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A paralisia cerebral (PC) é definida como uma desordem da postura e do movimento devido a uma lesão ou malformação do cérebro ainda imaturo. Embora estática e não progressiva, a lesão encefálica pode modificar o quadro clínico com o surgimento de deformidades ortopédicas e alteração no padrão dos movimentos. Dentre as alterações de movimento mais observadas está a marcha em equino, secundária à espasticidade decorrente da lesão no neurônio motor superior e à fraqueza muscular de dorsiflexores e plantiflexores. A marcha em equino por período prolongado pode trazer problemas como dor, calosidade, instabilidade de tornozelo (valgo ou varo) e prejuízo na capacidade de marcha. O gesso seriado suropodálico é uma intervenção eficaz no ganho de amplitude articular. Entretanto, seus efeitos na espasticidade de tríceps sural e na velocidade da marcha são controversos. Portanto, este estudo propôs avaliar os efeitos de um protocolo de gesso seriado suropodálico, seguido do uso de órtese e de exercícios domiciliares na amplitude articular do tornozelo, na espasticidade de tríceps sural e na velocidade da marcha, em crianças com PC. Foi realizado um estudo retrospectivo, por meio de análise de dados nos prontuários das crianças com PC submetidas ao protocolo de gesso seriado, órteses e exercícios domiciliares entre junho de 2015 e julho de 2017 na Rede Sarah de Hospital de Reabilitação – Unidade Belo Horizonte. As medidas de resultado incluem amplitude de movimento de dorsiflexão, espasticidade de tríceps sural e velocidade na marcha e foram acompanhadas por 12 meses após a retirada definitiva da imobilização gessada. Para a análise estatística utilizamos o Método das Equações de Estimação Generalizadas (GEE). Foi observado que o uso do gesso seriado resultou em ganho de amplitude articular de dorsiflexão com joelhos fletidos e estendidos e em redução da espasticidade do tríceps sural, evidenciada no teste de estiramento rápido. O uso da órtese e o uso irregular da órtese aumentaram significativamente a probabilidade de ganho de dorsiflexão com joelho fletido em 10,2% e 9,2%, e estendido em 11,9% e 9,6%, em relação às crianças que não usaram a órtese. Similarmente, aumentaram a probabilidade de ganho no teste de estiramento rápido em 15,9% para uso regular e 12,0% para uso irregular da órtese, respectivamente. Em relação à velocidade de marcha, o estudo mostrou que crianças com GMFCS IV, III e II têm 60,1%, 41,0% e 10,9% menos chances de aumento na velocidade da marcha durante o protocolo em relação às crianças com GMFCS nível I. Fazer exercícios de forma regular, irregular ou não fazer não teve efeito nas medidas de desfecho. O gesso seriado suropodálico é uma intervenção pouco invasiva, de baixo custo e efetiva no ganho de dorsiflexão de criança PC com equino. Os resultados desse protocolo sugerem que o gesso seriado resultou em ganho de amplitude articular de dorsiflexão com joelhos fletidos e estendidos e em redução da espasticidade do tríceps sural, sendo que uso de órtese tornozelo-pé após o gesso seriado, aumenta a chance de ganho da amplitude de dorsiflexão de tornozelo e de redução na espasticidade, de forma similar. Dessa forma, sugerimos que o tempo de uso da órtese seja reduzido e que um novo protocolo de exercícios físicos, que compreenda atividades funcionais, seja introduzido ao programa. Cerebral palsy (CP) describes a group of permanent disorders of the development of movement and posture causing activity limitation. These are attributed to non-progressive disturbances that occurred in the developing fetal or infant brain. Although static and nonprogressive, orthopedic deformities and changes in the pattern of movements may occur. Toe walking is a common presentation in young children with spastic CP. It is secondary to an upper motor neuron lesion and muscular weakness of dorsiflexors and plantiflexors. As the child grows, the toe walking can bring problems such as pain, callosity, ankle instability (valgus or varus) and impaired gait may develop. Serial casting is an effective action to gain joint amplitude; however, the effect on triceps spasticity and gait speed are controversial. The aim of this study was to evaluate the effects of a serial casting protocol, followed by the use of orthosis and home exercises in joint amplitude of the ankle, spasticity and gait speed in children with CP. A retrospective study was carried out by using medical records of children with CP between June 2015 and July 2017, at Sarah Network of Hospital of Rehabilitation - Belo Horizonte. Outcome measures included dorsiflexion, spasticity of triceps sural and gait speed and were followed for 12 months after the immobilization. For the statistical analysis we used the Generalized Estimation Equation (GEE) Method. It was observed that the serial casting increased joint amplitude of dorsiflexion with flexed and extended knees and reduced spasticity of the triceps sural, evidenced in the rapid stretch test. The regular use of orthosis and the irregular use of orthosis increased the odds of gain of dorsiflexion with flexed knee in 10.2% and 9.2%, and the odds of gain of dorsiflexion with extended knee in 11.9% and 9.6%, compared to children who did not use the orthosis. Similarly, it increased the odds of gain in R1 by 15.9% for regular use and 12.0% for irregular use of the orthosis, respectively. Regarding gait speed, the study showed that children with GMFCS IV, III and II had 60.1%, 41.0% and 10.9% less chances of increased walking speed during the protocol in relation to children with GMFCS level I. Doing the exercises regularly, irregularly or not doing any at all had no effect on outcome measures. The serial casting is a minimally invasive, low-cost and effective intervention, with increased joint amplitude of dorsiflexion with flexed and extended knees and reduced spasticity of the triceps sural. Similarly, regular or irregular use of ankle-foot orthosis after serial casting increases the chance of ankle dorsiflexion gain and of spasticity reduction. The orthosis time can be reduced and we suggest that a new protocol of physical exercises, that includes functional activities, might be introduced to the program.

The paper has the general objective of analyzing the environmental sustainability of an Institution of Higher Education (IHE) Public of the State of Santa Catarina. To meet this objective has to reach the specific objectives: to check the number of IHEs in Brazil and Santa Catarina; to identify the number of public and private institutions and to propose a management model 5W2H to deficit sustainability criteria. The methodology and the objectives considered descriptive, with the technical procedures has the case study and the approach problem qualitative. The methodology is divided into three phases: the first phase it is the theoretical basis, it approaches social and environmental responsibility; environmental management and environmental management system. In the second phase it is the analysis of the results where first there was the amount of IHE and distribution in administrative categories. In the third phase, it has been the purpose of responding to a checklist of 154 questions developed by Pieri et al (2011) and Environmental Management Plan Summary (5W2H). In the end it is concluded that the institution submitted a global sustainability index of 32 %, being regarded as weak, proposing with the 5W2H tool, an action for each criterion, as the inclusion of recyclable products in acquisitions; recycling of waste; accessibility to the handicapped; and creating actions that approximates the IHE to the society. It is hoped that the proposed actions that the institution to put them into practice, increase the environmental sustainability index, benefiting society and the environment.

This research examines whether there are differences between individuals from generations X and Y on the degree to which the backgrounds job satisfaction and organizational commitment precede the intention of quitting the job. In order to measure the constructs there were used three questionnaires, which were validated in previous studies, presented in a Likert scale of 5 points: the first is from Price and Mueller (1981) to analyze job satisfaction, the second is from Mowday, Steers and Porter (1979) to check the organizational commitment; the third is the analysis of intention of quitting the job, which was done by using the questionnaire of Benkhoff (1997). In addition to the questionnaires, it was included in the survey questions to collect demographics data such as age, sex, education level, field of expertise, hierarchical level and place of residence. There were obtained a total of 320 valid responses and the relation between the variables was studied by the method of Structural Equation Modeling in order to test the hypotheses presented, with the estimation PLS ( Partial Least Squares - Path Modeling) through the software SmartPLS 2.0. It was identified a pattern of positive and highly significant relation between job satisfaction and organizational commitment, and negative and significant relation between these constructs and the intention of quitting the job for both generations X and Y. Comparing the generations, the results suggest that for generation X job satisfaction proved to be a stronger antecedent to organizational commitment and intention to quit the job, contrary to expectations. However, as expected, organizational commitment proved to be a stronger antecedent to the intention of quitting the job for Generation Y. The study has limitations regarding the sampling, the methodology and the interpretation of data and suggests future studies indicating the need to overcome such limitations., Esta investigación examina si existen diferencias entre los individuos de las generaciones X e Y en el grado en que la satisfacción en el trabajo y el compromiso organizacional preceden la intención de dejar el trabajo. Para medir los constructos se utilizaron tres cuestionarios validados en estudios previos, que se presentan en una escala Likert de 5 puntos: el primero desde Price y Mueller (1981) para analizar la satisfacción laboral; el segundo de Mowday, Steers y Porter (1979) para evaluar el compromiso organizacional; en tercer, un análisis de intención de dejar el trabajo hecho por el Shoere y Martin (1989) cuestionario. Además de los cuestionarios, se incluyeron en las preguntas de la investigación datos demográficos. Se obtuvo un total de 320 respuestas válidas y para evaluar la relación entre las variables se utilizó el método de modelos de ecuaciones estructurales con el fin de probar la hipótesis presentada con estimación de el PLS por software SmartPLS 2.0. Se ha identificado un padrón de relación positiva y altamente significativa entre la satisfacción laboral y el compromiso organizacional, y relaciones negativas y significativas entre estes constructos y la intención de dejar el trabajo, tanto para las generaciones X e Y. En la comparación entre las generaciones, los resultados sugieren que para la generación X, la satisfacción laboral ha demostrado ser un antecedente más fuerte de compromiso organizacional y la intención de abandonar sus puestos de trabajo, en contra de las expectativas. Sin embargo, el compromiso de la organización resultó ser un antecedente más fuerte de la intención de dejar el trabajo para la Generación Y, como era de esperar. El estudio tiene limitaciones en cuanto a la muestra, el método y la interpretación de los datos, y se sugieren futuros estudios para superar tales limitaciones., Esta pesquisa analisa se há diferenças entre indivíduos das gerações X e Y quanto ao grau com que os antecedentes satisfação no trabalho e comprometimento organizacional precede a intenção de sair do emprego. Para mensuração dos construtos foram utilizados três questionários validados em estudos anteriores, apresentados em uma escala tipo Likert de 5 pontos: o primeiro de Price e Mueller (1981) para analisar a satisfação no trabalho; segundo o de Mowday, Steers e Porter (1979) para verificar o comprometimento organizacional; em terceiro, a análise da intenção de sair do emprego foi feita por meio do questionário de Shoere e Martin (1989). Em adição aos questionários, foram inseridas na pesquisa questões para levantamento de dados demográficos como idade, sexo, grau de escolaridade, ramo de atuação, nível hierárquico e local de residência. Foram obtidas um total de 320 respostas válidas e a relação entre as variáveis foi estudada por meio do método de Modelagem de Equações Estruturais, a fim de testar as hipóteses apresentadas, com a estimação PLS (Partial Least Squares – Path Modeling), através do software SmartPLS 2.0. Identificou-se um padrão de relações positivas e altamente significantes entre a satisfação no trabalho e o comprometimento organizacional, e relações negativas e significantes entre esses construtos e a intenção de sair do emprego para ambas as gerações X e Y. Na comparação entre gerações, os resultados sugerem que, para a geração X, a satisfação no trabalho mostrou-se como um antecedente mais forte do comprometimento organizacional e da intenção de sair do emprego, ao contrário do esperado. Entretanto, o comprometimento organizacional mostrou-se um antecedente mais forte da intenção de sair do emprego para a geração Y, conforme as expectativas. O estudo apresenta limitações quanto à amostra, ao método e à interpretação dos dados, bem como sugere estudos futuros apontando a necessidade de superar tais limitações.

RESUMO Esta pesquisa analisa se há diferenças entre indivíduos das gerações X e Y quanto ao grau com que os antecedentes "satisfação no trabalho" e "comprometimento organizacional" precedem a intenção de sair do emprego. Para mensuração dos construtos foram utilizados três questionários validados em estudos anteriores, apresentados em uma escala tipo Likert de 5 pontos: o primeiro de Price e Mueller (1981) para analisar a satisfação no trabalho; segundo o de Mowday, Steers e Porter (1979) para verificar o comprometimento organizacional; em terceiro, a análise da intenção de sair do emprego foi feita por meio do questionário de Shoere e Martin (1989). Em adição aos questionários, foram inseridas na pesquisa questões para levantamento de dados demográficos como idade, sexo, grau de escolaridade, ramo de atuação, nível hierárquico e local de residência. Foram obtidas um total de 320 respostas válidas e a relação entre as variáveis foi estudada por meio do método de Modelagem de Equações Estruturais, a fim de testar as hipóteses apresentadas, com a estimação PLS (Partial Least Squares - Path Modeling), através do software SmartPLS 2.0. Identificou-se um padrão de relações positivas e altamente significantes entre a satisfação no trabalho e o comprometimento organizacional, e relações negativas e significantes entre esses construtos e a intenção de sair do emprego para ambas as gerações X e Y. Na comparação entre gerações, os resultados sugerem que, para a geração X, a satisfação no trabalho mostrou-se como um antecedente mais forte do comprometimento organizacional e da intenção de sair do emprego, ao contrário do esperado. Entretanto, o comprometimento organizacional mostrou-se um antecedente mais forte da intenção de sair do emprego para a geração Y, conforme as expectativas. O estudo apresenta limitações quanto à amostra, ao método e à interpretação dos dados, bem como sugere estudos futuros apontando a necessidade de superar tais limitações. ABSTRACT This research examines whether there are differences between individuals from generations X and Y on the degree to which the backgrounds job satisfaction and organizational commitment precede the intention of quitting the job. In order to measure the constructs there were used three questionnaires, which were validated in previous studies, presented in a Likert scale of 5 points: the first is from Price and Mueller (1981) to analyze job satisfaction, the second is from Mowday, Steers and Porter (1979) to check the organizational commitment; the third is the analysis of intention of quitting the job, which was done by using the questionnaire of Benkhoff (1997). In addition to the questionnaires, it was included in the survey questions to collect demographics data such as age, sex, education level, field of expertise, hierarchical level and place of residence. There were obtained a total of 320 valid responses and the relation between the variables was studied by the method of Structural Equation Modeling in order to test the hypotheses presented, with the estimation PLS ( Partial Least Squares - Path Modeling) through the software SmartPLS 2.0. It was identified a pattern of positive and highly significant relation between job satisfaction and organizational commitment, and negative and significant relation between these constructs and the intention of quitting the job for both generations X and Y. Comparing the generations, the results suggest that for generation X job satisfaction proved to be a stronger antecedent to organizational commitment and intention to quit the job, contrary to expectations. However, as expected, organizational commitment proved to be a stronger antecedent to the intention of quitting the job for Generation Y. The study has limitations regarding the sampling, the methodology and the interpretation of data and suggests future studies indicating the need to overcome such limitations. RESUMEN Esta investigación examina si existen diferencias entre los individuos de las generaciones X e Y en el grado en que la satisfacción en el trabajo y el compromiso organizacional preceden la intención de dejar el trabajo. Para medir los constructos se utilizaron tres cuestionarios validados en estudios previos, que se presentan en una escala Likert de 5 puntos: el primero desde Price y Mueller (1981) para analizar la satisfacción laboral; el segundo de Mowday, Steers y Porter (1979) para evaluar el compromiso organizacional; en tercer, un análisis de intención de dejar el trabajo hecho por el Shoere y Martin (1989) cuestionario. Además de los cuestionarios, se incluyeron en las preguntas de la investigación datos demográficos. Se obtuvo un total de 320 respuestas válidas y para evaluar la relación entre las variables se utilizó el método de modelos de ecuaciones estructurales con el fin de probar la hipótesis presentada con estimación de el PLS por software SmartPLS 2.0. Se ha identificado un padrón de relación positiva y altamente significativa entre la satisfacción laboral y el compromiso organizacional, y relaciones negativas y significativas entre estes constructos y la intención de dejar el trabajo, tanto para las generaciones X e Y. En la comparación entre las generaciones, los resultados sugieren que para la generación X, la satisfacción laboral ha demostrado ser un antecedente más fuerte de compromiso organizacional y la intención de abandonar sus puestos de trabajo, en contra de las expectativas. Sin embargo, el compromiso de la organización resultó ser un antecedente más fuerte de la intención de dejar el trabajo para la Generación Y, como era de esperar. El estudio tiene limitaciones en cuanto a la muestra, el método y la interpretación de los datos, y se sugieren futuros estudios para superar tales limitaciones.

