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Chaque année, le diabète continue de progresser et touche plusieurs millions de personnes, la rétinopathie diabétique (RD) est une complication du diabète, résultant de l’atteinte des vaisseaux de la rétine, mettant en jeu le pronostic visuel. La rétinopathie diabétique, y compris l'œdème maculaire diabétique (OMD), est un problème de santé publique important et croissant, tant dans le monde qu'en France. Le nombre de diabétiques de type 2 est en constante augmentation et les patients sont de plus en plus jeunes. L’œdème maculaire est classiquement diagnostiqué et même défini par un épaississement maculaire dont la cause est une rupture de la barrière hémato-rétinienne (BHR) et la conséquence une baisse d’acuité visuelle. Le traitement des facteurs généraux est primordial dans la prise en charge de l’œdème maculaire diabétique que ce soit par le laser, Les anti VEGF ou les corticoïdes. Le rôle du pharmacien en tant que professionnel de santé de proximité est capital à tous les niveaux, dans la prévention, le diagnostic précoce, l’accompagnement, le signalement des effets secondaires et le développement des nouvelles thérapies.

La photobiomodulation correspond à une forme de photothérapie utilisant des sources de lumière non ionisantes, par laser ou LED (diodes électroluminescentes), dans le spectre visible ou infrarouge. Il existe de nombreuses applications de cette dernière en médecine et en chirurgie. L’intérêt spécifique en chirurgie du visage sur l’œdème reste encore a prouver car son application est récente et encore non évaluée. Cette thèse a pour but essentiel d’établir un protocole d’étude de l’effet anti-inflammatoire/anti-œdémateux de la photobiomodulation lors d’une chirurgie orthognatique.Pour étudier ce dernier nous avons utilisé un masque de la société NSK Buccoleds fournissant une exposition intra-orale par rayons rouges et extra-orale par rayons infra-rouges. Quatre séances de photobiomodulation étaient réalisées : 1h avant l’intervention, à J1, J2 et J3. Le suivi de l’œdème était réalisé par des photographies 3D à J1, J2, J3 et J7 avec une analyse des surfaces et des distances par un système d’iso-valeurs de couleurs.>br>Les premières analysent nous confortent dans l’hypothèse que la photobiomodulation apporterait une aide importante dans le contrôle de l’œdème post-opératoire.La conception d’un masque demi-fonctionnel est en cours de réalisation pour pouvoir mener une étude prospective randomisée, selon le protocole établi, afin de valider cette méthode.

Le canal épithélial sodique (ENaC) exprimé dans les cellules épithéliales alvéolaires joue un rôle important dans la clairance liquidienne à la naissance et lors d’un syndrome de détresse respiratoire aigu (SDRA). Des travaux préliminaires dans le laboratoire ont montré que le TNF-α régule à la baisse l’expression de l’ARNm αENaC en partie via une modulation post-transcriptionnelle de sa stabilité. Dans les travaux présentés dans ce mémoire, cinq séquences du 3’UTR αENaC qui sont hautement conservées (CS) dans différentes espèces ont été étudiées pour déterminer l’impact de chacune d’elle dans la modulation de l’ARNm αENaC en conditions basales ainsi qu’en présence de TNF-α. Pour étudier l’implication de celles-ci dans la modulation de l’ARNm αENaC, un modèle Tet-Off a été utilisé pour inhiber l’expression du transcrit à l’aide de la doxycycline. Les niveaux de transcrit dans le temps ont été estimés par RT-qPCR. Avec cette technique, la demi-vie de l’ARNm αENaC est de ~100 min. Des mutants de délétion ponctuelle du 3’UTR ont été générés en retirant spécifiquement les domaines CS1 (31pb), CS3 (22pb), CS2&3 (82pb), CS4&5 (74pb), CS1-5 (187pb) et CS3+ (165pb). Nos résultats montrent que la délétion de chacune des CS affecte leur demi-vie respective à 169 min, 172 min, 246 min, 193 min, 208 min et 237 min. La stabilité des différents mutants a ensuite été évaluée en présence de TNF-α (une cytokine retrouvée dans les poumons de patients atteints de SDRA). La courbe de dégradation de l’ARNm avec son 3’UTR complet observée est différente en présence de TNF-α de celle observée en condition basale. La courbe prend allure biphasique avec une dégradation rapide suivit d’un plateau à environ 50% de l’expression du contrôle (t=0). La même observation a été faites pour le mutant de délétion CS1-5. Nous concluons donc que de façon générale le 3’UTR de