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Introducción. La leucemia es el principal tipo de cáncer infantil, con una tasa de incidencia para 2022 de 5.5 por cada 100,000 menores. La hipercalcemia maligna es una de sus manifestaciones paraneoplásica grave y poco frecuente (incidencia global del 0.4 – 1.3%) en la población pediátrica. Objetivo. Presentar un caso de leucemia linfoblástica aguda que debutó con hipercalcemia severa. Descripción del caso. Se trata de una preescolar femenina de 3 años que inició con cuadro clínico caracterizado por dolores óseos y limitación funcional, los hemogramas iniciales no mostraron alteración de líneas celulares, las radiografías evidenciaron osteopenia generalizada, acompañado de hipercalcemia severa, paratohormona inhibida e hipercalciuria secundaria, que fueron manejados con hidratación endovenosa, diurético, esteroide y ácido zolendrónico. Así mismo, presentó desequilibrios electrolíticos que requirieron reposición de potasio y fósforo con adecuada respuesta. Se realizaron estudios de médula ósea, confirmándose el diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda, recibió quimioterapia protocolo ALLIC 2009 con enfermedad refractaria al final de la fase de inducción, y finalmente trasplante haploidéntico de médula que fue exitoso. Discusión. La hipercalcemia maligna es una de las urgencias oncológicas endocrinológica con una incidencia baja, que es más frecuente en la población adulta, por lo que no es la primera impresión diagnóstica para considerar en pediatría, lo que lleva a retrasos en el diagnóstico etiológico y en pronóstico. Conclusión. La hipercalcemia acompañada de lesiones osteolíticas difusas puede ser la primera y única manifestación en la población infantil con diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda, reconocerla permitirá llevar al inicio oportuno de tratamiento, impactando en sobrevida. Palabras clave: Hipercalcemia; Informes de Casos; Leucemia-Linfoma Linfoblástico de Células Precursoras; Médula Ósea; Neoplasias Hematológicas. Introduction. Leukaemia is the leading childhood cancer, with a 2022 incidence rate of 5.5 per 100,000 children. In the pediatric population, Hypercalcaemia maligna is one of its rare and severe paraneoplastic manifestations (overall incidence 0.4 - 1.3%). Objective. To present a case of acute lymphoblastic leukemia that debuted with severe hypercalcemia. Case description. It is about a 3-year-old female preschooler who started with a clinical picture characterized by bone pain and functional limitation; initial haemograms showed no alteration of cell lines, radiographs showed generalized osteopenia, accompanied by severe hypercalcemia, inhibited parathyroid hormone and secondary hypercalciuria, which were managed with intravenous hydration, diuretic, steroid and zoledronic acid. She also presented electrolyte imbalances that required potassium and phosphorus replacement with adequate response. Bone marrow studies were performed, confirming the diagnosis of acute lymphoblastic leukemia; she received ALLIC 2009 protocol chemotherapy with refractory disease at the end of the induction phase, and finally, a haploidentical bone marrow transplant, which was successful. Discussion. Hypercalcemia of malignancy is one of the endocrinological oncological emergencies with a low incidence, which is more frequent in the adult population. So, it is not the first diagnostic impression to be considered in pediatrics, leading to delays in aetiological diagnosis and prognosis. Conclusion. Hypercalcaemia accompanied by diffuse osteolytic lesions may be the first and only manifestation in the pediatric population with a diagnosis of acute lymphoblastic leukemia. Recognizing it will lead to the timely initiation of treatment, with an impact on survival. Keywords: Hypercalcemia; Case Reports; Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma; Bone Marrow; Hematologic Neoplasms. Introdução. A leucemia é o principal tipo de câncer infantil, com uma taxa de incidência de 5.5 por 100,000 crianças em 2022. A hipercalcemia maligna é uma das suas manifestações paraneoplásicas graves e raras (incidência global de 0.4 – 1.3%) na população pediátrica. Objetivo. Apresentar um caso de leucemia linfoblástica aguda que teve início com hipercalcemia severa. Descrição do caso. Trata-se de uma criança pré-escolar do sexo feminino, de 3 anos, que apresentou um quadro clínico caracterizado por dores ósseas e limitação funcional. Os hemogramas iniciais não mostraram alterações nas linhas celulares, e as radiografias evidenciaram osteopenia generalizada, acompanhada de hipercalcemia severa, com paratormônio inibido e hipercalciúria secundária. O manejo incluiu hidratação endovenosa, diurético, esteroide e ácido zoledrônico. Da mesma forma, a paciente apresentou desequilíbrios eletrolíticos que exigiram reposição de potássio e fósforo, com resposta adequada. Foram realizados estudos de medula óssea, confirmando o diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda. Ela recebeu quimioterapia seguindo o protocolo ALLIC 2009, mas apresentou doença refratária ao final da fase de indução, e, por fim, foi submetida a um transplante haploidêntico de medula, que foi bem-sucedido. Discussão. A hipercalcemia maligna é uma das urgências oncológicas endocrinológicas com baixa incidência, sendo mais comum na população adulta. Por isso, não é a primeira impressão diagnóstica a ser considerada em pediatria, o que pode resultar em atrasos no diagnóstico etiológico e no prognóstico da condição. Conclusão. A hipercalcemia acompanhada de lesões osteolíticas difusas pode ser a primeira e única manifestação na população infantil com diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda. O reconhecimento precoce permitirá o início oportuno do tratamento, impactando positivamente na sobr evida. Palavras-chave: Hipercalcemia; Relatos de Casos; Leucemia-Linfoma Linfoblástico de Células Precursoras; Medula Óssea; Neoplasias Hematológicas.