The paper has the general objective of analyzing the environmental sustainability of an Institution of Higher Education (IHE) Public of the State of Santa Catarina. To meet this objective has to reach the specific objectives: to check the number of IHEs in Brazil and Santa Catarina; to identify the number of public and private institutions and to propose a management model 5W2H to deficit sustainability criteria. The methodology and the objectives considered descriptive, with the technical procedures has the case study and the approach problem qualitative. The methodology is divided into three phases: the first phase it is the theoretical basis, it approaches social and environmental responsibility; environmental management and environmental management system. In the second phase it is the analysis of the results where first there was the amount of IHE and distribution in administrative categories. In the third phase, it has been the purpose of responding to a checklist of 154 questions developed by Pieri et al (2011) and Environmental Management Plan Summary (5W2H). In the end it is concluded that the institution submitted a global sustainability index of 32 %, being regarded as weak, proposing with the 5W2H tool, an action for each criterion, as the inclusion of recyclable products in acquisitions; recycling of waste; accessibility to the handicapped; and creating actions that approximates the IHE to the society. It is hoped that the proposed actions that the institution to put them into practice, increase the environmental sustainability index, benefiting society and the environment. El artículo tiene como objetivo principal analizar la sostenibilidad ambiental de una institución de educación superior - universidad pública en el estado de Santa Catarina. Para cumplir con este objetivo, se encuentran los siguientes objetivos específicos: Comprobar el número de instituciones de educación superior en Brasil y Santa Catarina; Identificar el número de instituciones de educación superior públicas y privadas y proponer un modelo de gestión 5W2H de criterios de sostenibilidad del déficit. La metodología de los objetivos es considerado descriptivo en relación con los procedimientos técnicos - estudio de caso y en el tema del enfoque cualitativo. La metodología se divide en tres fases: la primera fase es la base teórica, hablamos de responsabilidad social y ambiental; la gestión ambiental y el sistema de gestión ambiental. En la segunda fase es el análisis de los resultados, si primero no había la cantidad de IES y distribución en categorías administrativas. En la tercera fase, que tiene el propósito de dar respuesta a una lista de 154 preguntas desarrollado por Pieri et al (2011) y el Resumen del Plan de Gestión Ambiental - 5W2H. Al final se concluyó que la institución ha presentado un índice de sostenibilidad global del 32%, siendo considerado como débil, proponiendo 5W2H herramienta, una acción para cada criterio, como la inclusión de productos reciclables en el carro; reciclaje de residuos; la accesibilidad a las personas con discapacidad; y la creación de acciones que se aproxima a los IES de la sociedad. Se espera que las acciones propuestas por la institución al ponerlos en práctica, aumentan el índice de sostenibilidad del medio ambiente, en beneficio de la sociedad y el medio ambiente. O artigo tem como objetivo geral analisar a sustentabilidade ambiental de uma instituição de ensino superior (IES) pública do estado de Santa Catarina. Para atender a esse objetivo, buscou-se os seguintes objetivos específicos: verificar o número de IES existentes no Brasil e em Santa Catarina; identificar o número de IES públicas e privadas; e propor um modelo de gestão 5W2H para critérios deficitários de sustentabilidade. A metodologia é considerada descritiva quanto aos objetivos, qualitativa quanto aos procedimentos técnicos – estudo de caso – e qualitativa quanto à abordagem do problema. A trajetória metodológica divide-se em três fases: na primeira fase, fundamentação teórica, aborda-se a responsabilidade social e ambiental, a gestão ambiental e o sistema de gestão ambiental. Definidos os procedimentos metodológicos, na segunda parte, faz-se uma análise de resultados, onde primeiramente verificou-se a quantidade de IES e a distribuição nas categorias administrativas. Em seguida, buscou-se responder a uma lista de verificação, com 154 questões desenvolvidas por Pieri, Pfitscher, Frey, Freitas & Alberton (2011), para posteriormente apresentar um plano resumido de gestão ambiental. No final, conclui-se que a IES apresentou um índice de sustentabilidade global de 32%, considerado como fraco. O presente trabalho propõe, com a ferramenta 5W2H, uma ação para cada critério, como a inclusão de produtos recicláveis nas compras, reaproveitamento de resíduos, acessibilidade aos portadores de deficiência física e criação de ações que aproxime a IES da sociedade. Com as ações propostas, espera-se que a instituição incremente seu índice de sustentabilidade ambiental, beneficiando a sociedade e o meio ambiente.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Sócio-Econômico, Programa de Pós-Graduação em Administração, Florianópolis, 2013. Com o objetivo de analisar os elementos condicionantes da trajetória socioeconômica e os reflexos sobre o desenvolvimento da Região Metropolitana da Foz do Rio Itajaí considerando a contribuição da gestão pública, por meio de financiamentos via um Banco de Desenvolvimento, transcorre o presente trabalho. Neste contexto, busca-se identificar a trajetória de desenvolvimento da região Metropolitana da Foz do Rio Itajaí no âmbito da trajetória do Estado de Santa Catarina; diagnosticar a situação do desenvolvimento econômico, social e ambiental da Região Metropolitana da Foz do Rio Itajaí e qual o papel de um banco de desenvolvimento nesse contexto; evidenciar a atuação da gestão pública via banco de desenvolvimento na Região Metropolitana da Foz do Rio Itajaí e analisar, na perspectiva de um banco de desenvolvimento, a incorporação dos diversos conceitos de desenvolvimento em suas práticas de financiamento público. O trabalho possui uma abordagem qualitativa considerando a complexidade do problema e uma visão holística. Neste ambiente, trabalha-se com dados de múltiplas fontes, pois os dados foram coletados por meio de entrevistas, questionários, análises documentais e observações, além de dados secundários como institucionais, estatísticos e jornalísticos. Os resultados apontam para a negligência da dimensão ambiental do desenvolvimento, podendo resultar no longo prazo na depreciação das dimensões sociais e econômicas. Observa-se a atuação da gestão pública via um banco de desenvolvimento, o BRDE, na Região Metropolitana da Foz do Rio Itajaí, ainda se faz de forma tímida e passiva, com um significativo potencial de ampliação e possibilidade de se tornar um protagonista do processo de desenvolvimento territorial. Adicionalmente, medidas podem ser tomadas pela gestão pública, pela sociedade civil e pelo mercado para amenizar as tendências observadas ou tentar reverter os resultados apontados. Abstract : Aiming to analyze the factors affecting the socio-economic trajectory and reflections on the development of the metropolitan area of Foz do Rio Itajaí considering the contribution of public administration, through financing via a Bank of Development, this work takes place. In this context, we seek to identify the trajectory of development of the metropolitan area of Foz do Rio Itajaí within the trajectory of the State of Santa Catarina; diagnose the situation of economic, social and environmental development of the metropolitan area of Foz do Rio Itajaí and what role of a development bank that context, highlighting the role of public management via development bank in the metropolitan area of Foz do Rio Itajaí and analyze, from the perspective of a development bank, the incorporation of various development concepts in their lending practices public. The study has a qualitative approach considering the complexity of the problem and a holistic view. In this environment, we work with data from multiple sources, since the data were collected through interviews, questionnaires, observations and documentary analysis, secondary data as well as institutional, statistical and journalistic. The results point to the neglect of the environmental dimension of development and may result in long-term depreciation of the social and economic dimensions. We observe the performance of public administration via a development bank, BRDE, in the metropolitan area of Foz do Rio Itajaí, it is still a bit timid and passive, with a potential for significant expansion and ability to become a lead player in territorial development. Additionally, steps can be taken by the public administration, civil society and the market to mitigate the observed trends or try to reverse the aforementioned results.

Este artigo, elaborado a partir de uma pesquisa bibliográfica, aborda a expansão desenfreada do ensino superior brasileiro, especialmente o segmento das Instituições de Ensino Superior privadas, que tem levado a um intenso acirramento da concorrência entre as Instituições de Ensino Superior além de uma crescente preocupação para a Sociedade e para o Governo, sobre a garantia de padrões de qualidade para este importante segmento. Primeiramente é discutida a definição do conceito de qualidade em ensino superior, a seguir é feita uma análise crítica dos principais indicadores de qualidade instituídos pelo governo e sua eficiência em medi-la. Na sequência, o papel das Comissões Próprias de Avaliação — CPAs —é destacado nesse contexto. Por fim, o trabalho apresenta possíveis estratégias de gestão das IES nesse contexto de grande competitividade e pressão regulatória.

Submitted by Leticia Alvarenga (leticiaalvarenga@fdv.br) on 2018-09-04T18:34:03Z No. of bitstreams: 1 Debora Nitz Ferreira Elias (1).pdf: 690341 bytes, checksum: 29fd1a860915b9adcbc13780319579cf (MD5) Approved for entry into archive by Ana Paula Galdino (repositorio@fdv.br) on 2018-09-06T16:09:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Debora Nitz Ferreira Elias (1).pdf: 690341 bytes, checksum: 29fd1a860915b9adcbc13780319579cf (MD5) Made available in DSpace on 2018-09-06T16:09:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Debora Nitz Ferreira Elias (1).pdf: 690341 bytes, checksum: 29fd1a860915b9adcbc13780319579cf (MD5) Previous issue date: 2009-02-06 A presente pesquisa tem por objetivo empreender uma discussão jurídica acerca da eficácia da função social da propriedade fundiária em face da concepção socializada de propriedade proposta pelos movimentos sociais rurais, em espacial o MST, como um meio de se efetivar no meio rural os direitos fundamentais estipulados na Constituição Federal. Certamente, não é tarefa fácil, nem se tem a pretensão de esgotar o tema proposto, mas espera-se contribuir para uma melhor compreensão dos institutos que serão analisados. The present research aims to undertake a legal discussion about the effectiveness of the social function of land ownership in the face of the socialized conception of property proposed by the rural social movements, in MST, as a means of carrying out in the rural environment the stipulated fundamental rights in the Federal Constitution. It is certainly not an easy task, nor is it intended to exhaust the proposed theme, but it is hoped to contribute to a better understanding of the institutes that will be analyzed.

Nas duas últimas décadas, o capital intelectual (CI) emergiu como fator crucial para a competitividade organizacional. Nesse contexto, a necessidade do gerenciamento do CI tem sido destacada na literatura, por meio de abordagens para sua avaliação. Reconhecendo as vantagens dessas abordagens, Schnorrenberger (2005) e Ensslin e Dutra (2007) apontam sua limitação em não atender, simultaneamente, às três etapas do gerenciamento do CI: identificação, avaliação e recomendação de aperfeiçoamento. O objetivo deste trabalho, de caráter exploratório, consiste em construir um modelo de avaliação do CI que englobe seu gerenciamento utilizando a metodologia multicritério para apoio à decisão - construtivista (MCDA-C). Argumenta-se que a proposta conseguiu cumprir a tarefa de identificar os 57 elementos que respondem ao CI da organização pesquisada, avaliando e integrando todos os elementos, possibilitando uma visão global do desempenho e identificando os elementos do conhecimento como os principais responsáveis pelo desempenho nãocompetitivo da organização. Over the past two decades, intellectual capital (IC) has emerged as a crucial factor for corporate competitiveness. In this context, the management of IC has received considerable attention in the literature by means of approaches to its evaluation. Recognizing the validity of such approaches, Schnorrenberger (2005) and Ensslin and Dutra (2007) point out their main limitation regarding their incapacity to simultaneously attend to the three stages of IC management, namely, identification, evaluation, and recommendation for improvement. The objective of the present paper - of an exploratory nature - is to construct a model for IC evaluation that includes its management utilizing the multicriteria methodology for decision aid - constructivist (MCDA-C). It is argued that the model accomplished the task of identifying the 57 elements comprising the IC in the organization investigated, evaluating and integrating all elements, providing a global view of the performance and identifying the elements of knowledge as the main elements responsible for the noncompetitive performance of the organization.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Sócio-Econômico. Programa de Pós-Graduação em Contabilidade A literatura tem salientado o papel do Capital Intelectual (CI) como o principal agente de agregação de valor às organizações e como o elemento capaz de auxiliar as empresas a se tornarem mais competitivas. Diante da relevância do CI, o objetivo geral desta pesquisa, de caráter teórico-empírico, é realizar um estudo longitudinal referente à evidenciação voluntária do CI, nos Relatórios Anuais (RA) de companhias brasileiras, nos anos 2000, 2002 e 2004. Duas hipóteses de pesquisa foram enunciadas: H1 - Os resultados sobre evidenciação voluntária do CI das companhias brasileiras comportam-se de maneira similar àqueles do contexto internacional; H2 - Existe uma tendência ascendente de evidenciação voluntária do CI nos relatórios das companhias brasileiras. Este estudo apresenta os resultados de uma investigação sobre a evidenciação voluntária do Capital Intelectual (CI) nos relatórios de administração das 25 maiores companhias abertas brasileiras (Capital Social), listadas na BOVESPA, divulgadas com data base de 31/12/2004. A metodologia utilizada para a investigação das manifestações de CI foi a técnica da "análise de conteúdo", adaptada por Guthrie e Petty (2000a); o framework de classificação - no que concerne as categorias e elementos constituintes do CI - foi o proposto por Sveiby (1997). Esta escolha metodológica se deu em função dos resultados obtidos em uma investigação, no contexto internacional, onde foi possível identificar uma tendência de procedimentos, como tratado no presente trabalho. Confirmaram-se as duas hipóteses de pesquisa, ou seja, a evidenciação voluntária de CI no contexto brasileiro comporta-se de maneira similar àquela observada no contexto internacional; a evidenciação voluntária de CI nos RAs das companhias brasileiras apresenta uma tendência ascendente, ao longo do período estudado. Os resultados do estudo longitudinal apontam para (i) uma incidência alta de divulgação voluntária de CI nos relatórios das empresas brasileiras; (ii) uma significativa tendência para evidenciação em termos qualitativos (narrativa), mas não quantitativos; e, (iii) maior freqüência do capital externo como categoria de CI.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas Há milênios o homem utiliza plantas medicinais com a finalidade de acelerar o processo de cicatrização de feridas cutâneas. Apesar do uso sistemático algumas plantas medicinais ainda não receberam o devido respaldo científico através da experimentação. Objetivo: Estudar comparativamente, através de metodologia histométrica, o potencial cicatrizante dos extratos aquosos de Coronopus didymus e Calendula officinalis. Métodos: 15 ratos Wistar, machos, pesando aproximadamente 250 g foram submetidos ao resseccionamento de um fragmento cutâneo circular de aproximadamente 1 cm de diâmetro, até a exposição da fáscia muscular. Os animais foram divididos em dois grupos. O grupo controle recebeu diariamente sobre o ferimento uma gota de soro fisiológico. O grupo experimental foi redistribuído em 2 subgrupos. O Sub-grupo CD recebeu diariamente uma gota de extrato aquoso de Coronopus didymus e no Sub-grupo CO aplicou-se diariamente uma gota de extrato aquoso de Calendula officinalis. Decorridos sete dias de experimento, os animais foram submetidos à eutanásia. A área em cicatrização foi removida e processada para confecção de lâminas histológicas coradas com H. E. Para a avaliação morfométrica utilizou-se uma ocular histométrica dotada de um retículo de 100 pontos e empregou-se uma objetiva de 100x. Resultados: A avaliação histométrica permitiu observar que o grupo controle apresentou em média 14,51 fibroblastos e 64,63 fibras colágenas por campo observado; o Sub-grupo Coronopus didymus apresentou em média 19,06 fibroblastos e 70,95 fibras colágenas e o Sub-grupo Calendula officinalis apresentou em média 17,89 fibroblastos e 68,54 fibras colágenas. Conclusões: Os resultados obtidos neste estudo permitem concluir que o extrato aquoso de Coronopus didymus mostrou-se eficiente no processo cicatricial de feridas cutâneas em ratos Wistar, uma vez que promoveu um aumento, estatisticamente significante, do número de fibroblastos e fibras colágenas. O extrato aquoso de Calendula officinalis, apesar de proprocionar um maior número de fibras colágenas e fibroblastos que o grupo controle, não apresentou diferença estatisticamente significante.

Orientador: Antonio Marsaioli Jr Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Na produção de massas alimentícias, a etapa de secagem tem grande importância do ponto de vista de qualidade do produto, assim como nos aspectos econômicos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar um equipamento desenvolvido para a secagem de massas alimentícias curtas com a utilização de microondas, visando à redução do tempo de secagem em comparação aos processos convencionais. A operação objetiva reduzir o teor de umidade de aproximadamente 15 até 12 a 13% em base úmida. O equipamento é constituído de um leito descendente percorrido pelo alimento. Uma esteira transportadora sob a extremidade inferior do leito movimenta-se perpendicularmente ao fluxo de produto. A velocidade dessa esteira controla o tempo de residência no secador. No percurso entre os bocais de alimentação e descarga, o produto passa por seções onde recebe a aplicação de microondas e é ventilado com ar quente. Foram avaliadas diferentes combinações de potência de microondas e tempo de residência. As demais variáveis - umidade, temperatura e velocidade do ar - foram fixadas. A umidade final e a ocorrência de defeitos na massa foram as respostas estudadas. A partir dos resultados exploratórios obtidos neste trabalho pôde-se comprovar a viabilidade técnica de se secar massas curtas nesse equipamento, tendo sido possível também, apontar modificações a serem feitas no protótipo visando à melhoria da operação e sua aplicação em escala industrial. As propriedades dielétricas do macarrão foram determinadas para valores diversos de umidade. O conhecimento destes parâmetros permite avaliar o comportamento do material sob o efeito de um campo de microondas Abstract: During pasta manufacturing, the drying process has a major importance both in quality and economic aspects. A piece of equipment developed for drying short cut pasta with microwave energy was evaluated in an attempt to reduce drying time in comparison with conventional processes. This operation must reduce the moisture content of the product from 15 to 12-13%, wet basis. The short cut pasta runs through a falling bed as a conveyer-belt moves below it. The speed of the belt controls the residence time in the dryer. Inside the equipment, microwave and hot air are applied to the product. Different combinations of microwave power and residence time were evaluated. The other variables such as moisture, temperature and velocity of air were not studied. The final moisture and the occurrence of damage to the product were the responses analyzed. From the exploratory results obtained in this work, the technical possibility of drying pasta in this piece of equipment was attested. It was also possible to suggest changes to be implemented in the prototype in order to make the scale up and further industrial application possible. The dielectric properties of pasta were determined for different moisture contents. These parameters are important to evaluate the behavior of the material in a microwave field Mestrado Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador: Antonio Carlos Luz Lisbôa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química Resumo: O Engenheiro Químico no início de carreira se depara com vários desafios. Após conquistar uma vaga de Trainee ou Engenheiro Júnior em uma empresa, o egresso do curso de engenharia entra em contato com problemas e demandas que exigem conhecimentos não estudados na universidade. Essa experiência foi vivenciada pelo Autor e serviu de motivação para este trabalho, com o propósito de aproximar academia e indústria por meio da educação. O objetivo central foi propor novas disciplinas para o curso de Engenharia Química, com temas relevantes para o engenheiro que inicia sua carreira nas áreas de projetos, processos químicos ou produção para o setor industrial. Por meio de revisão bibliográfica, experiências do Autor, pesquisa de vagas e estudo da legislação do Ministério da Educação foi possível verificar as competências esperadas para o egresso do curso de engenharia e identificar os conteúdos exigidos pelo mercado de trabalho. Duas relações foram geradas para mostrar a importância dos temas propostos neste estudo. Na sequência foram elaborados quatro planos de ensino e seus respectivos planejamentos de aulas para as disciplinas de desenvolvimento de fluxogramas, utilidades industriais, normas técnicas para Engenharia Química e engenharia de produto. Essas disciplinas foram classificadas como obrigatórias e poderiam ser oferecidas no final do curso de graduação. As análises e conclusões finais mostraram que é possível implementar as quatro disciplinas em um curso de Engenharia Química por meio da atuação do Núcleo Docente Estruturante Abstract: The Chemical Engineer at the beginning of his career is faced with several challenges. After conquering a position as a Trainee or Junior Engineer in a company, the engineering graduate comes into contact with problems and demands that require knowledge not studied at university. This experience was lived by the author and served as a motivation for this work, with the purpose of bringing school and industry together through education. The main objective was to propose new disciplines for the Chemical Engineering course, with relevant themes for the engineer who starts his career in the areas like design, chemical processing or production for the industrial sector. By means of a literature review, the Author's experiences, an available position survey and a study of the legislation of the Brazil Education Ministry, it was possible to verify the competencies expected for the graduate of the engineering course and to identify the contents demanded by the job market. Two relations were generated to show the importance of the themes proposed in this study. Next, subjects and their syllabus were drawn up for four disciplines: flowchart development, industrial utilities, technical norms for Chemical Engineering and product engineering. These subjects were classified as required and could be offered at the end of the undergraduate course. The analyses and final conclusions showed that it is possible to implement the four disciplines in a Chemical Engineering course through the actions of the structuring teaching nucleus Mestrado Engenharia Química Mestre em Engenharia Química CAPES 33003017034P-8

