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The SARS-CoV-2 virus is the main cause of the pandemic viral pneumonia known as COVID-19. Some studies suggest that, in this disease, lymphopenia is the most common sign of infection, as well as increased CRP and IL-6 caused by a cytokine storm directed at the lungs. Therefore, the hypothesis of the study is to make a systematic revision of scientific studies linked to the immunological phenomenon known as COVID-19. Objectives: The main aim is to study the cytokine storm of COVID-19, as well as to determine the role of IL-6 and T-lymphocytes. Methods: A search strategy was made through the PICOS questions, based on the PRISMA method. The MeSH terms were looked up on PubMed, Google Scholar and SciELO (2019-2021). The level of quality was sought according to the ranking of Scimago institutions, and the H index of the journals was assessed. Results: 43 articles were included, and clinic, diagnosis, treatment, and pathogenesis were compared. A decrease in TCD4 / CD8 lymphocytes was shown in patients with severe disease, as well as an increase in IL-6 and CRP. Conclusions: The immunological phenomenon known as COVID-19 is characterized by lymphopenia and an increase in IL-6 amongst critically ill patients. Monitoring those parameters could help to understand the progression of the COVID-19 disease. El virus SARS-CoV-2 es el responsable de la neumonía viral pandémica conocida como COVID-19. Algunos estudios sugieren que, en esta enfermedad, la linfopenia sea el signo más común de infección, así como el aumento de PCR e IL-6 provocado por una tormenta de citocinas dirigida a los pulmones. Por ello, la hipótesis del trabajo es realizar una revisión sistemática de los estudios científicos relativos al fenómeno inmunológico de la COVID-19. Objetivos: El objetivo principal es estudiar la tormenta de citocinas de la COVID-19, así como determinar el rol de la IL-6 y los linfocitos T. Métodos: Se elaboró la estrategia de búsqueda a través de la pregunta PICOS en base al método PRISMA. Los términos MeSH se buscaron en PubMed, Google Scholar y SciELO (2019-2021). Se buscó el nivel de calidad según la clasificación de instituciones de Scimago, y se valoró el índice H de las revistas. Resultados: Se incluyeron 43 artículos y se compararon clínica, diagnóstico, tratamiento y patogenia. Se mostró una disminución de los linfocitos TCD4/CD8 en pacientes con enfermedad grave y un aumento de IL-6 y PCR. Conclusiones: El fenómeno inmunológico de la COVID-19 se caracteriza por linfopenia y aumento de IL-6 en pacientes críticamente enfermos. La monitorización de estos parámetros podría ayudar a entender la progresión de la enfermedad COVID-19. Ciencias Experimentales

Introducción: La diabetes mellitus tipo 1 (DMT1) es conocida como una enfermedad autoinmune, que principalmente se asocia a la presencia de células T destructoras de las células β de los islotes secretores de insulina en el páncreas. La etiología de la DMT1 no se conoce en gran precisión, pero se presume que podría ser debido a factores ambientales y genéticos. Objetivo: Revisar la mejor evidencia científica de la diabetes mellitus tipo I. Método: Se llevó a cabo una revisión bibliográfica de la literatura científica sobre diabetes mellitus tipo I mediante la búsqueda de artículos en las bases de datos WOS, Scopus, PubMed, ProQuest, Embase, Redalyc, Ovid, Medline, DynaMed y ClinicalKey durante el periodo 2018-2023. Resultado: La incidencia de DMT1 es alta en los países nórdicos, y es mucho más bajo en algunos países asiáticos, como China. Más del 90% de pacientes diagnosticado con diabetes tipo 1 tiene anticuerpos contra proteínas específicas de células beta. El riesgo genético para DMT1 se confiere principalmente por combinaciones de loci HLA clase II DR y DQ, especialmente en genes que codifican cadenas β altamente polimórficas DRB y DQB. La aparición de células CD4+ autorreactivos específicos de los islotes y células T CD8+ en sangre periférica, drenaje pancreático, ganglios linfáticos y las lesiones insulíticas indican evidencia de DMT1 como una enfermedad autoinmune. La alimentación, infecciones prematuras a virus relacionados con la inflamación de islotes pancreáticos y la disminución del microbioma intestinal son factores ambientales que están influenciados en la DMT1. Conclusiones: La diabetes mellitus tipo I uno es una complicación autoinmune, debido a sus causas que esta las provoca, por lo que al abordar el diagnóstico clínico, la incidencia, la fisiopatología, la inmunología, la genética, los factores asociados y el tratamiento permitirá mejorar la calidad de vida de los pacientes que padecen esta afección., Revista sanitaria de investigación, Выпуск 07 2023

Immunological markers have been described during COVID-19 and persist after recovery. These immune markers are associated with clinical features among SARSCoV-2 infected individuals. Nevertheless, studies reporting a comprehensive analysis of the immune changes occurring during SARS-CoV-2 infection are still limited.To evaluate the production of proinflammatory cytokines, the antibody response, and the phenotype and function of NK cells and T cells in a Colombian family cluster with SARS-CoV-2 infection.Proinflammatory cytokines were evaluated by RT-PCR and ELISA. The frequency, phenotype, and function of NK cells (cocultures with K562 cells) and T-cells (stimulated with spike/RdRp peptides) were assessed by flow cytometry. Anti-SARS-CoV-2 antibodies were determined using indirect immunofluorescence and plaque reduction neutralization assay.During COVID-19, we observed a high proinflammatory-cytokine production and a reduced CD56bright-NK cell and cytotoxic response. Compared with healthy controls, infected individuals had a higher frequency of dysfunctional CD8+ T cells CD38+HLA-DR-. During the acute phase, CD8+ T cells stimulated with viral peptides exhibited a monofunctional response characterized by high IL-10 production. However, during recovery, we observed a bifunctional response characterized by the co-expression of CD107a and granzyme B or perforin.Although the proinflammatory response is a hallmark of SARS-CoV-2 infection, other phenotypic and functional alterations in NK cells and CD8+ T cells could be associated with the outcome of COVID-19. However, additional studies are required to understand these alterations and to guide future immunotherapy strategies.Introducción. Se han descrito diferentes marcadores inmunológicos durante la COVID-19, los cuales persisten incluso después de la convalecencia y se asocian con los estadios clínicos de la infección. Sin embargo, aún son pocos los estudios orientados al análisis exhaustivo de las alteraciones del sistema inmunológico en el curso de la infección. Objetivo. Evaluar la producción de citocinas proinflamatorias, la reacción de anticuerpos, y el fenotipo y la función de las células NK y los linfocitos T en una familia colombiana con infección por SARS-CoV-2. Materiales y métodos. Se evaluaron las citocinas proinflamatorias mediante RT-PCR y ELISA; la frecuencia, el fenotipo y la función de las células NK (en cocultivos con células K562) y linfocitos T CD8+ (estimulados con péptidos spike/RdRp) mediante citometría de flujo, y los anticuerpos anti-SARS-CoV-2, mediante inmunofluorescencia indirecta y prueba de neutralización por reducción de placa. Resultados. Durante la COVID-19 hubo una producción elevada de citocinas proinflamatorias, con disminución de las células NK CD56bright y reacción citotóxica. Comparados con los controles sanos, los individuos infectados presentaron con gran frecuencia linfocitos T CD8+ disfuncionales CD38+HLA-DR-. Además, en los linfocitos T CD8+ estimulados con péptidos virales, predominó una reacción monofuncional con gran producción de IL-10 durante la fase aguda y una reacción bifuncional caracterizada por la coexpresión de CD107a y granzima B o perforina durante la convalecencia. Conclusión. Aunque la reacción inflamatoria caracteriza la infección por SARS-CoV-2, hay otras alteraciones fenotípicas y funcionales en células NK y linfocitos T CD8+ que podrían asociarse con la progresión de la infección. Se requieren estudios adicionales para entender estas alteraciones y guiar futuras estrategias de inmunoterapia.