l’ARNm αENaC, via les domaines conservés identifiés, est impliqué dans la déstabilisation du transcrit. Les CS ne sont pas impliquées dans le mécanisme post-transcriptionnel par lequel le TNF-α fait chuter l’expression de l’ARNm αENaC. Il n’en demeure pas moins que d’autres séquences du 3’UTR pourraient jouer un rôle important dans la dégradation rapide de l’ARNm αENaC durant l’inflammation ou lors d’une lésion pulmonaire., The epithelial sodium channel (ENaC) expressed in alveolar epithelial cells plays an important role in lung liquid clearance at birth and in acute respiratory distress syndrome (ARDS). Preliminary work in the laboratory has shown that TNF-α downregulates expression of αENaC mRNA in part via post-transcriptional modulation of its stability. In the present study, five 3'UTR αENaC sequences that are highly conserved (CS) across different species were studied to determine the impact of each of them on the modulation of αENaC mRNA under basal conditions, as well as in the presence of TNF-α. To study the involvement of these CS on the modulation of αENaC mRNA, a Tet-Off model was used to inhibit transcript expression using doxycycline. Transcript levels over time were estimated by RT-qPCR. With this technique, the half-life of αENaC mRNA is ~100 min. Punctual deletion mutants of 3'UTR were generated by specifically removing the CS1 (31pb), CS3 (22bp), CS2&3 (82bp), CS4&5 (74bp), CS1-5 (187bp) and CS3+ (165bp) domains. Our results show that the deletion of each CS affects their respective half-lives at 169 min, 172 min, 246 min, 193 min, 208 min and 237 min. The stability of the different mutants was then evaluated in the presence of TNF-α (a cytokine found in the lungs of patients with ARDS). In the presence of the complete 3’UTR, the degradation curve of the mRNA in presence of TNF-α was different from the one observed in under basal conditions. In presence of TNF-α, the curve turns biphasic with a rapid degradation followed by a plateau at about 50% of the expression level. The same thing was observed for the deletion mutant CS1-5. We therefore conclude that in general the 3'UTR of αENaC mRNA via the conserved domains is involved in the destabilization of the transcript. CSs studied did not contribute to the decreased expression of αENaC mRNA in the presence of TNF-α. However, we cannot exclude the possibility that other 3’UTR sequences could play an important role in the rapid degradation of αENaC mRNA during inflammation or lung injury.

In infants less than 2 years of age, acute hemorrhagic edema of infancy (AHEI) is characterized by the rapid onset of annular purpuric lesions associated with initially localized edemas affecting the extremities. This disorder is usually benign, without visceral involvement. Diagnosis is based on clinical examination, no specific laboratory findings exist and the histological examination of the lesions (which is unnecessary in the majority of cases) is most often nonspecific (sometimes patients have nonspecific leukocytoclastic vasculitis). Nosological status of AHEI remains unclear, but some reports suggest it is a clinical manifestation of rheumatoid purpura. Rhinopharyngeal episodes in the days before its onset have sometimes been reported, suggesting a viral cause. There is a net mismatch between patient's good general condition and the remarkable dissemination of the lesions. Infants monitoring must be rigorous in the first days, even though complications are exceptional (acute intussusception). Patients recover spontaneously within 12 days. Therapeutic management is based on accurate monitoring of the infant's general status. Fever, the extension of the purpuric lesions and, in particular, signs of impaired general condition may suggest the diagnosis of purpura fulminans. Another differential diagnosis is acute hemorrhagic or ecchymotic urticaria. We here report the case of a 3-month old infant with diffuse pseudoannular lesions within a context of apyrexy and preservation of patient's general condition. Patient's outcome was favorable without any treatment, confirming the diagnosis of AHEI.

L'œdème papillaire est un gonflement liquidien et/ou axonal de la tête du nerf optique du à un blocage du flux axoplasmique au niveau de la lame criblée. Nous rapportons le cas d'une jeune adolescente âgée de 17 ans, qui présenta un œdème papillaire bilatéral secondaire à une hypertension intracrânienne idiopathique.