Tese (doutorado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências Médicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2021. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). A doença de Chagas (DC) é uma doença tropical negligenciada transmitida por vetores causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi. A patologia é endêmica nas Américas, mas devido às migrações, a doença adquiriu importância global. A maioria dos indivíduos infectados permanece assintomática, entretanto, cerca de um terço dos pacientes progride para a fase crônica sintomática, que inclui sintomas digestivos e/ou cardíacos. Apesar do conhecimento atual, os mecanismos envolvidos na patogênese da DC ainda não estão totalmente elucidados. A hipótese integrativa permite avaliar como múltiplos mecanismos contribuem para a gênese dos sintomas presentes na DC. Assim, o objetivo do nosso estudo foi avaliar de forma integrativa a importância de fatores relacionados ao hospedeiro e o parasita em pacientes com diferentes sintomas da DC crônica. O estudo foi realizado com 176 pacientes, agrupados segundo o perfil clínico. A carga parasitária, os eventos de integração kDNA e a quantidade de LINE-1 foram avaliados por qPCR. A produção de anticorpos específicos contra o parasita e contra autoantígenos, cardíacos e intestinais, foram avaliadas por ELISA. A dosagem de citocinas foi realizada por citometria de fluxo. Nossos resultados confirmaram que a carga parasitária e o tratamento com o fármaco tripanocida durante a fase crônica não influenciam o perfil clínico dos pacientes. Da mesma forma, a análise de citocinas demonstrou a predominância do perfil pró-inflamatório nos grupos estudados. Ademais, todos os pacientes produziram anticorpos contra o parasita, e contra autoantígenos cardíacos e intestinais, independentemente dos sintomas. Tais achados sugerem que nenhum desses fatores influencia significativamente a patogênese da DC quando analisados de forma independente. No entanto, mediante as análises de correlação, foi possível detectar diferentes padrões de citocinas nos pacientes avaliados. Os indivíduos assintomáticos apresentaram uma produção mais equilibrada de citocinas pró e anti-inflamatórias. Além disso, o aumento dos níveis de IL-10 e IL-4 foram associados ao aumento da produção de anticorpos contra o T. cruzi e contra antígenos próprios, e o perfil de produção de anticorpos autoreativos diferiu entre os pacientes sintomáticos. Finalmente, os eventos de integração do KDNA não se correlacionaram com a gravidade dos sintomas, sugerindo que o sítio de integração deve ser o fator determinante. Dessa forma, nossos resultados fortalecem a hipótese de que processos patogênicos múltiplos influenciam o desenvolvimento das diferentes formas clínicas da CD, apoiando o uso de abordagens integrativas para criar uma assinatura clínica para pacientes crônicos com CD. Chagas disease (CD) is a vector-borne neglected tropical disease caused by the protozoan Trypanosoma cruzi. It is endemic in the Americas, but it has spread all over the world due to migrations. CD presents different clinical forms; following infection, while most individuals remain asymptomatic, about a third will progress to symptomatic chronic phase, which includes digestive and/or cardiac symptoms. Despite current knowledge, the mechanisms underlying the symptomatic forms of CD's are not fully elucidated. The integrative hypothesis proposes that multiple mechanisms contribute to the genesis of chronic, symptomatic CD. In the present study, we analyzed different host- and parasite-related factors to develop an integrative analysis to how they relate to the different manifestations of chronic CD. The study was conducted with 176 patients, grouped according to clinical profile. Parasite load, kDNA integration, and LINE-1 quantification were assessed by qPCR. Antibody reactivity against parasite-, cardiac- and intestinal-specific antigens were evaluated by ELISA. Cytokine production was measured by flow cytometry. Our data confirms that parasitic load and trypanocide treatment received during the chronic phase did not influence the patients' clinical profile. Similarly, cytokine analysis demonstrated a pro-inflammatory profile in all CD patients. All patients produced antibodies against the parasite, as well as cardiac and intestinal self-antigens, regardless of the symptoms. Such findings suggest that none of these factors significantly influence CD pathogenesis when taken independently. Nevertheless, using correlation analyses, we detected different cytokine patterns in the different clinical forms of CD, the asymptomatic patients presenting a more balanced production of pro- and anti-inflammatory cytokines. Furthermore, increased IL-10 and IL-4 levels were associated with the production of antibodies against parasite and host antigens, the profile of autoreactive antibody production differs among symptomatic patients. Finally, kDNA integration events failed to correlate with symptom severity, possibly suggesting that the site of integration may be a determining factor in this sense. Taken together, our results strengthen the notion that multiple pathogenic processes influence CD clinical forms, supporting the use of integrative approaches to create a clinical signature for chronic CD patients.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2019. Introdução: A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, afeta aproximadamente oito milhões de pessoas em todo o mundo. Cerca de um terço dos indivíduos com a infecção crônica desenvolve a cardiomiopatia chagásica, manifestação clínica mais importante da doença, principal responsável pela letalidade. As drogas tripanocidas, apesar de reduzirem a parasitemia na fase aguda, não possuem eficácia sobre a fase crônica e na progressão das lesões no coração. A eritropoietina (Epo), glicoproteína que regula a produção de eritrócitos, possui efeito cardioprotetor reduzindo o processo de apoptose, inflamação e isquemia do miocárdio. Objetivo: Investigar o possível efeito cardioprotetor da Epo na infecção murina pelo Trypanosoma cruzi. Métodos: Foram utilizados 52 camundongos fêmeas C57BL/6 uniformes quanto ao peso e idade. Os animais foram aleatoriamente divididos em oito subgrupos experimentais separados em dois grandes grupos: 1. Administração de salina ou Epo na fase aguda da infecção (n=28); 2. Administração de salina ou Epo na fase crônica da infecção (n=24). Os animais infectados receberam injeção intraperitoneal (ip) com 105 tripomastigotas da cepa Colombiana de T. cruzi. Os animais tratados com Epo receberam 2000 U/kg ip em dias alternados durante 30 dias após a infecção, sendo eutanasiados com 180 dias pós-infecção. Foi realizado hemograma no dia 0 (d0) e no dia 180 (d180). Dosagem sérica de enzimas marcadores de danos cardíacos foi realizada em d0, d15, d90 e d180. A avaliação do funcionamento cardíaco foi realizada através de ecocardiograma. Foi utilizada a PCR quantitativa (qPCR) para determinar a carga parasitária no coração, sangue, baço e intestino grosso. Por fim, análise histopatológica foi realizada para avaliação de alteração tecidual. Resultados: Como esperado, o hematócrito foi significativamente maior logo após o tratamento com Epo, mas este retornou aos valores pré-tratamento em d180. A maioria dos parâmetros hematológicos estavam dentros dos valores de referência, mesmo com a infecção e/ou tratamento com Epo. A dosagem de enzimas bioquímicas apresentou grande variabilidade intra-grupo, não sendo possível traçar a cinética ao curso da infecção. De interesse, a administração de Epo fez com que os níveis de creatina quinase fração miocárdica (CK- MB) fossem significativamente menores em comparação aos animais que receberam salina. A fração de ejeção foi normal em 100% dos animais infectados tratados com Epo na fase crônica. O mesmo só foi observado no grupo de camundongos não infectados tratados com Epo na fase aguda. A análise histopatológica cardíaca confirmou os achados da bioquímica e da ecografia para o grupo de animais infectados e tratados com Epo na fase crônica. Entretanto, quando os camundongos infectados foram tratados na fase aguda, foi observado necrose, fibrose e intenso infiltrado inflamatório no coração. A carga parsitária foi maior no coração entretanto, o número de parasitos tendeu a ser mais elevado nos grupos infectados tratados com Epo. Conclusão: Alguns dos parâmetros avaliados sugeriram um efeito cardioprotetor da Epo na doença de Chagas murina. Entretanto, mais estudos são necessários para comprovar seu real interesse nas infecções pelo T. cruzi. Introduction: Chagas disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, affects approximately eight million people worldwide. About one third of patients with chronic infection in chagasic cardiomyopathy, the most important clinical manifestation of the disease, mainly responsible for lethality. Like trypanocidal drugs, although they reduce parasitemia in the acute phase, they cannot affect the chronic phase and the progress of heart lesions. Erythropoietin (Epo), a glycoprotein that regulates the production of erythrocytes, has a cardioprotective effect on the use or process of apoptosis, inflammation and myocardial ischemia. Objective: To investigate the possible cardioprotective effect of Epo on murine infection by Trypanosoma cruzi. Methods: Fifty-two uniform C57BL / 6 female mice were used for weight and age. The animals were randomly divided into eight experimental subgroups separated into two large groups: 1. Administration of saline or Epo in the acute phase of infection (n = 28); 2. Administration of saline or Epo in the chronic phase of infection (n = 24). The infected animals received intraperitoneal (ip) injection with 105 trypomastigotes of the T. cruzi Colombian strain. Animals treated with Epo received 2000 U / kg ip every other day for 30 days after infection and were euthanized 180 days after infection. Blood count was performed on day 0 (d0) and on day 180 (d180). Serum dosing of cardiac damage marker enzymes was performed at d0, d15, d90 and d180. Cardiac function was assessed by echocardiography. Quantitative PCR (qPCR) was used to determine the parasitic load on the heart, blood, spleen and large intestine. Finally, histopathological analysis was performed to evaluate tissue alteration. Results: As expected, hematocrit was significantly higher soon after treatment with Epo, but it returned to pretreatment values at d180. Most hematological parameters were within the reference values, even with infection and / or treatment with Epo. The dosage of biochemical enzymes showed great intra-group variability, and it was not possible to trace the kinetics to the course of the infection. Of interest, administration of Epo caused myocardial fraction creatine kinase (CK-MB) levels to be significantly lower compared to animals receiving saline. Ejection fraction was normal in 100% of infected animals treated with Epo in the chronic phase. The same was observed only in the group of uninfected mice treated with Epo in the acute phase. Cardiac histopathological analysis confirmed the findings of biochemistry and ultrasound for the group of animals infected and treated with Epo in the chronic phase. However, when infected mice were treated in the acute phase, necrosis, fibrosis and intense inflammatory infiltrate were observed in the heart. Parsitic burden was higher in the heart; however, the number of parasites tended to be higher in infected groups treated with Epo. Conclusion: Some of the evaluated parameters suggested a cardioprotective effect of Epo on murine Chagas disease. However, further studies are needed to prove their real interest in T. cruzi infections.

Orientador: Osvaldir Pereira Taranto Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química Resumo: O objetivo deste trabalho foi estudar o processo de aglomeração de goma arábica em leito fluidizado utilizando solução de goma arábica e solução de inulina como ligantes, para obter um produto instantâneo que associasse inulina à goma arábica, e avaliar a qualidade do produto. Além disso realizar o monitorando em tempo real o tamanho das partículas de modo a melhor compreender os efeitos dos parâmetros do processo no crescimento das partículas. Foi utilizado planejamento composto central rotacional para estudo do processo de aglomeração. As variáveis independentes estudadas foram a temperatura do ar de fluidização (58 - 92 °C) e a vazão de atomização do ligante (1,0 ¿ 3,6 mL/min) tanto para soluções de goma arábica quanto para soluções de inulina. A concentração da solução também foi uma variável independente e variou de acordo com o tipo de ligante, de 0,7% a 24,9% (m/m) para soluções de goma arábica e de 1,9% a 22,1% (m/m) para soluções de inulina. As respostas avaliadas foram o rendimento do processo e o tamanho médio final das partículas. O monitoramento in-line do tamanho das partículas foi realizado por meio de velocimetria de filtro espacial. Com esse monitoramento foi possível acompanhar o crescimento dos grânulos ao longo do tempo e analisar como ele foi influenciado pelas variáveis independentes. O aumento da vazão de ligante e da concentração da solução para soluções de goma arábica influenciaram positivamente a taxa de crescimento e tamanho médio final das partículas. A vazão de ligante apresentou efeito significativo e positivo para o rendimento do processo de aglomeração para os dois tipos de ligante. Isso indica que a rápida inserção de ligante no leito é vantajosa para a aglomeração de goma arábica. O aumento da temperatura prejudicou o crescimento dos grânulos para os dois ligantes utilizados. Foi possível estabelecer as condições ótimas para os dois processos com relativo aumento do tamanho da partícula e rendimentos superiores a 60,0%. As soluções de inulina apresentaram-se como uma opção de ligante que pode associar propriedades prebióticas aos aglomerados, uma vez que ocorreu aglomeração e inulina foi associada ao produto aglomerado. O produto aglomerado apresentou melhores propriedades de instantaneização e fluidez para os dois tipos de ligantes utilizados quando comparado à matéria-prima Abstract: The aim of this work was to study the gum arabic agglomeration process using gum arabic solution and inulin solution as binders to obtain an instant product that associates inulin to gum arabic, and to evaluate the product quality. A rotational central composite experimental design was used to study the agglomeration process. The independent variables studied were the fluidizing air temperature (58 - 92 °C) and the binder flow rate (1.0 - 3.6 mL/min) for both gum arabic solutions and inulin solutions. The binder solution concentration was also an independent variable and varied according to the type of binder from 0.7% to 24.9% (m/m) for solutions of gum arabic and from 1.9% to 22.1% (m/m) for inulin solutions. The evaluated responses were the process yield and the final mean particle size. The particle size in-line monitoring was performed using spatial filter velocimetry. This monitoring was useful to follow the granules growth over time and to analyze how it was influenced by the independent variables. The increase at the binder flow rate and at the solution concentration for gum arabic solutions positively influenced the particle growth and final particle size. The binder flow rate showed a significant and positive effect on the agglomeration process yield for the binders. This indicates that the rapid insertion of binder in the fluidized bed is advantageous for the gum arabic agglomeration. The fluidizing air temperature increase impaired the granules growth for both used binders. It was possible to establish optimal conditions for the two processes with a relative increase of the particle size and yields over 60.0%. In addition, the inulin solutions were presented as a binder solution option which may associate prebiotic properties to the agglomerates, once agglomeration occurred and inulin was incorporated into the agglomerated product. The agglomerated product presented better instantaneous and flow properties for the two types of binders used when compared to the raw material Doutorado Engenharia Química Doutora em Engenharia Química CAPES 88882.329696/2019-01

