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A esclerose múltipla (EM) é uma doença neurológica inflamatória crônica autoimune do sistema nervoso central (SNC) que agride a bainha de mielina causando sua destruição em graus variados. A causa da EM é desconhecida e a teoria mais aceita envolve a combinação da suscetibilidade genética com um gatilho não genético associado a um sistema imune propício e fatores contribuintes no SNC. Ainda não existe marcador biológico capaz de detectar a EM ou prever o prognóstico da doença nem sua evolução clínica. Existem vários possíveis biomarcadores, mas ainda permanecem sem relevância clínica e nenhum possui sensibilidade e confiabilidade para diagnosticar EM e monitorar o curso da doença. O objetivo da pesquisa clínica na área de doenças desmielinizantes e principalmente EM é encontrar biomarcadores que possibilitem evidenciar doença subclínica, a atividade da doença ou permitam avaliação do tratamento. Este estudo analisou por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (LC-MS) aspectos metabolômicos de líquido cefalorraquidiano (Líquor - LCR) em pacientes com suspeita e diagnóstico confirmado de EM com o objetivo de descobrir um biomarcador capaz de diferenciar pessoas não doentes de pessoas com o diagnóstico de esclerose múltipla e caracterizar as diferentes classificações de EM. Neste trabalho, a análise LC-MS com abordagem untarget demonstrou que existem meios viáveis de diferenciar pacientes com EM de indivíduos normais e diferenciar pacientes de diferentes tipos de EM. Através de análises estatísticas como PCA, PLS-DA, da VIP e do Heat map consegui-se evidenciar um possível candidato a biomarcador, a fosfatidilcolina. Entretanto, ainda há poucos estudos que mostram o mecanismo e a relação da diminuição dos níveis de fosfatidilcolina em amostras de líquor. Acredita-se que os níveis deste potencial biomarcador está diretamente relacionado com o aumento da idade de pacientes afetados. Multiple sclerosis (MS) is a chronic autoimmune chronic inflammatory neurological disease of the central nervous system (CNS) that attacks the myelin sheath causing its destruction to varying degrees. The cause of MS is unknown and the most accepted theory involves combining genetic susceptibility with a non-genetic trigger in addition to a conducive immune system and contributing factors in the CNS. There is still no biological marker capable of detecting MS or predicting the prognosis of the disease or its clinical evolution. There are several possible biomarkers, but they still remain clinically relevant and none have the sensitivity and reliability to diagnose MS and monitor the course of the disease. The objective of clinical research in the area of demyelinating diseases and mainly MS is to find biomarkers that make it possible to evidence subclinical disease, disease activity or allow evaluation of treatment. This study analyzed by mass spectrometry cerebrospinal fluid (CSF) metabolic aspects in patients with suspected and confirmed diagnosis of Multiple Sclerosis with the objective and to discover a biomarker able to differentiate non-diseased persons from people diagnosed with multiple sclerosis in addition to being able to differentiate different classifications of multiple sclerosis. The untarget analysis performed demonstrated that there are viable means of differentiating patients with multiple sclerosis from normal individuals in addition to differentiating patients from different MS types. Through the analysis by PCA, PLS-DA, VIP and Heat map, it was possible to evidence a possible candidate for biomarker. This biomarker candidate is already cited in the literature. However, there are still few studies that show the mechanism and the relationship of decreased phosphatidylcholine levels in CSF samples. It is believed that the levels of this potential biomarker is directly related to the increased age of affected patients. Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2019)

Submitted by Denis Jeronimo Svicero (de_svicero@hotmail.com) on 2019-03-06T18:59:45Z No. of bitstreams: 1 Tese - Denis Jeronimo Svicero.pdf: 2573362 bytes, checksum: 414763d8cb5633806467b6343b29e239 (MD5) Rejected by Ana Lucia de Grava Kempinas (algkempinas@fca.unesp.br), reason: Dedicatória é o texto escrito no qual alguém, especificamente, dedica alguma coisa à outra pessoa. No seu caso a frase colocada na Dedicatória é o epígrafe (citação ou pensamento que, de alguma forma, influenciou em seu trabalho acadêmico). Faltou mencionar a CAPES nos AGRADECIMENTOS. Colocar dessa forma: O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001. on 2019-03-06T20:23:59Z (GMT) Submitted by Denis Jeronimo Svicero (de_svicero@hotmail.com) on 2019-03-07T00:38:51Z No. of bitstreams: 1 Tese - Denis Jeronimo Svicero.pdf: 2609804 bytes, checksum: 2f7b7b6758de4ec8cf66ea049de30004 (MD5) Approved for entry into archive by Ana Lucia de Grava Kempinas (algkempinas@fca.unesp.br) on 2019-03-07T13:18:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 svicero_dj_dr_botfmvz_par.pdf: 366246 bytes, checksum: cc489c6cfa72bf2c265d604410607c9d (MD5) Made available in DSpace on 2019-03-07T13:18:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 svicero_dj_dr_botfmvz_par.pdf: 366246 bytes, checksum: cc489c6cfa72bf2c265d604410607c9d (MD5) Previous issue date: 2019-02-20 Pró-Reitoria de Pós-Graduação (PROPG UNESP) Estudos com células estromais mesenquimais multipotentes (MSCs) estão em crescente progresso devido às suas propriedades imunomoduladoras, antiinflamatórias, antiapoptóticas e de regeneração tecidual, tornando essa modalidade de terapia celular promissora no tratamento de diversas doenças. Devido à limitada capacidade regenerativa do sistema nervoso central (CNS), causando sequelas funcionais, as MSCs estão sendo investigadas como uma alternativa terapêutica para condições neurológicas inflamatórias, vasculares, traumáticas e degenerativas em diversas espécies animais. A Mieloencefalite protozoária equina (EPM) causada por ambos os protozoários do filo Apicomplexa, Sarcocystis neurona e Neospora hughesi, permanece como uma importante doença neurológica dos equinos nas Américas, embora a maioria dos casos seja devida à infecção por S. neurona. A aplicação da proteômica com sua gama de ferramentas na clínica de equinos pode contribuir significativamente para o entendimento de processos patológicos e facilitar a descoberta de novos alvos terapêuticos ou marcadores diagnósticos. Neste contexto, os objetivos deste estudo foram avaliar o perfil proteômico do líquido cefalorraquidiano (CSF) antes e após múltiplos transplantes intratecal de MSCs em equinos hígidos e o perfil proteômico do CSF de equinos cronicamente afetados pela EPM. Doze cavalos adultos clinicamente saudáveis foram divididos aleatoriamente em três grupos experimentais: grupo DPBS (DPBS ou control; n = 4) onde a solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco's (DPBS) foi administrada pela via intratecal; grupo AD-G (AD-G; n = 4), no qual foram realizados transplantes intratecal com MSCs alogênicas de tecido adiposo; e grupo BM-G (BM-G; n = 4), no qual foram realizados transplantes intratecal com MSCs alogênicas de medula óssea. Todos os grupos experimentais receberam três tratamentos seriados (DPBS ou MSCs) com intervalo de 30 dias entre eles. As amostras de CSF foram coletadas dos grupos experimentais imediatamente antes do primeiro tratamento (denominado momento M0 ou Before) e 30 dias após o terceiro tratamento (denominado momento M90 ou After). Ao mesmo tempo, os CSF de 16 equinos clinicamente saudáveis e de 9 equinos cronicamente afetados por EPM foram coletados da subaracnóide, denominados grupo Control (Control; n = 16) e grupo EPM (EPM; n = 9) respectivamente. Cada uma das amostras de CSF do grupo Control e do grupo EPM foram individualmente ressuspendidas e agrupadas em pool, totalizando dois pool representativos de cada um dos grupos experimentais e denominados igualmente (Control e EPM) para avaliar o perfil proteômico dos mesmos. De modo similar, os três grupos que receberam transplantes e coletas de CSF nos dois distintos momentos, foram agrupados em seis pool representativos para cada grupo e momento. Considerando a plataforma proteômica utilizada, os três grupos foram pareadamente comparados: DPBS After vs. Before, AD-G After vs. Before e BM-G After vs. Before, sendo encontradas 208, 211 e 131 proteínas em cada comparação, respectivamente. Do mesmo modo, na comparação pareada do CSF dos grupos EPM e Control, EPM vs. Control, 201 proteínas foram identificadas e 33 proteínas observadas exclusivamente no CSF do grupo EPM. Ademais, também foi observada na comparação pareada dos grupos DPBS, BM-G e EPM, a presença dos três tipos de enolases interagindo entre si (ENO 1, ENO 2 e ENO 3), sendo em DPBS e BM-G como exclusivas do momento After e no grupo EPM como exclusivas dele. Neste contexto, este estudo ao avaliar os perfis proteômico do CSF antes e após múltiplos transplantes intratecal de MSCs em equinos hígidos e do CSF de equinos cronicamente afetados pela EPM permitiu identificar as enolases como potenciais marcadores de lesão neural e/ou de EPM. Novos estudos devem ser realizados para confirmar estes achados e avançar no conhecimento dos efeitos da terapia celular com MSCs pela via intratecal, para o tratamento de lesões neurológicas em equinos. Multipotent mesenchymal stromal cell (MSCs) studies are under increasing progress because of their immunomodulatory, anti-inflammatory, antiapoptotic and tissue regeneration properties, making this modality of cell therapy promising in the treatment of various diseases. Due to the limited regenerative capacity of the central nervous system (CNS), causing functional sequelae, MSCs are being investigated as a therapeutic alternative for inflammatory, vascular, traumatic and degenerative neurological conditions in various animal species. Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) caused by both protozoa of the Apicomplexa phylum, Sarcocystis neurona and Neospora hughesi, remains an important neurological disease in horses in the Americas, although most cases are due to S. neurona infection. The application of proteomics with its range of tools in the equine clinic can contribute significantly to the understanding of pathological processes and facilitate the discovery of new therapeutic targets or diagnostic markers. In this context, the objectives of this study were to evaluate the proteomic profiling of cerebrospinal fluid (CSF) before and after multiple intrathecal transplantations of MSCs in healthy horses and the CSF proteomic profiling of horses chronically affected by EPM. Twelve clinically healthy adult horses were randomly divided into three experimental groups: DPBS (DPBS or control; n = 4), in which intrathecal "transplants" with Dulbecco's phosphate buffered saline (DPBS) were performed; group AD-G (AD-Gs; n = 4), in which intrathecal transplants were performed with allogeneic adipose tissue MSCs; and BM-G group (BM-G; n = 4), in which intrathecal transplants were performed with allogeneic bone marrow MSCs. All experimental groups received three serial treatments (DPBS or MSCs) with a 30-day interval between them. CSF samples were collected from the experimental groups immediately before the first treatment (called the M0 or Before) and 30 days after the third treatment (called the M90 or After). At the same time, CSF of 16 healthy horses and 9 horses chronically affected by EPM were collected from the subarachnoid, Control group (Control; n = 16) and EPM group (EPM; n = 9) respectively. Each of the CSF samples from the Control group and from the EPM group were individually resuspended and pooled, totalizing two representative pools of each one the experimental groups and also named (Control and EPM) to evaluate their proteomic profilings. Similarly, the three groups that received transplants and CSF collections at two different times were grouped into six representative pools for each group and time. Considering the proteomic platform used, the three groups were similarly compared: DPBS After vs. Before, AD-G After vs. Before and BM-G After vs. Before, being found 208, 211 and 131 proteins in each comparison, respectively. Likewise, in the paired comparison of the CSF of the EPM and Control groups, EPM vs. Control, 201 proteins were identified, and 33 proteins were observed exclusively in the CSF of the EPM group. In addition, the presence of the three types of enolases interacting with each other (ENO 1, ENO 2 and ENO 3) was also observed in the comparison of the DPBS, BM-G and EPM groups, being exclusives in DPBS and BM-G at time After and in the EPM group as its exclusively. In this context, this study, when evaluating the proteomic profilings of CSF before and after multiple intrathecal transplantations of MSCs in healthy horses and CSF of horses chronically affected by EPM, allowed the identification of enolases as potential markers of neural and / or EPM injury. Further studies should be performed to confirm these findings and to advance the knowledge of the effects of intrathecal cell therapy with MSCs for the treatment of neurological lesions in horses.

