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The molecular mechanisms that trigger myometrial contractions in pregnant mammal females are not well understood; this is due to lack of information on the processes involved at the membrane interface and along the intracellular and intercellular signaling. The role of the dihydropyridine-sensitive calcium channels appears to be central; however, the functional implication of the alternative Ca2+ conductance supported by TRPV channels remain to be ascertain, since it has not been thoroughly addressed. My hypothesis stems from this lack of information concerning the functional involvement of the alternative Ca2+ conductance under various experimental conditions. Such cationic conductance may modulate the physiological and pharmacological excitability of the quiescent or laboring myometrium. The aim of this work was to study the role of alternative calcium conductance on the human myometrium in order to apply this knowledge to pathophysiological conditions as preterm birth. The biopsies were obtained from patients undergoing elective caesarean, who gave their written consent and met the inclusion criteria. Isometric tension measurements were performed using the isolated organ bath system (Radnoti). Subcellular fractions were prepared from the biopsies and were later analyzed by western blot. The Western blot technique was performed in order to analyze the presence of the different TRPV channels in the human myometrium. Lastly, from the same biopsy, uterine cells were isolated and cultured to later measure their intracellular Ca2+ signalling using confocal spectrofluorometry in the absence and presence of oxytocin, combined to alternative cationic conductance modulators, or TRPV agonists. The contractile activity of the uterine strips that were measured by the isolated organ bath system was modulated by TRPV channel agonists and blockers. Immunoblotting and immunohistochemistry techniques demonstrated that the TRPV3 and TRPV4 are expressed at the tissue and, Les mécanismes moléculaires qui déclenchent les contractions du myomètre chez les femelles mammifères gravides ne sont pas bien compris; ceci est dû au manque d’information sur les processus impliqués à la membrane de surface et lors de la signalisation intra- et intercellulaire. Le rôle des canaux calciques sensibles aux dihydropyridines est central; cependant, l’implication fonctionnelle des autres conductances Ca2+ dont celles supportées par les canaux activés par des molécules de la famille des vanilloïdes aussi nommés TRPV, reste à déterminer, car elles n’ont pas été étudiées de façon systématique dans le myomètre. Mon hypothèse découle de ce manque d’information concernant l’implication fonctionnelle des conductances Ca2+ alternatives dans différentes conditions expérimentales. Ces conductances cationiques pourraient moduler l’excitabilité pharmacologique et le déclenchement des contractions du myomètre à terme. L’objectif de cette étude était d’étudier le rôle des TRPV dans le myomètre humain afin d'appliquer ces connaissances à des conditions physiopathologiques comme le travail prématuré. Les biopsies ont été obtenues de patientes bénéficiant d’une césarienne élective qui répondaient aux critères d'inclusion et qui ont donné leur consentement par éclairé. Des mesures de tension isométrique ont été effectuées en utilisant le système de bain d'organe isolé (Radnoti). Des fractions subcellulaires ont également été préparés à partir des biopsies et ont ensuite été analysées par Western blot. La technique du Western blot a été réalisée afin d'analyser la présence des différents canaux TRPV dans le myomètre humain. Des techniques des immunohistochimie ont été réalisés afin de déterminer l’expression des TRPV dans le tissu myométrial. Des cellules utérines ont été isolées et cultivées pour mesurer la signalisation calcique intracellulaire en utilisant la spectrofluorométrie confocale en absence et en présence d'ocytocine, et des agonistes des TRPV. L’activité cont

