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O uso excessivo de fungicidas na agricultura tem sido bastante questionado pela sociedade em geral em função destes serem caros, de elevada persistência no solo e de elevado risco à saúde humana e ao meio ambiente. Nesse sentido medidas alternativas de controle tem sido buscadas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a eficiência de diferentes extratos de sementes de pimentas do gênero Capsicum sobre o crescimento micelial de Rhizoctonia solani e Sclerotium rolfsii. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado com 25 tratamentos, tendo dois controles (água e fungicida) e quatro repetições para os testes in vitro e seis para in vivo. Os dados foram submetidos à análise de Scott Knott a 5% de probabilidade. Os testes in vitro evidenciaram que todos os extratos se mostraram eficientes na inibição dos patógenos, destacando-se os extratos de Capsicum annuum, os quais obtiveram resultados significativamente superiores ao controle com o fungicida. Nos ensaios em diluição seriada, observou-se que na concentração de até 1x105 os extratos foram capazes de inibir o patógeno S. rolfsii. No ensaio in vivo em folhas destacadas, 13 extratos apresentaram eficiência no controle da mela, sendo que os extratos obtidos a partir de Capsicum baccatum e Capsicum frutescens apresentaram efeitos de controle semelhantes ao fungicida.

A produção de feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris) é limitada, dentre outros fatores, pela ocorrência de doenças, destacando-se a mela do feijoeiro e o mofo cinzento, causados pelos fungos Rhizoctonia solani e Sclerotium rolfsii, respectivamente. Extratos vegetais com potencial fungicida se destacam como um método alternativo no controle de fitopatógenos. O objetivo deste trabalho foi avaliar extratos de espécies do gênero Piper no crescimento micelial dos fungos R. solani e S. rolfsii. Foram preparados extratos aquosos e alcoólicos nas proporções de 1:10, 1:100, 1:1000 e 1:10000mg/mL, obtidos a partir de materiais secos e frescos de folhas, talos e inflorescências de P. carniconnectivum, P. hispidum, P. nigrum, P. permucronatum, P. tuberculatum e P. umbellatum, cultivadas em casa de vegetação e campo, totalizando cento e um tratamentos. A atividade antifúngica foi avaliada pelo método de difusão em poços, utilizando meio BDA. Alíquotas de 10µL dos extratos avaliados foram depositadas em cada poço, e um disco de micélio de 0,5cm de diâmetro do patógeno desafiante adicionado no centro da placa. Os halos de inibição formados foram medidos a cada 24h, no sentido longitudinal e transversal. Testes in vivo foram conduzidos em folhas destacadas e em plântulas de feijoeiro. Folhas destacadas de feijoeiro foram acondicionadas em caixas tipo Gerbox, e mudas de feijoeiro mantidas em câmara úmida. Sobre as folhas foram pulverizados os extratos avaliados, e após 24h, uma suspensão de micélio do patógeno R. solani, na concentração de 1x106 fragmentos de micélio.mL-1 também foi pulverizada, avaliando-se a cada 24h a severidade da doença. O delineamento experimental dos testes in vitro e in vivo foi o inteiramente casualizado, com três testemunhas. Dentre os extratos testados in vitro, vinte e seis demonstraram potencial inibitório no controle de R. solani na maior concentração, e doze mantiveram-se eficientes até a concentração 1:100, destacando-se os extratos obtidos das espécies P. permucronatum e P. carniconnectivum. Nos ensaios com o fungo S. rolfsii, dez extratos mostraram eficiência na inibição do patógeno, destacando-se o extrato aquoso de P. tuberculatum na maior concentração. No ensaio in vivo com folhas destacadas dez extratos apresentaram eficiência no controle da mela do feijoeiro, sendo que os extratos obtidos a partir de P. permucronatum, P. carniconnectivum e P. nigrum apresentaram efeitos de controle semelhantes ao controle fungicida, permanecendo extratos de P. permucronatum eficientes em testes in vivo com mudas de feijão em câmara úmida. Os resultados obtidos sugerem que os extratos de espécies do gênero Piper podem vir a ser utilizados futuramente como fonte de novas moléculas bioativas, visando o controle destes patógenos.

