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From 2004 to 2006, a parasitological survey aimed at the detection of the microsporidian parasite Thelohania contejeani Henneguy was carried out on 177 wild white-clawed crayfish (Austropotamobius pallipes complex) captured in six streams and rivers of the province of Belluno in north-eastern Italy. Microscopical examination of the skeletal muscles, and histological analysis applying different histochemical stains to full transverse and sagittal sections of the cephalothorax and abdomen were carried out. Transmission electron microscopy (TEM) was also conducted on the parasites recovered during the survey. Out of 177 crayfish examined, Thelohania contejeani (Microsporidia, Thelohaniidae) was present in only one crayfish from the Vena d’oro creek. The parasite was detected in the skeletal muscles in several developmental stages, including mature spores, which represented the most common stage recovered. Sporophorous vesicles were also present. Histological examination revealed that the fibres of the skeletal, cardiac and intestinal muscles were filled with spores. Melanin infiltrations were focally present in the infected striated muscles. The gill phagocytic nephrocytes were engulfed by small masses of spores. Among the staining techniques applied, Crossman’s trichrome stain represented the most effective method of detecting T. contejeani.

L’intensificazione delle attività di maricoltura, intese sia come produzioni d’avannotteria sia come produzioni d’ingrasso, comporta il frequente verificarsi di condizioni predisponenti l’emergenza di malattie diffusive, fra cui in primis quelle di natura batterica. Per tale motivo nelle specie ittiche allevate nel bacino del Mediterraneo, nonostante le patologie batteriche di maggior impatto economico vengano riferite ad un numero ristretto di agenti eziologici [es. Photobacterium damselae subsp. piscicida, Listonella (Vibrio) anguillarum e Tenacibaculum maritimum], si sta registrando una crescente attenzione verso quegli agenti batterici patogeni opportunisti o non usuali che possono determinare malattia sotto la spinta di fattori ambientali e gestionali predisponenti. A tale proposito si segnalano alcuni episodi di malattia osservati nel periodo 2009-2011 in spigole (Dicentrarchus labrax) ed orate (Sparus aurata) allevati in Italia, nel corso dei quali sono state isolate specie batteriche fino ad oggi ritenute di non comune riscontro nella maricoltura nazionale, quali in particolare Vibrio splendidus, V. harveyi, V. mediterranei, Shewanella putrefaciens, Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida e A. sobria. Vengono riportate le osservazioni cliniche e anatomopatologiche correlate agli episodi morbosi presi in considerazione. Vibrio splendidus è stato isolato in una decina di casi in corso di episodi di mortalità larvale verificatisi in spigole ed orate in diverse avannotterie italiane e, sempre a livello sistemico, anche da spigole di taglia commerciale che mostravano mortalità a stillicidio in presenza di grave malattia branchiale, ascite, splenomegalia ed ectasia del tratto gastro-intestinale. Già segnalato quale agente causale di gravi episodi patologici in larve di merluzzo (Gadus morhua) e rombo (Psetta maxima) allevati rispettivamente in Norvegia ed in Spagna, V. splendidus potrebbe quindi avere un ruolo eziologico di rilievo nel determinismo di malattia anche in pesci marini mediterranei. L’isolamento di Vibrio harveyi è stato condotto a livello cutaneo e sistemico da due riproduttori di spigola che presentavano al decesso gravi lesioni cutanee quali ulcere profonde ed estese aree necrotiche, similmente a quanto già riportato in recenti segnalazioni condotte nel Mediterraneo su orate e spigole. Shewanella putrefaciens è stata isolata a livello sistemico in due casi, sia da avannotti che da soggetti adulti di spigola che presentavano concomitanti infezioni parassitarie (es. parassitosi branchiali da Ichthyobodo sp.) o batteriche. Sebbene descritto quale agente patogeno opportunista soprattutto in pesci dulciacquicoli, questo microrganismo è stato segnalato recentemente quale agente di malattia anche in pesci marini d’allevamento. Di particolare interesse appare l’isolamento di Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida nel corso di un episodio morboso osservato in spigole adulte allevate a terra che presentavano lieve mortalità, splenomegalia e congestione cerebrale. Parallelamente, la stessa specie è stata isolata da giovanili di spigola allevati in gabbia in Croazia che presentavano splenomegalia associata a moderata mortalità. Ben descritto quale agente patogeno in salmonidi allevati sia in acqua dolce sia in mare e nel rombo allevato in areali atlantici, A. salmonicida subsp. salmonicida potrebbe rappresentare un futuro fattore di rischio sanitario per la maricoltura mediterranea. Sono poi da segnalare alcuni isolamenti di A. sobria, A. veronii biovar veronii e V. mediterranei condotti in corso di episodi morbosi registrati in situazioni di elevata densità di biomassa e/o di concomitanti fattori stressanti di natura ambientale che hanno rappresentato senz’altro importanti condizioni predisponenti l’insorgenza della malattia. Obiettivo comune dei laboratori diagnostici e di ricerca operanti nel campo dell’ittiopatologia in Italia dovrebbe essere quello di raccogliere e conservare gli isolati di questi “potenziali patogeni emergenti” al fine di condurne la caratterizzazione geno-fenotipica ai fini epidemiologici, studiarne i fattori di virulenza e patogenicità e monitorarne l’eventuale profilo di antibiotico resistenza.