Les naissances prématurées représentent un enjeu important dans notre société. L’inflammation utérine est la première cause de travail préterme (TP) menant à celles-ci. Peu d’options thérapeutiques sont efficaces dans la prise en charge du TP. En conséquence, de nouvelles molécules ont été investiguées pour moduler la contractilité utérine en grossesse. Des dérivés des acides gras polyinsaturés de type oméga-3, nommés specialized proresolving mediators (SPM), sont des molécules endogènes possèdant des caractéristiques uniques permettant une résolution active de l’inflammation; ce qui en fait de bons candidats dans le cadre de la problématique de ce projet de recherche. Le but de l’étude était d’évaluer l’efficacité de ses lipides à diminuer l’inflammation et à moduler l’activité utérine associée au TP dans un modèle ex vivo de myomètre humain à terme. Les objectifs spécifiques du projet était tout d’abord d’induire un statut inflammatoire et une réactivité utérine sur des explants de tissu utérin humain et de quantifier les changements de contractilité du myomètre dans les conditions contrôles, inflammatoires et en absence ou présence des médiateurs lipidiques. Finalement, l’expression de marqueurs inflammatoires dans les différentes conditions expérimentales a été quantifiée. La réactivité contractile des bandelettes utérines incubées en conditions pro-inflammatoires n’était pas modifiée par rapport aux contrôles. Lorsque incubées en présence de SPM (LXA4 et RvD2), l’activité utérine des bandelettes en réponse à l’ocytocine était diminuée dans l’ensemble des conditions testées, mais de manière non significative. Un marqueur inflammatoire, le facteur de transcription NFB p65 phosphorylé, n’était pas altéré de manière significative par les différentes conditions pro-inflammatoires ni en présence de SPM dans le myomètre humain. Toutefois, la transclocation nucléaire de NFB p65 phosphor, Preterm birth represents an important stake today. Uterine inflammation is the leading cause of preterm labor (PTL) resulting in preterm births. Few therapeutic options are efficient in the treatment of PTL. New drugs have been investigated in the modulation of uterine contractility during pregnancy. Derivatives of omega-3 polyunsaturated fatty acids named specialized proresolving mediators (SPM) are endogenous molecules with the unique characteristic of having an active role in the resolution of inflammation which makes them good candidates in this research project. The main goal of this study is to evaluate the efficacy of these lipids to reduce inflammation and decrease uterine activity in an ex vivo model human myometrium at term. The specific objectives of the project were to induce an inflammatory status and a uterine reactivity of the human uterine explants to quantify changes in myometrial contractility under different conditions: control, inflammatory in presence or not of SPM. Finally, the expression of inflammatory markers in the different experimental conditions was quantified. The uterine contractile reactivity of the strips incubated in pro-inflammatory conditions was not modified compared to the control conditions. When incubated with SPM (LXA4 and RvD2), the strips uterine activity in response to oxytocin were reduced in all tested experimental conditions regardless of the incubation time and concentrations used when compared to the controls, however values were not statistically significant. An inflammatory marker, the transcription factor NFkB p65 expression was not significantly changed in the different inflammatory conditions and in the presence of SPM in the human myometrium. Although, nuclear translocation was reduced significantly following a 24 h incubation in the presence of RvD2 compared to controls in the myometrium and fetal membranes. The ex vivo culture of uterine tissues for 6 and 24 hours induced important modulations in th

The Quebec Respiratory Health Network (RHN) Biobank is a multi-site infrastructure located in the province of Quebec (Canada) to collect, store, and supply high-quality human biological specimens for research on respiratory diseases. The sample types are diverse (plasma, serum, buffy coat, primary lung cells, lung parenchyma, bronchial biopsies, polyps, others), disease-oriented, and mirror research activities conducted at each site. The biobank currently manages approximately 57,000 specimens from 8,000 research participants or patients treated by standard of care. Specimens’ inventory and corresponding clinical data from all sites are denominalized and linked to a centralized database with retrieval and querying capabilities. Archival samples from recent to nearly 20-year collections are available to academic and industry researchers studying respiratory diseases.

En raison de sa vaste étendue, le territoire québécois est exposé à une multitude d’aléas différents qui peuvent menacer la sécurité de la population. Ces menaces nécessitent des interventions de la part des municipalités en vue de protéger la vie humaine, qu’il s’agisse du déploiement de personnels d’urgence ou la mise en place d’ouvrages ou de mesures de protection. De telles interventions peuvent causer une dégradation ou une perturbation des milieux naturels pouvant détruire des écosystèmes. Cet essai a pour objectif de bonifier la prise en considération des impacts environnementaux lors de la planification et de la mise en place de mesures de protection de la population contre les aléas. Pour ce faire, le cadre juridique applicable est détaillé afin de répertorier les pouvoirs et responsabilités des différents acteurs impliqués dans les domaines de la sécurité civile et de la protection de l’environnement. De plus, la gestion des risques au Québec est décrite afin de répertorier les principaux modes de gestion applicables à quatre des principaux aléas naturels qui menacent la sécurité des Québécois et les impacts environnementaux potentiels et réels de ces mesures sont analysés. De ce portrait de la situation québécoise en matière de sécurité civile et de protection environnementale, il est possible de déceler les lacunes quant à la conciliation de ces deux préoccupations et de proposer des pistes d’amélioration afin que les autorités puissent prendre de meilleures décisions. Le cadre légal québécois prévoit la prise en considération des impacts environnementaux pour plusieurs types de projets et d’ouvrages en vue d’atténuer les impacts lors des travaux de protection réalisés en prévention des aléas. Toutefois, le choix des mesures devra toujours considérer la primauté de la vie comme premier critère de sélection. De plus, ce principe selon lequel la sécurité de la population passe avant tout implique que la prise en considération des impacts environnementaux p

