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Das Verhältnis Frauen:Männer betrug 1,8:1. Der Altersmedian lag bei 72 Jahren. Die Seiten der Nase waren signifikant häufiger betroffen als die Mitte (p < 0,0001). 41,2% der Patienten hatten multiple kutane Neubildungen. Basaliome stellten 57,1% aller Diagnosen, Keratosen 12,8%, Nävuszellnävi 8,6%, sowie Plattenepithelkarzinome 6,0%. Über 98% der Tumoren wurden exzidiert, in 33,2% wurde nachreseziert. Die Defektdeckung erfolgte in 61,1% durch Nahlappenplastiken, in 18,1% durch Dehnungsplastiken sowie in 17,2% durch Vollhauttransplantate. Die Rezidivquote von Primärtumoren lag bei 13,2%, von Rezidivtumoren bei 24,6%. Es gab keinen Zusammenhang zwischen der Rezidivquote und der Tumorentität (p = 0,324). Postoperative Komplikationen hatten 18,9% der Patienten. Kissenbildungen und ästhetische Korrekturen waren am häufigsten. Das Komplikationsvorkommen hing nicht von der verwendeten Defektdeckung ab (p = 0,11). Zwei immunsuppressiv behandelte Patienten hatten multiple kutane Neubildungen.

Die biologisch wirksamen Acylphloroglucine Myrtucommulon A – I aus den Myrtengewächsen M. communis und C. scabrida wurden als potentielle Leitstrukturen zur Behandlung von Entzündungskrankheiten und Krebs identifiziert. In einer fünfstufigen Synthese gelang es, die Myrtucommulone und deren Strukturderivate mit Gesamtausbeuten bis zu 50 % darzustellen. Der symmetrische Aufbau der Naturstoffe erlaubte eine modulare Synthese mit einem hocheffizienten konvergenten Schlüßelschritt. Aus Phloroglucin als Grundbaustein wurden sowohl die Syncarpinäure-Einheit als auch der zentrale Acylphloroglucin-Kern unter minimalem Einsatz von Schutzgruppen und Verzicht auf Redoxreaktionen hergestellt und mittels einer basenkatalysierten doppelten Michael-Friedel-Crafts-Alkylierung verknüpft, um das vollständig funktionalisierte Kohlenstoffgerüst zu erzeugen. Zum Zwecke der Struktur-Wirkungs-Untersuchung wurde durch Variation der Acylgruppen, der Alkylgruppen und der 1,3-Diketon-Einheiten circa 30 verschieden Strukturderivate hergestellt und auf ihre Wirkung als duale Inhibitoren der mPGES-1 und der 5-LO getestet. Darüber hinaus wurden starke apoptoseinduzierende Wirkungen gegen mehrere Krebszellinien für einen großteil der Myrtucommulon-Strukturanaloga festgestellt. Die Wirkung einiger Strukturderivate konnte im Falle der Entzündungshemmung im Ver- gleich zur Leitstruktur Myrtucommulon A (IC50(mPGES) = 1 μmol/L) um ein Vielfaches verbessert werden. The biologically active acylphloroglucinols myrtucommulone A – I from M. communis, and C. scabrida (Myrtaceae) were identified as lead compounds for the treatment of inflammation and cancer. The synthesis of the myrtucommulones and their analogues succeeded in five steps with overall yields up to 50 %. The symmetrical structure of the natural compounds allowed a modular synthesis with a highly efficient convergent key step. Starting from phloroglucinol as the basic module, the syncarpic acid units and the acylphloroglucinol core were synthesized with minimal use of protecting groups and without the use of redox reactions. These were then conected by a base catalyzed double Michael-Friedel-Crafts alkylation to generate the fully functionalized carbon framework. For the scope of structure-activity-investigations a set of ca. 30 structural analogues were synthesized by variation of the acyl, the alkyl an the 1,3-dicarbonyl units. The biological evaluation comprised the dual inhibition of mPGES-1 and 5-LO as well the apoptotic activity against severall cancer cell lines. The activity of some myrtucommulone analogues as inflammation inhibitors could be increased dramatically in comparison to the parent myrtucommulone A (IC50(mPGES) = 1 μmol/L).