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This research aims to analyze and discuss national and international scientific evidence on the importance of nursing care in pediatric cancer treatment. This is an integrative literature review, carried out between the months of May and November 2022. The choice of articles was made through the BVS, Scielo, LILACS and Google Scholar databases, through the Health science descriptors (DeCS): Bone Marrow, Lymphoid Leukemia and Nursing. The 10 studies were grouped into thematic categories: Nursing care for children with acute lymphocytic leukemia (ALL); Applicability of toy therapy and the participation of animals in the oncological treatment process; Nursing as a fundamental tool in palliative care. It is concluded that the nursing professional has an essential role in assisting children diagnosed with ALL during treatment and in-hospital stay. Care should be carried out through theoretical/practical knowledge, offering psychological support and using humanized practices in conjunction with drug therapy, reducing and relieving pain, minimizing the effects caused by drugs and transforming the treatment that can cause pain and exhaustion, into something fun and reducing exhaustion, thus resulting in the creation of a greater bond between nurse and patient. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

O mielograma, exame citológico da medula óssea, representa um importante recurso na clínica de cães para determinar a origem de alterações na circulação sanguínea. Sua base é a avaliação da medula óssea, que nos adultos está presente principalmente nos ossos chatos, como o esterno e as costelas, e sua principal função é a de hematopoese, a produção de células sanguíneas, sendo elas as hemácias, leucócitos (granulócitos – neutrófilos, eosinófilos e basófilos, agranulócitos – monócitos e linfócitos), além das plaquetas. Para o mielograma, é necessário realizar a coleta correta da medula óssea, e sua análise envolve a avaliação da celularidade, determinação da relação Mieloide:Eritroide, avaliação das reservas de ferro e a pesquisa de parasitas, sendo que na espécie canina os mais comuns são Leishmania spp. e Ehrlichia spp. A busca de alterações na medula óssea se dá normalmente quando o paciente apresenta anormalidades hematológicas que não são explicadas com os outros exames de rotina. A sua análise e interpretação auxiliam o médico veterinário a alcançar o diagnóstico correto para o paciente.

Este levantamento tem como objetivo apresentar laudos e outras informações dos mielogramas realizados nos anos de 2017 e 2018 no Hospital Veterinário da Universidade Anhembi Morumbi, com ênfase nos animais portadores de leishmaniose visceral canina (LVC), a fim de constatar e relatar a quantidade de pacientes que apresentam a infecção por Leishmania spp., analisando também os resultados de outros exames citológicos e sorológicos desses animais para comparação e pontuação da precisão diagnóstica e alterações laboratoriais séricas e microscópicas mais comuns causadas por esta enfermidade, respectivamente. Observaram-se alterações em hemograma e mielograma, porém animais com baixo grau de parasitismo não apresentaram Leishmania spp. em seus exames de medula óssea.

O Mieloma Múltiplo (MM) é uma neoplasia de plasmócitos com origem na medula óssea, sendo de rara ocorrência. Na forma não-secretora não há identificação de gamopatia monoclonal sérica e da proteinúria de Bence-Jones, tornando o diagnóstico mais desafiador. Relata-se um caso de MM não-secretor, em cão da raça Shih Tzu, com histórico de hiporexia e emagrecimento progressivo sem demais manifestações clínicas. Foram encontrados em exames complementares achados inespecíficos iniciais de cardio, hepato e esplenomegalia, além de anemia. Também foram descartadas doenças infecciosas endêmicas. Por meio de radiografia de membros e coluna vertebral, foram evidenciadas lesões líticas ósseas disseminadas, sugerindo MM. Encaminhou-se o paciente para mielograma, na qual foi identificada plasmocitose reativa (>10%). Na eletroforese de proteínas séricas, obteve-se valores normais; e não houve detecção da proteinúria de Bence-Jones. Também foi identificada hipercalcemia. Por meio dos achados descritos acima, foi definido o diagnóstico em MM não-secretor. Instituiu-se o tratamento com Melfalano associado à prednisolona, com melhora do quadro clínico e ausência de efeitos colaterais por 120 dias. Concluiu-se que o MM não-secretor, embora raro, deve ser adicionado à lista de diagnósticos diferenciais em situações de sinais clínicos inespecíficos associados a distúrbios osteomedular. Bem como, o protocolo quimioterápico descrito mostrou-se eficaz como abordagem terapêutica.

Introdução: Transplante de medula óssea é o tratamento primordial para algumas doenças que comprometem a medula óssea (MO). Atualmente, o número de cadastrados para doação de MO é crescente, mas ainda está aquém do ideal. Objetivo: Avaliar os principais motivos que levam à decisão de se cadastrar ou não para doação de MO com o intuito de aumentar a adesão ao cadastro no Registro Nacional de Doadores de Medula Óssea (Redome). Metodologia Material e Métodos: Pesquisa quantitativa e descritiva realizada na cidade de Juiz de Fora, com a aplicação de questionário, em uma amostra de 448 moradores, entre 18 e 55 anos, sem afecções que contraindicam a doação. O questionário foi elaborado pelos autores com base em uma revisão bibliográfica minuciosa. Foram avaliadas variáveis demográficas e barreiras para o cadastro para ser doador de MO. Resultados: Entre os entrevistados, a média de idade foi de 32,6 anos, sendo 50,2% do sexo feminino, 52,6% brancos, 51% com renda de 1 a 3 salários e 55% com ensino médio completo. Dentre eles, 89,7% declararam não serem cadastrados como doadores de MO. Concluiu-se que os mais velhos têm 3,39 mais chances de se cadastrarem, enquanto os não brancos têm 55,1% menos chances de se cadastrarem. Conclusões: O fator que contribui para a baixa adesão ao cadastro em nosso meio é, principalmente, a falta de informação. Ademais, a informação por meio da mídia e as campanhas de doação de MO pelos setores de saúde são alguns dos fatores que esclareceriam a população sobre o tema, influenciando, assim, o cadastro.

