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The objective of this study was to analyze different immunoglobulins classes (IgG, IgM, IgE and IgA) against Cysticercus cellulosae in the cerebrospinal fluid (CSF), through enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), correlating them to clinical and tomographic profiles in patients with neurocysticercosis (NCC). Eighty-five specimens of CSF were obtained from 43 cases with NCC (26 with the active form and 17 with the inactive form) and from 42 patients with other neurological diseases. The inactive form of NCC presented a profile in CSF similar to the group without NCC. The active form of NCC presented elevation of specific immunoglobulins (IgG, IgM, IgE, and IgA) in decreasing order, with the highest values being detected among the cases with intraventricular cysts, or with inflammation signs in CSF or in those with multiple clinical manifestations. The highest sensitivity and specificity were obtained with ELISA-IgG (88.5% and 93.2%, respectively). This study confirmed the importance of ELISA in the immunologic diagnosis of NCC. Este estudo teve como objetivo analisar diferentes classes de imunoglobulinas (IgG, IgM, IgE e IgA) contra Cysticercus cellulosae no líquido cefalorraquiano (LCR), através de ensaio imunoenzimático (ELISA), correlacionando-as com elementos clínicos e tomográficos de pacientes com neurocisticercose (NCC). Foram estudados 85 espécimes de LCR de pacientes, sendo 43 casos com NCC (26 casos com a forma ativa e 17 com a forma inativa) e 42 pacientes portadores de outras doenças neurológicas. A forma inativa de NCC apresentou perfil imunológico no LCR semelhante ao grupo sem NCC. Por outro lado, a forma ativa da NCC apresentou elevação de imunoglobulinas específicas (IgG, IgM, IgE e IgA em ordem decrescente), com os maiores valores registrados entre os casos com cistos intraventriculares ou com sinais de inflamação no LCR ou naqueles com manifestações clínicas múltiplas. A máxima sensibilidade e especificidade foi obtida na reação ELISA-IgG (88,5% e 93,2% respectivamente). Este estudo reafirmou o papel do ELISA no diagnóstico imunológico da NCC.

Resumo não disponível.

We detected the cytokines interleukin-6 (IL-6) and granulocyte macrophage-CSF (GM-CSF) by ELISA in the CSF and serum of 30 HIV-infected patients classified as AIDS dementia complex (ADC), and 20 subjects with other neurological diseases (OND). We have found a high incidence of detectable IL-6 and GM-CSF in the CSF of ADC patients compared with OND patients. No statistical differences were observed between both groups for serum IL-6 and GM-CSF levels. These results suggest an intrathecal synthesis of these cytokines and a possible involvement in the pathogenesis of ADC.

Foi desenvolvido um protocolo de PCR para analisar os principais patógenos que infectam o sistema nervoso central (SNC). Foram testadas 383 amostras de líquido-cefalorraquidiano (LCR), para detecção de: adenovirus, Borrelia burgdorferi, enterovirus, vírus Epstein Barr , citomegalovírus, vírus herpes simplex, herpes humano tipo 6, vírus JC, Leptospira interrogans, Listeria monocytogenes, vírus da coriomeningite linfocitária, vírus do sarampo, vírus da caxumba, Mycobacterium sp, Mycoplasma pneumoniae, Toxoplasma gondii e vírus da varicela zoster. Das 383 amostras de LCR testadas a PCR foi positiva em 46 (12,0%). Os microrganismos detectados foram: citomegalovírus, enterovirus, vírus Epstein Barr , herpes simplex, herpes humanao tipo 6, vírus JC, Listeria monocytogenes, Mycobacterium sp, Toxoplasma gondii e varicela zoster. A introdução da técnica de PCR através de um protocolo para análise do LCR otimizou o diagnóstico etiológico das infecções do SNC e tem se revelado um instrumento de grande potencial diagnóstico. Estudos futuros necessitam ser realizados para melhor avaliar os resultados da PCR em pacientes imunocomprometidos e assim determinar o valor preditivo positivo deste ensaio neste grupo de pacientes. A protocol for testing cerebrospinal fluid specimens using a range of PCR assays for the diagnosis of central nervous system infection was developed and used to test prospectively 383 specimens. PCR assays were used for the detection of adenovirus, Borrelia burgdorferi, enteroviruses, Epstein Barr virus, cytomegalovirus, herpes simplex virus, human herpes virus type 6, JC virus, Leptospira interrogans, Listeria monocytogenes, lymphocytic choriomeningitis virus, measles virus, mumps virus, Mycobacterium sp., Mycoplasma pneumoniae, Toxoplasma gondii and varicella zoster virus. Of the 383 specimens tested in this study, 46 (12.0%) were found to be positive. The microorganisms detected were CMV, enterovirus, Epstein Barr virus, herpes simplex virus, human herpes virus type 6, JC virus, L. monocytogenes, Mycobacterium genus, Toxoplasma gondii and varicella zoster virus. The introduction of the PCR protocol described has improved the diagnosis of a range of central nervous system infections in our laboratory. We believe however that further evaluation of these assays in immunocompromised patients is necessary to better determine the predictive value of positive PCR results in these patient groups.