Es handelt sich um eine Kohortenstudie mit Krebspatienten, die zum strahlentherapeutischen Aufklärungsgespräch das Universitätsklinikum Marburg besuchten. Die Datenerhebung erfolgte durch das Abhören und Kodieren von Aufklärungsgesprächen, die auf Tonbandkassetten aufgenommen worden waren. Hierbei wurde das modifizierte Roter Interaction Analysis System (RIAS) verwendet. Auf diese Weise erfolgte neben einer qualitativen Analyse (Bewertung der Gesamtstimmung) und einer quantitativen Analyse (Kodierungshäufigkeit von einzelnen Variablen) die Dokumentation der äußeren Umstände. Von den insgesamt 63 zur Verfügung stehenden Tonbandaufnahmen erfüllten 57 die Einschlusskriterien und wurden in die Studie aufgenommen. Die Aufklärungsgespräche wurden von drei Fachärzten für Strahlentherapie geführt, deren Patientengruppen sich in den demographischen Basisdaten wie Alter, Geschlecht und Familienstand ebenso wie in den klinischen Kriterien Diagnose und Therapieziel nicht wesentlich unterschieden. Die Untersuchung der Arzt-Patienten-Interaktionen unter Verwendung des RIAS ergab in zahlreichen Kategorien sowohl der inhaltlichen Kodierung (quantitative Analyse) als auch der Kodierung der Gesamtstimmung (qualitative Analyse) signifikante Unterschiede im Gesprächsverhalten sowohl der drei Ärzte als auch der jeweiligen Patientengruppe. Obwohl es sich in der Studie um Aufklärungsgespräche für eine einzige Therapieform, nämlich die Strahlentherapie, handelte und sich die drei Patientengruppen nicht signifikant in ihren Charakteristiken unterschieden, dennoch die Gesprächsinhalte signifikant in Abhängigkeit vom aufklärenden Arzt differierten. Demnach erfolgt ein medizinisches Aufklärungsgespräch nur bis zu einem gewissen Grad in standardisierter Form und hängt wesentlich von persönlichen Merkmalen der aufklärenden Person ab. Gesprächsinhalte wie das Ausdrücken von Zustimmung oder die positive Charakterisierung Dritter sowie das Ansprechen emotionaler Aspekte führten dazu, dass sich der Patient häufiger verbal äußerte und stärker in das Gespräch einbrachte. Auch das Vermeiden von Äußerungen des Arztes, die Einfluss auf den Patienten hinsichtlich der Änderung von Verhaltensweisen oder Alltagsabläufen haben könnten, führte zu einer stärkeren Partizipation des Patienten am Aufklärungsdialog.Demgegenüber zeigte sich Verunsicherung der Patienten und daraus folgend nur geringe Beteiligung am Gespräch, wenn die Vermittlung medizinischen Wissens (Aussagen zu Untersuchungsergebnissen, Medikamenten, Therapien, Nebenwirkungen, zur Diagnose und zum organisatorischen Ablauf der kommenden Zeit) im Vordergrund stand. Ähnliche Effekte zeigten sich, wenn die Entscheidung und damit die Verantwortung für die Therapie dem Patienten zugewiesen wurden.Weiterhin konnte belegt werden, dass eine Beeinflussung der Gesprächspartner auf verschiedenen Gesprächsebenen stattfand. Sprach der Patient emotionale Themen an, zeigte Verunsicherung, Ängste oder negative Gefühle, antwortete der Arzt darauf mit empathischen Aussagen oder auch näheren fachlichen Erläuterungen. Sprach ein Gesprächspartner medizinisch-fachliche Gesprächsinhalte, beziehungsweise nicht-medizinische, alltägliche Themenbereiche an, wurden diese überzufällig häufig innerhalb der entsprechenden Kodierungskategorien beantwortet.Die Ergebnisse dieser Studie zeigen weiterhin ein geschlechtsspezifisches Gesprächsverhalten. Frauen verbalisierten signifikant häufiger Ängste und Sorgen und stellten mehr Fragen zu Nebenwirkungen der Strahlentherapie, zu medizinischen Sachverhalten und zu organisatorischen Abläufen. Männer versuchten dagegen häufiger, die Verantwortung für Therapieentscheidungen oder organisatorische Abläufe auf den Arzt zu übertragen. Die Einbeziehung der Patienten in die Entscheidung über die Therapie und den Therapieablauf unter Berücksichtigung ihrer kognitiven und psychoemotionalen Situation in den Aufklärungsgesprächen wird häufig vernachlässigt oder ineffektiv durchgeführt. 