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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O vírus herpes simples tipo-1 (HSV-1) promove uma infecção permanente de elevada prevalência em adultos, com potencial implicações em indivíduos imunocomprometidos. A terapia padrão para o tratamento dos sintomas de infecções por HSV inclui o aciclovir e seus análogos que possuem o mesmo mecanismo de ação, atuam através da inibição da enzima DNA-polimerase envolvida na síntese de novos vírions na célula infectada. As plantas medicinais tem apresentado potencial efeito antiviral como a espécie Spondias mombin (Anacardiaceae), conhecida popularmente como cajazeira, uma planta frutífera, distribuída no Brasil e em outros países das Américas. S. mombin apresenta evidências não-clínicas de efeito antiviral, além de ser utilizada popularmente para tratar herpes. A sua ação antiviral é principalmente relacionada a presença de taninos hidrolisáveis com potencial contra o HSV-1 e coxsakie vírus, sendo que, um dos metabólitos ativos parece ser a geranina. Nesse sentido, este estudo teve o objetivo de investigar o mecanismo de ação antiviral do extrato hidroetanólico e frações das folhas de S. mombin e da geranina frente ao HSV-1, bem como, caracterizar as substâncias presentes no extrato e quantificar o marcador geranina. Para isso, o perfil fitoquímico do extrato foi analisado por CL-EM e o teor de geranina foi quantificado por um método desenvolvido e validado por CLUE-DAD. Quanto aos ensaios biológicos, diferentes concentrações de amostras foram usadas para avaliar a atividade anti-herpes in vitro (anti-HSV-1) em ensaios virucida, pós-infecção, adesão e penetração. O mecanismo de ação antiviral da geranina foi também investigado in silico através da análise de sua interação com as glicoproteínas gB e gD da superfície do HSV-1. Simulações de docking molecular foram realizadas para ambos a fim de determinar a interação da geranina no sítio alvo. A posição de ligação foi otimizada posteriormente considerando a flexibilidade das glicoproteínas. A análise fitoquímica das amostras foi realizada por CL-EM e revelou a presença de 22 substâncias, das classes dos taninos hidrolisáveis, flavonoides O-glicosilados, ácidos fenólicos e um carboidrato. O extrato, a fração rica em taninos e a geranina mostraram atividade virucida in vitro através do bloqueio da adesão viral, mas não foi observada significativa inibição da penetração viral. As abordagens in silico demonstraram um grande número de potenciais interações intermoleculares fortes como ligações de hidrogênio entre a geranina e o sítio de atividade das glicoproteínas, particularmente a glicoproteína gB. Experimentos in silico indicaram que a geranina é pelo menos parcialmente responsável pela atividade anti-herpes por meio da interação com a glicoproteína de superfície viral gB, que é responsável pela adsorção viral. Adicionalmente, foi realizada a quantificação da geranina no extrato através de metodologia desenvolvida e validada por CLUE-DAD, onde foi obtido o teor de 193,8 µg de geranina por mg de extrato. Esses resultados destacam o potencial terapêutico anti-herpético do extrato hidroetanólico das folhas de S. mombin. No entanto, mais estudos são necessários para validar a atividade anti-herpética in vivo, bem como sua eficácia em humanos. The herpes simplex virus type-1 (HSV-1) promotes a permanent infection of high prevalence in adults, with potential implications in immunocompromised individuals. Standard therapy for the treatment of symptoms of HSV infections includes acyclovir and its analogues, which have the same mechanism of action, act by inhibiting the DNA polymerase enzyme involved in the synthesis of new virions in the infected cell. Medicinal plants have shown promising antiviral effect as Spondias mombin species (Anacardiaceae), popularly known as cajazeira, is a fruitful plant, distributed in Brazil and other countries in the Americas. S. mombin presents non-clinical evidence of antiviral effect, added to popular use to treat herpes. Its antiviral action is mainly related to the presence of hydrolyzable tannins which act against HSV-1 and coxsakie virus, and one of the bioactive metabolites appears to be geraniin. In this sense, this study aimed to investigate the mechanism of antiviral action of the extract and fractions of the leaves of S. mombin and geraniin against HSV-1, as well as to identify the substances present in the extract and quantify the content of geraniin. For this, the phytochemical profile of the extract by LC-MS and the geraniin content was quantified by a method developed and validated by UFLC-DAD. For biological assays, different concentrations of samples were used to evaluate the in vitro antiherpes activity (anti-HSV-1) in virucidal, post-infection, attachment, and penetration assays. The mechanism of action of geraniin was investigated considering the glycoproteins gB and gD of HSV-1 surface as potential molecular targets. Molecular docking simulations were carried out for both in order to determine the possible binding mode position of geraniin at the activity sites. The binding mode position was posteriorly optimized considering the flexibility of the glycoproteins. The chemical analysis of samples was performed by LC‑MS and revealed the presence of 22 substances, which are hydrolysable tannins, O-glycosylated flavonoids, phenolic acids, and a carbohydrate. The extract, tannin-rich fraction and geraniin showed important in vitro virucidal activity through blocking viral attachment but showed no relevant inhibition of viral penetration. The in silico approaches demonstrated a high number of potential strong intermolecular interactions as hydrogen bonds between geraniin and the activity site of the glycoproteins, particularly the glycoprotein gB. In silico experiments indicated that geraniin is at least partially responsible for the anti-herpes activity through interaction with the viral surface glycoprotein gB, which is responsible for viral adsorption. Additionally, the quantitative analyses of geraniin in the extract by UFLC-DAD presents a content of 193.8 µg of geraniin per mg of extract. These results highlight the therapeutic potential of S. mombin antiherpes treatment and provides support for its popular purposes. However, further studies are required to validate the antiviral activities in vivo, as well as efficacy in humans.

O ácido ferúlico (AF) é um constituinte fitoquímico pertencente ao grupo dos polifenois encontrado principalmente no farelo de arroz e de milho, com destaque para sua atividade fotoprotetora e antioxidante. Assim, o AF vêm sendo amplamente estudado para aplicação em formulações fotoprotetoras e antienvelhecimento cutâneo. No desenvolvimento de formulações tópicas os ensaios de liberação in vitro apresentam-se como um ensaio rápido, de baixo custo e que possibilitam resultados preliminares. O uso do AF é limitado pela instabilidade da molécula frente à luz e/ou oxidação. Diante disto, sua estabilidade pode ser melhorada através da complexação com ciclodextrinas, dispersão em polímeros ou inclusão em ciclodextrinas seguido da associação de um polímero formando um sistema multicomponente. Assim, objetivou-se o desenvolvimento de sistemas multicomponentes com ciclodextrinas e polímeros hidrofílicos utilizando ácido ferúlico e a obtenção de um modelo de membrana que seja semelhante à composição da pele humana para ensaios de liberação in vitro. A membrana foi obtida pela impregnação de uma solução lipídica em membrana sintética e caracterizadas por Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Microscopia de Força Atômica (MFA) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Formulações gel e gelcreme contendo AF 0,5% (p/p) foram avaliadas quanto à estabilidade e liberação in vitro na membrana otimizada através da célula de difusão de Franz. No desenvolvimento dos complexos multicomponentes procedeu-se estudos de dinâmica molecular e solubilidade em fase aquosa. Após seleção da ciclodextrina e polímero para compor os sistemas, os mesmos foram obtidos pelos métodos de malaxagem e rotaevaporação, caracterizados por DSC e TG (termogravimetria), difração de raios-X (DR-X) e espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). Além disto, foram avaliados quanto à estabilidade oxidativa e atividade antioxidante. As técnicas utilizadas para a caracterização da membrana obtida, permitiram demonstrar a ocorrência de impregnação da solução lipídica. As formulações foram estáveis quando armazenadas a 4 ºC ± 2 °C. Os resultados da liberação in vitro utilizando a membrana otimizada sugerem que esta pode ser aplicada como uma membrana acessível e simples na liberação in vitro de substâncias ativas. Com relação ao desenvolvimento dos sistemas multicomponentes, através das técnicas de caracterização foi possível compreender as interações entre o AF, ciclodextrinas e polímeros. As técnicas de obtenção dos sistemas mostraram-se adequadas, com alto de teor de incorporação do ativo. Destacando-se o método de obtenção por malaxagem, que apresentou rendimento consideravelmente maior quando comparado ao método por rotaevaporação. As ciclodextrinas e os polímeros selecionados possuíram potencial para serem empregados em sistemas multicomponentes. Uma vez que aumentaram a estabilidade do AF frente a altas temperaturas, como também auxiliaram na transição do estado cristalino para amorfo do fármaco, devido à inserção do ativo dentro da cavidade e interação com o polímero. Para a estabilidade oxidativa verificou-se, que os componentes do sistema conferiram significativa estabilidade para o AF. Na atividade antioxidante, em geral, os complexos multicomponentes potencializaram a atividade do AF. Os resultados sugerem a formação de sistemas multicomponentes estáveis, viabilizando otimização do ativo. Fornecendo subsídios para incorporação destes sistemas em formulações semissólidas. Ferulic acid (FA) is a phytochemical constituent pat of the polyphenols group which are found mainly in rice and corn meal, with emphasis on its photoprotective and antioxidant activity. Thus, FA has been widely studied for application in photoprotective and anti-aging skin formulations. In the development of topical formulations, in vitro skin release assays present themselves as a fast, low-cost assay that enable preliminary results. The use of FA is limited by the instability of the molecule in the face of light and/or oxidation. In view of this, its stability can be improved through complexation with cyclodextrins, dispersion in polymers or inclusion in cyclodextrins