Pacientes pós-operatórios de neurocirurgia portadores de ventriculostomia que apresentam quadro febril e alterações sistêmicas sugestivas de infecção necessitam ser investigados quanto à possibilidade de infecção do sistema nervoso central (SNC). O diagnóstico desta situação baseia-se em achados microbiológicos e bioquímicos do liquor. Contudo, a coleta deste material pode ser obtida por dois sítios distintos (espaço subaracnóide e ventrículos cerebrais), cuja coleta de cada sítio é considerada o padrão outro para diagnóstico de meningite ou ventriculite, respectivamente. A coleta de apenas um destes sítios pode promover resultado duvidoso ou falso negativo, o que retarda o início do manejo adequado destes pacientes aumentando sua morbimortalidade. Ademais, alterações liquóricas secundárias ao processo inflamatório pelo ato cirúrgico ou pela patologia de base são semelhantes àquelas presentes nas infecções do SNC. Diferenciar os casos de meningite asséptica das meningites bacterianas no cenário pós-operatório é uma tarefa difícil, e com frequência não consegue-se evitar o uso de antibioticoterapia desnecessária. Diante deste cenário, os autores estudaram as análises bioquímicas e microbiológicas dos pacientes portadores de ventriculostomia que estavam sob suspeita de infecção do SNC e, então, avaliaram se há correlação entre os achados destas amostras e se a acurácia diagnóstica de ambos os sítios se equivale. O projeto foi realizado pelo Departamento de Neurocirurgia do Hospital Cristo Redentor. O tamanho amostral foi definido através de um estudo piloto, que indicou a necessidade de 141 amostras para obter-se um poder de 95%. Os pacientes pósoperatórios de neurocirurgia portadores de ventriculostomia, que apresentassem febre e respeitavam os critérios de inclusão e exclusão foram submetidos a coletas de liquor por PL e pela DVE. As amostras foram analisadas conforme os critérios do CDC para determinar o diagnóstico de infecção, assim como a sensibilidade de cada sítio. A correlação diagnóstica entre os sítios de coleta foi avaliada através do Índice do Coeficiente de Concordância de Kappa. As 141 amostras foram coletadas em 108 paciente, sendo a maioria do sexo feminino (58,3%) e a média de idade de 57,81 anos. A principal patologia intracraniana que indicou a colocação da DVE foi HSA, seguida de AVEh paracapsular com hemoventrículo. Entre as 282 amostras, 102 foram compatíveis com infecção. Avaliando-se isoladamente, 70 das 141 amostras coletadas pela PL e 32 das 141 amostras coletadas da DVE foram compatíveis com infecção. Analisando-se os 70 casos de meningite, em 25 casos o liquor coletado pelo sistema da DVE do mesmo paciente também foi compatível com infecção (ventriculite), mas em 35 casos apenas o liquor coletado pela PL foi compatível com infecção. Por sua vez, nos casos de ventriculite, apenas 7 nāo tinham alterações compatíveis com infecção na amostra coletada pela PL. Ou seja, 45 (58,44%) casos foram compatíveis com meningite, 7 (9%) casos de ventriculite e 25 (32,46%) casos de meningo-ventriculite. O Coeficiente de Concordância de Kappa entre os resultados da PL e da DVE foi de 0.260. Este trabalho demonstrou que todos pacientes submetidos a neurocirurgias e portadores de DVE que evoluem com quadro sugestivo de infecção requerem investigação liquórica tanto do sistema ventricular (DVE) quanto do espaço subaracnóide (PL). A coleta de liquor apenas do sistema de DVE apresenta baixa sensibilidade e baixo valor preditivo negativo, portanto, sua coleta isoladamente nāo permite a exclusão do SNC como foco infeccioso. A complementação da investigação com PL apresenta uma sensibilidade 2,18 vezes maior para diagnóstico de infecção, além de uma maior segurança na exclusão diagnóstica quando, juntamente com o LCR da DVE, não tiver critérios de infecção. The placement of an EVD is a surgical procedure performed in cases of severe pathologies in the brain. This cateter allows continuous intensive neurological monitoring and also is a temporary treatment for intracranial hipertension, since the drainage of the CSF helps to regulate the pressure inside the skull. The EVD is commonly placed in patients with hydrocephalus, SAH, deep brain hematomas or other conditions that impair the CSF flow through the ventricles towards the veins in the skull. Even though the EVD placement in the frontal horn of the lateral ventricle has a low risk of complications, its presence increases the risk of CNS infection. Early diagnose of CNS infection is a challenge for physicians since neurologic clinical signs and symptoms are vague. Moreover, according to the medical literature, biochemical evaluation of the CSF collected from the EVD are usually not helpfull for the diagnose of infection, especially in patients with SAH, hemoventricles or who has recently been submited to brain surgery, since the CSF alterations seen in those conditions are difficult to be differentiated from the alterations found in infected patients. The proper and reliable diagnose of CNS infection is of major importance, and the earlier the diagnose is sealed or ruled out, the lower is the morbimortality of this condition. According to most authors, antibiotics must be initiated as soon as the first sign of CNS infection appears and the CSF is collected for analysis. However, unnecessary use of antibiotics is also hazardous for the patients, with risk of hepathic or renal failure, and may induce bacterial resistance. Possibly the analysis of the CSF collected from a diferent compartment, may have a higher sensibility for the diagnose of CNS infection; and if the sample is not suggestive of infection, physicians will be more confident to discard CNS infection. Authors coducted a transversal study at the Neurosurgery Department of Cristo Redentor Hospital. Sample size was calculated based on the results of a pilot study, which indicated that in order to achieve a power of 95%, a total of 141 samples was required. Post-neurocurgical patients harboring a ventriculostomy who develped fever and signs of infection, who respected the inclusion and exclusion criteria, were included and submitted to the CSF analysis collected by LP and also from the EVD. The diagnose of infection was based on the CDC criteria. The diagnose sensibility and the results correlation were analyzed using the Kappa Index. The 141 samples were collected from 108 patients, mostly females (58,3%) with a mean age of 57,81. The most frequent pathology which required the instalation of the ventriculostomy was Subarachnoid Hemorrhage (SAH), followed by deep brain hematomas with hemoventricles. Among the 282 samples (141 from LP and 141 from ventriculostomy), a total of 102 were compatible with infection. Seventy CSF from LP fulfilled infection criteria. However, only 32 ventriculostomy samples demonstrated infection. Among the 70 cases of meningitis, in 25 the CSF collected from the ventriculostomy was also suggestive of infection, but in 35 patients only the CSF from LP was suggestive of CNS infection. On the other hand, only 7 patients had the diagnose of ventriculitis without signs of infection in the CSF collected by LP. In other words, authors identified 45 (58,44%) cases of meningitis, 7 (9%) cases of ventriculitis and 25 (32,46%) cases of meningoventriculitis. The Kappa Correlation Index for the results obtained from LP and EVD was 0.260 and McNemar Chi-Squared test < 0.01. Authors demonstrated that every neurosurgical patient harboring an EVD who presents signs of infection needs to be investigated for infection in the CNS by collecting CSF samples from the ventricle and also from LP. The CSF analysis exclusive from the EVD has a low sensibility and negative predictive value. The investigation must be complemented in a standard pattern by the analysis of the CSF collected from LP, which has a sensibility 2.18 times higher than the EVD. Besides, when the analysis from both compartments are not suggestive infection, the physicians have a higher security to exclude CNS infection.

Resumo Objetivo: descrever um protocolo simplificado para abordagem de casos suspeitos de meningite. Metodos: relato de experiencia na abordagem diagnostica das meningites no servico de referencia em doencas tropicais do estado do Piaui, Brasil, no periodo de 2007-2016; extrairam-se informacoes do Sistema de Informacao de Agravos de Notificacao (Sinan) e do livro de registro do laboratorio; utilizou-se o teste do qui-quadrado para comparar os indicadores da vigilância epidemiologica baseados na classificacao final dos casos de meningite; utilizou-se o teste de concordância Phi para verificar a correlacao entre os diagnosticos etiologicos presumidos pelo protocolo e aqueles confirmados laboratorialmente. Resultados: considerando-se 4.096 casos de meningite estudados, houve reducao na classificacao generica desses casos, de 72 para 47% (p

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária A análise de Líquido Cefalorraquidiano (LCR) é um exame complementar de diagnóstico extremamente útil, pois permite o acesso a informações relativas à saúde neurológica dos pacientes. Esta é frequentemente realizada com o propósito de auxiliar no processo diagnóstico ou para o controlo da evolução clínica dos doentes. Com o presente estudo procurou-se conhecer a realidade clínica associada a este exame, desde os sinais clínicos dos cães a que é colhido LCR, passando pelos resultados desta análise, até ao desfecho clínico dos episódios em estudo. No presente estudo foram incluídos 130 cães, os seus LCR foram analisados, comparando-se os resultados obtidos nos exames citológicos e nos PCR realizados com o descrito na bibliografia. Foram ainda comparados os desfechos clínicos de 54 cães com diferentes resultados na avaliação citológica, procurando-se perceber se as conclusões extraídas da análise de LCR possuem valor como ferramenta de prognóstico. A contagem de células nucleadas totais apresentou-se aumentada em 62 (47,7%) amostras, 55 (42,3%) com pleocitoses de células mistas e 7 (5,38%) neutrofílicas, tendo sido identificada a presença de bactérias numa amostra deste último grupo. Não foram identificadas pleocitoses mononucleares. Em 32 amostras foram realizadas técnica de PCR para deteção de agentes infeciosos, tendo sido, em 4 delas identificados os seguintes agentes: uma com Toxoplasma gondii, uma com Neospora caninum e duas com o vírus da esgana canina. A amostra com Neospora caninum não evidenciou qualquer alteração à citologia, enquanto que as restantes 3 amostras apresentaram pleocitoses moderadas de células mistas. Os cães de raça Beagle demonstraram uma associação com as pleocitoses neutrofílicas. A análise citológica e PCR de LCR demonstrou não possuir valor prognóstico. Os dados obtidos reforçam a importância da análise do LCR em cães com doença neurológica, dada a frequência de pleocitoses e de agentes infeciosos no LCR neste estudo ter sido superior à descrita na bibliografia. Concluiu-se também que o recurso a técnicas moleculares é essencial, mesmo quando o LCR não apresenta as alterações analíticas esperadas, devendo os clínicos recorrer a estas técnicas sempre que suspeitem de qualquer agente infecioso como causa de meningite, não necessitando de o justificar na presença de uma pleocitose, mas sim nos sinais clínicos e diagnósticos diferenciais para cada caso. ABSTRACT - CEREBROSPINAL FLUID ANALYSIS AND INTERPRETATION IN DOGS IN CLINICAL PRACTICE - RETROSPECTIVE STUDY OF 130 CASES - The analysis of cerebrospinal fluid (CSF) is an extremely useful complementary diagnostic exam, as it allows access to information regarding the patient’s neurological health. This test is often performed for the purpose of assisting the diagnosis process or for controlling the clinical evolution of patients. The present study aimed to understand the clinical reality of this exam, including the clinical signs of the dogs from which the CSF was collected, the results of this analysis and the clinical outcome of the episodes under study For this study, 130 dogs were included on which the CSF was analyzed, comparing the results obtained in the cytological tests and in the PCR with those described in the bibliography. The clinical outcomes of 54 dogs with different results in the cytological evaluation were also compared, in an attempt to understand whether the conclusions drawn from the CSF analysis were valuable as a prognostic tool. The total nucleated cell count was increased in 62 (47.7%) samples, 55 (42.3%) with mixed cell pleocytosis and 7 (5.38%) neutrophilic, with bacteria identified in a sample from last group. No mononuclear pleocytosis were identified. Infectious agents were identified in 4 of the 32 samples where the PCR technique was performed: one tested positive for Toxoplasma gondii, one for Neospora caninum and two for canine distemper virus. The sample with Neospora caninum showed no change in cytology, whilst the other 3 samples had moderate mixed cell pleocytosis. Beagle dogs showed an association with neutrophilic pleocytosis. CSF cytological and PCR analysis showed no prognostic value. The data obtained reinforced the importance of testing the CSF of dogs with neurological disease, given that the frequency of pleocytosis and infectious agents present in the CSF in this study was superior to that described in the literature. It can also be concluded that the use of molecular techniques is essential, even when the CSF does not present the expected analytical changes. The clinicians should resort to these techniques whenever they suspect an infectious agent as the cause of meningitis, without the need to justify it in the presence of pleocytosis, but in the clinical signs and the differencial diagnosis of each case. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

Use of acute-phase proteins (APPs) for assessment of health and disease in animals has increased greatly within the last decade. The objective was to determine the normal concentration of APPs in the serum and cerebrospinal fluid (CSF) of healthy cattle by polyacrylamide gel electrophoresis. Fifty crossbred animals (350±70kg of BW and 18±1.2 months of age), 25 heifers and 25 steers were used. CSF samples were collected from atlanto-occipital (AO) site and blood samples were obtained from the jugular vein. CSF and serum protein electrophoresis were performed by means of sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis. Thirty-seven proteins with molecular weights ranging from 7 and 37kDa were identified in CSF of all animals. These eight were nominally identified with immunoglobulin A and G, celuloplasmin, transferrin, albumin, α1-antitripsin, acidic glycoprotein, and haptoglobin. All protein fractions in CSF did not differ between heifers and steers. In sera, 34 proteins with molecular weights between 7 and 244kDa were identified in heifers and steers. Similar proteins were nominally identified in the sera, but only the CSF presented α1-antitripsin. The serum values of acidic glycoprotein and immunoglobulin G were significantly higher in steers compared with heifers. In conclusion, measurement of CSF acute phase protein concentrations can be useful in diagnosing and monitoring the progression of bovine neurological diseases, perhaps even to guide therapeutic procedures. The CSF electrophoretic profile of healthy cattle does not change depending on gender. RESUMO: O uso de proteínas de fase aguda (PFAs) para a avaliação da saúde e da doença em animais de produção tem aumentado consideravelmente na última década. O objetivo deste estudo foi determinar a concentração normal de PAFs no soro e no líquido cefalorraquidiano (LCR) de bovinos sadios por meio da eletroforese em gel de poliacrilamida. Foram avaliados cinquenta animais mestiços (350±70kg de PV e 18±1,2 meses de idade), 25 novilhas e 25 novilhos. As amostras de LCR foram colhidas no espaço atlanto-occipital (AO) e as amostras de sangue obtidas da veia jugular. As PAFs do soro e do LCR foram determinadas através da eletroforese em gel poliacrilamida. Trinta e sete proteínas com pesos moleculares que variaram entre 7 e 37kDa foram identificadas no LCR de todos os animais, independente do sexo. Estas oito proteínas foram nominalmente identificadas como imunoglobulina A e G, ceruloplasmina, transferrina, albumina, α1-antitripsina, glicoproteína ácida, e haptoglobina. As frações de proteínas presentes no LCR não diferiram entre novilhas e novilhos. No soro de machos e fêmeas, 34 proteínas com pesos moleculares entre 7 e 244 kDa foram identificadas. As proteínas do soro foram similarmente identificadas, entretanto a α1-antitripsina foi identificada somente no LCR. Os valores séricos de glicoproteína ácida e imunoglobulina G foram significativamente mais elevados nas novilhas em comparação aos novilhos. Em conclusão, a determinação das concentrações de proteínas de fase aguda presentes do LCR pode ser útil no diagnóstico e monitoramento da progressão de doenças neurológicas bovinas, talvez possa ainda direcionar procedimentos terapêuticos. O perfil eletroforético do LCR de bovinos hígidos não se altera em função do sexo.

Introdução: A isquemia medular e resultante paraplegia constituem das complicações pós-operatórias mais temidas da cirurgia da aorta toraco-abdominal. A colocação de cateter de drenagem de líquido cefalorraquidiano está recomendada como medida preventiva em doentes de elevado risco. Este trabalho tem como objetivo avaliar a eficácia da colocação seletiva de cateteres de drenagem de líquor. Material e Métodos: Estudo retrospetivo em doentes submetidos a cirurgia endovascular da aorta torácica e toraco-abdominal nos quais foi colocado seletivamente cateter de drenagem de líquor, entre Janeiro 2010 e Março 2017. Considerados os fatores de risco para isquémica medular conhecidos. Resultados: Total 19 doentes submetidos a procedimentos endovasculares da aorta, 89,5% (n = 17) pertencentes ao sexo masculino, com idade média de 66 ± 9 anos. Dos procedimentos, 73,7% foram eletivos. Todos os cateteres foram colocados com o doente acordado, previamente à indução anestésica. A duração média da permanência do cateter foi 2,5 ± 0,8 dias. Realizada drenagem de líquido cefalorraquiadiano por aumento da pressão do mesmo em 7 doentes. Três doentes desenvolveram sintomas precoces de isquemia medular. Verificou-se reversão completa dos sintomas em 2 doentes. Dos doentes, 15,8% desenvolveram sintomas neurológicos e a mortalidade aos 30 dias foi de 10,5% (n = 2). Discussão: A incidência de complicações neurológicas foi superior ao descrito na literatura, o que pode dever-se ao facto da amostra englobar apenas doentes de elevado risco para isquemia medular. Conclusão: A drenagem de líquor é apontada como uma medida na prevenção de isquemia medular, devendo a mesma ser inserida numa estratégia multimodal. Estudos futuros são necessários de forma a determinar a eficácia desta técnica e comparar diferentes métodos com vista a prevenção de isquemia medular. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