International audience

Le transport actif de sodium par les cellules épithéliales alvéolaires est le principal mécanisme impliqué dans la régulation du niveau de liquide dans le poumon distal. Le canal épithélial sodique (ENaC) exprimé par les cellules épithéliales alvéolaires est essentiel à la résorption du liquide des poumons à la naissance ainsi que la résolution de l'œdème pulmonaire chez l'adulte. L'activité et l'expression du canal ENaC sont modulées par de nombreux stress pathophysiologiques. L'inflammation pulmonaire constitue un facteur important dans l'inhibition de l'expression du canal ENaC et pourrait favoriser la formation d'œdème pulmonaire. Nous avons précédemment démontré que différentes cytokines pro-inflammatoires, ainsi que les lipopolysaccharides (LPS) de Pseudomonas aeruginosa, inhibent l'expression de l'ARNm αENaC par des mécanismes de régulation transcriptionnelle et post-transcriptionnelle. Ces résultats suggèrent que les mécanismes qui modulent la stabilité des ARNm αENaC pourraient jouer un rôle important dans la régulation du niveau d’expression du transcrit en condition inflammatoire. Le principal objectif de mes travaux était de caractériser les mécanismes de modulation de l’ARNm αENaC dans les cellules épithéliales alvéolaires lors de différents stress pathophysiologiques et déterminer si cette modulation pouvait s’expliquer en partie par une régulation de la stabilité du transcrit. Mes travaux montrent que les LPS et la cycloheximide inhibent l’expression de l’ARNm αENaC de façon similaire via l’activation des voies de signalisation des MAPK ERK1/2 et p38. Cependant, les mécanismes de modulation de l’expression de l'ARNm αENaC sont différents puisque les LPS répriment la transcription du gène, alors que la cycloheximide diminuerait la stabilité du transcrit via des mécanismes post-transcriptionnels impliquant la région 3' non traduite (3'UTR) de l'ARNm αENaC. Pour mieux étudier le rôle du 3'UTR dans ce processus, nous avons développé un modèle Tet-Off nous permettant de mesurer la demi-vie de l’ARNm αENaC indépendamment de l’utilisation d’un inhibiteur de la transcription comme l'actinomycine D (Act. D). Nous avons montré que la demi-vie de l’ARNm αENaC était de 100min, un temps beaucoup plus court que celui rapporté dans la littérature. Nous avons démontré que l’Act. D a un effet stabilisateur important sur l’ARNm αENaC et qu’il ne peut être utilisé pour évaluer la stabilité du transcrit. À l’aide de différents mutants de délétion, nous avons entrepris de déterminer la nature des régions du 3’UTR impliquées dans la modulation de la stabilité du transcrit. Nous avons trouvé que le 3’UTR joue un rôle à la fois de stabilisation (région 3’UTR proximale) et de déstabilisation (région 3’UTR distale) du transcrit. Notre système nous a finalement permis de confirmer que la diminution de l’ARNm αENaC observée en présence de TNF-α s’expliquait en partie par une diminution importante de la stabilité du transcrit induite par cette cytokine. Enfin, nous avons identifié la nature des protéines pouvant se lier au 3’UTR de l’ARNm αENaC et déterminé lesquelles pouvaient moduler la stabilité du transcrit. Des trois protéines candidates trouvées, nous avons confirmé que la surexpression de DHX36 et TIAL1 diminue le niveau de transcrit par un mécanisme impliquant la stabilité du messager. Les travaux présentés ici montrent la complexité des voies de signalisation induites par différents stress sur les cellules épithéliales alvéolaires et montrent comment la stabilité de l’ARNm αENaC et en particulier, les séquences du 3’UTR jouent un rôle important dans la modulation du niveau de transcrit. Le modèle Tet-Off que nous avons développé permet d’estimer le temps de demi-vie réel de l’ARNm αENaC et montre que le 3’UTR du messager joue un rôle complexe dans la stabilisation du messager en condition de base ainsi qu’en condition pro-inflammatoire. Enfin, nous avons identifié deux protéines liant l’ARNm qui pourraient jouer un rôle important dans la modulation de la stabilité du transcrit., The epithelial sodium channel (ENaC) expressed in alveolar epithelial cells plays a major role for lung liquid clearance at birth and lung edema resorption in adulthood. The expression and activity of ENaC are inhibited by many pathophysiological stress that could have an impact in the clinical outcome of acute respiratory distress syndrome (ARDS). Pulmonary inflammation is an important factor in this inhibition that may promote or sustain pulmonary edema. We have previously shown that pro-inflammatory cytokines and lipopolysaccharide (LPS) from Pseudomonas aeruginosa inhibit αENaC mRNA expression by transcriptional and