Determination of in-vitro conditions to expand stem memory T Cells for adoptive cell therapy

ilustraciones, graficas La terapia adoptiva de células tiene el potencial de aumentar la inmunidad antitumoral, al modificar las células in-vitro para expandir linfocitos que reconozcan y ataquen el tumor. La capacidad funcional y sobrevida de las células transferidas al paciente dependerá de las subpoblaciones de memoria que sean expandidas en el laboratorio, por lo que la obtención de células de memoria poco diferenciadas es deseable. El objetivo principal de este trabajo fue determinar una estrategia de expansión in-vitro de linfocitos T CD4 stem de memoria humanos. Partiendo de células vírgenes estimuladas con un agente policlonal y adicionando diferentes combinaciones de citoquinas de la familia gamma común, se encontró que la combinación de IL-7, IL-15 e IL-21 o IL-7 e IL-21 fueron los cócteles que produjeron una mayor cantidad de células con fenotipo stem de memoria, medido por citometría de flujo. Adicionalmente, a través de la medición de proteínas de membrana y análisis in-sillico, se estableció una estrecha relación de los linfocitos T stem de memoria con el programa de diferenciación de linfocitos T foliculares, lo que consideramos contribuye a un mejor entendimiento de los procesos que subyacen la generación y mantenimiento de la memoria y, por ende, puede mejorar las estrategias actuales de expansión de linfocitos T con fines de inmunoterapia. (Texto tomado de la fuente) Adoptive cell therapy has the potential to increase antitumor immunity by modifying cells in-vitro to expand lymphocytes that recognize and attack the tumor. The functional capacity and survival of the cells transferred to the patient heavily depends on the memory subpopulations that are being expanded in the laboratory, hence, obtaining early memory cells is desirable. The main objective of our work was to determine a strategy for in-vitro expansion of human stem cell-like memory T CD4 lymphocytes. Starting from naive cells, stimulated with a polyclonal agent supplemented with different combinations of cytokines from the common gamma family, we found that the combination of IL-7, IL-15 and IL-21 or IL-7 and IL-21 were the cocktails that produced a greater number of cells with a stem memory phenotype, measured by flow cytometry. Additionally, through the measurement of membrane proteins and in-silico analysis, a close relationship between stem cell-like memory and the follicular helper T cells differentiation program was established, which we believe contributes to a better understanding of the processes that underlie the generation and maintenance of memory and, therefore, may improve current strategies of expansion of T cells for immunotherapy purposes. Maestría Magíster en Inmunología Medicina Traslacional