A triagem neonatal (TN) tornou-se uma importante intervenção de saúde pública para a detecção precoce e prevenção de doenças, ajudando a reduzir a morbidade e a mortalidade em crianças. As doenças lisossômicas de depósito (DLDs) são distúrbios genéticos, clinicamente heterogêneos, causados principalmente por defeitos em genes que codificam enzimas lisossômicas que degradam macromoléculas. As opções terapêuticas para essas doenças evoluíram bastante nos últimos anos e muitas das DLDs têm atualmente tratamento disponível que pode melhorar a evolução clínica, especialmente se forem introduzidos precocemente. Esse fato mostra claramente a necessidade de diagnóstico precoce e oportuno, de preferência durante a fase assintomática da doença, o que apoia o desenvolvimento de TN para alguns desses distúrbios. Embora vários estudos já tenham estabelecido métodos de triagem adequados para uso em programas de TN, pouco foi discutido sobre outros procedimentos, posteriores à triagem. Portanto, nesse estudo, avaliamos protocolos para o diagnóstico confirmatório de casos que resultarão alterados nos programas de TN para DLDs tratáveis, considerando sua potencial implementação no Brasil. Inicialmente, revisamos, coletamos e resumimos informações sobre protocolos e estratégias para confirmação diagnóstica de casos triados positivos para a doença de Fabry, doença de Gaucher, doença de Pompe e Mucopolissacaridose (MPS) tipo I, II e VI. Duas estratégias foram identificadas para o diagnóstico de quase todas essas doenças. Um baseado apenas na análise molecular e outro baseado principalmente na análise enzimática e na análise molecular. Depois, avaliamos as estratégias de diagnóstico confirmatório, previamente reportados, para investigar quatro casos que foram encaminhados a partir de um estudo de TN para DLDs realizado em mais de 10.000 recém-nascidos no Brasil. Dois casos de pseudodeficiência foram identificados, um para a doença de Pompe e um para MPS I. Além disso, dois portadores (heterozigotos) também foram identificados, um para MPS I e um para a doença de Gaucher. Esse estudo discute também as limitações das análises enzimáticas e moleculares na confirmação do diagnóstico, os desafios que podem ser encontrados durante a interpretação dos resultados e a necessidade de um protocolo abrangente para a investigação precisa de casos em suspeita, identificados por estudos de TN para DLDs. Por conseguinte, um protocolo foi desenvolvido com recomendações para o diagnóstico confirmatório de casos que resultarão alterados após o teste inicial para MPS I, proposto como modelo para a futura elaboração de protocolos para as demais doenças. Finalmente, o custo global de um programa de TN para DLDs foi estimado, na base do estudo piloto realizado no Brasil, considerando a fase da triagem e a estrutura do protocolo de confirmação diagnóstica. Esse estudo representa uma base para avaliações mais abrangentes destes programas, em vista de uma possível implementação em grande escala. Newborn screening (NBS) has become an important public health intervention for early detection and prevention of diseases, helping to reduce the morbidity and mortality in children. Lysosomal storage diseases (LSD) are genetic disorders, clinically heterogeneous, caused mainly by defects in genes encoding lysosomal enzymes that degrade macromolecules. Therapeutic options for these disorders have substantially evolved in the last years and many of the LSDs currently have available treatment that may improve clinical outcomes, especially if early introduced. This fact clearly raises the need for early and timely diagnosis, preferably during the asymptomatic stage of the disease, which supports the development of NBS for some of these disorders. While several studies have already established screening methods suitable for use in NBS programs, little has been discussed on further procedures. In this study, we evaluated protocols for the confirmatory diagnosis of cases that will result altered in NBS programs for treatable LSDs, considering its potential implementation in Brazil. Initially, we reviewed, collected and summarized information on protocols and strategies for diagnosis confirmation of cases screened positive for Fabry disease, Gaucher disease, Pompe disease and Mucopolysaccharidosis (MPS) type I, II and VI. Two strategies were identified for the diagnosis of almost all these diseases. One based only in the molecular analysis and the other based mainly in both the enzyme analysis and molecular analysis. Then, we evaluated the previously reported confirmatory diagnostic strategies to investigate four cases that were referred from a NBS study for LSDs performed in over 10,000 newborns in Brazil. Two cases of pseudodeficiency were identified, one for Pompe disease and one for MPS I. In addition, two carriers (heterozygotes) were also identified, one for MPS I and one for Gaucher disease. This report discusses the limitations of enzymatic and molecular analyses in diagnosis confirmation, the challenges that may be found during result interpretation and the need for a comprehensive protocol for precise investigation of cases in suspicion identified by NBS studies for LSDs. Therefore, a protocol was developed that comprises recommendations for the confirmatory diagnosis of cases that will result abnormal after the initial testing for MPS I, proposed as a template for the future development of similar protocols for the other diseases. Finally, the overall cost of a NBS program for LSDs was estimated, based on the pilot study conducted in Brazil, considering the screening phase and the structure of the diagnosis confirmation protocol. This study provides a basis for more comprehensive assessments of these programs in view of potential large-scale implementation.

Resumo Objetivo: descrever um protocolo simplificado para abordagem de casos suspeitos de meningite. Métodos: relato de experiência na abordagem diagnóstica das meningites no serviço de referência em doenças tropicais do estado do Piauí, Brasil, no período de 2007-2016; extraíram-se informações do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (Sinan) e do livro de registro do laboratório; utilizou-se o teste do qui-quadrado para comparar os indicadores da vigilância epidemiológica baseados na classificação final dos casos de meningite; utilizou-se o teste de concordância Phi para verificar a correlação entre os diagnósticos etiológicos presumidos pelo protocolo e aqueles confirmados laboratorialmente. Resultados: considerando-se 4.096 casos de meningite estudados, houve redução na classificação genérica desses casos, de 72 para 47% (p

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária A análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) é um meio complementar de diagnóstico importante na abordagem a doenças que afetem o sistema nervoso central (SNC). As alterações encontradas no LCR, muitas vezes, auxiliam na exclusão de diagnósticos diferenciais, embora raramente sejam indicativas de um diagnóstico definitivo. A citometria de fluxo (CF) é um método analítico que permite a avaliação qualitativa e quantitativa de múltiplos parâmetros celulares, sendo cada vez mais utilizada em medicina veterinária, especialmente nos campos da imunologia e hematologia. Esta dissertação teve como objetivo estudar a distribuição das populações de leucócitos através da análise de amostras de LCR, e de sangue periférico, por CF, no sentido de avaliar alterações no LCR no decorrer de doenças do SNC. Serão apresentados três casos clínicos, nos quais foram obtidas as percentagens das principais populações de leucócitos (neutrófilos, monócitos/macrófagos e linfócitos) e das subpopulações de linfócitos, nomeadamente, linfócitos B, T auxiliares e T citotóxicos. Em cada caso, ocorreu uma inversão da subpopulação de linfócitos T predominante, entre o sangue periférico e o LCR, que poderá estar associada a doença. Nas amostras de sangue periférico, a percentagem de linfócitos T CD4+ excedeu a de linfócitos T CD8+, sendo esta, por sua vez, a predominante no LCR. Os resultados sugerem que a análise de LCR por CF pode fornecer informação complementar relevante ao diagnóstico de doenças do SNC, dando espaço a novas aplicações para a CF em medicina veterinária. ABSTRACT - CLINICAL IMPORTANCE OF CEREBROSPINAL FLUID ANALYSIS IN DOGS – SEVERAL ANALYTICAL METHODS IN VETERINARY MEDICINE - Cerebrospinal fluid (CSF) analysis is an important complementary diagnostic procedure available for the diagnosis of central nervous system (CNS) diseases. Despite of rarely providing a definitive diagnosis, CSF changes can often help to narrow down the list of differential diagnoses. Flow cytometry is an analytical method that allows qualitative and quantitative assessment of multiple parameters of individual cells. This technology has become routinely used in veterinary medicine, particularly in immunology and hematology. This dissertation aimed to study the distribution of leukocytes through the analysis of CSF and peripheral blood samples by flow cytometry assessing its importance in the diagnosis of CNS diseases. Three clinical cases will be presented, in which the percentage of the main populations of leukocytes (neutrophils, monocytes/macrophages and lymphocytes) and lymphocytes subtypes, namely B, T helper and T cytotoxic lymphocytes were obtained. In each case, there was an inversion of the predominant T lymphocyte subtype between peripheral blood and CSF, which may be associated with disease. In the peripheral blood samples, the percentage of CD4+ T lymphocytes exceeded the CD8+ T lymphocytes, which was the predominant subtype in CSF. The results suggest that the CSF analysis by flow cytometry can provide additional relevant information to the diagnosis of CNS diseases, giving space for new applications for flow cytometry in veterinary medicine. N/A

Background and objectives: To investigate the differences in the number of squamous epithelial cells carried to the spinal canal by three different types of spinal needle tip of the same size. Methods: Patients were allocated into three groups (Group I, Group II, Group III). Spinal anesthesia was administered to Group I (n = 50) using a 25G Quincke needle, to Group II (n = 50) using a 25G pencil point spinal needle, and to Group III (n = 50) using a non-cutting atraumatic needle with special bending. The first and third drops of cerebral spinal fluid (CSF) samples were taken from each patient and each drop was placed on a slide for cytological examination. Nucleated and non-nucleated squamous epithelial cells on the smear preparations were counted. Results: There was statistically significant difference between the groups in respect to the number of squamous epithelial cells in the first drop (p 0.05 for each group). Conclusions: In this study of different needle tips, it was seen that with atraumatic needle with special bending a significantly smaller number of cells were transported when compared to the Quincke tip needles, and with pencil point needles. Resumo: Justificativa e objetivo: Investigar as diferenças no número de células epiteliais escamosas transportadas para o canal medular por três tipos diferentes de pontas de agulhas espinhais do mesmo tamanho. Métodos: Os pacientes foram alocados em três grupos (Grupo I, Grupo II, Grupo III). Raquianestesia foi administrada aos pacientes do Grupo I (n = 50) com agulha Quincke de 25G, do Grupo II (n = 50) com agulha espinhal ponta de lápis de 25G e do Grupo III (n = 50) com agulha atraumática não cortante de curvatura especial. A primeira e terceira gotas de líquido cefalorraquidiano (LCR) foram colhidas de cada paciente para amostra e cada gota foi colocada em lâmina para exame citológico. As células epiteliais escamosas nucleadas e não nucleadas sobre as lâminas de esfregaço foram contadas. Resultados: Houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos em relação ao número de células epiteliais escamosas na primeira gota (p 0,05, para cada grupo). Conclusões: Neste estudo de pontas de agulha diferentes, verificamos que com a agulha atraumática de curvatura especial o número de células transportadas foi significativamente menor, em comparação com as agulhas Quincke e ponta de lápis. Keywords: Spinal anesthesia, Cerebrospinal fluid, Spinal needles, Epithelial cells, Palavras-chave: Raquianestesia, Líquido cefalorraquidiano, Agulhas espinhais, Células epiteliais

The polyspecific antibody synthesis in multiple sclerosis (MS) gained diagnostic relevance with the frequent combination of measles-, rubella- and varicella zoster antibodies (MRZ-antibody reaction) but their pathophysiological role remains unknown. This review connects the data for intrathecal polyspecific antibody synthesis in MS and neurolupus with observations in the blood of patients with Guillain-Barré syndrome (GBS). Simultaneously increased antibody and autoantibody titers in GBS blood samples indicate that the polyspecific antibodies are based on a general property of an immune network, supported by the deterministic day-to-day concentration variation of antibodies in normal blood. Strongly correlated measles- and rubella- antibody variations point to a particular connectivity between the MRZ antibodies. The immune network, which provides serological memory in the absence of an antigen, implements the continuous change of the MRZ pattern in blood, not followed by the earlier immigrated B cells without corresponding connectivity in the brain. This may explain the different antibody patterns in cerebrospinal fluid, aqueous humor and blood of the individual MS patient. A complexity approach must implement a different view on causation in chronic diseases and causal therapies. RESUMO A síntese de anticorpos poliespecíficos em esclerose múltipla (EM) ganhou relevância diagnóstica com a combinação frequente de anticorpos contra sarampo, rubéola e varicela-zoster (reação de anticorpos MRZ), mas seu papel fisiopatológico permanece desconhecido. Esta revisão relaciona os dados da síntese intratecal de anticorpos poliespecíficos em EM e Neurolupus com observações no sangue de pacientes com síndrome de Guillain Barré (SGB). Simultaneamente, os títulos aumentados de anticorpos e autoanticorpos em amostras de sangue de SGB indicam que os anticorpos poliespecíficos se baseiam numa propriedade geral de uma rede imunitária, suportada pela variação determinística da concentração diária de anticorpos no sangue normal. As variações fortemente correlacionadas de anticorpos contra sarampo e rubéola apontam para uma conectividade particular entre os anticorpos MRZ. A rede imunitária, que fornece memória sorológica na ausência de um antígeno, implementa a mudança contínua do padrão MRZ no sangue, não seguida pelas células B que imigraram anteriormente sem conectividade no cérebro. Isto pode explicar os diferentes padrões de anticorpos no LCR, humor aquoso e sangue do paciente individual de EM. Uma abordagem complexa deve implementar uma visão diferente sobre a causalidade em doenças crônicas e terapias causais.