88% der in die Studie involvierten Patienten wurden nicht nach ihrer Meinung zur Therapie gefragt, mit weiteren 46% der Patienten wurde nicht über Therapiealternativen gesprochen. Wurden die Patienten zu einer Entscheidung bezüglich des weiteren Therapieverlaufes aufgefordert, konnte bei einem Großteil der untersuchten Patienten deutliche Anzeichen von Überforderung beobachtet werden. Zusammenfassend ist als Ergebnis dieser Studie festzustellen, dass eine effiziente und umfassende Schulung und Fortbildung von Ärzten, Medizinstudenten und medizinischem Personal auf dem Gebiet der Gesprächsführung eine wichtige Aufgabe darstellt, um dem Patienten durch adäquate Kommunikation eine verantwortliche Beteiligung am Therapiegeschehen zu ermöglichen und damit einen wesentlichen Beitrag zum Therapieerfolg zu leisten., The goal of this study is the analysis of the physician-patient relationship in patient briefings before radiotherapy. All data of this cohort study was collected from tape-recorded patient briefings of cancer patients treated in the department for radiotherapy of the university hospital Marburg. Data ascertainment was performed by wiretapping and coding of tape recordings using the modified Roter Interaction Analysis System (RIAS). In this manner we performed a qualitative analysis with an estimation of the total sentiment on the one hand and a quantitative analysis with an evaluation of the coding frequency of individual variables on the other hand. Furthermore, the RIAS allowed the documentation of external circumstances. In compliance with inclusion criteria we selected 57 of a total of 63 tape recordings for this study. The patient briefings were conducted by three specialists for radiotherapy. The patient groups assigned to the physicians were homogeneous concerning demographic characteristics such as age, sex and marital status on the one hand and clinic aspects like diagnosis and therapy on the other hand. The examination of the physician-patient relationship using the RIAS showed a significant difference in the conversation patterns not only between the physicians but also between the respective patient groups. Thus the differences were evident both for the quantitative and the qualitative analysis. Even though the objectives of the patient briefings – the preparation for radiotherapy – were very similar and the patient groups were structured homogeneously we observed a statistically significant difference regarding the topics of the briefings. A possible conclusion is that a patient briefing cannot be standardized and is highly dependent on the physician’s individual characteristics. Topics of physician-patient conversation like agreement, rising of emotional issues and positive characterization of a third person resulted in an increased frequency of verbal comments by the patient. Avoiding of paternalisms by the physician concerning general attitudes and every day life also leads to an increased verbal participation by the patient. In contrast we observed uncertainty and a resulting decrease in verbal participation by the patient when briefings were dominated by scientific topics like diagnostic results, therapies, drugs, adverse effects and schedules. Similar effects were evident when decision processes and responsibilities were assigned to the patient. Furthermore, we observed a reciprocal interaction between physician and patient. Emotional topics like uncertainties and fears mentioned by the patient were answered by emphatic statements and as well by scientific particulars. Conversation topics raised by one conversational partner were disproportionally often answered within the corresponding codifications. The results of this study showed a gender-dependent conversation behavior. Women often asked questions concerning fears, uncertainties, adverse effects, medical details and workflows, while male patients tried to place the responsibility for therapeutic decisions and workflows on the physician. Not unexpectedly, patients were inadequately included in decisions concerning their individual therapy. Thus, we found out that about 88% of patients were not asked for their opinion about the therapy and in 46% of the interviews there was no deal with therapeutic alternatives. Furthermore, most patients showed explicit indications for mental overloading when requested for therapeutic decisions. Recapitulatory, an adequate and extensive education of physicians, medical students and medical staff is crucial for an appropriate communication and consequently for a responsible cooperation of patients as considerable contribution to the therapeutic outcome.