Trabajo Integrador Final (Especialista en Bioquímica Clínica Área Inmunología) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2022. El ensayo de crossmatch por citometría de flujo (XMCF) proporciona un medio altamente sensible para detectar la presencia de anticuerpos contra el donante de órganos sólidos. El principal inconveniente que se presenta en esta técnica es la unión de las inmunoglobulinas de manera inespecífica a los receptores Fc en la superficie de los linfocitos B. Para evitar esto se realiza un tratamiento con pronasa. Dicho tratamiento puede afectar a otras moléculas de la superficie celular, alterando la expresión de epítopos anómalos e influyendo en la especificidad del ensayo. En el presente trabajo se plantea el uso de fragmentos Fc recombinantes para bloquear los receptores Fc, inhibiendo la unión inespecífica de anticuerpos humanos. Se utilizó la técnica de XMCF protocolo Halifax, comparando resultados al utilizar pronasa vs la variante propuesta en el trabajo, Human BD Fc Block. Del total de pruebas realizadas al momento de concluir el estudio y de acuerdo a los resultados obtenidos, se encontró diferencia estadísticamente significativa (*p

[EN] T lymphocytes migrate, become activated and develop their effector functions in complex three-dimensional environments endowed with specific mechanical properties, which greatly influence these processes. A particularly interesting aspect of this process is how T cells respond to mechanical signals to produce specific responses. The study of this response defines a mechanical “reactome” that contains molecules involved in mechanoperception and mechanoresponse. One of the latter is non-muscle myosin II (NMII), which converts mechanical and biochemical signals into movement, which the cell then uses to change its shape and reposition organelles and receptors. In this work, we aimed to assess the function of NMII paralogs NMII-A and NMII-B in T cell polarization, migration and activation. NMII-A is abundantly expressed in resting human T cells, whereas NMII-B is comparatively much less represented. However, NMII-B expression increases in response to interleukin 2 (IL-2) and/or anti-CD3/CD28. Regarding its function, targeted depletion of NMII-B, but not NMII-A, in primary CD3+ T cells inhibits front-back migratory polarity and chemotaxis towards CXCL12. Conversely, inhibition of either NMII paralog exacerbates T cell spreading on fibronectin and anti-CD3, indicating a possible role of NMII paralogs during formation of the immune synapse. Interestingly, NMII-A depletion had no detectable effect in a leukemic model of synaptic interaction. Conversely, depletion of NMII-B decreases contact inhibition of protrusion, generating T: APC contacts with an abnormal distribution of T cell activation components, such as CD3 and integrins. These defects correlate with abnormal actin dynamics at the edge of the T: APC interface. In this model, NMII-B (but not NMII-A) depletion decreases expression of specific hallmarks of T cell activation in J77 cl20 cells and proliferation in primary T cells. Our results position NMII-B as a novel effector that mediates the efficient activation and increased polarity and motility of effector T cells. [ES] La actividad fisiológica de los linfocitos T se desarrolla en entornos tridimensionales complejos con propiedades mecánicas que influencian estos procesos. El efecto de las propiedades mecánicas en la activación de los linfocitos T y cómo estos responden adaptativamente a las mismas es un campo de particular interés en nuestro laboratorio, particularmente el conjunto de moléculas que median la capacidad mecanosensitiva y las respuestas mecánicas de los linfocitos T. Una de las principales proteínas implicadas en la generación de fuerza mecánica es la miosina II no muscular (NMII), que convierte señales mecánicas y bioquímicas en movimiento de filamentos de actina, que las células utilizan para adaptar su forma a su microentorno mientras reposicionan orgánulos y receptores de membrana. En este trabajo, hemos determinado la función de los parálogos A y B de la NMII en los procesos de polarización, migración y activación linfocitaria. NMII-A se expresa abundantemente en células T no activadas, mientras que los niveles de NMII-B son mucho más bajos. Sin embargo, NMII-B aumenta su expresión en respuesta a IL-2 y/o anti-CD3/CD28. También hemos estudiado la función de los parálogos mediante siRNA o lentivirus. La depleción de NMII-B, pero no de NMII-A, inhibe la polarización anteroposterior de los linfocitos T así como la quimiotaxis hacia CXCL12. Por otra parte, la inhibición de ambos parálogos exacerba la extensión de los linfocitos T sobre fibronectina y anti-CD3, lo que sugiere un posible papel de estas moléculas durante la formación de la sinapsis inmune. En un modelo leucémico de este fenómeno, la depleción de NMII-A no tuvo ningún efecto morfológico o a nivel transcripcional. Por el contrario, la depleción de NMII-B causó una protrusión exacerbada de la célula T sobre la célula presentadora de antígeno, produciendo contactos mucho más dinámicos que los de las células control en los que diversas moléculas de activación, como CD3 o integrinas, se localizan anormalmente. A nivel transcripcional, la depleción de NMII-B disminuye la expresión de marcadores específicos de activación en células J77 cl20 así como la proliferación de linfocitos T primarios. Estos resultados posicionan a NMII-B como un nuevo efector que media la activación y el desarrollo de funciones efectoras de los linfocitos T.