The demonstration of intrathecal IgG synthesis has been used as an important laboratory parameter to support the diagnosis of multiple sclerosis(MS). The Committee for European Concerted Action for Multiple Sclerosis has recommended a protocol for the assessment of intrathecal IgG synthesis. We applied this methodology to determine the cerebrospinal (CSF) profile of 128 Brazilian patients with MS. We detected hypercytosis lower than 35 cells/mm3 in 97%, protein lower than 80mg/dl in 99%, normal blood-CSF barrier function in 76%, increased IgG local production around 53% and oligoclonal IgG bands by isoelectric focusing in 85% of the definite MS patients. The diagnostic accuracy of the quantitative analysis was lower than the qualitative. The detection of oligoclonal bands was especially important in the cases of normal quantitative assays of IgG. In addition, we found a lower frequency of inflammatory reaction in CSF in our MS cases, in comparison to some European studies. A demonstração da síntese intratecal de IgG tem sido usada como importante parâmetro de apoio laboratorial ao diagnóstico de esclerose múltipla (EM). O Comitê Europeu de Ação para Esclerose Múltipla recomenda um protocolo para avaliação de síntese intratecal de IgG. Esta metodologia foi utilizada para determinar o perfil do líquido cefalorraquidiano (LCR) de 128 pacientes com o diagnóstico de esclerose múltipla. Verificou-se pleocitose menor do que 35 células/mm3 em 97%, produção local de IgG por métodos quantitativos em 53% e presença de bandas oligoclonais em 85% dos casos de EM clinicamente definida. A análise qualitativa apresentou maior acurácia diagnóstica do que a avaliação quantitativa de IgG. A detecção de bandas oligoclonais foi especialmente importante nos casos de analise quantitativa de IgG. Observamos menor frequência de reação inflamatória no LCR, em relação aos estudos europeus.

Orientador: Claudio Lucio Rossi Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: A cisticercose é considerada um importante problema de saúde pública em países da Ásia, África e América Latina. Na América Latina, freqüências elevadas desta doença têm sido registradas no México, Peru, Chile e Brasil. A doença é causada pela infecção com o estágio larval (Cysticercus cellulosae) do parasita Taenia solium. Isto ocorre através da ingestão de alimentos contaminados por fezes, contendo ovos de T. solium, de auto-infecção fecal-oral ou de auto-infecção por peristalse reversa. A forma embrionária do parasita penetra a mucosa intestinal, cai na corrente sangüínea, migrando, principalmente, para músculo esquelético, tecido subcutâneo, olhos e sistema nervoso central (SNC). Quando os cisticercos estão presentes no SNC (neurocisticercose), dependendo do número, localização e estágio de desenvolvimento, podem causar sintomatologia extremamente severa. As manifestações clínicas da neurocisticercose são variadas e inespecíficas. Assim, o diagnóstico definitivo deve ser sempre considerado em um contexto epidemiológico e confirmado por dados laboratoriais e de imagem. As técnicas de neuroimagem, tais como a tomografia computadorizada e a ressonância magnética nuclear, além de permitirem um diagnóstico mais preciso da neurocisticercose, têm contribuído para uma melhor compreensão dos processos patofisiológicos da infecção. Entretanto, devido ao seu alto custo, as técnicas de imagem são, praticamente, inacessíveis para países em desenvolvimento, onde a incidência da doença é bastante elevada. A pesquisa de anticorpos anti - C. cellulosae em amostras de líq~ido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com suspeita clínica de neurocisticercose tem sido muito utilizada para o diagnóstico da infecção. No presente estudo, é descrita uma técnica imunoenzimática (ELISA) quantitativa para o imunodiagnóstico da neurocisticercose. A técnica de ELISA foi padronizada usando uma fIação purificada (FPC I) de um extrato bruto de C. cellulosae, obtida por meio de cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-Sephacel. Em um estudo comparativo, a técnica quantitativa de ELISA usando a fração FPC I (ELISA-FPC) e uma técnica de ELISA qualitativa padronizada com um extrato bruto de C. cellulosae (ELISA-EBCC) foram usadas para a pesquisa de anticorpos IgG anti - C. cellulosae em amostras de LCR de 57 pacientes com neurocisticercose e 50 pacientes com infecções heterólogas (neurosIfilis, neurotoxoplasmose, neurocriptococose, esc1erose múltipla e meningites bacteriana e viral). As duas técnicas de ELISA apresentaram sensibilidade de 95% , enquanto que as especificidades obtidas com as técnicas ELISA-FPC e ELISA-EBCC foram de 100% e 92%, respectivamente. O bom desempenho, em tennos de sensibilidade e especificidade, aliado ao baixo custo, indicam que a técnica ELISA-FPC pode ser de grande utilidade para o imunodiagnóstico da neurocisticercose Abstract: Cysticercosis is an important health problem in many Asia, Mrica and Latin America countries which have inadequate sanitary conditions, as well as in some industrialized nations with a high immigrant population from disease-endemic areas. In South America, high frequencies of this disease have been reported in Peru, Chile and Brazil. Cysticercosis is caused by infection with the larval form (cysticercus) of the tapeworm Taenia solium. The cysticerci may be located in areas where they produce no symptoms, such as musc1e or cutaneous tissues. On the other hand, the presence of cysticerci in the central nervous system (CNS), a condition known as neurocysticercosis, can cause seizures and other neurological problems. The clinical signs and symptoms of neurocysticercosis are variable and non-specific, leading to different neurological and psychiatric diagnoses. Thus, a definitive diagnosis of neurocysticercosis should always be considered in an epidemiological context and confirmed by laboratory and neuroimaging data. The methods used for diagnosing neurocysticercosis include neurOlmagmg techniques (computed tomography and nuclear magnetic resonance) and cerebrospinal fluid (CSF) ~alysis. Neuroimaging techniques have contributed to a more accurate diagnosis and a better understanding of the pathophysiology of neurocysticercosis. However, because of their high cost and restricted availability, these procedures may be of limited use in developing countries with high rates of infection. The detection of specific antibodies against Cysticercus cellulosae antigens in CSF samples from patients suspected of having neurocysticercosis is a useful tool for diagnosing the disease, especially when neuroimaging techniques are not available or inconclusive. In the present study, a quantitative '"oenzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the immunodiagnosis of neurocysticercosis is described. The ELISA was standardized using a purified C. cellulosae fraction (PCF I) obtained by ion exchange chromatography. The ELISA using PCF I (PCF-ELISA) and a a qualitative ELISA using a whole extract from C. cellulosae (WECC-ELISA) were used to screen for Cysticercusspecific IgG antibodies in cerebrospinal fluid (CSF) samples from 57 patients with neurocysticercosis and 50 patients with heterologous infections. The sensitivity of both assays was 95%, whereas the specificities of PCF-ELISA and WECC-ELISA were 100% and 92%, respectiveIy. The excellent sensitivity and specificity of the PCF-ELISA malce this assay a potentially useful tool in screening for antibodies against C. cellu/osae Mestrado Mestre em Ciências Médicas