followed by the association of a polymer forming a multicomponent system. Thus, the objective was to obtain a membrane model that is similar to the composition of human skin for in vitro skin release assays and development of multicomponent systems with cyclodextrins and hydrophilic polymers using ferulic acid. The membrane was obtained by impregnation of a lipid solution in synthetic membrane and characterized by Differential Exploratory Calorimetry (DSC), Atomic Force Microscopy (AFM) and Scanning Electron Microscopy (SEM). Gel and cream-gel formulations containing AF 0.5% (w/w) were evaluated for stability and in vitro release through the optimized membrane in franz diffusion cell. In the development of multicomponent complexes, studies of molecular dynamics and solubility in aqueous phase were carried out. After selection of cyclodextrin and polymer to make up the systems, they were obtained by the methods of kneading and evaporation rotary, characterized DSC and TG (thermogravimetry), X-ray diffraction (DR-X) and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). In addition, they were evaluated for oxidative stability and antioxidant activity. The techniques used to characterize the obtained membrane allowed to demonstrate the occurrence of impregnation of the lipid solution. The formulations were stable when stored at 4 ºC ± 2 °C. The results of in vitro release using the optimized membrane suggest that it can be applied as an accessible and simple membrane in the in vitro release of active substances. Regarding the development of multicomponent systems, through characterization techniques it was possible to understand the interactions between FA, cyclodextrins and polymers. The techniques of obtaining the multicomponent systems were adequate, with high incorporation content of the asset. The method of obtaining by kneading was highlighted, which presented considerably higher yield when compared to the method by evaporation rotary. The cyclodextrins and polymers selected had the potential to be used in multicomponent systems. Since they increased the stability of FA against high temperatures, they also assisted in the transition from crystalline to amorphous state of the drug, due to the insertion of the active inside the cavity and interaction with the polymer. For oxidative stability, it was verified that the components of the system conferred significant stability for FA. In antioxidant activity, in general, multicomponent complexes enhanced FA activity. The results suggest the formation of stable multicomponent systems, enabling optimization to the asset. Providing subsidies for the incorporation of these systems in cosmetic formulations.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A hipertensão e a Diabetes Mellitus são doenças em ascensão no mundo e podem causar várias complicações cardiovasculares. Diversos fármacos apresentam eficácia no tratamento dessas doenças, entretanto, muitos apresentam efeitos adversos e limitações de eficácia. O pericarpo do fruto de P. edulis f. flavicarpa O. Degener (maracujá amarelo), considerado um resíduo da indústria alimentícia é rico em compostos bioativos. Assim, devido à necessidade da busca por novos tratamentos para a hipertensão e diabetes, e com o intuito de estimular o desenvolvimento de fitoterápicos com espécies nativas do Brasil, o estudo teve como objetivo avaliar a composição fitoquímica, o perfil de toxicidade e o potencial efeito farmacológico de extratos do pericarpo em modelo não clínico de hipertensão e de diabetes. Para atingir os objetivos, a metodologia do estudo foi dividida nas seguintes partes: i: estudo fitoquímico, avaliação da atividade antioxidante in vitro e a avaliação da toxicidade oral aguda ii: avaliação não clínica da atividade antihipertensiva em modelo ex vivo de artérias isoladas e em modelo crônico de ratos espontaneamente hipertensos; iii avaliação não clínica aguda e crônica da atividade antidiabética em modelos de diabetes tipo 1, induzido por streptozotocina. Para o desenvolvimento do estudo foram produzidos dois extratos, um aquoso, preparado por decocção (AFA) e um hidroetanólico (AFM), obtido por maceração, a partir da farinha do pericarpo (pericarpo seco e triturado) de P. edulis. Os metabólitos secundários dos extratos foram identificados por CCD, CLUE-UV/DAD e CLAE-ESI-MSn , sendo os flavonoides Cglicosilados os metabólitos secundários mais encontrados em AFA e AFM. Dentre os flavonoides identificados, foi possível quantificar o teor de vicenina-2, orientina, isoorientina, vitexina e isovitexina por CLAE-QqQ-MS/MS. O polissacarídeo pectina foi encontrado apenas no extrato AFA, através de cromatografia de exclusão estérica de alto desempenho e RMN, o seu teor foi de 34,3%. De acordo com os resultados obtidos da avaliação da toxicidade oral aguda, os extratos AFA e AFM foram classificados na categoria 5 pelo GSH (Globally Harmonised Classification System for Chemical Substances and Mixtures) com DL50 >2000mg/kg, visto que, não apresentaram sinais de toxicidade aguda. O ensaio de avaliação antioxidante in vitro mostrou que os extratos têm boa atividade antioxidante pelos ensaios de CAT, poder redutor e DPPH. Na avaliação do efeito antihipertensivo foi verificado em modelo ex vivo de artéria isolada que o extrato AFM apresentou o melhor perfil de vasorelaxamento, quando comparado com AFA, esse efeito pode ser devido à abertura dos canais de potássio. Além disso, o extrato AFM nas doses 200 e 400 mg/Kg mostrou efeito hipotensivo significativo após 28 dias de tratamento e melhorou a função vascular em artéria mesentérica. Isso foi verificado pela diminuição da hipercontratilidade vascular e aumento do efeito vasorelaxante em resposta ao nitroprussiato de sódio e a Acetilcolina. Houve também uma diminuição na disfunção endotelial que pode ser atribuída ao aumento da biodisponibilidade do óxido nítrico. Assim, nossa hipótese é que todos esses efeitos foram capazes de contribuir para a redução da resistência vascular periférica, causando um efeito hipotensivo significativo. Estes resultados são inéditos para o pericarpo de P. edulis. Além disso, houve uma diminuição nos níveis plasmáticos de MDA no coração e um aumento da glutationa, sugerindo uma diminuição no estresse oxidativo, bem como um aumento no plasma de citocinas anti-inflamatórias como a IL-10. Na avaliação aguda da atividade antidiabética, observou-se que os extratos AFA e AFM nas doses de 400 e 600 mg/Kg de forma adjuvante a insulina conseguiram reduzir de forma significativa a glicemia, quando comparado aos ratos diabéticos que receberam apenas a insulina, sendo esse efeito mais significativo com tratamento com AFA. No estudo crônico de 60 dias esse efeito foi confirmado sendo observado uma redução significativa da glicemia com o tratamento dos extratos AFA e AFM na dose de 400 mg/Kg. Foi verificado ainda uma diminuição do MDA no fígado e uma dimunição de MPO no coração e rim, sugerindo que os extratos podem agir diminuindo o extresse oxidativo e a inflamação ocasionada na diabetes. A fibrose renal também foi diminuída com o tratamento crônico. Portanto, os estudos toxicológicos e farmacológicos apontaram que o extrato AFA e AFM, obtido de um resíduo industrial mostrou-se seguro e tem potencial para a obtenção de novos fitoterápicos com ação na hipertensão e na diabetes tipo 1. Hypertension and Diabetes Mellitus are diseases on the rise in the world and can cause several cardiovascular complications. Several drugs have efficacy in the treatment of these diseases, however, many have adverse effects and limitations of efficacy. The peel of the fruit of P. edulis f. flavicarpa O. Degener (yellow passion fruit), considered a waste from the food industry, is rich in bioactive compounds. Thus, due to the need to search for new treatments for hypertension and diabetes, and in order to stimulate the development of herbal medicines with species native to Brazil, the study aimed to evaluate the phytochemical composition, the toxicity profile and the pharmacological potential of P. edulis peel extracts in non-clinical models of hypertension and diabetes. Methodology was divided into the following parts: i: phytochemical study, assessment of antioxidant activity in vitro and acute oral toxicity ii: non-clinical assessment of antihypertensive activity in an ex vivo model of isolated arteries and in chronic model of spontaneously hypertensive rats; iii acute and chronic non-clinical evaluation of antidiabetic activity in models of type 1 diabetes, induced by streptozotocin. Two extracts were produced (aqueous, prepared by decoction-AFA and hydroethanolic -AFM, obtained by maceration) from the peel flour (dry and crushed peel) of P. edulis. Phytochemical analysis was performerd by CCD, UHPLC/UV-DAD and HPLC-ESI-MSn. In both extracts C-glycosylated flavonoids were identified. Among the identified flavonoids, it was possible to quantify the content of vicenin-2, orientin, isoorientin, vitexin and isovitexin by HPLC-QqQ-MS/MS. The polysaccharide pectin was found only in the AFA extract, through high performance steric exclusion chromatography and NMR, its content was 34.3%. According to the results obtained in acute oral toxicity, extracts were classified in category 5 by GSH (Globally Harmonized Classification System for Chemical Substances and Mixtures) with LD50> 2000mg/kg, since they did not show signs of acute toxicity. The in vitro antioxidant assay showed that the extracts have good antioxidant activity observed by TAC, reducing power and DPPH tests. In the evaluation of the antihypertensive effect, it was verified in an ex vivo model of isolated artery that the AFM extract had the best relaxation profile, when compared to AFA. It effect may be due to the opening of the potassium channels. In addition, the AFM extract at doses 200 and 400 mg/kg, orally, showed a significant hypotensive effect after 28 days of treatment and improved vascular function in the mesenteric artery. This was verified by a decrease in vascular hypercontractility and an increase in the vasorelaxant effect in response to sodium nitroprusside and acetylcholine. There was also a decrease in endothelial dysfunction that can be attributed to the increased bioavailability of nitric oxide. Thus, our hypothesis is that all these effects were able to contribute to the reduction of peripheral vascular resistance, causing a significant hypotensive effect. These results are unprecedented for the pericarp of P. edulis. In addition, there was a decrease in plasma MDA levels in the heart and an increase in glutathione, suggesting a decrease in oxidative stress, as well as an increase in plasma of anti-inflammatory cytokines such as IL-10. In the acute in vivo antidiabetic model, it was observed that the extracts at doses of 400 and 600 mg/kg associated with insulin were able to significantly reduce blood glucose, when compared to diabetic rats that received only insulin, being this effect more significant with AFA treatment. In the chronic antidiabetic model, the treatment with the extracts during 60 days caused a significant reduction in glycemia observed at a dose of 400 mg/kg. In addition, extracts decreased MDA in the liver and MPO in the heart and kidney, suggesting that the extracts may act by reducing oxidative stress and inflammation caused in diabetes. Renal fibrosis was also reduced with chronic treatment. Taken together, toxicological and pharmacological studies proved the safe and the potential effect of P.edulis peel fruit extracts in development new phytoterapics. 2021-10-19