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2018. Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal (FAPDF), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença tropical negligenciada causada por protozoários do gênero Leishmania. A transmissão ocorre principalmente pela picada de flebotomíneos fêmeas infectadas. A LTA apresenta um amplo espectro de manifestações clínicas classificadas como leishmaniose cutânea localizada (LCL), leishmaniose cutânea disseminada (LCDs), leishmaniose cutânea difusa (LCDf) e leishmaniose mucocutânea (LMC). Os mecanismos envolvidos no desenvolvimento e progressão das lesões ainda não estão completamente elucidados, sendo essencial conhecer os fatores que atuam na patogênese da doença e como eles contribuem para a diversidade de apresentações dos sintomas para melhor atendimento e tratamento dos pacientes. Neste trabalho, avaliou-se aspectos imunológicos e moleculares da LTA em indivíduos provenientes de áreas endêmicas do Brasil a fim de se verificar como esses aspectos estão associados às diversas manifestações clínicas da doença. A população do estudo foi composta por 30 pacientes provenientes de Corte de Pedra (Bahia) e 45 pacientes de diversas localidades atendidos no Hospital Universitário de Brasília (HUB) (Distrito Federal). Os indivíduos foram avaliados quanto à sintomatologia, sexo, idade, procedência, carga parasitária, produção de anticorpos e de citocinas. Além disso, foi analisada a influência da diversidade do parasito pela identificação de espécies de Leishmania e foi realizada pesquisa do vírus de RNA de Leishmania (LRV1) nas amostras. Foram coletadas amostras de sangue e de soro de todos os pacientes e biópsias dos indivíduos que apresentavam lesões ativas. A parasitemia foi determinada por qPCR direcionada ao kDNA do parasito e a presença do LRV1 foi avaliada por qRT-PCR e RT-PCR. A identificação das espécies de Leishmania se deu mediante sequenciamento dos produtos de PCR da região espaçadora do gene de RNA ribossomal ITS1. O método sorológico ELISA foi utilizado para a determinação de IgG anti-Leishmania e a citometria de fluxo para a dosagem das citocinas. Dos 75 pacientes avaliados, 23 (31%) pacientes eram assintomáticos, 34 (45%) pacientes apresentaram LCL primária, 10 (13%) pacientes apresentavam LCL recidiva e oito (11%) pacientes apresentavam LMC. O diagnóstico sorológico identificou 60 (80%) casos positivos e foi mais sensível para o grupo assintomático. As citocinas TNF, IFN-y, IL-17A e IL-2 foram diretamente relacionadas a grupos clínicos específicos. As diferenças nas concentrações de citocinas e sua correlação com os grupos clínicos avaliados reforçam a importância do sistema imune do hospedeiro na manifestação dos sintomas. O teste molecular detectou 45 (60%) pacientes positivos, sendo que a maior carga parasitária foi relatada em pacientes de Corte de Pedra com lesão ativa. As espécies L. amazonensis, L. braziliensis e L. guyanensis foram identificadas. Não foi demonstrada diferença estatística significativa na titulação de anticorpos e na carga parasitária entre os indivíduos com diferentes manifestações clínicas, não sendo possível relacionar esses fatores à severidade dos sintomas. Ademais, o LRV1 não foi detectado em nenhuma amostra. Isso nos levou a realizar experimentos in vitro com a finalidade de avaliar a influência do LRV1 na infectividade e na resposta ao tratamento com antimonial pentavalente e anfotericina B. Os resultados indicaram que o LRV1 não altera a taxa de infectividade das espécies de Leishmania, porém sua presença pode estar relacionada à resistência ao tratamento com antimonial pentavalente. Os resultados obtidos corroboram que múltiplos fatores atuam em associações complexas para resultar no amplo espectro sintomático da LTA, contudo é necessária a realização de novos estudos, com número amostral maior, para que se possa expandir o conhecimento acerca desses fatores. American Tegumentary Leishmaniasis (ATL) is a neglected tropical disease caused by protozoa of the genus Leishmania. Transmission occurs mainly by the bite of infected female sandflies. ATL presents a wide spectrum of clinical manifestations classified as cutaneous leishmaniasis (CL), disseminated leishmaniasis (DL), diffuse cutaneous leishmaniasis (DCL) and mucocutaneous leishmaniasis (MCL). The mechanisms involved in the development and progression of the lesions have not yet been fully elucidated and is essential to understand the factors that act in the pathogenesis of the disease and how they contribute to the diversity of presentations of the symptoms for better care and treatment of the patients. In this study, immunological and molecular aspects of ATL were evaluated in individuals from endemic areas of Brazil in order to verify how these aspects are associated with the clinical manifestations of ATL. The study population was 30 patients from Corte de Pedra (Bahia) and 45 patients from different locations attended at the University Hospital of Brasília (UHB) (Federal District). The individuals were evaluated for symptomatology, sex, age, origin, parasite load, production of antibodies and of cytokines. In addition, the influence of parasite diversity on the identification of Leishmania species and Leishmania RNA virus (LRV1) in the samples was analyzed. Blood and serum samples from all patients and biopsies of individuals with active lesions were collected. Parasitemia was determined by qPCR directed to kDNA of the parasite and the presence of LRV1 was evaluated by qRT-PCR and RT-PCR. Identification of the Leishmania species was performed by sequencing the ribosomal RNA gene ITS1. ELISA was used for the determination of anti-Leishmania IgG and flow cytometry for cytokine dosing. Of the 75 patients evaluated, 23 (31%) patients were asymptomatic, 34 (45%) patients had primary CL, 10 (13%) patients had recurrent CL, and eight patients (11%) had MCL. The serological diagnosis identified 60 (80%) positive cases and was more sensitive to the asymptomatic group. TNF, IFN-γ, IL-17A and IL-2 cytokines were directly related to specific clinical groups. Differences in cytokine concentrations and their correlation with the clinical groups evaluated reinforce the importance of the host immune system in the manifestation of symptoms. The molecular test detected 45 (60%) positive patients, and the highest parasite load was reported in patients with cutaneous lesion with active lesion. The species L. amazonensis, L. braziliensis and L. guyanensis were identified. No significant statistical difference was found in antibody titers and parasite load among individuals with different clinical manifestations, and it is not possible to relate these factors to the severity of the symptoms. In addition, LRV1 was not detected in any sample. This led us to conduct in vitro experiments to evaluate the influence of LRV1 on infectivity and response to treatment with pentavalent antimonial and amphotericin B. The results indicated that LRV1 does not change the infectivity rate of Leishmania species, but it is may be related to resistance to pentavalent antimonial treatment. In conclusion, the results obtained corroborate that multiple factors act in complex associations to result in the broad spectrum of symptomatic ATL. It is necessary to carry out new studies, with a larger sample number, so that the knowledge about the factors involved in the pathogenesis of the disease can be expanded.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2018. Coordenação de Aperfeiçoamento de Nível Superior (CAPES). Introdução: a doença de Chagas (DC) é uma doença tropical negligenciada, considerada um grave problema de saúde pública na América Latina. Devido a migrações, a DC vem se estabelecendo em países não endêmicos, principalmente pelas vias de transmissão transfusional e congênita. A frequência global da transmissão congênita varia em torno de 4 a 12% e no Brasil, de 0,1 a 5,2%. No Distrito Federal (DF), o último trabalho sobre prevalência da DC em gestantes e transmissão congênita foi realizado em 1983. Vista a escassez de dados atualizados sobre o tema no DF, hoje, é necessária a implantação de uma nova avaliação para uma visão mais recente, pois mudanças ocorreram em vários aspectos e indicadores populacionais. Objetivo: estimar a prevalência de infecção por Trypanosoma cruzi em gestantes atendidas pelo SUS (Sistema Único de Saúde) no período de 2014 a 2016 e estimar a frequência de transmissão congênita nos filhos de mães soropositivas para T. cruzi no DF, em 2016. Métodos: foram desenvolvidos estudos epidemiológicos transversais para: i) estimativa da soroprevalência em mulheres gestantes nos anos de 2014, 2015 e 2016; e ii) comparação de variáveis selecionadas entre as mães soropositivas em 2016 e dados do SINASC do mesmo ano; desenvolvido também um estudo epidemiológico de coorte descritiva para o estudo das crianças nascidas das mães soropositivas em 2016. Os dados para estimar a soroprevalência foram extraídos do Banco de Dados do Instituto de Diagnósticos de Brasília da APAE/DF, que compõe a Rede Cegonha da Secretaria de Estado de Saúde. Foi aplicado um questionário abordando dados do perfil demográfico, características de moradia, dados socioeconômicos, dados gestacionais e clínicos, perfil sorológico, conhecimento sobre a DC e dados dos bebês. Foi coletada uma amostra de sangue venoso das mães, uma amostra dos filhos após nascimento e, caso houvesse um resultado inicial positivo, uma segunda coleta aos nove meses. As amostras foram submetidas a testes sorológicos, parasitológicos diretos e moleculares. Resultados: a análise dos dados mostrou que a prevalência da infecção por T. cruzi em gestantes no período foi de 0,20% (52/25.871), 0,21% (74/35.790) e 0,17% (62/37.234) respectivamente em 2014, 2015 e 2016 e a taxa de transmissão congênita foi de 2,5% (1/40), em 2016 e a maioria de infectadas está concentrada na RA Ceilândia. A faixa etária mais frequente foi de 20 a 39 anos nos três anos e a maioria é provinda do estado da Bahia. A frequência da infecção em gestantes e a taxa de transmissão congênita no DF corroboram com outros achados na literatura. Conclusão: o rastreio no pré-natal foi de extrema importância para o conhecimento das mães sobre sua soropositividade para T. cruzi e permitiu a identificação de um caso de transmissão congênita. Os resultados reforçam a necessidade de implementação contínua de um sistema de rastreio para as mulheres gestantes e tratamento oportuno para recém-nascidos e crianças infectadas. Introduction: Chagas' disease (DC) is a neglected disease considered a serious public health problem in Latin America. Due to migrations, DC has been established in non-endemic countries, mainly through the transfusion and congenital transmission routes. The overall frequency of congenital transmission varies from 4 to 12% and in Brazil from 0.1 to 5.2%. In the Federal District (DF), the last study on the prevalence of CD in pregnant women and congenital transmission was carried out in 1983. Given the scarcity of updated data on the subject in the DF, today, it is necessary to implement a new evaluation for a more recent vision, as changes occurred in various aspects and population indicators. Objective: to estimate the prevalence of Trypanosoma cruzi infection in pregnant women attended by SUS (Sistema Único de Saúde) between 2014 and 2016 and to estimate the frequency of congenital transmission in the children of seropositive mothers for T. cruzi in DF , in 2016. Methods: cross-sectional epidemiological studies were developed for: i) estimation of seroprevalence in pregnant women in the years 2014, 2015 and 2016; and ii) comparison of selected variables among the seropositive mothers in 2016 and SINASC data from the same year; also developed a descriptive epidemiological cohort study for the study of children born to seropositive mothers in 2016. The data to estimate the seroprevalence were extracted from the Database of the Institute of Diagnostics of Brasília of APAE / DF, which composes the Stork Network of the State Health Secretariat. A questionnaire was applied addressing data on the demographic profile, housing characteristics, socioeconomic data, gestational and clinical data, serological profile, knowledge about DC and baby data. A sample of venous blood was collected from the mothers, a sample of the children after birth and if there was an initial positive result, a second collection at nine months. The samples were submitted to serological, direct parasitological and molecular test. Results: data analysis showed that the prevalence of T. cruzi infection in pregnant women in the period was 0.20% (52/25,871), 0.21% (74/35,790) and 0.17% (62/37,234) respectively in 2014, 2015 and 2016 and the congenital transmission rate was 2.5% (1/40) in 2016 and the majority of those infected are concentrated in RA Ceilândia. The most frequent age group was 20 to 39 years in the three years and the majority comes from the state of Bahia. The frequency of infection in pregnant women and the rate of congenital transmission in the DF corroborate with other findings in the literature. Conclusion: prenatal screening was extremely important for the mothers' knowledge about their seropositivity to T. cruzi and allowed the identification of a case of congenital transmission. The results reinforce the need for continuous implementation of a screening system for pregnant women and timely treatment for newborns and infected children.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2018. Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo liberado: Resumos e referências. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). O Estado do Mato Grosso do Sul é endêmico para as leishmanioses, onde Leishmania infantum tem sido detectado em humanos, cães, gatos e flebotomíneos. O monitoramento da ocorrência de flebotomíneos sinantrópicos é fundamental para avaliação das atividades de vigilância e controle das leishmanioses. Nosso objetivo foi verificar a taxa de infecção natural por Leishmania e identificar as fontes alimentares em flebotomíneos capturados em áreas de transmissão de leishmaniose do município de Rio Verde do Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Brasil nos anos de 2014 e 2016. Seis bairros do município foram selecionados devido a presença de casos de Leishmaniose Visceral e/ou Tegumentar. Em uma casa de cada bairro foram instaladas duas armadilhas do tipo CDC no peridomicílio. A identificação de Leishmania nas amostras foi realizada por kDNA-qPCR e por sequenciamento com alvo ITS. A detecção da fonte alimentar das fêmeas ingurgitadas foi realizada por meio de qPCR-cytb após análise High Resolution Melting (HRM-cyt b-qPCR). O esforço amostral total foi de 420 armadilhas CDC, das quais 380 foram positivas para flebotomíneos (sucesso de captura = 90,5%) com a captura de 24.989 flebotomíneos. Foram identificados 3.088 flebotomíneos distribuídos em 12 espécies. Lutzomyia longipalpis foi mais abundante em todos os pontos de coleta (n= 2.775), seguido de Nyssomyia whitmani (n=297). Foram analisadas 1261 fêmeas, agrupadas em 159 pools, dos quais 99 foram positivos na kDNA-qPCR de Leishmania, 92 de Lu. longipalpis (Taxa de infecção mínima – TIM = 8%) e 7 de Ny. whitmani (TIM = 7%). A maioria dos pools positivos de Lu. longipalpis foi detectada no ano de 2016 nos meses chuvosos. O sequenciamento revelou L. infantum nas amostras de Lu. longipalpis. DNA de galinha foi detectado em 57 flebotomíneos (98,3%) e apenas em uma fêmea foi detectado DNA humano (1,7%), a qual estava negativa para Leishmania na kDNA-qPCR. A taxa de infecção natural das fêmeas com DNA de galinha no conteúdo estomacal foi de 64,9% (37/57). Conclui-se que o risco de transmissão de L. infantum para humanos permanece na área estudada com alta frequência de flebotomíneos infectados no ambiente peridomiciliar. Human leishmaniases are endemic in the state of Mato Grosso do Sul (MS), Brazil, where Leishmania infantum has been detected in humans, dogs, cats, and phlebotomine sandfly vectors. Monitoring synanthropic vector populations is a critical component of leishmaniasis control-surveillance systems. Here, we used a suite of molecular approaches to assess Leishmania infection frequency and identify blood-meal sources in a large sample of sandflies collected in 2014 and 2016 in anthropic environments of a Leishmania-transmission area in MS (Rio Verde do Mato Grosso municipality). We sampled vectors in one peri-domestic site within each of six neighborhoods with recent records of human visceral and/or tegumentary leishmaniasis. We used kDNA-qPCR plus rDNA ITS sequencing to detect and identify Leishmania in pooled female sandflies. Individual blood-fed females (n = 58) were used for blood-meal analyses using qPCR plus High-Resolution Melting (HRM) of the mtDNA cytb gene. Overall, 90,5% of 420 CDC trap-nights yielded vectors, for a total of 24,989 sandflies. We identified 3088 sandflies in 12 species, including 2775 Lutzomyia longipalpis (the most abundant species at all sampling points) and 297 Nyssomyia whitmani. We tested 1261 female sandflies in 159 pools, of which 92 Lu. longipalpis (minimum infection rate [MIR] 8%) and 7 Ny. whitmani pools (MIR 7%) were Leishmania kDNA-qPCR-positive. Most positive Lu. longipalpis were collected in the 2016 rainy season. Sequencing confirmed L. infantum in Lu. longipalpis samples. HRM identified chicken DNA in 57 sandflies (98.3%), 37 of which were Leishmania DNA-positive; human blood was found in just one (Leishmania-negative) female (1.7%). Our data show ongoing risk of L. infantum transmission to humans in the study area, where Leishmania-infected sandfly vectors are common (and heavily rely on chicken blood) in the peri-domestic environment.

Óleos essenciais (OEs) constituem misturas complexas de várias moléculas voláteis hidrofóbicas produzidas pelo metabolismo secundário de plantas. Eles são empregados em diversos setores industriais, como por exemplo, o farmacêutico, alimentício, cosmético, agricultura e pecuária, em virtude de suas comprovadas ações bactericida, virucida, fungicida, antiparasitária, inseticida, analgésica, sedativa, anti-inflamatória, espasmolitica e anestésica local. Também têm sido utilizados na proteção de alimentos (como antioxidantes e conservantes), e incorporados em embalagens ativas. Os OEs podem apresentar problemas de instabilidade quando expostos ao calor, umidade, oxigênio e luminosidade. A reduzida solubilidade em água e sua elevada volatilidade são outras limitações para seu uso. A microencapsulação e nanoencapsulação dos OEs são estratégias viáveis e eficientes à proteção e modulação da liberação dos compostos bioativos, promovendo o aumento da estabilidade físico-química, proteção contra fatores ambientais, redução da volatilidade, aumento da solubilidade, biodisponibilidade, atividade biológica, redução da toxicidade, entre outros. A encapsulação em carreadores lipídicos micro e nanoestruturados tem recebido significativa atenção nos setores farmacêutico e alimentício, em face de várias vantagens, como baixa toxicidade, facilidade de escalonamento, baixo custo de produção e capacidade de encapsular compostos hidrofílicos e lipofílicos. Este trabalho teve como objetivo estudar a formação e secagem de sistemas lipídicos micro e/ou nanoestruturados contendo óleo essencial de Lippia sidoides, empregando diferentes processos tecnológicos e avaliar a influência destes nas propriedades apresentadas pelo produto líquido e seco obtido (propriedades físico-químicas, estabilidade, atividade antimicrobiana e retenção do timol, composto ativo majoritário no OE). Os resultados mostraram que a composição das formulações, as condições e o processo de secagem tiveram efeitos significativos nas propriedades físico-químicas e na estabilidade do produto, além de influenciarem também a retenção de timol. Este trabalho permitiu obter informações relevantes sobre os processos de secagem das formulações lipídicas por spray drying e liofilização e também sobre as características apresentadas pelos pós obtidos Essential oils (EOs) are complex mixtures of various volatile molecules (hydrophobic) produced by the plants secondary metabolism. Essential oils have high importance in various industrial sectors, such as pharmaceutical, food, cosmetic, health, agriculture and livestock; mainly due to its proved biological activity as bactericidal, virucidal, fungicidal, antiparasitic, insecticidal, analgesic, sedative, anti-inflammatory, spasmolytic and local anesthetic activities. Essential oils have also been used in food protection (as antioxidants and preservatives), and embedded in active food packaging. It is also characteristic of EOs present problems of instability when exposed to heat, moisture, oxygen and light. The reduced water solubility and high volatility are another limitation for the use of EOs. The micro and nanoencapsulation technologies of EOs arises as a viable and effective solution, increasing the product physicochemical stability, furnishing protection against environmental factors, reducing volatility, modulate the release, increasing bioavailability, reducing toxicity, among others. Encapsulation in lipid carriers has received significant attention in the pharmaceutical and food sectors, mainly due to the several attributed advantages such as low toxicity, capability to encapsulate hydrophilic and lipophilic compounds, low production costs and easy scale up. The objective of this work was to study the formation and drying of micro and/or nanostructured lipid systems loaded with essential oil of Lippia sidoides using different technological processes and to evaluate their influence on the properties presented by the liquid and dry product obtained (physicochemical properties, stability, antimicrobial activity and retention of thymol, major active compound in EO). The results showed that the composition of the formulations, the conditions and the drying process had significant effects on the physicochemical properties and the stability of the product, besides also influencing the retention of thymol. This work allowed to obtain relevant information on the drying processes of the lipid formulations by spray and freeze drying and also on the characteristics presented by the obtained powders