Résumé : Les anomalies de la contractilité utérine induisent des complications majeures. Il a été décrit que les facteurs inflammatoires et hormonaux déterminent la qualité des contractions utérines. FACTEURS INFLAMMATOIRES : Lors de prématurité spontanée, un statut inflammatoire est présent dans 60 % des cas où des médiateurs lipidiques inflammatoires (leucotriènes, prostaglandines) jouent un rôle majeur. Cette étude évalue l’effet du Montélukast, un antagoniste des récepteurs aux cys-leucotriènes, sur l’activité myométriale humaine in vitro. L’effet du Montélukast anténatal a été quantifié en condition inflammatoire sur l’activité contractile in vitro et sur la prolongation de la grossesse. Deux modèles sont utilisés. Le premier modèle est basé sur le prélèvement de biopsies utérines humaines, lors de césariennes. Le deuxième modèle est basé sur l’induction d’inflammation chez des rates gestantes suivie par des prélèvements utérins. En condition basale, les résultats montrent que le Montélukast a un effet tocolytique significatif sur l’activité contractile in vitro humaine et que son effet est additif à celui de la Nifédipine, le tocolytique de référence. Par ailleurs, l’effet du Montélukast est maximal en condition de prématurité spontanée. Lors de l'ajout d'agent pharmacologique bien caractérisé in vitro dans le modèle inflammatoire, la réactivité contractile à l'ocytocine des biopsies utérines des rates traitées au Montélukast est abolie alors que la sensibilité à la niféfipine était augmentée. Finalement, 3 des 9 rates traitées au Montélukast présentaient une prolongation anormale de la gestation. FACTEURS HORMONAUX : Lors d’une observation fortuite, une modification du patron de contractions utérines a été observée in vitro chez des femmes enceintes présentant une hypothyroïdie et traitées à la T[indice inférieur 4]. Des anomalies de contractilité peuvent conduire à des césariennes avec les risques chirurgicaux associés. Cette partie évalue si cette modificat, Abnormalities of uterine contractility result in major complications. It has been described that inflammatory and hormonal factors determine the quality of uterine contractions. INFLAMMATION FACTORS: In spontaneous prematurity, inflammatory status is present in 60 % of preterm birth cases, where inflammatory lipid mediators (leukotrienes, prostaglandins) play a key role. This section aims to evaluate the effect of montelukast, a cysteinyl-leucotrienes receptor antagonist, on in vitro human myometrial activity. Then, the effect of antenatal montelukast on contractile activity will be quantified under an inflammatory condition in vitro and on the prolongation of the pregnancy. Two models have been used. The first model is based on human uterine biopsies recovered from c-sections. The second model is based on the induction of inflammation in pregnant rats, in which hysterectomies were performed. In the basal condition, montelukast has a tocolytic effect in vitro on human uterine contractile activity and its effect is additive to the effect of nifedipine, the reference tocolytic. Moreover, the effect of montelukast is maximal under spontaneous preterm birth. When adding in vitro pharmacological agent s well characterized to pregnant rats from the inflammatory model, uterine reactivity to oxytocin is abolished after antenatal montelukast treatment while the uterine sensitivity to nifedipine was increased. Finally, three of the nine rats treated with montelukast had an abnormal delay of gestation. HORMONAL FACTORS: After a fortuitous observation, an abnormal pattern of uterine contraction was observed in pregnant women with hypothyroidism and treated with T[subscript 4]. Contractile abnormalities can lead to c-sections with associated surgical risks. This section assesses whether this change in uterine contractility is caused by an underlying hypothyroid condition or the administration of T[subscript 4]. In uterine biopsies from a female rat hypothyroid model

Les études des voies métaboliques de l'acide arachidonique ont permis de démontrer l'implication de plusieurs dérivés de ce lipide (leucotriènes et prostaglandines) dans certaines pathologies telles que l'asthme. Les époxy-éicosanoïdes (EET) ont été décrits comme ayant des effets anti-inflammatoires et broncho-relaxants importants et ils représentent une nouvelle cible thérapeutique potentielle. Plusieurs groupes de recherches ont permis d'élucider les mécanismes d'action par lesquels les EET ont leurs effets bénéfiques. Cependant, les connaissances sur cette voie spécifique ne sont pas complètes puisqu'à ce jour, nous ne savons pas quels stimuli endogènes modulent la synthèse et la dégradation de ces lipides. En raison de leurs effets hyperpolarisants sur les cellules musculaires lisses, principalement par l'activation des courants K[indice supérieur +], les EET ont été proposés à titre de facteur hyperpolarisant dérivé de l'épithélium (EpDHF). Il a également été démontré que la synthèse d'autres EpDHF, tels que le NO et la PGI?, est induite par l'action de la Bradykinine. Notre hypothèse de recherche était donc que les effets de la Bradykinine au niveau des bronchioles humaines sont en partie causés par la synthèse endogène des époxy-éicosanoïdes. Le but du projet était, d'une part de démontrer la relation potentielle entre l'action de la BK et la synthèse des EET et, d'autre part de mettre au point un nouveau modèle d'hyperréactivité bronchique pour mieux caractériser les effets des EET. De façon spécifique, les objectifs étaient de : 1) comparer les effets relaxant de la BK à ceux du 14,15-EET sur des bronchioles humaines en présence ou non d'inhibiteurs spécifiques, 2) quantifier l'effet de la réduction de la biodisponibilité des EET sur les effets électrophysiologiques de la BK au niveau des cellules musculaires lisses et épithéliales, 3) caractériser l'effet d'un prétraitement à l'IL-1? ou à l'IL-13 sur la réactivité bronchique à différents agents pharmacolog

