Search

Introdução/Objetivos: A Anemia Hemolítica Autoimune (AHAI) é caracterizada pela diminuição na sobrevida das hemácias, devida à hemólise mediada por anticorpos. O processo ocorre por ligação de anticorpos a antígenos eritrocitários com possibilidade de ativação do sistema complemento e remoção das hemácias pelo sistema retículo endotelial. As AHAI podem ser primárias, secundárias ou idiopáticas, conforme sua etiologia. Também podem ser caracterizadas em frias, quentes ou mistas, de acordo com a natureza do anticorpo envolvido. Este resumo teve por objetivo avaliar o perfil imunohematológico das anemias hemolíticas autoimunes em pacientes no hemocentro coordenador do Acre. Material e métodos: Trata-se de estudo observacional retrospectivo, com dados coletados dos resultados dos estudos imunohematológicos realizados em pacientes no hemocentro coordenador do Acre (HEMOACRE), no período de 01/12/2022 a 31/05/2023. Todos os estudos imunohematológicos do estado são conduzidos no hemocentro coordenador e, em todos os casos, foram realizados minimamente, os seguintes testes: Tipagem ABO/Rh, Teste Direto da Antiglobulina Humana (TAD), fenotipagem IgG, IgA, IgM, C3c e C3d, Pesquisa de Anticorpos Irregulares (PAI), autocontrole e fenotipagem eritrocitária (sempre que possível). Dependendo dos resultados, outros testes foram empregados. Resultados: No período do estudo, foram realizados 21 estudos imunohematológicos em pacientes, dos quais 20 apresentaram diagnóstico de AHAI, com maior prevalência do anticorpo IgG isoladamente (40%). IgG com IgA, IgM e C3 foram encontrados em 25%, IgG com C3 em 20%, IgG com IgM e C3 em 10% e IgG com IgA e C3 em 5%. Discussão: Embora estudos imunohematológicos já sejam realizados no hemocentro há muito tempo, nos últimos meses houve um investimento em novas técnicas no laboratório de imunohematologia clínica. A AHAI é uma condição relativamente rara e a confirmação de 20 casos em 6 meses no HEMOACRE é relevante. A anemia hemolítica autoimune quente, ou seja, provocada por anticorpos IgG, foi a mais frequente, conforme retratado em literatura. O anticorpo IgA foi evidenciado numa quantidade expressiva dos estudos. Conclusão: Os estudos imunohematológicos são importantes para a condução clínica de alguns pacientes e, por isso, sua realização com todas as técnicas disponíveis é fundamental.

Objetivo: Avaliar parâmetros hemocitométricos na admissão hospitalar de pacientes com COVID-19, de acordo com o desfecho (alta/óbito) em 30 dias. Métodos: Foi realizado um estudo observacional, com dados obtidos do Hospital Universitário Regional dos Campos Gerais (HURCG). Os pacientes foram estratificados em dois grupos de acordo com o desfecho: i) Sobreviventes e ii) Não sobreviventes. Foram adquiridas as seguintes informações clínicas: idade, sexo, índice de massa corporal, comorbidades, comprometimento pulmonar, intubação orotraqueal, tempo de internamento e desfecho final. Os parâmetros do hemograma, incluindo os hemocitométricos: NE-SSC (reatividade dos neutrófilos), NE-SFL (atividade metabólica dos neutrófilos), LY-SSC (irregularidade do núcleo linfocitário, granulação citoplasmática e/ou vacuolização) e LY-SFL (atividade metabólica dos linfócitos e/ou permeabilidade da membrana celular) foram obtidos na admissão hospitalar. Resultados: Foram incluídos no estudo 140 pacientes, 102 (72,9%) sobreviventes e 38 (27,1%) não sobreviventes. O grupo de não sobreviventes apresentou maior faixa etária, superior tempo de internamento, maior percentual de comorbidades (hipertensão arterial, diabetes mellitus e doença cardiovascular) e de indivíduos submetidos a intubação orotraqueal. Idade, comorbidades e comprometimento pulmonar >50% foram considerados fatores de risco para COVID-19. Os parâmetros RDW-CV e NE-SSC demonstraram associação ao prognóstico de mortalidade, com ponto de corte estimado em 13,2% e 153 Ch, respectivamente. A análise de sobrevivência em 30 dias demonstrou que a sobrevivência foi significativamente maior nos pacientes com RDW-CV ≤13,2% e NE-SSC ≤153 Ch (83,1% e 79,1%, respectivamente) do que naqueles com RDW-CV >13,2% e >153 Ch (60,3% e 67,1%, respectivamente). A razão de risco estimada para mortalidade associada ao ponto de corte de RDW-CV e NE-SSC de forma isolada foi de 1.9 (IC 95% 1.0 a 3.6, p = 0,048) e 2.2 (IC 95% 1.1 a 4.2, p = 0,020), respectivamente. Porém, na análise multivariada apenas a idade demonstrou ser um fator de risco independente para predizer o prognóstico de pacientes com COVID-19 em 30 dias. Discussão: O envelhecimento é um processo natural e está associado à diminuição da competência imunológica, o que contribui para os resultados encontrados. A idade também foi considerada, por um estudo anterior, em pacientes hospitalizados com COVID-19, como preditor independente de mortalidade em 28 dias. Um estudo anterior obteve o ponto de corte 13,0% para RDW-CV e na análise de sobrevivência em 30 dias observou que a sobrevida foi maior nos pacientes com RDW-CV ≤13,0%, semelhantes aos resultados do presente estudo. As alterações no parâmetro NE-SSC remetem à granulopoiese acelerada e desordenada da mieloperoxidase, que pode estar associada à tempestade de citocinas e estado inflamatório exacerbado em pacientes com COVID-19 em fase sintomática grave. Portanto, esses dados podem refletir sobre a resposta antiviral e o estado inflamatório dos pacientes. Conclusão: A idade demonstrou ser um fator de risco independente para predizer o prognóstico de pacientes com COVID-19. Os parâmetros RDW-CV e NE-SSC apresentaram associação com o prognóstico de mortalidade e podem ser explorados em estudos futuros para o desenvolvimento de algoritmos de regras para predição clínica em pacientes com COVID-19. Apoio financeiro: Fundação Araucária/UEPG.

Introdução/Objetivos: O EDTAK2 é o anticoagulante recomendado pela CLSI e pelo ISCH para a realização do hemograma. Na rotina hospitalar é interessante a possibilidade de realização de maior quantidade de exames com a mesma amostra, pois algumas situações exigem a coleta de um volume menor de sangue ou, até mesmo, em situações de extrema urgência. Seria mais eficiente a possibilidade de realização do hemograma utilizando a mesma amostra usada na avaliação dos gases sanguíneos, em presença do anticoagulante heparina de lítio (LiH). Não há estudos, com casuística considerável, que investigaram a equivalência das contagens de células sanguíneas heparinizadas em comparação ao uso do EDTAK2. O objetivo deste estudo foi comparar a contagem celular completa de sangue heparinizado provenientes de amostras coletadas para realização de gasometria e de amostras de hemograma (EDTAK2) oriundas da mesma punção. Material e métodos: Foram avaliadas 500 amostras de gasometria arterial coletadas em seringa BD A-Line™ em proporção de 50 UI de LiH por mL de sangue em paralelo com 500 amostras de hemograma coletadas em EDTAK2 (BD Vacutainer®). Todas eram provenientes da rotina hospitalar do Hospital Universitário Regional dos Campos Gerais, Paraná, Brasil. As análises foram realizadas no Sysmex-XN 1000™. Os parâmetros analisados foram: RBC, HBG, HCT, RDW, VCM, HCM, CHCM, WBC e PLT. A comparação entre os valores medianos foi realizada pelo teste de Mann-Whitney U. Para avaliar o grau de concordância foi utilizado o método de Bland-Altman e os limites clinicamente aceitáveis foram RBC ±1,7%, HBG ±1,8%, HCT ±1,7%, RDW ±1,7%, VCM ±1,2%, HCM ±1,4%, CHCM ±0,8%, WBC ±5,6% e PLT ±5,9%. Resultados: Os parâmetros RBC, HBG, HCT, RDW, VCM e PLT apresentaram diminuição significativa (p < 0,05) e CHCM aumento significativo (p < 0,05), nas amostras de sangue em LiH em relação ao EDTAK2. Na avaliação da concordância entre os valores dos parâmetros entre os dois anticoagulantes, observou-se um viés significativo do limite clínico aceitável, apresentando diminuição: RBC (3,4%), HBG (3,4%), HCT (6,7%), RDW (2,2%), VCM (3,2%) e PLT (116,4%) e aumento da CHCM (3,2%). Discussão: Um estudo prévio, que também avaliou as contagens celulares em amostras coletadas em LiH para gasometria, não encontrou diferença significativa entre os valores de RBC, HGB e HCT em relação as amostras coletadas em EDTA, porém a casuística do trabalho era pequena, foram avaliadas apenas 5 amostras. A diferença mais impactante entre as análises foi observada nas contagens plaquetárias que foram significativamente menores nas amostras heparinizadas em relação as amostras em EDTAK2. Esse resultado está de acordo com estudos anteriores que demonstraram diminuição nas contagens plaquetárias em amostras heparinizadas, devido à adesão e a formação de microagregados plaquetários, os quais podem não ser detectados por alguns modelos de equipamentos hematológicos. Conclusão: Os resultados do presente estudo demonstraram que maioria dos parâmetros do hemograma, demasiadamente a contagem de plaquetas, excederam as especificações permitidas para o viés clínico aceitável na avaliação de amostras heparinizadas. Portanto amostras de sangue em LiH não devem ser utilizadas para avaliar parâmetros do hemograma. No entanto, cada laboratório clínico deve avaliar e validar os procedimentos de contagens celulares de acordo com as particularidades da rotina inerentes a cada local.

Introdução: O Linfoma de Células T Angioimunoblástico (LTAI) é um linfoma de células T foliculares auxiliares helper (TFH) maduras CD4 positivas, caracterizado por sintomas sistêmicos que podem mimetizar inúmeras outras condições clínicas. O diagnóstico é desafiador e requer uma conjunção de achados clínicos, laboratoriais e histopatológicos. A imuno-histoquímica (IHQ) pode demonstrar os marcadores de células T como CD3, CD2 e CD4, e a frequente perda de marcadores CD5 e/ou CD7. A expressão aberrante de CD10, CD25 e CD279 (PD1) podem auxiliar no diagnóstico diferencial de outros linfomas T. A expressão de CD30 é observada em aproximadamente 20% dos casos. Estes marcadores podem ser detectados pelo exame de imunofenotipagem por citometria de fluxo multiparamétrica (CFM), técnica que permite o encontro de pequenas quantidades de células patológicas. O objetivo deste estudo é descrever uma série de 8 casos de LTAI avaliados por CFM em amostras de biópsias de linfonodos (LN) e sangue periférico (SP). Métodos: 273 amostras de LN foram avaliadas entre 2019 e 2023 com o tubo screening LST (CD8, CD56, CD5, CD3, CD38, CD4, CD20, CD45 e cadeias leves kappa e lambda). As amostras com alteração de fenótipo dos linfócitos T eram complementadas por tubos que incluíam os anticorpos monoclonais anti-CD2, CD7, CD10, CD25, CD26, CD27, CD28, CD45RA, CD45RO, CD57, CD94, CD279, receptor TCR gama-delta, e avaliação do receptor do TRCBeta com o clone JOVI1 partir de 2021. Resultados: 8 amostras de biópsia de LN apresentaram fenótipo sugestivo de LTAI no período estudado (2,93%). A CFM mostrou percentuais variados de células linfoides anômalas de baixa complexidade, positivas para CD4++, CD3++ e CD2++ em 100% dos casos estudados. O CD7 foi positivo em 6/7 casos, CD5 (5/7 casos), CD28 e CD45RO em 4/7 casos, e marcação fraca ou negativa de CD26, CD27 e CD45RA em todos os casos. Seis de 7 casos apresentaram positividade de moderada a forte para o antígeno anti-CD279 (PD1) e para CD10, ambos marcadores bastante específicos para o diagnóstico de LTAI. O CD30 foi parcial em 3 casos e o CD25 positivo fraco em todos os casos estudados. Três dos 8 casos foram avaliados pelo TRC Beta e todos eram totalmente negativos (não expressos), portanto clonais. Dos 8 casos estudados, cinco tiveram o SP avaliado previamente ou em conjunto, sendo possível detectar células anômalas em diferentes percentuais (0,2%, 4,0%, 13,0%, 15% e 23%). Todos os casos foram confirmados pelo exame anatomopatológico, com o encontro de infiltrados perivasculares e IHQ sugestivos do LTAI. Discussão: O LTAI apresenta-se clinicamente com sintomas sistêmicos como linfonodomegalias generalizadas, hepatoesplenomegalia, rash pruriginoso, poliartrite, ascite, anemia e perda de peso. Os pacientes podem apresentar ainda uma disfunção imunológica secundária à neoplasia e hipergamaglobulinemia policlonal. Além do quadro heterogêneo e da dificuldade de suspeição clínica, o diagnóstico histológico também pode ser desafiador, pois os linfonodos perdem sua arquitetura devido ao infiltrado perivascular e neovascularização. Reportamos aqui uma série de 8 casos de LTAI avaliados por citometria de fluxo, sendo que a células de interesse foram documentadas tanto na biópsia de LN quanto no SP. Em pelo menos três dessas amostras de SP coletadas antes da biópsia, o fenótipo encontrado foi decisivo para a definição diagnóstica final. Conclusão: A CFM em amostras de sangue periférico e biópsia de linfonodo direcionada para as células linfoides T anormais positivas para CD4, CD10 e CD279 (PD1) pode auxiliar e suportar o diagnóstico do Linfoma T Angioimunoblástico.

