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Bromus auleticus is a winter wild species with promissory characteristics for domestication as forage that inhabits temperate-warm grasslands from a wide region from South America. Populations from regions with different environmental conditions are considered as ecotypes and are associated with different seedborne Epichloë fungal endophytes. Association with Epichloë provides B. auleticus with increased growth capacity and resistance against pathogens. The seeds mature at the end of spring and germinate in autumn, remaining dormant during wet and warm summer. As the persistence of Epichloë endophytes in the seed is highly sensitive to temperature and humidity, we studied how the endophytes modulate seed germination in response to these factors in two B. auleticus ecotypes named La Pampa (LP) and El Palmar (EP). We also studied how environmental factors during germination affect endophyte survival. In the LP ecotype, adapted to coldest temperatures in autumn, Epichloë improved final germination under alternating temperatures, but had no effects on germination inhibition imposed by low water availability. In the EP ecotype, adapted to warm humid summer and autumn, the endophyte promoted germination at constant 25°C and alternating 15/25°C temperatures, and prevented germination at low water potentials. At 30°C, seed germination was inhibited and whereas seeds remained viable, endophyte survival was significantly lowered. The effect of Epichloë on B. auleticus seed germination was ecotype-specific: promoting germination at alternating temperatures in La Pampa ecotype or at high temperatures in El Palmar ecotype, while inhibiting it at low water availabilities, could be an endophyte-mediated ecotypic strategy minimising endophyte mortality and increasing seedling establishment. Fil: Stefanoni Rubio, Pablo Jose. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Gundel, Pedro Emilio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Fisiológicas y Ecológicas Vinculadas a la Agricultura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Instituto de Investigaciones Fisiológicas y Ecológicas Vinculadas a la Agricultura; Argentina. Universidad de Talca; Chile Fil: Novas, María Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Iannone, Leopoldo Javier. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina

El sobrepastoreo de los campos naturales ha determinado la disminución de especies nativas de alto valor forrajero, como es el caso de Bromus auleticus Trin. ex Nees en el bioma Campos. La reintroducción de especies nativas de alto valor forrajero sembradas sobre el campo natural aparece como una tecnología promisoria para la recuperación de dichos ambientes. No obstante, no ha sido suficientemente desarrollada principalmente por la falta de semilla comercial de la especie y por falta de información que oriente el manejo de la implantación. En ese sentido, se hace necesario conocer cuál es la densidad de siembra de Bromus auleticus más adecuada para lograr la reintroducción de la especie. Se instalan dos experimentos de campo para evaluar el efecto de la densidad de siembra de Bromus auleticus sembrado al voleo sobre campo natural en el año 2013 y en el año 2014, en la región de Basalto de Uruguay. Los tratamientos consistieron en diferentes densidades de siembra: 20, 40, 60 y 80 kg ha-1. Con densidades de siembra de hasta 40 kg ha-1 se alcanzaron coeficientes de logro de 17 y 26% a los 120 días postsiembra y niveles de sobrevivencia estival de 60 y 33% en los experimentos 2013 y 2014, respectivamente, obteniéndose al año de siembra 107 y 56 plantas por m-2 de Bromus auleticus, para las siembras 2013 y 2014, respectivamente. Densidades de siembra superiores a 40 kg ha-1 permitieron lograr una mayor cantidad de plantas de Bromus auleticus en el período de establecimiento de la pastura, compensando con menores porcentajes de sobrevivencia en el verano. The overgrazing of natural grasslands has determined the decrease of native species of high forage value, as is the case of Bromus auleticus Trin. ex Nees in the Campos biome. The reintroduction of native species of high forage value overseeded into natural grasslands appears as a promising technology for the recovery of these environments. However, has not been sufficiently developed due to the consequence of the absence of commercial seed of the species and the lack of information to guide the establishment management. In this sense, it is necessary to know the sowing rate (kg ha-1) of Bromus auleticus necessary to achieve the reintroduction of the species. Two field experiments are installed to assess the effect of the sowing density of Bromus auleticus sown into the natural grasslands in 2013 and in 2014, in the Basaltic region of Uruguay. The treatments consisted of different sowing rates: 20, 40, 60 and 80 kg ha-1. With sowing rates up to 40 kg ha-1, achievement coefficients of 17 and 26% were reached at 120 days post-sowing and summer survival percentages of 60 and 33% in the 2013 and 2014 experiments, respectively, obtaining the year of sown 107 and 56 plants per m-2 of Bromus auleticus, for 2013 and 2014 experiments, respectively. Seeding densities greater than 40 kg ha-1 allowed to achieve a greater amount of Bromus auleticus plants achieved in the establishment period, compensating with lower percentages of survive during the summer. DNA Comunicación Institucional Fil: Franco Aquino, Rodolfo. Universidad de la República. Sede Tacuarembó; Uruguay Fil: Jaurena, Martin. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria (INIA). Programa Pasturas y Forrajes; Uruguay Fil: Reyno Podestá, Rafael. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria (INIA). Programa Pasturas y Forrajes; Uruguay

High stocking rate livestock management has determined the decline of native species of high forage value as Bromus auleticus Trin ex Nees in the Campos region of the Rio de la Plata grasslands. The species has some agronomic and ecological characteristics that define it as of high potential to be reintroduced in degraded natural grasslands.However, Bromus auleticus has not been sufficiently described, since commercial seeds and infor-mation regarding the establishment phase are scarce. Two field experiments were carried out in 2013 and 2014, rei ntroducing Bromus auleticus into native grasslands in the Basaltic region, aiming to evaluate the impact of sowing density in the forage productivity and their seasonal distribution. The treatments consisted of different sowing densities: 20, 40, 60 and 80 kg ha-1 and one control treatment.Considering the management and the evaluated period (4 years for experiments 2013, and 3 years for experiments 2014), different sowing densities did not modify the forage production in any of the plantings for the evaluated period and compared to the control. However, the use of sowing densities of 40 kg ha-1 or higher allowed modifying the seasonal distribution of forage production with a better contribution in autumn-winter, and more stable production throughout the year..-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-. RESUMEN - El manejo ganadero con altas cargas ha determinado la disminución de especies nativas de alto valor forrajero como el Bromus auleticusTrin. ex-Nees en la región Campos de los pastizales del Río de la Plata. La especie posee características agronómicas y ecológicas que la definen como de alto potencial para ser reintroducida en campos naturales degradados. Sin embargo, no ha sido lo suficientemente difundida por la falta de semilla comercial e información sobre la etapa de instalación. Se realizaron dos experimentos de campo en 2013 y 2014, a partir de la reintroducción de Bromus auleticus en cobertura sobre campo natural en la región de Ba-salto, con el objetivo de evaluar el efecto de la densidad de siembra en la producción de forraje y la distribución estacional. Los tratamientos consistieron en diferentes densidades de siembra: 20, 40, 60 y 80 kg ha-1 y un tratamiento testigo. Tomando en cuenta el manejo realizado y el período evaluado (4 años para el experimento 2013, y 3 años para el experimento 2014), la utilización de diferentes densidades de siembra no modificó la productividad total en ninguna de las siembras para el período evaluado y respecto al testigo. Sin embargo, la utilización de densidades de siembra iguales o superiores a 40 kg ha-1 modificó la distribución estacional de la producción de forraje hacia un mayor aporte en el período otoño-invernal y una producción más equilibrada durante el año. .-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.RESUMO - O manejo da pecuária com altas cargas de animais tem determinado a diminuição de espécies nativas de alto valor forrageiro, como Bromus auleticus Trin. ex Nees na região do Bioma Campos. A espécie possui caracte-rísticas agronômicas e ecológicas que a definem como tendo alto potencial para ser reintroduzida em campos naturais degradados. No entanto, não foi suficientemente estudado devido à falta de sementes comerciais e informações sobre a fase de instalação. Dois experimentos de campo foram realizados em 2013 e em 2014 a partir da reintrodução de Bromus auleticus em cobertura em campo natural na região do Basalto, com o objetivo de avaliar o efeito da densidade de semeadura na produção de forragem e sua distribuição sazonal. Os tratamentos consistiram em diferentes densidades de semeadura: 20, 40, 60 e 80 kg ha-1 e um tratamento teste-munha sem plantio. Considerando o manejo realizado e o período avaliado (4 anos para o experimento de 2013 e 3 anos para o experimento de 2014), o uso de diferentes densidades de semeadura não alterou a produtivi-dade total de forragem em nenhum dos experimentos para o período avaliado e com relação ao controle. Po-rém, a utilização de densidades de semeadura iguais ou superiores a 40 kg ha-1 permitiu modificar a distribuição sazonal da produção forrageira com maior contribuição no período outono-inverno e produção mais equilibrada ao longo do ano.