Nove crianças portadoras de coleção subdural (CSD) foram tratadas por meio de derivação subduro-peritoneal. Todas foram submetidas a controle com tomografia computadorizada do encéfalo. O tamanho da coleção subdural foi avaliado por medida de sua área no corte tomográfico por meio de morfologia quantitativa com planímetro. Ocorreu regressão completa ou quase completa da CSD em oito pacientes. Os resultados funcionais foram excelentes em quatro pacientes, bons em três e maus em dois. Foi feita uma revisão da fisiopatologia e do tratamento da CSD na criança. Nine children harboring subdural effusions were treated by subduro peritoneal shunt. These patients were followed-up by CT scans. The area of the subdural effusions was measured by quantitative morphology with a planimeter. With the surgical treatment, the subdural effusion disappeared completely or near completely in 8 patients. The patient's functional state were excellent in 4, good in 3 and bad in 2 in the postoperative follow-up. We aldo reviewed the literature as far as the pathophysiology and the treatment of the subdural effusions are concerned.

A barreira hemato-encefálica (BHE) contribui para o isolamento imunológico do sistema nervoso central (SNC). Sua avaliação nunca foi realizada em pacientes submetidos a transplante de medula óssea (TMO). Neste estudo a integridade da BHE foi avaliada através das proteínas do LCR, de forma quantitativa, a fim de observar a incidência e entender a fisiopatologia da doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECH-C) no SNC. Foram estudadas amostras pareadas de LCR e soro de 33 pacientes com leucemia mielóide crônica submetidos a TMO alogênico, de doador aparentado, HLA idêntico. As amostras foram coletadas nos períodos pré TMO, pós TMO e concomitante à DECH-C. Não foi evidenciada quebra de BHE durante a DECH-C em nenhum dos casos estudados.

O envolvimento da doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECH-C) no sistema nervoso central tem sido especulado. Há uma série de semelhanças clínicas e fisiopatológicas entre DECH-C e doenças auto-imunes, o que leva a questionar sobre a síntese intratecal de imunoglobulinas. Este estudo avalia esta síntese, em particular durante a DECH-C, de forma quantitativa e qualitativa, a fim de observar sua incidência e possível fisiopatologia. Foram estudadas amostras pareadas de LCR e soro de 33 pacientes com leucemia mielóide crônica submetidos a transplante de medula óssea (TMO) alogênico, com doador aparentado, HLA idêntico. As amostras foram coletadas nos períodos pré TMO, pós TMO e concomitante à DECH-C. Não foi evidenciada produção intratecal de IgG ou IgA nas várias fases do TMO. Apenas casos isolados evidenciaram síntese, inclusive de IgM, durante a DECH-C. The central nervous system involvement in chronic graft versus host disease (GVHD) has been suggested. Chronic GVHD resembles auto immune connective tissue disorders. In order to investigate the immunoglobulin intra blood brain barrier (BBB) synthesis during chronic GVHD, and contribute to understanding the pathophysiology of the disease, we studied 33 patients who underwent allogeneic bone marrow transplants (BMT) from HLA identical related donors. Immunoglobulin intra BBB synthesis was investigated quantitative and qualitatively. The samples were collected pre BMT, pos BMT and during chronic GVHD. There were no evidence of immunoglobulin intra BBB synthesis, and no oligoclonal bands were found. Only isolated cases suggested IgG and IgA intra BBB synthesis, and in one case IgM during GVHD.