A principal estratégia de controle das doenças transmitidas pelo mosquito Aedes aegypti é a eliminação do vetor, principalmente em sua fase larval. Os larvicidas e inseticidas comerciais apresentam toxicidade ambiental. Nesse contexto surgem os produtos naturais como alternativas para solucionar essa problemática. O objetivo desse estudo foi desenvolver e caracterizar formulações contendo cinamato de pentila e avaliar sua atividade larvicida para o Aedes aegypti. O cinamato de pentila foi obtido por semissíntese através da esterificação do ácido cinâmico. Este composto foi caracterizado e sua pureza determinada por RMN 1H e CLUE-EM/EM. Foram realizados ensaios para avaliar o efeito do cinamato de pentila sobre larvas L3 e em mosquitos adultos de Ae. Aegypti. Foi observada uma atividade larvicida com CL50 de 19,9 μg.mL-1 , e em mosquitos adultos na dose de 200 μg por frasco teste, 80,8 ± 3,8 % de mortalidade em 2 h. Foram produzidas nanoemulsões com as lecitinas comerciais PHOSAL® 50+ (PHO), LIPOID® S 20 (L20) e LIPOID® S 75- 3 (L75) por homogeneização com agitação mecânica e ultra turrax. As nanoemulsões foram submetidas à secagem por atomização para a obtenção de micropartículas sólidas, que foram caracterizadas por FTIR, MEV, DSC e TG. As nanoemulsões obtidas por agitação com turrax apresentaram menores tamanhos de gotícula, sendo a de PHO: 81,0 ± 1,8 nm; L20: 120,4 ± 4,9 nm e L75 com 150,9 nm. As nanoemulsões de PHO se mostraram as mais estáveis durante 30 dias de observação, também foram as que apresentaram maior teor de cinamato de pentila com 66,0 ± 0,5%. As imagens obtidas por MEV evidenciaram que as micropartículas formadas pelas diferentes lecitinas tiveram aspecto semelhante entre elas. Nos espectros de FTIR foram observados sinais de estiramento característicos do cinamato de pentila e dos excipientes e pelas técnicas de DSC e TG foi possível ver um aumento da estabilidade do composto incorporado nas micropartículas sólidas. O estudo preliminar de toxicidade em zebrafish demonstrou evidências de toxicidade do cinamato de pentila em baixas concentrações, entretanto, futuros estudos deverão ser realizados para a influência do solvente neste tipo de modelo. As nanoemulsões e micropartículas produzidas se mostraram adequadas para viabilizar o uso em água desse éster com potencial uso como larvicida e adulticida, abrindo perspectivas para estudos com outros compostos. The main strategy for controlling diseases transmitted by the Aedes aegypti mosquito is the elimination of the vector, mainly in its larval stage. Commercial larvicides and insecticides shows environmental toxicity. In this context, natural products show as alternatives to solve this problem. The aim of this study was to develop and characterize formulations containing pentyl cinnamate and evaluate its larvicidal activity for Aedes aegypti. The pentyl cinnamate was obtained by semisynthesis through the esterification of cinnamic acid. This compound was characterized and its purity determined by NMR 1H e 13C, GC-MS and UHPLCMS/MS. Pentyl cinnamate activity tests were performed on L3 larvae and on adult mosquitoes of A. aegypti, obtaining a larvicidal activity with LC50 of 19.9 μg.mL-1 , and against adult mosquitoes at a dose of 200 μg per bottle test, 80.8 ± 3.8% mortality in 2 h. Nanoemulsions were produced with PHOSAL® 50+ (PHO), LIPOID® S 20 (L20) and LIPOID® S 75-3 (L75) lecithins by homogenization with mechanical agitation and ultra turrax. The nanoemulsions were subjected to spray drying to obtain solid microparticles, which were characterized by FTIR, SEM and thermal analysis by DSC and TG. The nanoemulsions obtained by agitation with turrax showed smaller droplet sizes, being that of PHO: 81.0 ± 1.8 nm; L20: 120.4 ± 4.9 nm and L75 with 150.9 nm. The PHO nanoemulsions proved to be the most stable during 30 days of observation, they were also the ones that showed higher content of pentyl cinnamate whith 66.0 ± 0.5%. The images obtained by SEM showed that the microparticles formed by the different lecithins had a similar aspect between them. In the FTIR spectra, stretching signals characteristic of the pentyl cinnamate and excipients were observed and by DSC and TG techniques it was possible to see an increase in the stability of the compound incorporated in solid microparticles. The preliminary study of toxicity in zebrafish showed evidence of toxicity of pentyl cinnamate in low concentrations, however, future studies must be carried out for the influence of the solvent in this type of model. The nanoemulsions and microparticles produced proved to be suitable for making the use of this ester in water with potential use as a larvicide and adulticide feasible, opening perspectives for studies with other compounds. 2021-05-12

A biodiversidade brasileira oferece enorme riqueza de flora, oportunidade singular para a atividade de bioprospecção. Dentre as moléculas bioativas, encontradas na maioria dos organismos vegetais, os alcaloides representam uma ampla variedade de estruturas químicas. Dentre os biomas brasileiros, a Caatinga, vegetação predominante da região Nordeste, oferece patrimônio biológico que não pode ser encontrado em nenhum outro local do planeta. É neste ambiente xérico que se encontra a Erythroxylum pungens O.E Shulz, espécie arbórea-arbustiva com grande potencialidade em alcaloides bioativos pouco explorados. O objetivo deste trabalho foi a bioprospecção de alcaloides tropânicos de Erythroxylum pungens O. E. Shulz, coletadas em ambiente natural, a avaliação do efeito do estresse hídrico em plantas jovens e avaliação do potencial bioativo in vivo em organismo modelo Danio rerio (zebrafish), bem como, análise in silico do alcaloide tropânico majoritário. No Capítulo 1, realizou-se o experimento de estresse hídrico por meio da suspensão de rega em espécimes de E. pungens até 20 dias. Concluímos que E. Pungens consegue armazenar altos índices de prolina, aminoácido osmoregulador e protetor, o qual foi mensurado por espectofotômetro a 520 nm. Também, por análises por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG-EM), foi possível observar que a produção diferenciada de alcaloides tropânicos está relacionada mais com a fase de desenvolvimento do que com a condição de estresse hídrico o qual a planta foi submetida. No capítulo 2, por meio de análises espectroscópicas realizadas por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG-EM), foram identificados 12 alcaloides tropânicos neste estudo, sendo três destes inéditos para a espécie. O alcaloide majoritário do caule foi isolado e realizada a atividade biológica com ele. Realizou-se o ensaio de toxicidade, para as larvas, a dose letal foi de LC50 = 18,4 ± 1,7 µM/L. Entretanto, não houve toxicidade em experimento com até 116,7 µM/L.com peixes adultos. No ensaio comportamental de campo aberto com zebrafish adultos para avaliar a atividade bioativa do alcaloide tropânico majoritário dos caules, o 3-(2-metilbutiriloxi)tropan-6,7-diol mostrou ação psicoestimulatória a 116,7 µM/L. No teste in silico, os alvos envolvidos nas vias antidepressivas foram identificados atracando com o alcaloide. 3-(2-metilbutiriloxi)tropan-6,7-diol parece estar envolvido em alterações comportamentais do zebrafish e merece investigação futura como uma possível nova molécula no tratamento de sintomas depressivos, ou possível efeito alucinógeno. Brazilian biodiversity offers an enormous wealth of flora, a unique opportunity for bioprospecting activity. Among the bioactive molecules found in most plant organisms, alkaloids represent a wide variety of chemical structures. Among the Brazilian biomes, the Caatinga, predominant vegetation in the Northeast region, offers biological heritage that cannot be found anywhere else on the planet. It is in this xeric environment that Erythroxylum pungens O.E Shulz is found, a tree-shrub species with great potential in little explored bioactive alkaloids. The objective of this work is the bioprospecting of tropane alkaloids of Erythroxylum pungens O.E Shulz, collected in a natural environment, the evaluation of the effect of water stress on metabolism under young plants and the evaluation of the bioactive potential in vivo in a Danio rerio (zebrafish) model organism, as well as, in silico analysis of the major alkaloid. In Chapter 1, the water stress experiment was carried out by suspending irrigation in specimens of E. Pungens in up to 20 days. We conclude that E. Pungens is able to store high levels of proline, osmoregulatory and protective amino acid, in response to drought tolerance. Also, from analysis by CG-MS, it was possible to observe that the production of tropane alkaloids is more related to the development phase than to the water stress condition in which the plant was subjected. In chapter 2 was identified by means of GC-MS spectroscopy analysis were 12 tropane alkaloids identified in this study, with three of these species and to unpublished alkaloid class. Regarding toxicity, several teratogenic effects were observed at 5mg/L and the lethal dose for zebrafish embryo was established at LC50 = 18,4 ± 1,7 µM/L. No mortality was observed in adults, but a behavioral screen showed psychostimulatory action at 116,7 µM/L.. In silico, targets involved in the antidepressant pathways were identified by docking with the alkaloid. Overall, E. pungens is a source of unique tropane alkaloids, as the 3-(2- methylbutyryloxy)tropan-6,7-diol, which seems to be involved in zebrafish behavioral changes and deserve future investigation as a possible new molecule in the treatment of depressive-like symptom or hallucinogens effects.