PRIMARY bacterial rhinitis is rare in dogs; it is usually secondary to nasal trauma, inhalation of an irritant, neoplasia, or viral, fungal or parasitic infections. Streptococcus equi subspecies zooepidemicus ( S zooepidemicus ), a common cause of respiratory infections in horses, has been

The combined use of morphological and molecular studies allowed for the first time the recognition and description of the adult stage of Clinostomum cutaneum Paperna, 1964 from the grey heron Ardea cinerea L. in Kenya. A redescription of the metacercaria that infect Nile tilapia Oreochromis niloticus niloticus (L.) from the same aquatic environment is also presented. C. cutaneum differs from all other species of Clinostomum Leidy, 1856 in the shape of its uterus. Sequencing the rRNA confirmed the morphological similarity between adults from the grey heron and the metacercarial stage from tilapia, and a level of genetic similarity with the other previously sequenced Clinostomum spp. was observed. The need for a reorganisation of Clinostomum using both morphological and molecular methods is highlighted.

The European INCO-DEV BOMOSA Project (Integrating BOMOSA cage fish farming systems in reservoirs, ponds and temporary water bodies in Eastern Africa) intends to establish small scale fish farming in marginal water bodies in Kenya, Uganda and Ethiopia, creating rural aquaculture networks with the aim to economically integrate aquaculture with agriculture. In order to study veterinary and public health aspects in Bomosa fish farming systems, a parasitological survey on wild and cultured tilapias (Oreochromis niloticus niloticus) has been carried out from March 2007 to October 2008. A total of 982 tilapias - 685 from Kenya, 222 from Uganda and 75 from Ethiopia - were sampled and subjected to complete parasitological examination. During the survey, fish from different environments (258 from open water reservoirs, 445 from ponds and 279 from BOMOSA cages) were sampled in order to evaluate the factors which could influence the parasite diffusion and outbreak of diseases. Quantitative data, such as prevalence, intensity and abundance, and qualitative data are presented together with the main abiotic and biotic risk factors identified as relevant for veterinary and public health aspects in tilapia aquaculture.

The atypical mycobacteriosis should be considered zoonotic agents, since they can penetrate through skin wounds and abrasions, causing the formation of granuloma in the skin. The purpose of this work is to evaluate the susceptibility to certain antibiotics of Mycobacterium marinum, one of the most important zoonosis agent among non-tuberculous mycobacteria. All strains were susceptible to ethanbutol, while only 6 were sensitive to rifampicin. 90% of strains were resistant to isoniazid, while 8 strains out of 10 were resistant to streptomycin.

Silurus glanis or European catfish belongs to the family Siluridae. It eat mainly fish, but also crustaceans, annelids, and insect larvae. From February 2007 to February 2009 105 samples of European catfish from the Po River were examined. Bacteriological examination was performed, the bacterium most frequently isolated was Aeromonas hydrophila. The presence of European catfish in our rivers is a threat to the indigenous populatins of fish and could alter the environmental balance, leading to a reduction in the number of species and individuals.

During 2007-2008 a survey aimed to investigate the diffusion of mycobacteria infections in Italian aquaculture was carried out. A total of 565 farmed fish, coming from 45 marine and freshwater farming systems, were examined. Mycobacterium marinum was isolated from striped bass showing symptoms and lesions referable to mycobacteriosis, and from European sea bass showing only histological lesions. Furthermore M. gordonae was isolated from 1 carp, M. fortuitum from i Siberian sturgeon and 1 rainbow trout, and Mycobacterium spp. from 2 European sea bass, always without macroscopical and microscopical lesions referable to mycobacteriosis.

The occurrence of Mycobacterium spp. in freshwater and marine ornamental fish was studied in Italy from June 2002 to May 2005. Two surveys were carried out, one of aquarium fish sent to the Lab- oratory for diagnosis, and the other of prevalence of infection by mycobacteria in ornamental fish im- ported into Italy. Bacterial isolation was carried out from the spleen, kidney and liver, and the isolates were subsequently identified by biochemical tests. In the first survey, 387 fish were examined and Mycobacterium spp. were isolated from 181 (46.8%) fish. In the second surve y 127 batches of ornamental fish from different countries were examined. Mycobacterium spp. were isolated from 38 (29.9%) batches. The following species we re found: M. fortuitum, M. peregrinum, M. chelonae, M. abscessus , M. marinum , M. gordonae, M. non- chromogenicum and M. interjectum. There was a high prevalence of infection independent of the presence of macroscopic lesions. Mycobacterium fortuitum and M. chelonae were more prevalent than M. marinum in the samples examined.