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2022 Resumen: El papel de la señalización de la IL-17 en la progresión tumoral es controversial. Así, teniendo en cuenta reportes de nuestro laboratorio y otros, se hipotetizó que la IL-17 podría tener efectos pro- o anti- tumorales sobre distintas células del microambiente tumoral y que el balance entre estos efectos determinará el rol de la vía en la progresión de un determinado tumor. De esta forma, nos propusimos diseccionar los mecanismos pro y anti-tumorales de la vía de la IL-17 en distintos tipos de modelos tumorales murinos. Encontramos que, dependiendo del tipo de tumor, la deficiencia de la vía de IL-17 promueve (B16 y MC57) o retrasa (EL4 y C1498) el crecimiento tumoral. Para entender los mecanismos de la distinta progresión tumoral, se utilizó el melanoma B16 y el linfoma EL4 como tumores con respuestas globales contrapuestas frente a IL-17. En primer lugar, se evaluó la respuesta inmune anti-tumoral y se determinó que la señalización de la vía IL-17A/F:RA es importante para el desarrollo de la respuesta CD8+ citotóxica independientemente del tipo de tumor y de la progresión global. A continuación, se determinó si diferencias en el tipo de tumor podían explicar la distinta progresión tumoral. Se identificó que B16 y MC57 expresaban IL-17RA, IL-17RD e IL-17RC, diferente a EL4 y C1498 que no expresan IL-17RC y producen IL-17A e IL-17F. Luego, se evaluó la respuesta a IL-17 determinándose que las células B16, que expresaban los tres receptores, mostraban una respuesta "clásica" asociada la estimulación de la respuesta inmune y la inflamación. Por el contrario, las células EL4, mostraron una respuesta "no clásica" a la IL-17, asociada al crecimiento celular y a cáncer. Para corroborar que diferencias en la expresión de las subunidades de receptores impactan en la respuesta a IL-17, se bloqueó la IL-17RC en células B16, lo cual cambió el perfil de respuesta a la IL-17 por uno similar al de EL4. Por último, utilizando la base de datos TCGA seleccionamos tumores con alta (SKCM, melanoma) y baja (LAML, leucemia mieloide aguda) expresión de IL-17RC y determinamos que en los pacientes con melanoma una mayor expresión de IL-17RA se asocia con una mayor supervivencia global. Esta asociación beneficiosa no se observó en la LAML. Nuestros datos sugieren que la expresión de IL-17RC por parte de las células tumorales es clave para predecir el papel anti- o pro- tumoral de la señalización de IL-17 en la progresión tumoral. Así, proponemos el estudio del perfil de expresión de las diferentes subunidades receptoras del eje IL-17A/F:RA como un aspecto crítico para definir racionalmente la utilidad de las terapias dirigidas a controlar la vía de la IL-17 en las inmunoterapias personalizadas contra el cáncer. 2024-09-30 Fil: Rodríguez, Constanza Emilse. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.

ilustraciones, graficas La terapia adoptiva de células tiene el potencial de aumentar la inmunidad antitumoral, al modificar las células in-vitro para expandir linfocitos que reconozcan y ataquen el tumor. La capacidad funcional y sobrevida de las células transferidas al paciente dependerá de las subpoblaciones de memoria que sean expandidas en el laboratorio, por lo que la obtención de células de memoria poco diferenciadas es deseable. El objetivo principal de este trabajo fue determinar una estrategia de expansión in-vitro de linfocitos T CD4 stem de memoria humanos. Partiendo de células vírgenes estimuladas con un agente policlonal y adicionando diferentes combinaciones de citoquinas de la familia gamma común, se encontró que la combinación de IL-7, IL-15 e IL-21 o IL-7 e IL-21 fueron los cócteles que produjeron una mayor cantidad de células con fenotipo stem de memoria, medido por citometría de flujo. Adicionalmente, a través de la medición de proteínas de membrana y análisis in-sillico, se estableció una estrecha relación de los linfocitos T stem de memoria con el programa de diferenciación de linfocitos T foliculares, lo que consideramos contribuye a un mejor entendimiento de los procesos que subyacen la generación y mantenimiento de la memoria y, por ende, puede mejorar las estrategias actuales de expansión de linfocitos T con fines de inmunoterapia. (Texto tomado de la fuente) Adoptive cell therapy has the potential to increase antitumor immunity by modifying cells in-vitro to expand lymphocytes that recognize and attack the tumor. The functional capacity and survival of the cells transferred to the patient heavily depends on the memory subpopulations that are being expanded in the laboratory, hence, obtaining early memory cells is desirable. The main objective of our work was to determine a strategy for in-vitro expansion of human stem cell-like memory T CD4 lymphocytes. Starting from naive cells, stimulated with a polyclonal agent supplemented with different combinations of cytokines from the common gamma family, we found that the combination of IL-7, IL-15 and IL-21 or IL-7 and IL-21 were the cocktails that produced a greater number of cells with a stem memory phenotype, measured by flow cytometry. Additionally, through the measurement of membrane proteins and in-silico analysis, a close relationship between stem cell-like memory and the follicular helper T cells differentiation program was established, which we believe contributes to a better understanding of the processes that underlie the generation and maintenance of memory and, therefore, may improve current strategies of expansion of T cells for immunotherapy purposes. Maestría Magíster en Inmunología Medicina Traslacional

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2022 En este trabajo de tesis se describe una población particular de linfocitos T convencionales CD39+ (LiT CD4 + FOXP3-) que infiltran tumores murinos de distinto origen histológico y están ausentes en ganglios drenantes y bazo de estos animales. Esta población de LiT constituye un grupo heterogéneo de células clonalmente expandidas en el microambiente tumoral y exhiben característica de agotamiento y citotoxicidad. Los LiT convencionales que expresan CD39+ también infiltran tumores y ganglios metástasis y están ausentes en ganglios no metastásicos y en sangre periférica en paciencia con cáncer de mamá. 2024-07-31 Fil: Bossio, Sabrina N. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.