Submitted by DANIELLE JAQUETA BARBERINI null (daniellebarberini@yahoo.com.br) on 2017-07-31T19:56:18Z No. of bitstreams: 1 Tese doutorado barberini dj.pdf: 3357947 bytes, checksum: 0c68557b936e62daac02074889c29f94 (MD5) Rejected by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-08-01T13:34:07Z (GMT) Submitted by DANIELLE JAQUETA BARBERINI null (daniellebarberini@yahoo.com.br) on 2017-08-01T13:49:07Z No. of bitstreams: 1 Danielle Jaqueta Barberini - Doutorado.pdf: 3565921 bytes, checksum: b779c3d1931ae6bcab5c211a7b3a0f89 (MD5) Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-08-01T15:14:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 barberini_dj_dr_bot_parc.pdf: 226378 bytes, checksum: 35e2c0a83ad34244bc647e3d675a15bd (MD5) Made available in DSpace on 2017-08-01T15:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 barberini_dj_dr_bot_parc.pdf: 226378 bytes, checksum: 35e2c0a83ad34244bc647e3d675a15bd (MD5) Previous issue date: 2017-07-24 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) As células-tronco mesenquimais (CTM) apresentam propriedades antiinflamatórias, imunomoduladoras, neuroprotetoras e neurorregenerativas. Pela capacidade regenerativa limitada do tecido neural, o potencial terapêutico das células-tronco tem sido estudado em várias enfermidades do sistema nervoso central (SNC). Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade, segurança e a resposta a transplantes intratecais sucessivos, de CTM provenientes de diversas fontes em equinos. Para isso, foram avaliados o potencial de transdiferenciação, terapêutico e o co-cultivo com líquido cefalorraquidiano (LCR) de CTM provenientes da medula óssea, tecido adiposo e cordão umbilical. Posteriormente, as CTM foram utilizadas para o transplante por via intratecal (IT) pela cisterna lombo-sacra (LS), atlanto-occipital (AO) e entre as vértebras C1-C2 em animais sadios (GS), totalizando 3 aplicações com intervalo de 30 dias. Adicionalmente as CTM foram rastreadas por cintigrafia após os transplantes pelas via AO e LS. Finalmente, as CTM foram utilizadas para o transplante IT entre as vértebras C1-C2 em animais com incoordenação motora decorrente de Mieloencefalite Equina por Protozoário (MEP) – grupo doente (GD), sob o mesmo protocolo. Todos os animais (GS e GD) foram avaliados por exame clínico e neurológico, análise hematológica e do LCR antes e após os transplantes. Os resultados demonstraram que as CTM provenientes de diversas fontes apresentaram efeitos positivos na presença de LCR, é uma terapia segura e viável utilizando diferentes vias intratecais, com altas doses e sucessivos transplantes. Adicionalmente, o transplante IT através do espaço entre C1-C2 demonstrou ser mais viável para ser realizado a campo e em animais que apresentam sinais neurológicos. Finalmente, a terapia com CTM demonstrou efeitos benéficos para sequelas crônicas em medula espinhal decorrentes da MEP. Mesenchymal stem cells (MSC) have anti-inflammatory, immunomodulatory, neuroprotective and neuro-regenerative properties. Due to the limited regenerative capacity of neural tissue, the therapeutic potential of stem cells has been studied in several pathological conditions of the central nervous system (CNS). Therefore, the objective of this study was to evaluate the viability, safety and the response to successive intrathecal injections of MSC from different sources in horses. For that, the transdifferentiation, therapeutic potential and co-culture of MSC with cerebrospinal fluid (CSF) from bone marrow, adipose tissue and umbilical cord were evaluated. Later, MSC were used for intrathecal (IT) transplantation through the lumbosacral cistern (LS), atlanto-occipital (AO) and between the C1-C2 vertebrae into healthy horses (HG), totalizing 3 injections between 30 days apart. Additionally, MSC tracking were performed after AO and LS transplantation. After this step, MSC were used for IT transplantation through the space between the C1-C2 vertebrae in horses with Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM) sequelae - sick group (SG) under the same protocol. All animals (HG and SH) were evaluated by serial clinical and neurological exams, hematological and CSF analysis before and after transplantation. The results demonstrated that MSC from several sources is a possibility of therapy for the CNS diseases, because their behavior in the presence of CSF have shown positive effects, it is a safe and viable therapy using different intrathecal routes, and safe even with high doses and successive transplants of MSC. In addition, IT transplantation between C1-C2 has been shown to be more feasible to be performed in the field and in animals with neurological signs. Finally, MSC therapy demonstrated beneficial effects for chronic sequelae in the spinal cord from EPM. FAPESP: 2013/26931-0 FAPESP: 2014/20550-8

Objective To measure the role of enterovirus detection in cerebrospinal fluid compared with the Bacterial Meningitis Score in children with meningitis. Methods A retrospective cohort based on analysis of medical records of pediatric patients diagnosed as meningitis, seen at a private and tertiary hospital in São Paulo, Brazil, between 2011 and 2014. Excluded were patients with critical illness, purpura, ventricular shunt or recent neurosurgery, immunosuppression, concomitant bacterial infection requiring parenteral antibiotic therapy, and those who received antibiotics 72 hours before lumbar puncture. Results The study included 503 patients. Sixty-four patients were excluded and 94 were not submitted to all tests for analysis. Of the remaining 345 patients, 7 were in the Bacterial Meningitis Group and 338 in the Aseptic Meningitis Group. There was no statistical difference between the groups. In the Bacterial Meningitis Score analysis, of the 338 patients with possible aseptic meningitis (negative cultures), 121 of them had one or more points in the Bacterial Meningitis Score, with sensitivity of 100%, specificity of 64.2%, and negative predictive value of 100%. Of the 121 patients with positive Bacterial Meningitis Score, 71% (86 patients) had a positive enterovirus detection in cerebrospinal fluid. Conclusion Enterovirus detection in cerebrospinal fluid was effective to differentiate bacterial from viral meningitis. When the test was analyzed together with the Bacterial Meningitis Score, specificity was higher when compared to Bacterial Meningitis Score alone. RESUMO Objetivo Avaliar o papel da pesquisa de enterovírus no líquido cefalorraquidiano em comparação com o Escore de Meningite Bacteriana em crianças com meningite. Métodos Coorte retrospectiva, realizada pela análise de prontuários, incluindo pacientes pediátricos, com diagnóstico de meningite e atendidos em um hospital privado e terciário, localizado em São Paulo, entre 2011 e 2014. Foram excluídos os pacientes com doença crítica, púrpura, derivação ventricular ou neurocirurgia recente, imunossupressão, outra infecção bacteriana concomitante que necessitasse de antibioticoterapia parenteral e aqueles que receberam antibiótico 72 horas antes da punção lombar. Resultados Foram incluídos no estudo 503 pacientes. Destes, 64 foram excluídos e 94 não realizaram todos os exames para análise. Dos 345 pacientes restantes, 7 ficaram no Grupo de Meningite Bacteriana e 338 no Grupo de Meningite Asséptica. Não houve diferença estatística entre os grupos. Na análise do Escore de Meningite Bacteriana, dos 338 pacientes com possível meningite asséptica (culturas negativas), 121 deles tiveram um ou mais pontos para o Escore de Meningite Bacteriana, com valor de sensibilidade de 100%, especificidade de 64,2% e valor preditivo negativo de 100%. Dos 121 pacientes com Escore de Meningite Bacteriana positivo, 71% (86 pacientes) tiveram a pesquisa de enterovírus positiva no líquido cefalorraquidiano. Conclusão A pesquisa de enterovírus no líquido cefalorraquidiano mostrou-se eficaz em diferenciar a meningite bacteriana da viral. Analisada junto com o Escore de Meningite Bacteriana, a especificidade foi maior em comparação ao Escore de Meningite Bacteriana isolado.

The cerebrospinal fluid analysis has been employed for supporting multiple sclerosis diagnosis and ruling out the differential diagnoses. The most classical findings reflect the inflammatory nature of the disease, including mild pleocytosis, mild protein increase, intrathecal synthesis of immunoglobulin G, and, most typically, the presence of oligoclonal bands. In recent years, new biomarkers have emerged in the context of multiple sclerosis. The search for new biomarkers reflect the need of a better evaluation of disease activity, disease progression, and treatment efficiency. A more refined evaluation of disease and therapy status can contribute to better therapeutic choices, particularly in escalation of therapies. This is very relevant taking into account the availability of a greater number of drugs for multiple sclerosis treatment in recent years. In this review, we critically evaluate the current literature regarding the most important cerebrospinal fluid biomarkers in multiple sclerosis. The determination of biomarkers levels, such as chemokine ligand 13, fetuin A, and mainly light neurofilament has shown promising results in the evaluation of this disease, providing information that along with clinical and neuroimaging data may contribute to better therapeutic decisions. RESUMO A análise do líquido cefalorraquidiano tem sido empregada para avaliação diagnóstica da esclerose múltipla e a exclusão dos diagnósticos diferenciais. Os achados clássicos refletem a natureza inflamatória da doença, incluindo discreta pleocitose, leve hiperproteinorraquia, aumento da síntese intratecal de imunoglobulina G e, mais tipicamente, a presença de bandas oligoclonais. Nos últimos anos, surgiram novos biomarcadores para esclerose múltipla, e esta busca por marcadores reflete a necessidade de melhor avaliar a atividade e a progressão da doença, bem como a eficácia terapêutica. Uma avaliação mais refinada da atividade da doença e da resposta aos medicamentos pode contribuir para melhores decisões terapêuticas, particularmente no que se refere à troca de medicação. Isto é muito importante nos dias de hoje, quando surgem novas opções medicamentosas. Neste artigo de revisão, avaliamos criticamente a literatura atual referente aos novos marcadores liquóricos na esclerose múltipla. A mensuração destes marcadores, como a quimiocina CXCL13, fetuína A e, principalmente, o neurofilamento de cadeia leve, demonstrou resultados promissores na avaliação da doença, provendo informações que, em conjunto com dados clínicos e de neuroimagem, podem contribuir para melhores decisões terapêuticas.

Objective: The present study is to describe the clinical impact of S100 and S100β for the evaluation of cerebral damage in cardiac surgery with or without the use of cardiopulmonary bypass (CPB). Methods: Quantitative results of S100 and S100β reported in the literature of the year range 1990-2014 were collected, screened and analyzed. Results: Cerebrospinal fluid and serum S100 levels showed a same trend reaching a peak at the end of CPB. The cerebrospinal fluid/serum S100 ratio decreased during CPB, reached a nadir at 6 h after CPB and then increased and kept high untill 24 h after CPB. Serum S100 at the end of CPB was much higher in infant than in adults, and in on-pump than in off-pump coronary artery bypass patients. ∆S100 increased with age and CPB time but lack of statistical significances. Patients receiving an aorta replacement had a much higher ∆S100 than those receiving a congenital heart defect repair. Serum S100β reached a peak at the end of CPB, whereas cerebrospinal fluid S100 continued to increase and reached a peak at 6 h after CPB. The cerebrospinal fluid/serum S100β ratio decreased during CPB, increased at the end of CPB, peaked 1 h after CPB, and then decreased abruptly. The increase of serum S100β at the end of CPB was associated with type of operation, younger age, lower core temperature and cerebral damages. ∆S100β displayed a decreasing trend with age, type of operation, shortening of CPB duration, increasing core temperature, lessening severity of cerebral damage and the application of intervenes. Linear correlation analysis revealed that serum S100β concentration at the end of CPB correlated closely with CPB duration. Conclusion: S100 and S100β in cerebrospinal fluid can be more accurate than in the serum for the evaluations of cerebral damage in cardiac surgery. However, cerebrospinal fluid biopsies are limited. But serum S100β and ∆S100β seem to be more sensitive than serum S100 and ∆S100. The cerebral damage in cardiac surgery might be associated with younger age, lower core temperature and longer CPB duration during the operation. Effective intervenes with modified CPB circuit filters or oxygenators and supplemented anesthetic agents or priming components may alleviate the cerebral damage. Objetivo: O presente estudo descreve o impacto clínico de S100 e S100β para a avaliação do dano cerebral em cirurgia cardíaca com ou sem o uso de circulação extracorpórea (CEC). Métodos: Os resultados quantitativos de S100 e S100β relatados na literatura entre os anos 1990 e 2014 foram recolhidos, rastreados e analisados . Resultados: Os níveis do fluido cerebroespinal e níveis séricos S100 mostram uma mesma tendência, atingindo um pico no final da CEC. A relação de fluido cerebroespinal e soro S100 diminuiu durante a CEC, chegando a um nadir 6 h após a CEC, aumentando e mantendo alta até 24 h após a CEC. O soro S100 no final da CEC foi muito maior no infantil do que em adultos, e em pacientes de revascularização miocárdica com CEC do que em pacientes sem CEC. ∆S100 aumentou com a idade e tempo de CEC, mas sem significância estatística. Os pacientes que receberam substituição da aorta tinham um ∆S100 muito maior do que aqueles que fizeram reparo dos defeitos cardíacos congênitos. Soro S100β atingiu um pico no final da CEC, enquanto líquido cefalorraquidiano S100 continuou a aumentar e atingir um pico 6 h após a CEC. A proporção entre soro S100β e líquido cefalorraquidiano diminuiu durante a CEC, aumentando no final da CEC, com pico 1 h após a CEC, em seguida, diminuiu abruptamente. O aumento de soro S100β no final da CEC foi associado com o tipo de operação, menor idade, menor temperatura do coração e danos cerebrais. ∆S100β exibiu tendência decrescente com a idade, tipo de operação, encurtamento da duração da CEC, o aumento da temperatura do coração, diminuindo a gravidade do dano cerebral e da aplicação de intervenções. Análise de correlação linear revelou que a concentração sérica de S100β no final da CEC está intimamente relacionada com a duração do procedimento. Conclusão: Níveis de S100 e S100β no líquido cefalorraquidiano podem ser mais precisos do que no soro para as avaliações de dano cerebral em cirurgia cardíaca. No entanto, as biópsias liquóricas são limitadas. Mas S100β e ∆S100β do soro parecem ser mais sensíveis do que o soro S100 e ∆S100. O dano cerebral em cirurgia cardíaca pode estar associado com a idade mais jovem, menor temperatura do núcleo e maior duração da CEC durante a operação. Intervenções eficazes com filtros modificados no circuito de CEC ou oxigenadores complementadas com agentes anestésicos ou componentes iniciadores podem aliviar o dano cerebral.

INTRODUCTION: Increased production and disorders in the circulation or absorption of cerebrospinal fluid (CSF) leads to increased intracranial pressure and causes a condition called hydrocephalus. The most common treatment for this disorder is the implantation of a ventricle-peritoneal shunt, which consists of the insertion of a ventricular catheter in the cerebral ventricle, a neurological valve for drainage control and a peritoneal catheter that leads the CSF to the abdominal region. The International Organization for Standardization (ISO) 7197 introduced requirements for the design and production of the shunts and neurological valve, including in vitro hydrodynamic tests, which are indispensable for evaluating the performance of the CSF drainage systems. METHODS: A testing rig built in accordance with ISO 7197 was evaluated for the uncertainty of flow and opening and closing pressure measurements, the pressure-flow relationship and reflux neurological valve resistance. The infusion pump and pressure measurement system were evaluated for calibration, hysteresis behavior and stability to determine the experimental uncertainties from hydrodynamic testing of two commercial products. RESULTS: The equipment showed uncertainties of less than 1% in the infusion pump, less than 4% in the pressure sensor and adequate performance for the hydrodynamic tests. CONCLUSION: The hydrodynamic test rig allowed the opening and closing pressures and the resistance to reflux to be obtained, and it also allowed the determination of the pressure and flow rate characteristics of two neurological commercial valves with experimental uncertainties that do not impact the results and the evaluation of in vitro performance of a shunt.

