The gray wolf is a large, highly mobile predator whose original geographic range included most of the Northern Hemisphere. High rates of genetic exchange probably characterized even distantly-separated populations in the past, but recent population declines and habitat fragmentation have isolated previously contiguous populations, especially in the Old World. We examine mitochondrial DNA (mtDNA) variability among twenty-six populations of wolves from throughout their geographic range. We find eighteen mtDNA genotypes in gray wolves, seven of these are derived from hybridization with coyotes, four are confined to the New World, six are confined to the Old World and one is shared by both areas. Genetic differentiation among wolf populations is significant but small in magnitude. In the Old World, most localities have a single unique genotype, whereas in the New World several genotypes occur at most localities and three of the five genotypes are nearly ubiquitous. The pattern of genetic differentiation in the gray wolf contrasts with that of another large, highly vagile canid, the coyote, in which genetic differentiation among populations is not significant even among widely separated localities. We suggest that the difference between these two species reflects the rapid, recent increase in coyote numbers and expansion of their geographic range, and the coincident decline in gray wolf populations. Apparent genetic differences among extant wolf populations may be a recent phenomenon reflecting population declines and habitat fragmentation rather than a long history of genetic isolation. El lobo gris es un predador grande y altamente mobil cuyo distribucion geografica original abarcaba la mayor parte del Hemisferio Norte. Es muy probable que en el pasado, altas tasas de intercambio genetico caracterizaran, incluso, poblaciones muy distantes. Sin embargo, recientes declinaciones poblacionales y fragmentacion del habitat han aislado poblaciones que antiguamente se escontraban, contiguas, especialmente en el Viejo Mundo. Examinamos la variabilidad en el ADN mitocondrial (mtDNA) de 26 poblaciones de lobos existentes a lo largo de toda su area de distribucion geografica. Encontramos 18 genotipos de mtDNA en lobos grises, de estos 7 son derivados de hibridacion con coyote, 4 estan confinados al Nuevo Mundo, 6 estan confinados al Viejo Mundo y uno esta presente en ambas areas. La diferenciacion genetica entre poblaciones de lobos es significativa pero de pequena magnitud. En el Viejo Mundo, la mayoria de las localidades tienen un unico genotipo especifico para cada loalidad, mientras que en el Nuevo Mundo, la mayoria de las localidades poseen varios genotipos, y tres de los cinco son aproximadamente cosmopolitas. El patron de diferenciacion genetica en el lobo gris contrasta conaquel de otro canido grande y altamente movil, el coyote, en el cual la diferenciacion genetica entre poblaciones no es significativa incluso en el casode localidades muy distantes. Sugerimos que la diferencia entre estas dos especies refleja el rapido y reciente incremento en el numero de coyotes, la expansion en su distribucion geografica y la declinacion en las poblaciones de lobos grises que ocurrio coincidentemente. La diferenciacion genetica entre las poblaciones de lobos existentes en la actualidad, puede ser un fenomeno reciente que refleja, antes que una largo historia de aislamiento genetico, la declinacion poblacional y fragmentacion del habitat.