Cancer has become more and more prevalent over the last few years, reaching its highest levels per capita in the Western world in 2008. Mutations that produce dominant gain of function oncogenes and loss of function tumor suppressor genes have been discovered due to their alteration in human and animal cancer cells, and by their ability to elicit cancer phenotypes in experimental models. Typical treatments for cancer include surgery, radiation therapy and chemotherapy. However, chemotherapy also kills normal cells because tumor cells are not specifically targeted, resulting in significant side effects. In the last 10 years, the problem of resistance against chemotherapeutic agents has become more common, and further investigation revealed that the resistant tumor cells contained mutations that allowed them to regulate drug cytotoxicity. Novel approaches have therefore been tested. These strategies are more specific to cancer cells and their metabolism. In clinic, they achieve promising levels of cytotoxicity towards cancer cells and reduce unwanted side effects. Targeted therapy is based on the specific elimination of cancer cells without damaging the surrounding, healthy tissues. For this approach to work, two major components are needed: first, a specific binding moiety that only targets cancer cells, and second, a toxic moiety that is taken up by endocytosis and induces cell death. These two components are often functionally combined to achieve a drug which selectively targets and kills the diseased cell.APTAMER-SIRNA-TRANSCRIPTSA prerequisite for successful RNAi-based cancer therapy is the identification of potent siRNA sequences that selectively silence genes crucial for tumor cell survival. Here the challenge was addressed by silencing key components of the translational machinery that are sensitive to apoptosis. This thesis has shown that the transfection of cytotoxic siRNAs into tumor-derived cell lines efficiently induces apoptosis after specific mRNA degradation. One of the major challenges in the development of siRNA-based drugs is the incorporation of effective strategies for cell type-specific siRNA delivery. We chose the well-established PSMA binding aptamer xPSM-A10-3 as a cell surface-specific ligand for the development of aptamer based siRNA-delivery vehicles. Furthermore, we also used A30, a novel RNA aptamer that binds to HER3 expressed on MCF-7 cells. This is the first study demonstrating the specific binding of A30 to HER3-expressing MCF-7, cells as well as its subsequent internalization. In agreement with the results obtained by McNamara et al., this thesis demonstrates that it is possible to deliver functional siRNAs into PSMA and HER3 expressing cells. The monovalent aptamer-siRNA transcripts induced the siRNA sequence-specific knockdown of mRNA and protein expression. The administration of aptamer-siRNA transcripts specifically induced apoptosis and cell death only in antigen-expressing cells without activating the nonspecific type I Interferon response. As a global parameter for the overall efficacy of the aptamer siRNA transcripts, cell viability was evaluated in a dose-dependent manner.IMMUNOKINASESThe unique expression of surface markers on tumor cells makes it possible to explore rational strategies for molecular targeting cancer cells without harming the surrounding normal cells. We developed a strategy to deliver a tumor suppressor protein specifically to Hodgkin lymphoma cells carrying the tumor-associated CD30 receptor. This was achieved by genetically fusing a constitutively active version of DAPK2 to the CD30 ligand, thus decreasing the likelihood of systemic toxicity and providing proof-of-principle that compounds ineffective or unsuitable as systemic drugs can be developed as targeted therapeutic reagents. We have shown that DAPK2 protein is downregulated in different CD30+ Hodgkin lymphoma-derived tumor cells by DNA promoter hypermethylation and that receptor-specific targeting of those cells with a constitutively-active version of DAPK2 fused to the CD30 ligand can restore this kinase activity and induce cell death in vitro and in vivo. For this purpose a fusion proteins was designed, expressed, purified and characterized concerning affinity, internalization activity, apoptosis induction and serum stability. These experiments were essential for the following in vivo experiments. In a disseminated mice model we could prove that the purified immunokinase was able to prevent tumor development in SCID mice. Even after more than 100 days no cancer development could be observed in any tissue analyzed. In conclusion, our data support the therapeutic potential of restoring the catalytic activity of kinases such as DAPK2 is an attractive alternative to commonly used toxins in combination with a specific ligand targeting diseased tumor cells in patients.