Introdução: O diagnóstico da neoplasia mielodisplásica (SMD) é desafiador na ausência de marcadores específicos (como aumento de número de blastos/sideroblastos em anel ou cariótipo definidor) e do acesso universal à análise molecular por NGS. Nesses casos, o diagnóstico baseia-se em achados morfológicos que exigem experiência do examinador e apresentam alto grau de discordância entre avaliadores. O Score de Ogata é baseado em parâmetros de citometria de fluxo e já foi demonstrado que quando maior ou igual a dois apresenta sensibilidade e especificidade de aproximadamente 70% e 90% no diagnóstico de SMD. Objetivo: Primário: Validação do Score de Ogata no diagnóstico de SMD no laboratório de citometria de fluxo da clínica Hematológica/Oncoclínicas. Secundários: Avaliação da concordância de achados morfológicos de displasia em mielograma entre dois examinadores; correlação entre achados morfológicos de displasia e assincronismos de maturação séries eritrocítica e granulocítica em análise imunofenotípica. Métodos: O Score de Ogata é calculado em todos os pacientes com informe de citopenias, suspeita ou diagnóstico de SMD ou SMD/Mieloproliferativas e é realizado no laboratório desde 2022. Foram recolhidos de janeiro a julho de 2023 dados demográficos, morfológicos de dois analisadores, de citometria de fluxo, de biópsia de medula óssea, citogenética, NGS, diagnóstico final, R-IPSS e tratamento. Os dados de 2022 estão sendo processados. Resultados: 51 pacientes analisados, 56% do sexo masculino com mediana de idade de 64 anos. As indicações de estudo medular foram: neutropenia (1,9%), plaquetopenia (11,8%), diagnostico prévio de SMD (11,8%), anemia (11,8%), bicitopenia (11,8%), pancitopenia (17,6%), suspeita de SMD (23,5%) e LMMC (9,8%). Obtivemos diagnóstico final de 33 pacientes, sendo que 42,4% foram de SMD, desses apenas 5 com cariótipo e 1 com NGS definidores. Considerando todos os casos, a concordância de achado de displasia ≥ 10% das células em série eritrocítica, granulocítica e megacariocítica entre os dois analisadores foi de 83%, 88% e 76,4% respectivamente. Dentre os pacientes com diagnóstico de SMD a concordância de achado de displasia ≥ 10% das células em série eritrocítica, granulocítica e megacariocítica foram de 100%, 93% e 77%. Já entre os pacientes sem diagnóstico de SMD, a concordância de ausência de displasia significativa das séries eritrocítica, granulocítica e megacariocítica foi de 100%, 100% e 80% respectivamente. A concordância entre achados de displasia significativa e distúrbio de maturação na citometria da série eritrocítica e granulocítica foi de 74,5% e 78,4%, respectivamente. A sensibilidade do Score de Ogata ≥2 foi de 60% e especificidade de 61,6% no diagnóstico de SMD. Discussão: a análise interina dos dados demonstra concordância satisfatória da avaliação de displasia em mielograma, porém menor em série megacariocítica que é a mais específica para diagnóstico de SMD. Já a correlação entre achados de displasia na morfologia e distúrbio de maturação na citometria são insatisfatórios podendo demonstrar que os métodos são complementares. O Score de Ogata ≥ 2 apresentou tanto sensibilidade quanto especificidade abaixo do descrito na literatura. Conclusão: tais achados demonstram a complexidade no diagnóstico de SMD e necessidade de implementação universal de ferramentas mais assertivas para diagnóstico como a análise molecular por NGS.

Introdução: A Mastocitose Sistêmica (MS) é um grupo heterogêneo de doenças caracterizado pela proliferação anormal e acúmulo excessivo de mastócitos em um ou mais órgãos. A pele é mais frequentemente acometida e os sintomas sistêmicos que ocorrem pela liberação de mediadores químicos ou decorrentes de infiltração orgânica. A morfologia da medula óssea mostra mastócitos com morfologia atípica (núcleo ovalado, formato alongado ou disformes, relativamente hipogranulares). A citometria de fluxo multiparamétrica (CFM) identifica e quantifica os mastócitos anormais pela forte positividade do marcador CD117, expressão de CD203 e autofluorescência, e expressão anômala dos antígenos CD2, CD25 e CD59. Para o diagnóstico é necessária a presença de mastócitos anormais em biópsia tecidual, associados a um critério menor [morfologia atípica no mielograma, CD2 e/ou CD25 positivo na CFM, mutação 816V no C-kit e aumento da triptase sérica], ou três critérios menores. A MS é dividida em MS indolente (MSI) e MS associada a outras doenças hematológicas clonais (MS-DHC). Além dessas subclassificações, há ainda a Leucemia Mielomastocítica Aguda (LMMA), grupo extremamente raro de neoplasias caracterizadas pela presença de blastos com diferenciação mielomastocitária. Objetivo: Reportar casos de mastocitose para melhorar o entendimento da fisiopatologia e apresentação clínica deste grupo de doenças. Métodos: Análise retrospectiva de 24 casos de MS e 3 LMMA avaliados entre 2018 e 2023 na base de dados do laboratório, e comparação dos achados morfológicos e imunofenotípicos entre os pacientes com os dois tipos de mastocitose (MSI e MS-DHC). MSI (n = 13), idade 64 anos (19-76), sendo 5 com medula hipercelular/eosinofilia e 8 com medula hipocelular; todas apresentam mastócitos atípicos e granulação aumentada nos granulócitos, aumento de eosinófilos e basófilos. Clinicamente foi reportada anemia ou mielodisplasia prévia em 5 casos, esplenomegalia em 4, e evolução para mastocitose agressiva em 3. MS-DHC (n = 9), idade 62 anos (41-77), sendo 2 LMA t(8;21), 2 LMA relacionadas a mielodisplasia, 2 SMD-EB2, 2 SMD hipoplásicas e uma ARSA, todos com displasia intensa nas três séries hematopoéticas e percentuais variados de blastos e mastócitos anormais. 3 LMMA, idade entre 16 e 58 anos; dois com t(8;21) e uma LMA M4 associada a SMD. Resultados: O percentual mediano de mastócitos na MSI foi de 0,15% (0,03 a 2,5%), semelhante ao reportado na literatura em mastocitose e controles normais. Já no grupo MS-DHC a mediana de mastócitos anômalos foi maior (0,7%, variando de 0,4 a 5,6%), com alterações displásicas mais frequentes. O percentual de células precursoras com diferenciação mieloide CD34+ foi 0,6% (0,1% a 0,85%) nas MSI, enquanto em MS-DHC a mediana foi 7,0% (1,5% a 26,4%). Em relação ao imunofenótipo, todos casos de MSI tinham CD25 positivo forte nos mastócitos, e 10 de 13 casos tinham CD2 expresso (CD25++CD2+). No grupo MS-DHC o CD25 foi fortemente expresso em 8 de 9 casos, porém o CD2 foi negativo/fraco em todos os casos (CD25++CD2- ou fraco). Já os casos de LMMA de novoapresentaram uma alta percentagem de mastócitos anormais (entre 4 e 23%), os quais foram considerados como blastos com diferenciação mastocitária (CD117++, CD203+, HLA-DR fraco), porém todos apresentaram CD2 e CD25 negativos/fracos. Conclusão: Apesar de não dispormos no serviço dos exames de dosagem da triptase ou mutação do cKit, consideramos que a presença de mastócitos fenotipicamente anormais na CFM associados a morfologia atípica são altamente sugestivos da doença. Assim, a expressão dos marcadores CD2 e CD25, o percentual de mastócitos anômalos e blastos, e história prévia de displasia medular são de grande auxílio no diagnóstico diferencial entre os subtipos de mastocitose sistêmica.

Introdução: O mieloma múltiplo (MM) é uma neoplasia hematológica desafiadora devido à complexidade do diagnóstico e tratamento. O daratumumabe, um anticorpo direcionado ao CD38 em plasmócitos, transformou o tratamento do MM. Contudo, pode dificultar a avaliação da doença residual mínima (DRM) via citometria de fluxo. Reconhecendo essa interferência, o Consórcio EuroFlow desenvolveu uma abordagem contendo o CD38 multiepítopo, visando detectar com precisão várias partes da molécula CD38. Este estudo examina a eficácia dessa abordagem frente ao efeito do daratumumabe na identificação de plasmócitos (PC). Métodos: De out/22 a jul/23, 75 amostras de medula óssea foram analisadas usando a citometria de fluxo de 8 cores e o kit MM-MRD da Cytognos. Esse kit inclui antígenos como CD38 multiepítopo, CD138, e outros, além de Ig Kappa e Ig Lambda intracitoplasmáticos. Os PCs são identificados por expressões fortes de CD38 e CD138, expressão monotípica da cadeia leve e fenótipos aberrantes. Para ampliar a sensibilidade, usou-se a técnica de bulklysis. A análise foi feita no software Infinicyt, avaliando a intensidade média de fluorescência e índice de marcação (stain index) para CD38. O SI classifica: 10, distinção clara entre populações. Resultados: Pacientes com MM foram divididos em quatro grupos: 1. Diagnóstico inicial (n = 26); 2. DRM pós-tratamento com DARA (n = 16); 3. DRM após última dose de DARA há > seis meses (n = 5); 4. DRM após regimes sem DARA (n = 28). No grupo 2, notou-se diminuição na expressão do CD38 multi-epítopo em PC clonais e normais, em comparação aos grupos 1 e 4. Por outro lado, pacientes que obtiveram DRM após um intervalo > 6 meses do último uso de DARA exibiram expressão de CD38 análoga aos grupos de diagnóstico e tratamento padrão. Quanto à intensidade média de fluorescência (IMF) para as subpopulações avaliadas, os valores para PC clonais, PC normais residuais e hematogônias foram, respectivamente: Grupo 1: 25.671, 34.159 e 4.300; Grupo 2: 3.057, 4.114 e 681; Grupo 3: 29.291, 40.839 e 3.637; Grupo 4: 12.951, 38.063 e 3.066 (p < 0,001). Notavelmente, a expressão do antígeno CD38 em pacientes após terapia com DARA não possibilitou uma distinção adequada dos plasmócitos em relação a outras populações da medula óssea, conforme evidenciado pelo stain index. Valores para PC clonais e PC normais residuais foram: Grupo 1: 41,8 e 56,1; Grupo 2: 3,9 e 7,3; Grupo 3: 36 e 56; Grupo 4: 20,3 e 62,7 (p < 0,001). Discussão: Os resultados obtidos levantam uma questão fundamental sobre a eficácia da abordagem do CD38 multiepítopo na avaliação de DRM. Embora a estratégia do Consórsio Euroflow incorpore outros marcadores que permitam a identificação de PCs mesmo na ausência de expressão de CD38 (como CD138 e Igs de cadeia leve), situações como tempo de coleta > 24h, celularidade e viabilidade da amostra podem comprometer essa análise. É crucial que futuras investigações se aprofundem em métodos alternativos ou refinamentos na técnica atual para garantir a avaliação adequada da DRM em pacientes com MM tratados com daratumumabe. Além disso, pode ser proveitoso investigar o tempo exato necessário para a normalização da expressão de CD38 após a cessação do daratumumabe, bem como entender os mecanismos subjacentes a essas mudanças.

Introdução: O carcinoma do timo é um tumor epitelial tímico raro, caracterizado por morfologia celular anômala, agressividade e formação precoce de metástases. Clinicamente, pode manifestar-se por sintomas relacionados a crescimento local, metástases ou síndromes paraneoplásicas. O diagnóstico, além de exames de imagem, envolve anatomopatológico (AP) (com múltiplas apresentações histológicas possíveis) e imuno-histoquímica (IH) da lesão, com demonstração de marcadores como: TdT (-), CD5+, CD117+, mTAP(-), BAP1(-) e GLUT1+. O uso de imunofenotipagem por citometria de fluxo (CMF) é pouco descrito neste contexto. Objetivo: Descrever um caso de carcinoma tímico avaliado por citometria de fluxo multiparamétrica. Relato de caso: Paciente de sexo feminino, 70 anos, apresentando um diagnóstico de linfoma B há 5anos, retorna com linfonodomegalia cervical esquerda 3cm e hemograma: Hb = 10,7 g/dL, Leucócitos = 9060/mm3, linfócitos = 2750/mm3 e plaquetas = 205.000/mm3. Foi encaminhada biópsia do linfonodo para CMF, AP e IH. A CMF (BD Facslyric, 8 cores) utilizou os seguintes marcadores para estudo: CD19, CD20, Kappa, Lambda, CD3, CD4, CD5, CD8, TCR gama/delta, CD56, CD15, CD64, CD45, CD38, CD30, CD40, CD95, CAM 5.2, CD81 e CD71. O perfil Imunofenotípico apresentou 43% de linfócitos B maduros policlonais, com relação entre cadeias leves de imunoglobulinas de superfície Kappa /Lambda 1:1; 52% de linfócitos T maduros, sendo que 41% expressam CD4 e 10% expressam CD8, relação CD4/CD8 = 4,1; e 1,5% de linfócitos NK. Observou-se também a presença de 3% de células não hematopoiéticas que expressaram CD5, citoqueratina (CAM5.2), CD81, CD40 e CD95 e não expressaram marcadores hematopoéticos CD3, CD19, CD20 e CD45. A resolução clínica, veio com o AP+IH, onde o resultado foi positivo para os marcadores: P63, CK5/6, CD5, CD117 e negativo para TTF1, favorecendo carcinoma tímico metastático do tipo de células escamosas. Discussão: Casos de Carcinoma do Timo são raros e sua análise por CMF são ainda mais infrequentes. No entanto, a CMF apresenta grande valor ao excluir diagnósticos diferenciais como linfomas e leucemias, e eventualmente detectando tumores não hematopoéticos. Os estudos AP e IH permite o diagnóstico final e sua diferenciação de carcinoma metastático (especialmente pulmão), timoma, tumor de células germinativas e linfomas, como o difuso de grandes células B. Em conjunto, estas técnicas permitem o diagnóstico final mais acurado e rápido, e favorecem a implantação de tratamento precoce e assertivo. Conclusão: O diagnóstico de carcinoma tímico é raro e desafiador, ainda mais em casos extra-tímicos como este. A estratégia multidisciplinar, empregando marcadores específicos por meio de CMF e IH, a eliminação de linhagens hematopoéticas e a análise anatomopatológica, constituem ferramentas de grande relevância para um diagnóstico mais preciso.