Acidentes com animais peçonhentos, principalmente serpentes e escorpiões, são considerados um sério problema de saúde pública. No Brasil, os acidentes ofídicos ocorrem principalmente por serpentes do gênero Bothrops, e os escorpiônicos pela espécie Tityus serrulatus. O tratamento convencional é o uso da soroterapia antipeçonha, que além de apresentar algumas limitações, como difícil acesso em algumas regiões e custo elevado, é capaz de neutralizar apenas as toxinas da peçonha, sendo ineficiente em inibir as reações inflamatórias endógenas. Dentro deste contexto, o estudo tem como objetivo realizar uma análise fitoquímica do suco dos frutos de Hancornia speciosa, bem como avaliar a capacidade do suco de neutralizar os efeitos inflamatórios da peçonha do escorpião Tityus serrulatus e os locais induzidos pela peçonha de Bothrops jararaca. A análise fitoquímica foi realizada através da técnica de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao espectrômetro de massas (CLAE-DAD-EM/EM). A atividade antiescorpiônica do suco foi avaliada utilizando-se do modelo animal de edema pulmonar agudo induzido pela peçonha do escorpião T serrulatus. Os animais receberam a peçonha por via subcutânea e foram tratados via oral com o suco nas doses de 100 e 200 mg/kg, utilizando-se de protocolos de pré e pós-tratamento. Após 2 horas da administração da peçonha, os animais foram eutanasiados para a coleta dos pulmões, rins e sangue. Com os tecidos dos pulmões tratados foram realizadas as seguintes análises: quantificação de citocinas, concentração de azul de Evans, dosagem da enzima mieloperoxidase (MPO) e porcentagem do peso relativo pulmonar; com os rins, dosagem de nitrito e peroxidação lipídica; e, com o sangue, avaliados parâmetros hematológicos e bioquímicos. Em relação a peçonha botrópica, a capacidade do suco em inibir seus efeitos locais foi avaliada nos modelos de edema de pata, hemorragia, miotoxicidade e dermonecrose. Para tanto, os animais receberam o suco por via oral nas doses de 100 e 200 mg/kg, sendo administrado logo após a peçonha botrópica (pós-tratamento). Através das análises por CLAE-DAD-EM/EM foram identificados 13 compostos, sendo os majoritários identificados como L-bornesitol, ácido quínico, ácido clorogênico e rutina. As observações referentes à inibição dos efeitos antiescorpiônicos demonstraram que o suco de Hancornia speciosa foi capaz de diminuir significativamente alguns importantes parâmetros como a produção das citocinas, a atividade mieloperoxidase, a concentração de azul de Evans no tecido pulmonar, a peroxidação lipídica e a dosagem de nitrito. Em relação aos efeitos botrópicos, o suco foi capaz de diminuir de forma significativa a lesão dermonecrótica, edema, hemorragia e as concentrações das enzimas creatina quinase e lactato desidrogenase. Portanto, é possível concluir que o suco de Hancornia speciosa Gomes apresenta potencial para ser utilizado como adjuvante no tratamento de envenenamentos escorpiônicos e botrópicos. Accidents with venomous animals, mainly snakes and scorpions, are considered a serious public health problem. In Brazil, ophidian accidents are mainly provoked by snakes of the genus Bothrops, and those with scorpions, by the species Tityus serrulatus. The conventional treatment is the use of antivenom serotherapy, which in addition to presenting some limitations, such as difficult access in some regions and high cost, is only able to neutralize the poison toxins, being inefficient in inhibiting the endogenous reactions triggered by their presence. In this context, the aim of this paper was to perform a phytochemical analysis of the fruit juice of Hancornia speciosa and its ability to inhibit the effects of the venom of the scorpion Tityus serrulatus and the snake Bothrops jararaca. The phytochemical analysis was performed using high performance liquid chromatography MS/MS. The antiscorpionic activity of the juice was evaluated using the animal model of acute pulmonary edema induced by the scorpion venom T serrulatus. For this, Swiss mice received venom subcutaneously and were treated orally with juice at doses of 100 and 200 mg / kg, using pre- and post-treatment protocols. Two hours after venom administration, the animals were euthanized to collect lungs, kidneys and blood. The following analyzes were performed with the lungs: cytokine quantification, evans blue concentration, myeloperoxidase enzyme (MPO) dosage and relative lung weight percentage; with the kidneys, nitrite dosage and lipid peroxidation; and with blood, hematological and biochemical parameters were evaluated. Regarding botropic venom, the ability of the juice to inhibit its local effects was evaluated in the models of paw edema, hemorrhage, myotoxicity and dermonecrosis. For this, Swiss mice of both sexes were used. In all models the juice was administered orally at doses of 100 and 200 mg / kg and was administered shortly after the botropic venom (post-treatment protocol). Through HPLC-DAD-MS / MS analyzes 13 compounds were identified, the major ones identified as L-bornesitol, quinic acid, chlorogenic acid and rutin. Observations regarding the inhibition of antiscorpionic effects demonstrated that Hancornia speciosa juice was able to significantly decrease some important parameters such as cytokine production, myeloperoxidase activity, evans blue concentration in lung tissue, lipid peroxidation and nitrite. Regarding the botropic effects, the juice was able to significantly reduce the dermonecrotic lesion, the edematogenic activity, the hemorrhagic activity and the concentrations of the creatine kinase and lactate dehydrogenase enzymes. From the results, it can be concluded that Hancornia speciosa Gomes juice has great potential to be used as adjuvant in the treatment of scorpion and botropic poisonings.