SOWING DENSITY, ESTABLISHMENT AND DRY MATTER PRODUCTION OF CEVADILHA VACARIANA. ABSTRACT: Bromus auleticus Trinius or cevadilha vacariana, is a perennial hibernal species native to the fields of southern Brazil, Uruguay and Argentina. The slow establishment is one of the problems pointed out in most works as the main difficulty for its use as perennial winter pasture. The present work aimed to study the effect of sowing density on the establishment and production of dry matter in B. auleticus, in the first and second year of pasture production. The applied treatments were sowing densities of 570 (T1), 840 (T2), 1,100 (T3), 1,350 (T4) and 1,700 (T5) viable seeds.m-2. There was no significant difference between treatments for the number of seedlings up to 35 days, nor for plant height up to 100 days after sowing and also for the number of days between sowing and first cut. Dry matter production was not affected by treatments either. In this experiment the sowing density had no influence on any of the evaluated characteristics. It was also not possible to establish an association between number of plants and dry matter production in the first cut in the year of establishment. Keywords: Bromus auleticus; Native forage; Temperate grass; Seeds Made available in DSpace on 2021-01-23T09:10:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Artigo-RCR-Joao-Carlos.pdf: 505414 bytes, checksum: c88239461bb8c48757dd6dff3dda524d (MD5) Previous issue date: 2020

Background and aims: We studied, through exudates employment, the effect of Epichloë (endophytic fungi), both independently and in association with Bromus auleticus (grass), on arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) colonization, host and neighbouring plants biomass production and soil changes. Methods: Through in vitro and greenhouse experiments, Epichloë endophytes effect on AMF development was evaluated. In vitro studies of exudates effect on Gigaspora rosea and Rhizophagus intraradices were performed using root or endophyte exudates. A 6-month greenhouse experiment was conducted to determine Bromus auleticus endophytic status effect and endophyte exudates role in biomass production, neighbouring plants mycorrhizal colonization and soil properties. Results: Endophyte exudates and E+ plant root exudates promoted in vitro AMF development in the pre-infective stage of G. rosea and in carrot root culture mycelium of R. intraradices in a dose-response relationship, while control media and E- plants exudates had no effect. R. intraradices colonization and plant growth was clearly increased by endophytes and their exudates. Conclusions: This is the first work evidencing the direct effect of Epichloë endophytes and infected plants root exudates on AMF extramatrical development. While higher levels of AMF colonization were observed in E+ plants, no clear effect was detected in neighbouring plants colonization, plant biomass or soil properties. Fil: Vignale, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Iannone, Leopoldo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Scervino, Jose Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente. Universidad Nacional del Comahue. Centro Regional Universidad Bariloche. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente; Argentina Fil: Novas, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina

Bromus auleticus es una gramínea nativa perenne que establece asociaciones simbióticas mutualistas con endofitos Epichloë. Las poblaciones naturales de B. auleticus suelen presentar altos porcentajes de infección, por lo que sería de esperar que la asociación favorezca la germinación e implantación de las semillas. Por otro lado, las plántulas se asocian tempranamente a organismos de la rizósfera que pueden promover su crecimiento, mejorando la adquisición de nutrientes.La presente Tesis está centrada en contribuir al conocimiento de la asociación en relación a la germinación del hospedante y a su asociación con hongos solubilizadores de P (HSF) de la rizósfera. Para esto se trabajó con 2 ecotipos de B. auleticus (LP y EP), con y sin Epichloë (E+ y E−).Se evaluó la germinación ante distintas temperaturas (15, 20, 25, 30°C y alternancia 15/25°C), potenciales hídricos (0, −0.5, −1.0 y −1.5 MPa) y envejecimiento acelerado. También se evaluó la interacción B. auleticus-Epichloë-PSF, evaluando el efecto de exudados de raíz (1.5, 3.0 y 6.0% v/v) en la solubilización de P y en experimentos de interacción planta-endofito-PSF.La temperatura no afectó significativamente la germinación, a excepción de 25°C para EP, donde las plantas E+ presentaron una germinación significativamente mayor. Las semillas E+ de ambos ecotipos presentaron un mayor porcentaje final de germinación que las E− ante la alternancia 15/25°C. En los experimentos de déficit hídrico, en semillas de LP no se observan diferencias entre E+ y E-, mientras que, en EP, la presencia de Epichloë disminuye el porcentaje de germinación. En los ensayos de envejecimiento acelerado, las semillas LP+ no se vieron afectadas luego de 3 días, y las EP+ no germinaron a los 10 y 15 días de tratamiento. Para los ensayos con HSF, las cepas presentaron diferencias en la solubilización frente a diferentes fuentes de P. Los exudados y sus diferentes concentraciones, afectaron diferencialmente a las cepas en la solubilización de P.En esta Tesis se pudieron abordar distintos aspectos que conciernen a la implementación de B. auleticus como pastura. Los resultados muestran variabilidad en la respuesta a los diferentes factores dependiendo del ecotipo, lo que se discute en relación a las características ambientales donde ambos ecotipos se desarrollan naturalmente. Bromus auleticus is a native perennial grass that establishes mutualistic symbiotic associations with Epichloë endophytes. Natural populations of B. auleticus usually present high infection percentages, so that it is expected that the association favours seed germination and establishment. On the other hand, seedlings associate at an early stage with rhizosphere organisms that can promote their growth, thus improving nutrient acquisition. This Thesis is focused in contributing to the knowledge of this association in relation with the host germination and their interaction with rhizospheric phosphate-solubilizing fungi (PSF). Two ecotypes of B. auleticus were used (LP and EP), with and without Epichloë (E+ and E−). Seed germination was evaluated under different temperatures (15, 20, 25 and 30°C, and alternated 15-25°C), water potentials (0, −0.5,−1.0 and −1.5 MPa) and accelerated ageing. The interaction B. auleticus- Epichloë- PSF was evaluated , analyzing the effect of root exudates (1.5, 3.0 and 6.0 v/v) on phosphate (P) solubilization and in interaction experiments plant-endophyte-PSF. Temperature did not significantly affect germination, apart from EP at 25°C, where E+ plants presented a significantly higher germination. The E+ seeds of both ecotypes presented a higher final germination percentage than E− at alternated 15/25°C. In the water stress experiments, no differences between E+ and E− seeds were observed for LP seeds, while in EP the presence of Epichloë diminished germination percentage. In the accelerated ageing experiments, LP E+ seeds were not significantly affected after 3 days, and EPE+ did not germinate after 10 and 15 days. For the PSF experiments, the strains have shown significant differences among different P sources. Fungal exudates affect differentially the strains on P solubilization. This Thesis studied different aspects concerning the application of B. auleticus as a forage grass. The results show variablity in the response to different factors depending on the ecotype, what should be discussed in relation to the environmental features where both ecotypes naturally develop. Fil: Stefanoni Rubio, Pablo Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina

Bromus auleticus es una gramínea nativa perenne que establece asociaciones simbióticas mutualistas con endofitos Epichloë. Las poblaciones naturales de B. auleticus suelen presentar altos porcentajes de infección, por lo que sería de esperar que la asociación favorezca la germinación e implantación de las semillas. Además, la especie de Epichloë asociada a B. auleticus varía según la región en la que se encuentren. Por otro lado, las plántulas se asocian tempranamente a organismos de la rizósfera que pueden promover su crecimiento, mejorando la adquisición de nutrientes. La presente Tesis está centrada en contribuir al conocimiento de la asociación en relación a la germinación del hospedante y a su asociación con hongos solubilizadores de P (HSF) de la rizósfera. Para esto se trabajó con 2 ecotipos de B. auleticus (LP y EP), con y sin Epichloë (E+ y E−). Se evaluó la germinación ante distintas temperaturas (15, 20, 25, 30°C y alternancia 15/25°C), potenciales hídricos (0, −0.5, −1.0 y −1.5 MPa) y envejecimiento acelerado. También se evaluó la interacción B. auleticus-Epichloë-PSF, evaluando el efecto de exudados de raíz (1.5, 3.0 y 6.0% v/v) en la solubilización de P y en experimentos de interacción planta-endofito-PSF. La temperatura no afectó significativamente la germinación, a excepción de 25°C para EP, donde las plantas E+ presentaron una germinación significativamente mayor. Las semillas E+ de ambos ecotipos presentaron un mayor porcentaje final de germinación que las E− ante la alternancia 15/25°C. En los experimentos de déficit hídrico, en semillas de LP no se observan diferencias entre E+ y E-, mientras que, en EP, la presencia de Epichloë disminuye el porcentaje de germinación. En los ensayos de envejecimiento acelerado, las semillas LP+ no se vieron afectadas luego de 3 días, y las EP+ no germinaron a los 10 y 15 días de tratamiento. Para los ensayos con HSF, las cepas presentaron diferencias en la solubilización frente a diferentes fuentes de P. Los exudados y sus diferentes concentraciones, afectaron diferencialmente a las cepas en la solubilización de P. En esta Tesis se pudieron abordar distintos aspectos que conciernen a la implementación de B. auleticus como pastura. Los resultados muestran variabilidad en la respuesta a los diferentes factores dependiendo del ecotipo, lo que se discute en relación a las características ambientales donde ambos ecotipos se desarrollan naturalmente. Bromus auleticus is a native perennial grass that establishes mutualistic symbiotic associations with Epichloë endophytes. Natural populations of B. auleticus usually present high infection percentages, so that it is expected that the association favours seed germination and establishment. Also, the Epichloë species associated to B. auleticus varies according to the region where they occur. On the other hand, seedlings associate at an early stage with rhizosphere organisms that can promote their growth, thus improving nutrient acquisition. This Thesis is focused in contributing to the knowledge of this association in relation with the host germination and their interaction with rhizospheric phosphate-solubilizing fungi (PSF). Two ecotypes of B. auleticus were used (LP and EP), with and without Epichloë (E+ and E−). Seed germination was evaluated under different temperatures (15, 20, 25 and 30°C, and alternated 15-25°C), water potentials (0, −0.5,−1.0 and −1.5 MPa) and accelerated ageing. The interaction B. auleticus- Epichloë- PSF was evaluated , analyzing the effect of root exudates (1.5, 3.0 and 6.0 v/v) on phosphate (P) solubilization and in interaction experiments plant-endophyte-PSF. Temperature did not significantly affect germination, apart from EP at 25°C, where E+ plants presented a significantly higher germination. The E+ seeds of both ecotypes presented a higher final germination percentage than E− at alternated 15/25°C. In the water stress experiments, no differences between E+ and E− seeds were observed for LP seeds, while in EP the presence of Epichloë diminished germination percentage. In the accelerated ageing experiments, LP E+ seeds were not significantly affected after 3 days, and EPE+ did not germinate after 10 and 15 days. For the PSF experiments, the strains have shown significant differences among different P sources. Fungal exudates affect differentially the strains on P solubilization. This Thesis studied different aspects concerning the application of B. auleticus as a forage grass. The results show variablity in the response to different factors depending on the ecotype, what should be discussed in relation to the environmental features where both ecotypes naturally develop. Fil: Stefanoni Rubio, Pablo José. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Bromus auleticus is a cool season perennial C3 grass, recognised as a forage plant genetic resource and used for native grasslands restoration. It is native to the campos biome, found in southern Brazil, Uruguay and central Argentina. Its forage yield is comparable with tall fescue. Seed dormancy is a problem to evaluate germination and for commercialisation of this species. Using four recently harvested seed lots of three different genotypes, we tested six different treatments to release dormancy: a control (mean germination 52%); 0.05 and 0.1% gibberellic acid; KNO3; pre-chilling + KNO3; and pre-chilling (mean germination across seed lots and treatments, 87%). Pre-chilling + KNO3 and pre-chilling were the best treatments to break dormancy, with mean germination times (MGT) reduced to half (8.7 and 9.3 days-1) that of the untreated control (19.2 days-1). The treatment with KNO3 alone did not yield uniform results across seed lots; when combined with pre-chilling, final germination did not increase but showed more consistent results. The use of 0.05% gibberellic acid was less efficient than pre-chilling to reduce the MGT of 17.2 days-1, but it could be considered as an alternative treatment for seed lots in which the germination results are needed fast and has the additional advantages of avoiding exposing seeds to cold stress. Furthermore, if seeds are contaminated with fungi, it reduces growth time and contamination effects.