Les voies métaboliques de l'acide arachidonique (AA) produisent divers dérivés qui sont impliqués dans le contrôle de la contraction et de la relaxation des muscles lisses.Les métabolites de l'AA sont produits soit par la voie des cyclooxygénases, des lipoxygénases ou celles des cytochromes P450 époxygénase et [oméga]-hydroxylase. À ce jour, aucune étude n'a analysé les effets des eicosanoïdes produits des cytochromes P450 sur le muscle lisse utérin en fin de grossesse. Le but de cette étude est de comparer les effets des différents sous-produits de l'acide arachidonique sur le myomètre gravide humain en situations physiologiques comme dans le cas du travail prématuré. Plus précisément, les objectifs spécifiques étaient de 1) démontrer l'effet des dérivés de l'AA sur l'activité contractile utérine in vitro à partir de tissus utérins de femmes enceintes et 2) d'explorer l'existence d'un équilibre entre les différentes voies métaboliques. Des biopsies utérines ont été réalisées chez des femmes consentantes bénéficiant d'une césarienne élective. Il s'agit d'une étude qui vise à quantifier les effets des eicosanoïdes exogènes sur le myomètre humain en utilisant un modèle in vitro et des mesures de tensions isométriques. Des effets tocolytiques partiels avec environ 40% d'inhibition ont été quantifiés lors de l'ajout des eicosanoïdes suivants: le 8,9-EET, le 14,15-EET et le 20-HETE.Les protéines du myomètre, des membranes foetales et du placenta ont été extraites et analysées par immunobuvardage.Les enzymes de la voie métabolique des EET sont présentes dans les tissus de la sphère utérine. Par la suite, les effets endogènes des EET et du 20-HETE ont été testés de même que ceux des inhibiteurs enzymatiques associés aux différentes voies métaboliques, seuls ou combinés. Par ailleurs, lors de l'utilisation d'inhibiteur, AUDA et DDMS, il a été possible d'observer des effets tocolytiques (20 à 30%) concordant avec un effet produit par les eicosanoïdes endogènes. Dans un secon

La libération de l'acide arachidonique (AA) de la membrane des cellules par les phospholipases activées, le rend accessible pour être métabolisé par plusieurs enzymes impliquées dans la biosynthèse des eicosanoïdes. Ceux-ci incluent les cyclooxygénases (COX), les lipoxygénases (LOX) et plusieurs isoformes des cytochromes P450 (CYP450) qui produisent les acides époxy-eicosatriénoïques (EET) et les acides hydroxy-eicosatétraénoïques (HETE). Tandis qu'une attention considérable a été accordée aux rôles des eicosanoïdes dérivés des COX et des LOX, relativement peu de données sont disponibles sur les rôles potentiels des eicosanoïdes produits par les CYP450 sur la réactivité des muscles lisses des voies respiratoires (MLVR). L'objectif général de ce projet était de déterminer les modes d'action de ces eicosanoïdes bioactifs sur les tissus pulmonaires humains. L' idée étant de mieux cerner les mécanismes cellulaires et moléculaires activés lorsque ces tissus sont traités avec différents médiateurs lipidiques (eicosanoïdes) et inflammatoires (cytokines). Pour cela les propriétés électrophysiologiques, pharmacomécaniques et biochimiques susceptibles d'être modulées par ces eicosanoïdes sur les MLVR ont été analysées. Premièrement, nous avons démontré que l'acide 14,15-époxy-eicosatriénoïques (14,15-EET) hyperpolarise et relaxe les MLVR humains via l'activation des canaux potassiques de grande conductance activé par le Ca[exposant]2+ (BK[indice]Ca ). De plus, nous avons démontré que cet époxy-eicosanoïde diminue la sensibilité au Ca[indice]2+ des bronchioles perméabilisées à la [bêta]-escine, ce qui est corrélé avec une baisse du niveau de phosphorylation et d'expression de la protéine CPI-17 (protein kinase C-potentiated myosin phosphatase inhibitor). Par la suite, nous avons mis au point un modèle d'hyperréactivité bronchique (HRB) induit par un prétraitement des tissus au tumor necrosis factor [alpha] (TNF[alpha]). Ce modèle nous a permis d'évaluer les effets anti-inflamm