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PTDC/SOC-SOC/29764/2017 UIDB/04647/2020 UIDP/04647/2020 Neste artigo, pretendem-se discutir as trajetórias terapêuticas dos(as) beneficiários(as) de técnicas invasivas de procriação medicamente assistida (PMA), entendidas como travessias que envolvem tensões íntimas, momentos de desassossego, bem como fissuras identitárias e corporais. Essas experiências pessoais e significantes — que não se coadunam com os formatos convencionados e uniformizados dos protocolos biomédicos — são abordadas a partir das dimensões de “afeição”, “desapego”, “perda”, “luto”, “abandono” e “libertação” em relação aos embriões criados in vitro. A análise baseia-se nos dados recolhidos de 34 entrevistas semidiretivas em profundidade e 85 questionários validados (inquérito online) com beneficiários(as) de PMA, no âmbito de um projeto mais amplo de investigação sociológica em curso, sobre os significados atribuídos por especialistas e leigos aos embriões humanos criados in vitro, tanto na PMA quanto na pesquisa científica. Esta pesquisa, por ora, mostra como o embrião in vitro se reconfigura entre o “ente vivo” e o “ser humano”, numa relação dinâmica entre “proximidade” e “distanciamento” físicos e emocionais, remetendo para o conceito de liminaridade e para as relações humano-máquina. In this article, we intend to discuss the therapeutic trajectories of the beneficiaries of invasive medically assisted procreation techniques (MAP), understood as a journey that involves intimate tensions, moments of restlessness, as well as identity and body fissures. These personal and significant experiences — which are not consistent with the agreed and standardized formats of biomedical protocols — are discussed upon the dimensions of “affection”, “detachment”, “loss”, “grieving”, “abandonment” and “liberation” in relation to the embryos created in vitro. The analysis is based on the data collected from 34 in-depth semi-directive interviews and 85 validated questionnaires (online survey) with MAP beneficiaries, as part of a broader, ongoing sociology research project on the meanings attributed by specialists and lay people to human embryos created in vitro, both in the context of MAP and in scientific research. So far, this research shows how the embryo in vitro is reconfigured between a “living entity” and a “human being”, in a dynamic relationship between “proximity” and “distancing”, both physical and emotional, referring to the concept of liminality and to human-machine relationships. publishersversion published

Law, as a field of knowledge production, does not become ready and finished in a norm or judgment of the court, but it is produced in the day to day of social and cultural relations. This is easily discernible when we bring to light the way in which the legal discourse has appropriated the categories of life and person to be able to judge the Direct Action of Unconstitutionality No. 3510, which dealt with the authorization of embryonic stem cell research. The importance of this judgment that occurred in 2008 was to perceive the set of strategies that were created within the discourse from cultural and social elements, to create and delimit social spaces for the application of the category of life and person, as well as other categories that were being put into question, such as abortion, death, DNA, soul and uterus. Therefore, the research problem rests on verifying the social and anthropological dynamics that went through the activation of these categories in the legal discourse and how this allows to see a set of interactions and conflicts that pass through values and serve as the basis for the strengthening of existing social relations or the emergence of new dynamics. In addition, an object that was the in vitro embryo that contained elements of nature and culture was at stake in this case, and assumed a hybrid character that led to the Federal Supreme Court (STF) to create the first public hearing of its history, in order to call the society and mainly researchers so that they could provide necessary elements in order to produce a decision that would put an end to the great question that permeated the judgment: Extraction of embryonic stem cells and the consequent death of the embryo Is In Vitro Abortion Practice? Would the embryo live in vitro? Is the embryo in vitro person? It is in this turbulent scenario that my research is situated. Thus, for the data collection I proceeded with a documentary ethnography based on the survey of all the documents that were part of the trial and extracting. The research brought as one of the results the way in which legal discourse appropriates certain values to deal with situations that are not limited to the scope of nature or culture, besides presenting a form of social gear that strengthens traditional values from a discursive logic of modernity and scientific advance. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O direito, enquanto campo de produção de conhecimento, não se perfaz pronto e acabado numa norma ou julgamento do tribunal, mas ele é produzido no dia a dia das relações sociais e culturais. Isso é facilmente perceptível quando trazemos à tona a forma como o discurso jurídico se apropriou das categorias de vida e pessoa para ter condições de julgar a Ação Direta de Inconstitucionalidade nº 3510, que tratou sobre a autorização das pesquisas com células tronco embrionárias. A importância desse julgamento que aconteceu em 2008 foi perceber o conjunto de estratégias que foram criadas dentro do discurso a partir de elementos culturais e sociais, para criar e delimitar espaços sociais para a aplicação da categoria de vida e pessoa, bem como outras categorias que foram sendo colocadas em discussão, como o aborto, morto, DNA, alma e útero. Diante disso, o problema da pesquisa repousa em verificar a dinâmica social e antropológica que perpassou o acionamento dessas categorias no discurso jurídico e como isso permite ver um conjunto de interações e conflitos que envolvem valores e servem de base para o fortalecimento de relações sociais existentes ou surgimento de novas dinâmicas. Ademais, estava em jogo nesse caso, um objeto que era o embrião in vitro que reunia em si elementos da natureza e cultura, logo assumindo um caráter híbrido que levou ao Supremo Tribunal Federal (STF) a criar a primeira audiência pública da sua história, precisando, para tanto, chamar a sociedade e principalmente pesquisadores para que pudessem fornecer elementos necessários, a fim da produção de uma decisão que colocasse um ponto final a grande pergunta que permeava o julgamento: A extração de células tronco embrionárias e a consequente morte do embrião in vitro é prática de aborto? Teria vida o embrião in vitro? Seria o embrião in vitro pessoa? É nesse cenário turbulento que está situada minha pesquisa. Assim, para a coleta dos dados procedi com uma etnografia documental pautada no levantamento de todos os documentos que fizeram parte do julgamento e extraindo. A pesquisa trouxe como um dos resultados a maneira em que o discurso jurídico se apropria de determinados valores para lidar com situações que não se limitam ao âmbito da natureza ou cultura, além de apresentarmos uma forma de engrenagem social que fortalece valores tradicionais a partir de uma lógica discursiva de modernidade e avanço cientifico.

