure approche diagnostique grâce au dosage de la charge parasitaire dans le sang périphérique et une meilleure prise en charge thérapeutique par l’utilisation des formes liposomales de l’AmB en 1 re intention ont permis d’améliorer nettement son pronostic sur ce terrain particulier. Le dépistage systématique d’une éventuelle infection par la réalisation d’une sérologie de la leishmaniose dans le cadre du bilan pré-greffe chez le receveur et chez le donneur ainsi que sur les produits sanguins avant leur administration restent les meilleures mesures préventives. [ABSTRACT FROM AUTHOR]