Contexto: Pelargonium sidoides é uma importante planta com propriedades medicinais originária da região da África do Sul e Lesoto, amplamente utilizada no tratamento de infecções respiratórias por meio do seu extrato comercializado EPs®7630. Atualmente, os resultados de investigações pré-clínicas indicam que a atividade farmacológica de P. sidoides inclui moderados efeitos antimicrobianos, marcante modulação da resposta imune não-específica, especialmente com propriedades imunomoduladoras por meio do estímulo sobre a atividade de células natural killer (NK). Poucos são os estudos que avaliam a atividade das células NK e sua citotoxicidade na presença do EPs® 7630. Objetivo: avaliar os efeitos a curto prazo causados pelo EPs®7630 sobre linfócitos citotóxicos na proliferação, ativação e degranulação celular, na produção de proteínas contidas em seus grânulos citolíticos e na expressão do gene da perforina (PRF1). Método: Foram utilizadas células mononucleares de sangue periférico de indivíduos com idade igual ou superior a 18 anos, saudáveis, sem histórico de neoplasias, doenças autoimunes e doenças infecciosas crônicas ou ativas no momento da inclusão do estudo. As células foram subdivididas entre três grupos (sem tratamento, tratadas com EPs® 7630 a 10μg/mL e controle veículo) e incubadas em estufa CO2 a 5% a 37ºC por 4 horas. Posteriormente, foi realizada imunofenotipagem dessas células por citometria de fluxo a fim de se quantificar os linfócitos T e suas subpopulações, as células NK, o marcador CD38 para ativação celular, o marcador CD107a para degranulação celular, além da proteína perforina em sua forma inativa (BD48) e em sua forma ativada (DG9) em linfócitos TCD8 e células NK. Já a análise da expressão do gene da perforina PRF1 foi realizada pela da técnica RTq-PCR (PCR em tempo real). Os testes estatísticos foram realizados por meio do programa GraphPad Prism e as análises foram consideradas estatisticamente significantes para p < 0,05. Resultados: houve um pequeno aumento na proliferação de linfócitos T após o tratamento com o EPs® 7630 a 10μg/mL por 4 horas, no entanto sem diferença estatisticamente significativa entre as médias (41,14 ± 10,41 vs. 43,25 ± 10,83; p=0,199). Observou-se quantidades semelhantes entre as médias dos grupos sem tratamento e com tratamento de linfócitos TCD8 (66,38 ± 12,11 vs. 66,28 ± 11,42 respectivamente; p=0,997), de linfócitos TCD4 (24,74 ± 14,33 vs. 24,65 ± 14,23, respectivamente; p=0,998) e de células NK (8,70 ± 3,62 vs. 8,18 ± 3,02, respectivamente; p=0,432). O número de linfócitos com marcação de ativação CD38+ também foi semelhante entre tratados e não tratados. A quantificação de perforina em sua forma inativa (BD48) e ativada (DG9) nos linfócitos TCD8 não diferiu entre tratados e não tratados. Em relação às células NK, a média de perforina em sua forma inativa (BD48) nos grânulos citolíticos se mostrou maior no grupo tratado em comparação às células sem tratamento, porém sem diferença estatisticamente significativa (29,20 ± 11,10 vs. 24,29 ± 11,00, respectivamente; p=0,346). Pôde-se evidenciar que houve aumento significativo na quantidade de perforina ativa (DG9) em função do tratamento com EPs®7630 a 10μg/mL por 4 horas quando realizada comparação ao grupo de células sem tratamento (11,87 vs. 8,6, respectivamente; p=0,048). Quanto à degranulação, não foram observadas diferenças quanto ao tratamento, tanto em linfócitos T CD8 quanto em células NK. Na avaliação da expressão gênica de PRF1, observou-se maior número de transcritos do gene, cerca de 6 vezes mais, no grupo de células tratadas com o EPs®7630 a 10μg/mL em comparação ao grupo sem tratamento, (0,02 vs. 0,003, respectivamente; p=0,0079). Conclusão: Foi observado que o extrato comercial à base de P. sidoides é capaz de modular o sistema imune inato por meio da ativação de perforinas presentes nos grânulos citolíticos das células NK. Esses resultados apontam o extrato EPs®7630 como uma substância com propriedades adjuvantes promissoras no tratamento de doenças causadas por células infectadas por vírus ou neoplásicas. Context: Pelargonium sidoides is an important herbal medicine from South Africa and Lesotho, largely used on the treatment of respiratory tract infections through its commercialized extract EPs®7630. Currently, the results of pre-clinical investigations indicate which pharmacological activity of P. sidoides includes moderate antimicrobial effects, significant modulation of non-specific immune response, mainly with immunomodulatory properties by stimulating the activity of natural killer cells (NK). There are few studies that evaluate the activity of NK cells and their toxicity in the presence of EPs®7630. Objective: evaluate the effects of EPs®7630 on cytotoxic lymphocytes in proliferation, activation and, cell degranulation, on the production of proteins inside their cytolytic granules and, perforin (PRF1) gene expression. Methods: Peripheral blood mononuclear cells from healthy individuals aged 18 years or older, with no history of neoplasms, autoimmune diseases, and chronic or active infectious diseases at the time of study inclusion were used. Cells were divided into three groups (no treatment, treated with 10μg/mL EPs® 7630 and, vehicle control) and incubated in a 5% CO2 oven at 37ºC for 4 hours. Subsequently, immunophenotyping of these cells was performed by flow cytometry in order to quantify T lymphocytes and their subpopulations, NK cells, the CD38 marker as an indication of cell activation, the CD107a marker as an indication of cell degranulation, in addition to the perforin protein in its inactive form (BD48) and in its activated form (DG9) in TCD8 lymphocytes and NK cells. The analysis of the expression of the perforin PRF1 gene was performed using the RTq-PCR (real-time PCR) technique. Statistical tests were performed using the GraphPad Prism program and the analyzes were considered statistically significant for p

ilustraciones, gráficas, tablas En este proyecto se planteó determinar la relación entre los niveles de expresión de 15-Hidroxiprostaglandina deshidrogenasa (HPGD) con la densidad y el fenotipo de linfocitos T (LT) en tejido prostático de pacientes con cáncer de próstata (CaP) y su posible asociación con la recurrencia bioquímica (RB). Es un estudio analítico retrospectivo, en tejidos incluidos en parafina de pacientes con CaP tratados en el Instituto Nacional de Cancerología (INC) entre los años 2007 a 2013, intervenidos con prostatectomía radical (PR). Se analizó la expresión de HPGD mediante qRT-PCR e inmunohistoquímica. La población y fenotipo de LT (periféricos e infiltrantes de tumor (TIL)) se determinó mediante inmunohistoquímica a través de la utilización de anticuerpos específicos para cada marcador. Pruebas de χ2 o test exacto de Fisher fueron aplicadas para determinar diferencias estadísticamente significativas entre las variables analizadas con una p0,05). La expresión proteica de HPGD en tejido prostático no tumoral se encontró en alta frecuencia a bajo nivel mientras que, en tejido tumoral se halló una baja frecuencia y bajo nivel (p0.05). The protein expression of HPGD in non-tumorous prostate tissue was found in high frequency at a low level, while in tumor tissue a low frequency and low level was found (p