Ill., graph. Darst.

Background Glyoxalases (Glo1 and Glo2) are involved in the glycolytic pathway by detoxifying the reactive methylglyoxal (MGO) into D-lactate in a two-step reaction using glutathione (GSH) as cofactor. Inhibitors of glyoxalases are considered as anti-inflammatory and anti-carcinogenic agents. The recent finding that various polyphenols modulate Glo1 activity has prompted us to assess curcumin's potency as an Glo1 inhibitor. Methodology/Principal Findings Cultures of whole blood cells and tumor cell lines (PC-3, JIM-1, MDA-MD 231 and 1321N1) were set up to investigate the effect of selected polyphenols, including curcumin, on the LPS-induced cytokine production (cytometric bead-based array), cell proliferation (WST-1 assay), cytosolic Glo1 and Glo2 enzymatic activity, apoptosis/necrosis (annexin V-FITC/propidium iodide staining; flow cytometric analysis) as well as GSH and ATP content. Results of enzyme kinetics revealed that curcumin, compared to the polyphenols quercetin, myricetin, kaempferol, luteolin and rutin, elicited a stronger competitive inhibitory effect on Glo1 (Ki = 5.1±1.4 µM). Applying a whole blood assay, IC50 values of pro-inflammatory cytokine release (TNF-a, IL-6, IL-8, IL-1v) were found to be positively correlated with the Ki-values of the aforementioned polyphenols. Moreover, whereas curcumin was found to hamper the growth of breast cancer (JIMT-1, MDA-MB-231), prostate cancer PC-3 and brain astrocytoma 1321N1 cells, no effect on growth or vitality of human primary hepatocytes was elucidated. Curcumin decreased D-lactate release by tumor cells, another clue for inhibition of intracellular Glo1. Conclusions/Significance The results described herein provide new insights into curcumin's biological activities as they indicate that inhibition of Glo1 by curcumin may result in non-tolerable levels of MGO and GSH, which, in turn, modulate various metabolic cellular pathways including depletion of cellular ATP and GSH content. This may account for curcumin's potency as an anti-inflammatory and anti-tumor agent. The findings support the use of curcumin as a potential therapeutic agent.

The rapid development of resistances and multiresistances against the nowadays used antibiotics has become a worldwide problem. This development has attained alarming magnitudes particularly in the case of Shigella sp.. A new target for the development of antibiotic active substances against Shigella sp. is represented by the tRNA-guanine-transglycosylase (TGT). It was the purpose of this study to identify and to isolate new leading structures or potential inhibitors of the TGT as well as of the insulin-like growth factor 1 receptor tyrosine kinase (IGF-1-RTK) from plant extracts. IGF-1-RTK is a part of the intracellular subunit of the IGF-1-receptor. This receptor takes a key position in the progression of cancer. Its function could be inhibited by blockage of the catalytic kinase domain. Thus an excessive cell proliferation would be prevented while a controlled crossing into the apoptotic pathway would be allowed. For the screening of the plant extracts the innovative method “Fishing of Ligands” was used. Compared with the High-Throughput-Screening this method is the less time-consuming and mainly cheaper procedure for the discovery of active ingredients in extensive substance libraries. With the method “Fishing of Ligands” 15 extracts of traditional medicinal plants were screened for the existence of TGT-binding substances and six more substances were analysed for a TGT-binding. In the extracts of Passiflora incarnata L., Solanum dulcamara L. and Centella asiatica (L). URBAN ingredients were found which bind to TGT. The ingredient of the methanolic extract of the herb of Passiflora incarnata L. was isolated with preparative HPLC and could be identified with NMR and MS as isovitexin-2”-O-ß-glycoside. By usage of high-field NMR spectrometers it was possible to give a complete interpretation of the 1H-NMR spectrum of this substance