Introdução e objetivos: Neoplasias mieloproliferativas (NMP) BCR::ABL1 negativas são doenças clonais de células-tronco hematopoiéticas caracterizadas por panmielose. JAK2V617F é uma alteração genética no gene JAK2, comum nessas doenças e promove uma atividade constitutiva da proteína JAK2 em vias de sinalizações hematopoiéticas. Variantes em íntrons já foram descritas nas NMP, como rs10974944, localizada no íntron 12 de JAK2 e em desequilíbrio de ligação estreito com o haplótipo 46/1 (GGCC), que, por sua vez, apresenta influência na aquisição de JAK2V617F. Variantes na mesma região, como rs10815151 (C>T), podem desempenhar funções relevantes na patogênese dessas doenças. O estudo objetivou relatar a ocorrência da variante rs10815151 (C>T) e inferir sobre sua influência no cenário etiopatiogênico das NMP BCR::ABL1-. Materiais e métodos: 108 indivíduos diagnosticados clinicamente com policitemia vera (PV) (n = 39), trombocitemia essencial (TE) (n = 61) e Mielofibrose (MF) (n = 8) participaram do estudo. Foram colhidas amostras de sangue periférico dos participantes para extração de DNA genômico de granulócitos e análises moleculares por meio do sequenciamento de Sanger. Frequências alélicas e genotípicas foram expressas por valor absoluto e frequência relativa e foram testadas pelo Qui-Quadrado com intervalo de confiança de 95%. Considerou-se valores de p < 0,05 estatisticamente significativos. Resultados: 42 indivíduos (38,9%) apresentaram a variante rs10815151 (C>T). O genótipo heterozigoto (CT) demonstrou-se mais elevado em TE (37,7%) em relação a PV (23,1%), ao passo que o homozigoto variante (TT) apresentou-se aumentando em PV (12,8%) quando comparado a TE (8,2%). A frequência alélica de T apresentou-se mais acentuada em TE (27,1%) que em PV (24,4%). Pacientes com MF não apresentaram a variante. Em relação a distribuição da variante quanto ao status de JAK2V617F, os genótipos CT e TT apresentaram frequências mais elevadas em indivíduos JAK2V617F− (41,7% e 29,2%, respectivamente), demonstrando associação significativa (CC vs CT: OR = 0,2; IC 95% = 0,1-0,6; p = 0,009; CC vs CT/TT: OR = 0,3; IC 95% = 0,1-0,8; p = 0,032, respectivamente). O alelo T demonstrou associação com JAK2V617F_VAFT) em NMP BCR::ABL−. A elevada frequência dessa variante em indivíduos JAK2V617F− abre debates sobre seu possível papel na etiologia dessas doenças. Considerando que anormalidades de splicing desempenham papel nesse grupo de cânceres hematológicos, levanta-se a hipótese de que o alelo variante (T) de rs10815151 possa exercer efeito indireto na expressão ou regulação de JAK2. Essa variante pode, teoricamente, modular a estrutura ou função de elementos regulatórios ainda desconhecidos do íntron 12, afetando a ligação de fatores de transcrição ou o processo de splicing. Tais modificações podem causar alterações na expressão ou processamento do mRNA e, como consequência, limitar a capacidade de JAK2V617F de desempenhar sua função patogênica e outros efeitos a jusante podem estabelecer o distúrbio mieloproliferativo clonal. Conclusão: Estudos posteriores com rs10815151 (C>T) devem ser realizados para avaliar possível papeis na etiologia molecular de neoplasias mieloproliferativas BCR::ABL1−.

The use of tyrosine kinase inhibitors (TKIs) have revolutionized the treatment of chronic myeloid leukemia (CML), making it possible for patients to have a life expectancy similar to that of the healthy population. To improve treatment adherence and effectiveness, it is necessary to understand the side effects that the medications may cause. On the other hand, the importance of TKI discontinuation studies are strengthened by recognition of long term adverse events. The primary objective of this study is to assess the prevalence of renal insufficiency in a cohort of CML patients who use first and second-generation tyrosine kinase inhibitors and compare this prevalence between the two generations of the medication. The secondary objective is to identify risk factors for the development of renal alterations secondary to the use of TKIs. Methods: this is an observational, cross-sectional, and analytical clinical study, with a sample consisting of 160 CML patients at the outpatient clinic of a reference hospital in Brazil between October 2000 and January 2023. Clinical and laboratory data available since the start of hospital follow-up were analyzed from the medical records of these patients. Categorical variables were expressed as counts and percentages, and compared using chi-square tests. The Mann-Whitney test was applied for continuous variables. Logistic regression was used for identifying risk factors for renal disfunction. P-values less than 0.05 were considered statistically significant. Data were collected and tabulated in Microsoft Excel® spreadsheets and analyzed using the Statistical Package for the Social Sciences - SPSS® software (IBM® SPSS® Statistics v. 25.0, SPSS Inc, Chicago, USA). Results: The univariate analyses showed a significant relationship between the presence of renal dysfunction and the use of Imatinib (p = 0.0026), advanced age (p = 0.00001), and presence of comorbidities (p = 0.001), particularly systemic arterial hypertension (SAH) (p = 0.0001). With the multivariate analysis, independent variables for renal dysfunction found were, advanced age (p = 0.0023; OR: 2.08; CI: 1.30-3.32), having SAH (p = 0.0142; OR: 1.91; CI: 1.14 – 3.20), and the use of Imatinib (p = 0.0131; OR: 1.89; CI: 1.14 - 3.14). Conclusion: The study findings suggest that the use of Imatinib therapy in patients with chronic myeloid leukemia may be associated with a reduction in glomerular filtration rate and an increase in the occurrence of chronic kidney disease in this population in the long term, especially when combined with other risk factors such as advanced age and the presence of comorbidities, particularly SAH.

Introdução/Objetivos: As neoplasias hematológicas com morfologia plasmablástica incluem o mieloma múltiplo com características plasmablásticas e os linfomas com fenótipo semelhante às células plasmocitárias - linfoma plasmablástico, linfoma primário de efusões associado ao HHV-8, linfoma de grandes células B ALK positivo e linfoma difuso de grandes células B KSHV/HHV8 positivo. Estas condições raras têm em comum predominância de plasmócitos com morfologia plasmablástica ou células B grandes e atípicas, com morfologia plasmablástica ou imunoblástica, expressão de marcadores de células B pós-centro germinativo (CD38, CD138, MUM1, BLIMP1 e XBP1), perda de marcadores B (CD20 e PAX5) e alto Ki-67. Estas neoplasias representam desafio diagnóstico, especialmente na diferenciação entre mieloma múltiplo/plasmocitoma plasmablástico (MM/PP) e linfoma plasmablástico (LP). Combinação de dados clínicos, laboratoriais e genéticos é crucial para diagnóstico, prognóstico e abordagem terapêutica apropriados. Descrevemos coorte de neoplasias plasmablásticas (NP) diagnosticadas em um hospital terciário entre janeiro/2013 e dezembro/2022. Materiais e métodos: Coorte retrospectiva, unicêntrica, de adultos com NP, com análise do perfil clínico, laboratorial e anatomopatológico, incluindo status de infecção por HIV e EBV (EBER). O diagnóstico foi revisado por hematopatologista experiente. Sobrevida global (SG) foi estimada pelo método de Kaplan Meier e comparações por teste de Log-Rank. Resultados: Foram identificados 13 casos de NP, sendo 7 consistentes com LP e 6 com MM/PP; desses, 69% homens, 9/12 imunossuprimidos, 30% com neoplasia hematológica prévia, 4/10 com sintomas B (LP) e acometimento “CRAB”em 100% dos MM/PP. Gamopatia monoclonal e doença extranodal ocorreram em 20% e 86% dos LP e 33% e 100% dos MM/PP. Infiltração medular foi mais frequente nos MM/PP. Mediana de Hb de 12,2 g/dL (6,2-14,9), menor no LP; B2M de 2,86 mg/dL (1,4 - 13), maior no MM/PP; DHL de 304 U/L (160 - >2500), com maior nível no LP; albumina de 3,57 g/dL (1,98 - 4,53) sem diferença entre os subgrupos. Ausência de CD20 e/ou PAX5, expressão de MUM1 e de CD38 e/ou CD138 ocorreram respectivamente em 85%, 100% e 92% da coorte. A expressão de MYC e CCDN1 foi mais frequente no subgrupo MM/PP. Mediana de Ki67 de 90% (30 - 99), semelhante nos subgrupos. EBV foi detectado em 2 casos de LP. Dentre os LP, 83% tinham estádio III/IV e foram tratados com quimioterapia linfoma-like (EPOCH + Bortezomib), com resposta completa (RC) de 67%. Dos MM/PP estadiados, 50% tinham ISS III, 83% receberam tratamento mieloma-like baseado em inibidor de proteassoma e anti-CD38 e 17% tratamento linfoma-like, com RC de 75%. SG em 2 anos foi de 45% (33,3% LP e 55,6% MM/PP). Discussão: Nesta coorte observamos que envolvimento CRAB, ausência de infecções pelos vírus HIV e EBV e expressão de CCND1 e MYC estão presentes numa maior frequência no MM/PP, sendo úteis na diferenciação com o LP. Apesar da alta taxa de RC, não há terapia padrão para estas neoplasias e a SG foi curta em ambos os subgrupos. Conclusão: As NP possuem prognóstico adverso. Associação de dados clínicos e laboratoriais foi crucial na definição diagnóstica dos casos discutidos, já que há grande sobreposição entre os achados morfológicos e imunofenotípicos das duas entidades. É fundamental a descrição de maior número de casos para expandir o entendimento e o reconhecimento destas entidades.

O Mieloma Múltiplo (MM) é um câncer hematológico ocasionado pelo acúmulo de plasmócitos na medula óssea (MO). Estudos demonstram que a ativação constitutiva da via canônica de Wnt é comum no MM, induzindo a proliferação celular, a progressão e a disseminação da doença, assim como a aquisição de resistência à fármacos. Mecanisticamente, a atividade oncogênica desta via no MM se dá pela expressão e reciclagem anormal dos receptores das proteínas Wnt, denominados Fzd (Frizzeld). Quando a via canônica está inativa, as ubiquitina ligases ZNRF3 e RNF43 promovem a internalização e a degradação dos receptores Fzd, impedindo a ligação das proteínas Wnt. Para que a via seja ativada, a internalização dos receptores Fzd é inibida por uma sinalização paralela, mediada por proteínas da família das R-spondinas (RSPOs), que se ligam a receptores LGR, aliviando a atividade de ZNRF3/RNF43 sobre os receptores Fzd, que então se mantém na membrana plasmática. No MM, a liberação excessiva de RSPOs na MO e sua ligação ao receptor LGR4 em plasmócitos promove a estabilização dos receptores Fzd e o aumento significativo da responsividade destas células à sinalizações mediadas por Wnts. No entanto, ainda não se sabe quais tipos celulares, constituintes do microambiente medular, são os responsáveis pela produção de RSPOs. Desta forma, o objetivo deste estudo é avaliar a expressão gênica de RSPOs 1-4 nas distintas populações de células esqueléticas/estromais isoladas de amostras da medula óssea humana normal e de pacientes com MM, por citometria de fluxo e qRT-PCR, para identificar sua fonte específica (CAAE: 59636622.3.0000.5257). Além disso, avaliamos a expressão das RSPOs 1-4 em dados transcriptômicos de células estromais murinas, obtidos pela técnica de Single-cell RNASeq e disponíveis publicamente no banco de dados GEO do NCBI sob o número GSE 122467 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi? acc=GSE122467). Nestes dados, observamos a expressão de RSPO2 e RSPO3 na subpopulação de células reticulares CAR, com fenótipo LEPR+ (receptor de leptina) alta expressão de genes associados à adipogênese e sustentação da hematopoese, como CXCL12, SCF (Kitl) e IL-7. Nossas análises por citometria de fluxo convencional sugerem um aumento na porcentagem de células CAR em pacientes portadores de MM. O que sustenta a nossa hipótese que essas células sejam as possíveis fontes das RSPO que induzem a ativação constitutiva da via de Wnt em plasmócitos no microambiente da MO, corroborando para a manutenção e a proliferação destas células no MM. Novas análises por citometria de fluxo convencional e por qRT-PCR em amostras humanas estão em andamento para confirmar estes achados. Considerando que a evolução do MM depende significativamente de suporte do microambiente, identificar a fonte específica de RSPOs no MM e como as células que as produzem são modificadas pela doença poderá ter implicações importantes para a descoberta de novos marcadores diagnósticos e/ou preditores de prognóstico, assim como de novos alvos terapêuticos no âmbito da medicina de precisão.

Objetivo: O objetivo do trabalho foi validar a técnica para quantificação de células CD34+ no citômetro de fluxo da marca Beckman Coulter, modelo DxFLEX. A citometria de fluxo é uma técnica versátil usada para analisar as propriedades físico-químicas das células e partículas em suspensão. É possível quantificar e caracterizar células individuais com base em várias propriedades, como tamanho, forma e marcadores de superfície ou intracelulares. A principal função da citometria de fluxo é permitir a análise simultânea de milhares de células em alta velocidade. Material e método: O protocolo utilizado foi de plataforma única, estabelecido pelo ISHAGE (International Society of Hematotherapy and Graf Enginnering) com beads magnéticas para identificação da população alvo, no período de 02/05 à 21/06/2023, feito por comparação interlaboratorial (DxFLEX versus laboratório apoio). Foram utilizadas 20 amostras de sangue periférico de doador de sangue total (doador normal), 15 amostras de sangue periférico de doador mobilizado para coleta de CPH, 5 amostras de produtos de Células Progenitoras Hematopoiéticas (CPH) coletadas por aférese e 5 coletadas da medula óssea, 10 amostras de plasma de sangue total e 2 amostras comerciais, para controle, com contagem de células CD34+ conhecidas. Resultado: Precisão com R2 próximo de 1, variando até 10%, sendo em amostra de sangue periférico de doador normal um R2 = 0,90, amostra de sangue periférico de doador mobilizado um R2 = 0,94, e amostra de produto CPH coletado por aférese e de medula óssea com R2 = 0,99; repetibilidade das amostras variando até 2 desvios padrões; um valor de carryover definido em 1,52%; todos os testes branco foram realizados com plasma de doador normal e apresentaram resultados iguais a zero; sensibilidade analítica com coeficiente de variação médio de 14,6%, sendo o preconizado de até 20%; intervalo de referência do equipamento de acordo com o estabelecido pelo fabricante com valor de 0,06; e estabilidade das amostras por período de 24 horas quando mantidas em temperatura de 2°a 8°C. Discussão: As células CD34+ são células progenitoras hematopoiéticas encontradas na medula óssea e em outras fontes, como sangue periférico e cordão umbilical, e têm a capacidade de se diferenciarem em vários tipos de componentes sanguíneos, como hemácias, leucócitos e plaquetas. A quantificação das células CD34+ é de extrema importância para os transplantes de medula óssea desde a identificação do momento ideal para o início da coleta dos produtos por aférese, até a mensuração da quantidade de células CD34+ nos produtos provenientes de coletas por aférese ou da medula óssea para um transplante eficaz. A validação demonstrou precisão próxima de 100%, sem carreamento dos resultados entre a aquisição de amostras de valores altos e baixos, repetibilidade adequada com valores até 2 desvios padrões, sensibilidade analítica com coeficiente de variação dentro do preconizado (20%) e boa estabilidade das amostras quando armazenadas em temperatura de 2° a 8°C. Conclusão: Os resultados foram bastante satisfatórios o que torna segura a técnica da quantificação de CD34+ pelo equipamento DxFlex no serviço.