Major histocompatibility class II molecule-peptide-T-cell receptor (MHCII-p-TCR) complex-mediated antigen presentation for a minimal subunit-based, multi-epitope, multistage, chemically-synthesised antimalarial vaccine is essential for inducing an appropriate immune response. Deep understanding of this MHCII-p-TCR complex’s stereo-electronic characteristics is fundamental for vaccine development. This review encapsulates the main principles for achieving such epitopes’ perfect fit into MHC-II human (HLADRβ̞1*) orAotus(Aona DR) molecules. The enormous relevance of several amino acids’ physico-chemical characteristics is analysed in-depth, as is data regarding a 26.5 ± 2.5Å distance between the farthest atoms fitting into HLA-DRβ1* structures’ Pockets 1 to 9, the role of polyproline II-like (PPIIL) structures having their O and N backbone atoms orientated for establishing H-bonds with specific HLA-DRβ1*-peptide binding region (PBR) residues. The importance of residues having specific charge and orientation towards the TCR for inducing appropriate immune activation, amino acids’ role and that of structures interfering with PPIILformation and other principles are demonstrated which have to be taken into account when designing immune, protection-inducing peptide structures (IMPIPS) against diseases scourging humankind, malaria being one of them.

Objetivos: A princípio, o Diabetes Mellitus do tipo 1(DM I) é considerado uma doença endócrina autoimune órgão-específica, no qual resulta a destruição seletiva das células beta das ilhotas pancreáticas, produtoras de insulina, pela infiltração progressiva de células inflamatórias pelos linfócitos T autorreativos. As manifestações clínicas do distúrbio metabólico surgem quando cerca de 80% das células beta pancreáticas são destruídas. A doença apresenta patogenia complexa, envolvendo a participação de vários fatores, dentre esses a susceptibilidade imunogenética com forte associação aos genes de histocompatibilidade (HLA), eventos ambientais (infecções) e resposta autoimune contra antígenos próprios pancreáticos, presença de linfócitos autorreativos e/ou autoanticorpos, provocando a destruição das células beta pancreáticas, desencadeando as anormalidades metabólicas típicas dessa doença. Contudo, o diagnóstico e o tratamento do acometimento autoimune de outros tecidos, particularmente o tiroidiano, são importantes na redução de comorbidades, assim ao propósito quantificar a prevalência dos autoanticorpos anti-GAD e anti-IA2 e a eficiência do tratamento farmacológico em indivíduos do sexo masculino na faixa etária de 15 a 20 anos. Método: foi realizado um levantamento epidemiológico nas bases de dados dos municípios de Rio Claro e São Carlos – SP, contemplando 30 indivíduos do sexo masculino, na faixa etária de 55-60 anos com diagnóstico confirmado de DM I, contemplando o Grupo DM I (GDMI) e 30 indivíduos do sexo masculino na faixa etária de 15-20 anos, sem diagnóstico confirmado de DM I para os valores de referência do anti-GAD e anti-IA2, sendo alocado no Grupo Controle (GC). Os participantes tiveram sangue coletado no período matutino após 12 horas de jejum, as amostras eram centrifugadas e o soro obtido era separado em frascos para a dosagem de glicemia de jejum, hemoglobina glicada e frutosamida. O soro era congelado a temperatura de -10ºC, estocado a -70º C para posterior dosagem dos autoanticorpos. Após esse procedimento, os voluntários selecionados foram encaminhados a uma avaliação endocrinológica para a prescrição e adequação farmacológica de insulina exógena, no qual foram convidados a retornarem para a avaliação laboratorial sanguínea com a nova prescrição farmacológica após 24 semanas de uso, fator este que permitiu identificar uma relação entre o tratamento utilizado e os valores sanguíneos de glicemia de jejum, hemoglobina glicada e frutosamida. Com isso, foi utilizado uma análise comparativa dos títulos de anti-GAD e anti-IA2 dos dois grupos, sendo empregado o teste t student para amostras independentes. Desse modo, estipulou-se 5% na rejeição da hipótese de nulidade, e para a análise estatística foi analisado o programa de informática SPSS. Resultados: a mediana de idade foi de 17.19 para ambos os grupos. O GC apresentou uma média de glicemia de jejum de 88,7 mg\dL, enquanto GDMI foi de 128,3 mg\dL. Para a análise do anti-GAD, o GC evidenciou valores médios de 0,27 ± 0,29 U\ml. E o GDMI, um valor médio de 1,20 ± 1,35 U\ml. Visto isso, em relação ao anti-IA2, o GC mostrou uma média de 0,24 ± 0,27 U\ml, e o GDMI de 0,40 ± 0,67 U\ml. Em seguida as 24 semanas de tratamento farmacológico com insulina exógena de longa e curta duração foi evidenciado um melhor controle glicêmico, no que tange os parâmetros de glicemia de jejum, hemoglobina glicada e frutosamida Conclusão: diante dos resultados apresentados, foi possível demonstrar que o anti-GAD evidenciou uma maior prevalência entre os indivíduos do GDMI em relação aos indivíduos do GP, evidenciando que este seria o mais importante dos autoanticorpos avaliados, permitindo a detecção de risco para o desenvolvimento do DM I. Vale ressaltar que os resultados obtidos, fundamental para a promoção e prevenção de saúde, visto que demonstram a possível identificação precoce do risco para o desenvolvimento de DM I, junto com o tratamento prescrito realizado de forma adequada, a fim de propiciar a conscientização com menores custos para a saúde pública do município.