Striped bass (hybrid of Morone ssp.) is a fish raised in hot water; in Italy is not very common because its meat is not so appreciate. In USA and Israel M. marinum, M. shottii, M. pseudoshottii were the mycobacterial species more frequently isolated from Morone spp. The aim of the present work is to describe the first M. marinum infection in a striped bass farm of Northern Italy. In summer 2007 some gills of striped bass with yellow-brown nodules were sent to Istituto Zooprofilattico and the histopathological examination showed several granulomas with a large number of acid-fast bacilli. After this finding, some fishes from the same farm were randomly selected, sacrificed and necropsied in order to identify the mycobacterial species. The anatomopathological exams revealed lesions in various organs of all animals: ulcerative cutaneous lesions, yellow mucus with red nodules on the gills, splenomegaly and military granulomatous lesions in liver, kidney and spleen. At necropsy, liver, spleen, kidney, gills and muscle were collected and a portion fixed in formalin for the histological and immunohistochemical examination while another portion, not fixed, utilized for parasitological, virological and bacteriological investigations. Microscopically granulomas presented a central necrotic area surrounded by inflammatory cells and enclosed by a thin capsule. All granulomas were associated with a great number of acid-fast bacilli resulting positive to immunohistochemistry with a polyclonal antibody against M. bovis. From all samples, with the exception of muscle, it was possible to isolate photochromogenic colonies and the purified isolates were characterised by phenotypical and biochemical identification. All the isolates were identified as M. marinum. It is important to emphasize that, although granulomatous lesions were diffused in various organs, no fishes died for the infection and that the low death rate allowed the increase of human risk by manipulation and consumption of contaminated fishes.

Con il termine di Micobatteriosi o Tubercolosi ittica viene indicato un complesso di malattie sistemiche ad andamento cronico, sostenute da batteri acido-alcool resistenti (BAAR) appartenenti al genere Mycobacterium. Essi colpiscono numerose specie ittiche d'acqua dolce e salata, sia di allevamento che delle acque libere, sono diffusi nel suolo, nei pascoli e nelle paludi (6). I micobatteri sono germi molto resistenti agli agenti fisici e sono in grado di permanere e sopravvivere molti mesi nell’ambiente. Le Micobatteriosi atipiche sono state segnalate soprattutto in pesci d'acquario tropicali, ma anche in pesci allevati da consumo; non si conoscono specie refrattarie a questa infezione, naturale o sperimentale (1, 4, 8). Presentano un andamento enzootico e un decorso cronico. La sintomatologia dei pesci affetti da micobatteriosi appare aspecifica: si manifesta con ritardo della crescita e/o dello sviluppo sessuale, anoressia ed emaciazione, tachipnea, apatia, letargia, lepidortosi, atassia natatoria, esoftalmo, melanosi, distensione addominale. (4, 8). Sulla cute, quando coinvolta, si osservano ulcere e tumefazioni, associate a sfilacciamento delle pinne ed emorragie diffuse. In alcuni casi l'infezione può estendersi al sistema scheletrico, causando deformità. Nei soggetti colpiti si ha un progressivo indebolimento e caduta delle difese organiche, questo processo ha come esito la morte del pesce (8, 10). All'esame anatomopatologico si osservano versamenti in cavità celomatica, presenze di pseudomembrane sui visceri, e splenomegalia, noduli biancastri diffusi in milza, fegato e rene (1, 8, 10); molto frequenti sono i portatori asintomatici. Le specie di micobatteri maggiormente coinvolte nel determinismo della tubercolosi ittica sono Mycobacterium marinum, M. fortuitum e M. chelonae, ma ad esse si affiancano altre specie, quali M. abscessus, M. peregrinum, M. gordonae, M. kansasii e M. nonchromogenicum ritenute ad oggi specie patogene emergenti (8, 10). L’interesse per questa patologia nasce dal fatto che essendo considerata una “zoonosi minore”, può essere trasmessa all’uomo, rappresentando un reale rischio soprattutto per gli operatori del settore ittico. Tali microrganismi possono penetrare attraverso ferite e abrasioni cutanee provocando la formazione di granulomi a carico della cute e non sono da escludere forme linfonodali, polmonari ed ossee ad andamento molto più drammatico, soprattutto nei soggetti giovani e in quelli immunodepressi. (2, 3). Il riscontro di casi da micobatteri ittici, riguardante i proprietari di un acquario, sottolinea la necessità di far luce su una patologia di interesse ispettivo finora poco considerata, anche in virtù del fatto che il settore acquariofilo ha raggiunto una grande importanza commerciale in tutti i paesi industrializzati e, in particolar modo in Italia, dove i pesci ornamentali rappresentano gli animali da compagnia più comuni (10). Il quadro, già complesso per la concorrenza di molte specie nel determinismo della malattia, è complicato dalla alta resistenza di tali specie ai comuni farmaci anti-tubercolari. La terapia lunga e difficile nell’uomo, è, al momento, impraticabile nei pesci (1, 7, 9). In questi episodi assume, quindi, fondamentale importanza l’isolamento e la tipizzazione del micobatterio coinvolto, necessaria per ottenere un esito corretto e soprattutto con il giusto significato diagnostico. Scopo del presente lavoro è quello di evidenziare la presenza di tali patologie nei pesci ornamentali d’importazione durante il triennio preso in considerazione, confrontandoli con i dati dei monitoraggi precedenti effettuati sul territorio nazionale