The detection of IgE is technically difficult because of its reduced concentrations in serum, and even lower concentrations in cerebrospinal fluid (CSF). In the present investigation we studied 86 CSF samples using an immunoenzymatic method with an anti-IgE-alkaline phosphatase conjugate and a fluorigenic substrate. The samples were from three groups: A) 29 patients with neurocysticercosis (NC), B) 36 patients with different neurologic disorders (neurosyphilis, neurotuberculosis, meningitis, tumors, hemorrhage) and C) 21 discharged individuals who had been hospitalized for bacterial meningitis. The results obtained were: A) 0.05 to 3.00 IU/ml (0.76±0.79), B) 0.00 to 1.50 IU/ml (0.23±0.34) and C) 0.05 to 1.25 IU/ml (0.34±0.34). The present results suggest that IgE appears to play a role in the pathogeny of NC and that efforts should be made to standardize a test for the detection of specific IgE antibodies. A detecção de IgE apresenta dificuldades técnicas pela reduzida concentração que se encontra no LCR e no soro. Utilizando método imunoenzimático com conjugado anti-IgE-fosfatase alcalina e substrato fluorigênico, foram estudadas 86 amostras de LCR de três grupos: A) 29 pacientes com NC, B) 36 pacientes com afecções neurológicas diversas (neurossífilis, neurotuberculose, meningites, tumores, hemorragias) e C) 21 indivíduos de pós-alta médica de meningites bacterianas. Os resultados obtidos foram: A) 0,05 a 3,00 Ul/ml (0,76±0,79), B) 0,00 a 1,50 Ul/ml (0,23±0,34) e C) 0,05 a 1,25 Ul/ml (0,34±0,34). Os resultados obtidos sugerem que a IgE parece ter papel na patogenia da NC e esforços devem ser feitos para padronização de teste para detecção de anticorpos IgE específicos.

A barreira hemato-encefálica (BHE) contribui para o isolamento imunológico do sistema nervoso central (SNC). Sua avaliação nunca foi realizada em pacientes submetidos a transplante de medula óssea (TMO). Neste estudo a integridade da BHE foi avaliada através das proteínas do LCR, de forma quantitativa, a fim de observar a incidência e entender a fisiopatologia da doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECH-C) no SNC. Foram estudadas amostras pareadas de LCR e soro de 33 pacientes com leucemia mielóide crônica submetidos a TMO alogênico, de doador aparentado, HLA idêntico. As amostras foram coletadas nos períodos pré TMO, pós TMO e concomitante à DECH-C. Não foi evidenciada quebra de BHE durante a DECH-C em nenhum dos casos estudados. The blood-brain barrier (BBB) contributes to the central nervous system (CNS) immunological isolation. BBB has never been studied in patients who developed chronic graft-versus-host disease (GVHD) after allogeneic bone marrow transplants (BMT), from HLA identical related donors. BBB disruption was investigated through the cerebrospinal fluid (CSF) proteins, quantitative and graphically, in order to detect the incidence and possible pathophysiology of the CNS involvement in chronic GVHD. Thirty three CSF and matched serum samples from chronic myeloid leukemia patients were collected pre BMT, pos BMT and during chronic GVHD. There was no evidence of BBB disruption in any patient studied.

Introdução: As alterações bioquímicas e celulares observadas no líquido cefaloraquidiano (LCR) no período neonatal exibem amplas variações, o que dificulta o diagnóstico de meningite bacteriana. Entre os marcadores laboratoriais de inflamação aguda, a proteína C reativa (PCR) pode ser utilizada no auxílio do diagnóstico de meningite. Objetivo: Determinar os níveis de PCR em amostras de soro e LCR de recém-nascidos (RNs) com diagnóstico de meningite neonatal. Metodologia: Foram avaliados 48 RNs com diagnóstico de meningite bacteriana e de 37 RNs com sepse tardia sem meningite associada atendidos na Unidade Neonatal do Hospital Universitário de Londrina, Paraná. A dosagem da PCR no soro foi realizada por imunoturbidimetria e no LCR por imunonefelometria ultra-sensível. Resultados: Os níveis de PCR entre os RNs com meningite bacteriana variaram de 0,4 a 170mg/L (média 35,1 ± 40,2 e mediana 22,5) no soro e de 0,0 a 10,8mg/L (média 1,1 ± 2,0 e mediana 0,5) no LCR. Em 27/38 (71,0%) pacientes com meningite bacteriana e em 14/29 (48,3%) com sepse tardia, houve elevação dos níveis de PCR no LCR(p=0,0580). Porém, quando os valores de PCR no soro e no LCR foram categorizados (40mg/L para o soro e 4 mg/L para o LCR), não houve diferença entre os dois grupos (p=0,1375 e p=0,1645, respectivamente). Conclusão: A elevação da PCR no LCR sugere a presença de meningite bacteriana; porém, a passagem da PCR sérica pela barreira hematoencefálica em RNs com meningite bacteriana e em RNs com sepse sem meningite limita a sua utilização como marcador laboratorial de diagnóstico de meningite neonatal.