post-transcriptional mechanisms, suggesting that a modulation of αENaC mRNA stability could play a role in this process. The main objective of the present work was to characterize how different pathophysiological stress affect αENaC mRNA expression in alveolar epithelial cells and determine whether this modulation could be explained in part by regulating the stability of the transcript. Our study shows that LPS and cycloheximide decrease the level of αENaC mRNA with a similar time course and via the activation of the MAPK ERK1/2 and p38 signaling pathways. Despite similarities, there were important differences in the mechanisms involved in the modulation of αENaC mRNA expression. While LPS repress αENaC mRNA transcription, cycloheximide triggers post-transcriptional mechanisms involving the 3' untranslated region (3'UTR) of αENaC mRNA. To further study the role of αENaC 3'UTR in this process, we developed a Tet-Off model that allows us to measure the half-life of αENaC mRNA regardless of the use of a transcription inhibitor such as actinomycin D (Act. D). Using this system, we showed a 100 min half-life for αENaC mRNA, a much shorter time then the one reported for this mRNA using Act. D. We showed that Act. D has an important stabilizing effect on αENaC mRNA and cannot be used to assess the stability of the transcript. Using deletion mutants of the αENaC 3'UTR region, we determined how different portions of 3'UTR were important in modulating stability of the transcript. We found that the 3'UTR has dual functions, with portions important to promote stabilization (proximal 3'UTR) and others that strongly destabilize (distal 3'UTR) the transcript. Our system also allowed us to confirm that the decreased expression of αENaC mRNA induced by TNF-α results in part by a decreased stability of the mRNA. Finally, we identified several RNA-binding proteins that interact specifically with αENaC 3'UTR and determined if these proteins had an impact on transcript stability. Surexpression of two of these proteins in alveolar epithelial cells, DHX36 and TIAL1 was able to decrease the level of αENaC mRNA via a downregulation of mRNA stability. The work presented here shows the complexity of the signal transduction pathways elicited by different pathological stress conditions in alveolar epithelial cells and is the first to show that αENaC mRNA stability elicited by sequences in 3’UTR plays an important role in modulating the level of the transcript. The Tet-Off model that we developed allows to accurately estimate the half-life of αENaC mRNA and shows that the 3’UTR portion of the mRNA plays a complex role in the modulation of transcript stability in basal and pro-inflammatory conditions. Finally, we identified two putative RNA-binding proteins able to specifically recognize αENaC 3’UTR and modulate the transcript stability.

Le Syndrome néphrotique idiopathique (SNI) est une maladie ayant pour siège le glomérule rénal. C’est la néphropathie glomérulaire la plus fréquente en pédiatrie bien que son épidémiologie soit encore mal connue. Son incidence est de 1 pour 20000, ce qui en fait une maladie rare. Le SNI est une pathologie des podocytes, on observe trois sous-groupes histologiques, la forme à lésions glomérulaires minimes (LGM), la hyalinose segmentaire et focale (HSF) et plus rare la néphropathie membranaire (NM). La forme LGM est la plus courante et de bon pronostic, la forme HSF est minoritaire quoiqu’en expansion et de moins bon augure. C’est aussi un trouble du système lymphocytaire T, un facteur circulant sécrété par celui-ci altèrerait les podocytes. Cliniquement, on observe des œdèmes locaux voire une anasarque dus à une rétention primaire ou secondaire de sodium. Le diagnostic repose sur une protéinurie détectable à la bandelette ou par prélèvement et une albuminémie inférieure à 30g/l. On peut aussi observer une hyperlipidémie mixte. Le traitement est principalement une corticothérapie au long cours, en cas de rechutes fréquentes ou d’intoxications stéroïdiennes des immunosuppresseurs comme les alkylants, la cyclosporine, le lévamisole ou des nouvelles molécules sont utilisés, pouvant entrainer des effets indésirables aussi graves que la pathologie traitée. Il existe une forme corticorésistante corrélée à la HSF et influencée par la race de l’enfant dont le traitement est souvent symptomatique. Auquel on rajoute des traitements préventifs des complications dues à la maladie comme au traitement. Si de nos jours la forme corticosensible est jugulée, 50% des formes corticorésistantes aboutissent à une insuffisance rénale terminale. L’avenir repose sur la recherche du facteur circulant et les nouvelles pistes de la thérapie génique.

