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Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais Nocomial bloodstream infections (BSI) are most frequent infection in neonatal intensive care units (NICU), increasing considerably the length of stay in the unit and hospital costs besides contributing to poor prognosis, manly in hospitals developing countries settings. The aims of the study were to assess the impact of a care bundle for managment of Central Venous Catheter (CVC) to reduce nosocomial bloodstream infection, and to describe the pathogenesis and molecular epidemiology of infections due to S. epidermidis in a NICU of a Brazilian university hospital. The study included newborns admitted to the unit of Clinical Hospital of Federal University of Uberlândia from October / 2010 to August / 2012. Epidemiological surveillance used to follow BSI was the \"National Healthcare Safety Network\" (NHSN), and an insertion protocol for insetion and maintenance of central venous catheter based on Center for Disease Control (CDC) guidelines was adopted in unit. For the study of the pathogenesis of these infections due to S. epidermidis, cultures of the skin in the insertion site and CVC hub, as well as the nasal and intestinal mucosa of neonates were performed from 48 hrs to 14 days using the invasive procedure, or positive hemoculture, and the tip of the CVC after its withdrawal. The study was approved by the ethics committee in research of the UFU (protocol 464/10). A total of 112 infants developed BSI (20.3%) totaling 178 episodes (32.3%), 139 (25.2%) defined as hospital acquired. Incidence rates of BSI during the sudy research were 16.1 /1000 patient-days and 23.0/1000 CVC-days, but with significant variations during the investigation period, with increasing rates (59.6 / 1000 patient-days) in January 2011 and 2012 when compared with the rates of other months (16.6/1000 patient-days; IRR 3.59; P

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Introdução- As infecções do trato urinário (ITU) são frequentes em pacientes críticos, geralmente associadas ao uso de cateter urinários de demora (CVD) levando a uma morbidade significativa. Objetivo- Avaliar a epidemiologia, etiologia, fatores de risco e evolução de infecções do trato urinário em pacientes adultos críticos. Material e métodos- O estudo incluiu vigilância retrospectiva (2012-2018) da incidência do primeiro episódio de ITU em pacientes internados na Unidade de Terapia Intensiva (UTI) de Adultos de um hospital terciário de referência no Brasil. Por meio de triagem sistemática dos prontuários dos pacientes, uma ficha individual, com dados epidemiológicos, demográficos, clínicos e microbiológicos foi preenchida. Foram avaliados fatores de risco intrínsecos e extrínsecos, utilizando-se análises estatísticas univariada e multivariada. Adicionalmente, foi calculado a densidade de uso dos seguintes antimicrobianos: cefepime, ceftriaxona, imipenem, meropenem, polimixina B e tigeciclina. O espectro de resistência in vitro foi determinado pelo Laboratório de Microbiologia do Hospital. Resultados- Nos 7 anos de investigação foram identificados 363 pacientes (252 com bacteriúria, 109 com candidúria e 2 episódios por Trichosporon spp.) com primeiro episódio de ITU adquirida na Unidade, com base em critérios microbiológicos. A incidência dessas infecções foi de 7,2/1000 pacientes-dia (3.5/1000 pacientes-dia para bacteriúrias e 2,1/1000 pacientes-dia para candidúrias). De modo geral, a maioria dos pacientes foram do sexo feminino (58,6%), com média de idade relativamente baixa de 55,9 anos. Apresentaram escores de doença aguda (ASIS ≥4) e de comorbidades (CHARLSON ≥3) elevados, com 74,6% e 54,5%, respectivamente. O tempo médio de internação total e após o diagnóstico foram prolongados, correspondendo respectivamente a 15 dias (DP±13,29) e 11 dias (DP±12,52). As infecções foram na maioria monocrobianas (97,2%), com apenas 2,7% de etiologia polimicrobianas. No total, dos 373 microrganismos houve predominância para os bacilos Gram-negativos (50,9%) identificados nas seguintes espécies pela ordem: Escherichia coli (36,0%), Klebsiella pneumoniae (23,6%) e Acinetobacter baumannii (10,0%). As leveduras foram responsáveis por 30,7% das amostras isoladas, com destaque para Candida albicans (57,0%). A maioria das amostras foram caracterizadas como multirresistentes (62,4%). Observou-se correlação positiva entre o uso de polimixina B (P=