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The aim of this report is to present the clinical case of a five-year-old mixed breed female dog diagnosed with chronic myeloid leukemia (CML). Leukemias are malignant neoplasms that originate from bone marrow precursor cells and the consequences can be thrombocytopenia, anemia, persistent leukocytosis and the presence of neoplastic cells in the blood. The treatment of choice involves the use of tyrosine kinase inhibitors, but it cannot be used in this case. Thus, the dog received different chemotherapy protocols that initially included hydroxyurea, cytarabine, doxorubicin and prednisone. Due to the partial remission of clinical signs and the short-term therapeutic response to these medications, the protocol was changed to metronomic chemotherapy with chlorambucil. The use of these chemotherapeutic agents was not effective in reducing leukocytosis and controlling the patient's anemia and thrombocytopenia, due to the occurrence of immature cells in the blood and resistance to chemotherapeutic agents. In the absence of the crisis and the possibility of using tyrosine kinase inhibitors, hydroxyurea remains the chemotherapy of choice. The animal had a 210-day survival, due to severe leukocytosis and anemia, which were not responsive to the therapeutic protocol used and the appearance in the blood count of neutrophilic precursors that occurred 46 days after the beginning of hydroxyurea treatment. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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Resumos escolhidos para publicação. Nessa edição, os títulos foram: Alelos Raros Tipificados na Rotina do Laboratório de Histocompatibilidade da Santa Casa de São Paulo/SP; Análise Retrospectiva de Reconvocações de Doadores de Medula Óssea no Laboratório de Histocompatibilidade da Santa Casa de São Paulo/SP; Avaliação das Unidades de Sangue de Cordão Umbilical não Aparentado Armazenadas no Banco de Sangue de Cordão Umbilical do Hospital de Clínicas de Porto Alegre; Coleta de Células-Tronco Hematopoiéticas de Doadores Voluntários: Experiência de um Único Centro; Perfil do Banco de Cadastro de Doadores de Medula Óssea e suas Buscas ao Redome no Estado de Pernambuco; O Olhar do Doador Brasileiro de Medula Óssea sobre os Serviços Prestados pela Rede Redome no Processo de Doação; Melhoria no Contato com os Doadores do Redome; Histórico da Pesquisa Preliminar de Doadores Nacionais para Pacientes Internacionais; Tempo Médio de Liberação de Resultados de Tipagem HLA (2ª fase) para Doadores Voluntários de Medula Óssea; e Desequilíbrio de Ligação de Haplótipos HLA-DRB1-DQB1 de Candidatos do Redome em um Laboratório do Norte do Estado do Paraná, Região Sul do Brasil.

The bone marrow is a "niche" for stem cells; determining the bone marrow pH value is of great importance. It is very difficult, almost impossible, to carry out the intravital determination of pH. In surgical practice, there are situations when doctors have no way to save the patient's lower limb because of the threat to life. In such cases, it is possible to extract the bone marrow from the bone marrow cavity of the amputated femur and examine it. The purpose of this research was to study the acid-base balance peculiarities of the marrow of long bones and carry out a comparative analysis of the obtained data and the indicators of flat bones. The study included 40 test samples of bone marrow. Lower limb amputations were performed because of foot gangrene. Bone marrow was extracted from the femur. The marrow of flat bones was obtained by a sternal puncture. In the pH test of the sternal puncture, the data varied within the range of the blood pH, i.e., between 7.35-7.45 and 7.8. The pH and gas composition data of the sternal puncture were identical to the blood indicators. The data of bone marrow obtained from the long bone was completely different. The acid-base balance strictly ranged from 6.7 to 6.9. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

O mieloma múltiplo é uma neoplasia mais importante de plasmócitos quando se consideram incidência e severidade. É responsável pela síntese elevada de imunoglobulinas e a fisiopatogenia associada à doença ocorre, principalmente, em consequência da síndrome da hiperviscosidade sanguínea (diátese hemorrágica, sinais neurológicos, aumento do trabalho cardíaco e doença renal). Pelo menos dois de quatro critérios diagnósticos devem estar presentes: lessões ósseas líticas, aspirado de medula óssea com mais de 5% de plasmócitos, gamopatia monoclonal em soro ou urina e proteinúria de Bence-Jones. Este relato descreveu um caso de mieloma múltiplo em cão, conduta diagnóstica ocorreu a partir da evidência de uma lesão osteolí- tica em membro torácico esquerdo, com posterior combinação de 3 dos 4 critérios utilizados para o diagnóstico definitivo dessa enfermidade.

Abstract: Tissue engineering has been a fundamental technique in the regenerative medicine field, once it permits to build tri-dimensional tissue constructs associating undifferentiated mesenchymal cells (or mesenchymal stromal cells - MSCs) and scaffolds in vitro. Therefore, many studies have been carried out using these cells from different animal species, and rabbits are often used as animal model for in vivo tissue repair studies. However, most of the information available about MSCs harvesting and characterization is about human and murine cells, which brings some doubts to researchers who desire to work with a rabbit model in tissue repair studies based on MSCs. In this context, this study aimed to add and improve the information available in the scientific literature providing a complete technique for isolation, expansion and differentiation of MSCs from rabbits. Bone marrow mononuclear cells (BMMCs) from humerus and femur of rabbits were obtained and to evaluate their proliferation rate, three different culture media were tested, here referred as DMEM-P, DMEM´S and α-MEM. The BMMCs were also cultured in osteogenic, chondrogenic and adipogenic induction media to prove their multipotentiality. It was concluded that the techniques suggested in this study can provide a guideline to harvest and isolate MSCs from bone marrow of rabbits in enough amount to allow their expansion and, based on the laboratory experience where the study was developed, it is also suggested a culture media formulation to provide a better cell proliferation rate with multipotentiality preservation.

Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a concentração e viabilidade da fração de células mononucleares (FCM) a partir de diferentes técnicas de colheita e processamento de medula óssea (MO) em equinos. Foram avaliados cinco equinos adultos, hígidos e sem raça definida. Obtiveram-se frações de medula óssea (MO) do osso esterno, de acordo com dois protocolos: na colheita A, utilizou-se 10mL de solução de heparina dentro da seringa e em seguida, aspirou-se a MO; na colheita B, 10mL de solução de heparina foi injetada na MO e a aspiração foi realizada após 20 segundos. Todos os animais foram submetidos aos dois protocolos de colheitas, realizadas em sequência, sem intervalo entre os dois procedimentos. Após isolamento da fração de células mononucleares (FCM), das amostras de MO obtidas nas colheitas A e B, cada amostra foi dividida em dois tubos, um contendo solução de DMEM e outro contendo PBS. Assim, alternando-se o tipo de colheita e a solução diluidora, obteve-se quatro tubos de amostras por animal. Os tubos foram centrifugados e os sedimentos foram homogeneizados nos respectivos meios obtendo-se o volume final de 100μL. Realizou-se determinação da concentração e viabilidade celular, obtendo-se as concentrações médias de FCM. Para ambos os meios de diluição, a colheita B apresentou valor numérico maior em comparação à colheita A, porém não foi significativo (p>0,05). Atribui-se tal tendência à menor ocorrência de coagulação da MO no momento da colheita B, sugerindo-se melhor aproveitamento da FCM. Não houve diferença (p>0,05) entre os meios DMEM ou PBS, indicando que os mesmos não alteraram a viabilidade celular. Os protocolos utilizados para colheita de MO e separação da FCM se mostraram eficientes, para o uso em terapia celular em equinos.