Os nematoides-das-galhas são mundialmente conhecidos por causar elevados prejuízos à agricultura. No Brasil, as espécies do gênero Meloidogyne são responsáveis por perdas na produção de diversas culturas distribuídas por todo o país. Diante da dificuldade encontrada no controle desses nematoides, várias estratégias vêm sendo estudadas, e dentre elas, o uso de extratos vegetais representa uma alternativa de baixo custo e menos agressivo ao meio ambiente. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de extratos aquosos de diferentes espécies do gênero Piper no controle de M. incognita em ensaios in vitro e in vivo em mudas de Coffea canephora. Os estudos foram conduzidos no laboratório de fitopatologia e em casa de vegetação da Embrapa Rondônia, em Porto Velho. Para as avaliações foram utilizadas seis espécies do gênero Piper, obtendo-se os extratos aquosos de folhas, talos e inflorescências, usados frescos e secos, na concentração 0,1µg/mL. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado, com 58 tratamentos e seis repetições, além dos controles com água mineral estéril e nematicida (Carbofuran, 20mL.L-1).Para os testes in vitro utilizaram-se placas acrílicas do tipo Elisa como suporte para os microtubos, onde foram colocados separadamente em cada cavidade dos Eppendorfs 100(µL) de extratos e 100(µL) da suspensão contendo 50 ovos do respectivo nematoide. Os ovos foram extraídos utilizando a metodologia descrita por Hussey et al. (1973), modificado por Boneti e Ferraz (1981). As placas foram levadas a incubadoras B.O.D a 25 °C, por 15 dias, no escuro. No décimo sexto dia avaliou-se o número de ovos, juvenis (J2) eclodidos, imóveis e móveis. De todos os extratos de Piper testados, dezessete foram capazes de inibir significativamente a eclosão do fitonematoide. Destes, destacam-se P. hispidum e P. tuberculatum, que apresentaram os melhores efeitos inibitórios (ação ovicida + larvicida). A partir daí, escolhendo-se os extratos que apresentaram efeito nos ensaios in vitro, conduziu-se o experimento in vivo em casa de vegetação. Mudas de C. canephora (Clone CPAF-RO C750, susceptível) com seis meses de idade, mantidas em vasos de 8L, foram inoculadas com 5000 ovos de M. incognita. Após 24 horas aplicaram-se 720mL dos extratos por vaso. A aplicação dos extratos foi repetida aos 30, 60 e 90 dias após a inoculação, avaliando-se as mesmas após 150 dias quanto a ao fator de reprodução (FR), ao número de galhas por grama de raízes (NGGR) e ao número de ovos por grama de raízes (NOGR). O delineamento experimental tanto in vitro quanto in vivo foi do tipo inteiramente casualizado, com seis repetições. Os dados foram submetidos à Anova e as médias comparadas em teste de Scott-Knott a 1% e 5% respectivamente. Dentre os extratos testados in vivo, dezesseis apresentaram redução significativa em relação à FR, NGGR e NOGR, quando comparados ao controle, destacando-se as espécies P. carniconnectivum, P. permucronatum, P. tuberculatum e P. umbellatum, por demonstrarem eficiência no controle populacional do nematoide-das-galhas, pela redução de FR quando comparados ao controle com nematicida comercial. Conclui-se que os extratos aquosos de Piperáceas, apresentam atividade nematicida e podem se usados no desenvolvimento de futuros métodos de controle químico e cultural, em substituição parcial ou total aos nematicidas convencionais.

Em situações de estresse abiótico ou biótico as plantas tendem a ativar respostas de defesa, sejam estruturais ou bioquímicas. Objetivou-se neste trabalho estudar a interação de clones de Coffea canephora x Hemileia vastatrix, identificar as respostas do hospedeiro na interação de incompatibilidade e de compatibilidade com o patógeno. Para tanto, mudas com 120 dias de idade dos clones da variedade BRS ‘Ouro Preto’ C199, C160 e C125, foram inoculadas com o patógeno (1,5 x 104 uredósporos/mL) e as plantas foram levadas à câmara de inoculação à 25 °C e umidade relativa de 90% por até 168 horas. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas por teste de Tukey a 1% de significância. Após a quantificação das proteínas totais, é possível observar que nos Clones C199 e C160 a primeira resposta de aumento de teor de proteínas ocorreu após seis horas, sendo o pico máximo de produção ocorrido após 72 horas. E este dispersando-se levemente somente após 120 horas. No clone susceptível, a resposta só ocorreu após 48 horas, sendo este 20% inferior à variedade resistente e não houve um segundo pico de resposta, de produção. Para as atividades de peroxidase e fenilalanina-amônia-liase, o padrão de resposta semelhante foi observado para os clones em estudo, onde uma indução da atividade e a intensidade desta foram maiores nestes clones resistentes. Este resultado sugere que há resposta bioquímica envolvida na resistência à ferrugem e esta deve ser especialmente investigada às 72 horas após a inoculação.