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior β-galactosidase has presented increased use in the dairy industry, since it can be used to produce a isomolecular mixture of glucose and galactose and also has wide application in biotechnological production of milk with a low-lactose content, in production of galacto-oligosaccharides from whey lactose and as a preliminary step to d-tagatose synthesis. Exist still a great interest in the optimization of fermentation conditions and of medium composition to increase the production of β-galactosidase in order to achieve a high yield of low cost production. The yeast Kluyveromyces marxianus is an important industrial yeast for fermentation of lactose, having classic applications in the production of biomass, ethanol and enzymes. In this work the production and characterization of β-galactosidase from K. marxianus ATCC 46537 produced by fermentation of whey permeate were studied. The fermentation medium used was based in permeate whey and analysis of sugars and ethanol were made by liquid chromatography. Enzymatic activity was determined by the initial rates and glucose formed was measured by glucose oxidase. The enzyme activity unit (U mL-1) was defined as μmol of glucose produced per minute per mL enzyme suspension at a temperature of 30 °C, pH 6.5, with an initial lactose concentration of 50 g L-1. The medium to obtain inoculum was the medium composed of yeast extract (6.0 g L-1), (NH4)2SO4 (6.0 g L-1), KH2PO4 (5,0 g L-1), MgSO4.7H2O (0.6 g L-1) permeate whey (lactose concentration of 50 g L-1) prepared in phosphate buffer 10-1 M pH 5.5. Was studied the growth kinetic of the yeast and was obtained the μmax of 0, 288 h-1 and generation time of 2.41 hours in this stage. Different methods of β-galactosidase extraction were evaluated and the extraction by vortex agitator and ultrasonic processor were who showed the best results. A Fractional Factorial Design was performed to study the influence of pH and medium composition on the production of β-galactosidase for which it was obtained that the maximum production of β-galactosidase was affected more significantly by lactose, followed by (NH4)2SO4, yeast extract and pH. The fermentative medium composition was evaluated using a Central Composite Design, the best results were obtained for lactose concentrations ranging from 100 to 150 g L-1, yeast extract lower than 6 g L-1 and (NH4)2SO4 between 2 and 8 g L-1. The simultaneous influence of agitation speed and aeration rate was evaluated by performing a Central Composite Design that resulted in enzymatic activity of 139.58 U mLfermented broth-1 at the central point (250 rpm and 0.75 vvm). Was evaluated the co-production of bioethanol by fermentation of whey permeate by using K. marxianus. The highest value observed for bioethanol concentration (36.94 g L-1) was obtained in the fermentation in which was used agitation speed of 427 rpm and aeration rate of 0.24 vvm, which implies a yield of 72.3 %. Was verified, by simultaneous analysis of the optimum regions for the answers of enzyme activity and bioethanol co-production, regions that imply high values for enzymatic activity and bioethanol, simultaneously, as follows: agitation speed 200-400 rpm with rate aeration of 0.4 to 1.2 vvm. These results indicate a promising alternative for the valorization of whey permeate in the simultaneous production of β-galactosidase and bioethanol. The enzyme extract produced were characterized and the kinetic constants obtained for Vmax and Km were respectively 11.01 U mL-1 and 3.62 g L-1. The produced enzyme was most active at a temperature of 45 °C and obtained high values of relative activity in lactic acid buffer at pH 5.5 to 7.3. The polyacrylamide gel electrophoresis the enzyme extract showed a subunit molecular mass of 52.3 kDa coincident with the reference sample (Lactozyme® 2600) indicating the presence of β-galactosidase subunits produced