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical, 2016. Texto liberado parcialmente pelo autor. Conteúdo liberado: resumo/abstract. O conhecimento atualizado da distribuição e infecção natural de triatomíneos sinantrópicos é fundamental para vigilância e controle da doença de Chagas. No Brasil, a detecção de Trypanosoma cruzi em triatomíneos é realizada por microscopia óptica (MO) do conteúdo intestinal, que pode apresentar diversas limitações quanto à sua sensibilidade e especificidade. Objetivos: Analisar a ocorrência de triatomíneos e suas taxas de infecção natural por T. cruzi e outros tripanossomatídeos no estado de Goiás (GO) e Distrito Federal (DF), estimar a sensibilidade da MO para detecção de T. cruzi em triatomíneos e analisar a transmissão de T. cruzi em ambientes onde colônias de triatomíneos infectados forem detectadas. Métodos: Os espécimes (adultos e ninfas) capturados no intra e peridomicílio e resultados dos exames parasitológicos a fresco e lâminas coradas foram obtidos por meio do LACEN/SES/GO e DIVAL/DF. O DNA foi extraído de amostras do intestino para realização das PCRs (cPCR e qPCR) utilizando quatro marcadores moleculares (TCZ, kDNA, rDNA 18S e rDNA24sα). Também, foi avaliada a infecção por T. cruzi em colônia de P. megistus (nestedcPCR) e em amostras sanguíneas provenientes de primatas neotropicais não-humanos (nestedqPCR) encontrados no Zoológico de Brasília (ZooB). Resultados: Foram analisados 2715 triatomíneos provenientes de 12/30 regiões administrativas do DF e 95/246 municípios de GO. Houve predomínio de T. sordida em GO e no DF P. megistus foi mais frequente, com taxas de infecção por flagelados similares a T. cruzi de 4,6% e 1,6%, respectivamente. A MO revelou 144/841 triatomíneos positivos para tripanossomatídeos, resultando em uma taxa de infecção de 17,1%. A qPCR, específica para T. cruzi, revelou 347 positivos (41,2%). A sensibilidade da MO para T. cruzi, tendo como referência a TCZ qPCR, foi estimada em 23,6% e a da rDNA24sα cPCR foi estimada em 58,5%. Blastocrithidiatriatomae e T. rangeli foram detectadas nos triatomíneos assim como infecções mistas por T. cruzi e B. triatomae. As taxas de infecção por T. cruzi nas espécies de triatomíneos variaram de 19 a 67% sendo maiores para T. pseudomaculata e em triatomíneos vivos e frescos. O sequenciamento revelou TcI em P. megistus e T. sordida e TcII em P. megistus e T. pseudomaculata. No ZooBT. cruzi foi encontrado em P. megistus (44/50) e em primatas (17/26) de seis gêneros e oito espécies, sendo que um Mico chrysoleucus e um Saguinusniger apresentaram alta parasitemia. Discussão e Conclusão:Os resultados mostram uma baixa sensibilidade da MO para a detecção de tripanosomatídeos em triatomíneos e infecções por pelo menos três espécies de tripanossomatídeos, o que reforça a necessidade de métodos de alta especificidade para o desenvolvimento de estratégias de vigilância adequadas dos vetores da doença de Chagas. O método de TCZ qPCR pode ser considerado um padrão referência para detecção de T. cruziem triatomíneos. The current knowledge of the distribution and natural infection of synanthropictriatomines is essential for surveillance and control of Chagas disease. In Brazil, optical microscopy (OM) has been used to detect Trypanosoma cruzi in triatomines, but this technique can present several limitations in terms of sensitivity and specificity. Objectives: Analyze the occurrence of triatomines and their natural infection rates for Trypanosoma cruzi in state of Goiás (GO) and the Federal District (DF),estimate the sensitivity of OM to detect T. cruzi in triatomines, and analyze T. cruzi transmission foci in environments where infected triatomine colonies were detected. Methods: The specimens (adults and nymphs) captured in the intra and peridomicile and results of parasitological fresh and stained slides were obtained from LACEN/SES/GO and DIVAL/DF. DNA was extracted from the intestine samples for the PCRs (cPCR and qPCR) using four molecular markers (TCZ, kDNA, 18S and rDNA24sα). Also, T. cruzi infections were assessed in a Panstrongylusmegistuscolony and from blood samples of nonhuman primates found in the Brasilia Zoo (ZooB). Results:2715 triatomines were analyzed from 12/30 administrative regions of the DF and 95/246 municipalities of GO. In GO, T. sordida predominate while in the DF P. megistus was more frequent, with infection rates by flagellates similar to T. cruzi of 4.6% and 1.6%, respectively. OM revealed 144/841 trypanosomatid-positive triatomines, resulting in a 17.1% infection rate. The T. cruzi TCZ qPCR, showed 347 positive (41.2%). The sensitivity of T. cruzi-OM with reference to TCZ qPCR was estimated at 23.6% and rDNA24sα cPCR was estimated at 58.5%. Triatomines were infected by Blastocrithidiatriatomae and T. rangeli. However, mixed infections with T. cruzi and B. triatomae were found. Infection rates by T. cruzi in triatomine species ranged 19-67% and were higher for T. pseudomaculata and alive and fresh triatomines. The sequencing of some samples confirmed the identification of B. triatomae and revealed TcI in P. megistus and T. sordida, and TcII in P. megistus and T. pseudomaculata. In ZooB, T. cruzi was found in 44/50 P. megistus and 17/26 primates (six genera and eight species); one Micochrysoleucus and one Saguinusniger showed high parasitaemia. Discussion and Conclusion: The results show a low sensitivity of OM for trypanosomatids detection in triatomines and infections for at least three trypanosomatid species, which reinforces the need for highly specific methods for the development of appropriate surveillance strategies of the vectors of Chagas disease. It also suggests that the TCZ qPCR method could be considered as a reference standard for detection of T. cruziin triatomines.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências Médicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2015. O Trypanosoma cruzi é transmitido principalmente por via vetorial, entretanto, outras vias de transmissão também apresentam importância epidemiológica, como a transfusão sanguínea, a via transplacentária e por meio da contaminação de alimentos. A transmissão sexual do T. cruzi foi sugerida por vários pesquisadores, desde a descoberta da doença de Chagas, contudo, poucos trabalhos científicos foram realizados. Pesquisas anteriores sugerem que camundongos infectados podem transmitir o parasito por via sexual durante a fase aguda da doença, quando a carga parasitária é alta. Como a maioria dos indivíduos infectados são diagnosticados na fase crônica, é de extrema importância investigar se também ocorre a transmissão sexual do T. cruzi em condições de baixa parasitemia. O presente trabalho teve como objetivo investigar a transmissão sexual do T. cruzi no modelo experimental murino durante a fase crônica. Dez camundongos BALB / c, machos e fêmeas sexualmente maduros, infectadas por via intraperitoneal com 103 formas tripomastigotas de T. cruzi, foram cruzados com animais não infectados após 90 dias da infecção. Os casais foram avaliados depois de duas gestações e a infecção pelo T. cruzi foi analisada por testes parasitológicos, sorológicos e métodos moleculares. Além disso, foi determinada a carga parasitária em diferentes tecidos por qPCR. Os resultados mostram que camundongos cronicamente infectados por T. cruzi podem transmitir o parasita aos parceiros sexuais. O exame parasitológico identificou o parasito no sangue periférico em 100% dos animais infectados intraperitonialmente e em 20% dos camundongos que foram infectados pela via sexual. Os testes sorológicos e moleculares demonstraram a presença de anticorpos específicos e amplicons em todos os animais testados após o período de 120 dias. Análise histopatológica do coração, testículo/ovário, intestino e músculo, identificou a presença de infiltrado inflamatório moderado e destruição de fibras cardíacas nos animais infectados pela via intraperitoneal, na ausência de ninhos de amastigota. A transmissão sexual do parasita para fêmeas inicialmente não infectadas também foi validada pela identificação da infecção transplacentária para os filhotes. A análise da progênie mostrou que a infecção congênita ocorreu em 25/26 (96,15%) animais, que apresentaram resultados positivos nos testes moleculares. Os resultados confirmam a transmissão sexual do T. cruzi na fase crônica da infecção. Até onde sabemos, esta é a primeira demostração experimental da transmissão sexual do T. cruzi na fase crônica da infecção. A via sexual pode ser um fator potencial de dispersão da Doença de Chagas no mundo. A determinação desta via de transmissão em animais cronicamente infectados é de suma importância, uma vez que a maioria dos indivíduos com CD encontram-se na fase crônica. Além disso, estudos epidemiológicos em áreas livres de triatomíneos são necessários para determinar o potencial de infectividade em casais em que apenas um dos parceiros tem uma história de CD, favorecendo a maior compreensão da importância da transmissão sexual em populações humanas. Trypanosoma cruzi is mainly transmitted by haematophagous triatomines, however, other routes of transmission also have epidemiological importance, such as blood transfusion, transplacental route and through food contamination. Sexual transmission of T. cruzi was suggested by several researchers, since the discovery of Chagas disease, but, few scientific studies have been conducted on the subject. Previous work suggests that infected mice can transmit the parasite sexually during the acute phase of the disease, when the parasite load is high. Since most infected individuals are diagnosed during the chronic phase, it is important to investigate whether also occurs sexual transmission of T. cruzi in low parasitaemia conditions. This study aimed to investigate the sexual transmission of T. cruzi in murine model during the chronic phase. Ten sexually mature BALB/c, males and females, infected intraperitoneally with 103 T. cruzi trypomastigotes were crossbred with non-infected animals 90 days after infection. The couples were assayed after two pregnancies and T. cruzi infection was analyzed by parasitological, serological and molecular methods. In addition, parasite load was determined in different tissues by qPCR. The results show that mice chronically infected with T. cruzi can transmit the parasite to sexual partners. Parasitological test identified the parasite in the peripheral blood in 100% of intraperitoneally infected animals and in 20% of mice that were infected through sexual contact. The serologic and molecular analysis demonstrated the presence of specific antibodies and amplicons in all animals tested after 120 days. Histolopathological analysis of heart, testis / ovary, intestine and muscle identified the presence of mild infiltration and destruction of cardiac fibers in animals infected intraperitoneally, in absence of amastigote nests. Sexual transmission of the parasite to naive females was also validated by the identification of transplacental infection in their offspring. Progeny analysis showed that congenital infection arised in 25/26 (96.15%) animals, which showed positive results in molecular tests. The results confirm the sexual transmission of T. cruzi in the chronic phase of infection. To the best of our knowledge, this is the first confirmation of sexual transmission of T. cruzi, a route with great potential for spreading CD worldwide. The determination of this pathway in chronically infected animals is of paramount importance, since most individuals with CD are in the chronic phase. In addition, epidemiological surveys in triatomine-free areas are required to determine the infectivity rate in couples in which only one partner has a history of CD, thus helping to clarify the importance of this mode of transmission in human populations.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-graduação em Medicina Tropical, 2014. Mamíferos silvestres, sinantrópicos e domésticos podem ser hospedeiros dediferentes espécies de Leishmania. Estudos sobre possíveis reservatórios de Leishmania em diferentes áreas são fundamentais para a definição das estratégias de vigilância e controle das doenças. No presente estudo, avaliou-se a ocorrência de infecção por Leishmaniaspp. em mamíferos de duas unidades de conservação e entorno do DF, Brasília, Brasil. Pequenos mamíferos foram capturados em2011 e 2012 em duas Unidades de Conservação Federais do DF, o Parque Nacional de Brasília (PNB) e a Reserva Biológica da Contagem (Rebio), e, em 2013, foram amostrados cães de condomínios residenciais e núcleos rurais do entorno das unidades. Amostras de pele e sangue dos animais silvestres e dos cães foram avaliadas por meio de diferentes testes moleculares, direcionados à região polimórfica D7 do gene 24Sα rRNA, para a região conservada do minicírculo de kDNAe para a região espaçadora interna do DNA ribossômico ITS1 de Leishmania spp.As espécies de Leishmaniaforam identificadas mediante o sequenciamento dos produtos amplificados. As amostras de sangue dos cães foram submetidas ao teste imunocromogrático rápido (DPP) para detecção de anticorpos anti-Leishmania. Foram estudados 179 mamíferos silvestres, os quais 20,1% tiveram amostras positivas para Leishmania spp. nos testes moleculares (Clyomys laticeps, Gracilinanus agilis, Necromys lasiurus, Nectomys rattus, Rhipidomys macruruse Didelphis albiventris). Não foram observadas diferenças significativas comparando a proporção de indivíduos infectados por Leishmania spp.entre as duas áreas amostradas e entre as espécies.A maioria das amostras positivas era do roedor N. lasiurus, as quais foram identificadas como L. amazonensisouL. braziliensis. As 19 amostras dos cães estudados foram positivas ao teste DPP, porém, apenas cinco(26,3%) foram positivas para Leishmania spp. nas análises moleculares.As amostras de cães foram identificadas como L. infantum.Os resultados sugerem o envolvimento de seis espécies de mamíferos silvestres na transmissão enzoótica de Leishmania spp.no Distrito Federal, sendo o primeiro registro de L. amazonensisnoroedor silvestreN. lasiurusno Brasil Central. Wild, synanthropic and domestic mammals are hosts of Leishmania spp. Studies on possible reservoirs of Leishmania in different areas are fundamental for the development of strategies for the surveillance and control of this disease. In the present study, we evaluated the Leishmania spp. occurrence in mammals in two conservation units and their surroundings in Brasilia, Federal District (FD) Brazil. Small mammals were captured in 2011 and 2012 in two conservation units of FD, the Brasília Nacional Park (BNP) and the Biological Reserve of Contagem (BRC). In 2013, we took samples from dogs in residential areas in the surroundings of these conservation units. Skin and blood samples were evaluated by PCR using different molecular markers (D7 24Sα rRNA, kDNA and DNA ITS1). The Leishmania species were identified by sequencing. Blood samples from the dogs were also subjected to the rapid imunocromogratical test (DPP) for detection of anti-Leishmania antibodies. 179 wild mammals were studied, of which 20.1% had DNA of Leishmania spp successfully detected in at least one positive sample. Six species were considered infected: Clyomys laticeps, Gracilinanus agilis, Necromys lasiurus, Nectomys rattus, Didelphis albiventris and Rhipidomys macrurus. No significant differences comparing the proportion of individuals infected with Leishmania spp were observed between the two sampled areas and between wild mammal species. Most of the positive samples were collected from the rodent N. lasiurus, infected by L. amazonensis or L. braziliensis. All 19 dog samples studied were positive by DPP, however, only five (26.3%) were positive for Leishmania spp. by PCR. DNA sequence of ITS1 amplicons from dog samples had 100% identity with L. infantum sequence. The results suggest the involvement of six species of wild mammals in the enzootic transmission of Leishmania spp. in FD. This is the first record of L. amazonensis in N. lasiurus in Central Brazil.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Laboratório Multidisciplinar de Pesquisa em Doença de Chagas, 2014. Morbidade e mortalidade em humanos infectados cronicamente com o Trypanosoma cruzi são observados em aproximadamente 30% dos infectados. Os fatores que selecionam esses chagásicos, entre todos os demais infectados, à aquisição da doença crônica são desconhecidos. Estudos de genética molecular demonstraram a transferência de sequências de minicírculos de kDNA do parasito para sítios específicos do genoma do hospedeiro. O sítio de integração identificado com maior frequência foi o retrotransposon LINE-1. Observou-se ainda que o kDNA pôde ser mobilizado para outros sítios do genoma pela atividade do LINE-1. Esses dados sugeriram a possibilidade de associação das variações clínicas da doença com as mutações no genoma. As mutações de kDNA se comportariam como força motriz da patogênese da cardiopatia chagásica. Neste estudo, foram avaliados 95 indivíduos do Pará, 36 voluntários de municípios de Minas Gerais e Goiás e 136 controles do Distrito Federal, com dados do eletrocardiograma, teste ergométrico, holter 24h e ecodopplercardiograma. Foram feitas análises estatísticas visando a associar esses dados clínicos com os achados de integração de kDNA em múltiplos loci na maioria dos cromossomos. Tendo a análise dos exames clínicos revelado que a maioria dos indivíduos da amostragem estava na fase indeterminada da infecção crônica pelo T. cruzi, sem alteração significativa nos exames, sem frequência elevada de alterações nos grupos de risco para desenvolvimento da doença, não foi possível associar qualquer mutação como valor preditivo para desenvolvimento da cardiopatia chagásica. Os resultados indicam o caráter benigno da evolução das infecções crônicas, na fase clinicamente indeterminada. Entretanto, esses achados não excluem a hipótese de associação das mutações com a patogênese da cardiopatia chagásica. Outros estudos clínico-epidemiológicos de médio e longo prazo são necessários para a identificação de fatores preditivos das manifestações cardíacas da doença de Chagas. Morbidity and mortality in humans chronically infected with Trypanosoma cruzi are observed in approximately 30% among infected people. The factors of selection of chagasic, among the infected population, towards development of the chronic Chagas disease, are unknown. The studies on molecular genetics showed the transfer of the kDNA minicircle sequences from T. cruzi to the human host's genome. The kDNA integration loci were often identified in the LINE-1 retrotransposon. It was also observed that the kDNA mutations could be mobilized by the retrotransposon from the primary to a secondary site at the genome. These findings suggested the possibility of association of Chagas disease clinical manifestations with the kDNA integrations. In this regard, the kDNA mutations could be triggers of the pathogenesis of the chagasic cardiopathy. In this study, we evaluated 95 patients from the State of Para, 36 from counties of Minas Gerais and Goias, and 136 controls patients, from the Federal District, Brazil. The electrocardiogram, ergometric test, 24h recording electrocardiogram, and ecodopplercardiogram were analysed. The statistical analyses, which aimed at the association among the clinical findings with those of the integration of the kDNA at multiple sites at various chromosomes, were carried out. The evaluations of clinical parameters of the heart function showed majority all patients were in the undeterminate phase of the chronic chagasic infection, and no clinical manifestation. This observation explains why, in the absence of statistical differences among the groups of risk-patients, there was no demonstrable association. Therefore, it was not shown any particular loci of mutation as a predictive risk-factor for development of the Chagas cardiopathy. The result indicates the benign feature of the chronic chagasic infections, clinically undetermined. However, the findings in the undeterminate phase of the infection do not exclude the hypothesis of possible association of the kDNA mutations with the pathogenesis of the Chagas’ heart disease. Long range clinic-epidemiologic studies are necessary to identifying predictive factors of the clinic manifestation of the chronic Chagas disease.