Introdução: O surgimento dos Inibidores de Tirosino-Quinase (ITQ), no final da década de 90, revolucionou o tratamento dos pacientes com Leucemia Mieloide Crônica (LMC), impactando diretamente na sobrevida desta população nas últimas duas décadas. A maioria dos pacientes tratados com ITQs obtém respostas moleculares profundas, com estudos demonstrando sobrevida similar à população geral. Todavia, alguns pacientes não atingem resposta adequada devido à falha ao tratamento, tanto pela resistência à medicação quanto pela intolerância aos efeitos colaterais. Para pacientes que falham com ITQs, o Transplante de Células-Tronco Hematopoiéticas (TCTH) continua a ser considerado uma terapia eficaz e potencialmente curativa. No entanto, há poucos dados na literatura sobre os resultados dos transplantes realizados após falha com as terapias-alvo. Objetivo: este estudo visa determinar a Sobrevida Global (SG) de pacientes com LMC submetidos ao TCTH após falha aos ITQs em um centro de referência no Brasil, além de analisar as incidências de recaída, mortalidade não relacionada a recaída e incidência cumulativa de DECH aguda (DECHa) ou DECH crônica (DECHc). Métodos: Estudo retrospectivo, observacional e analítico, realizado a partir de registros de prontuários e base de dados do Serviço de Transplante de Medula Óssea. As curvas de sobrevida foram realizadas usando o método de Kaplan Meier e o teste exato de Fisher foi usado para variáveis categóricas. EZR foi usado para análise estatística. Resultados: Foram avaliados 103 pacientes com diagnóstico de LMC, transplantados no período de janeiro de 2001 a maio de 2021, sendo excluídos os pacientes que não utilizaram ITQs previamente, totalizando 70 pacientes na análise final. A idade mediana foi de 38 anos (10‒60) e a maioria dos pacientes eram do sexo masculino (66%). 29 pacientes estavam em fase crônica antes do transplante, 38 em fase acelerada e 3 em crise blástica. 19 pacientes (27%) tiveram mutações identificadas, 5 pacientes com mutação T315I, 3 com mutação G250E e os demais com mutações diversas. 39 pacientes haviam utilizado ITQ de 2ª geração (56%). Quanto às características relacionadas ao TCTH, em 47% a fonte de células foi sangue periférico, 52% tiveram doador aparentado e 93% receberam condicionamento mieloablativo. A sobrevida mediana foi de 11 anos; sendo SG de 1 ano: 70% (57,8‒79,3), SG 5 anos: 57,7% (45,1‒68,5) e SG 10 anos: 51,4% (38,3 -63,1). A SG estimada em 5 anos não foi diferente para CP1 (60%) versus fases avançadas (45%); p = 0,6. Incidência cumulativa de mortalidade Não Relacionada à Recaída (NRM) em 100 dias: 12,9% (6,3‒21,9) e em 1 ano: 21,4 % (12,7‒31,7). Incidência cumulativa de DECHa em 100 dias: 34,3% (23,4‒45,5) e de DECHc em 1 ano: 34,3% (23,3‒45,5). Incidência cumulativa de DECHc em 2 anos: 35,7% (24,6‒47,0). Em relação às taxas de recaída em 1 ano, a incidência cumulativa de recaída foi de 27,1% (17,3‒38) e em 2 anos 34,3 (23,4‒45,5). Conclusão: O estudo teve como objetivo principal a avaliação da sobrevida, sendo encontrada uma taxa superior a 50% em 5 e 10 anos, corroborando o potencial do TCTH no cenário de falha terapêutica. Além disso, foi observada incidência de DECHa, DECHc, recaída e NRM em geral similares a estudos anteriores. Ressalta-se que a busca de doadores deve ser realizada precocemente, assim que observada a resistência a ITQ de 2ª geração, considerando que os melhores resultados são alcançados quando os pacientes ainda estão em fase crônica.

Introdução: A Síndrome Mielodisplásica (SMD) compreende um grupo heterogêneo de doenças clonais de origem nas células tronco pluripotente. A SMD é caracterizada por uma Medula Óssea (MO) displásica, ineficiência no processo de hematopoese, apoptose intramedular aumentada e citopenias no sangue periférico. Cerca de 10% a 40% dos pacientes têm propensão para transformação leucêmica principalmente para Leucemia Mieloide Aguda (LMA). Na faixa pediátrica a SMD é considerada rara, representando de 2% a 4% de todas as neoplasias hematológicas pediátricas. A SMD pediátrica (SMD-p) apresenta uma etiopatogenia distinta dos pacientes adultos. A SMD é considerada um modelo ideal para estudos epigenéticos, contudo, pouco se sabe sobre o papel dessas alterações no grupo pediátrico. Dentro das alterações epigenéticas, a metilação têm sido a melhor compreendida, principalmente no contexto das regiões promotoras de genes associados ao desenvolvimento, proliferação e controle do ciclo celular. O gene do fator de crescimento de fibroblasto 17 (FGF17) faz parte da grande família dos fatores de crescimento que desempenham papéis importantes na progressão de tumores sólidos. Entretanto, seu papel nas neoplasias hematológicas ainda precisa ser elucidado. Até o presente momento, não há nenhum estudo que tenha avaliado o perfil de metilação do corpo gênico de FGF17 e seu possível papel na SMD-p. Objetivo: Analisar o perfil de metilação do corpo gênico de FGF17 em pacientes com SMD-p e correlacionar com as características citogenéticas e clínicas. Metodologia: A análise citogenética foi realizada em 58 amostras de MO de pacientes com SMD-p através do bandeamento G. A análise do perfil de metilação do corpo gênico de FGF17 foi realizada por pirosequenciamento e como controle utilizamos 9 amostras de MO de doadores pediátricos para o transplante. Resultados: A Citopenia Refratária da Infância (CRI) foi o subtipo mais frequente (62,1%). Alterações citogenéticas foram observadas em 58,6% dos pacientes. O pirosequenciamento dos 4 sítios CpGs do corpo gênico de FGF17 mostrou que os pacientes apresentavam um perfil de metilação heterogêneo em relação aos controles. A hipermetilação foi observada associada com cariótipo anormal em relação aos controles (p = 0,04). Pacientes com SMD/LMA apresentaram hipermetilação de FGF17 em relação aos controles (p = 0,01) e aos pacientes com CRI (p = 0,02). A evolução da SMDp para LMA foi observada em 45% (26/58) e esteve associada a hipermetilação do gene FGF17 (p = 0,03). Discussão: Estudos vêm apontando a importância da metilação do DNA fora da região promotora. Demostrando que a metilação no corpo gênico pode afetar a progressão do tumor levando a um aumento de expressão dos genes. Nosso estudo foi o pioneiro ao verificar o perfil de metilação no corpo gênico de FGF17 em pacientes com SMD-p. O FGF17 atua como regulador de vias como PI3K-Akt, MAPK, Ras, Rap1 e mTOR, a ativação dessas vias ativação contribui para inibição da apoptose, progressão do ciclo celular e proliferação celular. O perfil de metilação do gene FGF17 em SMD-p foi heterogêneo, contudo, pacientes com subtipos mais avançados, alterações citogenéticas e que evoluíram para LMA apresentam hipermetiladas. Dessa forma, nossos resultados sugerem que a hipermetilação do corpo gênico de FGF17 pode estar contribuindo para o prognostico desfavorável e evolução da SMD-p. Conclusão: A hipermetilação do corpo gênico de FGF17 está associada alterações citogenéticas, subtipos avançados e evolução para LMA.

Introdução/objetivos: A doação de plaquetas por aférese (plaquetaférese) é um procedimento que proporciona a retirada seletiva de plaquetas de um doador. Sua utilização é de grande importância em pacientes com algumas condições clínicas específicas. Este estudo teve como objetivo descrever o perfil clínico- epidemiológico dos doadores de plaquetaférese do Hemocentro Coordenador do Acre durante um ano, analisando dados prévios à doação e as principais intercorrências relacionadas ao procedimento. Material e métodos: Estudo descritivo e retrospectivo com dados secundários do hemocentro coordenador do Acre, no período de 01/07/2022 a 31/07/2023. Foram incluídas na análise as variáveis: sexo,faixa etária, estado civil, cor autodeclarada, grau de escolaridade, procedência, peso, altura, temperatura axilar, hematócrito e contagem de plaquetas, tempo de procedimento, volume coletado, rendimento plaquetário e intercorrências na coleta. Foram calculadas médias das variáveis contínuas e proporções das categóricas. Dados tabulados e analisados no programa Microsoft Excel. Resultados: No período do estudo foram registrados 124 procedimentos de plaquetaférese em 65 doadores com 110 procedimentos (88,7%) bem sucedidos e 14 (11,3%) não concluídos por intercorrências durante o procedimento. Do total de doadores, todos eram do sexo masculino e a maior parte apresentava umbom nível de escolaridade ‒ 3º grau completo (90%); 41 doadores (63%) estavam na faixa etária de 31 a 50 anos, 18 doadores (27%) estavam na faixa etária de 21 a 30 anos e 6 (10%) tinham entre 51 e 60 anos; 95,3% brancos e 4,7% não brancos; 44,6% solteiros e 55,4% não solteiros. A maior parte dos doadores era residente em Rio Branco (67%), com 20% procedentes de outros municípios acreanos e 13% de outros estados. Nos procedimentos realizados, os doadores apresentaram média de 90,58 kg de peso, 174,19 cm de altura e 36°C de temperatura axilar. A média do hematócrito pré-procedimento foi 43% (hemoglobina média de 14 g/dL) e plaquetometria média de 250.000 mm3. Os procedimentos duraram em média 74 minutos, em 6 ciclos. Em média, o volume de plaquetas coletado foi de 381 mL com rendimento plaquetário médio de 4,0×1011. Foram registradas 14 intercorrências: 5 (35%) por problemas técnicos do equipamento, 2 (14%) por problemas com os kits e 7 (51%) intercorrências clínicas, principalmente palidez cutâneo mucosa, parestesia ou hipotensão arterial. Discussão: A doação de plaquetas por aférese é um procedimento de grande importância em hemoterapia, pois, além de minimizar a exposição a múltiplos doadores, também diminui o risco de outras intercorrências transfusionais como transmissão de doenças infecciosas. Para a doação é necessário, dentre outros critérios, que o doador possua um acesso venoso calibroso, o que pode explicar a predominância masculina nesse estudo. O bom nível de escolaridade pode estar associado a uma melhor compreensão pelo doador, enquanto cidadão, em relação às demandas sociais. As medidas antropométricas e laboratoriais mostraram-se razoáveis, como era de se esperar, uma vez que estamos lidando comdoadores de sangue. A maior parte das intercorrências foi clínica e maisestudos são necessários a fim de avaliar melhor esse dado. Não foram encontrados estudos abrangentes sobre o perfil dos doadores de plaquetas por aférese, tanto em âmbito nacional quanto internacional. Alguns estudos locais foram conduzidos e seus resultados apresentaram notável congruência com as conclusões deste estudo. Conclusão: A doação de plaquetas por aférese no hemocentro coordenador do estado ocorre de forma satisfatória. Ressalta-se a importância da atenção contínua para o monitoramento de eventuais complicações.

Introdução/objetivos: O antígeno Duffy, conhecido como ACKR1 (Atypical Chemokine Receptor 1), é uma glicoproteína de membrana que atua como um receptor para quimiocinas pró-inflamatórias. A sua expressão na superfície da hemácia se dá pela codificação dos alelos FY*01 e FY*02, definindo assim os fenótipos Fy(a+b-), Fy(a-b+) e Fy(a+b+). Quando há uma mutação pontual (c.1-67T>C) no alelo FY*B em homozigose, é formado o fenótipo Fy(a-b-), representado pelo genótipo FY*02N.01, e conhecido como mutação em GATA-1. Nesse caso, a expressão do antígeno Fyb na superfície da hemácia é silenciada e pode desencadear uma resposta inflamatória exacerbada, uma vez que o receptor que auxilia na modulação das quimiocinas não está presente na circulação sanguínea. Em pacientes falciformes essa mutação tem ainda mais importância, uma vez que se tratam de indivíduos cronicamente inflamados e geralmente com histórico de transfusão. Dessa maneira, o objetivo do trabalho foi identificar o perfil do sistema de grupo sanguíneo Duffy em pacientes falciformes atendidos pelo Centro de Hematologia e Hemoterapia do Paraná (HEMEPAR) na região contemplada pelo Hemocentro coordenador de Curitiba. Material e métodos: Os dados demográficos (idade) e clínicos (fenotipagem e número de bolsas transfundidas) foram coletados a partir do cadastro dos indivíduos na rede do HEMEPAR. Os indivíduos foram divididos em 4 grupos de acordo com o fenótipo, e os dados foram analisados utilizando o teste de Kruskal-Wallis. Foram incluídos no estudo os indivíduos HbSS e com idade maior ou igual a 18 anos completos até a data da coleta dos dados. Resultados: Foram analisados os dados de 107 indivíduos, sendo observada uma frequência antigênica de 53 indivíduos (49,5%) para Fya e 64 indivíduos (59,8%) para Fyb, valores próximos aos descritos por Maheshwari e Killeen (2023) para os brasileiros. Em relação aos grupos fenotípicos, foram identificados 25 indivíduos Fy(a+b+), 39 indivíduos Fy(a-b+), 28 indivíduos Fy(a+b-) e 15 indivíduos Fy(a-b-). O número de bolsas transfundidas não apresentou diferença estatística significativa entre os grupos fenotípicos analisados. Discussão: De acordo com os grupos Fy(a+b-) e Fy(a-b-), observou-se que 40,2% dos indivíduos analisados podem apresentar a mutação c.1-67T>C em hetero ou homozigose, respectivamente, indicando a importância da pesquisa pela mutação no indivíduo falciforme. Além disso, identificou-se a importância de, além do perfil transfusional, levantar parâmetros clínicos relacionados à inflamação, como a presença de crises dolorosas e o uso de hidroxiureia pelos pacientes, fatores que podem influenciar nas características transfusionais desses indivíduos. Conclusão: Os resultados obtidos demonstram a prevalência dos antígenos Duffy em indivíduos falciformes no Paraná, e a importância da fenotipagem e genotipagem do grupo sanguíneo Duffy nos pacientes falciformes brasileiros, uma vez que grande parte desses indivíduos podem apresentar a mutação em GATA-1 e, consequentemente, apresentar quadros inflamatórios mais exacerbados. Apoio Financeiro: CAPES.