Abstract: Chlorocebus aethiops is a species of non-human primate frequently used in biomedical research. Some research involves this species as an experimental model for various diseases and possible treatment with stem cells. The bone marrow is one of the main sources of these cells and provides easy access. The aim of this study was to standardize the protocol of collection and separation of bone marrow in C. aethiops. Ten animals were submitted to puncture of bone marrow with access to the iliac crest and cell separation by density gradient. The bone marrow of C. aethiops had an average of 97% viability. From the results achieved, we can conclude that C. aethiops is an excellent model to obtain and isolate mononuclear cells from bone marrow, fostering several studies in the field of cell therapy.

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Abstract The goal of this study was to analyze cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to bone marrow cells of mice of nature identical synthetic flavorings, passion fruit and strawberry, and artificial synthetic flavorings, vanilla, chocolate, tutti-frutti and cookie, at doses 0.5; 1.0; 2.0; 5.0 and 10.0 mL/kg. The additives were given to the animals by gavage in a single daily application for seven days. Data were subjected to analysis of variance (ANOVA) followed by post Tukey’s post hoc test, p

Abstract Handroanthus impetiginosus has long been used in traditional medicine and various studies have determined the presence of bioactive chemical compounds and potential phytotherapeutics. In this study, the genotoxicity of the lyophilized tincture of H. impetiginosus bark (THI) was evaluated in mouse bone marrow using micronucleus assays. The interaction between THI and genotoxic effects induced by the chemotherapeutic agent, doxorubicin (DXR), was also analyzed. Experimental groups were evaluated 24 to 48 h after treatment with N-nitroso-N-ethylurea (NEU; 50 mg/kg), DXR (5 mg/kg), sodium chloride (NaCl; 150 mM), and THI (0.5-2 g/kg). Antigenotoxic assays were carried out using THI (0.5 g/kg) in combination with NEU or DXR. Analysis of the micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) indicated no significant differences between treatment doses of THI (0.5-2 g/kg) and NaCl. Polychromatic erythrocyte (PCE) to normochromatic erythrocyte (NCE) ratios did not indicate any statistical differences between DXR and THI or NaCl, but there were differences between THI and NaCl. A significant reduction in MNPCEs and PCE/NCE ratios was observed when THI was administered in combination with DXR. This study suggested the absence of THI genotoxicity that was dose-, time-, and gender-independent and the presence of moderate systemic toxicity that was dose-independent, but time- and gender-dependent. The combination of THI and DXR also suggested antigenotoxic effects, indicating that THI reduced genotoxic effects induced by chemotherapeutic agents.

From fifteen female dogs with clinical diagnoses of pyometra, hematological exams were performed at three times: M0 (prior to the surgery), M24 (24h after ovarysalpingohisterectomy-OSH) and M48 (48h after OSH). Anemia was seen in 80% of the cases, characterized as mild normocytic normochromic type. The means of total leukocyte counts were 27.043, 57.940 and 40.139 céls/µL in M0, M24 and M48. A total of80% of the animals presented neutrophilic left shift in all moments. During medullar exams, the cellular, iron reserve and megakaryocytic concentration were raised as well as the ME ratio, showing a value of 26,3:1,0, probably due to the elevation of granular proliferation and maturation compartment, as the mean of the reserve compartment was within normal range. As 83% of the animals with neutrophilic left shift showed a melullary reserve compartment raised, it can be concluded that female dogs with piometra had left shift of neutrophils with disproportionally between compartments, without segmented medullar saturation.

A técnica de citoinclusão é amplamente utilizada e reconhecida por profissionais da área da saúde, em particular médicos patologistas, porém as informações sobre a aplicação desse método em medicina veterinária ainda são raras. Análises citológicas de medula óssea e da capa leucocitária (porção do sangue formada por concentrados de leucócitos) são amplamente utilizadas no diagnóstico de patologias de origem neoplásica e não neoplásica e de agentes infecciosos. Embora a importância do uso da técnica seja amplamente reconhecida, não há registro da utilização de amostras citológicas de medula óssea e capa leucocitária na confecção de citoinclusões em blocos de parafina, como meio de diagnóstico no segmento médico veterinário. Assim, este trabalho tem como objetivo elaborar um protocolo de citoinclusão em parafina para amostras citológicas de medula óssea e capa leucocitária de cães. Foram submetidas à técnica de citoinclusão 110 amostras de capa leucocitária e 44 de medula óssea de cães portadores ou não de enfermidade sistêmica, sendo que em 68% destas, tanto para a capa leucocitária quanto para a medula óssea, as amostras se mostraram viáveis. A utilização do álcool 95% como fixador e de etapas no processamento histológico de 20 minutos (álcool absoluto, xilol e parafina, três banhos cada) foi crucial para a qualidade dos cortes histológicos e para a análise microscópica dos espécimes corados pela hematoxilina-eosina. A separação mecânica da capa leucocitária e a centrifugação do aspirado de medula óssea foram eficientes e de baixo custo no preparo das citoinclusões. Ressalta-se a importância na padronização da técnica de citoinclusão, em particular para amostras de capa leucocitária e medula óssea, visando à obtenção de espécimes de qualidade independentemente das limitações de equipamentos.

The aim of the study was to analyze a series of Brazilian patients with Niemann-Pick disease type C (NP-C). Method Correlations between clinical findings, laboratory data, molecular findings and treatment response are presented. Result The sample consisted of 5 patients aged 8 to 26 years. Vertical supranuclear gaze palsy, cerebellar ataxia, dementia, dystonia and dysarthria were present in all cases. Filipin staining showed the “classical” pattern in two patients and a “variant” pattern in three patients. Molecular analysis found mutations in the NPC1 gene in all alleles. Miglustat treatment was administered to 4 patients. Conclusion Although filipin staining should be used to confirm the diagnosis, bone marrow sea-blue histiocytes often help to diagnosis of NP-C. The p.P1007A mutation seems to be correlated with the “variant” pattern in filipin staining. Miglustat treatment response seems to be correlated with the age at disease onset and disability scale score at diagnosis.