O gênero de esponjas marinhas Agelas sp. é conhecido como fonte de alcaloides bromados dos tipos pirrol e imidazol, além de terpenoides, esteróis e ácidos graxos, metabólitos que estão relacionados com muitas atividades biológicas. Neste trabalho, amostras fracionadas a partir dos extratos metanólicos de Agelas coletadas na costa nordeste brasileira, foram analisadas em sistemas CLAE-EM, nos modos positivo e negativo, e caracterizados os metabólitos 4,5-dibromopirrol-2-carboxamida (1) ácido 4,5-dibromopirrol-2-carboxílico (2), bromopirrol-2-carboxamida (3) ácido bromopirrol-2-carboxílico (4), éster metílico da longamida B (5), hanishina (6), 9,10-di-hidrokeramadina (7), mukanadina E (8), agelanesina (9), dibromosceptrina (10), dispacamida C (11), dispacamida A (12), agesamida (13), éter metílico da dibromoagelaspongina (14), agelanina b (15), longamida (16), metil-himenidina (17), agelanesina c (18), manzacidina A (19), bromohimenialdisina (20), oroidina (21), agelasidina A (22), 5-hidroxilisina (23), himenidina (24), mukanadina A (25), clatramida A (26) e longamida (27). Também foram identificados ácidos graxos como os ácidos pentadecanoico, margárico, palmítico e esteárico, além do nonadeceno, docosanol, tetracosanol, pentacosanol, heptacosanol, ácido behênico e esqualeno, obtidos a partir do fracionamento de extratos lipídicos e analisados através de CG-EM. Frações resultantes de partição do extrato bruto de A. dispar e Agelas foram testadas em ensaios microbiológicos e demonstraram moderada a alta ação antibacteriana e antifúngica, contra organismos como Staphylococcus aureus, S. epidermidis, S. hominis, Enterococcus faecalis, E. faecium, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia Coli, Salmonella enteriditis, Klebsiella pneumoniae, Candida albicans, C. cruzei e C. tropicalis, assim como fraca ação antioxidante. Foram isolados o esterol β-sitosterol e o alcaloide 4,5-dibromopirrol-2-carboxamida, sendo que o último demonstrou potente atividade antibacteriana e antifúngica, com o melhor valor de CIM= 0,25 µg/mL e CBM/CFM=0,25 µg/mL. Foi realizado o levantamento bibliográfico de dados espectrométricos de substâncias de Agelas na literatura. O fracionamento e identificação dos metabólitos foram realizados através de técnicas cromatográficas clássicas, CG-EM, CLAE-EM e RMN1H e RMN13C, uni e bidimensionais. Sponges from the genus Agelas sp. are known as source of brominated pyrrole and imidazole alkaloids, as well as terpenoids, sterols and fatty acids, metabolites that are associated with various biological activities. In this work, fractionated samples from Agelas sp. and Agelas dispar methanolic extracts, collected on the northeast coast of Brazil, were analyzed in HPLC-MS systems, and the following metabolites were characterized through positive and negative mode MS: 4,5-dibromo-1H-pyrrole-2-carboxamide (1), 4,5- dibromopyrrole-2-carboxylic acid (2), bromopyrrole-2-carboxamide (3) bromopyrrole-2- carboxylic acid (4), longamide B methyl esther (5), hanishin (6), 9,10-di-hydrokeramadin (7), mukanadin E (8), agelanesin (9), dibromosceptrin (10), dispacamide C (11), dispacamide A (12), agesamide (13), dibromoagelaspongin methyl ether (14), agelanin b (15), longamide (16), methyl-hymenidin (17), agelanesin c (18), manzacidine a (19), bromohymenialsidin (20), oroidin (21), agelasidine a (22), 5-hidroxilisine (23), hymenidin (24), mukanadine A (25), clathramide A (26) and longamide (27). Also were identified fatty acids, such as pentadecanoic, margaric, palmitic and stearic, as well as nonadecene, docosanol, tetracosanol, pentacosanol, heptacosanol, behenic acid and squalene, obtained from fractionation and GCMS analysis of lipid extracts. Fractions resulting from the partition of A. dispar and Agelas sp. crude and semi-crude extract were tested in microbiological assays and demonstrated moderate to high antibacterial action and antifungal activities, against organisms such as Staphylococcus aureus, S. epidermidis, S. hominis, Enterococcus faecalis, E. faecium, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia Coli, Salmonella enteriditis, Klebsiella pneumoniae, Candida albicans, C. cruzei and C. tropicalis, beside poor antioxidant activity. The sterol βsitosterol and the alkaloid 4,5-dibromopyrrole-2-carboxamide were isolated, and the latter showed potent antibacterial and antifungal activity in the assay performed, with the best MIC = 0.25 μg/ mL and MBC/ MFC = 0.25 μg/ mL. Collection of spectrometric data from Agelas sp. substances available on literature was performed. Fractioning, characterization and identification of metabolites was achieved through classical chromatographic techniques, GCMS, HPLC-MS, HPLC-MS-MS and uni and bidimensional 1H NMR and 13C NMRSponges from the genus Agelas sp. are known as source of brominated pyrrole and imidazole alkaloids, as well as terpenoids, sterols and fatty acids, metabolites that are associated with various biological activities. In this work, fractionated samples from Agelas sp. and Agelas dispar methanolic extracts, collected on the northeast coast of Brazil, were analyzed in HPLC-MS systems, and the following metabolites were characterized through positive and negative mode MS: 4,5-dibromo-1H-pyrrole-2-carboxamide (1), 4,5- dibromopyrrole-2-carboxylic acid (2), bromopyrrole-2-carboxamide (3) bromopyrrole-2- carboxylic acid (4), longamide B methyl esther (5), hanishin (6), 9,10-di-hydrokeramadin (7), mukanadin E (8), agelanesin (9), dibromosceptrin (10), dispacamide C (11), dispacamide A (12), agesamide (13), dibromoagelaspongin methyl ether (14), agelanin b (15), longamide (16), methyl-hymenidin (17), agelanesin c (18), manzacidine a (19), bromohymenialsidin (20), oroidin (21), agelasidine a (22), 5-hidroxilisine (23), hymenidin (24), mukanadine A (25), clathramide A (26) and longamide (27). Also were identified fatty acids, such as pentadecanoic, margaric, palmitic and stearic, as well as nonadecene, docosanol, tetracosanol, pentacosanol, heptacosanol, behenic acid and squalene, obtained from fractionation and GCMS analysis of lipid extracts. Fractions resulting from the partition of A. dispar and Agelas sp. crude and semi-crude extract were tested in microbiological assays and demonstrated moderate to high antibacterial action and antifungal activities, against organisms such as Staphylococcus aureus, S. epidermidis, S. hominis, Enterococcus faecalis, E. faecium, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia Coli, Salmonella enteriditis, Klebsiella pneumoniae, Candida albicans, C. cruzei and C. tropicalis, beside poor antioxidant activity. The sterol βsitosterol and the alkaloid 4,5-dibromopyrrole-2-carboxamide were isolated, and the latter showed potent antibacterial and antifungal activity in the assay performed, with the best MIC = 0.25 μg/ mL and MBC/ MFC = 0.25 μg/ mL. Collection of spectrometric data from Agelas sp. substances available on literature was performed. Fractioning, characterization and identification of metabolites was achieved through classical chromatographic techniques, GCMS, HPLC-MS, HPLC-MS-MS and uni and bidimensional 1H NMR and 13C NMR.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O bioma Caatinga constitui um importante potencial de formação vegetal, com inúmeras espécies reportadas na literatura pelo amplo espectro de atividades biológicas e diversidade química apresentada. Diante do potencial deste bioma, o presente trabalho aborda a investigação química e biológica de três espécies de plantas coletadas na caatinga nordestina: Euphorbia tirucalli Linn., Bredemeyera floribunda Willd. e Bredemeyera brevifolia Benth. A análise por LC-MS, em modo negativo, aplicada aos extratos das três espécies permitiu avaliar o perfil fitoquímico das espécies e assim constatar os flavonoides como classe de metabólitos predominante. O estudo químico dos extratos hexânico da parte aérea e etanólico das raízes de E. tirucalli, aplicando técnicas cromatográficas, permitiu o isolamento de cinco constituintes: dois já isolados na espécie, a β-amirina e o ácido 4-O-metil-gálico, além de três compostos inéditos na espécie, a ampelopsina, a miricetina e ácido 3,3'-dimetoxielágico-4-O-αraminopiranosídeo. A avaliação da atividade antioxidante dos extratos de E. tirucalli frente ao DPPH e ABTS possibilitou constatar que o extrato etanólico das raízes apresentou melhor eficiência frente aos dois radicais, enquanto dentre os compostos isolados a myricetin apresentou melhor inibição dos radicais com IC50 de 22,62 μg/mL para o DPPH e de 53,22 μg/mL para o ABTS. A avaliação das atividades antimicrobianas permitiu constatar que apenas os extratos etanólicos apresentaram potenciais antibacterianos e antifúngicos, enquanto que todos os compostos isolados mostraram efeito inibitório contra cepas de S. aureus, E. coli, S.brasiliensis e C. Albicans, com maior efeito para a miricetina e ampelopsina. O estudo das espécies do gênero Bredemeyera também se mostrou promissor. Tratamentos cromatográficos aplicados ao extrato hidroalcoólico das raízes de B. floribunda permitiu o isolamento de dois compostos, o (2E) -3’-(3,4,5-trimetóxifenil) -prop-2-enoato de metila e o 1,7- dihidroxi-3,4,8-trimetoxixantona ambos já isolados na espécie, enquanto os procedimentos cromatográficos aplicados ao extrato etanólico dos talos levou ao isolamento de três flavonoides, a rutina, o canferol e a quercetina sendo os dois últimos isolados pela primeira vez na espécie. O estudo do extrato hidroalcoólico das raízes de B. brevifolia permitiu a identificação de duas flavonas, a 5,7,4’-trihidroxi-3’- metoxiflavona e a 5,7,2’,3’,4’-pentahidroxi-6,4’-dimetoxiflavona da fração clorofórmica e o isolamento desta primeira flavona na fração acetato. A avaliação da atividade enzimática in vitro frente a peçonha da espécie Bothrops jararaca, mostrou resultados relevantes, pois permitiu constatar que a peçonha de B. jararaca foi totalmente inibida pelo extrato hidroalcoólico das raízes B. brevifolia, mostrando-se ser um dado muito interessante devido a relevância dessa classe de toxinas nos envenenamentos ofídicos. Este estudo contribuiu para o conhecimento químico e biológico das três espécies estudadas, com novas moléculas isoladas para cada espécie, além de dados biológicos inéditos associados a atividade antiofídica do gênero Bredemeyera e a atividade antimicrobiana de Euphorbia tirucalli. The Caatinga biome constitutes an important potential of vegetal formation, with numerous species reported in the literature for the broad spectrum of biological activities and chemical diversity presented. Due chemistry and biological potential of this biome, the present study approaches the phytochemical investigation of three plant species collected in the northeastern caatinga: Euphorbia tirucalli Linn., Bredemeyera floribunda Willd. and Bredemeyera brevifolia Benth. The LC-MS