in the extract. A enzima β-galactosidase tem apresentado uso crescente na indústria de laticínios, visto que a mesma pode ser empregada na prodrução de uma mistura isomolecular de glicose e galactose, além de possuir uma grande aplicação biotecnológica na produção de leite com baixo teor de lactose, na produção de galacto-oligossacarídeos a partir da lactose do soro e como etapa preliminar para síntese de d-tagatose. Têm-se ainda um grande interesse na otimização das condições de fermentação e composição do meio para aumentar a produção de β-galactosidase, a fim de alcançar um elevado rendimento de produção de baixo custo. A levedura Kluyveromyces marxianus é uma importante levedura industrial para fermentação de lactose, tendo aplicações clássicas na produção de biomassa, etanol e enzimas. Neste trabalho foi estudada a produção e caracterização da enzima β-galactosidase de K. marxianus ATCC 46537 produzida por fermentação de permeado de soro de leite. As fermentações utilizaram meio à base de permeado de soro de leite e as análises de etanol e açúcares foram feitas por cromatografia líquida. A atividade enzimática foi determinada pelo método das taxas iniciais e a glicose formada era dosada por glicose-oxidase. A unidade de atividade enzimática U mL-1 foi definida como μmol de glicose produzida por minuto, por mL de suspensão enzimática, à temperatura de 30 °C, pH 6,5, com uma concentração inicial de lactose de 50 g L-1. O meio para obtenção do inóculo foi o meio composto por extrato de levedura (6,0 g L-1), (NH4)2SO4 (6,0 g L-1), KH2PO4 (5,0 g L-1), MgSO4.7H2O (0,6 g L-1) e permeado de soro de leite em pó (concentração de lactose 50 g L-1), preparado em tampão fosfato 10-1 M pH 5,5. Foi estudada a cinética de crescimento da levedura e obteve-se o valor da μmax de 0, 288 h-1 e tempo de geração nesta fase de 2,41 horas. Diferentes métodos de extração de β-galactosidase foram avaliados, sendo a extração em agitador tipo vórtex e em processador ultrassônico os que apresentaram os melhores resultados. Foi realizado um Planejamento Fatorial Fracionário para estudar a influência do pH e composição do meio na produção de β-galactosidase e obteve-se que, a produção de β-galactosidase foi afetada de modo mais significativo por lactose, seguido de (NH4)2SO4, extrato de levedura e pH. A composição do meio fermentativo foi avaliada por um Delineamento Composto Central para a síntese de β-galactosidase e os melhores resultados foram alcançados para as concentrações de lactose variando de 100 a 150 g L-1, extrato de levedura inferior a 6 g L-1 e (NH4)2SO4 entre 2 e 8 g L-1. A influência conjunta da velocidade de agitação e taxa de aeração foi avaliada pela realização de Delineamento Composto Central que obteve atividade enzimática de 139,58 U mLcaldo-1 no ponto central (250 rpm e 0,75 vvm). Avaliou-se a co-produção de bioetanol por fermentação do permeado de soro de leite usando K. marxianus. O maior valor observado para concentração de bioetanol (36,94 g L-1) foi obtido na fermentação em que utilizou-se da velocidade de agitação de 427 rpm e taxa de aeração de 0,24 vvm, o que implica em um rendimento de 72,3%. Verifica-se, pela análise conjunta das regiões ótimas para as respostas atividade enzimática e co-produção de bioetanol, que há faixas das regiões que implicam em altos valores de atividade enzimática e bioetanol simultaneamente, sendo elas: agitação de 200 a 400 rpm com aeração entre 0,4 a 1,2 vvm. Estes resultados indicam uma alternativa promissora para a valorização do permeado de soro de leite na produção conjunta de β-galactosidase e bioetanol. O extrato enzimático produzido foi caracterizado e as constantes cinéticas obtidas para Vmáx e Km foram, respectivamente, 11,01 U mL-1 e 3,62 g L-1. A enzima produzida apresentou maior atividade a uma temperatura de 45 °C e obteve-se altos valores de atividade relativa em tampão lático na faixa de pH de 5,5 a 7,3. A eletroforese em gel de poliacrilamida do extrato enzimático apresentou uma subunidade de massa molecular 52,3 kDa coincidente com a amostra de referência (Lactozyme® 2600) indicando a presença de subunidades de β-galactosidase no extrato produzido. Doutor em Engenharia Química