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Cinco cavalos adultos foram submetidos à coleta de medula óssea do esterno e de tecido adiposo da região glútea. As amostras foram processadas para obtenção da fração mononuclear da medula óssea e fração vascular estromal do tecido adiposo, o número de células obtidas e a viabilidade celular foram determinados. Em seguida, realizou-se o congelamento das amostras em solução contendo 20% de soro fetal bovino e 10% de dimetilsulfóxido. Depois de um mês, realizou-se o descongelamento das amostras e a viabilidade celular foi novamente mensurada. Os resultados revelaram que as técnicas utilizadas tanto para coleta de medula óssea quanto de tecido adiposo em equinos são simples, rápidas e seguras. As metodologias adotadas para o processamento das amostras foram eficientes, obtendo-se aproximadamente 95% de viabilidade celular. Após o descongelamento, a viabilidade média das amostras de células mononucleares da medula óssea foi de 86% e da fração vascular estromal do tecido adiposo de 64%. Frente à importância da terapia celular na clínica médica de equinos, concluiu-se que é necessária a realização de mais estudos, visando padronizar uma técnica de criopreservação que mantenha a integridade das células da fração mononuclear da medula óssea e da fração vascular estromal do tecido adiposo de equinos.

OBJETIVO: Comparar as células-tronco mesenquimais humanas obtidas de filtros de coleta reutilizáveis àquelas coletadas em filtros descartáveis e caracterizá-las utilizando os critérios da International Society for Cellular Therapy. MÉTODOS: Foram isoladas células-tronco mesenquimais humanas de kits de coleta de medula óssea reutilizáveis e descartáveis, pela lavagem dos filtros com meio de cultura. As células isoladas foram caracterizadas de acordo com os critérios estabelecidos pela International Society for Cellular Therapy, por meio das técnicas de citometria de fluxo, diferenciação in vitro e citoquímica. RESULTADOS: As amostras foram obtidas de filtro descartável (n=3) e reutilizável (n=3). Todas as amostras obtidas de filtros descartáveis produziram células-tronco mesenquimais, e todas as células-tronco mesenquimais humanas derivadas de medula óssea preencheram os critérios estabelecidos pela International Society for Cellular Therapy. CONCLUSÃO: Este estudo mostrou que as células-tronco mesenquimais também podem ser obtidas de kits de coleta reutilizáveis (que permanecem em uso em vários centros, no mundo inteiro), para serem empregadas em pesquisa como uma fonte alternativa e ética.

Foram induzidas lesões no tendão flexor digital superficial (TFDS) de ambos os membros anteriores de seis equinos, seguidas de implante autólogo de células da fração mononuclear de medula óssea em apenas um membro de cada animal. Os animais foram avaliados por parâmetros clínicos, ultrassonográficos, histopatológico e imunoistoquímico. Paralelamente, realizou-se o cultivo de novas amostras para a caracterização das células utilizando-se marcadores CD34 e CD45 por meio da citometria de fluxo, confirmando a presença de células mesenquimais na fração mononuclear. A caracterização das fibras colágenas tipo I e tipo III no tecido neoformado mostrou melhora na qualidade da cicatrização tendínea dos membros tratados. A terapia com implante autólogo das células da fração mononuclear melhorou a organização tecidual e a sua qualidade, apresentando maior expressão significativa para colágeno tipo I.

Chronic Myeloid Leukemia (CML) is a myeloproliferative disease characterized by the presence of the Philadelphia chromosome (translocation between chromosomes 9 and 22), resulting in the formation of the hybrid BCR-ABL protein. Currently, the treatment of CML patients is performed with imatinib mesylate (IM), which promotes the elimination of leukemic cells by inhibiting the kinase activity of BCR-ABL. This study evaluated the effectiveness of IM by monitoring 22 CML patients in a chronic phase treated at the CEPON/SC with IM for a minimum follow-up period of two years. Cytogenetic Response (CR) and bone marrow biopsies (BMB) were evaluated before and after IM treatment. BMB were evaluated by detection of reticulin degree and vascularization. The results were correlated to the CR. Mean time to achieve CR was 9 months and was attained by 77.27% of the patients. The results from the initial BMB analysis showed that 59.09% presented reticulin of between 2+ and 4+ whereas after treatment, only 27.17% presented this degree. With regard to vascularization of the initial sample, 90.91% were graded between II and IV, whereas after treatment, 40.91% had this degree. The results suggest a positive correlation of degree of reticulin and vascularization with CR.A Leucemia Mielóide Crônica (LMC) é uma doença mieloproliferativa caracterizada pela presença do cromossomo Filadélfia (translocação entre os cromossomos 9 e 22), que resulta na formação da proteína híbrida BCR-ABL. Atualmente o tratamento de pacientes com LMC é realizado com mesilato de imatinibe (MI), o qual promove a eliminação das células leucêmicas pela inibição da atividade quinase de BCR-ABL. O presente estudo avaliou a eficácia do MI por meio do acompanhamento de pacientes portadores de LMC em fase crônica, atendidos no CEPON/SC tratados com MI pelo tempo mínimo de dois anos. Foram avaliadas a Resposta Citogenética (RC) e as biópsias de medula óssea (BMO) antes e após o tratamento com MI. As BMO foram avaliadas quanto ao grau de reticulina e vascularização. Os resultados correlacionaram-se com a RC cujo tempo médio para obtenção da RC foi de 9 meses, sendo atingida por 77.27% dos pacientes. Na primeira BMO, 59.09% dos pacientes apresentaram grau de reticulina entre 2+ e 4+ e após o tratamento, apenas 27.17% apresentaram esta graduação. Quanto à vascularização da primeira amostra, 90.91% foram graduadas entre II e IV e após o tratamento, 40.91% apresentaram esta graduação. Os resultados sugerem uma correlação diretamente proporcional entre os graus de reticulina e vascularização com a RC.

OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi de avaliar o efeito de um centrifugado de medula óssea na cicatrização de lesão muscular em coelhos. MÉTODOS: Este estudo experimental envolveu a utilização de 15 coelhos machos, adultos, da raça Nova Zelândia Branco. Em cada animal, realizou-se uma lesão transversal na região média do músculo tibial anterior direito, onde se adicionou uma esponja de colágeno absorvível, embebida em um centrifugado de aspirado de medula óssea do osso ilíaco ipsilateral. O membro posterior esquerdo foi utilizado como controle, sendo submetido à mesma lesão; porém, neste caso, adicionando-se somente a esponja de colágeno absorvível. Após 30 dias, os animais foram sacrificados para o estudo da cicatrização muscular. As áreas de cicatrização muscular foram submetidas à análise histológica com histomorfometria, interessando-se a mensuração do número de células musculares em regeneração por micrômetro quadrado e a proporção de fibrose formada. RESULTADOS: O método de centrifugação utilizado neste estudo resultou em uma concentração média de células nucleadas maior que o número destas células nos aspirados originais, sem provocar destruição celular significativa. A adição do centrifugado de medula óssea não resultou em aumento significante do número de células musculares em regeneração em relação ao grupo controle. Também não houve diferença significante na proporção de fibrose formada em relação ao grupo controle. CONCLUSÃO: A administração de centrifugado de medula óssea utilizada neste estudo não favoreceu a cicatrização de lesão muscular em coelhos.OBJECTIVE: The objective of this study was to evaluate the effect of bone-marrow centrifugate on the healing of muscle injuries in rabbits. METHODS: This experimental study involved use of fifteen adult male New Zealand White rabbits. Each animal received a transverse lesion in the middle of the right tibialis anterior muscle, to which an absorbable collagen sponge, soaked in a centrifugate of bone marrow aspirate from the ipsilateral iliac bone, was added. The left hind limb was used as a control and underwent the same injury, but in this case only the absorbable collagen sponge. Thirty days later, the animals were sacrificed to study the muscle healing. These muscle areas were subjected to histological analysis with histomorphometry, with the aim of measuring the number of muscle cells per square micrometer undergoing regeneration and the proportion of resultant fibrosis. RESULTS: The centrifugation method used in this study resulted in an average concentration of nucleated cells greater than the number of these cells in original aspirates, without causing significant cell destruction. Addition of the bone marrow centrifugate did not result in any significant increase in the number of muscle cells undergoing regeneration, in relation to the control group. There was also no significant difference in the proportion of resultant fibrosis, compared with the control group. CONCLUSION: Administration of the bone marrow centrifugate used in this study did not favor healing of muscle injuries in rabbits.

O objetivo deste trabalho foi definir diretrizes para a indicação do transplante de células-tronco hematopoéticas (TCTH) no tratamento da leucemia mieloide aguda (LMA) no Brasil. O papel do TCTH no tratamento da LMA foi discutido pelosautores e apresentado para a Sociedade Brasileira de Transplante de Medula Óssea na reunião sobre Diretrizes Brasileiras para o TCTH, que o ratificou. Este consenso foi baseado na revisão da literatura internacional e na experiência brasileira em TCTH para o tratamento da LMA. O tratamento ideal para leucemia mieloide aguda em primeira remissão completa (1RC) ainda não está definido. Há consenso na indicação do TCTH alogênico, com condicionamento mieloablativo, para pacientes que apresentem alterações citogenéticas consideradas de alto risco. O TCTH alogênico não está indicado na 1RC para pacientes de baixo risco citogenético e, aparentemente, o TCTH alogênico, autólogo ou a quimioterapia de consolidação são equivalentes para os pacientes de risco intermediário.The objective of this work was to define guidelines for the indication of hematopoietic stem cells transplantation (HSCT) in the treatment of acute myeloid leukemia (AML) in Brazil. The role of HSCT in the treatment of AML was discussed by the authors and presented to the Brazilian Society of Bone Marrow Transplantation in a meeting to formulate and ratify the Brazilian Guidelines on HSCT. This consensus was based on a review of international publications and on the Brazilian experience in HSCT for the treatment of AML. The optimal treatment for AML in first complete remission (1CR) has not been defined yet. There is consensus on the indication of allogeneic HSCT with myeloablative conditioning for patients who present high risk cytogenetic changes. Allogeneic HSCT is not indicated for low cytogenetic risk 1RC patients and, apparently, allogeneic and autologous HSCT and consolidation chemotherapy are similar for intermediate risk patients.

A Sociedade Brasileira de Transplante de Medula (SBTMO) promoveu o I Encontro de Diretrizes do Transplante de Medula Óssea em 2009. Para revisão das indicações de transplante em Pediatria baseadas em evidências foi constituído grupo de trabalho com oncologistas e hematologistas com experiência em pediatria. Os artigos científicos foram cuidadosamente avaliados e, para cada doença, foram definidas as evidências para recomendação dos transplantes (de A a C) e a qualidade destas evidências (de 1 a 3). As recomendações incluem doenças hematológicas malignas e não malignas, tumores sólidos, imunodeficiências e doenças de depósito tratadas com transplantes de células-tronco hematopoéticas, quer autólogos, alogênicos de irmão HLA compatível ou não aparentados (doadores adultos ou sangue de cordão umbilical). Como não existem recomendações uniformemente aceitas em pediatria, não foram incluídas recomendações para transplantes de intensidade reduzida, com manipulação do enxerto e nem parcialmente compatíveis. É importante ressaltar que todas as indicações são baseadas no conhecimento atual e podem modificar-se com o tempo. Assim, esta revisão não deve ser utilizada para aplicação direta no cuidado do paciente sem levar em conta características da doença, do doador e fatores de risco do próprio paciente. Este trabalho não deve ainda ser utilizado como documento que limite o acesso do paciente ao transplante adequadamente indicado. Ressaltamos ainda, nesta revisão, diferenças entre transplantes em crianças e em adultos, com algumas recomendações específicas para os transplantes em pediatria.The Brazilian Bone Marrow Transplant Society (SBTMO) held its First Meeting on Bone Marrow Transplant Guidelines in 2009. A working group of hematologists and oncologists with experience in pediatrics was formed to review evidence-based indications for pediatric transplants. Scientific publications were carefully assessed and, for each disease, the evidence for recommendation (from A to C) and the quality of the evidence (from 1 to 3) were defined. The recommendations include malignant and non-malignant hematological diseases, solid tumors, immunodeficiency, and storage diseases treated with hematopoietic stem cell transplants: either autologous or allogeneic from matched sibling donors or unrelated donors (adults or umbilical cord blood). Guidelines for reduced-intensity transplants, manipulated grafts or partially compatible donors were not included as there are no uniformly accepted recommendations. All indications are based on the best current knowledge which may change over time. Thus, this review should not be directly applied to patient care without taking into account the disease, donor and patient characteristics. Additionally, this paper should not be used as a document to limit patient access to transplant if correctly indicated. In this review we also point out differences between transplantation in adults and children and make some specific recommendations for pediatric transplants.