A presente dissertação surge como uma abordagem de carácter exploratório face a um projecto de parceria entre o Centro de Neurociências e Biologia Molecular (CNC), os Hospitais da Universidade (HUC) e o Instituto de Sistemas e Robótica (ISR), cujo principal objectivo é o de estabelecer um método de inspecção automática com base em métodos da área de Visão por Computador que permita proceder a uma avaliação mais rigorosa e objectiva de gâmetas e embriões, visando auxiliar as correntes Técnicas de Reprodução Assistida. Este trabalho consiste num conjunto de etapas sequenciais que permitem com algum rigor fazer uma detecção e classificação de espermatozóides em imagens microscópicas. Procede-se inicialmente a um pré-processamento da imagem alvo de forma a reduzir o ruído indesejado presente nas imagens e a realçar os contornos das estruturas a segmentar. Esta etapa é seguida de um processo de binarização através do cálculo de um limiar simples. São de seguida extraídas as regiões segmentadas através da obtenção das suas caixas envolventes. Os objectos resultantes são multiplicados por um fator de escala que resulta do quociente da sua área com a de um espermatozóide de referência e manipulados geometricamente através do recurso a um método de enquadramento de elipses de forma a facilitar a sua posterior classificação. É extraída a secção intermédia desta região por intermédio da sua segmentação pelo método de Otsu, removendo o fragmento do objecto posterior à região mais escura obtida pela aplicação deste método. De seguida é utilizada uma abordagem com base na recolha de parâmetros morfológicos e num sistema de classificação como base em Máquina de Vetores de Suporte (SVM) aplicada sobre a assinatura dos contornos da cabeça com a finalidade de classificá-la morfologicamente. Este procedimento é seguido por a recolha de um conjunto de parâmetros de forma da secção intermédia para determinar a sua espessura e a possível presença de gotas citoplasmáticas. Procede-se ainda a uma nova segmentação pelo método de Otsu de uma faixa de pixéis em torno do eixo maior da cabeça na imagem processado por forma a determinar a proporção do acrossoma face à zona nuclear. Para efeitos de seguimento da cauda é utilizado um algoritmo com base em binarização local, interpolação quadrática e cálculo do Índice de Semelhança Estrutural (SSIM) de um conjunto de pixéis face a um pixel central. São apresentados os resultados para cada um dos métodos da implementação descritos na dissertação. Conclui-se que o sistema sugerido é uma proposta viável para a detecção e classificação de espermatozóides em imagens microscópicas. The current thesis emerges as the result of an exploratory project whose purpose is to provide an efficient, robust and more objective solution for the automated evaluation of gamete and embryo quality to be used along the currently practiced Assisted Reproduction Techniques, a joint project between the Neurosciences and Cellular Biology Center (CNC), the Hospitals of the University of Coimbra and the Institute of Systems and Robotics (ISR). This work consists of a number of steps that resort to methods based of Computer Vision to segment and classify Spermatozoon present in microscopic images: first we go through a preprocessing stage so as to reduce undesired noise while largely preserving fine detail such as sharp corners, thin lines and curved structures. After this step we proceed by binarizing the image by applying a simple threshold based on the brightness of the pixels of the processed image. After eliminating the smaller objects still present in the binary image, we extract the bounding boxes which contain the head and mid-piece of the various spermatozoa present in the image. The next step is to scale the various objects as a function of the quotient between the object’s and a reference spermatozoon’s areas and then readjust their orientation by performing an ellipse fitting of each binary object so as to have them centered and horizontally aligned for an easier comparison. The mid-piece is then cropped through a process based on a segmentation of the region through Otsu’s method and the contour signature and additional morphological features are then calculated for each of the extracted heads. The contour signature vectors are then evaluated using an approach based on Support Vector Machine (SVM) so as to classify them morphologically. We then proceed to analyze a number of features including the column histogram of the several mid-pieces to ascertain whether or not there are defects present such as cytoplasm droplets or any sort of abnormal thickness. To finalize this step we retrieve a strip of pixels situated around the major axis of the head and once again apply Otsu’s algorithm so as to separate the pixels in two distinct sets that allow us to verify the existence of the acrosome in regards to a specific head and its relative dimension when compared to the nucleus of the spermatozoon. To identify the points that constitute the sperm’s tail we resort to an iterative method based on a quadratic interpolation of the results of a local segmentation and by calculating the SSIM index of a group of potential tail points relatively to the currently selected pixel. Results to each of the methods presented in this thesis are shown at the end of the document in order to demonstrate their performance. We conclude that the current solution is a viable method for the detection and classification of sperm cells through the use of microscopic digital images.