Relatamos o caso de um paciente, de 28 anos, portador de nevo melanocítico gigante congênito(NMGC), com transformação em melanoma e metastátase no sistema nervoso central (SNC). Descrevemos resumidamente as características patológicas de ambas as lesões(NMGC e melanoma), a frequência de malignização do NMGC, os órgãos mais frequentemente acometidos pelas metastases do melanoma - dando ênfase ao acometimento do SNC - além dos fatores que podem levar à malignização do NMGC, os exames usados para o diagnóstico das metástases no SNC - ressaltando a importância do líquido cefalorraquiano - e algumas modalidades terapêuticas para o melanoma com acometimento do SNC. We describe the case of a 28-year-old man with a giant congenital melanocytic nevus (GCMN) with malignant transformation to melanoma and metastasis on the central nervous system (CNS). We also make a summary of the pathological features from both lesions(GCMN and melanoma), the occurrence of malignancy of GCMN, the organs more frequently involved with metastatic melanoma - with emphasis to involvement of CNS -just as the factors that cause malignant transformation of GCMN; the methods to diagnose metastases in CNS - emphasizing the importance of cerebrospinal fluid - and some therapeutical modalities for the metastatic melanoma in CNS. UNIFESP-EPM UNIFESP, EPM SciELO

Cerebrospinal fluid (CSF) and serum of 17 patients with HAM/TSP (HTLV-I associated myelopathy/ tropical spastic paraparesis), six with multiple sclerosis and six with idiopathic epilepsy (non inflammatory control) from Brazil were analysed for the presence of intrathecal synthesis of virus-specific antibodies against measles, rubella, varicella zoster virus and herpes simplex virus by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). All HAM/TSP and multiple sclerosis cases had an intrathecal immune response (oligoclonal IgG). In HAM/TSP, only 1/17 case showed a polyspecific intrathecal immune response against measles and rubella virus. In multiple sclerosis, specific antibodies against measles and rubella (MRZ response) were observed in all patients but not in the control with idiopathic epilepsy. The diagnostic and theoretical relevance of mono- and polyspecific immune responses is discussed for these chronic neurological diseases. Amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) e soro de 17 pacientes brasileiros com HAM/TSP, seis com esclerose múltipla e seis com epilepsia idiopática (controle não-inflamatório) foram analisadas para a presença de anticorpos para os vírus do sarampo, rubéola, varicela zoster e herpes simples pelo método de ELISA. Todos os casos de HAM/TSP e esclerose múltipla tinham resposta imune intratecal (IgG oligoclonal). Somente 1/17 casos de HAM/TSP apresentavam resposta imune poliespecifica intratecal para sarampo e rubéola. Anticorpos específicos para sarampo e rubeola (resposta MRZ) foram observados em todos os pacientes com esclerose múltipla, mas não nos controles com epilepsia idiopática. A relevância das respostas poliespecifica e monoespecifica é discutida para essas doenças neurológicas crônicas.

Os autores apresentam o estudo de oito pacientes com neurocisticercose encefálica no Estado do Rio Grande do Norte. Fazem comentários sobre a incidência da parasitose e referem as convulsões como o achado clínico mais freqüente, seguido pela cefaléia. O exame neurológico foi anormal em cinco dos oito pacientes. O diagnóstico foi baseado em achados da tomografia computadorizada em sete pacientes e do líquido cefalorraquidiano em três. The authors present the study of eight patients with cysticercosis of the central nervous system observed in the State of Rio Grande do Norte, Brazil. They comment about the frequency of the diasease. Seizures were present in six patients and headache in four. The neurologic examination was abnormal in Five patients. The'diagnosis was based on computed tomography findings in seven patients, and on cerebrospinal fluid findings in three.

Cefaléia por hipotensão do líquido cefalorraquidiano é condição frequente na prática clínica. O diagnóstico e o tratamento não oferecem dificuldades. O autor descreve um caso com a forma espontânea da síndrome e discute aspectos clínicos e fisiopatológicos. Headache associated with low spinal fluid pressure is a common clinical feature of ease management. The author reports a case with spontaneous cerebrospinal fluid hypotension, and discuss clinical aspects and pathophysiological mechanisms of this entity.