La capacità dei molluschi bivalvi di filtrare elevati volumi di acqua li rende in grado di accumulare microrganismi potenzialmente patogeni per l’uomo. Tra questi Giardia spp. e Cryptosporidium spp. assumono oggi notevole interesse in relazione al possibile ruolo zoonosico. I protozoi flagellati appartenenti al genere Giardia (Metamonadida, famiglia Hexamitidae), sono parassiti che possono vivere nell’acqua e possono causare problemi di salute sia nell’ospite uomo che in diverse specie animali. Causa una zoonosi che si trasmette per via oro-fecale, causando nell’organismo ospite diarrea e disidratazione (4). Le spore dei parassiti appartenenti al genere Cryptosporidium (Apicomplexa, Coccidia) causano un’infezione parassitaria sia di importanza medica, sia veterinaria, che colpisce le cellule epiteliali del tratto gastro-intestinale, l’epitelio dei dotti biliari e del tratto respiratorio sia dell’uomo che di altri vertebrati. Anche in questo caso si tratta di una zoonosi trasmissibile per via oro-fecale, causando diarrea profusa (3, 4). A tal proposito 2340 molluschi bivalvi allevati e/o pescati in Emilia-Romagna (comprensorio Alto Adriatico), sono stati sottoposti ad indagini parassitologiche al fine di stabilirne il possibile ruolo nella trasmissione all’uomo di questi parassiti. Di questi soggetti, 780 sono stati inoltre sottoposti alla ricerca di metalli pesanti, quali cadmio, piombo e mercurio per i quali esiste un limite massimo indicato dal Regolamento CE 1881/2006 (7). È stata inoltre valutata anche la presenza del cromo, in quanto molto diffuso nell’ambiente e per il quale non esiste ad oggi una normativa specifica che ne sancisca i limiti.

EC and non-European countries for now import the frogs, traditional ingredients of Italian cuisine, in order to meet the internal requirement. Not very well known are the real diffusion of MOTT and the possible role of the amphibians on the maintenance of this zoonosis in the environment. 214 Rana esculenta collected from a Turin’s Institute analysed. All the samples are of capture and were imported alive from Albania. A sample of skin, muscle and liver was taken from every animal in sterility. These aliquots are processed, decontaminated and centrifuged, and then the sediment was spread on Stonebrink and Löwenstein-Jensen medium. The test-tubes were incubated at 28°C until the development of colonies or up till sixty day. All the colonies resulted positive at ZN stain were processed for CDC Manual’s fenotyping tests. The specimens turned out to be positive, at least for one aliquot, for Mycobacterium spp. are 94 (43.9%) on 214 frogs examined. In skin 34.1% (73 subjects) of samples were positive, while at liver level 20.6% (44 frogs) were positive and only one muscle sample resulted positive (0.5%). 118 strains were isolated: 48 Mycobacterium chelonae (40.7%), 23 M. fortuitum (19.5%), 20 M. gordonae (16.9%), 13 M. flavescens (11.0%), 6 M. abscessus (5.1%), 4 M. peregrinum (3.4%), 3 M. kansasii (2.5%), and 1 M. marinum (0.8%). In skin and liver, the species must representative was M. chelonae (26 strains, 35.6%, in skin; 29 strains, 65.9%, in liver). The only Mycobacterium isolated from muscle samples was classified as M. marinum. Our results confirmed the hypothesis that frog’s muscles present a lower level of bacterial contamination than the non-edible portions. The frequent finding of mycobacteria in skin’s aliquots supports the hypothesis of external contamination of samples, due to the natural environment where the amphibians live rather than to an effective infection.