Dissertação (mestrado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Brasília, 2022. O melanoma é um tipo de câncer de pele derivado dos melanócitos, com alta taxa de mortalidade e mau prognóstico. Atualmente, várias abordagens imunoterapêuticas estão sob investigação para tratar o melanoma. No entanto, recidivas do câncer e respostas heterogêneas ainda são observadas clinicamente. Portanto, é essencial compreender melhor os mecanismos de imunoescape do melanoma e como esse câncer interage com a resposta imune para garantir o escape imunológico. Nesse trabalho, investigamos qual o impacto do microambiente inflamatório sobre o potencial da linhagem de melanoma metastático MeWo em controlar a resposta imune de células T. Para isso, inicialmente produzimos meios condicionados de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) em repouso (MC) e imunoativados com fitohemaglutinina (iMC). Em seguida, a MeWo foi expandida em RPMI, MC ou iMC e o secretoma gerado após a expansão celular foi coletado e identificado como Sec (RPMI), nSec (não inflamatório) ou iSec (secretoma inflamatório), respectivamente. A partir desse momento, submetemos as PBMCs ativadas com fitohemaglutinina ao Sec, nSec e iSec. Inicialmente, notamos que as células MeWO expostas ao iMC apresentaram expressão elevada de importantes moléculas imunomoduladoras, como PD-L1 e IDO. Além disso, essas células apresentaram aumento na expressão das ectoenzimas CD39 e CD73 em sua membrana, indicando maior potencial de gerar imunossupressão por produção de adenosina. Em adição, nossos dados revelaram que o iSec foi capaz de controlar significativamente a proliferação de células T e reduzir a expressão de marcadores clássicos de ativação como CD69 e HLA-II. Além disso, as PBMCs tratadas com iSec apresentaram expressão reduzida dos principais reguladores das respostas Th1, Th2 e Treg (Tbet e Gata-3 e FOXp3). De modo concordante, notamos expressão reduzida de IFNγ nessas células. Mais importante, as PBMCs cultivadas com iSec apresentaram expressão reduzida dos transcritos TIM-3 e LAG-3, que codificam alvos terapêuticos que têm sido investigados no melanoma. Como pode ser visto, a exposição das células tumorais ao ambiente inflamatório desempenha um papel importante para permitir que essas células atuem com uma função imunossupressora mais potente. Considerando que nosso estudo teve foco em investigar comunicação parácrina, seria importante o desenvolvimento de novas investigações de modo a fornecer um melhor entendimento dos mecanismos de imunoescape do melanoma, com uma abordagem que permita contato celular. Tais avanços são fundamentais para o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas focadas na imunoterapia do melanoma. Melanoma is a type of skin cancer derived from melanocytes, with a high mortality rate and poor prognosis. Currently, several immunotherapeutic approaches are under investigation to treat melanoma. However, cancer relapses and heterogeneous responses are still clinically observed. Therefore, it is essential to better understand the mechanisms of melanoma immunoescape and how this cancer interacts with the immune response to ensure immune escape. In this work, we investigated the inflammatory microenvironment impact on the potential of the MeWo metastatic melanoma cell line to control the T cell immune response. First, we produced the conditioned media (MC) of resting peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and immunoactivated with phytohemagglutinin (iCM) Then, MeWo was expanded into RPMI, MC or iMC and the secretome generated after cell expansion was collected and identified as Sec (RPMI), nSec (non-inflammatory) or iSec (inflammatory secretome), respectively. From that moment, we submitted the PBMCs activated with phytohemagglutinin to Sec, nSec and iSec. Initially, we noticed that MeWo cells exposed to iMC showed high expression of important immunomodulatory molecules, such as PD-L1 and IDO. In addition, these cells showed an up regulation on the expression of CD39 and CD73 ectoenzymes in their membrane, indicating a greater potential to generate immunosuppression by adenosine production. In addition, our data revealed that iSec was able to significantly control T cell proliferation and reduce the expression of classic activation markers such as CD69 and HLA- II. PBMCs treated with iSec showed reduced expression of the main regulators of Th1, Th2 and Treg responses (Tbet, Gata-3 and FOXp3). Accordingly, we noted reduced expression of IFNγ in these cells. More importantly, PBMCs cultured with iSec showed reduced expression of TIM-3 and LAG-3 transcripts, which encode therapeutic targets that have been investigated in melanoma. As can be seen, the exposure of tumor cells to the inflammatory environment plays an important role in allowing these cells to perform a more potent immunosuppressive function. Considering that our study focused on investigating paracrine communication, it would be important to develop new investigations in order to provide a better understanding of melanoma immunoescape mechanisms, with an approach that allows cellular contact. Such advances are fundamental for the development of new therapeutic approaches focused on melanoma immunotherapy.

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de Lectura: 22-09-2022, Las neoplasias linfoblásticas de células T son enfermedades hematológicas agresivas que derivan de linfoblastos comprometidos con el linaje de células T que se desarrollan principalmente en niños. Esta enfermedad afecta a la médula ósea y a la sangre (T-ALL) aunque también puede aparecer como una masa tumoral en el timo/mediastino o en los nódulos linfáticos (T-LBL). La toxicidad asociada a los tratamientos actuales y el mal pronóstico en caso de recaída, con tasas de supervivencia inferiores al 10%, ponen de manifiesto la necesidad de nuevas terapias personalizadas que resulten más eficaces y generen menos efectos adversos. La vía de STAT5 es la segunda vía de señalización más frecuentemente desregulada en las TALL/LBL solamente por detrás de la vía de NOTCH. En este sentido, un alto número de pacientes muestra la fosforilación sostenida y consiguiente activación constitutiva de STAT5, que se transloca al núcleo, donde actúa como un factor de transcripción y promueve el desarrollo tumoral. Lamentablemente, todavía no existe un tratamiento específico para aquellos pacientes diagnosticados con T-ALL/LBL que presentan desregulada la vía de STAT5. Por un lado, porque la inhibición de STAT5 resulta complicada en términos de eficacia y especificidad. Por otro lado, porque las alteraciones que promueven la fosforilación sostenida de STAT5 afectan a múltiples genes, pueden aparecer de forma simultánea y no han sido caracterizadas en su totalidad, complicando la implementación de nuevas terapias. El objetivo general de la presente Tesis Doctoral es la caracterización de las bases moleculares subyacentes a las neoplasias linfoblásticas de células T, para identificar potenciales dianas terapéuticas que permitan el desarrollo de nuevos tratamientos personalizados dirigidos a aquellos pacientes diagnosticados con T-ALL/LBL que presenten una activación constitutiva de STAT5. La primera parte del trabajo ha consistido en la identificación y caracterización funcional de alteraciones susceptibles de contribuir a la fosforilación sostenida de STAT5 en los pacientes con neoplasias linfoblásticas de células T, entre las que se encuentran: la fusión SEPTIN6-ABL2, la hipermetilación de la isla CpG asociada con el inicio de la transcripción de SOCS3 y diferentes mutaciones puntuales que afectan a los genes JAK1, JAK3 y el propio STAT5. En base a los resultados obtenidos, la segunda parte del trabajo se ha enfocado en el estudio de los mecanismos moleculares por los que una fosforilación sostenida de STAT5 promueve el desarrollo tumoral en los pacientes con T-ALL/LBL. En este sentido, nuestros resultados demuestran que la activación constitutiva de STAT5 induce un perfil de expresión génica alterado con niveles de tránscritos aberrantes para múltiples genes. Entre ellos, la sobreexpresión de PIM1 tiene un efecto directo en la señalización relativa a c-MYC y mTOR, resultando fundamental para la proliferación y viabilidad de aquellas células que presentan mutaciones oncogénicas en la vía de STAT5. Por lo tanto, PIM1 se postula como una diana terapéutica para la implementación de nuevos tratamientos dirigidos a aquellos pacientes diagnosticados con T-ALL/LBL que muestren una activación constitutiva de STAT5 causada por la presencia de diferentes alteraciones en su vía de señalización, Para el desarrollo de la tesis se ha contado con financiación procedente de los siguientes proyectos:SAF2015-70561-R. Proyecto de investigación del Ministerio de Economía y Competitividad. IPs: Prof. José Fernández-Piqueras y Dra. María Villa Morales. RTI2018093330-B-I00. Proyecto de investigación del Ministerio de Ciencia e Innovación. IPs: Prof. José Fernández-Piqueras y Prof. Javier Santos Hernández. AECC-PROYECT18054PIRI. Proyecto de investigación de la Asociación Española Contra el Cáncer. IP: Prof. José Fernández-Piqueras