We analysed sera and cerebrospinal fluid (CSF) of 20 cases of human T-cell lymphotropic virus type (HTLV-I) associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP) from Brazil and Iran and as controls, 16 Brazilian HTLVI seronegative individuals afflicted with other neurological diseases. It was observed in the HAM/TSP patients that: 1) all had an inflammatory reaction within the central nervous system (CNS); 2) 95% (19/20) showed oligoclonal bands reflecting intrathecal IgG synthesis; 3) 85% (17/20) presented a local synthesis of HTLVI antibodies; 4) 35% (7/20) had a measurable immunoglobulin (Ig) synthesis within the CNS. The CSF parameters of the HAM/TSP were compared with the clinical data (age at onset, duration of disease and disability level). Our data prove that CSF analysis is important for the diagnosis of HAM/TSP. There is no association between the severity of the disease and CSF findings. Foram analisadas amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) e plasma de 20 pacientes com mielopatia associada ao HTLV-I (HAM/TSP) provenientes do Brasil e Irã e como controle, 16 de indivíduos brasileiros soronegativos para HTLV-I acometidos por outras doenças neurológicas (esclerose múltipla, epilepsia idiopática e mielopatia de etiologia desconhecida). Observou-se no grupo de pacientes com HAM/TSP: 1) reação inflamatória no SNC em todos os casos; 2) 95% (19/20) mostravam bandas oligoclonais refletindo síntese intratecal de IgG no SNC; 3)85% (7/20) apresentavam síntese local de anticorpos para HTLV-I; 4)35% (tinham síntese mensurável de imunoglobulinas no SNC. Os parâmetros do LCR dos pacientes com HAM/TSP foram comparados aos dados clínicos (idade de início, duração da doença e grau de incapacidade). Os dados apresentados neste estudo indicam a importância da analise do LCR para diagnóstico de HAM/TSP. Entretanto nenhuma associação entre a gravidade da doença e os achados do LCR foi demonstrada.

We detected the cytokines interleukin-6 (IL-6) and granulocyte macrophage-CSF (GM-CSF) by ELISA in the CSF and serum of 30 HIV-infected patients classified as AIDS dementia complex (ADC), and 20 subjects with other neurological diseases (OND). We have found a high incidence of detectable IL-6 and GM-CSF in the CSF of ADC patients compared with OND patients. No statistical differences were observed between both groups for serum IL-6 and GM-CSF levels. These results suggest an intrathecal synthesis of these cytokines and a possible involvement in the pathogenesis of ADC. Detectamos as citocinas interleucina-6 (IL-6) e granulócito-macrófago-CSF (GM-CSF) por ELISA no LCR e soro de 30 pacientes infectados por HIV classificados como tendo AIDS-demência complexo (ADC) e de 20 pacientes com outras doenças neurológicas (OND). Encontramos elevada incidência de IL-6 e GM-CSF detectável no LCR de pacientes com ADC, em relação aos pacientes com OND. Diferenças estatísticas não foram observadas entre os dois grupos de pacientes para níveis de IL-6 e GM-CSF no soro. Esses resultados sugerem síntese intratecal dessas citocinas e sua possível participação na patogenia da ADC.

Objective The literature describes various cerebrospinal fluid (CSF) drainage techniques to alleviate posthemorrhagic hydrocephalus in preterm newborns; however, consensus has not been reached. The scope of this study was describing a case series of premature neonates with posthemorrhagic hydrocephalus and assessing the outcomes of different approaches used for CSF diversion. Methods A consecutive review of the medical records of neonates with posthemorrhagic hydrocephalus treated with CSF drainage was conducted. Results Forty premature neonates were included. Serial lumbar puncture, ventriculosubgaleal shunt, and ventriculoperitoneal shunt were the treatments of choice in 25%, 37.5% and 37.5% of the cases, respectively. Conclusion Cerebrospinal fluid diversion should be tailored to each case with preference given to temporary CSF drainage in neonates with lower age and lower birth-weight, while the permanent ventriculoperitoneal shunt should be considered in healthier, higher birth-weight neonates born closer to term. RESUMO Objetivo A literatura descreve várias opções de drenagem liquórica (DL) para alivio da hidrocefalia pós-hemorrágica (HPH) em neonatos prematuros; contudo, não existe um consenso sobre a melhor abordagem. O escopo deste estudo foi descrever uma série de casos de neonatos prematuros, portadores de HPH, verificando os resultados de diferentes técnicas utilizadas para DL. Métodos Revisão consecutiva dos prontuários de neonatos com diagnostico de HPH submetidos a DL. Resultados Quarenta recém-nascidos prematuros foram incluídos. A punção lombar seriada (PL), a derivação ventriculosubgaleal (VSG) e a derivação ventrículo peritoneal (VP) foram o tratamento escolhido em 25%, 37,5% e 37,5% dos casos, respectivamente. Conclusão As opções de DL devem ser avaliadas caso a caso, sendo dada preferência às drenagens temporária em prematuros com idade e peso mais baixos ao nascer, enquanto o shunt definitivo (derivação VP) pode ser considerado naqueles prematuros mais saudáveis, com idade e peso superiores.