Le micobatteriosi ittiche sono patologie studiate sia per il loro riscontro nell’allevamento intensivo, sia in quanto zoonosi. Di esse esistono modelli sperimentali creati per inoculazione parenterale. E’ stato messo a punto un modello di infezione “per immersione” in branzini utilizzando il M. fortuitum con l’obiettivo di riprodurre una situazione spontanea ed individuare la via di entrata. Due gruppi di branzini di 10g sono stati tenuti, per due ore, in due sospensioni di M. fortuitum contenenti rispettivamente 102 germi/ml e 105germi/ml, un terzo gruppo è stato utilizzato come controllo. Soggetti per ogni gruppo sono stati prelevati a 16 e 24 ore p.i., quindi giornalmente per i successivi 6 giorni ed infine settimanalmente per 9 settimane per l’indagine istologica e batteriologica. Per l’istologia i soggetti venivano fissati in toto in formalina tamponata 10%. Sono stati osservati complessivamente 39 soggetti “esposti” e 9 controlli. Dagli organi (cute, branchie, occhio, intestino, fegato, rene, peritoneo, milza) dei soggetti fissati in formalina sono state allestite sezioni istologiche seriate colorate poi con ematossilina-eosina, Ziehl-Neelsen e con metodica immunoistochimica (IHC) impiegante l’anticorpo policlonale anti-Mycobacterium bovis (Dako) diluito1:3000 con rivelazione medinte sistema Kit LSAB perossidasi (Dako). Mentre l’esame batteriologico ha dato positività solo dalla quarta settimana p.i., l’istologia ha mostrato lesioni già a partire dalla I settimana p.i.. La lesione riscontrata era un granuloma, da singolo e focale a multiplo e confluente, inizialmente caratterizzato dall’accumulo di aggregati nodulari di istiociti e rari linfociti alla periferia. In seguito mostrava necrosi di singole cellule che con il progredire della lesione tendeva a coinvolgere tutta la porzione centrale. Lesioni granulomatose specifiche, con presenza di acido-resistenti e di positività specifica con l’IHC, sono state riscontrate, in ordine di frequenza decrescente, nelle branchie, milza, rene anteriore, fegato e peritoneo. In 15 soggetti su 39 osservati (38,46%) le branchie mostravano lesioni così distribuite: in 10 casi alla base delle lamelle e nello stroma della lamella primaria; in 1 solo caso lo stroma della lamella primaria; in 4 casi solo la base delle lamelle. Altri siti, quali tratto anteriore e tratto posteriore dell’intestino, cute a livello di linea laterale e occhio, campionati come le branchie per valutare le possibili vie di entrata, non hanno mostrato lesioni specifiche. Il modello sperimentale ha riprodotto la malattia e, circa le possibili vie di entrata, i risultati sembrerebbero indicare nelle branchie la prima sede di replicazione batterica riconoscendo a questo organo un ruolo importante come “porta” di entrata per il micobatterio.

Le micobatteriosi ittiche, già note in natura, sono patologie studiate sempre più di frequente sia per le problematiche legate all’allevamento intensivo, sia per le eventuali potenzialità zoonosiche. Modelli sperimentali, che prevedevano una inoculazione (peritoneale o muscolare), sono stati riprodotti in diversi teleostei, con specie differenti di batteri appartenenti al genere Mycobacterium. In base a risultati precedenti (Sarli et al., Atti APIV 2003) è stato creato un modello di infezione “per immersione” in branzini utilizzando il M. fortuitum, allo scopo di valutare l’insorgenza delle lesioni precoci ed individuare la più probabile via di entrata, fornendo così nuove conoscenze alla patogenesi della malattia. Due gruppi di 60 branzini di 10g sono stati tenuti immersi, per due ore, in due sospensioni di M. fortuitum contenenti rispettivamente 102 germi/ml e 105germi/ml. Un terzo gruppo, sempre di 60 soggetti, è stato utilizzato come controllo negativo. Tre soggetti per ogni gruppo sono stati prelevati a 16 e 24 ore p.i., quindi giornalmente per i successivi 6 giorni e settimanalmente per 9 settimane. Dei tre soggetti, previamente sottoposti ad eutanasia, due venivano fissati in toto in formalina tamponata 10% ed uno utilizzato per reisolare il ceppo batterico impiegato per l’infezione. Per l’esame istologico sono stati campionati: occhio, branchie, stomaco, intestino anteriore e posteriore, cute (linea laterale anteriormente alla pinna caudale), milza, rene anteriore, fegato, peritoneo. Sezioni istologiche seriate sono state impiegate per la colorazione ematossilina-eosina e Ziehl-Neelsen. L’esame batteriologico, negativo in tutti i soggetti del gruppo di controllo, è risultato positivo nei soggetti “esposti” solo dalla quarta settimana p.i. Sono stati sottoposti ad esame istologico complessivamente gli organi di 47 soggetti (9 controlli e 38 esposti). Nei soggetti di controllo era presente solamente una statosi epatica, da lieve e focale a diffusa e grave, peraltro riscontrata anche nei soggetti esposti. In questi ultimi la lesione elementare rilevata era un granuloma, da singolo e focale a multiplo e confluente, caratterizzato dall’accumulo di aggregati nodulari di istiociti e rari linfociti alla periferia (grado 1, prevalentemente ad 1 settimana p.i.). Con la progressione del granuloma iniziava a comparire la necrosi di singole cellule (grado 2, prevalentemente a 2 settimane p.i.) o era evidente un centro necrotico del granuloma (grado 3, prevalentemente dopo la terza settimana p.i.). Lesioni granulomatose specifiche con presenza di acido-resistenti sono state riscontrate, in ordine di frequenza decrescente, nella milza, rene anteriore, branchie, fegato, peritoneo. Nella milza in 15 casi su 38 era presente iperplasia dei centri melanomacrofagici (6 casi) e/o lesioni granulomatose (10 casi). Nel rene anteriore vi era iperplasia dei centri melanomacrofagici (1 caso) o granulomi (7 casi). Nelle branchie (8 casi) erano riscontrabili lesioni focali di branchite a livello di lamelle secondarie, caratterizzate da iperplasia delle cellule epiteliali, accumulo di monociti e presenza di rari acido-resistenti a livello intracellulare. Alla base delle lamelle primarie, nello stroma dell’arco branchiale, erano reperibili le tipiche lesioni granulomatose. Granulomi a livello epatico sono stati osservati in 4 casi, mentre, su 5 casi di reazione peritoneale, essa era riconducibile alla variante granulomatosa in 2 casi ed a una peritonite acuta iniziale in 3 casi. Alla luce dei risultati ottenuti si enfatizza la riproduzione sperimentale della malattia con un modello mai utilizzato in letteratura e, si sottolinea, tra le vie di entrata valutate su base istologica, quella branchiale come la più verosimile in base alla frequenza delle lesioni riscontrate.