A field experiment was performed to study the effect of Epichloë endophytes of the wild forage grass Bromus auleticus on mycorrhizal colonization, seedling emergence and growth parameters in three heterospecific grasses of agronomic interest. Plots with B. auleticus associated with Epichloë (E+) and non-associated (E-) plants were established and 3 y later, seeds of Lolium multiflorum (E+ or E-), Schedonorus arundinaceus (E+ or E-) and Bromus catharticus (not establishing associations with Epichloë) were sown as B. auleticus neighbors. B. auleticus E+ plants induced a significant increase in mycorrhizal colonization of the neighbor grasses, even higher in the E- neighbor plants (L. multiflorum and S. arundinaceus), in comparison to B. auleticus E- neighbors. Seedling emergence, root length, leaves number or shoot dry weight were not affected. This is the first approach to studying these triple interactions (endophyte-grass-mycorrhiza) involving wild and forage grasses in the field. Our results show that the effect of Epichloë extends further than its own host and suggest an interaction among endophytes of heterospecific neighbors at the rhizosphere level.Keywords arbuscular mycorrhizal fungi, Bromus auleticus, Lolium multiflorum, multiple mutualistic symbiosis, root exudates, Schedonorus arundinaceus Fil: Vignale, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Iannone, Leopoldo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Novas, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina

Tribunal: Condón, Federico; Boggiano, Pablo; Fedrigo, Jean El manejo ganadero con altas cargas y el consecuente sobrepastoreo provocan la degradación de las pasturas naturales. Este proceso se caracteriza por la disminución de especies nativas de alto valor forrajero, como por ejemplo Bromus auleticus Trin. ex Nees. La presencia de ecotipos adaptados, la persistencia y su sobrevivencia a los stress hídricos estivales definen a este especie como de alto potencial para ser reintroducida en campos naturales. Se plantea como objetivo evaluar el impacto de la densidad de siembra en la reintroducción de Bromus auleticus sobre campo natural. En el norte del Uruguay en suelos de Basalto superficial y mediante siembras al voleo se realizaron dos experimentos en mayo del 2013 y mayo de 2014. Los tratamientos consistieron en diferentes densidades de siembra 20, 40, 60 y 80 kg de semilla.ha⁻¹ manteniendo un testigo con igual fertilización que el resto de los tratamientos (CNF). Se evaluó el efecto de los tratamientos en el número de plantas.m⁻² logradas al año de siembra y su impacto en la producción de forraje acumulada y estacional del campo natural. El número de plantas.m⁻² logrado al año de siembra se incrementó hasta la densidad de 60 kg ha⁻¹ alcanzando entre 100 y 120 plantas.m⁻². El uso de densidades altas entre 60 y 80 kg ha⁻¹ , resultaron claves para contrarrestar la disminución de plantas luego del período estival. En el tercer y cuarto año para el experimento 2014 y 2013, respectivamente, con el uso de densidades iguales o por encima de 40 kg ha⁻¹ se obtuvo una mayor producción relativa de forraje en el período de otoño-invierno (kg MS.ha⁻¹) mejorando la distribución de la producción de forraje y sin cambios en la producción acumulada de forraje (kg MS.ha⁻¹). En síntesis, estos experimentos evidenciaron que fue posible reintroducir Bromus auleticu en siembras al voleo en un campo natural sobre suelos superficiales de basalto. Adicionalmente, la utilización de esta tecnología de bajo costo permitió mejorar la estacionalidad del campo natural.