Syphilis is a re-emerging sexually-transmitted infection, caused by the spirochete Treponema pallidum, that may penetrate early into the central nervous system. The venereal disease research laboratory test (VDRL) on the cerebrospinal fluid (CSF) is the most widely used for neurosyphilis diagnosis. We evaluated the performance of two other nontreponemal tests (rapid plasma reagin [RPR] and unheated serum reagin [USR] tests) in comparison with the VDRL in CSF. Methods: We analyzed CSF samples from 120 individuals based on VDRL reactivity in the CSF and the clinical picture of neurosyphilis. Results: High inter-rater reliability was found among all three tests, with equivalent sensitivity and specificity. Intraclass correlation coefficient for absolute agreement was 1 for VDRL versus USR, 0.99 for VDRL versus RPR, and 0.99 for RPR versus USR. Conclusions: Rapid plasma reagin and unheated serum reagin tests were identified as excellent alternatives for neurosyphilis diagnosis.

RESUMO A análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) é uma importante ferramenta no diagnóstico das doenças neurológicas dos bovinos. A coleta do LCR em diferentes momentos facilita o monitoramento do quadro clínico e/ou a avaliação da eficácia de tratamentos estabelecidos. Todavia, os efeitos de coletas consecutivas sobre os parâmetros citológicos e bioquímicos do LCR de bovinos saudáveis ainda não foram analisados. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar potenciais diferenças citológicas e bioquímicas no LCR de bovinos sadios, obtidos em dois momentos, com intervalo de 96 horas. O LCR foi submetido à análise citológica e à determinação do teor de proteína total. Na segunda coleta, verificou-se aumento significativo da celularidade, porém ainda dentro do intervalo de referência para a espécie, diminuição de linfócitos e elevação de células mononucleares em relação à primeira coleta. No entanto, os números de hemácias (/µL), células nucleadas (/µL), neutrófilos (%), eosinófilos (%) e a concentração da proteína total (mg/dL) continuaram dentro dos valores de referência 96 horas após a realização da primeira punção. Conclui-se que os procedimentos de coleta de LCR consecutivos não provocaram inflamação local detectável 96 horas após a primeira punção, o que sugere que, quando necessário, coletas de LCR seriadas, por si só, não interfeririam nos resultados do exame. ABSTRACT The analysis of cerebrospinal fluid (CSF) is important for the diagnosis of neurological diseases in cattle. However, the effect of consecutive collections on the cytological and biochemical parameters of the CSF has not been evaluated yet. The objective of the present study was to evaluate potential differences on the cytological and biochemical analysis of CSF obtained from healthy cattle at two sampling times with 96 hours of interval in between. Total and differential cell counts, and total protein concentration were analyzed in the CSF. Increased cellularity and significant reduction of lymphocyte and elevated numbers of mononuclear cells were observed on the second collection. However, erythrocyte count (/µl), total leukocyte count (/µl), neutrophils (%), eosinophils (%) and total protein concentration (mg/dl) remained within the reference range 96 hours after the completion of the first puncture. In conclusion, consecutive CSF collections cause no detectable local inflammation 96 hours after the first puncture suggesting that repeated collections do not interfere in the CSF results.

Dissertação (mestrado)-Universidade Federal do Parana

Cytokines and intrathecal IgG synthesis were determined in the cerebrospinal fluid (CSF) and sera to evaluate inflammatory activity in multiple sclerosis (MS) patients during clinical remission. Although the disease was stable, there had been a significant increase of proinflammatory cytokines such as TNFalpha and IFNgamma in the CSF and serum, with no significant changes of IL12 and IL10 production. The changes in the cytokine production patterns were associated with an increase of leukocytes in the CSF, as well as the presence of oligoclonal bands suggesting intrathecal IgG synthesis. These results suggest that even when the disease is clinically silent, one can observe inflammatory activity in these MS patients. Os níveis de citocinas e síntese intratecal de IgG foram dosados no líquido cefalorraquidiano (LCR) e soro, com o objetivo de avaliar a atividade inflamatória em pacientes com esclerose múltipla durante remissão clínica. Foram detectados níveis elevados de citocinas pró-inflamatórias (TNFalfa e IFNgama) no LCR e soro, sem alterações significativas na produção de IL12 e IL10. O perfil de produção das citocinas pró-inflamatórias estava associado ao aumento de leucócitos no LCR, assim como a presença de bandas oligoclonais IgG sugerindo síntese intratecal de IgG. Estes resultados sugerem que mesmo quando a doença está clinicamente silenciosa, a atividade inflamatória está presente nestes pacientes.