L′anthrax est une zoonose causée par le Bacillus anthracis. les humains contractent généralement cette maladie dans des régions endémiques, par contact direct avec des animaux infectés ou avec leurs produits contaminés. Les localisations palpébrales sont rares dans la pratique clinique et posent des problèmes de diagnostic différentiel. Les auteurs rapportent l'observation d'un patient admis dans un tableau de cellulite préseptale, avec escarre noirâtre étendue de la paupière supérieure et œdème extensif de l′hémiface, faisant suspecter une localisation palpébrale de la maladie du charbon. L'examen bactériologique a permis de confirmer le diagnostic. Le patient a bénéficié d′une antibiothérapie à base de pénicilline G avec une bonne évolution.

L'œdème lié à l'insuline est une complication rare mais décrite à maintes reprises dans la littérature médicale. Bien qu'il soit décrit de manière préférentielle à la suite de l'introduction ou de l'optimisation d'une insulinothérapie chez les patients diabétiques de type I, on retrouve des descriptions de cas chez des patients diabétiques de type H, chez des patients d'origine africaine, chez des patients sous corticothérapie ou encore chez des patients présentant un diabète mitochondrial ou une mucoviscidose. Si l'imputabilité de l'insuline dans l'apparition d'un syndrome œdémateux semble vraisemblable dans le diabète de type I, elle est plus discutable dans les autres situations. L'histoire naturelle de l'œdème est en général simple et limitée avec l'apparition d'un œdème des membres inférieurs spontanément résolutif. Cependant, l'évolution de l'œdème vers un anasarque compliqué d'une poussée d'insuffisance cardiaque, d'une pleurésie bilatérale voire d'un épanchement péricardique ou d'un œdème aigüe du poumon nécessite d'avoir été informé préalablement de l'existence de cet effet indésirable lié à l'insuline et de rechercher systématiquement une autre étiologie. L'œdème lié à l'insuline doit rester un diagnostic d'élimination. En ce qui concerne la physiopathologie de l'œdème imputable à l'insuline, deux grands mécanismes sont évoqués: l'action de l'insuline sur le rein et en particulier sur les canaux épithéliaux sodiques ENacs entraînant une rétention hydro-sodée, et l'action de l'insuline sur l'endothélium et sur sa production de médiateurs vasoactifs dont le monoxyde d'azote ou NO fait partie. Dans notre étude, le cas clinique illustrant ce phénomène rapporte l'histoire de la maladie d'une jeune femme de 32 ans qui présente un diabète de type I lent diagnostiqué 8 années plus tôt et pour lequel la patiente n'a jamais voulu se traiter. C'est à la suite d'une décompensation acido-cétosique sévère déclenchée par une pneumopathie infectieuse que l'insuline sera finalement initiée. La patiente présentera 3 semaines après l'introduction de l'insuline un syndrome œdémateux qui nécessitera un traitement par diurétique. Le but de notre étude, au-delà d'avoir essayé de faire une revue de littérature exhaustive sur le sujet, est d'informer de l'existence de cet effet indésirable afin de prévenir de ses complications éventuelles.