To date the pathogenesis of atypical mycobacterioses in fish has been scarcely characterized. In this research, European sea bass (D. labrax) were experimentally infected with Mycobacterium fortuitum to study histologically the pathogenesis of the infection. Three groups of sea bass (total of 90 fish, 30 fish per group) weighing 10-12 g were used: two groups were intraperitoneally (i.p.) inoculated with different concentrations of M. fortuitum (104 and 107 cfu/10 g b.w. diluted in Phosphate Buffered Saline + 0.05% Tween 80) while a third control fish group was injected i.p. only with Phosphate Buffered Saline + 0.05% Tween 80. Three fish from each group were sacrificed at 1, 2, 3, 4, 6, 8 and 10 weeks post inoculation (p.i.). All the fish were subjected to bacteriological examination. Samples of peritoneum, kidney, liver, spleen, skin and muscle were fixed, paraffin-wax embedded and two 4-µm-thick serial sections underwent haematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen stains. The strain used for the experimental infection was reisolated from all the fish, starting from the 1st p.i. week. Macroscopic lesions were similar in the two infected groups, independently from the inoculum. Histological examination of the subjects at the first p.i. week revealed the presence of granulomatous peritonitis. At the second p.i. week the peritonitis was more diffused on the serosa, with rare necrotic foci. The granulomata enlarged and were surrounded by a fibrous capsule at the third p.i. week. Acid-alcohol fast bacteria were easily observed when necrosis appeared. After the third p.i. week, both initial and well organized granulomas with necrotic center coexisted in peritoneum and parenchymal tissues. The results of this research seem to indicate the high suitability of European sea bass, when inoculated with a rapidly growing Mycobacterium strain, as an in vivo model to study the pathogenesis of fish mycobacteriosis.

The distribution of Sphaerospora dicentrarchi Sitja-Bobadilla et Alvarez-Pellitero, 1992 and S. testicularis Sitja-Bobadilla et Alvarez-Pellitero, 1990, myxozoan parasites of European seabass Dicentrarchus labrax (L.), was investigated in different farming systems in Italy. In total, 1406 fish were examined. High S. dicentrarchi prevalence was observed in all the farming systems involved in this survey (extensive farms: 51.5%; intensive farms: inland 59.6%, inshore floating cages 76.2%, offshore floating cages 41.6%) except for submersible cages (7.4%). S. testicularis was detected only in nine male fish from two intensive farms. The epidemiology and pathological effects of the parasites are discussed.

We studied a natural infection of the oligochaete Branchiura sowerbyi Beddard, 1892 with the Raabeia-type actinosporean stage of Myxobolus lentisuturalis Dyková, Fiala et Nie, 2002 which infected goldfi sh Carassius auratus auratus (L.) in Italy, using molecular analysis of the SSU rRNA gene. The existence of intraoligochaete development shows that this parasite follows the lifecycle pattern described by Wolf and Markiw (1984) for Myxobolus cerebralis. Histological examinations of the goldfi sh infected by M. lentisuturalis showed at low magnifi cation the presence of two bilateral crescent-shaped masses in the dorsal epaxial muscle. These lesions were not circumscribed, presented irregular edges and infi ltrated the underlying bundles of skeletal muscle and interstitial tissue. At higher magnifi cation, disappearance of muscle fi bres and substitution of the muscle tissue with Myxobolus spores and plasmodia were observed.