Dissertação de Mestrado em Biotecnologia Farmacêutica apresentada à Faculdade de Farmácia A doença de Alzheimer (DA) é responsável atualmente por cerca de 50-70% de todos os casos de demência, prevendo-se que ultrapasse 75 milhões de doentes até 2030.Clinicamente a doença é caracterizada por perda cognitiva gradual, levando a total perda das funções neurológicas e motoras. A transição entre os sintomas do envelhecimento normal e a doença é caracterizada como Défice Cognitivo Ligeiro (DCL), esta condição aumenta a probabilidade de desenvolver a DA, estimando-se que aconteça em 1/3 dos casos. DA é caracterizada ao nível molecular pela presença de placas amiloides e tranças neurofibrilares de Tau.A falta de informação sobre os mecanismos da doença não permite que haja um diagnóstico definitivo. Quanto mais avançada está a doença maior a precisão do diagnóstico, que normalmente é realizado por exclusão de outras doenças, levando a um acompanhamento inadequado do doente. A base do diagnóstico é a partir de vários exames, como por exemplo o recurso a biomarcadores, que têm vindo a chamar a atenção dos clínicos. Os biomarcadores existentes para esta patologia, embora sejam eficazes no apoio a um diagnóstico mais preciso, ainda não permitem a distinção com DCL. Desta forma, neste projeto realizou-se um estudo proteómico para encontrar possíveis biomarcadores que preencham essas lacunas.Foram analisadas e estudadas 14 e 16 amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com doença de Alzheimer e Défice Cognitivo Ligeiro, respetivamente. A análise foi realizada por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa (LC-MS/MS) e quantificada através do método SWATH (do inglês Sequential Window Acquisition of all Theoretical mass spectra). As proteínas de interesse foram selecionadas por comparação entre 4 grupos: DA vs. DCL; DA (feminino vs. Masculino); feminino (DA vs. DCL) e masculino (DA vs. DCL).Após análise por diferentes métodos, foram selecionadas ao todo 26 proteínas de interesse. Observou-se uma possível relação da doença com o aparecimento precoce, uma vez que as proteínas Apolipoptroteína A1 e a Protrombina apresentam alteração acentuada nos indivíduos mais jovens. Observou-se também que as proteínas Fibulina1 e IGHG3 estão significativamente aumentadas nos indivíduos masculinos com DA podendo indicar uma diferença entre os géneros. Esta informação também é corroborada pela Análise de Componentes Principais (PCA) dos grupos de comparação entre os géneros, onde se observou uma tendência na separação entre os géneros. As restantes proteínas selecionadas estão maioritariamente relacionadas com as placas amiloides e processos inflamatórios, no entanto também foram selecionadas proteínas relacionas com processos de stresse oxidativo e com os microtúbulos. Realizou-se ainda uma PCA para o grupo DA Vs. DCL destas proteínas, que permitiu observar uma tendência na separação entre as patologias. Actually, Alzheimer’s disease (AD) accounts about 50-70% of all dementia cases, and is expected to surpass 75 million patients by 2030.Clinically, AD is characterized by gradual cognitive loss, leading to complete loss of neurological and motor functions. The transition between the symptoms of normal aging and the disease is characterized as Mild Cognitive Impairment (MCI), and this condition increases the probability of developing AD, which is estimated to occur in 1/3 of the cases. AD is characterized by the presence of amyloid plaques and Tau neurofibrillary tangles in the brain. The lack of information on the mechanisms of the disease doesn’t allow an AD diagnosis, especially at the earliest stage. The more advanced the disease is, the greater the accuracy of the diagnosis, which is usually performed by excluding other diseases, leading to an inappropriate monitoring of the patient. The diagnosis is based on several tests, such as the use of biomarkers, which have been drawing attention of medical community.Regardless of being used to support a more accurate diagnosis, the current biomarkers for AD do not allow a distinction between AD and MCI. Thus, a proteomic study was carried out in the present study, in order to find possible biomarkers that fill these gaps.Thereby, 14 and 16 cerebrospinal fluid (CSF) samples from patients with AD and MCI respectively, were analyzed and studied. The analysis was performed by liquid chromatography coupled to sequential mass spectrometry (LC-MS/MS) and quantified by the SWATH (Sequential Window Acquisition of all Theoretical mass spectra) method. The proteins of interest were selected for comparison between 4 groups: AD vs. DCL; AD (female vs. male); Female (AD vs. MCI) and male (AD vs. MCI).Twenty-six proteins of interest were selected after analysis with different methodologies. A possible relation between the disease with early onset was observed, since the proteins Apolipoprotein A1 and Prothrombin present a marked change in the youngest individuals. It was also observed that the proteins Fibulin I and IGHG3 are significantly upregulated in the male patients with AD and this may be an indication of a gender difference in AD. This indication is also corroborated by a Principal Component Analysis (PCA), where a tendency to separate the two genders is observed.The remaining selected proteins were found to be mostly related to amyloid plaques and inflammatory processes, although also proteins related to oxidative stress and the microtubules were selected. By performing a PCA analysis comparing AD vs. MCI using these selected proteins it was possible to observe a tendency in the separation of the two pathologies. FCT

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