The objective of this work was to evaluate the in vitro antibacterial activity of snake venoms and purified toxins on the phytopathogenic bacterium Ralstonia solanacearum. The evaluations were performed with 17 crude venoms (13 from Bothrops, 3 from Crotalus, and 1 from Lachesis) and seven toxins (1 from Bothrops and 6 from Crotalus). Antibacterial activity was assessed in MB1 medium containing solubilized treatments (1 μL mL-1). A total of 100 μL bacterial suspension (8.4 x 109 CFU mL-1) was used. After incubation at 28°C, the number of bacterial colonies at 24, 48, and 72 hours after inoculation was evaluated. SDS-PAGE gel at 15% was used to analyze the protein patterns of the samples, using 5 μg protein of each sample in the assay. Furthermore, the minimum inhibitory concentration (MIC) and lethal concentration (LC50) values were determined by the Probit method. Venoms and toxins were able to reduce more than 90% of R. solanacearum growth. These results were either equivalent to those of the positive control chloramphenicol or even better. While MIC values ranged from 4.0 to 271.5 μg mL-1, LC50 ranged from 28.5 μg mL-1 to 4.38 mg mL-1. Ten crude venoms (7 from Bothrops and 3 from Crotalus) and two purified toxins (gyroxin and crotamine) are promising approaches to control the phytopathogenic bacterium R. solanacearum. Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antibacteriana in vitro de venenos e toxinas purificadas de serpentes sobre a bactéria fitopatogênica Ralstonia solanacearum. As avaliações foram realizadas em 17 venenos brutos (13 de Bothrops, 3 de Crotalus e 1 de Lachesis) e sete toxinas (1 de Bothrops e 6 de Crotalus). A atividade antibacteriana foi avaliada em meio MB1 que continha os tratamentos solubilizados (1 μL mL-1). Utilizou-se o total de 100 μL de suspensão bacteriana (8,4 x 109 UFC mL-1). Após incubação a 28°C, avaliou-se o número de colônias bacterianas às 24, 48 e 72 horas após a inoculação. O gel SDS-PAGE a 15% foi usado para analisar o perfil proteico das amostras, tendo-se utilizado 5 μg de proteína no ensaio. Além disso, os valores de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração letal (CL50) foram determinados pelo método Probit. Os venenos e as toxinas foram capazes de reduzir mais de 90% do crescimento de R. solanacearum. Esses resultados foram ou equivalentes aos do controle positivo cloranfenicol ou até melhores. Enquanto os valores de CIM variaram de 4,0 a 271,5 μg mL-1, a CL50 variou de 28,5 μg mL-1 a 4,38 mg mL-1. Dez venenos brutos (7 de Bothrops e 3 de Crotalus) e duas toxinas (giroxina e crotamina) são abordagens promissoras para o controle da bactéria fitopatogênica R. solanacearum.

O gênero Piper é amplamente utilizado para as mais diferentes finalidades, logo, o aprofundamento fitoquímico se faz necessário. Este trabalho teve o objetivo de identificar os metabólitos de folhas, talos e inflorescência de Piper tuberculatum e Piper hispidum. O material vegetal foi obtido no campo experimental e avaliado no laboratório de fitopatologia da Embrapa Rondônia. A presença de alcaloides foi confirmada em todas as amostras quando utilizado o reagente de Dragendorff, presença de saponinas em folhas e talos de P. tuberculatum e talos de P. hispidum, flavonoides em todas as partes de P. tuberculatum e talos e inflorescência de P. hispidum, taninos, cumarinas foi encontrada em todas as amostras, compostos fenólicos foram observados em folhas de P. tuberculatum e folhas e inflorescência de P. hispidum, os triterpenos foram encontrados em talos e inflorescência de P. tuberculatum e P. hispidum. Tanto P. tuberculatum quanto P. hispidum mostraram grade variedades de compostos.

Nos ultimos 30 anos tem-se observado, por parte da sociedade, uma maior preocupacao com o uso de agrotoxicos na agricultura. Nesse sentido, a pesquisa tem buscado incansavelmente produtos alternativos, que sejam mais eficientes, baratos e ambientalmente seguros. Dentre as alternativas buscadas, o uso de extratos de plantas tem se mostrado promissor. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivo testar 48 extratos aquosos e alcoolicos de 18 variedades de pimentas do genero Capsicum obtidos a partir de sementes, folhas e frutos pelo metodo de maceracao para o controle na inibicao de germinacao de Hemileia vastatrix e crescimento micelial dos fungos Colletotrichum lindemuthianum, Alternaria sp., Fusarium sp. Colletotrichum gloeosporioides e Phomopsis. Destes, o extrato aquoso, obtido de sementes de Capsicum chinense foi o mais eficiente, controlando todos os fitopatogenos desafiantes, mostrando que esses extratos possuem compostos bioativos possiveis de controlar fungos fitopatogenicos. PALAVRAS-CHAVE: Doencas fungicas, Inibicao, Metodo alternativo.

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Nos últimos 30 anos tem-se observado, por parte da sociedade, uma maior preocupação com o uso de agrotóxicos na agricultura. Nesse sentido, a pesquisa tem buscado incansavelmente produtos alternativos, que sejam mais eficientes, baratos e ambientalmente seguros. Dentre as alternativas buscadas, o uso de extratos de plantas tem se mostrado promissor. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivo testar 48 extratos aquosos e alcoólicos de 18 variedades de pimentas do gênero Capsicum obtidos a partir de sementes, folhas e frutos pelo método de maceração para o controle na inibição de germinação de Hemileia vastatrix e crescimento micelial dos fungos Colletotrichum lindemuthianum, Alternaria sp., Fusarium sp. Colletotrichum gloeosporioides e Phomopsis. Destes, o extrato aquoso, obtido de sementes de Capsicum chinense foi o mais eficiente, controlando todos os fitopatógenos desafiantes, mostrando que esses extratos possuem compostos bioativos possíveis de controlar fungos fitopatogênicos. PALAVRAS-CHAVE: Doenças fúngicas, Inibição, Método alternativo. Made available in DSpace on 2018-03-06T00:34:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ExtratoVieiraJUNIOR.pdf: 664958 bytes, checksum: 2688ab0fe9e0c9cac5553c2babe319f7 (MD5) Previous issue date: 2018-03-05