Aquaculture is a zootechnical sector in increasing expansion over the world which could be strategic for the economic and social advancement of developing countries, including the African continent. The European BOMOSA Project (Integrating BOMOSA cage fish farming systems in reservoirs, ponds and temporary water bodies in Eastern Africa) (2006-2009) intended to establish small scale fish farming in marginal water bodies in East African countries creating rural aquaculture networks with the aim to economically integrate aquaculture with agriculture. In the framework of the BOMOSA project, a study of veterinary and public health aspects in tilapia (Oreochromis niloticus) cultured in Bomosa fish farming systems has been carried out. The activities of the DVM thesis here summarized fall in this field and have been performed from October to December 2007 in Sagana Fish Farm, the main BOMOSA Kenyan hub. In this period a total of 160 tilapias have been sampled from 11 farm ponds and subjected to complete parasitological examination. In some cases, infected tissues were fixed in 10% buffered formalin for histology. Furthermore, in order to study the life cycle of some helminths recovered in the farmed fish, parasitological analyses were carried out on 72 gastropods owing to Bulinus and Melanoides genera, and 5 piscivorous birds (2 herons Ardea cinerea, 2 hammerkop Scopus umbretta and 1 cormoran Phalacrocorax carbo). This survey allowed to identify several protozoan, myxozoan and metazoan parasites which could be pathogenic to farmed fish and, in some case, to humans. The results of parasitological exams carried out on gastropods and piscivorous birds confirmed the presence of all the suitable hosts for a successful completion of the life cycle of several helminths recovered from farmed fish.

Gli elasmobranchi rappresentano attrazioni popolari negli acquari pubblici e negli zoo sin dal 1860. Nel corso degli ultimi anni le conoscenze relative alla biologia e alla gestione degli elasmobranchi in ambiente controllato sono aumentate e diverse sono le specie mantenute e riprodotte con successo. Al contrario, informazioni relative alle patologie sono limitate e sono riferite principalmente a deformità spinali, patologie tiroidee, neoplasie e malattie di origine parassitaria ed infettiva. Fra queste le infezioni di origine batterica soprattutto sostenute da microrganismi appartenenti alla famiglia delle Vibrionaceae rivestono un ruolo importante in quanto spesso correlate ad episodi di mortalità. Tra le diverse specie di Vibrio il V. harveyi (sinonimo di V. carchariae), segnalato in diverse specie come squalo toro (Carcharias taurus), squalo limone (Negaprion brevirostris), squalo grigio (Carcharhinus plumbeus) e spinarolo (Squalus acanthias) è spesso associato a fenomeni di meningite o ad ulcere cutanee. Altri Vibrio come V. alginolyticus, V. parahaemolyticus e il Photobacterium damselae subsp. damselae sono stati correlati ad episodi di mortalità ma in sovrapposizione solitamente con altre patologie. L'Aeromonas salmonicida è documentata come agente causale di malattia in pinna nera (Carcharhinus melanopterus) mentre negli squali martello (Shyrna tiburo) sono stati segnalati Serratia marcescens e, in giovanili con sintomi neurologici, Flavobacterium sp.. Recentemente anche i micobatteri come Mycobacterium avium e M. chelonae sono stati isolati da lesioni granulomatose diffuse rispettivamente in squalo bamboo (Hemiscyllium ocellatum) e nel pesce violino (Rhinobatos lentiginosus). Nell'acquario di Cattolica (RN) sono presenti oltre 100 esemplari di elasmobranchi appartenenti a 16 specie diverse. Nel corso degli ultimi anni la maggior parte degli episodi di mortalità che si sono verificati sono riferiti principalmente a patologie di origine batterica prevalentemente associate alla presenza di V. harveyi. In particolare tale patogeno è stato correlato al decesso di 4 giovani esemplari di S. tiburo, 5 esemplari di cui 4 esemplari giovanili ed uno adulto di squalo pinna nera (C. melanopterus), 3 esemplari giovanili di squalo bamboo (Chiloscyllium punctatum) in concomitanza con V. fischeri ed in un esemplare di squalo nutrice adulto (Ginglymostoma cirratum) in associazione alla presenza di P. damselae subsp. damselae. In tutti i soggetti deceduti sono stati riscontrati quadri di meningite ed enterite e tutti gli episodi di mortalità si sono verificati durante il periodo di quarantena o dopo il loro trasferimento in una nuova vasca. Infine in un esemplare adulto di squalo toro (C. taurus) che mostrava estese lesioni cutanee di tipo necrotico è stata rilevata la presenza di Tenacibaculum maritimum. Le principali problematiche sanitarie riscontrate nell’ambiente controllato dell’acquario sono rappresentate da infezioni batteriche sostenute da agenti patogeni opportunisti ubiquitari in ambiente acquatico (soprattutto Vibrio) che sono in grado di causare, in presenza di condizioni predisponenti, patologie batteriche superficiali e/o sistemiche anche gravi che possono portare anche alla morte. Pertanto l’applicazione di attenti protocolli gestionali possono essere utili al fine di ridurre le condizioni di stress a cui gli animali possono essere sottoposti soprattutto durante le fasi successive al trasporto e all’acclimatamento alle nuove condizioni di vita. Per quanto concerne T. maritimum ulteriori indagini andranno condotte al fine di stabilire il ruolo patogeno e le modalità di trasmissione di tale microrganismo negli elasmobranchi soprattutto in condizioni di coabitazione con teleostei.