Made available in DSpace on 2014-10-01T13:08:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-01Bitstream added on 2014-10-01T14:03:01Z : No. of bitstreams: 1 S0100-736X2013001200012.pdf: 712853 bytes, checksum: 89effe17e843ec9265298ee27b274a4d (MD5) A presente pesquisa foi realizada com o objetivo de desenvolver e adaptar técnicas diagnósticas em neurologia para primatas não humanos, da espécie Alouatta guariba Geoffroy Saint-Hilaire, 1812 (bugio-ruivo) saudáveis e mantidos em cativeiro. Foram realizadas análises físico-químicas e citológicas do líquido cefalorraquidiano obtido na cisterna magna de oito bugios-ruivos. Para realização dos exames, todos os animais foram contidos quimicamente com associação de cetamina, xilazina e midazolam e anestesia inalatória com isoflurano. Os resultados das análises do líquido cefalorraquidiano demonstraram valores médios de proteína: 16,92mg/dL±9,84; glicose: 131,25mg/dL±106,7; pH: 8,37±0,69; células nucleadas: 0,5/mm³±0,75; hemácias: 49,37/mm³±111,76 e pressão: 7,37cm H2O±1,77. O trabalho demonstrou a segurança e a eficácia da colheita do líquido cefalorraquidiano na cisterna magna de Alouatta guariba e os valores de referência para a espécie. This survey was conducted with the objective of developing and adapting diagnostic techniques in neurology for non-human primates, of the species Alouatta guariba Geoffroy Saint-Hilaire, 1812 (howler monkey) healthy and kept in captivity. Physical-chemical analyses were carried out in cerebrospinal fluid and its pressure measurement in the cisterna magna. Eight animals were used for the analysis of cerebrospinal fluid. In all procedures, were used chemical restraint and anesthesia with ketamine, xylazine and association of midazolam and inhalational anesthesia with isoflurane for carrying out the spinal tap. The cerebrospinal fluid analysis showed average values: protein: 16.92±9.84; glucose: 131.25mg/dL±106.7; pH: 8.37±0.69; nucleated cells: 0.5/mm³±0.75; red blood cells: 49.37/mm³±111.76 and CSF cisternal pressure: 7.37cm H2O±1.77. This study demonstrated the safety and efficacy of cerebrospinal fluid collection in the cisterna magna of Alouatta guariba, and the reference values for the specie. Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Clínica Veterinária Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Cirurgia e Anestesiologia Veterinária Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Clínica Veterinária, Serviço de Neurologia Veterinária Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho Faculdade de Medicina de Botucatu Departamento de Neurologia, Psiquiatria e Psicologia Médica Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Clínica Veterinária Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Cirurgia e Anestesiologia Veterinária Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Clínica Veterinária, Serviço de Neurologia Veterinária Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho Faculdade de Medicina de Botucatu Departamento de Neurologia, Psiquiatria e Psicologia Médica

Analysis on cerebrospinal fluid (CSF) in neurological diagnosis has always been considered to be a strong point among the main complementary examinations in Brazil. The present paper reviews the main events in the history of CSF in the neurological sciences, with emphasis on the founders of several CSF schools in our country from the beginning of the 20th century to the present time. No Brasil o estudo do líquido cefalorraquidiano (LCR) como arsenal diagnóstico para a neurologia sempre foi considerado um ponto forte entre os principais exames complementares. Neste artigo são revisados os fatos principais da história do LCR dentro das ciências neurológicas, com ênfase aos fundadores das diversas escolas de LCR do nosso país desde as primeiras décadas do século XX até o momento atual.

The central nervous system is the most commonly affected extramedullary site in acute lymphoblastic leukemia. Although morphologic evaluation of the cerebrospinal fluid has been traditionally used for diagnosing central nervous system involvement, it is a method of low sensitivity. The present study aimed at evaluating the use of immunophenotyping in the detection of blasts in the cerebrospinal fluid from children and adolescents with acute lymphoblastic leukemia.

FACEPE Introdução: Ocitocina, vasopressina e óxido nítrico são substâncias envolvidas na modulação da dor. Migrânea e fibromialgia são doenças que compartilham mecanismos fisiopatológicos semelhantes e tem a dor como principal característica, apresentando o envolvimento de muitas substâncias na origem do quadro álgico. Objetivo: dosar as concentrações de ocitocina, vasopressina e óxido nítrico no LCR de mulheres com migrânea e fibromialgia e correlacionar os níveis com: intensidade da dor de cabeça, impacto da cefaleia, sintomatologia de depressão e de ansiedade, níveis de estresse, qualidade do sono e fadiga. Método: amostra composta por 33 mulheres, as quais foram submetidas a coleta de LCR durante procedimento de raquianestesia com posterior análise pela técnica de radioimunoensaio. Além da coleta do LCR também foi solicitado que respondessem a questionários referentes ao impacto da cefaleia, depressão, ansiedade, estresse, fagida e qualidade de sono. As mulheres foram divididas em grupos de acordo com a presença de migrânea, de acordo com os critérios da ICHD-III e com a presença de fibromialgia, de acordo com os critérios da ACR (2010). Resultados: não foram encontradas diferenças estatísticas entre as concentrações das substâncias e os grupos de mulheres que não apresentavam dor, mulheres apenas com migrânea e mulheres com migrânea associada à fibromialgia, bem como também não houve correlação entre estas e intensidade da dor de cabeça, impacto da cefaleia, sintomatologia depressiva e ansiosa, fadiga, estresse e qualidade de sono. Conclusão: apesar de não ser evidenciada relação entre as concentrações liquóricas de ocitocina, vasopressina e óxido nítrico em mulheres com migrânea e com fibromialgia, não existem estudos envolvendo a análise dessas substâncias no LCR de humanos, sendo este um estudo pioneiro no que diz respeito a coletar substâncias envolvidas na modulação da dor no próprio SNC. Introduction: Oxytocin, vasopressin and nitric oxide are substances involved in pain modulation. Migraine and fibromyalgia share similar pathophysiological mechanisms and have pain as the main characteristic, like involvement of many substances in the origin of pain. Objective: To measure oxytocin, vasopressin and nitric oxide levels in the CSF of women with migraine and/or fibromyalgia and to correlate its between: headache severity, headache impact, depression and anxiety symptoms, stress levels, sleep quality and fatigue. Method: Thirty-three 33 women composed the sample. CSF was collected during spinal anesthesia, and then these samples were analyzed by radioimmunoassay technique. These women were asked to answer questionnaires about the impact of headache, depression, anxiety, stress, fatigue, and quality of sleep. The women were divided into groups according to the presence of migraine according to the ICHD-III criteria and the presence of fibromyalgia according to the ACR (2010) criteria. Results: There was no difference between oxytocin and nitric oxide levels and the group of women with no pain, with only migraine and with migraine + FM. There was no correlation between oxytocin and nitric oxide levels and intensity of headache, impact of headache, depressive and anxious symptomatology, fatigue, stress and quality of sleep. Conclusion: Although no correlation were found between oxytocin, vasopressin and nitric oxide levels in women with migraine and fibromyalgia, there are no studies involving the analysis of these substances in human CSF, which is a pioneering study with regard to collect substances involved in CNS pain modulation.

Introdução: As mucopolissacaridoses (MPS) constituem um grupo de doenças lisossômicas caracterizadas pela deficiência de uma das enzimas responsáveis pela degradação dos glicosaminoglicanos (GAGs). É difícil determinar a incidência precisa de hidrocefalia em pacientes com MPS, pois não possui uma definição formal por consenso. Além disso, é difícil distinguir a hidrocefalia comunicante da dilatação ventricular secundária à atrofia cerebral, porque ambas apresentam características clínicas e neuroradiológicas comuns. Embora várias técnicas sejam usadas para identificar pacientes com MPS com maior probabilidade de ter hidrocefalia e responder ao tratamento cirúrgico, não existe um método definitivo para provar o diagnóstico. Objetivos: Avaliar a relação entre ventriculomegalia, volume cerebral e liquórico, fluxo de líquor aquedutal e cervical e pressão de abertura liquórica em pacientes com MPS, e detectar potenciais biomarcadores para as alterações da circulação liquórica. Métodos: Quarenta e três pacientes com MPS (12 MPS I, 15 MPS II, 5 MPS III, 9 MPS IV A e 2 MPS VI) realizaram testes clínicos e de desenvolvimento neurológico, ressonância magnética (RM) nas sequências T1, T2, FLAIR e por contraste de fase, seguidas por punção lombar para avaliação da pressão de abertura liquórica. Para a análise das variáveis da RM, foram medidos: volume cerebral e liquórico, carga de lesões na substância branca (LSB), índice de Evans, largura do terceiro ventrículo, ângulo do corpo caloso, espaços perivasculares dilatados (EPVD), estenose da junção craniocervical, volume de stroke aquedutal e cervical, e concentração de GAGs no líquor. Resultados: As formas graves e a macrocefalia estiveram significativamente associadas com a ventriculomegalia, principalmente com o índice de Evans (p = 0.004 e p = 0.008, respectivamente). A carga de LSB apresentou uma forte correlação com as medidas ventriculares e o volume liquórico ventricular (rs = 0.51, p = 0.001). A dilatação ventricular supratentorial e o volume de líquor ventricular apresentaram uma correlação moderada com o volume de stroke aquedutal (VSA) (rs = 0.46, p = 0.002). A pressão de abertura liquórica não se correlacionou nem com as três medidas da ventriculomegalia, nem com a volumetria liquórica, nem com o VSA. O prejuízo cognitivo e os EPVD mostraram uma associação significativa com a ventriculomegalia, especialmente com a largura do terceiro ventrículo (p = 0.019 e p = 0.001, respectivamente). Os EPVD em quantidade aumentada também apresentaram uma significativa associação com o VSA elevado (p = 0.007). Conclusões: Nos pacientes com MPS, a ventriculomegalia está associada a um fenótipo grave da doença, maior declínio cognitivo e maior extensão das LSB e EPVD. Existem associações entre as medidas de fluxo liquórico e as medidas relacionadas à volumetria liquórica. Além disso, as medidas volumétricas estão associadas a quantidade de EPVD. Background: The mucopolysaccharidoses (MPS) are a group of lysosomal diseases characterized by a deficiency in one of the lysosomal enzymes responsible to degrade glycosaminoglycans (GAGs). The precise incidence of hydrocephalus in patients with MPS is hard to determine, because it lacks a formal, consensus-based definition. In addition, it is difficult to distinguish communicating hydrocephalus from ventricular dilatation secondary to brain atrophy, because both share common clinical and neuroradiological features. Although various techniques are used to identify MPS patients who are most likely to have hydrocephalus and respond to surgical treatment, no definitive method exists to prove diagnosis. Objectives: To assess the relationship between ventriculomegaly, brain and cerebrospinal fluid (CSF) volumes, aqueductal and cervical CSF flows, and CSF opening pressure in MPS patients, and to provide potential biomarkers for abnormal CSF circulation. Methods: Forty-three MPS patients (12 MPS I, 15 MPS II, 5 MPS III, 9 MPS IV A and 2 MPS VI) performed clinical and neurodevelopmental tests, and T1, T2, FLAIR and phase-contrast magnetic resonance imaging (MRI) followed by a lumbar puncture with the CSF opening pressure assessment. For the analysis of MRI variables, the following measures were performed: brain and CSF volumes, white matter (WM) lesion load, Evans’ index, third ventricle width, callosal angle, dilated perivascular spaces (PVS), craniocervical junction stenosis, aqueductal and cervical CSF stroke volumes, and CSF GAGs concentration Results: The severe forms and the macrocephaly were significantly associated with the ventriculomegaly, mainly with the Evans’ index (p = 0.004 and p = 0.008, respectively). The WM lesion load presented a high correlation with the ventricular measurements and the ventricular CSF volume (rs = 0.51, p = 0.001). The supratentorial ventricular dilation and the ventricular CSF volume presented a moderate correlation with the aqueductal CSF stroke volume (ACSV) (rs = 0.46, p = 0.002). The CSF opening pressure did not correlate with either the three measures of ventriculomegaly, either with the CSF volumetry or with the ACSV. The cognitive impairment and the dilated PVS showed a significant association with the ventriculomegaly, especially with the width of the third ventricle (p = 0.019 and p = 0.001, respectively). Increased amount of dilated PVS also had a significant association with the elevated ACSV (p = 0.007). Conclusions: In MPS patients ventriculomegaly is associated with a severe phenotype, increased cognitive decline, WM lesion severity and enlarged PVS. There are associations between CSF flow measurements and measurements related to CSF volumetrics. Also, the volumetric measurements are associated with the degree of dilated PVS.

Objective: Clinical neurological assessment is challenging for severe traumatic brain injury (TBI) patients in the acute setting. Waves of neurochemical abnormalities that follow TBI may serve as fluid biomarkers of neurological status. We assessed the cerebrospinal fluid (CSF) levels of glutamate, lactate, BDNF, and GDNF, to identify potential prognostic biomarkers of neurological outcome. Methods: This cross-sectional study was carried out in a total of 20 consecutive patients (mean [SD] age, 29 [13] years; M/F, 9:1) with severe TBI Glasgow Coma Scale ≤ 8 and abnormal computed tomography scan on admission. Patients were submitted to ventricular drainage and had CSF collected between 2 and 4 h after hospital admission. Patients were then stratified according to two clinical outcomes: deterioration to brain death (nonsurvival, n = 6) or survival (survival, n = 14), within 3 days after hospital admission. CSF levels of brain-derived substances were compared between nonsurvival and survival groups. Clinical and neurological parameters were also assessed. Results: Glutamate and lactate are significantly increased in nonsurvival relative to survival patients. We tested the accuracy of both biomarkers to discriminate patient outcome. Setting a cutoff of >57.75, glutamate provides 80.0% of sensitivity and 84.62% of specificity (AUC: 0.8214, 95% CL: 54.55–98.08%; and a cutoff of >4.65, lactate has 100% of sensitivity and 85.71% of specificity (AUC: 0.8810, 95% CL: 54.55–98.08%). BDNF and GDNF did not discriminate poor outcome. Interpretation: This early study suggests that glutamate and lactate concentrations at hospital admission accurately predict death within 3 days after severe TBI.

Background: Very little is known about the incidence and prevalence of hydrocephalus in patients with mucopolysaccharidoses (MPS). The biggest challenge is to distinguish communicating hydrocephalus from ventricular dilatation secondary to brain atrophy, because both conditions share common clinical and neuroradiological features. The main purpose of this study is to assess the relationship between ventriculomegaly, brain and cerebrospinal fluid (CSF) volumes, aqueductal and cervical CSF flows, and CSF opening pressure in MPS patients, and to provide potential biomarkers for abnormal CSF circulation. Methods: Forty-three MPS patients (12 MPS I, 15 MPS II, 5 MPS III, 9 MPS IV A and 2 MPS VI) performed clinical and developmental tests, and T1, T2, FLAIR and phase-contrast magnetic resonance imaging (MRI) followed by a lumbar puncture with the CSF opening pressure assessment. For the analysis of MRI variables, we measured the brain and CSF volumes, white matter (WM) lesion load, Evans’ index, third ventricle width, callosal angle, dilated perivascular spaces (PVS), craniocervical junction stenosis, aqueductal and cervical CSF stroke volumes, and CSF glycosaminoglycans concentration. Results: All the scores used to assess the supratentorial ventricles enlargement and the ventricular CSF volume presented a moderate correlation with the aqueductal CSF stroke volume (ACSV). The CSF opening pressure did not correlate either with the three measures of ventriculomegaly, or the ventricular CSF volume, or with the ACSV. Dilated PVS showed a significant association with the ventriculomegaly, ventricular CSF volume and elevated ACSV. Conclusions: In MPS patients ventriculomegaly is associated with a severe phenotype, increased cognitive decline, WM lesion severity and enlarged PVS. The authors have shown that there are associations between CSF flow measurements and measurements related to CSF volumetrics. There was also an association of volumetric measurements with the degree of dilated PVS.