analysis, in negative mode, applied to the extracts of the three species allowed the evaluation of the phytochemical profile of the species and thus found the flavonoids as the predominant class of metabolites. The chemical study of the hexane and ethanolic extracts from aerial parts and roots of E. tirucalli, respectively, using chromatographic techniques, allowed the isolation of five constituents: two already isolated in the species, β-amyrin and 4-O-methyl-gallic acid, and three unpublished compounds in the species, ampelopsin, myricetin and 3,3'-dimethoxyellagic acid-4-O-α-rhamnopyranoside. The evaluation of the antioxidant activity from E. tirucalli extracts against DPPH and ABTS showed the potential of the ethanolic root extract against both radicals, whereas among the compounds isolated myricetin showed the best inhibition of radicals with IC50 of 22.62 μg/mL for DPPH and 53.22 μg/mL for ABTS. The evaluation of antimicrobial activities showed antibacterial and antifungal potential of the ethanolic extracts, while all the isolated compounds showed inhibitory effect against strains of S. aureus, E. coli, S.brasiliensis and C. Albicans, with greater effect for myricetin and ampelopsin. The study of species of the genus Bredemeyera was also promising. Chromatographic treatments applied to the hydroalcoholic extract of B. floribunda roots allowed the isolation of two compounds, methyl (2E)-3'-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-prop-2-enoate and 1,7- dihydroxy-3,4,8-trimethoxixantone both already isolated in the species, while the chromatographic procedure applied to the ethanolic extract of the stems led to the isolation of three flavonoids, rutin, canferol and quercetin being the last two isolates for the first time in the species. The study of the hydroalcoholic extract from B. brevifolia roots allowed the identification and isolation of two flavones, 5,7,4'-trihydroxy-3'- methoxyflavone and 5,7,2',3',4'-pentahydroxy-6, 4'-dimethoxyflavone. The evaluation of the in vitro enzymatic activity against Bothrops jararaca venom showed relevant results, since it was verified that B. jararaca venom was totally inhibited by the hydroalcoholic extract of B. brevifolia roots, proving to be a very interesting data because the relevance of this class of toxins in snake poisoning. This study contributed to the chemical and biological knowledge of the three species studied, with new isolated molecules for each species, as well as unpublished biological data associated with Bredemeyera antiofidic activity and Euphorbia tirucalli antimicrobial activity.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A espécie Commiphora leptophloeos (Mart.) J.B. Gillett (Burseraceae) é uma planta nativa do Brasil, pertence ao bioma caatinga e é conhecida popularmente como “imburana-de-espinho” ou “imburana-de-cambão”. Os estudos etnofarmacológicos citam o uso da espécie no tratamento de inflamações e infecções. Dentro deste contexto, o presente estudo objetivou avaliar a toxicidade, a atividade anti-inflamatória e antimicrobiana em ensaios não clínicos in vitro e in vivo dos extratos das folhas e das cascas do caule e isolar, identificar e quantificar os marcadores químicos. No estudo fitoquímico, o extrato hidroetanólico foi preparado por maceração e as frações foram obtidas por particição líquido-líquido (fração diclorometano, acetato de etila-AcOEt e n-butanol-BuOH). O isolamento, a elucidação estrutural e a caracterização das substâncias nos extratos foram realizadas por CPC, CL-EM, FIA-ESI-ITMS/MS e RMN de 1H e a quantificação dos marcadores nos extratos por CLAE-DAD-ELSD. A toxicidade dos extratos foi avaliada in vitro pelo ensaio de MTT e citometria de fluxo e in vivo pelo teste de toxicidade aguda, via oral. A atividade anti-inflamatória in vitro foi avaliada pelo ensaio de óxido nítrico induzido por LPS e in vivo nos modelos de edema de pata induzido por carragenina e de bolsa de ar induzida por zimosam. A atividade antimicrobiana foi avaliada pela determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e triagem virtual dos compostos isolados foi realizada por estudos in sílico. Do extrato das folhas, foram isolados 2 flavonoides por CPC e caracterizadas 16 substâncias por espectrometria de massas como ácidos fenólicos, flavonoides glicosilados derivados de quercetina, luteolina, apigenina e taninos condensados derivados de catequina. Do extrato das cascas do caule foram isolados 2 taninos por CPC e caracterizadas 8 substâncias como ácidos fenólicos e procianidinas. O extrato das folhas a 200 µg/mL e o extrato das cascas do caule nas concentrações de 1, 10, 100 e 200 µg/mL demonstraram efeito anti-inflamatório in vitro no ensaio de óxido nítrico induzido por LPS. No modelo de edema de pata induzido por carragenina, o extrato das folhas e das cascas do caule nas doses de 100, 200 e 400 mg/kg, via oral, reduziu significativamente (p

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A espécie Cochlospermum vitifolium, conhecida popularmente como pacotê, é utilizada pela medicina popular no tratamento enfermidades como hipertensão, hepatite, icterícia, hiperglicemia, distúrbios inflamatórios, além de possuir propriedades emenagogas, que podem ser atribuídas à presença de constituintes químicos na espécie. Ainda não existem estudos químicos e biológicos com partes isoladas da planta, assim, o presente trabalho objetivou identificar os constituintes químicos presentes nos extratos etanólicos, frações hexânica, acetato de etila e metanólica das flores, folhas, caules, frutos e sementes da C. vitifolium, além de avaliar a atividade antioxidante in vitro e leishmanicida, bem como avaliar o potencial anti-inflamatório do extrato etanólico e fração acetato de etila das flores em modelos experimentais in vivo. O perfil químico dos extratos etanólico e frações das flores, folhas e caule da Cochlospermum vitifolium foi registrado por UPLC-DAD-MS/MS. Os compostos das flores foram identificados como taninos hidrolisáveis (galotaninos, galoilquínicos, elagitaninos), flavonóides, derivados fenólicos da poliamida espermidina, ácidos graxos hidroxilados, além dos compostos: ácido quínico, ácido siríngico, di-hexosídeo do ácido cinâmico e ácido arjunólico. Para o caule, a prunina, taxifolina, aromadendrina, naringenina e canferol foram além de alguns compostos também observados nas flores. O teor de fenólicos totais das amostras foi expresso em equivalentes de ácido gálico por grama de amostra, destacando-se a fração acetato de etila das flores (525,90 mg EAG/g). O potencial antioxidante foi investigado pelos ensaios radical DPPH, atividade antioxidante total, quelação dos íons de ferro e cobre, poder redutor e sequestro dos radicais superóxidos (O2 - ) e hidroxilas (OH- ). A amostra que melhor apresentou atividade antirradicalar frente ao radical DPPH (IC50 = 5,03 ± 0,10), quelação dos íons de cobre (84,26%) e sequestro do radical O2 - (99,18%) numa concentração de 0,05 mg/mL foi a Fr AcOEt das flores. Os extratos e frações das flores, folhas, caules e frutos, apresentaram habilidade redutora dose dependente, com poder redutor acima de 100% em 0,25 mg/mL. A fração metanólica dos frutos apresentou melhor capacidade antioxidante frente ao radical OH- (39,84% em 0,3 mg/mL). A melhor habilidade de quelação dos íons de ferro (52,27% em 0,3 mg/mL). A atividade leishmanicida foi avaliada para as formas promastigotas, sendo as frações hexânicas das folhas e do caule capazes de inibir o crescimento dos parasitas. O extrato etanólico e fração acetato das flores da C. vitifolium apresentaram atividade anti-inflamatória nos modelos experimentais em estudo. Os resultados revelaram a presença de importantes compostos químicos em amostras de C. vitifolium, podendo ser responsáveis pela atividade antioxidante, leishmanicida e anti-inflamatória, revelando um potencial terapêutico para o desenvolvimento de novas moléculas com atividade anti-inflamatória. The Cochlospermum vitifolium specie, popularly known as pacotê, is a medicinal plant used of treatment of hypertension, hepatitis, jaundice, hyperglycemia and inflammatory disorders, in addition have increase menstrual flux property, that can be attributed the presence of chemical compounds of species. However, not have chemical and biological studies with isolated parts of the plant, so, the study aimed to identify chemical compounds present in ethanolic extract, hexane, ethyl acetate and methanol/water fractions of C. vitifolium flowers, leaves, stalks, fruits and seed and evaluate the antioxidant and leishmanicide effect in vitro, as well as evaluate anti-inflammatory potential of ethanolic extract and ethyl acetate fraction of flowers in vivo experimental models. The chemical profile of ethanolic extract and ethyl acetate fractions of flowers, leaves and stalks of C. vitifolium was evidenced by UPLC-DAD-MS/MS. The compounds of flowers were identified as hydrolysable tannins (galotannins, galoylquinones, ellagitannins), flavonoids, phenolic derivatives of polyamide spermidine, hydroxylated fatty acids, in addition to the compounds: quinic acid, syringic acid, dihexoside of cinnamic acid and arjunolic acid. For the stalks the prunin, taxifoline, aromadendrin, naringenin and kaenferol were identified, besides some compounds also observed in the flowers. The total phenolic content was express in equivalents of gallic acid per gram of sample, highlighting the ethyl acetate fraction of flowers (525.90 mg EAG/g). The antioxidant potential was evaluated for diphenylpicryl hydrazine (DPPH), total antioxidant capacity, iron and cooper-chelating, reducing power, superoxide (O2-) and hydroxyl (OH-) radicalscavenging assays.The sample that demonstrated the greater anti-radical activity against the radical DPPH (IC50 = 5.03 ± 0.10), chelation of copper ions of 84.26% and sequestration of the O2 - radical (99.18%) at 0.05 mg/mL was ethyl acetate fraction. The ethanolic extract and fractions of flowers, leaves, stalks and fruits showed reductive capacity dose-dependent, with reducing power above 100% by 0.25 mg/mL. The methanolic fraction from the fruits showed greater capacity antioxidant against the (OH- ) radical (39.84% in 0.3mg/mL). The best ability to chelate iron ions (52.27% in 0.3mg / mL). The leishmanicide activity was evaluated for promastigotes forms, which the hexanic fraction from the leaves and stalks were capable of inhibit parasite growth. The ethanolic extract and ethyl acetate fraction from the flowers of C. vitifolium demonstrated anti-inflammatory activity in vivo experimental models. The results revealed the presence of important chemical compounds in samples of C. vitifolium, which could be responsible for the antioxidant, leishmanicidal and antiinflammatory activity, revealing a therapeutic potential for the development of new molecules with anti-inflammatory activity.