Ampiamente riconosciuto nel passato come agente patogeno di crostacei, molluschi ed elasmobranchi, Vibrio harveyi (sin. V. carchariae e V. trachuri) negli ultimi anni è stato riportato come agente di malattia in pesci marini d’allevamento in diversi areali geografici, compreso il bacino del Mediterraneo. Nel corso del 2011 sono stati osservati, in spigole (Dicentrarchus labrax) di peso compreso tra 155 e 230 g allevate in un impianto intensivo a terra, ripetuti episodi di malattia caratterizzati da anoressia, dimagrimento ed atassia natatoria, con mortalità a stillicidio protrattasi da maggio ad ottobre. Su 8 lotti pervenuti in laboratorio venivano effettuati esami necroscopici, parassitologici e RT-PCR per ricerca di Betanodavirus secondo procedure di laboratorio standard. Per quanto concerne l’esame batteriologico, semine da cervello e rene venivano condotte su terreni di primo isolamento, quali Agar Sangue (AS) e Trypticase Soy Agar (TSA)+ 1,5% NaCl, e su terreni semi-selettivi quali Tiosulphate-Citrate-Bile Salts-sucrose Agar (TCBS) ed incubate a 25°C ±1. Porzioni di branchie, cervello e organi viscerali venivano inoltre fissati in formalina tamponata al 10% per l’esame istologico. All’esame necroscopico si poteva osservare accentuato dimagrimento, cheratite monolaterale, splenomegalia e congestione cerebrale di lieve o moderata entità. L’esame parassitologico ha messo in evidenza, con prevalenze ed intensità variabili ma mai tali da poter essere posti in relazione al determinismo degli episodi morbosi, la presenza di Trichodina sp., Amyloodinium ocellatum, Diplectanum aequans e Sphaerospora dicentrarchi. Tutti i campioni sono risultati negativi per Betanodavirus. L’esame batteriologico ha permesso di isolare da tutti i soggetti di 4 dei lotti esaminati Vibrio harveyi in quantità significativa dal cervello. Gli isolati sono stati identificati su base feno-genotipica. Gli esami istologici hanno evidenziato costantemente grave malattia branchiale con teleangectasie, emorragie ed edema in presenza di parassiti e batteri. Focolai necrotici con aggregati di batteri venivano osservati in fegato e milza e, in alcuni soggetti, nel cuore. Nel rene si rilevava glomerulonefrosi, ectasia dei tubuli, iperemia interstiziale e necrosi focale. La muscolatura scheletrica presentava degenerazione ialina. A livello cerebrale venivano evidenziati accentuata congestione, emorragie, microgliosi e necrosi focale in associazione a presenza di batteri. In alcuni casi era presente anche congestione dei vasi meningei e dei plessi coroidei, con infiltrazione melanomacrofagica. Nel dicembre 2011 si è avuta occasione di osservare un episodio morboso in spigole (peso medio 85 g) allevate in un altro impianto intensivo a terra, con lesioni erosive a livello di cute e pinne, cheratite monolaterale, lieve splenomegalia e mortalità a stillicidio; in alcuni soggetti si evidenziava congestione cerebrale. Da due dei tre lotti esaminati si è isolato V. harveyi in quantità significativa dal cervello. La semina di raschiati cutanei su Flexibacter Maritimus Medium (FMM) ha permesso di isolare Tenacibaculum maritimum. Alla luce degli episodi qui riportati, V. harveyi potrebbe rappresentare un patogeno emergente per la maricoltura nazionale. Ricerche volte a delucidarne i meccanismi patogenetici ed i determinanti di virulenza, che sembrano essere ceppo-dipendenti, nonché i fattori ambientali e gestionali che possono condizionarne l’emergenza in allevamento appaiono quindi necessarie.