Tesis-CEINDO, Universidad San Pablo CEU, Programa en Medicina Traslacional, leida el 25 de octubre del 2022 Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 25-10-2024 La alergia es una enfermedad crónica en la que el sistema inmune reacciona de una manera desmesurada contra una sustancia externa del ambiente. A pesar de que recientemente se han hecho muchos descubrimientos en la fisiopatología alérgica, los mecanismos moleculares que la controlan no son del todo conocidos. Previamente descubrimos que pacientes alérgicos graves presentaban manifestaciones clínicas no descritas con anterioridad incluyendo un extenso remodelado en la mucosa oral y cambios metabólicos a nivel sistémico que implicaban a los linfocitos T. Debido a ello, hipotetizamos que los cambios observado en la mucosa y el metabolismo en pacientes alérgicos graves no solo están asociados con la fisiopatología alérgica si no que dictan la respuesta alérgica. Para comprobarlo, primero analizamos si los cambios en la barrera epitelial respiratoria tienen asociados cambios metabólicos a su vez que puedan ser utilizados potencialmente como biomarcadores de su estado. Además, comprobamos si los cambios metabólicos sistémicos observados previamente tienen algún efecto sobre la función de los linfocitos T y el desarrollo de la enfermedad. En esta tesis se concluyó que los cambios metabólicos en mucosa respiratoria y células T puedan están estrechamente relacionados en la patofisiología alérgica.

La psoriasis es una enfermedad inflamatoria crónica y sistémica de la piel de origen autoinmunitario, que se asocia a múltiples comorbilidades (hipertensión arterial, diabetes mellitus, enfermedades cardiovasculares y amigdalitis) disminuyendo significativamente la calidad de vida de los pacientes. Se caracteriza por un curso clínico variable con recaídas y remisiones cuya presentación más frecuente es la psoriasis en placas. En la mayoría de los casos es necesario instaurar un tratamiento de forma permanente que va a depender de la gravedad de la patología, existiendo para las formas leves distintos tratamientos tópicos y para las formas moderadas a graves se emplea la fototerapia, así como tratamientos sistémicos, que incluyen inmunosupresores clásicos y agentes biológicos. La presente revisión bibliográfica presenta como objetivo realizar una revisión de los distintos fármacos que se encuentran actualmente comercializados en España, así como descubrir aquellos que están en camino de ser aprobados en los próximos años por las autoridades sanitarias. Los nuevos fármacos biológicos están dirigidos contra diferentes vías de señalización, como la de las interleucinas interleucina- 12 e interleucina- 23 (IL-12/IL 23) y la interleucina- 17 (IL-17). Asimismo, los inhibidores de las Jak cinasas (JAK) son una posible nueva diana de acción para el tratamiento de la psoriasis en placas modera-grave, ya que existe evidencia de que múltiples citocinas proinflamatorias implicadas en la patogénesis de la psoriasis usan la vía de señalización JAK/STAT para la transducción de señales. Psoriasis is a chronic inflammatory and systemic skin disease of autoimmune origin, which is associated with multiple comorbidities (hypertension, diabetes mellitus, cardiovascular diseases and tonsillitis), significantly reducing the quality of life of patients. It is characterized by a variable clinical course with relapses and remissions whose most frequent presentation is plaque psoriasis. In most cases, it is necessary to establish a permanent treatment that will depend on the severity of the pathology. For mild forms there are different topical treatments and for moderate to severe forms phototherapy is used, as well as systemic treatments, which include classic immunosuppressants and biological agents. The present bibliographic review has the objective of reviewing the different drugs that are currently marketed in Spain, as well as discovering those that are on the way to be approved in the coming years by the health authorities. The new biologic drugs are directed against different signaling pathways, such as the interleukin-12 and the interleukin-23 (IL-12/IL-23) and the interleukin-17 (IL-17) signaling pathways. Likewise, Jak kinase inhibitors (JAK) are a potential new target of action for the treatment of moderate-severe plaque psoriasis, as there is evidence that multiple proinflammatory cytokines involved in the pathogenesis of psoriasis use the JAK/STAT signaling pathway for signal transduction. Universidad de Sevilla. Máster Universitario en Especialización Profesional en Farmacia

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de Lectura: 29-03-2022, Las células B convencionales juegan un papel crucial como eje del sistema inmunitario adaptativo humoral. Adicionalmente a estas funciones, se ha propuesto que las células B pueden presentar antígenos mediante presentación cruzada, aunque, tanto las vías de captura de estos antígenos, como las propias fuentes de antígenos no se encuentran bien definidas. En este trabajo describimos cómo las células B pueden capturar bacterias enteras a partir de células dendríticas (DCs) infectadas mediante un proceso denominado transfagocitosis. El contacto estrecho entre ambos tipos celulares es fundamental para que se dé el proceso y es independiente del tipo bacteriano. Al mismo tiempo, la activación de las células B facilita la transfagocitosis. La exposición a las bacterias intracelulares “entrena” a las células B (a partir de ahora Bbac; de células B entrenadas por bacterias) que adquieren nuevas habilidades como células presentadoras de antígenos. Una vez las bacterias se encuentran en el interior de las células B, se degradan eficazmente y los péptidos resultantes de la degradación se presentan mediante presentación cruzada a células T CD8+ vírgenes, que se activan de forma muy potente. No obstante, para que adquieran estas habilidades como células presentadoras, las células Bbac deben mantener una actividad autofágica adecuada. Nuestros datos demuestran que la activación de la respuesta T CD8+ citotóxica mediada por la actividad presentadora de antígenos de las células Bbac ayuda, tanto a resolver infecciones bacterianas, como a limitar el crecimiento tumoral. Por tanto, nuestros datos abren el camino para la creación de una nueva generación de inmunoterapias basadas en las células Bbac en la lucha contra el cáncer y contra patógenos intracelulares, Este trabajo ha sido llevado a cabo con financiación del Ministerio de Ciencia e Innovación con referenciaMCIN/AEI/10.13039/501100011033/