Introdução/objetivos: A determinação do perfil de antígenos eritrocitários em doadores de sangue e pacientes que recebem transfusão sanguínea é importante na prevenção da aloimunização. Para a detecção desses antígenos é realizada a técnica convencional de fenotipagem eritrocitária. Quando essa técnica apresenta limitações, seja devido a expressão fraca ou alterada dos antígenos, ou em paciente politransfundido, é necessário a implantação de técnicas de amplificação de ácidos nucleicos. O objetivo deste estudo foi comparar as técnicas de fenotipagem e genotipagem eritrocitária realizadas em voluntários da Universidade Estadual de Ponta Grossa. Materiais e métodos: Foi realizado um estudo observacional transversal com indivíduos da comunidade universitária. Foram realizadas 37 fenotipagens, pela metodologia de aglutinação em coluna-gel-teste, para antígenos dos sistemas Rh e Kell. Foram selecionados 4 indivíduos, os quais possuíam os fenótipos de relevância a serem estudados, sendo eles: Rhccee, RhCCee, K-k+, K+k+. Posteriormente, foi realizada a extração e quantificação de DNA seguido de amplificação por meio de PCR alelo específico (PCR-AS), e revelação por eletroforese em gel para os antígenos do sistema Rh (C, c, E, e) e do sistema Kell (K, k). Resultados: A distribuiçãodos fenótipos do sistema Rh e Kell encontrados neste estudo foram: 2 (50%) indivíduos RhCCee, 2 (50%) indivíduos Rhccee, 3 (75%) indivíduos K-k+ e 1 (25%) indivíduo K+k+. A genotipagem realizada por PCRAS apresentou os resultados concordantes ao da fenotipagem. Discussão: A PCR convencional realizada neste estudo gerou resultados 100% condizentes com a fenotipagem anteriormente realizada. A PCR convencional é um método qualitativo, e o produto dessa reação é visualizado por meio da eletroforese, técnica usada para separar fragmentos de DNA com base no tamanho e carga, sendo revelado em luz UV. Deve ser ressaltado que como alternativa para PCR convencional existe a PCR em tempo real que permite a monitorização em tempo real da amplificação, que é baseado na detecção e quantificação de um composto fluorescente que aumenta proporcionalmente a quantidade de material genético que está sendo amplificado. A PCR em tempo real vem sendo muito utilizada por ser quantitativa, precisa, sensível, rápida e com maior reprodutibilidade. Além disso, essa técnica não possui processamento pós-PCR, minimizando as chances de contaminação cruzada, mas tendo como desvantagem o alto custo do equipamento. Realizar a genotipagem de maneira precisa dos principais antígenos eritrocitários garante segurança transfusional, tendo em vista o potencial que a imunogenicidade tem para acarretar reações transfusionais hemolíticas e doença hemolítica perinatal. Conclusão: Os resultados do presente estudo demonstram a equivalência entre a fenotipagem e a genotipagem, realizada pela PCR convencional, nos indivíduos avaliados. No entanto, realizaremos estudos futuros com maior número de amostras e antígenos eritrocitários para que determinemos a especificidade, sensibilidade e reprodutibilidade dos testes. Além disso, analisaremos métodos de genotipagem alternativos, como a PCR em tempo real em equipamento QuantStudio 5 (ThermoFisher) recentemente adquirido, que permitirá um procedimento mais rápido, preciso e seguro, visando a aplicação de novos métodos de diagnóstico na rotina imuno-hematológica.

Introdução/objetivos: O Sistema Diego (ISBT nº 010) é composto por 23 antígenos, destacando-se o Diego A e o Diego B. Esses antígenos participam da manutenção da integridade do citoesqueleto do eritrócito e do transporte de alguns ânions. O objetivo deste estudo é quantificar a prevalência do anticorpo contra o antígeno Diego A (Símbolo Diª ISBT DI1) entre os receptores de hemocomponentes, identificados nos painéis de identificação de anticorpos realizados no hemocentro de Rio Branco. Material e métodos: Foi realizado um estudo observacional retrospectivo, com dados oriundos dos resultados de painéis de identificação de anticorpos de pacientes receptores de hemocomponentes, coletados no período de 01/01/2010 a 31/07/2023, no hemocentro coordenador do Acre, responsável pela realização de todos os estudos imunohematológicos do estado. Resultados: No período do estudo, foram realizadas 426 pesquisas de anticorpos em pacientes, identificando o anticorpo anti-Diª em 20 casos (4,7%). No período de 01/01/2010 a 31/12/2017 (8 anos), foram realizados 149 painéis, e o anti-Diªfoi detectado em 4 deles (2,7%). Já no período subsequente, de 01/01/2018 a 31/07/2023 (5 anos e 7 meses), foram testados 277 pacientes, e 16 deles (5,8%) foram positivos para o anti-Diª. Discussão: Ao contrário do antígeno Dib, que tem alta frequência, o Diª é pouco encontrado na população europeia (0,0002%) e nos caucasianos (0,01%), mas é relativamente frequente nos japoneses (4,6%) e coreanos (6,1%) e em indígenas mexicanos (20,4%). No Brasil, estudos relatam frequência variada, sendo de 3% em alguns estados até 46% em alguns povos indígenas. O Norte é a região brasileira com a maior população indígena e no estado do Pará foi relatada uma frequência de 9,7% do Diª. Não há dados descritos quanto à frequência do antígeno no Acre. No hemocentro do estado, em 12 anos e 7 meses de coleta, o anticorpo anti-Diªfoi encontrado em 4,7% das pesquisas realizadas. O surgimento do anticorpo em pacientes evidencia a presença do antígeno na população. Entre 01/01/2018 e 31/07/2023, houve um aumento no número de testes realizados, resultando em mais que o dobro da frequência do anti-Diª em comparação ao período anterior, mesmo sendo um período menor. Este aumento absoluto no número de pesquisas pode ser devido ao investimento institucional no laboratório de imunohematologia clínica, proporcionando um espaço amostral mais representativo da população, que inclui mais de 2% de povos indígenas em relação a população total do estado, justificando o grande aumento percentual da detecção do anticorpo. O aumento da incidência do anticorpo também pode ser associado a uma possível crescente aloimunização na população. Conclusão: A presença do anti-Diª em pacientes receptores de sangue no Hemocentro de Rio Branco denota a presença do antígeno Diª na população. A alta prevalência descrita em povos indígenas destaca a relevância dessa pesquisa no Acre. Quanto mais frequente o antígeno, maior a probabilidade de exposição, resultando em uma maior prevalência do anticorpo, que pode repercutir em maior prevalência de doenças hemolíticas perinatais e de reações transfusionais imediatas. Para esclarecer mais a respeito desse anticorpo e sua relevância para a população acreana, são necessários mais estudos, a fim de traçar o perfil imunofenotípico eritrocitário na população.

O Hemocentro Coordenador do Paraná possui equipe de triadores composta por médicos e enfermeiros qualificados, capacitados e conhecedores das regras previstas na legislação vigente. O grupo se reúne a cada seis meses, presencialmente e on-line , com o intuito de discutir ocorrências de inaptidões não normatizadas na legislação ministerial, atualizar o Manual de Triagem Clínica e adequar protocolos às determinações de auditorias internas e externas. A equipe conta com assessoria de convidados especialistas de áreas de conhecimento como Endocrinologia, Odontologia, Infectologia e outros para esclarecimentos de eventos pontuais. Foram temas recentemente discutidos e elucidados: cirurgia bariátrica, uso de testosterona em candidatos trans, enxerto ósseo bovino e contato domiciliar nas Hepatites B e C. Os temas a serem discutidos são enviados previamente à equipe no grupo de WhatsApp “Apoio Triadores Hemepar”. No caso de não haver consenso, ou persistirem dúvidas, a demanda é enviada à responsável técnica institucional, que compõe a equipe, para esclarecimento posterior ou inclusão na pauta da reunião seguinte. Com as normatizações institucionais publicadas no Manual de Triagem Clínica, as Ouvidorias com reclamações geradas por doadores diminuíram consideravelmente, promovendo melhora nos indicadores institucionais. Os critérios gerais para a doação de sangue aprovados pela equipe de triadores são disponibilizados para as unidades da hemorrede paranaense no site da Secretaria de Estado da Saúde, no link https://www.saude.pr.gov.br/Pagina/Doacao-de-Sangue . Nesse momento, os candidatos à doação têm a oportunidade de conhecer alguns dos principais critérios com antecedência, evitando deslocamentos que geram custo e frustração, desnecessariamente.

Introdução/objetivos: O procedimento de eritrocitaférese possibilita a coleta dupla de concentrados de hemácias de um mesmo doador. Assim, este procedimento propicia otimização de estoque de hemocomponentes, minimiza o risco de aloimunização, além de ser de extrema importância quando se trata de doador com fenótipo raro. Este estudo teve como objetivo descrever a experiência do hemocentro coordenador do Acre com a implantação do procedimento na rotina de coletas de sangue da instituição e descrever o perfil clínico epidemiológico dos doadores submetidos ao procedimento. Material e métodos: Trabalho observacional, descritivo, com dados obtidos dos registros de procedimentos de coleta de hemácias por aférese (eritrocitaférese) que ocorreram no hemocentro coordenador do Acre, no período de 01/04/2023 até 31/07/2023. Foram incluídas as variáveis sexo, cor da pele, idade, e dosagem da hemoglobina dos doadores. Resultados: Até o final deste estudo, foram realizados 5 procedimentos de eritrocitaférese no Hemocentro do Acre. Dos 5 doadores, 4 eram homens (80%) e 1 mulher (20%); todos brancos autodeclarados (100%), com média de idade de 37 anos. No hemograma que é coletado previamente ao procedimento, a média de medida da hemoglobina foi de 15,32 g/dL (mínima 14,2 g/dL, máxima 16,7 g/dL), observando-se que, no serviço, ter dosagem de hemoglobina superior 14 g/dL é condição obrigatória para ser doador de hemácias por aférese, assim como ser um doador regular. Os procedimentos duraram em média 36 minutos, variando de 35 a 37 minutos. O protocolo atual do serviço permite doação de hemácias por aférese a cada 120 dias para homens e 180 dias para mulheres. Demais condições não diferem da rotina de coleta de sangue total. Não houve intercorrências durante os procedimentos. Discussão: Os procedimentos de eritrocitaférese realizados no hemocentro coordenador do Acre ocorreram com sucesso, alcançando o objetivo final que foi a otimização do estoque, com concentrados de hemácias já deleucocitados. A implantação deste procedimento no hemocentro do Acre se mostrou de extrema importância para pacientes com necessidades transfusionais crônicas, aloimunizados ou não, como os portadores de hemoglobinopatias e de outras doenças oncohematológicas. Não há na literatura relatos de experiências com a eritrocitaférese e sobre sua eficácia nos serviços em que foi estabelecida, principalmente no Brasil. Conclusão: O procedimento de eritrocitaférese foi eficaz no que se propõe, com potencial de reduzir a exposição a diferentes doadores. Entretanto, análises posteriores são necessárias para avaliação de um maior quantitativo de procedimentos.

Introdução/objetivos: As transfusões de hemocomponentes são indispensáveis na terapêutica de determinadas patologias, mas exigem vigilância rigorosa devido aos riscos envolvidos. Assim, a utilização de protocolos de monitoramento transfusional são valiosos para incentivar práticas transfusionais seguras e prevenir eventos adversos. Este estudo buscou analisar o impacto da implantação de um protocolo de monitoramento de transfusões no Hospital de Santa Juliana. Material e métodos: Análise descritiva e retrospectiva dos dados secundários extraídos dos protocolos de acompanhamento transfusional do Hospital de Santa Juliana, de 01/08/2022, data de implantação do protocolo, a 31/05/2023. Estes protocolos contêm todas as informações de registro obrigatório das transfusões. Os protocolos foram preenchidos pela equipe de enfermagem do início até 24 horas após o término da transfusão. Resultados: No período houve 1112 transfusões no Hospital Santa Juliana, sendo 58% de concentrados de hemácias, 20% de concentrados de plaquetas, 17% de plasma fresco congelado e 5% de crioprecipitado. No mês de implantação houve baixa adesão ao preenchimento, que foi melhorando nos meses seguintes, embora se alcançando o máximo de 30,25% de protocolos plenamente preenchidos. Observou-se melhora dos registros transfusionais com a utilização do protocolo. De todas as transfusões, 45% tiveram os sinais vitais registrados durante todo o procedimento, o que já ocorria de rotina, mas também após, no protocolo, permitindo à equipe uma perfeita visualização evolutiva de todo o período. Também foram observadas melhorias nos preenchimentos das requisições transfusionais. Foram registradas duas reações transfusionais no período. Discussão: Os resultados evidenciam a relevância da implantação e adesão a um protocolo de acompanhamento transfusional em um ambiente hospitalar. A menor adesão ao preenchimento nos primeiros meses pode ser devida a uma fase de adaptação de toda equipe à nova rotina. Embora os registros transfusionais já fossem feitos adequadamente, os registros pós transfusionais, que no protocolo foram feitos também por 24 horas após cada transfusão, facilitam a conscientização da equipe de que os riscos transfusionais não se encerram com o término da transfusão. Desta forma, a vigilância transfusional foi maior. No período anterior à implantação do protocolo, não houve registro de reações transfusionais nos últimos 24meses, permitindo concluir que o registro de 2 reações foi um resultado muito positivo. Treinamento contínuo e conscientização sobre a importância do adequado preenchimento do protocolo são indispensáveis e podem influenciar a adesão a longo prazo. Deve-se objetivar 100% de protocolos preenchidos. Os bons resultados devem ser divulgados na instituição para fortalecer a conscientização. Outras estratégias de vigilância transfusional estão sendo desenvolvidas na unidade, para aumentar a segurança dos pacientes. Conclusão:: Os resultados obtidos foram encorajadores, mas é necessário aprimorar a integração do protocolode acompanhamento de transfusões na rotina hospitalar. A elaboração de estratégias de treinamento, monitoramento e aprimoramento contínuo da prática clínica transfusional, implicará em melhores resultados para os pacientes submetidos a transfusões sanguíneas.

Introdução/objetivos: A Sífilis, infecção sexualmente transmissível causada pela bactéria Treponema pallidum, apesar de ser uma doença de notificação compulsória desde 2010, ainda sofre com as subnotificações, por muitas vezes ser assintomática e não ser corretamente diagnosticada. Os rigorosos protocolos de triagem e testagem dos serviços de hemoterapia desempenham papel fundamental para a prevenção de novas infecções por via transfusional. Este estudo teve como objetivo descrever a prevalência de soropositividade para sífilis em doadores de sangue e o perfil epidemiológico destes doadores no Estado do Acre. Material e métodos: Foi realizado um estudo do tipo observacional retrospectivo, com dados secundários obtidos do sistema de informação utilizado no Centro de Hematologia e Hemoterapia do Acre (Hemoacre), das doações ocorridas no período de 01/01/2019 a 30/06/2023. Foram incluídas as variáveis idade, cor autodeclarada e sexo, foi também realizada a análise descritiva dos dados. Resultados: Foram obtidos dados das 53.174 doações de sangue do período do estudo. As doações foram testadas para sífilis pelos métodos de quimioluminescência (CMIA), teste treponêmico até novembro de 2022, ou VDRL, teste não treponêmico, a partir de dezembro deste mesmo ano. Foram registrados 1.009 (1,9% do total) casos, sendo 1000 (99%) positivos e 9 (1%) inconclusivos. Dos 1000 casos positivos, 180 (18%) foram reagentes pelo método de CMIA e 820 (82%) por VDRL; todos os casos inconclusivos foram por CMIA. A média de idade dos doadores inaptos por este marcador foi de 32 anos, com 40,64% do sexo feminino e 59,36% do sexo masculino. A maioria dos doadores (98,6%) se autodeclarou de cor branca. A análise anual das prevalências dos casos foi a seguinte: em 2019 (1,54%), 2020 (1,76%), 2021 (2,06%), 2022 (1,80%) e em 2023 (2,54%). Discussão: Conforme os dados do Boletim Epidemiológico de Sífilis de 2021 divulgado pelo Ministério da Saúde, foram notificados 205 mil novos casos no ano de 2020, demonstrando um aumento significativo em relação aos anos anteriores. Segundo os dados obtidos neste estudo, pode-se observar um aumento na prevalência de reatividade para sífilis no Hemocentro de Rio Branco nos últimos anos, sendo mais expressivo nos anos de 2021, com prevalência de 2,06%, e 2023, com prevalência de 2,54%. O perfil epidemiológico dos doadores inaptos por este marcador (jovens, brancos e do sexo masculino) seguiu resultados obtidos em pesquisas da região Sul onde a prevalência também foi mais expressiva em adultos jovens, porém, em sua maioria, mulheres. A metodologia de quimioluminescência foi recentemente adotada para a análise da sorologia para Sífilis no HEMOACRE, substituindo o método VDRL no mês de dezembro de 2022. A nova metodologia deve ser considerada ao analisar o aumento de positividade para Sífilis no último ano, dada a maior especificidade do teste treponêmico. Este achado também foi observado em uma pesquisa que analisou a mesma troca de metodologia em um hemocentro no estado do Pará. Conclusão: Monitorar a prevalência da sífilis em doadores de sangue é importante para a elaboração de políticas para a garantia da qualidade dos hemocomponentes doados. Mais estudos são necessários para a avaliação da tendência de aumento neste marcador, assim como comparar as duas metodologias no serviço.

