1. CircOMA1调控多巴胺受体促进泌乳素瘤耐药性
- Author
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张译尹, 吴娜, 李雪莉, 胡斌, 吴欣仪, and 朱永红
- Subjects
circOMA1 ,泌乳素瘤 ,耐药 ,miR-145-5p ,Medicine (General) ,R5-920 - Abstract
目的探究环状RNA hsa_circ_0002316(circOMA1)是否参与泌乳素瘤耐药调控及其作用机制是什么。方法通过RT-qPCR检测临床泌乳素瘤标本中circOMA1表达情况(5例敏感泌乳素瘤标本和12例耐药泌乳素瘤标本)。通过慢病毒载体构建稳定表达外源性circOMA1 MMQ细胞系模型进行体外实验,分为MMQ NC组及MMQ OMA1组。通过构建裸鼠皮下肿瘤模型进行体内实验,分为MMQ NC+卡麦角林(CAB)组、MMQ NC+溴隐亭(BRC)组、MMQ OMA1+CAB组、MMQ OMA1+BRC组。通过CCK8、Western blot、ELISA等表型实验检测circOMA1对耐药机制中的细胞增殖和泌乳素(PRL)分泌两个方面的影响。通过Western blot、ELISA、免疫组化等实验检测circOMA1对多巴胺受体表达的影响。通过TargetScan、CircInteractome等软件分析预测、 microRNA-145-5p(miR-145-5p) minic补救实验探究circOMA1调控多巴胺受体机制。结果RT-qPCR结果显示多巴胺受体激动剂(DAs)耐药泌乳素瘤中circOMA1表达升高(P<0.01)。在细胞实验及裸鼠皮下肿瘤实验中,与MMQ NC组相比,MMQ OMA1组DAs敏感性降低,细胞增殖水平和泌乳素分泌水平升高(P<0.05)。Western blot和免疫组化结果显示,MMQ OMA1组多巴胺2型受体(DRD2)表达下调,多巴胺5型受体(DRD5)表达上调,环3’,5’-单磷酸腺苷(cAMP)水平上调(P<0.05)。此外,在MMQ OMA1组中miR-145-5p表达下调,kelch重复序列和BTB结构域蛋白7(KBTBD7)mRNA及蛋白表达水平上调(P<0.05),然而MMQ OMA1组转染miR-145-5p minic后,KBTBD7表达下调,DRD2表达上调(P<0.05),表明过表达miR-145-5p逆转了circOMA1对KBTBD7的促进作用。结论circOMA1通过miR-145-5p/KBTBD7轴下调DRD2表达,降低泌乳素瘤对DAs敏感性,并且调控多巴胺受体表达激活cAMP通路促进泌乳素合成释放,从而促进泌乳素瘤耐药性。
- Published
- 2022
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