the first time. Furthermore 4 other flavonoids could be isolated and identified from 4 different fractions of the extract. All of the 5 flavonoids have the basic structure of apigenine. However, only isovitexin-2”-O-ß-glycoside could be selected from the extract by the TGT. For this reason an investigation of the influence of the substitutional pattern of the apigenine basic structure on the enzyme-binding was necessary. Therefore experiments to structure-response-relationships were accomplished by the method “Fishing of Ligands” as well as by determination of Ki values and crystallographic methods in collaboration with the work group of Prof. Dr. G. Klebe (Philipps-University of Marburg). The results of the research with the “Fishing of Ligands” gave indices on a preferred binding of C 6 substituted apigenine derivatives. For apigenine itself a binding to TGT was not observed by this assay. By determination of the Ki values of apigenine as well as of the 5 apigenine derivatives it could be shown that the pattern of substitution correlates with the inhibitory effect. Isovitexin-2”-O-ß-glycoside was tested exhibiting a Ki value of 20 µm. Thus the scope of application for “Fishing of Ligands” could be extended by factor 48. Unfortunately, crystallisation of this substance in complex with TGT was not successful. Therefore the determination of a binding modus was not possible. Isovitexin-2”-O-ß-glycoside and isovitexin are representatives of a new inhibitor class of the TGT. For further investigations, e.g. with the bacteria itself, the substances should be modified for increasing the inhibitory effect. For the second target, IGF-1-RTK, binding substances from medical plants could be obtained with the method “Fishing of Ligands” too. 12 different plant extracts were screened. A binding of one or more ingredients on IGF-1-RTK could be observed while examining the 6 extracts obtained from the roots of Glycyrrhiza glabra L., the herbs of Passiflora incarnata L., Lichen islandicus and from the cortex of Aspidosperma quebracho-blanco SCHLECHT.. The extracts of this cortex were examined particularly. Two substances of the dichloromethane extract which bind to IGF-1-RTK could be isolated. The isolation was performed by an “Extrography”, a normal-phase chromatography based method, followed by further purification steps. One of the isolated substances could be identified as aspidospermine. However, for both substances only a binding on IGF-1-RTK could be observed in consequence of the test procedure of the “Fishing of Ligands”. The inhibitory effect of these substances should be confirmed with additional tests, ideally with a cell test. In this study it was possible to isolate ingredients with new structures for inhibitors for the two targets TGT and the IGF-1-RTK. By the results of this study it could be shown that a successfully quest for new leading structures or active substances is possible in a reasonable way with the method “Fishing of Ligands” and that investigations in known and unknown plant extracts are still worthwhile., Die rasante Entwicklung von resistenten und multiresitenten Keimen ist ein weltweites Problem, das im Falle der Shigellen besorgniserregende Ausmaße angenommen hat. Die tRNA-Guanin-Transglykosylase (TGT) stellt ein neues Target für die Entwicklung antibiotisch wirkender Substanzen gegen Shigellen dar. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, in Pflanzenextrakten neue Leitstrukturen bzw. potentielle Inhibitoren sowohl für die TGT als auch für die Insulin-like growth factor 1 receptor tyrosine kinase (IGF-1-RTK) zu identifizieren und zu isolieren. IGF-1-RTK ist Teil der intrazellulären Untereinheit des IGF-1-Rezeptors. Dieser nimmt eine Schüsselstellung im Krebsgeschehen ein und könnte durch Blockade der katalytischen Kinasedomäne in seiner Funktion gehemmt werden. Somit würde eine übermäßige Zellproliferation verhindert sowie ein kontrollierter Übergang in die Apoptose ermöglicht werden. Für das Screening der