Introdução/objetivos: As hepatites virais do tipo B e C são doenças causadas pelos DNA-vírus da família Hepadnaviridae, respectivamente, o HBV (Vírus da hepatite B) e o HCV (Vírus da hepatite C) As doenças têm importante impacto nas regiões Norte e Nordeste do Brasil, sendo a região Amazônica a área mais endêmica do país. O objetivo deste trabalho foi descrever a prevalência de positividade para as hepatites do tipo B e C em doadores de sangue e o perfil epidemiológico destes doadores no Estado do Acre. Material e métodos: Foi realizado um estudo do tipo observacional retrospectivo, com dados secundários obtidos do sistema de informação utilizado no Centro de Hematologia e Hemoterapia do Acre (Hemoacre), das doações ocorridas no período de 01/01/2020 a 30/06/2023. Foram analisados os resultados dos exames sorológicos por quimioluminescência para hepatites B (HBsAg e Anti HBc) e C (anti HCV). Foram incluídas também as variáveis idade, cor autodeclarada e sexo. Foi realizada a análise descritiva dos dados. Resultados: Foram obtidos dados das 41.152 mil doações de sangue do período do estudo. Para a hepatite B, foram registrados 1367 (3,3%) casos, sendo 1301 (95,2%) positivos e 66 (4,8%) inconclusivos. A média de idade dos doadores inaptos por este marcador foi de 41 anos, com 39% do sexo feminino e 61% do sexo masculino. A maioria dos doadores (96%) se autodeclarou de cor branca. Com relação à hepatite C, foram registrados 135 casos (0,33%), sendo 92 (68,1%) positivos e 43 (31,8%) inconclusivos. A média de idade dos doadores inaptos por HCV foi de 35,59 anos; destes doadores, 28,26% eram mulheres e 71,74% homens; a maior parte dos doadores inaptos por HCV se autodeclarou de cor branca. A análise anual das prevalências dos casos foi a seguinte: para HBV, em 2020 (1,63%), 2021(1,56%), 2022 (1,61%) e em 2023(1,46%); para HCV em 2020 (0,24%), 2021(0,21%), 2022(0,25%) e em 2023(0,21%). Discussão: A Organização Mundial da Saúde estima que cerca de 257 milhões de pessoas sejam portadoras crônicas da hepatite B e mais de 71 milhões sejam portadoras da hepatite C no mundo. As regiões Norte e Nordeste do Brasil representam 55,4% dos casos notificados de hepatites virais no país, sendo de grande importância epidemiológica para a região amazônica. As prevalências para HBV e HCV em doadores de sangue do estado do Acre no período do estudo, assim como o perfil epidemiológico dos doadores inaptos por estes marcadores, estão de acordo com os dados já descritos na literatura. Estudos conduzidos nas regiões Sudeste e Centro Oeste do Brasil mostraram resultados semelhantes aos encontrados nesta pesquisa. Outras análises são necessárias para a avaliação da tendência de positividade destes marcadores nesta população. Conclusão: Conhecer a prevalência das hepatites B e C em doadores de sangue, assim como as características epidemiológicas destes doadores, é importante para a elaboração de políticas regionais específicas e adequadas para a garantia da qualidade dos hemocomponentes doados.

Introdução/objetivos: A legislação brasileira determina a realização de testes laboratoriais para identificar marcadores de doença de Chagas, entre outras patologias, em doadores de sangue dos serviços de hemoterapia. Este estudo teve como objetivo descrever a soroprevalência de doença de Chagas em doadores de sangue e descrever o perfil sociodemográfico dos candidatos inaptos sorológicos por este marcador no hemocentro coordenador do estado do Acre. Material e métodos: Estudo descritivo, retrospectivo com dados referentes aos resultados sorológicos para doença de Chagas, realizados por quimioluminescência, das doações de sangue ocorridas no hemocentro coordenador do Acre, no período de 01/01/2014 a 30/06/2023. Foram incluídas também as variáveis sociodemográficas: sexo, cor da pele (autodeclarada), idade dos candidatos e dados referentes a soroconversão. Resultados: No período do estudo, houve 110.157 doações de sangue no estado do Acre, de um total de 41.988 doadores. Dessas, houve um total de 121 (0,11%) positividades sorológicas para doença de Chagas, sendo 86 resultados reagentes (0,08%) e 35 resultados inconclusivos (0,03%). Dos 121 casos positivos, 72 eram do sexo masculino (59,5%), 49 do sexo feminino (40,5%), 118 eram brancos (97,52%) e 3 não brancos (2,48%). A média de idade dos candidatos na data da doação foi de 35 anos, sendo identificados 35 casos de soroconversão (28,93%) e 86 casos de positividade na primeira doação de sangue (71,07%). A prevalência anual de positividade para doença de Chagas se apresentou da seguinte forma: 2014 (0,10%), 2015 (0,11%), 2016 (0,08%), 2017 (0,05%), 2018 (0,05%), 2019 (0,04%), 2020 (0,08%), 2021 (0,05%), 2022 (0,22%) e 2023 (0,41%). Discussão: A evolução silenciosa e negligenciada em infectados com Trypanosoma cruzi justifica a importância da triagem e da análise dos dados em doadores de sangue no Brasil. Estima-se que a doença afete de 6 a 7 milhões de pessoas em todo o mundo, com grande parte em território brasileiro (até 4,6 milhões), mesmo com a sabida subnotificação de casos. Dados recentes mostraram uma soroprevalência por doença de Chagas de 0,11% em doadores de um hemocentro do Norte, 0,23% de um Hemocentro do Nordeste e 0,08% de descarte por doença de Chagas no Centro-Oeste. Não há dados relatados na literatura sobre o estado do Acre. Observa-se, nos últimos anos avaliados nesta pesquisa, um aumento na prevalência de positividade para Doença de Chagas, em especial nos anos 2022 e 2023 (este, em curso). Estudos adicionais são relevantes para compreender o aumento desta prevalência. Conclusão: Conhecer o perfil do doador e as características da região é importante para garantir segurança transfusional, assim como guiar políticas públicas relacionadas à doença de Chagas.

Skeletal stem and progenitor cells are responsible for bone maintenance and regeneration. Recently, a more specific set of phenotypic markers was described to identify the multipotential stem cell population (SSC, PDPN+ CD146− CD164+ CD73+), which gives rise to a PDPN+ CD146+ Bone, Cartilage and Stromal Progenitor (BCSP), which in turn originates a PDPN− CD146+ osteoprogenitor (OP) or a PDPN+ CD146− chondroprogenitor (CP). However, little is known about the frequency of these cell populations in bones of distinct anatomical locations, whether these phenotypic markers are stable enough to be used as distinctive markers during in vitro expansion, and whether these populations differ in osteogenic potential, three relevant questions for the development of characterized and effective Advanced Medicinal Therapeutic Cellular Products (AMTCPs) for application in innovative therapies for bone diseases. Therefore, the objective of this study was to investigate the frequency of SSCs and its progeny in the bone marrow collected from different bone sources and the stability of their immunophenotypic profile following in vitro expansion by FACS, their osteogenic differentiation potential in vitro, and how these profiles correlate with that of unfractionated Bone Marrow Stromal Cells (BMSCs). Following approval (nº 21768719.0.0000.5257), human hip (n = 19) and humerus (n = 5) samples were collected. In hip samples, SSCs accounted for 0.13% ± 0,20% of total nucleated non-hematopoietic cells, BCSPs were 4.78% ± 10.47%, CPs were 7.38% ± 14.12%, and OPs were 9.94% ± 12.20%. In humerus, SSCs and CPs were only detected in one sample (0,2% e 12%, respectively). BCSPs were 0.3% ± 0.15% and a higher frequency of OPs (25.05% ± 5.30%, p = 0.04) was detected in comparison to hip samples. Following PDPN− CD146+ (OP) and PDPN+ CD146− (SSCs and CPs) sorting, it was observed that their immunophenotypic profiles converged during expansion to PDPN+ CD146+, becoming similar to BMSCs. However, the expanded subpopulations differed in osteogenic capacity, with the PDPN+ CD146− (SSCs and CPs) producing a lower mineralized matrix area revealed by Alizarin Red staining than the BMSCs and OPs. Further in vivo functional assays will be performed to confirm these findings, that may lay the foundation to produce better AMTCPs.

Objetivo: Apresentar o fluxo de atendimento no diagnóstico das lesões orais potencialmente malignas em pacientes com doença do enxerto contra o hospedeiro crônica oral. Materiais e métodos: Foram selecionados dois pacientes do sexo masculino, com diagnóstico de leucemia mieloide crônica (LMC) que foram submetidos ao transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH) alogênico aparentado, com mais de 10 anos de pós transplante e com doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH) crônica tardia em cavidade oral. Os dados clínicos destes pacientes foram coletados nas consultas semestrais de controle pela equipe de odontologia. A consulta odontológica para avaliação da presença de lesões orais compatíveis com DECH crônica contemplou avaliação da coloração, forma, volume e textura da mucosa oral e além dos critérios do consenso do NIH/2015. Resultados: Caso clínico 1: paciente do sexo masculino, 44 anos, com diagnóstico de LMC foi submetido ao TCTH em 19 de junho de 2002. O paciente apresentou lesões liquenoides com características de DECH crônica na cavidade oral em 2003, tratadas com bochecho de dexametasona. As lesões liquenoides em mucosa jugal e lábio inferior aumentaram com o uso de aparelho ortodôntico fixo em 2012 e regrediram parcialmente após a remoção do mesmo, quando se optou por realizar uma biópsia incisional em 2013 (11 anos pós-TCTH), com laudo histopatológico de hiperplasia epitelial sem atipias e hiperceratose. O paciente é mantido em controle semestral, sem alteração das características clínicas das lesões (21 anos pós-TCTH). Caso clínico 2: paciente do sexo masculino, 50 anos, com diagnóstico de LMC foi submetido ao TCTH em 20 de fevereiro de 2008. O paciente apresentou lesões liquenoides com características de DECH crônica na mucosa jugal em 2013 (cinco anos pós-TCTH), tratadas com bochecho de dexametasona que regrediram parcialmente e que permaneceram até o presente momento. Assim como o primeiro relato de caso, este paciente também foi submetido a biópsias que confirmaram o diagnóstico de DECH crônica oral, sendo mantido em controle semestral, sem alteração das características clínicas das lesões (15 anos pós-TCTH). Discussão: Os presentes casos relatam dois pacientes com 15 e 21 anos de pós-TCTH tardio, que foram tratados para DECH crônica da cavidade oral e acompanhados pela odontologia. Após o tratamento não apresentar mais resposta e as lesões não apresentarem sintomatologia dolorosa e nem características de aumento ou progressão, optou-se por cessar as medicações e manter o acompanhamento destes pacientes a cada seis meses. Além disso, foram realizadas biópsias em áreas com características clínicas diferenciadas para controle, com resultados positivos para DECH crônica e para lesões potencialmente malignas. Conclusão: Podemos concluir que é de extrema importância a manutenção do acompanhamento de pacientes no pós-TCTH tardio, em virtude do maior risco do aparecimento de carcinoma de células escamosas secundário que pode ser precedido por lesões potencialmente malignas na cavidade oral. Em um dos casos apresentados o controle semestral foi fundamental para o diagnóstico precoce das lesões potencialmente malignas.

Bone mechanobiology is the study of the physical, biological and mechanical processes that continuously affect the multiscale multicellular system of the bone from the organ to the molecular scale. Current knowledge derives from experimental studies, which are often limited to gathering qualitative data in a cross-sectional manner, up to a restricted number of time points. Moreover, the simultaneous collection of information about 3D bone microarchitecture, cell activity as well as protein distribution and level is still a challenge. In silico models can expand qualitative information with hypothetical quantitative systems, which allow quantification, testing and comparison to existing quantifiable experimental data. An overview of multiscale, multiphysics, agent-based and hybrid techniques and their applications to bone mechanobiology is provided in the present review. The study analysed how mechanical signals, cells and proteins can be modelled in silico to represent bone remodelling and adaptation. Hybrid modelling of bone mechanobiology could combine the methods used in multiscale, multiphysics and agent-based models into a single model, leading to a unified and comprehensive understanding of bone mechanobiology. Numerical simulations of in vivo multicellular systems aided in hypothesis testing of such in silico models. Recently, in silico trials have been used to illustrate the mechanobiology of cells and signalling pathways in clinical biopsies and animal bones, including the effects of drugs on single cells and signalling pathways up to the organ level. This improved understanding may lead to the identification of novel therapies for degenerative diseases such as osteoporosis.

The effects of climate change on at-risk species will depend on how life history processes respond to climate and whether the seasonal timing of local climate changes overlaps with species-specific windows of climate sensitivity. For long-lived, iteroparous species like gopher tortoises Gopherus polyphemus, climate likely has a greater influence on reproduction than on adult survival. Our objective was to estimate the timing, magnitude, and direction of climate-driven effects on gopher tortoise reproductive output using a 25 yr dataset collected in southeastern Georgia, USA, near the northern edge of the species’ range. We assessed the timing of climate effects on reproductive output (both probability of reproduction and clutch size) by fitting models with climate covariates (maximum temperature, precipitation, and temperature range) summarized at all possible time intervals (in 1 mo increments) within the 24 mo period prior to the summer census date. We then fit a final model of reproductive output as a function of the identified climate variables and time windows using a Bayesian mixture model. Probability of reproduction was positively correlated with the prior year’s April-May maximum temperature, and clutch size was positively correlated with the prior year’s June maximum temperature. April-May and June maximum temperatures have increased over the past 3 decades at the study site, which likely led to an increase in clutch size of approximately 1 egg (15% increase over a mean of 6.5 eggs). However, the net effect of climate change on gopher tortoise population dynamics will depend on whether there are opposing or reinforcing climate responses for other demographic rates.