Uma nova era no tratamento do câncer está surgindo com o uso de anticorpos capazes de inibir pontos de bloqueio do sistema imunológico, chamados de “inibidores de checkpoint”. Um novo conceito de “balas mágicas”, que no início do século passado foram imaginadas por Paul Ehrlich como capazes de atuar diretamente na destruição de alvos tumorais, é representado agora por anticorpos direcionadas contra moléculas que bloqueiam a atividade antitumoral do sistema imunológico, como o antígeno de linfócitos T citotóxicos-4 (CTLA-4) e a proteína-1 de morte celular programada (PD-1). Essas novas imunoterapias vêm revolucionando a forma de tratar diferentes tipos de câncer. Nesta revisão selecionamos estudos, sobre CTLA-4 e PD-1, seus ligantes em células apresentadoras de antígenos, assim como destacamos a importância da descoberta de antígenos tumorais e o papel do sistema imunológico na imunovigilância tumoral. Nesse estudo são discutidos aspectos relacionados aos efeitos de imunoterapias baseadas no uso de anticorpos monoclonais anti-CTLA-4 e anti-PD-1/ PD-L1, como o risco de serem estimuladas respostas ​​direcionadas a tecidos saudáveis e outros efeitos adversos, bem como o uso de terapias combinadas que podem contribuir para melhorar a eficiência do tratamento do câncer.

SUMMARY Autotaxin (ATX; ENPP2) produces lysophosphatidic acid (LPA) that regulates multiple biological functions via cognate G protein-coupled receptors LPAR1–6. ATX/LPA promotes tumor cell migration and metastasis via LPAR1 and T cell motility via LPAR2, yet its actions in the tumor immune microenvironment remain unclear. Here, we show that ATX secreted by melanoma cells is chemorepulsive for tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) and circulating CD8+ T cells ex vivo, with ATX functioning as an LPA-producing chaperone. Mechanistically, T cell repulsion predominantly involves Gα12/13-coupled LPAR6. Upon anti-cancer vaccination of tumor-bearing mice, ATX does not affect the induction of systemic T cell responses but, importantly, suppresses tumor infiltration of cytotoxic CD8+ T cells and thereby impairs tumor regression. Moreover, single-cell data from melanoma tumors are consistent with intratumoral ATX acting as a T cell repellent. These findings highlight an unexpected role for the pro-metastatic ATX-LPAR axis in suppressing CD8+ T cell infiltration to impede anti-tumor immunity, suggesting new therapeutic opportunities., In brief Through LPA production, ATX modulates the tumor microenvironment in autocrine-paracrine manners. Matas-Rico et al. show that ATX/LPA is chemorepulsive for T cells with a dominant inhibitory role for Gα12/13-coupled LPAR6. Upon anticancer vaccination, tumor-intrinsic ATX suppresses the infiltration of CD8+ T cells without affecting their cytotoxic quality., Graphical Abstract

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2021 Resumen: La enfermedad de Chagas fue catalogada en 2005 por la OMS, como una de las enfermedades tropicales desatendidas del mundo. Su prevalencia e incidencia se han incrementado no solo en los países donde la transmisión es principalmente vectorial, sino también en países no endémicos como consecuencia de la globalización. Si bien se conoce que las complicaciones de la infección crónica ocurren en un 30-40% de los infectados, se estima que a causa del sub-diagnóstico, la falta de consultas y controles de las personas o de la reducida sensibilidad de las pruebas que se realizan, podría ser mayor. De hecho, constituye una enfermedad inhabilitante, con un gran deterioro en la calidad de vida y una alta tasa de mortalidad. Los tratamientos son escasos, y es necesario profundizar en los mecanismos que conducen a la infección crónica persistente de modo que sea posible descubrir objetivos terapéuticos eficaces ya sea para mejorar el pronóstico y destino de la patología o en un mejor escenario, para erradicar la infección. A pesar de décadas dedicadas al estudio de la respuesta inmune frente a esta infección, poco se conoce sobre las causas que conducen a los defectos en la respuesta efectora. En este trabajo de tesis doctoral nos enfocamos en el fenotipo metabólico y mitocondrial que adquiere la célula T CD4 durante la infección y sus repercusiones funcionales, que podrían explicar las fallas en dicho compartimiento celular. Los resultados obtenidos durante el desarrollo de esta tesis demuestran que, durante la fase aguda de la infección, los linfocitos T CD4 adquieren un perfil metabólico glucolítico y oxidativo exacerbado con altos niveles de especies reactivas del oxígeno mitocondrial (ROSm) cuya acumulación se evidencia desde tiempos tempranos de la infección. Los altos niveles de ROSm observados durante la fase aguda se correlacionan con un incremento en la depolarización o daño mitocondrial. Observamos que las células T CD4 efectoras se ven fuertemente afectadas con estas alteraciones durante la fase aguda de la infección. Estas células, además, presentan menor funcionalidad y son más susceptibles a la apoptosis. Esta última podría relacionarse a un déficit de sistemas antioxidantes, así como a alteraciones en la dinámica mitocondrial. En este sentido, el tratamiento in vitro con el antioxidante NAC, redujo la apoptosis en células T CD4 con daño mitocondrial. Adicionalmente, el tratamiento in vivo durante la fase aguda de la infección con ribósido de nicotinamida (NR), un precursor de nicotinamida adenina dinucleótido (NAD+) que es capaz de estimular la mitofagia, disminuyó la frecuencia de células T CD4 con mitocondria depolarizada y productoras de ROSm. Más aún, demostramos que los defectos mitocondriales son dependientes de la señalización del TCR y están relacionados al contexto de la infección, ya que no se producen en un modelo de inmunización. En conjunto, estos resultados son los primeros en demostrar que la infección aguda por T. cruzi desencadena alteraciones metabólicas y mitocondriales en células T CD4 que están vinculadas a una función deficiente y a la inducción de apoptosis. De esta forma, estos eventos contribuirían a la incapacidad de la respuesta inmune del hospedador de eliminar al parásito. Por lo tanto, estos resultados proporcionan nuevos conocimientos que permiten comprender los procesos moleculares y metabólicos que impulsan la disfunción y destino de las células T CD4 durante la infección. 2023-09-30 Fil: Ana, Yamilé. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Stempin, Cinthia Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Faculta de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Fil: Stempin, Cinthia Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Fil: Touz, María Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Fil: Montes, Carolina Lucia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Fil: Montes, Carolina Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Fil: Daniotti, José Luis. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina. Fil: Gómez, Karina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular Dr. Héctor N. Torres; Argentina.