Extrakte wurde die innovative Methode des Ligandenfischens verwendet. Sie stellt eine gegenüber dem Hochdurchsatzscreening weniger zeitaufwendige und kostengünstigere Methode zur Auffindung aktiver Verbindungen in komplexen Substanzbibliotheken dar. Mit dem Ligandenfischen wurden, neben 8 Verbindungen, 15 Extrakte traditioneller Arzneipflanzen auf das Vorhandensein von Substanzen untersucht, die an die TGT binden. In Extrakten aus Passiflorae herba, Dulcamarae stipites und Centellae asiaticae herba verlief diese Suche erfolgreich. Das aus dem methanolischen Passiflorae herba-Extrakt gefischte Flavonoid wurde mit präparativer HPLC isoliert und mit NMR- und massenspektrometrischen Techniken als Isovitexin-2’’-O-ß-glucosid identifiziert. Aufgrund der Verwendung hochfeldiger Messgeräte gelang erstmalig die vollständige Interpretation des 1H-NMR Spektrums dieser Verbindung. Aus 4 anderen Fraktionen des Extraktes wurden weitere 4 Flavonoide isoliert und identifiziert. Alle 5 Flavonoide besitzen eine Apigenin-Grundstruktur, wovon die TGT nur Isovitexin-2’’-O-ß-glucosid aus dem Substanzpool des Extraktes selektieren konnte. Daher war es notwendig, den Einfluss des Substitutionsmusters am Apigenin-Grundgerüst auf die Enzymbindung näher zu untersuchen. Es wurden Experimente zu Struktur-Wirkungsbeziehungen sowohl mit dem Ligandenfischen als auch in Zusammenarbeit mit dem Arbeitskreis Prof. Dr. G. Klebe (Philipps-Universität Marburg) durch Bestimmung der Ki-Werte sowie mit kristallographischen Methoden durchgeführt. Aus den Ligandenfischversuchen konnten Hinweise auf eine bevorzugte Bindung des an C 6 substituierten Apigeninderivates erhalten werden, wobei für Apigenin selber keine Bindung an die TGT nachgewiesen werden konnte. Durch Bestimmung der Ki-Werte von Apigenin und der 5 isolierten Apigeninderivate konnte gezeigt werden, dass die inhibitorische Wirkung mit dem Substitutionsmuster am Apigenin korreliert. Für Isovitexin-2’’-O-ß-glucosid wurde der Ki-Wert mit 20 µM bestimmt. Damit konnte die Ki-Wert-Grenze für das Ligandenfischen um den Faktor 48 erweitert werden. Ein Bindungsmodus für Isovitexin-2’’-O-ß-glucosid im Komplex mit der TGT konnte aus den durchgeführten Kokristallisations- und Soakingexperimenten nicht bestimmt werden. Isovitexin-2’’-O-ß-glucosid und Isovitexin stellen Vertreter einer neuen Inhibitorklasse für die TGT dar, die für weitere Untersuchungen, z. B. an Shigellenkulturen, modifiziert werden sollten, um zu wirksameren Substanzen zu gelangen. Auch für das zweite Target, IGF-1-RTK, konnten mit dem Ligandenfischen bindende Substanzen in 6 der 12 untersuchten Extrakte traditioneller Arzneipflanzen gefunden werden. Eine Bindung einer oder mehrerer Substanzen an IGF-1-RTK konnte in Extrakten aus Liquiritiae radix, Lichen islandicus, Passiflorae herba und Quebracho cortex festgestellt werden. Die Quebracho cortex-Extrakte wurden daraufhin näher untersucht. Aus dem Dichlormethanextrakt konnten zwei an das Target bindende Substanzen isoliert werden. Dazu wurden eine Extrographie, eine auf der Normalphasenchromatographie beruhenden Methode, sowie daran anschließende Reinigungsschritte durchgeführt. Eine der isolierten Verbindungen wurde als Aspidospermin identifiziert. Für die aus Quebracho cortex isolierten Verbindungen konnte, bedingt durch den Versuchsablauf des Ligandenfischens, lediglich eine Bindung an IGF-1-RTK aus dem Extrakt nachgewiesen werden. Die Wirksamkeit der isolierten Verbindungen müsste in weiteren Versuchen idealerweise mit einem Zelltest überprüft werden. Im Rahmen der Versuche zu dieser Arbeit ist die Isolierung von wirksamen Substanzen gelungen, deren Struktur für Inhibitoren der untersuchten Targets neuartig ist. Es konnte gezeigt werden, dass eine Leitstruktur- und Wirkstoffsuche aus komplexen Substanzbibliotheken mit der Methode des Ligandenfischens kostengünstig und erfolgreich betrieben werden kann und in solch hoch diversen Systemen wie Pflanzenextrakten als weiterhin lohnenswert anzusehen ist.

Ill., graph. Darst.