O desempenho de um processo de produção de óxido de etileno é normalmente avaliado através da seletividade da reação. Neste trabalho, uma unidade produtiva foi estudada com o objetivo de se maximizar a seletividade através da atuação sobre as principais variáveis de processo. Uma análise estatística de um conjunto de dados de processo mostrou que quatro variáveis (vazão de oxigênio, vazão de gás de reciclo, temperatura da reação e teor de clorados) são as de maior influência sobre a seletividade e explicam mais de 60% das variações ocorridas no processo produtivo. Com base nessa análise de dados, modelos de regressão multilinear foram desenvolvidos e testados com o objetivo de representar o comportamento do processo em função apenas do comportamento dessas quatro variáveis. O modelo matemático empírico proposto para representar esse processo foi validado estatisticamente e fenomenologicamente, demonstrando consistência com os dados obtidos em processo. O modelo também foi desdobrado em 24 submodelos que representam condições possíveis de operação da unidade e para os quais foram elaboradas superfícies de respostas que permitiram definir a melhor forma de gestão das 4 variáveis críticas conjuntamente, de modo a se obter a máxima seletividade possível para a reação em função desses cenários operacionais. The performance of an ethylene oxide manufacturing process is normally measured by the selectivity reaction. In this work, a production unit was studied in order to maximize selectivity through the development of a strategic plan to main to manage the key process variables. A statistical analysis of a data set indicated that only four variables (oxygen flow, recycle gas flow, temperature reaction and chlorine content) are responsible for the greater influence over the selectivity and explain more than 60% of process variations. As consequence, regression models were developed and tested in order to represent the process behavior as a function of these four variables. The proposed mathematical model was statistically and phenomenologically validated, demonstrating consistency with the current process data. The model was rewritten in 24 sub-models, named deployed models which represent possible operational conditions of the unit. A set of surface responses was defined for each deployed model, providing to identify the best way for the management of these 4 critical variables. Furthermore, this analysis leads to a management tool for achieving the best results in selectivity, as function of the possible operational scenarios for this unit.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2013. A doença de Chagas é uma patologia que acomete milhares de pessoas no mundo inteiro, principalmente no continente Americano. O Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, é transmitido principalmente pelo inseto triatomíneo durante o repasto sanguíneo. Além da transmissão vetorial, a doença de Chagas pode ser adquirida por via transfusional, congenital ou pelo consumo de alimentos contaminados. A possibilidade da transmissão sexual da doença de Chagas foi sugerida por Carlos Chagas em 1909, entretanto, poucos trabalhos foram publicados sobre o tema desde então. O presente trabalho teve como objetivo investigar a transmissão sexual do Trypanossoma cruzi no modelo experimental murino. Para isso, foram feitos testes parasitológicos, sorológicos e moleculares em 20 camundongos infectados e em seus parceiros sexuais, inicialmente sadios. Os resultados mostraram que após o acasalamento com animais infectados, os parceiros sexuais apresentaram testes sorológicos positivos em 60% dos casos, enquanto que o DNA nuclear do parasito foi identificado no sangue dos animais analisados. Além disso, duas fêmeas inicialmente sadias apresentaram testes de hemocultura positivos após acasalarem com machos infectados, confirmando assim a trasmissão sexual do T. cruzi. Os resultados dos testes sorológicos e moleculares dos filhotes mostraram uma discrepância entre a sorologia e os resultados de PCR, sendo que o teste molecular apresentou uma maior sensibilidade. A taxa de infecção congênita obtida pelos métodos sorológicos revelaram que 14% dos filhotes provenientes dos Grupos A e B adquiriram a infecção, enquanto que o teste de PCR demonstrou uma positividade de 58%. A análise histopatológica não foi capaz de mostrar a presença de ninhos de amastigotas no coração dos animais infectados, tanto pela via intraperitonial, como pela via sexual. No entanto, pôde-se observar a presença de extenso infiltrado inflamatório destruindo as fibras cardíacas em todos os animais infectados. A análise de imunohistoquímica realizada em cortes histológicos de testículos de camundongos infectados revelou uma grande quantidade de formas amastigotas no túbulo seminífero e epidídimo. A capacidade de infecção do sêmem proveniente de indivíduo infectado pelo T. cruzi foi verificada. As análises histopatológicas mostraram a presença de ninhos de amastigotas no coração de fêmeas infectadas a partir da inoculação intra-vaginal de sêmen humano. Dessa forma, nossos resultados mostram que ocorreu transmissão sexual do Trypanosoma cruzi em camundongos. Chagas disease is a condition that affects thousands of people worldwide, mainly in the Americas. Trypanosoma cruzi, etiologic agent of Chagas disease, is transmitted primarily by triatomine insect during blood feeding. Besides vetorial transmission, Chagas disease can be acquired by blood transfusion, congenital or by consumption of contaminated food. The possibility of sexual transmission of Chagas disease has been suggested by Carlos Chagas in 1909, however, few studies have been published on the subject since then. The present study aimed investigate sexual transmission of Trypanosoma cruzi in experimental murine model. For this, parasitological, serological and molecular infected mice and their sexual partners, initially healthy. The results showed that after mating with animals infected sexual partners serological tests showed positive in 60% of cases, while the nuclear DNA of the parasite was identified in blood from all animals analyzed. In addition, two healthy females initially showed positive blood culture tests after mating with infected males, thus confirming the sexually transmitted T. cruzi. The results of serological and molecular tests of pups showed a discrepancy between serology and PCR results, and the molecular test showed a higher sensitivity. Congenital infection rate obtained by serological methods showed that 14% of the from Groups A and B acquired infection, whereas the PCR test showed an 58% positivity. Histopathological analysis was not able to show the presence of nests of amastigotes in the hearts of infected animals, either by intraperitoneal as through sex. However, it was observed the presence of extensive inflammatory infiltrate destroying cardiac fibers in all infected animals. Immunohistochemical analysis performed in histological testis infected mice revealed a large amount of amastigotes in seminiferous tubule and epididymis. The ability of infection semen from individual infected with T. cruzi was verified. The histopathological analysis showed the presence of nests of amastigotes in the heart of infected females from intravaginal inoculation of human semen. Thus, our results show that there was sexual transmission of Trypanosoma cruzi in mice.

Após mais de um século da descoberta da doença de Chagas, cujo agente etiológico é o parasito denominado Trypanosoma cruzi, muito ainda há para ser desvendado sobre essa doença. O polimorfismo, a forma de reprodução, a correlação entre cepa e forma clínica, métodos sorológicos e moleculares, transferência gênica e suas consequências clínicas, tratamento e cura são tópicos que envolvem grandes questionamentos ainda não totalmente elucidados pelos pesquisadores desta enigmática doença. O controle de doadores em bancos de sangue e a diminuição nos índices de transmissão vetorial fizeram com que a transmissão congênita ganhasse uma maior importância. No presente estudo, o monitoramento das mulheres durante a gestação possibilitou o acompanhamento do recém-nascido até os nove meses de idade, fase na qual se espera que os anticorpos maternos tenham desaparecido por completo. Para se conhecer a população de gestantes infectadas por Trypanosoma cruzi, no serviço da Maternidade de um Hospital Universitário, 1.979 prontuários foram analisados num intervalo de três anos (2010 a 2012). Perfis socioeconômicos e demográficos, assim como as características reprodutivas e sorológicas foram estudados. Tiveram sorologia positiva para Tripanossomíase Americana 3,1% das mulheres (61/1.979) e poucas relataram aborto. Estudos sobre o aborto demonstraram que em mães infectadas que não transmitiram sua infecção ao feto não houve maior frequência de aborto, prematuridade e mortalidade perinatal, porém, houve uma maior tendência à natimortalidade nas mães que transmitiram a infecção aos seus filhos. Trinta e oito gestantes infectadas por T. cruzi (duas com gestações gemelares) e seus conceptos (quarenta) participaram de uma pesquisa para verificar a integração de minicírculos de kDNA deste protozoário em seus filhos. Para o diagnóstico sorológico as três técnicas convencionais de ELISA, IFI e HAI foram realizadas em todas as amostras. Todas as mães confirmaram a positividade da doença de Chagas pela sorologia. Duas crianças tiveram diagnóstico sorológico, parasitológico e molecular positivos para Trypanosoma cruzi, caracterizando a transmissão congênita, além da transferência gênica horizontal. As reações de polimerização em cadeia (PCR) foram realizadas visando identificar a presença de DNA nuclear (nDNA) e mitocondrial (kDNA) nas amostras estudadas. As amplificações foram realizadas em triplicata com cada par de primers, para confirmação diagnóstica. A amplificação do material nuclear de T. cruzi ocorreu em 92,1% das mães e em 10% das crianças (4/40). Em 70% das crianças e em 92,1% das mães houve amplificação do DNA do cinetoplasto do parasito. A maior parte dos eventos de integração de minicírculos de kDNA ocorreu por meio de elementos móveis, sendo a maioria deles o retrotransposon LINE-1. O maior número de integrações foi observado no cromossomo X. After more than a century the discovery of Chagas disease, which etiological agent parasite is called Trypanosoma cruzi, there is still much to be revealed about this disease. Polymorphism, how to play, the correlation between strain and the clinical, serological and molecular methods, gene transfer and its clinical consequences, treatment and cure are topics that involve major issues still not completely understood by researchers of this enigmatic disease. The control of donors in blood banks and the reduction of vector transmissions rates caused the congenital transmission to gain greater importance. In this study, monitoring women during pregnancy allowed the accompaniment of the newborn to nine months of age, at which stage it is expected that maternal antibodies have disappeared completely. To know the population of pregnant women infected by Trypanosoma cruzi, in the service of a Maternity Hospital, 1979 records were analyzed at an interval of three years (2010 to 2012). Socioeconomic and demographic profiles, as well as reproductive and serological features were studied. Had positive serology for American trypanosomiasis 3.1% of women (61/1.979) and a few of them reported abortions. Studies have shown that abortion in infected mothers who failed to transmit their infection to the fetus had no greater frequency of miscarriage, prematurity and perinatal mortality, but there was a greater tendency to stillbirth in mothers who transmitted the infection to their children. Thirty-eight infected by T. cruzi pregnant women (two with twin pregnancies) and their fetuses (forty) participated in a survey to verify integration of kDNA minicircle of this protozoan in their children. For serological diagnosis the three conventional techniques of ELISA, IFA and HAI were performed on all samples. All mothers confirmed the positivity of Chagas disease by serology. Two children had positive serological, parasitological and molecular diagnosis of Trypanosoma cruzi, featuring congenital transmission, in addition to horizontal gene transfer. The polymerase chain reactions (PCR) were performed to identify the presence of nuclear DNA (nDNA) and mitochondrial (kDNA) in the samples studied. The amplifications were performed in triplicate with each primer pair for diagnostic confirmation. Amplification of nuclear material of T. cruzi occurred in 92.1% of mothers and 10% of children (4/40). In 70% of children and 92.1% of the mothers was no amplification of kinetoplast DNA of the parasite. Most integration events of minicircle kDNA occurred through mobile elements, with most of them the LINE-1 retrotransposon. The largest number of integrations was observed on chromosome X. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2013. A transferência lateral (TL) e vertical (TV) de minicírculos de DNA (kDNA) do Trypanosoma cruzi foram investigadas em 26 pessoas de quatro famílias. A infecção ativa foi documentada em cinco pessoas com o DNA nuclear do T. cruzi. Evidência da integração do kDNA foi documentada em todos esses casos. Foram obtidas sequências quimeras kDNA-DNA humano de 157 eventos de TL e TV as quais foram analisadas em bancos de dados. As integrações do kDNA foram mapeadas em 19 dos 23 cromossomos, e 72,4% das integrações ocorreram em elementos transponíveis: 80% dessas mutações ficaram retidas em retroelementos LINE-1. O gene do receptor olfatório RO1-17 reteve 10 das 18 integrações de kDNA em regiões codificadoras. A técnica tpTAIL-PCR específica para este gene gerou mais 37 quimeras, totalizando 194 mutações de kDNA-DNA humano. Em 105 eventos (54%) das mutações estavam inseridas em loci de indivíduos consanguíneos, verdadeiros eventos de TGV herdados pelas progênies. Em 15 desses eventos (14%) as quimeras kDNA-DNA hospedeiro tinham topologia sugestiva de herança Mendeliana. Os demais 90 eventos (86%) apresentaram diversidade nas sequências de nucleotídeos dos minicírculos integradas no mesmo sitio do genoma de parentais e progênies. Este achado sugere que a maioria das mutações do kDNA no genoma humano apresentam padrão não Mendeliano. Verificou-se ainda que a diversidade de sequências de minicírculos integradas foi aumentada pelos fenômenos de recombinação, truncamento, mobilização e embaralhamento de regiões dos minicírculos nas mutações herdadas. A demonstração de crescimento do genoma com diversidade genética sugere especiação sem limite conhecido. Ademais, TL e TV contribuem para o magnífico fenômeno da evolução, definida por Darwin como “descendentes com modificações”. The lateral and the vertical gene transfers (LT and VT) of Trypanosoma cruzi kDNA minicircles was sought among 26 people in four families. The live T. cruzi infection was documented in five people showing the parasite nuclear DNA. The evidence of the kDNA integration was shown in all those cases. The kDNA-human DNA chimera sequences were obtained from 157 LT and VT events that were analyzed in databank. The kDNA mutations were found in 19 out of 23 chromosomes, and 72,4% of these integrations occurred in transposable elements; 50% of these mutations were present in the retrotransposable LINE-1. At the locus of the olfactory receptor OR1-17 there were 10 among 18 integrations. The tpTAIL-PCR technique with primers specific to the OR1-17 gene generated, additionally, 37 chimeras among a total of 194 chimeras kDNA-DNA disclosed in the human genome. A total of 105 (54%) mutations were inserted at various loci from bloodline individuals in four families, whose are truly events inherited from progeny. Among 15 of those events (14%) there were kDNA-host DNA mutations showing topology that suggests the Mendelian inheritance. The remaining 90 mutations (86%) revealed a broad genetic diversity arising from different minicircle sequences integrated at single loci in the parental and progeny. This finding indicates that a great majority of the kDNA mutations in the human genome is non-Mendelian. Additionally, it was shown an increasing diversity of minicircle sequences as a consequence of recombination, reshuffling, hitchhiking, and truncated minicircle at the inherited mutation sites. The documented genome growth and diversity of the minicircles flanking the host DNA at the mutation sites suggested unlimited speciation, hence LT and VT contribute for the magnificent unstoppable evolution, which was defined by Charles Darwin as “descendents with modifications”.