Asexual Epichloë endophytes establish mutualistic symbioses with grasses, improve fitness of their hosts and modify the surrounding environment. To test the hypothesis that this symbiotic association increases the abundance and diversity of phosphate-solubilizing fungi (PSF), a pot experiment was conducted combining two endophytic statuses: Epichloë-infected (E+) and non-infected (E−) Bromus auleticus plants, and two soil types collected from agricultural (A) and non-agricultural (NA) fields. Soil fungi were isolated at the beginning of the experiment and 12 months after the introduction of B. auleticus, and tested for their inorganic P (Pi)-solubilizing capability. Arbuscular mycorrhizal colonization in B. auleticus roots of E+ and E− plants was also analyzed. PSF abundance was affected by the endophytic status and by the type of soil; the highest value was detected in the E−NA treatment, followed by the E+A treatment. PSF diversity was higher in NA than in A soils and higher in soils treated with E+ than in those treated with E−. Arbuscular mycorrhizal fungi colonization was higher in E+ plants. We hypothesize that the positive association between Epichloë endophytes and mycorrhizal fungi with an increase in the PSF diversity would generate an increase in the phosphorus (P) available to plants. Fil: Arrieta, Alejandro Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Iannone, Leopoldo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Scervino, Jose Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente. Universidad Nacional del Comahue. Centro Regional Universidad Bariloche. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente; Argentina Fil: Vignale, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Novas, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina

Las plantas a menudo establecen múltiples asociaciones simbióticas simultáneas con diferentesmicroorganismos; sin embargo, la forma en que cada simbionte afecta a los otros simbiontes y losefectos de estas múltiples interacciones en la productividad de las plantas hospedantes no son bienentendidos. Esta tesis está centrada en contribuir al conocimiento de las interacciones multitróficas entregramíneas nativas y endofitos Epichloë. Particularmente, está dirigida a la caracterización de latriple asociación mutualista entre gramíneas, endofitos y hongos formadores de micorrizasarbusculares (HMA) y a establecer los mecanismos que expliquen la correlación positiva observadaentre la presencia de endofitos Epichloë y la colonización de gramíneas nativas por HMA. Se realizaron ensayos in vitro, donde se analizó el efecto de los exudados de endofitos y deplantas infectadas con endofitos (E+) y no infectadas (E-) sobre la fase extramatrical de los HMA. Seestudiaron, en invernadero, el efecto de exudados de endofitos sobre la micorrización y laproductividad vegetal en plantas de Bromus auleticus libres de endofitos (E-) y en plantas vecinasagronómicamente seleccionada: Lolium multiflorum (E+ y E-). Se analizaron, a campo, el efectosimultáneo en simbiosis de los endofitos y los HMA sobre el desarrollo vegetativo y otros caracteresde interés agronómico de gramíneas nativas como Bromus auleticus, seleccionadasagronómicamente: Lolium multiflorum y Schedonorus arundinaceus y sobre una gramínea libre deendofitos en la naturaleza: Bromus catharticus. Este plan comprende estudios básicos para el futuro aprovechamiento y manejo tecnológico dela triple simbiosis mutualista que se relacionan con el mejoramiento de pastos para el forraje yproductividad vegetal. Plants often establish multiple simultaneous symbiotic associations with different microorganisms;however, the way in which each symbiont affects the other symbionts and the effects ofthese multiple interactions on plant performance are not well understood. This thesis is focused on contributing to the knowledge of multitrophic interactions between nativegrasses and Epichloë endophytes. Particularly, it is directed to the characterization of the triplemutualist interaction between grasses, endophytes and arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and toestablish mechanisms that explain the observed positive correlation between the presence of Epichloë endophytes and the colonization of native grasses by HMA. In vitro tests where the effect of endophytes exudates and from infected (E+) and endophytefree plants (E-) on the AMF extramatrical phase were performed. Greenhouse experiments were also performed to study the effect of endophyte exudates on themycorrhization and plant productivity of uninfected (E-) Bromus auleticus and Lolium multiflorum (ryegrass) (E+ and E-) (agronomically selected). We performed field trials to study the simultaneous effect of symbiotic endophytes and AMF onthe vegetative development and other traits of agronomic interest of native grasses as Bromusauleticus, agronomically selected as Lolium multiflorum and Schedonorus arundinaceus andendophytE-free grass in nature: Bromus catharticus. This plan includes basic studies for the future development and technological management of atriple mutualistic symbiosis that relate to the improvement of pastures for forage and plantproductivity. Fil: Vignale, María Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Background and aims: Plants often establish multiple simultaneous symbiotic associations with different micro-organisms; however, the way in which each symbiont affects the other symbionts and the effects of these multiple interactions on plant performance are not well understood. The aim of this study was to evaluate how two different asexual Epichloë species modulate the establishment of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) in a wild forage grass under different soil fertilization levels. Methods: We performed a completely randomized 12-month-long field experiment to evaluate the effect of two B. auleticus-endophyte ecotypes and two soil fertilization levels on the colonization of AMF, in seedlings and adult plants. Plant biomass and reproductive tillers production were also measured. Results: The symbiosis, measured as the total extent of AM fungal colonization and frequency of arbuscules was significantly higher in Epichloë-infected plants and was not affected by fertilization either in seedlings or in adult plants. Plant biomass was increased by fertilization but no differences were observed due to the endophytic status. However, E+ plants produced more panicles than their E− counterparts. Conclusions: Our findings strongly support the hypothesis of positive association between Epichloë endophytes and AMF in wild grasses, making this model important for agronomic improvement. Fil: Vignale, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Iannone, Leopoldo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina Fil: Pinget, Albertina Daniela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Entre Ríos. Estación Experimental Agropecuaria Concepción del Uruguay; Argentina Fil: De Battista, José P.