O envelhecimento é um processo complexo caracterizado pelo declínio progressivo de diferentes tecidos e sistemas, acarretando susceptibilidades ao desenvolvimento de doenças neurodegenerativas que estão diretamente associadas ao avanço da idade. O objetivo desse estudo foi investigar o perfil exossomal e a carga inflamatória de vesículas extracelulares em plasma e líquido cefalorraquidiano (LCR) no processo de envelhecimento. Para tanto foram usados ratos machos Wistar de 3 e 21 meses de idade (n = 12). O LCR e o plasma desses animais foram coletados e o isolamento de vesículas extracelulares foi realizado usando um kit comercial e a concentração de proteína total, a atividade de acetilcolinesterase (AChE), os níveis de CD63 e interleucina-1 beta (IL-1β) foram avaliados. Os resultados obtidos mostraram que os níveis circulantes de IL-1β foram significativamente menores nas vesículas extracelulares em comparação com jovens adultos, enquanto que, o envelhecimento não alterou os níveis de IL-1β no LCR; houve uma redução dos níveis de CD63, um marcador exossomal, em plasma de ratos envelhecidos, enquanto que um aumento relacionado à idade nos níveis de CD63 no LCR foi observado; e houve um aumento da atividade de AChE em plasma e LCR do grupo envelhecido. Nossos dados sugerem que o aumento dos níveis de IL-1β nas vesículas extracelulares circulantes pode ser associado, pelo menos em parte, a condições inflamatórias relacionadas ao envelhecimento e a alteração nas vesículas extracelulares do LCR, analisada pelos níveis de CD63, em ratos envelhecidos podem estar envolvidos na susceptibilidade a distúrbios neurodegenerativos. Aging is a complex process characterized by the progressive decline of different tissues and systems, increasing the susceptibility to neurodegenerative diseases. The aim of this study was to investigate exosomal markers and inflammatory cargo of extracellular vesicles obtained from cerebrospinal fluid and plasma in aging process. Male Wistar rats of 3-month-old and 21-month-old were used (n= 12). The cerebrospinal fluid and plasma of animals were collected and isolation of extracellular vesicles was performed using a commercial kit. Total protein concentration, acetylcholinesterase (AChE) activity, CD63, an exosomal marker, and interleukin-1β (IL-1β) levels were evaluated. The results obtained showed a decrease in circulating IL-1β levels in extracellular vesicles in aged rats, whereas, aging did not alter exosomal IL-1β levels in cerebrospinal fluid; an age-related increase was observed in CD63 levels in extracellular vesicles from cerebrospinal fluid, while its content was decreased in plasma extracellular vesicles of aged group; and there was an increase in AChE activity in plasma and cerebrospinal fluid of the aged group. Our data suggest that IL-1β levels in circulating extracellular vesicles can be linked at least in part to aging-related inflammatory conditions and a disruption on cerebrospinal fluid, evaluated by CD63 levels, in aged rats can be involved to susceptibility to neurodegenerative disorders.

Introdução A preocupação crescente com as possíveis consequências da replicação viral no sistema nervoso central mostra a necessidade da detecção do HIV no compartimento cerebral. O teste de PCR em tempo real desenvolvido pela Abbott, o Abbott m2000 RealTime HIV-1 (m2000rt), quantifica a carga viral do HIV em amostras de sangue com um procedimento efetivo e de baixo custo no nosso país, por isso é adotado como método padrão pelo Ministério da Saúde, mas não é utilizado em amostras de líquor. O ensaio produzido pela Roche, o COBAS TaqMan HIV-1, version 2 (COBAS v2.0), é o método de PCR em tempo real que tem sido amplamente utilizado para detectar a carga viral do HIV no compartimento cerebral. No entanto, esse método ainda não foi validado para esse propósito e seu custo pode ser uma limitação em diversas regiões com baixos recursos. Objetivos Considerando que não há uma metodologia padronizada para essa situação específica (detecção do HIV no líquor), nós conduzimos esse estudo a fim comparar os desempenhos dos testes m2000rt e COBAS v2.0, na tentativa de propôr um método alternativo e com baixos custos ao mais utilizado nesse contexto (COBAS v2.0). Métodos O estudo foi realizado no período de maio de 2015 a julho de 2016. O cálculo do tamanho da amostra foi baseado em dados de um estudo piloto que revelaram ser necessário um número mínimo de 37 amostras, para detectar uma diferença de 0,20 log10 na carga viral, com um coeficiente de correlação de 0,979 e um poder de 90%. Essa equação permitiria uma perda de 10%. As amostras de líquor foram coletadas consecutivamente a partir de 37 pacientes HIV positivos atendidos no Hospital de Clínicas de Porto Alegre/RS. Os métodos foram processados de acordo com o proposto pelo fabricante para utilização com amostras de plasma. Pequenas modificações foram necessárias no teste em estudo (m2000rt) para neutralizar qualquer diferença metodológica e evitar vieses de mensuração: o congelamento das amostras foi realizado a -20ºC até o momento da análise. O ensaio COBAS v2.0 foi utilizado como referência, uma vez que é o método mais utilizado. Foram realizadas análises quantitativas com resultados que estavam dentro da faixa linear em ambos os métodos (n = 18). Para tornar os métodos comparáveis, adotou-se o limite de detecção do ensaio m2000rt para ambos (40 cp/mL ou 1,60 log10 cp/mL). Os resultados abaixo do limite de detecção foram apresentados como uma variável categórica, uma vez que não são quantificáveis. O coeficiente de correlação de Pearson foi utilizado para comparar os métodos. A normalidade das variáveis foi então resumida calculando o viés estimado pela diferença média "đ " e o desvio padrão das diferenças realizadas pelo teste t para amostras pareadas. Com base na falta de normalidade dos métodos, o grau de concordância dos resultados das cargas virais de HIV foi analisado pelo índice Kappa. Esse estudo foi aprovado pelo comitê de ética do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (RS)/ Brasil, registrado na Plataforma Brasil como sendo CAAE: 35072214.7.0000.532. Conclusão Em conclusão, o teste m2000rt que foi modificado para este ensaio mostrou boa concordância e correlação com o teste mais utilizado nesse contexto e pode ser considerado um método alternativo com resultados semelhantes ao COBAS v2.0 e baixos custos na quantificação da carga viral do HIV no líquor. Sugerimos, principalmente em locais onde este método está prontamente disponível com uma relação custo-benefício aceitável, que o exame m2000rt deva ser realizado. Introduction Growing concern about possible consequences of viral replication in the central nervous system shows the need for HIV detection in the cerebral compartment. The real time PCR test developed by Abbott, Abbott RealTime m2000 HIV-1 (m2000rt) quantifies HIV viral load in blood samples effectively and with low costs Brazil. It is the standard method by the Brazilian Ministry of Health, but it has never been utilized to measure HIV in cerebrospinal fluid samples. The assay produced by Roche, COBAS TaqMan HIV-1, version 2 (COBAS v2.0) is the real-time PCR method that has been widely used to detect HIV viral load in cerebral compartment. However, this method has not yet been validated for this purpose and its cost may be a limitation in several regions in the world with low resources. Objective Taking under consideration that there was no standard methodology for this specific situation (detecting HIV in cerebrospinal fluid), we conducted this study to compare the performances of the m2000rt and COBAS v2.0 assays, to propose an alternative and low-cost method to more used in this context (COBAS v2.0). Methods The study was conducted from May 2015 to July 2016. The sample size calculation was based on data from a pilot trial that revealed that a minimum of 37 samples would be needed to detect a difference of 0.20 log10 in viral load, with a correlation coefficient of 0.979 and a 90% power. This equation would allow a 10% lost. CSF samples were collected consecutively from 37 HIV-positive patients seen at Hospital de Clínicas, Porto Alegre, RS. Methods were processed according to proposed by the manufacturer for utilization with plasma samples. Small modifications were necessary in the study test (m2000rt) to neutralize any methodological differences, thus avoiding measurement bias: the freezing of samples was carried out at -20ºC until the moment of the analysis. The COBAS v2.0 test was used as a reference since it is the most commonly used method. Quantitative analyzes were performed with results that were within the linear range in both methods (n=18). To make the methods comparable, the detection limit of the m2000rt assay for both (40 cp/mL or 1.60 log10 cp/mL) was adopted. The results below the limit of detection were presented as a categorical variable, since they are not quantifiable. The Pearson correlation coefficient was used to compare methods. The normality of the variables was then summarized calculating the estimated bias by the mean difference "đ" and standard deviation of the differences performed by t test for paired samples. Based on the lack of normality of the methods, the degree of agreement of the HIV viral load results was analyzed by the Kappa index. This study was approved by the Hospital de Clínicas of Porto Alegre (southern Brazil) Ethics Review Board, registered in the Brazil Platform as CAAE: 35072214.7.0000.532. Conclusion In conclusion, the m2000rt test that was modified for this trial showed good agreement and correlation with the most used test in this context and can be considered an alternative method with similar results to COBAS v2.0 and low costs in the HIV viral load quantification in cerebrospinal fluid. We suggest, especially in places where this method is readily available with an acceptable cost-benefit ratio, that the m2000rt exam should be performed.

Cerebrospinal fluid (CSF) is a complex liquid formed mainly by the choroid plexuses. After filling the ventricular system where it circulates, CSF flows out to the subarachnoid spaces through openings in the 4th ventricle. Following numerous studies on CSF pathways, these openings were first discovered in the 19th century by two notable researchers, François Magendie and Hubert von Luschka, who described the median and lateral openings subsequently named after them. Even after the studies of Axel Key and Gustav Magnus Retzius confirming these openings, their existence was questioned by many anatomists, yet acknowledged by others. Finally gaining the acceptance of all, recognition of the holes endures to the present day. Interest in these openings may be attributed to the several congenital or acquired pathological conditions that may affect them, usually associated with hydrocephalus. We report some historical aspects of these apertures and their discoverers. RESUMO O líquido cefalorraquidiano é um fluido complexo formado principalmente pelos plexos coroides que, após preencher o sistema ventricular, onde circula, flui para os espaços subaracnóides através de aberturas do 4o ventrículo. Antecedido por numerosos estudos sobre as vias do líquido cefalorraquidiano, estas aberturas foram descobertas pela primeira vez no século XIX graças a dois pesquisadores notáveis, François Magendie e Hubert von Luschka, que descreveram as aberturas mediana e laterais do 4o ventrículo, as quais receberam, então, seus nomes. Apesar dos estudos de Axel Key e Gustav Magnus Retzius que confirmaram a existência de tais aberturas, estas foram postas em dúvida por muitos anatomistas, mas aceitas por outros, para finalmente serem reconhecidas por todos, o que perdura até os presentes dias. O interesse por essas aberturas pode ser atribuído a diversas condições patológicas congênitas ou adquiridas que podem atingi-las, geralmente associadas à hidrocefalia. Aqui são relatados alguns aspectos históricos sobre essas aberturas e seus descobridores.

É sabido que a perda de líquido cefalorraquidiano (LCR) é o principal responsável pelo desenvolvimento da cefaleia pós-punção dural (CPPD). Sabe-se, também, que o sexo é um fator independente para o desenvolvimento da CPPD, sendo o sexo feminino o de maior incidência. Estudos experimentais avaliaram vários fatores que podem causar o aumento no extravasamento de LCR, porém, nenhum deles comparou a perda de LCR pós-punção entre os sexos. O objetivo deste estudo foi o de desenvolver um modelo experimental com a finalidade de simular uma punção dural e mensurar a perda de solução salina a 0,9% após o procedimento, bem como, comparar essa perda entre os sexos. This study investigated, in the form of an experiment, the leakage of cerebral spinal fluid (CSF) after dural puncture, and standardized the type of needle and manner of puncture, in order to make a direct comparison between males and females. Spinal anesthesia, which is carried out through dural puncture, was developed in 1800, and soon after, one of its side effects, postdural puncture headache (PDPH) was identified. PDPH was found to be the consequence of the loss of CSF. After the loss of CSF was identified like the main cause od PDPH, several pieces of research were carried out with the aim of minimizing the loss of CSF. The diameter of the needle was reduced, and the way of introducing it was changed. Studies also indentified a higher incidence of PDPH in females. In this study, we developed a dural sac model made of acrylic with a height of 40 centimeters (cm) and total volume of 170 mililiters (ml) and a dural attachment, mimicking an in vivo scnerario. The dura mater fragment was attached in cephalocaudal direction, maintaining the anatomical orientation of the tissue, they were perforated by a 27G Quincke needle. Saline solution 0.9% was used, which resembles CSF composition, the liquid volume was kept the same by replacement of each 10 minutes analyzed, with the total of 60 minutes. Comparing the total volume of liquid outflow by gender, there was a statistically significant difference (p = 0.029) the liquid outflow was higher using female-derived dura mater fragments than male-derived fragments, the results of the male sample demonstrated total median volume of 10ml (1,7ml = P25; P75 = 18,7ml) and female samples demonstrated a total median volume of 33,8ml (6,2ml = P25; P75 = 83ml). We conclude that exists inside dura structure, a mechanical component, which gradually reduces the loss of liquid and pieces of dura extends as a partial plug from the wall of the puncture site into the lumen, which is also filled with debris.

The analysis of intrathecal IgG, IgA and IgM synthesis in cerebrospinal fluid (CSF) and evaluation in combined quotient diagrams provides disease-related patterns. The compilation with complementary parameters (barrier function, i.e., CSF flow rate, cytology, lactate, antibodies) in a cumulative CSF data report allows a knowledge-based interpretation and provides analytical and medical plausibility for the quality assessment in CSF laboratories. The diagnostic relevance is described for neurological and psychiatric diseases, for which CSF analysis can’t be replaced by other diagnostic methods without loss of information. Dominance of intrathecal IgM, IgA or three class immune responses give a systematic approach for Facial nerve palsy, Neurotrypanosomiasis, Opportunistic diseases, lymphoma, Neurotuberculosis, Adrenoleucodystrophy or tumor metastases. Particular applications consider the diagnostic power of the polyspecific antibody response (MRZ-antibodies) in multiple sclerosis, a CSF-related systematic view on differential diagnostic of psychiatric diseases and the dynamics of brain- derived compared to blood-derived molecules in CSF for localization of paracytes. RESUMO A análise da síntese intratecal de IgG, IgA e IgM no liquido cefalorraquidiano (LCR) e a avaliação destas em diagramas com quocientes sugere padrões de diversas doenças. Estes dados, juntamente com outros parâmetros como a função de barreira, o fluxo liquórico, a citologia, o lactato e a pesquisa de anticorpos, integrados em uma ficha de paciente, permite uma interpretação baseada em conhecimento e permite também uma aferição da qualidade em laboratórios de LCR. A relevância diagnóstica é descrita para doenças neurológicas e psiquiátricas pois a análise do LCR não pode ser substituída por outros metódos diagnósticos sem perda de informação para o diagnóstico do paciente. O aumento da síntese intratecal de IgM, IgA ou das 3 classes de imunoglobulinas sugerem um diagnóstico sistemático de paralisia facial periférica, neurotripanosomiase, doenças oportunísticas, linfoma, neurotuberculose, adrenoleucodistrofia ou metástases de tumores cerebrais. A resposta poliespecífica de anticorpos contra sarampo, rubéola e varicela zoster (MRZ reação) é sugestiva de esclerose múltipla. Uma visão sistemática considera o diagnóstico diferencial de doenças psiquiátricas e doenças chrônicas. A dinâmica de moléculas derivadas do cérebro comparadas com aqueles derivadas do sangue é importante para a localização de parasitos em doenças parasitárias do sistema nervoso.