Tese (Doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2012. A primeira microepidemia pelo Trypanosoma cruzi na Amazônia brasileira foi publicada em 1969 e, desde então, outras têm sido observadas em famílias residentes em vários municípios dos Estados daquela região. Em 2007 e 2009 foram identificados casos clínicos de doença de Chagas aguda (DCA) em famílias dos municípios de Barcarena e Breves, Estado do Pará. Este estudo mostrou anticorpos da classe IgG contra antígenos do T. cruzi em 35,7% (39/109) das pessoas, sendo 29,5% (13/44), 26,6% (4/15), 20,6% (6/29), respectivamente, das famílias A, B, e C residentes no município de Barcarena, e em 76,1% (16/21) da família D do município de Breves; em 66,6% (14/21) dos casos dessa família foram identificados anticorpos IgM anti-T. cruzi. Os resultados de PCR com iniciadores de nDNA do parasito foram positivos em 76,1% (83/109) dos casos: Família A, 77,2%; B, 100%; C, 75,8% e D, 57,1%. De grande interesse, em 21 casos de DCA o exame parasitológico positivo foi convalidado pela PCR com iniciadores de nDNA de T. cruzi. Ademais, nas células germinativas do sêmen foi confirmada infecção ativa pelo T. cruzi, também presente nas células somáticas do sangue, pela PCR com iniciadores específicos de nDNA e kDNA. Adicionalmente, 16,5% (18/109) casos positivos apenas para kDNA, sem a infecção ativa, retiveram seqüências de minicírculos integradas no genoma. Nesses 18 casos as mutações de kDNA foram transferidas para as progênies pela reprodução sexuada. Com esse respeito, a diferença de 53% (44/83) entre os resultados obtidos pela PCR para nDNA e aqueles dos testes imunológicos contra antígenos de T. cruzi tem importância epidemiólogica ainda não apreciada em outra investigação. Pois, a presença de nDNA e kDNA foi encontrada na ausência de anticorpos contra antígenos de T. cruzi nos hospedeiros tolerantes aos antígenos do parasito. Ademais, em todos esses casos de infecção ativa também ocorreu transferência vertical de seqüências de minicírculos de kDNA do T. cruzi pela reprodução sexuada e as mutações foram prontamente identificadas no genoma humano. Então, a larga diferença entre os resultados de testes imunológicos e de PCR pode ser explicada pela aquisição da infecção via sexual ou transplacentária, durante a fecundação ou na fase inicial da gestação, antes do desenvolvimento do sistema imune do embrião, e o indivíduo nasce tolerante aos antígenos de T. cruzi. As mutações de kDNA foram identificadas nos cromossomos, e o principal sítio de integração foi retrotransposon LINE-1 em 70% (301/430) das quimeras identificadas. Em 83,3% (50/60) dos casos as mutações ocorreram no gene do receptor olfatório OR1-17, e em apenas 16,6% (10/60) foram encontradas em genes com outras funções reconhecidas. O achado mais relevante neste estudo foi a documentação de transmissão do kDNA e do nDNA do T. cruzi pela reprodução sexuada. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT By 1969, a microepidemic of Trypanosoma cruzi was recognized in the Brazilian Amazonia, and lately they have been constantly reported in families from several counties in the region. By 2007 and 2009, clinical cases of acute Chagas disease were identified in families living in counties of Barcarena and Breves, Estado do Pará. The exams revealed IgG antibodyes against T. cruzi antígens in 35,7% (39/109) cases of the study population: Family A, 29,5% (13/44); B, 26,6% (4/15); C, 20,6% (6/29) of Barcarena county, and Family D, 76,1% (16/21) of Breves; Anti-T. cruzi IgM antibody was identified in 66,6% (14/21) of family D cases. The PCR assays with specific nDNA primer sets yielded positive results in 76,1% (83/109) cases: Family A, 77,2%; B, 100%; C, 75,8%; and D, 57,1%. Of interest, 21 cases showing symptoms of acute Chagas disease had parasitologic demonstration of T. cruzi and these were convalidated by the PCR assays with nDNA primer sets. Moreover, germline cells from male gametes showed T. cruzi nDNA and kDNA as well as somatic mononuclear cells from blood. Additionally, 16,5% (18/109) of kDNA positive cases in absence of active infection retained the minicircle sequences in the genome. In these cases the kDNA mutations were vertically transfered to progenie by sexual reproduction. With this respect, the reported differences 53% (44/83) between results of antibody assays and those obtained by PCR with primer sets to T. cruzi nDNA have broad epidemiologic importance not yet reported by previous investigation. The presence of nDNA and kDNA was documented in the absence of antibody against T. cruzi antigens in hosts’ immue tolerant to the parasite antigens. Furthermore, vertical transfer of T. cruzi minicircle occurs by sexual reproduction in every case nDNA and kDNA are present in the course of an active infection. Insofar, the reported differences herein can be explained by the acquisition of the infection during fecundation or in the early gestational period, via sexual transmissão or transplacenta from mother to offspring before embryo immune system development; and the newborn becomes tolerant to T. cruzi antigens. The kDNA mutations were identified in several chromosomes, and the main integration hotspot was LINE-1 in 70% (301/430) cases. The mutations entered at the olfactory ORI-17 gene in (50/60) cases (83,3%) and in (10/60) cases (16,6%) they were found in genes with annotated functions. A highly relevant finding in this study was the documentation of transmission of kDNA, and of nDNA from T. cruzi active infection by sexual reproduction.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2012. Este estudo é parte de linha de pesquisa do Laboratório Multidisciplinar de Pesquisa em Doença de Chagas, na Faculdade de Medicina da Universidade de Brasília, que visa ao mapeamento das integrações de sequências de minicírculos de DNA mitocondrial (kDNA) de Trypanosoma cruzi em famílias de residentes em diferentes ecossistemas brasileiros. Nesta dissertação foram analisados sêmens de 53 adultos de dois municípios do Estado do Pará. O trabalho foi conduzido para identificar e caracterizar os sítios de integração das mutações de kDNA em células do sêmem e determinar a de presença do DNA nuclear (nDNA) do T. cruzi em adultos na idade reprodutiva. Foram analisadas amostras de DNA do sêmen de 53 homens. Os testes PCR mostraram que em 44 amostras (83%) havia nDNA. Em mais quatro amostras (48/53) os testes PCR revelaram amplicons de kDNA parasita. Estes quatro últimos sugerem que as sequências de minicírculos poderiam estar integradas ao genoma de pessoas sem a infecção ativa pelo T. cruzi. Então, a técnica tpTAIL-PCR foi usada para caracterizar as mutações de kDNA nos cromossomos das células analisadas. Foram encontradas 142 mutações no genoma de 38 indivíduos (72%) do estudo. Essas mutações foram localizadas (56,6%) em LINE-1 dispersos nos genomas. Ademais, verificou-se que 32,5% dessas mutações achavam-se no locus AL7313741.4 de LINE-1, no cromossomo X. Apenas nove eventos de integração de kDNA ocorreram em regiões codificadoras do genoma. Entre essas, encontram-se mutações em genes de quinases, receptor olfatório e em outros sítios não determinados. Em 24 casos (16,8%) o kDNA ligado ao LINE-1 estava acompanhado de fragmento de sequência de DNA retroviral, sugerindo recombinação e “hitchhiking’’. De grande interesse, os resultados sugerem a possibilidade de transmissão da infecção por 83% dos homens que tem o nDNA do T. cruzi no sêmen e, assim, a reprodução sexuada pode contribuir para transferência e herança das mutações de kDNA nas progênies das famílias do estudo. This study stems for a research line that has been carried on the Chagas Disease Multidisciplinary Research Laboratory at the Faculty of Medicine, University of Brasilia, which aims at the mapping of the integrations of the mithocondrial minicircle sequences (kDNA) from Trypanosoma cruzi in members of familes living in different Brazilian ecosystems. Herein, we analysed samples of semen from 53 men from two counties at the State of Pará, Brazil. The research was conducted aiming at the identification and characterization of kDNA mutation hotspots in semen cells, so as to determine the rate of presence of the parasite nuclear DNA (nDNA) in adults at reproductive age. A total of 53 semen samples DNA were analysed. The PCR exams showed nDNA in 44 samples (83%), and further four samples (48/53) yielded kDNA amplicons. These results suggest that sequences of kDNA minicircles can integrate into the human genome in the absence of an active T. cruzi infection. Then, we used the tpTAIL-PCR technique to characterize the kDNA mutations on chromosomes of analyzed cells. A minimum of 142 mutations were disclosed in the genome of 38 family members (72%). These mutations were localized in LINE-1 (56.6%) disperse all through the genome. However, it was observed that 32.5% of such mutations were present in the locus AL7313741.4 of LINE-1, a chromosome X. Nine mutation events were found in coding regions of the genome. Among these, there were mutations in protein-kinase, and in the olfactory genes, and, also in undetermined sites. Further 24 mutations (16.8%) showed the kDNA covalently linked to LINE-1, and these chimeras were attached to fragments of retroviral DNA sequences, thus suggesting recombination and hitchhiking. Of great interest, the results suggest the possibility of transmission of the infections from 83% of men showing the DNA from T. cruzi in the semen, and, therefore, sexual reproduction may contribute to lateral transfer and inheritance of kDNA mutations in the progeny of the study families.

Orientadores: Florencia Cecilia Menegali, Gustavo Cesar Dacanal Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Com o aumento da variedade de produtos em pó, produzidos por diversas indústrias alimentícias, há a necessidade de informações detalhadas a respeito do seu manuseio e processamento voltadas para a aplicação em diversos produtos alimentares. O aumento do tamanho de partículas finas pelo processo de aglomeração em leito fluidizado proporciona benefícios que incluem redução de perdas de finos e perigo ou desconforto na manipulação, e principalmente, melhoria das propriedades de instantaneização do pó, por exemplo, solubilidade, dispersão em líquidos etc. Os leitos fluidizados pulsados possuem uma série de vantagens em relação aos leitos convencionais, podendo-se destacar a fácil fluidização de partículas irregulares com tamanhos distintos. A pectina é muito conhecida como agente geleificante e vem sendo utilizada na forma de pó. Este trabalho teve como objetivo estudar as modificações nas propriedades físicas da pectina em pó produzida por aglomeração em leito fluidizado pulsado. As condições ótimas de processo foram obtidas por meio de planejamento experimental, ou delineamento composto central 24. As variáveis estudadas foram temperatura do ar, vazão de ligante, velocidade de fluidização do ar e frequência de pulsação do ar. Obteve-se um rendimento no processo superior a 80% e o aumento de tamanho da partícula foi de quase 340%. O produto foi caracterizado por análises de umidade, instantaneização, dissolução, morfologia, distribuição do tamanho da partícula e do diâmetro médio, fluidez e fragilidade do aglomerado. O aglomerado se mostrou mais poroso e irregular comparado com a matéria-prima que é mais compacta e circular. As partículas aglomeradas apresentaram melhora na aparência, na fluidez, bem como nas propriedades de instantaneização e dissolução. Verificou-se também que a tensão na ruptura e o módulo de elasticidade do gel formado pelo produto aglomerado foram superiores ao gel da matéria-prima Abstract: The agglomeration of food powders is commonly used to produce porous granules with higher wettability and dispersability. The agglomeration process promotes the particles enlargement and reduction of fines and result in some benefits, including lower rates of particles elutriation and danger reduction in handling or inhalation. Fluid bed agglomeration is commonly used to improve the instant properties of spray-dried food powders. However, the fluidization of spray-dried particles is characterized by cracks and channels. The pulsed fluid bed has some advantages over the conventional fluid bed equipment, including easy fluidization of irregular particles of different sizes. Pectin is widely used in the food industries as a gelling agent and has been used in powder form. The aim of this work was to study the changes in the physical properties of pectin powder produced by agglomeration in pulsed fluidized bed. The optimal process conditions were obtained by a full factorial design 24. The variables studied were fluidizing air temperature, binder flow rate, fluidizing air velocity and air pulsation frequency. Agglomerated process presented a process yield above 80% and an increase of almost 340% in the mean particle diameter. The product was characterized by moisture, wettability, dissolution, morphology, particle size distribution and mean diameter, fluidity and fragility of the agglomerated. The agglomerated was more porous and irregular compared with the raw material that is more compact and circular. The agglomerated particles showed an improvement in appearance, fluidity and the properties of wettability and dissolution. It was also found that the stress at fracture and modulus of elasticity of the gel formed by the agglomerated product were higher than the gel obtained from the raw material Mestrado Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador: Elias Basile Tambourgi Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica Resumo: A bromelina, enzima presente no abacaxi, hidrolisa ligações peptídicas das proteínas; tem aplicação em diversas áreas envolvendo alimentos, medicina e nutrição animal. No abacaxi a bromelina está presente no talo, na polpa e na casca do fruto. Visando avaliar a bromelina presente no fruto brasileiro Ananás comosus L. Merril, variedade pérola, enfocando seu aproveitamento quando recuperada a partir dos resíduos da industrialização, foram pesquisadas, em comparação com a bromelina pura, condições de pH e temperatura para maior atividade, estabilidade térmica ao longo do tempo em várias temperaturas e a cinética da sua atividade catalítica, empregando caseína como substrato. O extrato foi obtido pela trituração da casca e do talo interno do fruto e a reação de hidrólise, com pH controlado, efetuada em reator com 75 mL de volume útil sob constante agitação. Após a reação foi retirada amostra, adicionada em tubo contendo ácido tricloroacético e centrifugado, analisando a absorbância do sobrenadante. Atividade e a cinética foram expressas em mmol tirosina / L.minuto pela absorbância a 280 nm dos aminoácidos aromáticos gerados na hidrólise da caseína. Foram empregadas três relações enzima / substrato (em massa): 1 / 25, 1 / 50 e 1 / 125 para os ensaios relativos ao planejamento experimental em estrela tendo como ponto central pH em 7,0 e temperatura de 35 °C, os resultados foram tratados fornecendo as equações do modelo e as superfícies de resposta; as equações foram tratadas matematicamente fornecendo gráficos da melhor atividade em função da temperatura; os resultados do planejamento experimental mostraram similaridade entre a bromelina dos resíduos do fruto e a bromelina pura tomada como padrão. Para a estabilidade térmica os ensaios foram efetuados determinando a atividade para a relação 1 / 25 sob temperaturas variando entre 25 °C e 62 °C ao longo de 180 minutos com duas faixas de pH: a de melhor atividade definida no planejamento experimental (5,5 a 6,5) e entre 3,3 e 3,5; os resultados foram tratados analisando o gráfico da atividade em função do tempo mostrando que o modelo de ordem um é adequado para descrever a inativação térmica da enzima e que ela ocorre de maneira mais acentuada na faixa de pH 3,3 a 3,5 com valor do fator de freqüência k0 (minuto-1) 2,5 x1032 vezes maior para o extrato. Os ensaios para determinar a cinética da atividade catalítica da bromelina sobre a caseína foram efetuados a temperatura constante de 35 °C e pH de máxima atividade definido no planejamento experimental para cada uma das três relações enzima / substrato estudadas; foram elaboradas as curvas da concentração de aminoácidos formados ao longo do tempo (zero a 15 minutos) e os resultados tratados calculando a derivada das curvas no tempo zero (velocidade inicial); o modelo de Michaelis - Menten mostrou ser adequado para descrever o mecanismo de hidrólise da caseína pela bromelina e os resultados indicam que os valores da velocidade máxima (Vmax) e da constante de Michaelis (Km) são maiores para o extrato dos resíduos do fruto do que para a bromelina pura. Abstract: The bromelain, enzyme found in pineapple, hydrolyses peptide protein bonds; there is application in several areas involving food, medicine and animal nutrition. In pineapple the bromelain is present in the flesh, skin and core of the fruit. Aiming to evaluate the bromelain present in Brazilian fruit Ananas comosus L. Merril, pérola type, focusing its use from industrialization residues recovering, it was searched, comparing with pure bromelain, pH conditions and temperature for higher activity, thermal stability along the time under several temperatures and the kinetics of its catalytic activity, using casein as a substrate. The extract was obtained crushing the skin and core of the fruit and the hydrolysis reaction, with controlled pH, done in a 75 mL net volume reactor under constant stirring. After reaction a sample was taken, added to a tube with tri chloroacetic acid and centrifuged, analyzing the supernatant absorbance. Activity and kinetics were expressed as mmol of tyrosine / L.min from absorbance at 280 nm of aromatic amino acids generated by casein hydrolysis. Three enzyme / substrate ratio were employed (weight basis):1 / 25, 1 / 50 and 1 / 125 for star type experimental design assays with central point at 7.0 for pH and at 35 °C for temperature, the results were processed giving the model equation and surface responses, the equations were mathematically treated giving graphics of best activity as a function of temperature; the experimental design results showed similarity between bromelain from fruit residues and pure bromelain taken as reference. The assays for thermal stability were carried out by activity determination for 1 / 25 ratio under temperatures varying from 25 °C and 62 °C during 180 minutes for two pH ranges: that for best activity defined from experimental design (5.5 to 6.5) and between 3.3 to 3.5; the results were treated by the analysis of the graphics of activity as a function of time showing that the order one model is adequate to describe the enzyme thermal inactivation and that it is stronger at pH range of 3.3 to 3.5 with values of frequency factor k0 (minute-1) 2.5 x1032 times bigger for the extract.The assays to determine the kinetics of bromelain catalytic activity on casein were carried out at constant temperature of 35 °C and pH of maximum activity defined by experimental design for each one of the three studied enzyme / substrate ratio; curves were built for the concentration of formed amino acids along the time (from zero to 15 minutes) and the results treated calculating the curves derivative at time zero (initial rate); the Michaelis - Menten model showed to be adequate to describe the casein hydrolysis mechanism of casein by bromelain and the results indicate that the maximum reaction rate (Vmax) values and the Michaelis constant (Km) values are bigger for the fruit residues extract than that for pure bromelain. Doutorado Sistemas de Processos Químicos e Informática Doutor em Engenharia Química