The need for large-scale production of highly accurate simulated event samples for the extensive physics programme of the ATLAS experiment at the Large Hadron Collider motivates the development of new simulation techniques. Building on the recent success of deep learning algorithms, variational autoencoders and generative adversarial networks are investigated for modelling the response of the central region of the ATLAS electromagnetic calorimeter to photons of various energies. The properties of synthesised showers are compared with showers from a full detector simulation using geant4. Both variational autoencoders and generative adversarial networks are capable of quickly simulating electromagnetic showers with correct total energies and stochasticity, though the modelling of some shower shape distributions requires more refinement. This feasibility study demonstrates the potential of using such algorithms for ATLAS fast calorimeter simulation in the future and shows a possible way to complement current simulation techniques.

Present study signifies the thermal analysis of the electroosmotic flow of Williamson fluid in the presence of peristaltic propulsion and asymmetric zeta potential at the walls. The present study addresses this thermal configuration for the very first time. The state of art of study is to explore the heat transport in electroosmotic biological flows with applications like smart sensors, food diagnostics and DNA chips. The governing equations are simplified by using reliable approximation, namely lubrication and Debye-Hückel approximation. The resulting equation is then solved analytically and numerically by the perturbation technique and using Mathematica software. Physical quantities are analyzed under various dominant parameters. The heat transfer coefficient and shear stresses are also determined. Bolus dynamics are also visualized. It is observed from the analysis that an increase in electroosmosis effect leads to an increase in temperature and temperature of Newtonian fluid is more as compared to Non-Newtonian fluid. The presence of asymmetric zeta potential is a key phenomenon in controlling fluid flow in the microchannel. Temperature increases for increased electroosmotic strength me, mobility of the medium β and Brinkman number Br.

The concentration of bone marrow (BM) aspirate (BMA) is increasingly valued for bone and cartilage repair, particularly with the rarity and donor-variability of BM-multipotential stromal cells (BM-MSCs). The present study aimed to assess BM-MSC yield following BM concentration using a fast and compact-sized vertical centrifugation system. BMA concentrate (BMAC) was separated in a 1 min process and collected easily after an automatic discarding of plasma and red blood cells. A significant increase in CD45low CD271high cells per BMAC volume (measured using flow-cytometry) was noted (4-fold, p = 0.0001). Additionally, the vertical centrifugation system helped to enrich colony numbers (assessed by CFU-F assays) in BMAC comparably with conventional centrifugation systems, BioCUE™ and SmartPReP-2® (4.3-fold, 4.6-fold and 3-fold, respectively). Next, a functional assessment of BM-MSCs processed by vertical centrifugation was performed, and MSC viability and proliferation were not affected. Also, these BM-MSCs showed similar alkaline phosphatase and calcium levels to those of BMA-MSCs when osteogenically induced. Furthermore, glycosaminoglycans and Nile red levels in addition to the gene expression assays confirmed that there was no significant change in chondrogenic or adipogenic abilities between BMA-MSCs and BMAC-MSCs. The expression levels of selected angiogenic and immunomodulatory mediators were also similar between the two groups. Collectively, the vertical centrifugation system helped to enrich BM-MSCs effectively, while maintaining cell viability and functions. Thus, such a vertical centrifugation system for BM concentration can be valuable for various regenerative therapies.

Los micro-organismos que hasta ahora han sido reconocidos como agentes exitantes de fermentaciones y putrefacciones, ó de enfermedades, pertenecen casi enteramente á los hongos inferiores.

Introduction: T-cell prolymphocytic leukemia (T-PLL) is a rare T-cell leukemia, accounting for approximately 2% of lymphocytic leukemia cases in adults over 30 years of age. It has an aggressive clinical course and poor prognosis, in addition to a low response to conventional chemotherapy and a short survival time. This disease is characterized by post-thymic lymphocyte proliferation with small to regular size. The cells have weak CD3 expression and CD4 expression on the cell membrane occurs in over half of the cases. Co-expression of CD4 and CD8 occurs in about 25% of cases. A smaller proportion of cases have cells with only CD8 expression on the cell membrane. The main feature is severe leukosis in peripheral blood, but involvement of bone marrow, lymph nodes, liver, spleen and skin are not uncommon. Case report: Previously healthy 57-year-old woman presenting with abdominal pain and distension, weight loss, asthenia, and decreased general condition for 2 months. Physical examination revealed splenomegaly (19 cm RCE) and hepatomegaly (18 cm RCD), generalized lymphadenopathies of no more than 2 cm. CBC with Hb 7.5 g/dL, large leukocytosis 472 × 109/L with 92% prolymphocytic cells and platelet count was 31 × 109/L. Multiparametric flow cytometric analysis (MFC) in peripheral blood showed a mature T-cell lineage strongly positive for CD3, CD8, CD7 and CD26, negative for CD4, CD45 RA and RO and NK marker isoforms (CD56, CD57, CD94) but positive for cytoplasmic TCL1. TCR rearrangement evaluation showed clonally CD8 T-cells positive for Vβ chain 8. Conventional cytogenetic examination showed complex karyotype with a rare derived chromosome: der(2)t(1;2)(q21;q37), plus iso chromosome 8q, deletion 11q22, structural changes involving chromosomes 14, 13, 17 and several markers. FISH confirmed additional signals in MYC (8q), IGH (14q) and TP53 (17p) genes. The patient treated with chemotherapy (Fluouracil, Cyclophosphamide and Mitoxantrone), with no response. Since she maintained lymphocytosis, lymphadenomegaly and hepatosplenomegaly, she was treated with Alentuzumab (anti-CD52) with a plan to do 12 cycles, but showed progression within 3 months, requiring discontinuation of the medication. The patient was referred for palliative care in May 2021. Conclusion: We report the case of a patient with T prolymphocytic leukemia presenting with an elevated peripheral blood white blood cell count, complex karyotype with a rare derived chromosome, der(2)t(1;2)(q21;q37), aberrant immunophenotype and progressive disease despite treatment with alemtuzumab.

BackgroundWashington, DC, and sub-Saharan Africa are both affected by generalized HIV epidemics. However, care for persons living with HIV (PLWH) and clinical outcomes may differ in these geographically and culturally diverse areas. We compared patient and clinical site characteristics among adult persons living with HIV (PLWH) enrolled in two longitudinal HIV cohort studies-the African Cohort Study (AFRICOS) and the DC Cohort.MethodsThe DC Cohort is a clinic-based city-wide longitudinal cohort comprised of PLWH attending 15 HIV clinics in Washington, DC. Patients' socio-demographic characteristics, clinical evaluations, and laboratory data are retrospectively collected from electronic medical records and limited manual chart abstraction. AFRICOS is a prospective observational cohort of PLWH and uninfected volunteers attending 12 select HIV care and treatment facilities in Nigeria, Kenya, Uganda and Tanzania. AFRICOS study participants are a subset of clinic patients who complete protocol-specific visits every 6 months with history and physical examination, questionnaire administration, and blood/sputum collection for ascertainment of HIV outcomes and comorbidities, and neurocognitive and functional assessments. Among participants aged ≥ 18 years, we generated descriptive statistics for demographic and clinical characteristics at enrollment and follow up and compared them using bivariable analyses.ResultsThe study sample included 2,774 AFRICOS and 8,420 DC Cohort participants who enrolled from January 2013 (AFRICOS)/January 2011 (DC Cohort) through March 2018. AFRICOS participants were significantly more likely to be women (58.8% vs 27.1%) and younger (83.3% vs 61.1% aged < 50 years old) and significantly less likely to be MSM (only 0.1% of AFRICOS population reported MSM risk factor) than DC Cohort. Similar rates of current viral suppression (about 75% of both samples), hypertension, hepatitis B coinfection and alcohol use were observed. However, AFRICOS participants had significantly higher rates of CD4ConclusionsWith similar viral suppression outcomes, but many differences between our cohorts noted, the combined sample provides unique opportunities to assess and compare HIV care and treatment outcomes in the U.S. and sub-Saharan Africa. Comparing these two cohorts may inform care and treatment practices and may pave the way for future pathophysiologic analyses.

Objetivo: evaluar la eficacia y seguridad de liraglutida como medicamento coadyuvante para disminuir el índice de masa corporal (IMC) en personas con sobrepeso y obesidad a nivel mundial. Materiales y métodos: se realizó la búsqueda de estudios en las bases de datos (TRIP, Embase, Pubmed, Scopus, Epistemonikos, Cochrane y ClinicalKey), cuyo desenlace por evaluar sea la disminución de peso con el uso de liraglutida. Lo anterior se realizó mediante la herramienta PRISMA 2009 con el fin de obtener una revisión sistemática. Resultados: de un total de 74 estudios, se incluyeron 3 ensayos clínicos aleatorizados que evaluó un total de 4281 participantes. Se evaluó como desenlace principal la disminución de peso y los eventos adversos presentados fueron los desenlaces secundarios. Se realizó un metaanálisis cuyo reporte de pérdida de peso de -5,22 (intervalo de confianza [IC] del 95 %: -5,95, -4,50) y el índice de inconsistencia (I²) mostró alta heterogeneidad, al igual que la metarregresión realizada. Los eventos adversos se evidenciaron con mayor frecuencia en el grupo de liraglutida, y los eventos gastrointestinales fueron los más reportados. Conclusión: los resultados individuales en los estudios demuestran que el uso de liraglutida disminuye el peso. Sin embargo, en esta revisión sistemática se evidencia que no hay una significancia estadística de la evidencia por heterogeneidad de los estudios evaluados.

The study was intended to find how the Primary Health Centers in the Selected Tribal Districts of Karnataka-India are functioning and to reveal their problems and prospects. Cross-sectional, Observational study was done in a total of 35 PHCs, randomly selected from the three tribal dominant districts of Karnataka (Mysore, Chamaraja Nagar and Kodagu). A total of 35 medical and 50 para-medical staff were interviewed with pre tested questioners. For qualitative data, 100 tribal beneficiaries were selected (50 men, 50women). Data was collected through open-ended questionnaires using interviews, matrix method and focus groups study and data analyzed using SPSS software. The study found that non availability of essential fundamental facility, ill-mannered behavior of the staff, and absence of adequate man power, were some of the major reasons why tribals have negative perceptions about the PHCs. Further, this study has shown that there is a need of policy change regarding working style of PHCs.

Introdução: A Doença de Castleman (DC) corresponde a um grupo heterogêneo de desordens linfoproliferativas que compartilham características histopatológicas em comum. É classificada em quatro tipos: unicêntrica (DCU), multicêntrica associada ao herpes vírus 8 (DCM-HHV8), multicêntrica associada ao POEMS e multicêntrica idiopática. O principal fator de risco para desenvolvimento de DCM-HHV8 é a imunodeficiência, sendo o HIV a associação mais frequente. Para o diagnóstico é necessária realização de biópsia de linfonodo, com três variantes histopatológicas: hialino-vascular, plasmocitária e mista. O quadro clínico é variável, sendo que a DCM-HHV8 e HIV positivo ocorre em indivíduos mais jovens e é mais associada a febre e esplenomegalia. A escolha do tratamento depende do tipo e da gravidade da doença. Há risco aumentado para doenças malignas secundárias, principalmente linfomas. Relato de caso: Homem de 37 anos, vivendo com HIV há 17 anos e em uso de terapia antirretroviral há 7 anos, com carga viral indetectável e contagem de linfócitos CD4 de 238/mm3. Apresentou quadro de plaquetopenia, febre e perda de peso, com investigação infecciosa inicial negativa. Realizou PET-CT com esplenomegalia e linfonodomegalias em cadeias cervicais, ilíacas e inguinais (SUVmáx 7,4). Evoluiu com rash cutâneo, piora da febre e sudorese noturna, sendo internado devido a hipotensão e hiperlactatemia. Houve melhora da pressão arterial e redução do lactato após troca do antirretroviral Abacavir por Tenofovir, quadro tal que é descrito como toxicidade do medicamento. Em exames laboratoriais, apresentava anemia, plaquetopenia, aumento de interleucina 6 (IL-6), aumento de desidrogenase láctica (DHL), ferritina elevada, PCR quantitativo para vírus Epstein-Barr (EBV) 171.197 cópias/mL e PCR para HHV8 detectado. Realizado mielograma com plasmocitose discreta (4,8%) e aumento da atividade macrofágica, imunofenotipagem sem alterações e biópsia de medula óssea com imuno-histoquímica negativa para HHV8 e EBV. Biópsia de linfonodo cervical esquerdo com hiperplasia linfoide folicular com moderada plasmocitose interfolicular, HHV8 positivo focalmente e hibridização in situ negativa para EBV, sendo compatível com Doença de Castleman variante de plasmócitos. Iniciado tratamento com metilprednisolona e introduzido rituximabe semanal. Após a primeira semana da terapia instituída, paciente evoluiu com melhora clínica e laboratorial expressivas. Discussão e conclusão: Relatamos aqui o caso de um paciente HIV positivo com diagnóstico de DCM, que apresentou PCR sérico positivo para EBV e HHV8, com imuno-histoquímica de biópsia excisional de linfonodo positiva para HHV8 e hibridização in situ negativa para EBV. A associação do HHV8 e do HIV com a DC já é bem estabelecida, porém a associação com a infecção pelo EBV não é clara na literatura, com poucos estudos realizados e resultados divergentes. Na histopatologia deste caso caracterizou-se imagem clássica de DC e foi classificada como variante de plasmócitos, que é a mais comum encontrada na DCM-HHV8. O paciente relatado apresentou excelente resposta inicial ao tratamento, conforme descrito na literatura, com aumento da sobrevida global em 5 anos de 33% para 90% na era rituximabe. Infelizmente, o paciente se recusou a continuar o tratamento, evoluiu com progressão de doença e perda do seguimento subsequente.