Le syndrome de détresse respiratoire aiguë (SDRA) se développe suite à une atteinte pulmonaire lésionnelle, induisant un œdème et une inflammation excessive, généralement suivis d’une réparation atypique menant à la fibrose. Malgré de signifiants progrès dans les traitements, la mortalité reste élevée : ~ 40 %. Mon hypothèse de travail est que l’atténuation de l’œdème ou de la réponse inflammatoire pourrait freiner le développement ou la sévérité de la phase exsudative. Nous avons évalué cette hypothèse à l’aide d’un modèle de phase exsudative du SDRA, i.e. instillation intra-trachéale de bléomycine, chez les souris.  La modulation des fluides alvéolaires est étudiée avec des souris transgénique (Tg) pour le canal ENaC, qui sont sensibles à la formation d’un œdème. Cependant, ces souris Tg ne sont pas plus sensibles au développement de la phase exsudative en condition lésionnelle (bléomycine). Nous avons déterminé par une étude électrophysiologique des cellules épithéliales alvéolaires de type II (AT II) que ce n’est pas lié à une inhibition par la bléomycine de la fonction du canal ENaC.  Le traitement de la réponse inflammatoire associée au SDRA par des glucocorticoïdes est une thérapie potentielle mais controversée. Les glucocorticoïdes dans notre modèle murin ne réduisent pas la sévérité des lésions. Nous avons pu déterminé lors d’expériences in vitro que ce serait dû à une réduction de la capacité de réparation des AT II. En résumé :  La modulation du canal ENaC ne modifie pas le développement de la phase exsudative, suggérant que la régulation de l’œdème n’est pas suffisante pour modifier l’évolution du SDRA.  La modulation de l’inflammation par les glucocorticoïdes est ineffective, possiblement à cause d’une altération de la réparation. Mon étude suggère que le traitement de la phase exsudative du SDRA est complexe. En effet, la régulation de l’œdème ou de l’inflammation de façon isolée ne peut pas modifier l’évolution du SDRA. L'hétérogénéité des sources du SDRA et la redondance des mécanismes cellulaires impliqués dans l’évolution des lésions pulmonaires suggèrent que le traitement nécessitera une approche visant plusieurs cibles mécanistiques afin d’en accélérer la résolution., Although much has been learned about the mechanisms leading to acute respiratory distress syndrome (ARDS), mortality remains high: ~ 40%. This syndrome is associated with lung injury where alveolar edema and excessive inflammatory response can progress to abnormal epithelial repair and fibrosis. The hypothesis of the work presented in this thesis is that attenuation of edema or of the inflammatory response in the initial stage of the acute lung injury would decrease the severity of injury. I evaluated this hypothesis in an ARDS acute phase, modeled by an intratracheal instillation of bleomycin in mice, using two distinct experimental strategies.  The importance of edema clearance was studied in a transgenic (Tg) ENaC mouse, a mouse known to be sensitive to the formation of edema. However, our results show that these Tg mice were not more susceptible to the development of the ARDS acute phase induced by bleomycin. Furthermore, we have been able to show that bleomycin itself did not interfere with the ENaC channel function of alveolar epithelial cells type II (AT II).  The treatment of the inflammatory response associated with ARDS by glucocorticoid therapy is subject to controversy. In our mouse model, glucocorticoids decrease the level of cytokine in the alveolar milieu but did not decrease the severity of lung injury. Using in vitro experiments, we show that this lack of response could be secondary to the impact of the treatment on the epithelial repair capacity of AT II. In summary:  The ENaC channel expression did not have an impact on the development of the exudative phase, suggesting that the regulation of edema is not sufficient to alter the course of ARDS.  The modulation of inflammation by glucocorticoids was ineffective, possibly because of impaired repair of the epithelium. These results suggest that the control of edema or inflammation separately does not modify the evolution of lung injury. The heterogeneity of the ARDS origins and the redundancy of cellular mechanisms involved in lung injury will require therapy aimed at multiple pathophysiological targets to permit the resolution of lung injury.