Avaliaram-se o mielograma, o hemograma e a ocorrência de apoptose no sangue periférico e na medula óssea de cães com cinomose de ocorrência natural. Foram utilizados 15 cães distribuídos em dois grupos: (a) controle - seis animais clinicamente saudáveis com RT-PCR negativa para o vírus da cinomose canina (CC); (b) infectado - nove animais com manifestações clínicas de CC e RT-PCR positiva. Dos cães com CC, oito (88,9%) apresentaram anemia discreta a moderada (hematócrito: 30,6%), normocítica (VCM: 67,9fL) e normocrômica (CHCM: 34,1g/dL). Todos os animais apresentaram contagens médias normais de leucócitos totais (11600 células/µL) e neutrófilos segmentados (8802 células/µL). Linfopenia foi observada em cinco animais (55,6%) e desvio nuclear dos neutrófilos para a esquerda em oito (88,9%). As contagens médias de linfócitos e neutrófilos bastonetes foram, respectivamente, 1054 e 1508células/µL. No mielograma, todos os animais apresentaram celularidade e relação M:E dentro dos limites de referência. O hemograma e a medula óssea dos cães-controle não apresentaram alteração e não havia células em apoptose no esfregaço sanguíneo desses animais. Nos cães com CC, a média do índice apoptótico foi 0,73% no esfregaço sanguíneo e 1,87% na medula óssea. A apoptose, portanto, pode estar envolvida na patogênese das alterações hematológicas observadas na CC.The myelogram, the hemogram, and the occurrence of apoptosis in peripheral blood and bone marrow in dogs with canine distemper (CD) of natural occurrence were studied. Fifteen dogs were distributed into two groups: (a) control - six clinically healthy animals with RT-PCR negative for canine distemper virus (CDV); and (b) infected - nine animals showing clinical CD manifestations and RT-PCR positive. The majority of dogs with CD (88.9%) presented discrete to moderate (hematocrit: 30.6%), normocytic (MCH: 67.9fL) and normochromic (MCHC: 34.1g/dL) anemia. All animals showed total leukocytes counting (11,600 cells/µL) and segmented neutrophils (8,802 cells/µL) within the limits of reference. Lymphopenia and left shift neutrophils were observed in 55.6% and 88.9% of the dogs, respectively. Additionally, the average counts of lymphocytes and neutrophils were 1,054 and 1,508cells/µL, respectively. The myelogram of all animals presented cellularity and M:E relation within the limits of reference. Haemogram and bone marrow of the control dogs had no alteration. Moreover, no apoptotic cells were detected in the smear of the peripheral blood of control animals. On the other side, dogs with CD presented a higher apoptotic index (AI), both in the peripheral blood (AI: 0.73%) and in the bone marrow (AI: 1.87%). Therefore, apoptosis may contribute to hematological changes observed in CD.

PURPOSE: To assess the technique for the collection of rabbit bone marrow stem cells from different regions to be used as an experimental model in regenerative medicine. METHODS: Thirty rabbits were allocated into 2 groups: GROUP A, n=8, animals that underwent bone marrow blood (BMB) harvesting from the iliac crest; and GROUP B: including 22 rabbits that underwent BMB harvesting from the femur epiphysis. After harvesting, mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation (Ficoll - Histopaque). The number of mononuclear cells per ml was counted in a Neubauer chamber and cell viability was checked through Tripan Blue method. RESULTS: Harvesting from the iliac crest yielded an average of 1 ml of BMB and 3,6.10(6) cells/ml over 1 hour of surgery, whereas an average of 3ml of BMB and 11,79.10(6) cells./ml were obtained in 30 min from the femur epiphysis with a reduced animal death rate. CONCLUSION: The analysis for the obtention of a larger number of mononuclear cells/ml from rabbit bone marrow blood was more satisfactory in the femur epiphysis than in the iliac crest.OBJETIVO: Avaliar a técnica mais promissora para a coleta de células tronco adultas de medula óssea de coelhos para a utilização do mesmo como modelo experimental na medicina regenerativa. MÉTODOS: Foram utilizados 30 coelhos divididos em 2 grupos: GRUPO A, n=8, onde realizamos a coleta de sangue de medula óssea (MO) da crista ilíaca e grupo B, n=22, onde realizamos a coleta de sangue da medula óssea da epífise do fêmur. Após as coletas, realizamos a separação das células mononucleadas através do gradiente de densidade (Ficoll-Hystopaque). Através da câmara de Neubauer realizamos a contagem das células mononucleadas por ml. Testamos a viabilidade celular através do método Tripan Blue. RESULTADOS: Na coleta de sangue de MO na crista ilíaca obtivemos a média de 1 ml durante 1 hora de procedimento cirúrgico, obtendo a quantidade de 3,6 .10(6) células/ml, enquanto que a punção na epífise do fêmur obtivemos a média de 3 ml durante 30 minutos de procedimento cirúrgico obtendo a quantidade de 11,79.10(6) cél./ml diminuindo o óbito dos animais. CONCLUSÃO: A análise para a obtenção de maior número de células mononucleadas/ml de sangue de medula óssea de coelho foi mais satisfatória na região da epífise do fêmur em comparação com a crista ilíaca.