A obesidade, definida como o acúmulo excessivo ou anormal de gordura que pode causar dano à saúde do indivíduo, é considerada atualmente um dos principais problemas de saúde pública. Resulta de um desequilíbrio entre a ingestão alimentar e o gasto corporal de energia. O controle do balanço energético de animais e seres humanos é realizado pelo sistema nervoso central (SNC) por meio de conexões neuroendócrinas, em que hormônios periféricos circulantes, como a leptina e a insulina, sinalizam neurônios especializados do hipotálamo sobre os estoques de gordura do organismo e induzem respostas apropriadas para a manutenção da estabilidade desses estoques. A maioria dos casos de obesidade se associa a um quadro de resistência central à ação da leptina e da insulina. Em animais de experimentação, a dieta hiperlipídica é capaz de induzir um processo inflamatório no hipotálamo, que interfere com as vias intracelulares de sinalização por esses hormônios, resultando em hiperfagia, diminuição do gasto de energia e, por fim, obesidade. Evidências recentes obtidas por intermédio de estudos de neuroimagem e avaliação de marcadores inflamatórios no líquido cefalorraquidiano de indivíduos obesos sugerem que alterações semelhantes podem estar presentes também em seres humanos. Nesta revisão, apresentamos sumariamente os mecanismos envolvidos com a perda do controle homeostático do balanço energético em modelos animais de obesidade e as evidências atuais de disfunção hipotalâmica em humanos obesos. Obesity, defined as abnormal or excessive fat accumulation that may impair life quality, is one of the major public health problems worldwide. It results from an imbalance between food intake and energy expenditure. The control of energy balance in animals and humans is performed by the central nervous system (CNS) by means of neuroendocrine connections, in which circulating peripheral hormones, such as leptin and insulin, provide signals to specialized neurons of the hypothalamus reflecting body fat stores, and induce appropriate responses to maintain the stability of these stores. The majority of obesity cases are associated with central resistance to both leptin and insulin actions. In experimental animals, high-fat diets can induce an inflammatory process in the hypothalamus, which impairs leptin and insulin intracellular signaling pathways, and results in hyperphagia, decreased energy expenditure and, ultimately, obesity. Recent evidence obtained from neuroimaging studies and assessment of inflammatory markers in the cerebrospinal fluid of obese subjects suggests that similar alterations may be also present in humans. In this review, we briefly present the mechanisms involved with the loss of homeostatic control of energy balance in animal models of obesity, and the current evidence of hypothalamic dysfunction in obese humans.

Calcification and ossification of the ligamentum flavum or of the posterior longitudinal ligament are causes of compressive myelopathy, more frequent in the lower thoracic levels, and extremely rare in Western populations. Surgical decompression is the only therapy, but the disease is usually progressive, and its recurrence after surgery is common. Inflammatory mediators might play a role in the progression of compressive myelopathy, but, to our knowledge, the therapeutic approach involving anti-inflammatory agents has never been tried before. We report a case of compressive myelopathy due to calcification of the ligamentum flavum, in which hyperproteinorachia and response to steroid therapy have been observed. Those data have not been published before and might provide new ideas for the disease understanding.

Introducción: El SÍndrome HaNDL (Headache and neurologic deficits with cerebroespinal fluid lymphocytosis) por sus siglas en inglés, es una patologÍa que cursa con cefalea, focalización neurológica y linfocitosis en el lÍquido cefalorraquÍdeo. Objetivo: este artÍculo busca presentar un caso de SÍndrome de HaNDL, puesto que esta condición nosológica implica un reto diagnóstico. Resultados y conclusiones: Se presenta el caso de un paciente con diagnóstico de sÍndrome de HaNDL los hallazgos al examen fÍsico y del lÍquido cefalorraquÍdeo. [Barros-Gutiérrez CE, Silva-Monsalve E, Gualtero-Trujillo S. SÍndrome HaNDL. MedUNAB 2015; 17(3): 190-192]. Introduction: The syndrome of transient Headache and Neurological Deficits with cerebrospinal fluid Lymphocytosis, is a pathology that presents cephalalgia, neurological focalization and lymphocytes in the cerebrospinal fluid. Objective: This article presents a HaNDL Syndrome case, since this nosological condition implies a diagnostic challenge. Results and conclusions: A case of a patient with HaNDL syndrome diagnosis, physical examination findings and cerebrospinal fluid are presented.[Barros-Gutiérrez CE, Silva-Monsalve E, Gualtero-Trujillo S. HaNDL Syndrome. MedUNAB 2015; 17(3): 190-192].

Liquoric fistula (LF) is defined as the communication of the subarachnoid space with the external environment, which main complication is the development of infection in the central nervous system. We reported the case of a patient with non-traumatic eyelid liquoric fistula secondary to orbital meningocele (congenital lesion), which main clinical manifestation was unilateral eyelid edema. Her symptoms and clinical signs appeared in adulthood, which is uncommon. The patient received surgical treatment, with complete resolution of the eyelid swelling. In conclusion, eyelid cerebrospinal fluid (CSF) fistula is a rare condition but with great potential deleterious to the patient. It should be considered in the differential diagnosis of unilateral eyelid edema, and surgical treatment is almost always mandatory.

The involvement of the leptomeninges by metastatic tumors can be observed in solid tumors, in which case it is termed meningeal carcinomatosis (MC), and in lymphoproliferative malignant disease. It is more common in breast and lung cancer, as well as melanoma, with adenocarcinoma being the most frequent histological type. MC is usually a late event, with disseminated and progressive disease already present and, it is characterized by multifocal neurological signs and symptoms. Diagnosis is based on the evaluation of clinical presentation, cerebrospinal fluid and neuroimaging studies. The better systemic disease control is observed with new therapeutic agents, and the development of neuroimaging methods is responsible for the increasing incidence of such metastatic evolution. Intrathecal chemotherapy is generally the treatment of choice, although frequently palliative. Prognosis is guarded, although a higher performance status may indicate a subgroup of patients with a more favorable outcome. O acometimento leptomeníngeo por metástases tumorais pode ocorrer em tumores sólidos, sendo chamado de carcinomatose meníngea (CM), e também em doenças linfoproliferativas. Tumores de mama, pulmão e melanoma são os principais responsáveis pelos casos, e adenocarcinoma é a histologia mais frequentemente encontrada. A CM é um evento tardio na evolução da doença e caracteriza-se por sinais e sintomas neurológicos multifocais. O diagnóstico se faz pela avaliação conjunta do quadro clínico, neuroimagem e estudo do líquido cefalorraquidiano. O maior controle da doença sistêmica obtido com as novas modalidades terapêuticas e a baixa penetração de drogas no sistema nervoso central, aliados ao desenvolvimento nos métodos de neuroimagem observado nas últimas décadas, são fatores que respondem por um aumento na incidência desta apresentação. A quimioterapia intratecal é o tratamento de escolha, porém, frequentemente paliativo. O prognóstico é reservado, sendo que o melhor performance status pode selecionar um subgrupo de pacientes com melhor evolução.

Some studies have linked the presence of chemokines to the early stages of Alzheimer's disease (AD). Then, the identification of these mediators may contribute to diagnosis. Our objective was to evaluate the levels of beta-amyloid (BA), tau, phospho-tau (p-tau) and chemokines (CCL2, CXCL8 and CXCL10) in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with AD and healthy controls. The correlation of these markers with clinical parameters was also evaluated. The levels of p-tau were higher in AD compared to controls, while the tau/p-tau ratio was decreased. The expression of CCL2 was increased in AD. A positive correlation was observed between BA levels and all chemokines studied, and between CCL2 and p-tau levels. Our results suggest that levels of CCL2 in CSF are involved in the pathogenesis of AD and it may be an additional useful biomarker for monitoring disease progression.

In a few rare diseases, specialised studies in cerebrospinal fluid (CSF) are required to identify the underlying metabolic disorder. We aimed to explore the possibility of detecting key synaptic proteins in the CSF, in particular dopaminergic and gabaergic, as new procedures that could be useful for both pathophysiological and diagnostic purposes in investigation of inherited disorders of neurotransmission. Dopamine receptor type 2 (D2R), dopamine transporter (DAT) and vesicular monoamine transporter type 2 (VMAT2) were analysed in CSF samplesfrom 30 healthy controls (11 days to 17 years) by western blot analysis. Because VMAT2 was the only protein with intracellular localisation, and in order to compare results, GABA vesicular transporter, which is another intracellular protein, was also studied. Spearman’s correlation and Student’s t tests were applied to compare optical density signals between different proteins. All these synaptic proteins could be easily detected and quantified in the CSF. DAT, D2R and GABA VT expression decrease with age, particularly in the first months of life, reflecting the expected intense synaptic activity and neuronal circuitry formation. A statistically significant relationship was found between D2R and DAT expression, reinforcing the previous evidence of DAT regulation by D2R. To our knowledge, there are no previous studies on human CSF reporting a reliable analysis of these proteins. These kinds of studies could help elucidate new causes of disturbed dopaminergic and gabaergic transmission as well as understanding different responses to L-dopa in inherited disorders affecting dopamine metabolism. Moreover, this approach to synaptic activity in vivo can be extended to different groups of proteins and diseases.

Background : : : : The Shaker Dog Syndrome manifests itself as generalized tremors that usually affect the head and body of the patient. The tremors increase with movement and decrease at rest, and it may cease during sleep. The disorder develops mostly in 1-year to 5-year-old animals weighing below 15 kg. The diagnosis is based on the exclusion of other possible causes of tremors and a positive response to treatment with corticosteroids. The treatment consists of immunosuppressant doses of corticosteroids and it can be associated to decreasing diazepam doses during 8 to 12 weeks. Literature data are very rare and cannot be found in Brazil. Consequently, this study aimed at describing a Shaker Dog Syndrome case that is responsive to corticosteroids. Case : A 2-year-old mongrel female dog, weighting 7.5 kg, was referred to the Hospital de Clinicas Veterinarias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, presenting generalized tremors for 5 days, which would cease during sleep. In the neurological examination, the cranial nerve exam and the test for postural reactions were considered normal. The hematological and biochemical profile did not show alterations. The cervical spine radiography did not display bone alterations. A density of 1.016 was observed at the physical examination of the cerebrospinal fluid. The chemical examination revealed a glucose level of 100 mg/dL, negative bilirubin, negative ketones, absence of occult blood, pH 8.0, presence of protein traces, normal urobilinogen, negative reactive protein C (PCR), normal creatine kinase (CK) and aspartate aminotransferase (AST). The result of Pandy’s test was negative. Oral treatment with prednisone at a dose of 1.5 mg.kg -1 BID and diazepam at a dose of 0.5 mg.kg -1 BID was instituted, this latter during 4 days. The corticoid dose was maintained until total disappearance of the tremors, which occurred within 24 days. Afterwards, a gradual reduction of 50% of the dose was made every 7 days, during 4 weeks. Discussion : During anamnesis, tremors induced by trauma and medication were ruled out. Myelin abnormalities were also improbable, as they cause congenital tremors and do not quickly respond to corticosteroids. A colorless aspect and absence of occult blood and bilirubin was observed in the LCR analysis. The absence of turbidity and the presence of protein traces in this sample demonstrate normality (38.7 mg/dL ± 15.49). Chemical and physical exams did not demonstrate alterations – pH 8.0 (8.30 ± 0.34) and a density of 1.016 (1007 ± 1.83), respectively. The glucose concentration in the cerebrospinal fluid was not reduced. The results obtained from Pandy’s and reactive protein C tests were negative. The analysis of AST and CK enzymes was normal. Since the values obtained from enzymatic and protein evaluations of the cerebrospinal fluid were normal, they suggest an absence of infectious and degenerative processes. The immunosuppressant prednisone dose recommended by literature is variable; thus, the smallest corticosteroid dose indicated was selected, which is 1.5 mg.kg -1 BID. An association with diazepam was made to reduce tremors. Usually, clinical improvement can occur within a few days, but the remission of clinical signs can take weeks. In the present case, the reduction of tremors occurred on the fourth day, with the complete disappearance in 24 days, without recurrence within a clinical follow-up period of 2 years.