Orientadores: Osvaldir Pereira Taranto, Maria Regina Parise Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica Resumo:A operação de fluidização tem sido muito utilizada em inúmeros processos industriais nos setores químicos, alimentício e farmacêutico em função das suas características vantajosas, que possibilitam um contato bastante efetivo entre a fase sólida e a fase fluida. No entanto, as condições de operação destes processos freqüentemente podem conduzir ao fenômeno de defluidização ou até ao colapso total do leito. A manutenção de condições estáveis do regime de fluidização durante processos de recobrimento de partículas em leitos fluidizados também é de fundamental importância, pois o excesso de umidade dentro do leito acaba levando à defluidização. O presente trabalho objetiva aplicar a metodologia de análise espectral Gaussiana dos sinais de flutuação de pressão para monitorar e controlar o fenômeno de defluidização do processo de recobrimento de celulose microcristalina em um leito fluidizado gás-sólido. O trabalho foi realizado em duas etapas: 1) monitoramento dos regimes de fluidização operantes durante a evolução do processo de recobrimento e 2) controle da vazão de ar e da vazão de suspensão utilizando-se controladores PI. Diferentes condições experimentais de massa de celulose, vazão de suspensão polimérica e excesso de velocidade do ar em relação à mínima fluidização na temperatura de 70°C foram estudadas. A evolução da freqüência média Gaussiana mostrou claramente as transições de regimes de fluidização durante o processo e possibilitou a definição de uma faixa de regime estável de 6,0 a 7,0 Hz, que foi empregada como setpoint range dos controladores para manipular os sinais de comando para o inversor de freqüência e para a bomba peristáltica. A aplicação do método de Åström e Hägglund permitiu a obtenção dos parâmetros do controlador PI para o inversor e o método da curva de reação proporcionou uma estimativa preliminar dos parâmetros do controlador PI para a bomba. Ensaios de recobrimento da celulose em malha fechada mostraram que a utilização de um sistema de controle permitiu obter melhores condições fluidodinâmicas do leito em relação ao processo sem controle. Embora quantidades equivalentes de suspensão tenham sido adicionadas em ambos os processos, o regime de fluidização operante com controle era do tipo borbulhante estável, enquanto que sem controle o regime era de leito fixo, mostrando que o objetivo do trabalho em manter condições mais estáveis de fluidização durante o processo foi atingido. Abstract: The fluidization operation has been used extensively in many industrial processes in chemical, food and pharmaceutical branches, because of its advantageous characteristics that promote an effective contact between the solid and the fluid phases. However, the operational conditions of these processes frequently lead to the defluidization phenomenon or to the total collapse of the particles in the bed. The handling of stable conditions in the fluidization regime during fluidized bed coating processes is very important, because the moisture content excess can cause the defluidization of the bed. The objective of this present work is to apply the Gaussian spectral pressure distribution to monitor and to control the defluidization phenomenon in a fluidized bed coating process using microcrystalline cellulose as fluidizing particles. The work was performed in two stages: 1) monitoring of the fluidization regimes during the development of the coating process and 2) control of the airflow rate and of the coating suspension flow rate using PI controllers. The experiments were carried out varying solid particle mass, coating suspension flow rate and excess air velocity in relation to the minimum fluidization velocity in the temperature of 70ºC. The Gaussian mean frequency evolution showed the fluidization regime transitions and it allowed to define a band of stable regime (6.0 Hz to 7.0 Hz), which was used as a set-point range of the controllers to manipulate the signal of command for frequency inverter and for the peristaltic pump. The application of Åström e Hägglund method allowed obtaining the PI controller parameters to the inverter and the reaction curve method provided an initial guess of the PI controller parameters to the pump. The experiments of microcrystalline cellulose coating in closed-loop showed that the use of a control system allowed obtaining better fluid-dynamic conditions of the bed in relation to the without process control. Although equivalent amounts of suspension have been added to both processes, the fluidization regime with control was kept under bubbling stable, while without control the regime was that of a fixed bed, showing that in order to maintain more stable fluidization during the process was reached. Mestrado Engenharia de Processos Mestre em Engenharia Química

Orientador: Florencia Cecilia Menegalli Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: processo de aglomeração de alimentos é muito utilizado quando se deseja aumentar as propriedades de instantaneização de pós obtidos pela secagem em spray dryer. Os produtos obtidos pela secagem em spray são normalmente caracterizados como sendo finos, coesivos e por apresentar difícil fluidização. Deste modo, torna-se conveniente utilizar leitos fluidizados, vibrados ou pulsados, que resultem em um aumento da movimentação das partículas e homogeneidade do leito durante a fluidização, permitindo aglomerar produtos em pó oriundos da secagem em spray dryer. O objetivo deste trabalho foi estudar as mudanças nas propriedades físicas de polpa de acerola e de proteína isolada de soja em pó após o processo de aglomeração em leito fluidizado cônico, e verificar os efeitos do uso de diferentes frequências de pulsação do ar fluidizante durante o processo de aglomeração. A pulsação do ar foi realizada por meio da rotação de uma válvula esfera, instalada abaixo da placa distribuidora de ar. As condições ótimas de processo e os perfis de aumento de tamanho de partículas foram obtidos por meio de planejamentos experimentais e de ensaios de cinéticas de aglomeração. As variáveis de processo estudadas foram o tempo de processo, velocidade e temperatura do ar fluidizante, vazão de líquido ligante, pressão de atomização, altura do bico aspersor e massa de amostra. O produto aglomerado foi caracterizado pelos testes de diâmetro médio e distribuição de tamanho de partículas, tempo de instantaneização, solubilidade, morfologia e conteúdo de umidade. Durante a aglomeração, as partículas da matéria prima coalescem, formando grânulos grossos. A morfologia das partículas também é alterada com o aumento de tamanho. A forma das partículas finas são circulares e compactas, enquanto os aglomerados tendem a ser mais alongados e apresentam superfície irregular. Os produtos aglomerados apresentaram melhores propriedades de instantaneização, ou maior dispersabilidade em água, em relação à matéria-prima, proveniente da secagem em spray dryer Abstract: Fluid bed agglomeration is commonly used to improve the instant properties of spray-dried food powders. However, the fluidization of spray-dried particles is characterized by cracks and channels. Vibration or pulsation systems are frequently attached in the fluid bed equipments in order to improve the bed homogeneity and to allow the particles fluidization using lower fluidizing air flow. The aim of this work was to study the physical property modifications of soy protein isolate powder and acerola powder produced by a wetagglomeration process in a conical fluid bed, using fluidizing air pulsation for some runs. The equipment used was a batch-fluidized bed equipped with a rotating spherical valve installed below the air distribution plate that promotes the fluidizing air pulsation. Experimental designs and agglomeration kinetics were achieved in order to evaluate the optimal operational conditions and to study the particles growing behavior. The process variables studied were process time, fluidizing air temperature and velocity, atomized binder flow, atomization pressure, nozzle height and mass of sample. The product transformations were determined by an analysis of the particle diameter, size distribution, morphology and moisture content. During agglomeration, the raw particles coalesce, resulting in the formation of granules with increasing size, but morphological changes were also verified. The shape of the raw powder particles were circular and compact, while the agglomerated particles were elongated, wrinkled and showed tight solid bridges. The fluidization of spray-dried particles was enhanced with the pulsation system, resulting in higher fluid bed homogeneity and agglomerated products with narrows particle size distribution. The consolidation of small granules results in an improvement in the instant properties, increasing product wetting and dispersability in water Doutorado Doutor em Engenharia de Alimentos

Orientadores: Sandra Cristina dos Santos Rocha, Nadia Rosa Pereira Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica Resumo: Polihidroxibutirato (PHB) é um poliéster completamente biodegradável e biocompatível. O interesse no desenvolvimento, produção e comercialização do PHB vem crescendo por ser um produto biodegradável e de produção integrada à cadeia de açúcar e álcool. A secagem é uma importante etapa do processo de produção do PHB, pois para o adequado pósprocessamento desse material deve-se garantir um teor de umidade limite de 0,5%. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo estudar uma tecnologia de secagem, em um produto inovador e de importância na preservação ambiental. Foi realizado um estudo da fluidodinâmica e dos mecanismos de secagem do PHB em um leito fluidizado pulsado rotativo (LFPR). A escolha do equipamento baseou-se no fato de que o PHB úmido é coesivo e não apresenta fluidização convencional de qualidade. O secador de LFPR utiliza a pulsação do ar para desfazer os aglomerados de PHB melhorando a circulação das partículas dentro do leito. O presente estudo também incluiu a caracterização física do material antes e após a secagem. Para os ensaios de caracterização em que os equipamentos não trabalham em presença de umidade, a liofilização do PHB foi a alternativa encontrada para se caracterizar o material antes da secagem. O PHB apresentou um excelente comportamento fluidodinâmico em LFPR. A frequência de pulsação de 10 Hz foi a que apresentou comportamento mais favorável, com queda de pressão moderada e patamares de estabilidade. Por meio dos ensaios fluidodinâmicos foi possível determinar a velocidade de mínima fluidização vigorosa pulsada (VMV), parâmetro que ajudou a estabelecer a velocidade empregada para os experimentos de secagem. Durante a secagem do PHB foi avaliada a influência que a temperatura, velocidade e frequência de pulsação do ar exercem na cinética de secagem. Verificou-se excelente contato entre as partículas de PHB e o ar aquecido, com elutriação somente nos primeiros 10 minutos de secagem. As curvas de secagem do PHB indicaram períodos de taxa de secagem constante e decrescente. A temperatura e a velocidade do ar influenciaram positivamente o processo. Além disso, foi detectada a existência de um outro solvente além da água nas amostras de PHB, por meio da comparação entre as curvas de secagem obtidas com medidas de umidade feitas em estufa e em Karl Fischer. A análise termogravimétrica (TGA) também ajudou a detectar a presença de outro solvente além da água nas amostras de PHB. Os ensaios de caracterização física mostraram que as condições operacionais de secagem testadas não provocaram a degradação das partículas de PHB. Sob as condições consideradas ótimas de secagem, temperatura de 90 ºC, frequência de 7 Hz e velocidade do ar 0,40 m/s, foi atingida umidade igual a 0,56%, demonstrando a viabilidade do secador LFPR. Abstract: Poly-hydroxybutyrate (PHB) is polyester, completely biodegradable and biocompatible. The interest on its development, production and commercialization has arisen due to its biodegradability and production integrated to the sugar and alcohol chain. Drying is an important step of the PHB production because an adequate post-processing is achieved only at moisture contents less than 0.5%. The goal of this work was to study a drying technology for this innovative product of relevant importance for the environmental preservation. The fluid-dynamic and drying mechanisms analyses were made in a rotating-pulsed fluidized bed (RPFB). The equipment was chosen based on the fact that the wet PHB is cohesive and doesn't work properly in a conventional fluid bed. The RPFB dryer uses the air pulsation to undo the PHB agglomerate improving the circulation of the particles inside the bed. This study also included the physical characterization of the material before and after the drying. For the characterization tests that wouldn't work with moisture presence, the liophilization was the best alternative to characterize the material before the drying process. The PHBshowed an excellent dynamic behavior in RPFB. The pulsation frequency of 10 Hz presented the most favorable fluid dynamic conditions, resulting in moderate pressure drop and regime stability. Based on the fluid-dynamic study it was possible to determine the minimum vigorous fluidizing air flow (MVF), an important parameter to set the air velocity range for the drying experiments. An excellent contact between the PHB particles and the hot air was obtained during the drying runs, with particles elutriation only during the first 10 minutes. The influence of the temperature, velocity and frequency of air pulsation was evaluated on the drying kinetics. The PHB drying kinetics presented constant and decreasing-rate drying periods. The drying process was positively influenced by the air temperature and velocity. Furthermore, the presence of another solvent additionally to the water was detected in the PHB samples through the comparison between the drying curves obtained with moisture measurements made in an oven and in Karl Fischer equipment. The thermo gravimetric analysis also helped to detect the presence of another solvent in the PHB samples. The physical characterization tests showed that the drying operating conditions didn't cause degradation on PHB particles. The RPFB dryer showed to be a viable technique to dry PHB, as moisture content of 0.56% was reached at optimal operating conditions of air temperature of 90oC, air velocity of 0,40 m/s and frequency of pulsation of 7 Hz. Mestrado Engenharia de Processos Mestre em Engenharia Química

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Laboratório Multidisciplinar de Pesquisa em Doença de Chagas, 2008. O presente trabalho é o primeiro relato de integração de seqüências provenientes de um protozoário para o genoma de células germinativas humanas. Neste estudo, nós documentamos a integração de minicírculos de kDNA de Trypanosoma cruzi no genoma de células germinativas e a transferência vertical dessas mutações para os descendentes. Foram analisadas amostras de esperma de 34 voluntários. Desses, 22 doadores foram agrupados em cinco famílias, cujos progenitores (F0) eram portadores da doença de Chagas. Doze amostras de esperma foram obtidas de indivíduos isolados. Foi possível observar a integração de kDNA de T. cruzi no genoma de todos os 17 chagásicos estudados. A transferência vertical apenas das seqüências de kDNA para as progênies F1 e F2 pôde ser observada em 6 descendentes de chagásicos. As análises das regiões do genoma humano que flanqueavam as seqüências de kDNA mostraram a integração de minicírculos de kDNA preferencialmente em elementos retrotransponíveis do tipo LINE-1, em 72,5% das seqüências quimeras. O encontro do mesmo locus em indivíduos chagásicos e seus descendentes é mais uma evidência mostrando a herança das mutações. Verificamos, também, que as seqüências de minicírculos de kDNA ligaram-se a outros elementos transponíveis (4%), tais como Alu, ERV e MER, e, também, em alguns genes (9%). Nos demais clones (14%), não foi possível determinar os loci de integração do kDNA no genoma devido á ausência de informação em bancos de dados. Os achados deste estudo sugerem que as mutações decorrentes da inserção do kDNA poderiam causar alterações genotípicas e fenotípicas implicadas na auto-imunidade descrita na doença de Chagas. De fato, a incorporação de DNA exógeno na célula humana nos mostra a complexidade das interações do parasito com o hospedeiro humano. A descrição de mutação, recombinação e deriva genética, alterando genótipo e fenótipo do hospedeiro, poderão sugerir a base da auto-imunidade que se associa à patogênese da doença de Chagas. The present work shows by the first time the integration of Trypanosoma cruzi kDNA minicircle sequences into the human genome. This eukaryote-to-eukaryote lateral transfer of DNA is constantly seen in each patient harbouring the infections. The kDNA mutations are inherited by F1 and F2 progeny and undergo genetic drifts, recombination hitchhiking from primary to secondary chromosomes. We analysed 22 samples of sperm of volunteers from five families whose founders have the active infections. Independently, we further analysed haploid cells DNA from 12 individuals. The vertical transfer of kDNA minicircle sequences was detected in 17 family members. Among these there were 11 with active T. cruzi infections, showing nDNA and kDNA signatures. The remaining six F1 and F2 progenie had the kDNA signatures only. In each of these 17 individuals we showed sequences of minicircles of kDNA from T. cruzi integrated into germ line cells. The main hotspot for the kDNA integration was retrotransposons LINE-1 (72.5%). In 9% of cases the integreations entered coding regions of genes. Besides, kDNA minicircles sequences integrated nonautonomous transposable elements (4%) Alu, ERV and MER, Finally, in (14%), the kDNA mutations entered undetermined sites into the human genome. The presence of the kDNA mutations are in agreement with the findings of lateral transfer of kDNA in somatic cells of same individuals (Hecht, M.M, Thesis, University of Brasilia, 2008). Furthermore, the demonstration of kDNA mutations in haploid cells is brought here in the absence of active T. cruzi infections. Actually, the vertical inheritance could be appreciated in two marriages to which the marriages generated offsprings with kDNA mutations showing sequence alignments similar to the father. In fact, an exogenous DNA incorporation by the human cell let us to see more complex process of parasite-host`s interaction. The evolution of living creatures suggests that lateral transfer of exogenous DNA, mutations and hitchhiking, genetic drifts and social heterosis could be considered ongoin forces leading to genetic diversity and evolution.

Orientadores: Osvaldir Pereira Taranto, Marcelo Nitz da Costa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica Resumo: Acetato de sódio e um sal orgânico produzido pela reação do acido acético com hidróxido de sódio. Depois da cristalização e separação os cristais úmidos são secos. Já o cloreto de potássio e um sal inorgânico extraído de rochas e águas salinas muito utilizado na industria química como fertilizante. Esses sais são higroscópicos, coesivos quando úmidos, e geralmente são secos em secadores de leitos fluidizados. No presente trabalho foi utilizado um secador de leito pulso-fluidizado (PFB) que e uma modificação do secador de leito fluidizado convencional. Neste equipamento uma taxa constante de ar e suprido para o secador. Um distribuidor de gás instalado sob a câmara de secagem promove a pulsação pela corrente de gás alternada. A principal vantagem desta técnica e o uso de uma vazão de ar menor quando comparada com outras. O PFB utilizado neste trabalho possui uma área de secção transversal de 0,18 metros quadrados e constituído de quatro seções. Inicialmente foi realizado o estudo fluidodinâmico dos sais secos e úmidos. Posteriormente as curvas de secagem do acetato de sódio e cloreto de potássio foram determinadas para diferentes condições de secagem (temperatura do ar e freqüência de pulsação). A secagem e fluidodinâmica em leito fluidizado convencional foram feitas para que a comparação com o leito pulsado fosse possível. Resultados mostraram que as taxas de secagem foram maiores na fluidizarão pulsante devido ao melhor comportamento fluidodinâmico: o fluxo intermitente ajuda a romper partículas aglomeradas e conseqüentemente prover melhor contato entre gás - partícula. Abstract: Sodium acetate is a salt produced by the reaction of acetic acid with sodium hydroxide. After crystallization and separation, the wet crystals are dried. Potassium chloride is an inorganic salt extracted from rocks and saline water. It is mainly used in the chemical industry as a fertilizer. These salts are hygroscopic particulate materials, which are dried in fluidized beds or rotary dryers. In this work a pulsed-fluid bed (PFB) dryer was used, which is a variation of the conventional fluidized bed dryer. In this equipment, a constant airflow rate is supplied to the dryer. A gas distributor installed upstream of the drying chamber provides the pulsed-flow by alternating the gas stream. The main advantage of this technique is the lower airflow rate supplied when compared with competitive techniques. The PFB used in this work has a cross section area of 0.18 m2 and it has four sections. Initially, the fluid-dynamic study of dry and wet salts was performed. Subsequently the drying curves of sodium acetate and potassium chloride were determined for different drying conditions (inlet air temperature and pulsation frequency). Drying and Fluid-dynamic was performed in conventional fluidized bed drying, so that results could be compared. Results showed that the drying rates were higher under pulsed fluidization due to the better fluid-dynamic behavior: the intermittent flow can help to break particle agglomerates and therefore provide better contact between particles and the gas. Mestrado Engenharia de Processos Mestre em Engenharia Química