O ácido ferúlico (AF) é um ácido fenólico amplamente distribuído no reino vegetal e advindo do metabolismo secundário destes. É formado a partir do metabolismo dos aminoácidos fenilalanina e tirosina nos vegetais, sendo abundante e encontrado em grãos integrais, espinafre, salsa, uvas e ruibarbo. Esse estudo deve-se ao altíssimo potencial antioxidante que resulta em grande interesse pela indústria de cosméticos. Alguns testes e estudos são exigidos pelos órgãos regulatórios internacionais e nacionais, entre eles a pesquisa de produtos de degradação forçada. O objetivo desta pesquisa foi identificar e caracterizar os produtos de degradação do AF e desenvolver um método por CLUE-DAD capaz de quantificar as impurezas e produtos de degradação com eficiência em matérias-primas, formulações e demais formas farmacêuticas. Nesse estudo foram realizados os estudos indicativos de estabilidade, as degradações forçadas entre elas: Hidrólises, oxidação e fotoestabilidade em solução e sólida, os quais foram identificados e quantificados por um método por CLUE-DAD. Os resultados obtidos mostram-se muito promissores, destaca-se a estabilidade do ativo a hidrólise e a forte instabilidade a luz, quando em solução, apresentando degradação a partir dos primeiros 5 min. A otimização do método desenvolvido por CLUE-DAD foi feita utilizando-se como ferramenta um planejamento fatorial. Os gráficos de superfície-resposta e Pareto revelaram as variáveis com maior influência sobre todas as variáveis dependentes; a concentração de acetonitrila na fase móvel e o fluxo. O melhor método para identificação do AF e do produto de degradação, possuindo resolução e seletividade satisfatória, para o método desenvolvido a fase móvel é composta por água acidificada a 2% de ácido acético:acetonitrila (88:12), fluxo de 0,25 mL/min, temperatura do forno de 30ºC, a detecção foi realizada à 322 nm. A metodologia foi validada e atendeu todos os parâmetros da validação estabelecidos, contudo revelou uma certa instabilidade nas variações de fluxo testadas na robustez. O tempo de análise foi reduzido para menos de 6 minutos. O planejamento fatorial mostrou-se uma ferramenta importante para o desenvolvimento racional e otimizado do método. Ferulic acid (FA) is a phenolic acid widely distributed in the plant kingdom and deriving from the secondary metabolism of these. It is formed from the metabolism of amino acids phenylalanine and tyrosine in vegetables, being abundant and found in whole grains, spinach, parsley, grapes and rhubarb. This study is due to the very high antioxidant potential of great interest in the cosmetics industry. Some tests and studies are required by international and national regulatory bodies, including the research of forced degradation products. The objective of this research was to identify and characterize FA degradation products and to develop a UHPLC-DAD method capable of quantifying impurities and degradation products efficiently in raw materials, formulations and other pharmaceutical forms. In this study, indicative stability studies were performed, which include forced hydrolysis, oxidation and photostability in solution and solid, which were identified and quantified by a UHPLC-DAD method. The results obtained are very promising, the stability of the active hydrolysis and the strong light instability, when in solution, showing degradation from the first 5 min. The optimization of the method developed by CLUE-DAD was done using a factorial planning tool. Surface-response and Pareto graphs revealed the variables with the greatest influence on all dependent variables; the concentration of acetonitrile in the mobile phase and the flow. The best method for identifying the AF and the degradation product, with satisfactory resolution and selectivity, for the mobile phase method is composed of acidified water at 2% acetic acid: acetonitrile (88:12), flow rate of 0.25 mL / min, oven temperature 30 ° C, detection was performed at 322 nm. The methodology was validated and met all the established validation parameters, but revealed a certain instability in the flow variations tested in the robustness. The analysis time was reduced to less than 6 minutes. Factorial planning proved to be an important tool for the rational and optimized development of the method.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A orientina e a isoorientina são flavonoides C-glicosídicos e marcadores da espécie vegetal Passiflora edulis var. flavicarpa Degener e de outras espécies vegetais, as quais são reportadas na literatura por suas diversas propriedades farmacológicas. Para avaliação e caracterização do metabolismo in vitro desses flavonoides, reações de biotransformação de fase I utilizando complexos de Salen foram simuladas. Assim, através das técnicas de cromatografia em coluna clássica e CLAE, isolou-se a orientina e a isoorientina a partir do extrato hidroetanólico de P. edulis. Estes flavonoides foram submetidos às reações com os oxidantes m-CPBA e PhIO e catalisadas pelo catalisador de Jacobsen (Mn (Salen)), um catalisador eficiente e de fácil síntese e purificação, e com o catalisador sintetizado [Mn(3MeOSalen)Cl], ainda não relatado em estudos biomiméticos, o qual foi caracterizado por técnicas espectroscópicas e eletroquímicas, destacando-se o seu potencial de oxidação, superior ao potencial do catalisador de Jacobsen. Através da quantificação por CLUE-DAD, a reação da isoorientina com m-CPBA na proporção 1:20:20 (catalisador: oxidante: flavonoide) apresentou um maior consumo do substrato para ambos os catalisadores enquanto que a reação da orientina com PhIO na proporção 1:10:10 apresentou um maior consumo do substrato também para ambos catalisadores. A melhor condição foi otimizada evidenciando que os isômeros orientina e isoorientina apresentam reatividade diferente. Os produtos de reações foram caracterizados por CLAE-EM e CLAE-EM/EM, 3 da orientina e 5 da isoorientina, onde o catalisador [Mn(3MeOSalen)Cl] formou um maior número de compostos, e com a adição de dois átomos de oxigênio, enquanto o catalisador de Jacobsen formou compostos com a adição de apenas um átomo de oxigênio. Os produtos caracterizados não foram encontrados na literatura, entretanto se destaca a formação de epóxidos, que são compostos altamente reativos. Desta forma, este estudo pode servir de base para a realização de posteriores estudos farmacológicos e toxicológicos que confirmem a presença destes compostos como metabólitos de fase I e assegurem a segurança na utilização de produtos vegetais que possuam a isoorientina e orientina como marcadores. Orientin and isoorientin are C-glycosidic flavonoids and markers of the species Passiflora edulis var. flavicarpa Degener and other plant species, which are reported in the literature for their various pharmacological properties. To evaluate and characterize the in vitro metabolism of these flavonoids, phase I biotransformation reactions using Salen complexes were simulated. Thus, through the techniques of classical column chromatography and HPLC, orientin and isoorientin were isolated from the hydroethanolic extract of the leaves P. edulis. These flavonoids were subjected to reactions with m-CPBA and PhIO as oxidants and catalyzed by the Jacobsen catalyst (Mn (Salen)), an efficient and easily synthesized and purified catalyst, and with the synthesized catalyst [Mn (3MeOSalen) Cl], not reported yet in biomimetic studies, which was characterized by spectroscopic and electrochemical techniques, highlighting its oxidation potential, higher than the potential of the Jacobsen catalyst. By HPLC-DAD quantification, the reaction of isoorientin with mCPBA in the ratio 1:20:20 (catalyst: oxidant: flavonoid) showed higher consumption of the substrate for both catalysts when compared to others oxidants, while the reaction of the orientin with PhIO in the proportion 1:10:10 showed higher substrate consumption also for both catalysts. The best condition was optimized showing that the orientin and isoorientin isomers exhibits distinct reactivity. The reaction’s products were characterized by HPLC-MS and HPLC-MS/MS, 3 for orientin and 5 for isoorientin, where the [Mn (3MeOSalen) Cl] catalyst formed a larger number of compounds, and with the addition of two oxygen, whereas the Jacobsen’s catalyst formed compounds with the addition of only one oxygen atom. The products characterized were not found in the literature, however the formation of epoxides, which are compounds highly reactive, is highlighted. Thus, this study can serve as a basis for subsequent pharmacological and toxicological studies that confirm the presence of these compounds as phase I metabolites and ensure the safety of the use of plant products that have isoorientin and orientin as markers.