FUNDAMENTO: Diversos estudos foram publicados sobre a ação de células tronco da medula óssea no ventrículo esquerdo, ao atuarem no remodelamento pós-infarto agudo do miocárdio. Os resultados, no entanto, têm se mostrado controversos. OBJETIVO: Avaliar através do ecocardiograma a função sistólica de pacientes com infarto agudo do miocárdio após o Transplante Autólogo de Células Mononucleares da Medula Óssea (TACMMO) através de duas vias injeção: intracoronariana e intravenosa. MÉTODOS: Estudo aberto, prospectivo, randomizado. Foram incluídos pacientes admitidos por infarto agudo do miocárdio (IAM) com supradesnivelamento do segmento ST e submetidos à reperfusão mecânica ou química, dentro de 24 horas após o início dos sintomas, que apresentavam ao ecocardiograma redução da contratilidade segmentar e defeito fixo da perfusão relacionada à artéria culpada pelo IAM. A medula óssea autóloga foi aspirada da crista ilíaca posterior sob sedação e analgesia, nos pacientes randomizados para o grupo tratado. Após manipulação laboratorial, 100 milhões de células mononucleares foram injetadas por via intracoronariana ou intravenosa. Utilizamos o ecocardiograma (Vivid 7) para avaliar a função ventricular antes e após três e seis meses da infusão de células. RESULTADOS: Foram incluídos trinta pacientes, 14 no grupo arterial (GA), dez no grupo venoso (GV) e seis no grupo controle (GC). Não houve diferença estatística dos parâmetros ecocardiográficos estudados entre os grupos. CONCLUSÃO: O transplante autólogo de células mononucleares da medula óssea não demonstrou melhora dos parâmetros ecocardiográficos da função sistólica.FUNDAMENTO: Diversos estudios fueron publicados sobre la acción de células tronco de la médula ósea en el ventrículo izquierdo, al actuar en la remodelación postinfarto agudo del miocardio. Los resultados, sin embargo, tienen se mostrado controvertidos. OBJETIVO: Evaluar a través del ecocardiograma la función sistólica de pacientes con infarto agudo de miocardio tras el Transplante Autólogo de Células Mononucleares da Médula Ósea (TACMMO) a través de dos vías inyección: intracoronaria e intravenosa. MÉTODOS: Estudio abierto, prospectivo, randomizado. Se incluyeron a pacientes admitidos por infarto agudo de miocardio (IAM) con supradesnivelamiento del segmento ST y sometidos a la reperfusión mecánica o química, dentro de 24 horas tras el inicio de los síntomas, que presentaban al ecocardiograma una reducción de la contractilidad segmentar y defecto fijo de la perfusión relacionada a la arteria responsable del IAM. Se llevó a cabo la aspiración de la médula ósea antóloga de la cresta ilíaca posterior bajo sedación y analgesia, en los pacientes randomizados para el grupo tratado. Tras la manipulación laboratorial, se inyectaron 100 millones de células mononucleares por vía intracoronaria o intravenosa. Utilizamos el ecocardiograma (Vivid 7) para evaluar la función ventricular antes y tras tres y seis meses de la infusión de células. RESULTADOS: Se incluyeron a 30 pacientes, 14 en el grupo arterial (GA), 10 en el grupo venoso (GV) y 6 en el grupo control (GC). No hubo diferencia estadística de los parámetros ecocardiográficos estudiados entre los grupos. CONCLUSIÓN: El transplante antólogo de células mononucleares de la médula ósea no demostró mejora de los parámetros ecocardiográficos de la función sistólica.BACKGROUND: Several studies have been published on the effect of bone-marrow stem cells on the left ventricle when acting on post- acute myocardial infarction remodeling. However, the results have been controversial. OBJECTIVE: To carry out an echocardiographic analysis of the systolic function of patients with acute myocardial infarction after autologous mononuclear bone marrow cell transplantation (AMBMCT) as performed via the intracoronary and intravenous routes. METHODS: This is an open-label, prospective, randomized study. Inclusion criteria: patients admitted for ST-elevation acute myocardial infarction (MI) who had undergone mechanical or chemical reperfusion within 24 hours of the onset of symptoms and whose echocardiogram showed decreased segmental wall motion and fixed perfusion defect related to the culprit artery. Autologous bone marrow was aspirated from the posterior iliac crest under sedation and analgesia of the patients randomly assigned for the treatment group. After laboratory manipulation, intracoronary or intravenous injection of 100 x 106 mononuclear cells was performed. Echocardiography (Vivid 7) was used to assess ventricular function before and three and six months after cell infusion. RESULTS: A total of 30 patients were included, 14 in the arterial group (AG), 10 in the venous group (VG), and six in the control group (CG). No statistical difference was found between the groups for the echocardiographic parameters studied. CONCLUSION: Autologous mononuclear bone marrow cell transplantation did not improve the echocardiographic parameters of systolic function.

Atualmente, o incremento das pesquisas enfoca a medula óssea como fonte potencial para o tratamento de doenças, uma vez que seu uso como diagnóstico já é largamente empregado. Os objetivos deste artigo são revisar os melhores acessos à medula óssea e destacar a importância desse material como diagnóstico e tratamento de doenças. São abordadas particularidades sobre as técnicas de coleta e as complicações observadas pelos autores, a fim de facilitar os procedimentos, tornando-os mais seguros.Currently, the research focuses on bone marrow as a potential source for the treatment of diseases, since its use as a diagnosis is already largely employed. This paper aims to promote a practical review on the best access to the bone marrow and the importance of this material as diagnosis and treatment. Sampling techniques are observed and detailed by the authors, in order to facilitate the procedures and make them safer.

As doenças linfoproliferativas com diferenciação plasmocitária e pico monoclonal são causas de dificuldade diagnóstica no estudo de espécimes de medula óssea. Conhecer os aspectos clínicos, morfológicos, imunofenotípicos e citogenéticos é fundamental para o diagnóstico correto. Descrevemos os aspectos práticos mais relevantes para a interpretação de biópsias de medula óssea frente às situações mais frequentes.Some lymphoproliferative diseases with plasma cell differentiation and monoclonal gammopathy are challenging to diagnose when dealing with bone marrow biopsies. Knowledge of clinical, morphological, phenotypic and cytogenetic aspects is crucial to establish the correct diagnosis. We describe practical relevant aspects that help in the interpretation of bone marrow biopsies in these situations.