O envelhecimento da população e o aumento da expectativa de vida resultam em um número cada vez maior de pacientes com demência. Os déficits cognitivos podem ser manifestações de uma doença curável do sistema nervoso central (por exemplo, neuroinflamação), como também de uma doença atualmente considerada irreversível, como a doença de Alzheimer (DA). Tendo em vista as novas abordagens terapêuticas para a DA, em que se avalia o potencial modificador da patogenia, torna-se necessário o estabelecimento de um diagnóstico confiável em vida. Embora a análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) e do soro seja realização de rotina em doenças neuroinflamatórias, ainda necessita de padronização para ser usada como instrumento auxiliar no diagnóstico clínico da DA. Vários parâmetros relacionados à DA (tau total, formas fosforiladas de tau, peptídeos Aβ, genótipo ApoE, p97 etc.) podem ser determinados no LCR. A combinação de alguns desses parâmetros proporciona sensibilidade e especificidade na faixa de 85% para o diagnóstico da DA, um valor usualmente atribuído a um bom instrumento de diagnóstico. Nesta revisão, são discutidas as publicações mais recentes sobre os marcadores neuroquímicos para o diagnóstico clínico das demências, com ênfase no diagnóstico precoce e diferencial da DA. Discutem-se brevemente as novas perspectivas oferecidas por tecnologias recentes, tais como a FCS (fluorescence correlation spectroscopy) e a técnica de espectrometria de massa pelo método SELDI-TOF (surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry).Aging of population, and increasing life expectancy result in an increasing number of patients with dementia. This symptom can be a part of a completely curable disease of the central nervous system (e.g, neuroinflammation), or a disease currently considered irreversible (e.g, Alzheimer's disease, AD). In the latter case, several potentially successful treatment approaches are being tested now, demanding reasonable standards of pre-mortem diagnosis. Cerebrospinal fluid and serum analysis (CSF/serum analysis), whereas routinely performed in neuroinflammatory diseases, still requires standardization to be used as an aid to the clinically based diagnosis of AD. Several AD-related CSF parameters (total tau, phosphorylated forms of tau, Aß peptides, ApoE genotype, p97, etc.) tested separately or in a combination provide sensitivity and specificity in the range of 85%, the figure commonly expected from a good diagnostic tool. In this review, recently published reports regarding progress in neurochemical pre-mortem diagnosis of dementias are discussed with a focus on an early and differential diagnosis of AD. Novel perspectives offered by recently introduced technologies, e.g, fluorescence correlation spectroscopy (FCS) and surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (SELDI-TOF MS) are briefly discussed.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS) is a progressive neurodegenerative disease that affects the somatic motor system through the degeneration of upper and lower motors neurons. Evidence suggests that the cerebrospinal fluid (CSF), which is in direct contact with the nervous system, has soluble substance that could cause injuries in motor neurons. Animal models that express mutant ALS associated genes have been created to study the various etiopathological mechanisms which manifest themselves similarly to that occur in ALS patients. However, these models best represent the etiology of the disease in familiar cases and there is not yet an animal model that represents the characteristics of the disease in sporadic form, despite the similarity between familiar and sporadic cases. Thus, the aim of this study was to evaluate the motor and histological changes after intracerebroventricular injection (i.c.v.) of CSF from ALS sporadic patients in rats. 43 seven-month-old Wistar rats were used, coming from the sectoral animal facility of the Department of Physiology at the Federal University of Sergipe. The study was divided into two experiments: (I) with a single administration i.c.v. of the CSF and (II) with repeated administration i.c.v. of the CSF. In the experiment I, the animals were divided into 3 groups: control (CTR, artificial CSF solution), non-ALS (N-ALS, CSF of patients without neurological disease) and ALS (ALS, LCR of patients with sporadic ALS) who received a single injection i.c.v. (7.5μL) and one week after were subjected to motor tests: strength test, catalepsy test, open field test and walking test once a week for 30 days. In the Experiment II, animals were divided into 3 groups: control (CTR) Non-ALS (N-ALS) and ALS and they received daily injection for 6 days, i.c.v. (5.0μL). Throughout the treatment the animals underwent the motor tests already mentioned. After the tests, in both experiments, rats were anesthetized, perfused, their spinal cords were removed and subjected to histological analysis by hematoxylin-eosin for general morphological observation. In the first experiment ,in ALS group, motor alteration was observed in the strength test, open field and in the walking test, accompanied by a reduction of motor neurons and glial cells in the thoracic and lumbar regions of the spinal cord. In the second experiment, Also in the ALS group, it was observed driving change in catalepsy, open field and in the walking test, accompanied by an increase of glial cells in the lumbar region of the spinal cord. Data presented in this study show that the CSF management of ALS patients can cause pathogenic mechanisms similar to those seen in humans and other animal models of ALS. A Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA) é uma doença neurodegenerativa progressiva, que afeta o sistema motor somático através da degeneração dos neurônios motores superiores e inferiores. Evidências apontam que o líquido cefalorraquidiano (LCR), que está em íntimo contato com o sistema nervoso, apresenta substâncias solúveis que podem provocar lesões em neurônios motores. Modelos animais que expressam genes mutantes associados à ELA foram desenvolvidos, para o estudo dos mais diversos mecanismos etiopatológicos que se manifestam de forma similar aos que ocorrem em pacientes com a doença. Entretanto, esses modelos representam melhor a etiologia da doença em casos familiares e, apesar da semelhança entre casos familiares e esporádicos, ainda não se tem um modelo animal que represente características da doença nesta última. Diante disso, o objetivo do presente trabalho foi avaliar as alterações motoras e histológicas após injeção intracerebroventricular (i.c.v.) de LCR de pacientes com ELA esporádica em ratos Wistar. Foram ultilizados 43 ratos Wistar, com idade aproximada de sete meses, provenientes do Biotério Setorial do Departamento de Fisiologia da Universidade Federal de Sergipe. O trabalho foi dividido em 2 experimentos: (I) com uma única administração i.c.v. de LCR e (II) com administrações repetidas i.c.v. de LCR. No experimento I os animais foram divididos em 3 grupos, controle (CTR, solução de LCR artificial), não-ELA (NELA, LCR de pacientes sem doenças neurológicas) e ELA (ELA, LCR de paciente com ELA esporádica) que receberam uma única injeção i.c.v. de 7,5 μL e após uma semana foram submetidos aos testes motores: teste de força, catalepsia, campo aberto e teste de marcha uma vez por semana durante 30 dias. No experimento II, os animais foram divididos em 3 grupos, controle (CTR), Não-ELA (N-ELA) e ELA que receberam uma injeção diária, durante 6 dias, i.c.v. de 5 μL. Ao longo do tratamento, os animais foram submetidos aos testes motores acima mencionados. Após os testes, em ambos experimentos, os ratos foram anestesiados, perfundidos, suas medulas removidas e submetidas à análise histológica pela coloração de hematoxilina-eosina para observação morfológica geral. No experimento I, no grupo ELA, foi observado alteração motora no teste de força, campo aberto e no teste de marcha, acompanhado por uma redução de neurônios motores e células gliais na região torácica e lombar da medula espinal. No experimento II, também no grupo ELA, foi observado alteração motora na catalepsia, campo aberto e no teste de marcha, acompanhado de um aumento de células gliais na região lombar da medula espinal. Os dados apresentados neste estudo mostram que a administração de LCR de pacientes com ELA pode provocar mecanismos patogênicos semelhantes aos observados em humanos e outros modelos animais de ELA.

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária A hidrocefalia é a doença congénita do sistema nervoso central mais comum em cães. Traduz--se numa distensão ativa do sistema ventricular cerebral resultante de uma passagem inadequada do líquido cefalorraquidiano, desde o seu local de produção até ao local de absorção. A obstrução pode ocorrer ao longo de todo o percurso e, é normalmente de origem congénita, podendo também ser adquirida. Os objetivos deste estudo consistiram na caracterização de uma amostra de canídeos (n=16) relativamente à raça, idade, sexo, porte corporal, sintomas/sinais clínicos, exame imagiológicos, decisão terapêutica e prognóstico, e a sua comparação com a bibliografia. A hidrocefalia foi também classificada em congénita ou adquirida e determinada a sua etiologia. Desta forma, catorze animais tinham hidrocefalia de origem congénita. A idade média ao diagnóstico foi de 13 meses, não parecendo haver relação com sexo e porte corporal. As raças que se encontram indicadas na bibliografia como predispostas não apresentaram grande incidência neste estudo. Os sinais clínicos mais frequentes foram a depressão (63%), o estrabismo posicional (50%) e os défices nas reações posturais (44%). Os grupos do exame neurológico que mais vezes se mostraram alterados foram a marcha (75%), a avaliação craniana (75%) e o estado mental (63%). Imagiologicamente detetou-se uma grande relação da hidrocefalia com malformação do tipo Chiari (31%), divertículo aracnóide no quarto ventrículo (19%) e estenose do aqueduto mesencefálico (19%). Ambas as abordagens médica e cirúrgica podem resultar numa boa evolução clínica, não se constatando que uma seja preferível à outra. O tratamento cirúrgico deve ser dirigido para a causa da hidrocefalia, quando possível. O prognóstico para a hidrocefalia está intimamente ligado com as doenças concomitantes e parece ser melhor quanto menor for a idade ao diagnóstico. Através deste estudo, o prognóstico para animais tratados com hidrocefalia parece ser favorável, sendo possível assegurar uma boa qualidade de vida e um tempo médio de sobrevivência de 17,4 meses, face a uma boa resposta terapêutica. ABSTRACT - Hydrocephalus in dogs – About sixteen clinical cases - Hydrocephalus is the most common congenital central nervous system (CNS) disease in dogs. This disease is an active distension of the cerebral ventricular system caused by an inadequate circulation of the cerebrospinal fluid (CSF) between its production and absorption sites. The obstruction can occur at any point of the way and, though it can be acquired, it’s usually due to a congenital defect. The purpose of this study was to characterize a dog sample (n=16) regarding the breed, age, sex, body size, clinical signs/symptoms, imaging exam, therapeutic decision and prognosis, and to compare those with the literature. The hydrocephalus was also classified as congenital or acquired and its etiology was determined. From the affected animals, fourteen had congenital hydrocephalus. The mean age at diagnosis was 13 months, and there was no apparent relation to sex and body size. The predisposed breeds referred in the literature didn’t have a major incidence in this study. The most frequent clinical signs were depression (63%), positional strabismus (50%) and postural reactions deficits (44%). The neurological examination groups that where more often affected were the gait (75%), cranial nerve assessment (75%) and mental status (63%). The imaging examination revealed a relationship between hydrocephalus and Chiari malformation (31%), fourth ventricle arachnoid diverticulum (19%) and mesencephalic aqueduct stenosis (19%). Both medical and surgical treatment can result in good follow-up, and it wasn’t observed that one is preferable to the other. When possible, the surgical treatment should be directed according to the cause of hydrocephalus. The prognosis for hydrocephalus correlates with the concomitante diseases and it seems better the younger the animal are when diagnosed. According to this study, the prognosis for animals treated with hydrocephalus seems positive, being possible to ensure a good quality of life and an average survival time of 17,4 months, if there is a good therapeutic response.

Objective To define how to best handle cerebrospinal fluid (CSF) specimens to obtain the highest positivity rate for the diagnosis of malignancy, comparing two different methods of cell concentration, sedimentation and cytocentrifugation. Methods A retrospective analysis of 411 CSF reports. Results This is a descriptive comparative study. The positive identification of malignant CSF cells was higher using the centrifuge than that using the Suta chamber (27.8% vs. 19.0%, respectively; p = 0.038). Centrifuge positively identified higher numbers of malignant cells in samples with a normal concentration of white blood cells (WBCs) (< 5 cells/mm3) and with more than 200 cells/mm3, although this was not statistically significant. There was no lymphocyte loss using either method. Conclusions Cytocentrifugation positively identified a greater number of malignant cells in the CSF than cytosedimentation with the Suta chamber. However, there was no difference between the methods when the WBC counts were within the normal range. RESUMO Objetivo Definir qual a melhor forma de concentrar amostras de LCR para obter maior porcentagem de positividade para o diagnóstico de infiltração neoplásica. comparando dois métodos diferentes de concentração de células, sedimentação e citocentrifugação. Métodos Análise retrospectiva de 411 laudos de LCR. Resultados Estudo comparativo descritivo. A identificação de células neoplásicas no LCR foi mais elevada quando usada a citocentrífuga do que a câmara de Suta (28% vs 19,0%, respectivamente; p = 0,038). Centrifugação identificou maior número de células neoplásicas em amostras com concentração de células < 5 células/mm3 e superior a 200 células/mm3, embora não significativo. Não houve perda de linfócitos usando qualquer um dos métodos. Conclusões A citocentrifugação identificou um número maior de células malignas no LCR do que a sedimentação com a câmara de Suta. No entanto, não houve diferença entre os métodos quando as contagens de leucócitos estavam dentro do intervalo normal.

The present work aimed to evaluate the pattern of CSF alterations in patients diagnosed with neurocysticercosis (NCC) in racemose form.Method This is a retrospective cohort study of patients with diagnosis of NCC in racemose form. CSF samples from 26 patients were analyzed. After patient-chart analysis was performed descriptive analysis of case studies and comparison between sexes in relation to variables were obtained with CSF by Mann-Whitney and Student’s t-tests.Results The sexes did not differ statistically when compared to pleocytosis in CSF. Eosinophils were present in 31% in samples while the ELISA test presented 80% sensitivity in this case series. Of the patient total, 24 presented a meningitis pattern with lymphocytic predominance.Conclusion There was no difference in inflammatory pattern between the sexes, with predominance of lymphocytic meningitis and 80% sensitivity by ELISA test of CSF patients with racemose form of NCC. O objetivo deste trabalho foi avaliar o padrão de alterações do LCR de pacientes com diagnóstico de neurocisticercose (NCC) na forma racemosa.Método Trata-se de estudo de coorte retrospectiva, de pacientes com diagnóstico de forma racemosa da NCC. Foram analisadas amostras de LCR de 26 pacientes. Após análise de prontuário foi realizada análise descritiva da casuística e comparação entre sexos em relação às variáveis obtidas com o LCR por meio dos testes de Mann-Whitney e t-Student.Resultados Não houve diferença estatisticamente significante quando comparado à pleocitose no LCR entre os sexos. Houve presença de eosinofilorraquia em 31% das amostras e o teste ELISA apresentou sensibilidade de 80% nesta casuística. Do total de paciente, 24 apresentaram padrão de meningite com predomínio linfocítico.Conclusão Não houve diferença no padrão inflamatório entre os sexos, com predomínio de meningite linfocítica e sensibilidade de 80% ao teste ELISA do LCR de pacientes da forma racemosa de NCC.

A sífilis é um agravo infectocontagioso causado pelo Treponema pallidum, de transmissão predominantemente sexual, que afeta 12 milhões de pessoas por ano no mundo. Se não curada em suas fases iniciais, predispõe a complicações potencialmente graves. Uma dessas complicações é a neurossífilis, caracterizada pela invasão do sistema nervoso central pelo T. Pallidum em qualquer fase da história natural da infecção, cuja mortalidade ultrapassa 60%. Em pessoas com HIV, essa complicação pode ser mais frequente, surgir após um menor período de latência e ser mais agressiva.Na maioria das vezes, a neurossífilis é assintomática ou se apresenta por meio de manifestações clínicas pouco específicas que demandam alto índice de suspeição e propedêutica laboratorial invasiva. O diagnóstico é feito através de provas sorológicas ou de biologia molecular no líquor. A controvérsia é sobre a indicação desse diagnóstico e respectivo tratamento nos casos assintomáticos, principalmente em se tratando de pessoas que vivem com o HIV. Esta revisão narrativa da literatura concluiu que a punção lombar propedêutica da neurossífilis está indicada em pessoas que apresentam sororreagência ao VDRL, associado a uma ou mais das seguintes condições: manifestações neurológicas na esfera motora, sensitiva ou cognitiva; sintomatologia sifilítica ou VDRL maior que 1:8 pós-tratamento, descartada reinfecção; pessoas com HIV na presença de CD4 menor que 351 células/mm3 e VDRL maior ou igual a 1:32; e evidência de doença sifilítica terciária não neurológica em atividade (goma ou aortite). Feito o diagnóstico a partir desses critérios, o tratamento específico deverá ser administrado mesmo nos casos assintomáticos.

The nervous system plays an important role in HIV infection. The purpose of this review is to discuss the indications for cerebrospinal fluid (CSF) analysis in HIV infection in clinical practice. CSF analysis in HIV infection is indicated for the diagnosis of opportunistic infections and co-infections, diagnosis of meningitis caused by HIV, quantification of HIV viral load, and analysis of CNS HIV compartmentalization. Although several CSF biomarkers have been investigated, none are clinically applicable. The capacity of HIV to generate genetic diversity, in association with the constitutional characteristics of the CNS, facilitates the generation of HIV quasispecies in the CNS that are distinct from HIV in the systemic circulation. CSF analysis has a well-defined and valuable role in the diagnosis of CNS infections in HIV/AIDS patients. Further research is necessary to establish a clinically applicable biomarker for the diagnosis of HIV-associated neurocognitive disorders. O sistema nervoso representa um papel importante na infecção pelo HIV. O objetivo desta revisão é discutir as indicações para análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) na infecção pelo HIV na prática clínica. A análise do LCR na infecção pelo HIV é indicada para o diagnóstico de infecções oportunistas e co-infecções, meningite pelo HIV, quantificação da carga viral de HIV e compartimentalização do HIV no SNC. Uma série de biomarcadores no LCR foi investigada, na literatura, porém não apresentam aplicabilidade clínica. A grande capacidade do HIV de gerar diversidade genética, associado a características constitucionais do SNC propicia o desenvolvimento quasiespécies distintas no SNC das circulantes sistemicamente. A análise do LCR na infecção pelo HIV é bem estabelecida no diagnóstico de infecções no CNS, contudo mais pesquisas é necessária para estabelecer a aplicabilidade clínica dos biomarcadores no diagnóstico de desordens cognitivas associadas ao HIV.