A artrite reumatoide é uma doença autoimune, sua progressão é acompanhada de dor, edema e degeneração óssea. O óleo extraído da casca da castanha de caju (Anacardium occidentale) tem sido alvo de pesquisas recentes motivadas pelo seu potencial efeito biológico. Estudos pré-clínicos já demonstraram evidências de diversas atividades, as quais se destaca seu efeito antioxidante, anti-inflamatório e antitumoral. Diante disso, o presente trabalho buscou isolar e identificar os principais marcadores do extrato, bem como avaliar o efeito anti-inflamatório em modelo in vivo agudo e crônico e a toxicidade deste extrato. A partir do extrato do óleo da casca da castanha de A. occidentale (M3), foi possível isolar três substâncias, sendo caracterizadas como 6-[8(Z),11(Z),14-pentadecatrienil] ácido salicílico, 6-[8(Z),11(Z)- pentadecadienil] ácido salicílico e 6-[8(Z)-pentadecenil]ácido. O pré-tratamento com o extrato M3 (50 e 100 mg/kg; ρ

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Biossurfactantes são compostos anfifílicos de origem microbiana, os quais surgem como alternativa ao uso dos surfactantes químicos devido ao fato destes serem sintetizados a partir de derivados de petróleo, por conseguinte, bastante agressivos ao meio ambiente. Em contrapartida, os surfactantes biológicos além de possuírem propriedades semelhantes às dos surfactantes químicos, possuem também vantagens sobre eles: biodegradabilidade e estabilidade em condições drásticas de pH, temperatura e salinidade. Diante disso, vários estudos vêm se desenvolvendo a fim de tornar a produção dos biossurfactantes viável à sua comercialização. Grande parte das pesquisas tem como objetivo avaliar a produção desses compostos utilizando diferentes fontes renováveis e investigar suas propriedades surfactantes. Os ramnolipídeos, biossurfactantes produzidos por bactérias e pertencentes ao grupo dos glicolipídeos, são aplicados em diversas áreas industriais (petrolífera, agrícola, farmacêutica, etc.) devido às suas várias propriedades: emulsificante, solubilizante, molhante, dentre outras. Dessa forma, o presente trabalho tem como finalidade verificar a produção de ramnolipídeo por Pseudomonas aeruginosa AP029-GLVIIA, variando-se a concentração de substrato: glicose (10, 18 e 26 g/L) e a percentagem de inóculo (3, 10 e 17%) durante 72 horas de cultivo. Avaliou-se durante esse tempo o crescimento celular (X), a concentração de glicose consumida (S), o ramnolipídeo produzido (P), o pH do sistema e a produção de proteínas totais. Foram realizados cinco ensaios dos quais a melhor condição avaliada (26 g/L de glicose e 3% de inóculo) produziu 0,84 ± 0,06 g/L de ramnolipídeo em 24 horas, fator de conversão de biomassa em produto (YP/X) de 0,260 g/g, fator de conversão de substrato em produto (YP/S) de 0,034 g/g e produtividade em produto (PP) de 0,021 g/L∙h. Neste ensaio a biomassa alcançou o maior valor dentre todos os cultivos realizados (2,5 ± 0,041 g/L), o pH variou entre 5,8 e 8 e o consumo de substrato alcançou 82,45% ao fim do experimento. A partir do melhor resultado fez-se o estudo do índice de emulsificação e da atividade emulsificante avaliando seis solventes: querosene, hexadecano, tolueno, óleo de soja, de milho e de motor, dos quais o óleo de motor apresentou as melhores respostas: índice de emulsificação de 77,55% nas primeiras 24 horas e elevada estabilidade emulsificante, 2,23 U. Em seguida, a eficiência do biossurfactante na remoção de petróleo presente em areia foi avaliada em 16,8% e a atividade antimicrobiana do ramnolipídeo contra espécies fúngicas foi determinada, mostrando a sua capacidade em inibir fungos das espécies Candida tropicalis e Candida albicans. Deste modo, os resultados obtidos comprovam o potencial do ramnolipídeo produzido para aplicações biotecnológicas. Biosurfactants are amphiphilic compounds of microbial origin, which have aroused as an alternative to the use of chemical surfactants, due to the fact that they are synthesized from petroleum derivatives, therefore, very aggressive to the environment. In addition to, biological surfactants have properties similar to the chemical surfactants and also have some advantages over them such as biodegradability and stability in different pH, temperature and salinity conditions. In face of this situation, several studies have been developed in order to make the production of biosurfactants viable for commercialization. The most researches aim to analyze the production of these compounds using different renewable sources and investigate their surfactant properties. The rhamnolipids, which are biosurfactants produced by bacteria and belonging to the group of glycolipids, are applied in several industrial areas due to its various properties as emulsifying, solubilizing, wetting, so on. Thus, this work aims to verify the production of rhamnolipid by Pseudomonas aeruginosa AP029-GLVIIA, changing the following parameters: the concentration of glucose (10, 18 and 26 g / L) and the inoculum percentage (3, 10 and 17%) for 72 hours. Along with time the cell growth (X), the glucose concentration consumed (S), the produced rhamnolipid (P), the pH of the system and the production of total proteins were assessed. Five trials were performed and the best condition (26 g / L glucose and 3 ml inoculum) produced 0.838 ± 0.064 g/ L ramnolipid in 24 hours, biomass conversion factor in product (YP/X) of 0.260 g/g, substrate conversion factor in product (YP/S) of 0.034 g/g and product productivity (PP) of 0.021 g/L∙h. At this assay, the biomass reached the highest value among all cultures (2.5 ± 0.041 g/L), pH ranged from 5.8 to 8 and substrate consumption reached 82.45% at the end of the experiment. From the best outcome, there were studied the emulsification index and the emulsifying activity with six different solvents: kerosene, hexadecane, toluene, soybean oil, corn oil and motor oil. The last one presented the best response with emulsification index of 77.55% in the first 24 hours and high emulsifying stability, 2.23 U. Then, the efficiency of the biosurfactant in the removal of oil present in sand was evaluated in 16.8% and the antimicrobial activity of the ramnolipid against fungal species were determined. Therefore, this outcome shows out the ability of the ramnolipid to inhibit fungi of the species Candida tropicalis and Candida albicans. At last, the obtained results prove the potential of the rhamnolipid produced for biotechnological applications.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Kalanchoe brasiliensis e Kalanchoe pinnata (Crassulaceae), conhecidas como “saião” e “coirama”, têm amplo uso popular no tratamento de úlceras pépticas e inflamações cutâneas. Vale destacar que K. pinnata está presente na Relação Nacional de Plantas de Interesse do Sistema Único de Saúde - RENISUS (2009). Dentro deste contexto, o objetivo do presente estudo foi caracterizar os marcadores químicos nos sucos das folhas das duas espécies e avaliar as atividades gastroprotetora e anti-inflamatória tópica. Foi realizada caracterização fitoquímica por Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência Acoplada a Espectrômetro de Massas (CLUE-EM). A atividade gastroprotetora foi avaliada nos modelos de úlcera águda induzida por etanol e indometacina, já a secreção gástrica foi avaliada no modelo de ligadura do piloro, em ratos Wistar. Foi realizado o pré- tratamento com os sucos nas doses de 125, 250 e 500 mg/kg e a ranitidina (50 mg/kg) por via oral. A atividade anti-inflamatória tópica foi avaliada no modelo de edema de pata induzido por carragenina e edema de orelha induzido por óleo de crotón em camundongos Swiss, utilizando formulações na forma de gel contendo os sucos em diferentes concentrações (1,25%, 2,5% e 5%) e como fármaco padrão a dexametasona (1mg/g), todos administrados por via tópica imediatamente após a indução. A análise por CCD revelou a presença de manchas características de flavonoides nos sucos das duas espécies, após revelação com o Reagente Natural A, sendo observado que as duas espécies têm perfil flavonoídico diferente. Na análise por CLUE-EM K. brasiliensis apresentou flavonoides glicosilados derivados principalmente da patuletina, enquanto que K. pinnata apresentou flavonoides glicosilados derivados principalmente da quercetina. O pré-tratamento com o suco das folhas de K. brasiliensis nas doses de 125 mg/kg (P

O desenvolvimento de novos fármacos é uma atividade de grande importância para a indústria farmacêutica e envolve diversas etapas, entre elas o monitoramento da qualidade e segurança das substâncias de interesse. O ácido p-cumárico, por meio de um processo de esterificação, origina o metil pcumarato, etil p-cumarato e isopropil p-cumarato, que são alvos de diversos estudos biológicos, porém são escassos na literatura informações sobre suas características físico-químicas, estabilidade e metodologia analítica para sua identificação e quantificação. Neste contexto, esse trabalho teve como objetivo a avaliação térmica e cromatográfica destes ésteres, visando determinar sua estabilidade e características físico-químicas contribuindo na pesquisa de novos fármacos e controle de qualidade de medicamentos que venham a apresentar estas moléculas como princípio ativo. As análises por DSC, DTA e TG demonstraram que os ésteres derivados do ácido p-cumárico, apesar de sua semelhança estrutural, possuem comportamentos térmicos distintos, de forma que é possível o emprego destas técnicas para a identificação destes. O metil p-cumarato e o etil p-cumarato apresentaram ponto de fusão em 131 °C e 65 °C respectivamente, já o isopropil p-cumarato não apresentou processo de fusão. As três amostras possuem boa estabilidade térmica, sendo o metil pcumarato o mais estável. Foi desenvolvido um método para identificação simultânea destes compostos por UHPLC, mostrando-se eficiente também na identificação dos seus produtos de degradação ao ser aplicado no estudo de degradação forçada. The development of new drugs is an activity of great importance for the pharmaceutical industry and involves several steps, among them the quality and safety monitoring of the substances of interest. P-coumaric acid, via an esterification process, gives methyl p-coumarate, ethyl p-coumarate and isopropyl p-coumarate, which are targets of several biological studies, but information about its physicochemical characteristics, stability and analytical methodology for its identification and quantification are scarce in the literature. In this context, this work aims at the thermal and chromatographic evaluation of these esters, aiming to evaluate their stability and physicochemical characteristics contributing in the new drugs research and quality control of drugs that will present these molecules as active principle. The analysis by DSC, DTA and TG showed that the p-coumaric acid derivatives, despite their structural similarity, have different thermal behavior, so that it is possible to use these techniques to identify them. Methyl p-coumarate and ethyl p-coumarate showed melting point at 131 ° C and 65 ° C, respectively, since the p-coumarate isopropyl did not show a melting process. The three samples have good thermal stability, with methyl p-coumarate being the most stable. A method for simultaneous identification of these compounds by UHPLC was developed, the method was also efficient in the identification of its degradation products when applied in the study of forced degradation.