Prevalence of chagas disease in pregnant in goiânia-go and integration of minicircles of kDNA of Trypanosoma cruzi in infants from infected mothers

Após mais de um século da descoberta da doença de Chagas, cujo agente etiológico é o parasito denominado Trypanosoma cruzi, muito ainda há para ser desvendado sobre essa doença. O polimorfismo, a forma de reprodução, a correlação entre cepa e forma clínica, métodos sorológicos e moleculares, transferência gênica e suas consequências clínicas, tratamento e cura são tópicos que envolvem grandes questionamentos ainda não totalmente elucidados pelos pesquisadores desta enigmática doença. O controle de doadores em bancos de sangue e a diminuição nos índices de transmissão vetorial fizeram com que a transmissão congênita ganhasse uma maior importância. No presente estudo, o monitoramento das mulheres durante a gestação possibilitou o acompanhamento do recém-nascido até os nove meses de idade, fase na qual se espera que os anticorpos maternos tenham desaparecido por completo. Para se conhecer a população de gestantes infectadas por Trypanosoma cruzi, no serviço da Maternidade de um Hospital Universitário, 1.979 prontuários foram analisados num intervalo de três anos (2010 a 2012). Perfis socioeconômicos e demográficos, assim como as características reprodutivas e sorológicas foram estudados. Tiveram sorologia positiva para Tripanossomíase Americana 3,1% das mulheres (61/1.979) e poucas relataram aborto. Estudos sobre o aborto demonstraram que em mães infectadas que não transmitiram sua infecção ao feto não houve maior frequência de aborto, prematuridade e mortalidade perinatal, porém, houve uma maior tendência à natimortalidade nas mães que transmitiram a infecção aos seus filhos. Trinta e oito gestantes infectadas por T. cruzi (duas com gestações gemelares) e seus conceptos (quarenta) participaram de uma pesquisa para verificar a integração de minicírculos de kDNA deste protozoário em seus filhos. Para o diagnóstico sorológico as três técnicas convencionais de ELISA, IFI e HAI foram realizadas em todas as amostras. Todas as mães confirmaram a positividade da doença de Chagas pela sorologia. Duas crianças tiveram diagnóstico sorológico, parasitológico e molecular positivos para Trypanosoma cruzi, caracterizando a transmissão congênita, além da transferência gênica horizontal. As reações de polimerização em cadeia (PCR) foram realizadas visando identificar a presença de DNA nuclear (nDNA) e mitocondrial (kDNA) nas amostras estudadas. As amplificações foram realizadas em triplicata com cada par de primers, para confirmação diagnóstica. A amplificação do material nuclear de T. cruzi ocorreu em 92,1% das mães e em 10% das crianças (4/40). Em 70% das crianças e em 92,1% das mães houve amplificação do DNA do cinetoplasto do parasito. A maior parte dos eventos de integração de minicírculos de kDNA ocorreu por meio de elementos móveis, sendo a maioria deles o retrotransposon LINE-1. O maior número de integrações foi observado no cromossomo X. After more than a century the discovery of Chagas disease, which etiological agent parasite is called Trypanosoma cruzi, there is still much to be revealed about this disease. Polymorphism, how to play, the correlation between strain and the clinical, serological and molecular methods, gene transfer and its clinical consequences, treatment and cure are topics that involve major issues still not completely understood by researchers of this enigmatic disease. The control of donors in blood banks and the reduction of vector transmissions rates caused the congenital transmission to gain greater importance. In this study, monitoring women during pregnancy allowed the accompaniment of the newborn to nine months of age, at which stage it is expected that maternal antibodies have disappeared completely. To know the population of pregnant women infected by Trypanosoma cruzi, in the service of a Maternity Hospital, 1979 records were analyzed at an interval of three years (2010 to 2012). Socioeconomic and demographic profiles, as well as reproductive and serological features were studied. Had positive serology for American trypanosomiasis 3.1% of women (61/1.979) and a few of them reported abortions. Studies have shown that abortion in infected mothers who failed to transmit their infection to the fetus had no greater frequency of miscarriage, prematurity and perinatal mortality, but there was a greater tendency to stillbirth in mothers who transmitted the infection to their children. Thirty-eight infected by T. cruzi pregnant women (two with twin pregnancies) and their fetuses (forty) participated in a survey to verify integration of kDNA minicircle of this protozoan in their children. For serological diagnosis the three conventional techniques of ELISA, IFA and HAI were performed on all samples. All mothers confirmed the positivity of Chagas disease by serology. Two children had positive serological, parasitological and molecular diagnosis of Trypanosoma cruzi, featuring congenital transmission, in addition to horizontal gene transfer. The polymerase chain reactions (PCR) were performed to identify the presence of nuclear DNA (nDNA) and mitochondrial (kDNA) in the samples studied. The amplifications were performed in triplicate with each primer pair for diagnostic confirmation. Amplification of nuclear material of T. cruzi occurred in 92.1% of mothers and 10% of children (4/40). In 70% of children and 92.1% of the mothers was no amplification of kinetoplast DNA of the parasite. Most integration events of minicircle kDNA occurred through mobile elements, with most of them the LINE-1 retrotransposon. The largest number of integrations was observed on chromosome X. 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