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Entre Ríos. Estación Experimental Agropecuaria Concepción del Uruguay; Argentina Fil: Novas, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Micología y Botánica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Micología y Botánica; Argentina

Las especies asexuales del género Epichloë Tul (Clavicipictaceae, Hypocreales, Ascomycota)establecen simbiosis mutualista con diferentes especies de gramíneas (C3) muchas de ellas deinterés agronómico. El objetivo de esta tesis fue evaluar el efecto de las simbiosis entre gramíneas nativas y endofitosasexuales Epichloë sobre la diversidad fúngica de la rizósfera. Se postuló que la simbiosis Bromus auleticus – Epichloë pampeana modificaría la estructura de lacomunidad del suelo debido a que los endofitos producen metabolitos en el interior de la planta loscuales son excretados por el sistema radical. Para poner a prueba la hipótesis, se realizó un ensayo en vivero con diversos tiempos de muestreoen el cual se evaluaron diferentes parámetros. Semillas de B. auleticus asociadas (E+) o noasociadas (E-) a E. pampeana fueron sembradas en macetas con dos tipos de suelo (Agronómicoy No Agronómico). Se evaluó el efecto de la interacción gramínea-endofito y del uso agronómicodel suelo mediante identificación por análisis macro y micromorfológico, metagenómico y cultivo enmedios selectivos. La presencia de E. pampeana en las plantas de B. auleticus se asoció con un aumento de ladiversidad de hongos saprobios de la rizósfera, un aumento del porcentaje de micorrización, ysumado a esto, un incremento de la diversidad de los hongos micorrícicos en suelos No Agronómico. También se evidenció un incremento de especies micorrícicas con mayor capacidadpara movilizar fósforo (P), en asociación a plantas E+ en comparación a las E-, en muestras desuelo Agronómico. No se detectó un efecto significativo del estatus endofítico ni de los suelossobre la cantidad de hongos solubilizadores de P, pero si se observó un efecto sobre su diversidadatribuible a la introducción de B. auleticus. En cuanto a su rol defensivo frente a especies parásitasy/o potenciales patógenos, no se observaron deferencias entre los diferentes tratamientos encuanto al porcentaje de colonización de las raíces por Chytridiomycetes, pero si se detectó unaumento en el porcentaje de mortalidad de plantas E- de B. auleticus en comparación a las E+. Los resultados obtenidos en ésta tesis ponen en evidencia el efecto de los endofitos asexuales Epichloë en el entorno en el que se desarrolla su hospedante, lo cual señala la relevancia de estemodelo para el estudio no sólo de la simbiosis planta-endofito sino también de múltiplesinteracciones, con el valor agregado de ser B. auleticus una gramínea nativa de interésagronómico. Asexual species of the genus Epichloë Tul (Clavicipitaceae, Hypocreales, Ascomycota) establishmutualistic symbiosis with different species of C3 grasses, many of them of agronomic interest. Theaim of this work was to evaluate the effect of the symbiosis established between native grasses andasexual Epichloë endophytes on the fungal diversity of the rhizosphere. It was postulated that the symbiosis Bromus auleticus – Epichloë pampeana could modify thestructure of the soil community as endophytes produce metabolites within the plant which areexcreted by the root system. To test this hypothesis, a greenhouse assay was conducted in with different sampling times, inwhich different parameters were evaluated. Seeds of B. auleticus associated (E+) or not (E-) with E.pampeana were sown in pots with two different soil types (Agricultural and Non- Agricultural). Theeffect of the interaction grass - endophyte and the agronomical management of soil was evaluatedthrough identification by clasical taxonomic techniques, high-throughput analysis and cultivation onselective media. The presence of E. pampeana in plants of B. auleticus was associated with an increase in thediversity of saprobe fungi in the rhizosphere, in the percentage of mycorrhizal colonization, andalso, in the diversity of mycorrhizal fungi in Non Agricultural soil. In addition, an increase wasevidenced on mycorrhizal species with a greater capacity to mobilize phosphorus (P) in E+ plants incomparison to E-, in Agricultural soil samples. However, it was not detected a significant effect ofthe association nor the soils used over the P solubilizing fungi amount. But it did was observed anincrease in its diversity, attributable to the introduction of B. auleticus. Regarding the defensive roleagainst parasitic species and/or potential pathogens, although no significant differences on thepercentage of root colonization by Chytridiomycetes were found between the different treatments, itwas detected a significant increase in the mortality percentage of B. auleticus E- plants ofcompared to E +. The results obtained in this thesis highlight the effect of Epichloë asexual endophytes in theenvironment where the host develops , which indicates the relevance of this model for the study notonly of the symbiosis established between plant-endophytes but also for multiple interactions,combined with the agronomic interest B. auleticus a native grass. Fil: Arrieta, Alejandro Matías. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Bromus auleticus (cebadilla chaqueña) es considerada uno de los recursos forrajeros más promisorios del Cono Sur. Presenta variación entre poblaciones que ha sido determinada para diversos caracteres vegetativos, lo cual podría traducirse en diferencias de producción y calidad de forraje. El objetivo del presente estudio fue evaluar dos procedencias de cebadilla chaqueña (Argentina y Uruguay) para biomasa acumulada e indicadores de calidad nutritiva en dos períodos del año (verano-otoño y otoño-primavera). Se compararon cinco clones uruguayos (U) y cinco argentinos (A), dispuestos al azar en surcos distanciados a 1 m entre sí, con 10 plantas cada uno. Se determinó biomasa acumulada por planta (B) y calidad, midiendo Fibra Detergente Neutra (FDN), Proteína Bruta (PB) y Digestibilidad de la Materia Seca (DMS) en dos momentos del año. En general, la biomasa fue de baja calidad debido al momento en que se realizaron los cortes, lo que limita el alcance de los resultados. Sin embargo, las diferencias observadas entre los clones en este estado de desarrollo podrían indicar la existencia de variación entre genotipos de cebadilla chaqueña U y A en biomasa y calidad nutritiva. En biomasa acumulada no se observó efecto significativo de origen. En todas las variables de calidad evaluadas en verano-otoño, se encontraron diferencias significativas entre orígenes. En otoñoprimavera, las diferencias entre orígenes fueron significativas para DMS. Los clones U presentaron mayor PB, menor FDN y mayor DMS. Dentro de cada origen, los argentinos presentaron menos diferencias que los uruguayos, tanto en biomasa acumulada como en calidad. Para ninguno de los clones A o U se encontró coincidencia entre mayor biomasa y mayor calidad. Bromus auleticus (“chaqueña” bromegrass) may be considered as one of the most valuable forage species for the Southern Cone. This species shows variation among populations, determined in diverse vegetative characters, which could result in differences in production and forage quality. The objective of this study was to evaluate two origins of Bromus auleticus (Argentina and Uruguay) for characters of biomass accumulated and quality in two periods of the year (Summer-Autumn and Autumn-Spring). Five Uruguayan (U) and Argentine (A) clones were compared, it were randomly arranged in rows spaced one meter of each other, with 10 plants each one. Biomass accumulated per plant (B) and biomass quality were determined in two times of the year measuring neutral detergent fiber (NDF), crude protein (CP) and dry mater digestibility (DMD). In general, quality of biomass was poor due to time cuttings, limiting the scope of the results. However, differences between the clones in this stage of development could be indicating the presence of variation among genotypes of “chaqueña” prairie grass U and A in biomass and nutritional quality. Significant effect of origin for B was not observed. In all biomass quality variables evaluated in Summer-Autumn, significant differences between origins were found. In Autumn-Spring, differences between origins were significant in DMD. U clones showed more CP, less NDF and higher DMD. Within each origin, A showed less differences than U both in B and quality. Concerning A or U clones, no coincidence between high biomass and high quality was found. EEA Anguil Fil: Bustamante, E.G.R. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina Fil: Ruiz, Maria de Los Angeles. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; Argentina. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina Fil: Morici, Ernesto Francisco. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Agronomía; Argentina Fil: Babinec, Francisco Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; Argentina. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Agronomía; Argentina Fil: Pordomingo, Adriana Beatriz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Anguil; Argentina. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Bromus auleticus é uma espécie perene, nativa do estado do Rio Grande do Sul, que tem demonstrado adaptabilidade, potencial para produção de forragem de qualidade e alta diversidade morfológica. Neste trabalho, foram analisados padrões de bandas de sistemas enzimáticos e de marcadores RAPD, com o objetivo de determinar a variabilidade genética em 16 acessos de Bromus auleticus do Rio Grande do Sul. A variabilidade foi avaliada pelo índice de similaridade de Jaccard, utilizando-se o método UPGMA nas análises de agrupamento. Os índices de similaridade variaram de 0,0 a 0, 50 com base em isoenzimas e de 0,15 a 0,71 com base em marcadores RAPD. Os dados foram eficientes para a formação de grupos, indicando a variabilidade genética dos acessos analisados. Entretanto, houve baixa relação entre os agrupamentos e os locais de coleta. A variabilidade genética dos acessos é importante sob o ponto de vista do melhoramento genético, permitindo a seleção futura dos genótipos a partir de seus respectivos desempenhos. A utilização simultânea de isoenzimas e RAPD foi eficiente na caracterização da diversidade genética dos acessos analisados. Bromus auleticus is a perennial, native species of the state of Rio Grande do Sul, which has demonstrated adaptability, potential yield of good quality forage as well as high morphological diversity. This work has analyzed band patterns from enzymatic systems and RAPD markers, with the objective to access the genetic variability in 16 accessions of Bromus auleticus from Rio Grande do Sul. The variability was evaluated using Jaccard similarity index. The method of grouping based on the average (UPGMA) was used in cluster analyses. The similarity index ranged from 0.0 to 0.50 using isozumes and from 0.15 to 0.71 using RAPD markers. The data have been efficient for the formation of different groups, indicating the genetic variability of the accession analyzed. However, these groupings have little relationship with the respective collecting places. The genetic variability of the accessions is important to the genetic improvement, allowing future genotype selection based on their respective performances. The simultaneous utilization of isozymes and RAPD was efficient in characterizing the genetic diversity of the accessions evaluated.

The chromosome number of 14 accessions of Bromus auleticus Trin. ex Nees, native of Rio Grande do Sul, was 2n = 6x = 42, same ploidy level found in other South-American Bromus species. Its chromosomes were metacentric or submetacentric, ranging from ca. 4 mm to ca. 8 mm in length. Up to two satellite-bearing chromosome pairs were sometimes observed. However, as already reported for other species, the high symmetry and homogeneity of the karyotypes made it difficult to detect possible intraspecific differences.