Les médiateurs lipidiques de l’inflammation dont le leucotriène B4 (LTB4) et le facteur d’activation plaquettaire (PAF) permettent la régulation de la migration des neutrophiles polymorphonucléaires (PMNs) et l’extravasation plasmatique au site inflammatoire. Afin de déterminer leurs rôles dans la régulation de la migration des PMNs au site inflammatoire, nous avons étudié leur effet potentiellement coopératif en utilisant une approche pharmacologique à l’aide d’antagonistes sélectifs des récepteurs du LTB4 et du PAF dans un modèle d’inflammation dermique chez le lapin. Les résultats montrent un effet inhibiteur additif des antagonistes des deux médiateurs lipidiques, lorsque utilisés de façon concomitante, sur la migration des neutrophiles induite par le LTB4, le PAF et aussi sur des médiateurs non-chimiquement apparentés comme le facteur nécrosant des tumeurs (TNFα), ainsi que sur l'inhibition de l’extravasation plasmatique induite par le leucotriène D4, suggérant un rôle régulateur des récepteurs du LTB4 et du PAF dans la migration des PMNs au site inflammatoire. Nous avons déterminé le rôle de ces médiateurs dans la régulation de la migration des PMNs en réponse à une ischémie-reperfusion des membres inferieurs chez le lapin. Les résultats appuient l’hypothèse selon laquelle le LTB4 et le PAF exercent un rôle important dans l’accumulation des PMNs au site inflammatoire. En effet l’administration concomitante des antagonistes des récepteurs de ces deux médiateurs lipidiques a réduit de façon significative la migration des PMNs aux poumons, intestins et foie. Nos résultats contribuent à élucider le rôle du LTB4 et du PAF dans la régulation de l’extravasation des PMNs et du plasma au site inflammatoire., Inflammatory lipid mediators including leucotriene B4 (LTB4) and platelet activating factor (PAF) regulate the trafficking of polymorphonuclear neutrophils (PMNs) and plasma extravasation at inflammatory sites. To delineate their role in regulating PMNs extravasation, we studied the effect of PAF and/or LTB4 selective receptor antagonists in dermal inflammation induced by a variety of agonists in a rabbit bioassay model. The results show that there is an additive inhibitory effect when the two antagonists are used concomitantly on PMNs dermal accumulation induced by LTB4 and PAF, as well by chemically unrelated agonists including TNFα, in addition to inhibiting plasma extravasation induced by LTD4. These results support a regulatory role of LTB4 and PAF in regulating PMNs trafficking and plasma extravasation at inflammatory sites. Next, we studied the regulatory role of lipid mediators in regulating PMNs trafficking in response to hind limb ischemia-reperfusion. The results show that the administration of both PAF and LTB4 receptor antagonists reduced significantly PMNs migration to the lung, the liver and the intestine. Our results contributed to elucidate the role of LTB4 and PAF in the regulation of PMNs migration and oedema formation at inflammatory sites.

Les décès attribués à un choc septique à la suite d’une infection sévère augmentent chez les diabétiques et surviennent assez fréquemment dans les unités de soins intensifs. Le diabète sucré et le choc septique augmentent la production d’espèces réactives oxygénées et de cytokines pro-inflammatoires, lesquelles activent le facteur de transcription nucléaire Kappa B conduisant à l’induction du récepteur B1 (RB1) des kinines. Le diabète induit par la streptozotocine (STZ) augmente l’expression du RB1 dans divers tissus périphériques, le cerveau et la moelle épinière. Les lipopolysaccharides bactériens (LPS), souvent utilisés pour induire le choc septique, induisent aussi le RB1. L’objectif de ce travail vise à démontrer la contribution du RB1 des kinines dans l’exacerbation du choc septique pendant le diabète. Des rats Sprague-Dawley (225-250 gr) traités à la STZ (65 mg/kg, i.p.) ou le véhicule ont reçu quatre jours plus tard les LPS (2 mg/kg, i.v.) ou le véhicule en présence ou pas d’un antagoniste du RB1 (SSR240612, 10 mg/kg) administré par gavage. La température corporelle a été mesurée pendant 24h après le traitement. Le SSR240612 a aussi été administré à 9h AM et 9h PM et les rats sacrifiés à 9h AM le jour suivant après un jeûne de 16 h. Les effets de ces traitements ont été mesurés sur les taux plasmatiques d’insuline et de glucose, l’œdème et la perméabilité vasculaire (dans divers tissus avec la technique du Bleu d’Evans) ainsi que sur l’expression du RB1 (PCR en temps réel) dans le cœur et le rein. L’augmentation de la température corporelle après traitement au LPS chez les rats traités ou pas à la STZ a été bloquée par le SSR240612. L’antagoniste a normalisé l’hyperglycémie et amélioré