The study was carried out to evaluate the influence of the additional selenium (Se) in oocytes donors' diet and in the in vitro embryos production. Ten Jersey cows were divided, randomly, in control groups (CG) and treatment (TR), receiving the same diet that only differed by the Se concentration in mineral salt. The CG received 3.2 mg of Se/cow/day and TR received 9.6 mg/cow/day. After 20 days from the treatment beginning, it was done the first follicular aspiration driven by ultrasound (US) that was discarded. Following this, it was done more five US with an average of 15 days. The oocytes where then classified in I, II and III quality, expanded, naked, atresic or degenerated. The in vitro embryos production was done in the BIOTEC - CESUMAR laboratory, according to standard routine and then evaluated in the seventh day after in vitro fertilization. During the experimental period (119 days) the animals had an average weight gain of 49.9 ± 13.47 kg/cow. The average of total oocytes (35.11 ± 2.65) and quality I oocytes (11.61 ± 1.58) were higher in the TR (P0.05).In accordance to the conditions in which the study was developed it is possible to conclude that the higher Se addition to diet resulted in higher oocytes production, higher quantity of degree I oocytes I and higher embryos production in the process of in vitro fertilization, recommending the use of 9.6 mg of Se/ day per cows donor of oocytes. O trabalho foi realizado com o objetivo de verificar a influência do selênio (Se) adicional na dieta de doadoras de oócitos e na produção de embriões in vitro. Dez vacas Jersey foram divididas, aleatoriamente, em grupos controle (GC) e tratamento (GT), recebendo a mesma dieta, diferindo apenas na concentração de Se contida no sal mineral. O GC recebeu 3,2 mg de Se / vaca / dia e o GT 9,6 mg de Se / vaca / dia. Decorridos 20 dias do início do tratamento, foi realizada a primeira aspiração folicular guiada por ultra-sonografia (AF), que foi desprezada. Em continuidade a esta, foram realizadas mais cinco AFs, com intervalo médio de 15 dias. Os oócitos foram classificados em qualidade I, II, III, expandido, desnudo, atrésico ou degenerado. A produção in vitro de embriões foi realizada no laboratório Biotec - Cesumar, conforme rotina padrão e avaliados no sétimo dia após a fecundação in vitro. Durante os 119 dias de experimento, os animais apresentaram ganho de peso médio de 49,9 ± 13,47 kg / vaca. A média de oócitos totais (35,11 ± 2,65) e a média de oócitos qualidade I (11,61 ± 1,58) colhidos foram maiores no GT (P0,05). Assim, conclui-se que a maior adição de Se à dieta resultou em maior produção de oócitos, maior quantidade de oócitos de grau I e maior produção de embriões no processo de fecundação in vitro, recomendando a utilização de 9,6 mg de Se / dia / vaca doadoras de oócitos. ix, 25 f

Avaliaram-se os efeitos de dois protocolos de punção folicular na quantidade/qualidade dos oócitos e na produção in vitro de embriões, em vacas da raça Gir, não-lactantes. O ciclo estral foi sincronizado com cloprostenol e ao longo do experimento os animais receberam implantes auriculares de norgestomet, renovados a cada 14 dias. Os animais foram submetidos aos protocolos I (sem estimulação hormonal, com punção folicular duas vezes/semana) e II (pré-tratamento com 250 UI de FSH em doses decrescentes, três dias antes da punção folicular). Os oócitos recuperados foram levados ao laboratório em meio TALP-Hepes e submetidos à maturação. Na fecundação in vitro utilizou-se sêmen de touro Gir, previamente capacitado. Após 22 horas de fecundação, os prováveis zigotos foram co-cultivados com células da granulosa em CR2aa acrescido de 10% de soro fetal bovino. A taxa de clivagem foi avaliada 72 horas pós-fecundação e a de blastocisto 192 horas pós-fecundação. O número total de folículos foi maior (P0,05). O número de oócitos de grau I e a taxa de clivagem foram maiores (P0.05). The number of grade I oocytes and cleavage rate were higher (P