la déficience en insuline chez les rats STZ. Le SSR240612 a inhibé l’œdème et réduit la perméabilité vasculaire dans les tissus des rats diabétiques traités ou pas avec les LPS. La surexpression du RB1 chez les rats traités au STZ et/ou LPS était renversée par le SSR240612. Cet antagoniste a prévenu la mortalité causée par les LPS et LPS plus STZ. Les effets anti-pyrétique, anti-inflammatoire et anti-diabétique du SSR240612 suggèrent que le RB1 puisse représenter une cible thérapeutique valable pour le traitement de la co-morbidité associée au choc septique dans le diabète., Death attributed to septic shock following severe infection increases in diabetic patients and occurs quite frequently in intensive care units. Diabetes mellitus and septic shock increase the production of reactive oxygen species and pro-inflammatory cytokines leading to higher kinin B1 receptor (RB1) expression that is mediated by the activation of the transcriptional nuclear factor Kappa B. Streptozotocin (STZ)-induced diabetes increased the expression of RB1 in rat peripheral tissues, brain and spinal cord. Bacterial lipopolysaccharides (LPS) commonly used to induce septic shock in animal models, also induce RB1. Our objective is to study the contribution of kinin RB1 in the increased morbidity and mortality associated with the combination of these two diseases. Sprague-Dawley rats (225-250g) treated with STZ (65 mg/kg, ip) or vehicle received four days later LPS (2 mg/kg, iv) or vehicle in the presence or absence of the RB1 antagonist, SSR240612 (10 mg/kg), administered by gavage. Body temperature was monitored for 24h after treatment. In addition, SSR240612 was administered twice (9h AM and 9h PM) and rats were sacrificed the following morning at 9h AM after 16 h of fasting to measure the impact on plasma insulin and glucose, oedema and vascular permeability in various tissues (with the technique of Evans Blue) and on the expression of RB1 (real-time PCR) in heart and kidney. The increase in body temperature caused by treatment with LPS both in STZ-diabetic and non-diabetic rats was blocked by SSR240612. The antagonist normalized hyperglycaemia and improved insulin deficiency in STZ rats. SSR240612 inhibited oedema and reduced vascular permeability in all tissues from diabetic rats treated or not with LPS. The overexpression of RB1 induced by LPS and STZ was blocked by SSR240612. Pharmacological blockade of B1R with SSR240612 prevented the mortality induced by LPS and STZ plus LPS. Thus the anti-pyretic, anti-inflammatory and anti-diabetic effects of SSR240612 suggest that kinin RB1 is a promising therapeutic target for the treatment of co-morbidity associated with septic shock in diabetes.

The purpose of this study was to answer two questions: What is the effect of bed rest on the circumference of the lower limbs? What is the effect of one session of a routinely used method of compressive digital lymphatic stimulation on this same circumference? There were three study groups with 33, 33 and 34 subjects. To respond to the first interrogation, two groups were compared: a healthy young population and a pathological population. For the second question, a third group of patients with a pathology were treated with one session of compressive digital lymphatic stimulation. In the two situations, the difference in the circumference of the lower limbs was noted. The results showed that both bed rest and digital stimulation had a statistically significant effect on the measured circumferences. The differences observed after one treatment session were significantly greater than those after bed rest.; Le but de cette étude était de répondre à deux questions : Quel était l'effet du repos allongé sur les mesures périmétriques des membres inférieurs ? Quel était l'effet d'une séance de traitement par pression digitale doigts écartés (PDDE), que nous utilisons dans notre quotidien, sur ces mêmes périmètres ? Dans cette étude trois groupes de populations ont été étudiées : deux de 33 et un autre de 34 sujets. Pour répondre à la première question sur le repos, nous avons comparé deux populations : l'une jeune et saine, l'autre pathologique. Pour répondre à la deuxième question, un troisième groupe de personnes pathologiques a reçu une séance de traitement. Dans les deux situations, la différence sur les mesures périmétriques a été notée. Les résultats mesuraient les différences périmétriques des membres inférieurs. Ils indiquent que le repos comme le traitement par PDDE ont un effet statistiquement significatif sur les périmètres. La différence de mesures à la suite d'une séance de traitement est statistiquement supérieure à celle du repos.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.