ABSTRACT The work pace in poultry slaughterhouses is high and the risk of developing upper limb work-related musculoskeletal disorders is moderate to high. Thus, through risk management and the use of technical, organizational, and administrative means, the employer should ensure the well-being of workers, as well as safe and healthy working environments and conditions. The aim of this study was to identify the self-reported preference of poultry slaughterhouse workers regarding rest break frequency and duration, and to verify the reasons for their choice. The participants in the study included 311 workers from four poultry slaughterhouses. The workers were asked what rest break schemes they preferred: 6x10 min, 3x20 min, 4x15 min or another schedule, as well as the reasons for their selection. According to the workers’ opinions, 3x20 min was the best break schedule (90.7%), mainly because it allowed time to rest (64.5%), as they had more time to carry out their activities calmly. Unanimously, these workers responded that a 10-min break is very short, which only allows one to reach the rest area or the bathroom and return, no time to rest. Only 8.7% of workers wanted to have a higher rest break frequency (6 or 4 times per day) to leave the sector more, go to the bathroom often, have shorter work intervals, in addition to warming up the body and resting more. This paper provides guidelines for slaughterhouse managers to determine the best rest break schedules for their workers to promote health and safety.

Objetivos: A transfusão de concentrado de granulócitos (CG) é indicada em pacientes neutropênicos graves, em contexto de infecção refratária após 48h de tratamento com antimicrobiano específico, sem previsão de recuperação neutrofílica pelos próximos 5 dias, porém ainda tem benefício incerto na literatura. O estudo Resolving Infection in Neutropenia with Granulocytes (Blood 2015;29:2153-61) demonstrou melhora na sobrevida em pacientes que receberam CG em dose alta (0,6×109 granulócitos/kg), quando comparado com pacientes que receberam CG em doses mais baixas. A hidroxietilamida 450/0,7 PM 450.000 (HES) é um hemossedimentante que promove separação das camadas granulocítica e hemática, facilitando a coleta de CG por aférese. Devido a não disponibilidade do HES no mercado questionamos se é eficaz realizar a coleta de CG sem o hemossedimentante a fim de obter doses terapêuticas. Métodos: Comparamos 10 coletas de CG com HES versus 10 coletas sem HES, utilizando dados referentes à idade, peso, altura, sexo, leucometria pré-coleta, volume processado em cada procedimento, volume da bolsa coletada e a quantidade de granulócitos coletados por unidade. Para as coletas, utilizamos o equipamento COM.TECH (Fresenius Kabi) e os doadores foram mobilizados 12 a 16h antes da coleta com 8 mg VO de dexametasona e 300 mcg/SC de filgrastim. Resultados: Comparando as 10 coletas de CG com e sem HES as médias obtidas foram as seguintes: idade (33,4 vs. 39,5 anos); sexo (9 masculinos e 1 feminino vs. 10 masculinos); peso (81 vs. 92 kg); altura (1,74 vs. 1,77 m); leucometria pré-coleta (37,18 vs. 31,39 ×103 leucócitos/microlitros), volume processado (8575 vs. 9473 mL), volume da bolsa coletada (367 vs. 363 mL), contagem de granulócitos no produto (3,15 vs. 2,42 × 1010granulócitos/unidade). Os CG coletados sem HES apresentaram em média menos 23,2% de granulócitos/unidade. Discussão: Nas coletas de CG sem HES o volume médio processado foi maior por não podermos contar com o uso do hemossedimentante. Por sua vez, a leucometria média pré-coleta dos doadores nos quais HES foi utilizado foi maior. Tendo em vista o baixo benefício do uso de CG fora da dose apropriada, consideramos que para pacientes com até 40 kg, ainda é possível obter doses terapêuticas de CG nas coletas por aférese, mesmo sem usar o HES. Conclusão: A coleta de CG sem HES é factível, porém em média houve uma perda de efetividade de cerca de quando o HES não foi utilizado. Recomendamos manter as coletas de CG sem HES para pacientes com peso ≤40 kg. Uma mobilização das entidades médicas e de pacientes é necessária para disponibilizar o HES no mercado.

G. C. B., masculino, 30 anos. Diagnóstico de Leucemia Mieloide Crônica (LMC) em fase crônica em 2015, com início de tratamento com imatinibe na ocasião, alcançando resposta molecular maior (RMM) aos 6 meses de tratamento, com BCR-ABL 0,084%. No início de 2016, devido a episódios de dor lombar, realizou ressonância magnética (RM) que evidenciou lesões nos corpos vertebrais de L3 e L4 e nos ossos da bacia, descritas como possíveis hemangiomas. Em 2017 realizou novo exame, com descrição de lesões semelhantes em L2, L3, L4, sacro e pelve. Em 2019, referiu novamente a queixa de lombalgia com piora ao decúbito. Realizou nova RM, com evidência de múltiplas lesões ósseas com aspecto de acometimento neoplásico secundário nas colunas cervical, torácica e lombar - com aumento significativo do número de lesões com relação ao exame realizado em 2017. Foram realizadas biópsias (corpo vertebral de T12 e asa do ilíaco à direita), com laudo demonstrando presença de tecidos ósseo, adiposo e fibroconjuntivo sem alterações histopatológicas significativas. Durante todo este período, permaneceu com o tratamento com imatinibe, mantendo RMM. Seguiu com piora progressiva da queixa de dor lombar ao longo do acompanhamento. Devido a correlação temporal do aparecimento das primeiras lesões com o início do tratamento com imatinibe e o seu aumento progressivo ao longo do tempo, foi aventada a hipótese de que as alterações pudessem estar relacionadas ao uso do medicamento, apesar de não haver descrição de caso semelhante na literatura. Desta forma, optou-se por realizar a troca do tratamento com imatinibe para nilotinibe em janeiro de 2020. Após a troca da medicação, o paciente apresentou melhora progressiva. Em RM de controle realizada em março de 2020, evidenciou-se redução da maioria das lesões ósseas nas vértebras lombares e torácicas. Atualmente o paciente encontra-se com dores em coluna controladas, corroborando a melhora radiológica demonstrada no último exame de imagem realizado, com boa aderência e tolerância ao tratamento com nilotinibe. Estudos do grupo australiano mostraram que pacientes com LMC que receberam imatinibe por períodos superiores a 17 meses exibiram volumes ósseos trabeculares da espinha ilíaca significativamente aumentados. Por outro lado, nenhuma alteração no volume do osso trabecular foi observada em pacientes tratados com interferon-α, sugerindo que essas alterações eram o resultado das ações do imatinibe. Um estudo de Jönsson et al. demonstrou que pacientes tratados com imatinibe tiveram aumento da densidade mineral óssea total do quadril em comparação com controles normais da mesma idade. Isso foi associado à diminuição do fosfato e do cálcio séricos, bem como à diminuição dos níveis séricos dos marcadores de formação óssea. Tais dados sugerem fortemente que o imatinibe altera a remodelação óssea. Embora os mecanismos ainda não estejam totalmente elucidados, vários têm sido propostos, relacionados com o aumento de osteoblastos, diminuição de osteoclastos ou ambos. O caso descrito demonstra o aparecimento de lesões ósseas após o início do tratamento com imatinibe, com aumento significativo ao longo do tempo e biópsia sem alterações patológicas. Houve melhora clínica e radiológica importantes após a troca da medicação, o que levanta fortemente a hipótese de que as lesões tenham relação com remodelamento ósseo associado ao imatinibe.

Introdução: “Mixed phenotype acute leukemia” (MPAL) é uma entidade patológica recentemente definida, categorizada pela classificação da Organização Mundial de Saúde (OMS) de 2008 e 2016 como um raro subtipo de leucemia aguda que possui células blásticas de origem múltipla expressando marcadores específicos para várias linhagens. Pode mostrar um fenotipo B / T linfoide, B / mieloide, T / mieloide ou B / T / mieloide. São responsáveis por cerca de 2-5% de todas as Leucemias, tendo o subtipo T/Mieloide o segundo mais frequente. Apresentam maiores índices de Infiltração extramedular quando comparado as demais Leucemias, sendo o Sarcoma uma rara, porém eventual manifestação, principalmente em tecido ósseo. Objetivo: O objetivo deste trabalho e relatar um raro tipo de Leucemia Aguda associado a formação de Sarcoma Infiltrativo. Relato de caso: Paciente feminino, 57 anos, portadora de Esquizofrenia, apresentando quadro de cefaleia e disartria, com diagnóstico de Hematoma Subdural Agudo associado a Pancitopenia (Hb 7,5; Ht 23; Leuo 5500 – 68 Neutrofilos e 5000 Blastos; Plaquetas 8 mil). Realizado investigação medular, com diagnóstico de MPAL T/Mieloide, com infiltração por 93,68% de células de tamanho pequeno a moderado e baixa complexidade interna com CD45 +/++; CD34 ++; CD99++/+++; CD117 het; MPO het/-; CD15 het/-; CD33 +/++; CD38 het/-; NG2 +/++; CD64 +/-; CD4 +/++; CD 11b het/-; CD123 +/-; CD 105 +; CD 71++; Cd3c +/- e TdT +// CD19 -; Cd7-; CD2-; CD79a-; CD3m -; CD5-; HLA-DR-; TCR alfa/beta -; TCR gama/delta -. Apresentava massa em Setimo arco costal com derrame pelural adjacente, com diagnóstico de Sarcoma Infiltrativo por MPAL e derrame paraneolpasico confirmado por Imuno-Histoquimica e citometria de liquido pleural. Citogenetica sem crescimento celular. Optado por manter protocolo quimioterapico com esquema “7+3”. Paciente apresentou quadro de choque séptico, evoluindo para óbito. Discussão: MPAL constitui uma rara entidade hematológica com estimativa de 0,35/1.000.000 casos/ano. O sistema de classificação da OMS 2016 reconhece cinco subtipos de MPAL: MPAL com t (9; 22) (q34; q11.2) BCR-ABL1; MPAL com t (v; 11q23), MLL reorganizado; MPAL nao especificado de outra forma (NOS) B / mieloide; MPAL, NOS T / mieloide; e MPAL, NOS outros. A incidência pareceu ser maior em homens do que em mulheres, e foi observada uma distribuição de idade bimodal, com picos ≤ 19 e ≥ 60 anos. A mediana de idade do diagnóstico de MPAL foi de 50 anos, menor do que para LMA, mas maior do que para LLA. 58% dos casos apresentaram fenotipo B / mieloide, 36% T / mieloide, 4% linfoide B / T e 2% tinham fenotipo trilinhagem. Clinicamente, cursa com os sintomas relacionados a falência medular, porém geralmente com maior contagem de leucócitos e infiltração extra-medular, observado em cerca de 38% dos pacientes, maior em comparação as LLA e LMA, como foi observado no caso. E considerada uma doença de alto risco, com desfechos desfavoráveis em comparação aos outros tipos, tendo o subtipo T/Mieloide menores níveis de Resposta Completa e Sobrevida Global em comparação aos B/Mieloide. Nao há um guideline definido para tratamento devido a escassez de caos, porém convenciona-se que seja utilizado protocolo para LLA seguido de TMO alogênico, com melhores chances de se atingir remissão. No caso da paciente em questao, ja havia sido iniciado o protocolo de indução com “7+3” no momento do diagnóstico definitivo. Desta forma, foi optado por manter este esquema. Conclusão: Apesar dos recentes avancos no estudo da patogenese desta doença, a MPAL ainda é uma entidade rara e controversa dentro da Literatura, sendo imprescindível que se documente estes casos para que haja maior elucidação fisiopatologica e terapêutica.

Introdução: A transfusão de plasma convalescente tem sido utilizada como terapêutica alternativa no tratamento de COVID19 nos últimos meses. Avaliamos o impacto dos anticorpos neutralizantes produzidos pelos pacientes e dos anticorpos presentes nas unidades transfundidas na redução da carga viral em pacientes em tratamento hospitalar de COVID19. Materiais e métodos: Foram avaliados consecutivamente 29 pacientes admitidos para tratamento hospitalar de COVID19 em um único centro. Doses de 300 a 600 ml de plasma convalescente foram administradas ao longo de 2 dias. Foram coletados swabs nasais a cada 48 h a partir do D0 (dia de transfusão de plasma convalescente) até a alta hospitalar, a fim de determinar a carga viral por digital droplet PCR (ddPCR) dos alvos N1 e N2 do gene N (nucleocapsídeo) para análise de redução de carga viral, sendo considerado o número de cópias virais por 1000 células presente na amostra. Mensuramos os títulos de anticorpos neutralizantes (cytopathic effect-based virus neutralization test -SARS-CoV-2 GenBank MT126808.1) dos pacientes (NAbsP) antes da transfusão (D0) e títulos de anticorpos neutralizantes das unidades de plasma transfundidas (NAbsT). Para análise de associação entre NAbsP e redução de carga viral, os pacientes foram divididos em dois grupos de acordo com o status de NAbsP no D0: título de NabsP inferior a 80 e título de NabsP igual ou superior a 80. Para esta análise, foi utilizado o teste de Mann-Whitney . Para verificar a associação entre NAbsT e redução de carga viral, os pacientes foram divididos em três grupos: aqueles que receberam transfusão de plasma convalescente com título de NAbsT até 160, título de NAbsT entre 160-640 e NAbsT superior a 640. Para esta análise, foi utilizado o teste de Kruskall-Wallis. Resultados: Pacientes com baixos títulos de neutralizantes à admissão (NAbsP inferior a 80) apresentaram redução de carga viral significativamente maior (p=0,009) que pacientes com NAbsP igual ou superior a 80. Com relação ao impacto da transfusão de plasma, observou-se que quanto maior o título de anticorpos neutralizantes transfundidos maior foi a redução da carga viral; porém, tal achado não apresentou significância estatística (p = 0,528). Discussão: O combate e eliminação da viremia através dos anticorpos neutralizantes presentes no plasma convalescente compreende uma das justificativas da sua aplicação como terapia alternativa para COVID19. Contudo, estudos prévios demonstraram resultados contraditórios em relação ao seu impacto no clearance viral. Na presente casuística, pacientes com baixos títulos de anticorpos neutralizantes apresentaram maior redução de carga viral após a transfusão de plasma convalescente do que pacientes com altos títulos. Pacientes que já apresentavam títulos elevados de neutralizantes parecem não se beneficiar da transfusão de plasma no que se refere à redução de carga viral. A estratificação dos pacientes de acordo com os níveis basais de anticorpos neutralizantes parece ser um ponto importante a ser discutido no tratamento de COVID19 com plasma convalescente e fornece uma explicação plausível para os resultados controversos previamente observados.

Introdução: A recidiva após TCTH alogênico é observada em 20% a 40% dos pacientescom LMC. A monitorização dos níveis de BCR-ABL1 é uma forma de detecção precocede recaída após TCTH. No entanto, a sensibilidade da tecnologia de PCR aumentou aolongo dos anos. A população de pacientes transplantados também mudou: são pacientesmais graves e já tratados previamente com ITQ. Portanto, novos estudos são necessárioscom este método e população para que se determine o significado atual dos resultados deBCR-ABL após TCTH. Objetivo: Determinar a relação entre a positividade do BCR-ABL aos três, seis e dozemeses após TCTH e o risco de morte ou recidiva. Avaliar se o ponto de corte de 0,1% deBCR-ABL se correlaciona com sobrevida, recaída hematológica ou citogenética (RC/H). Método: avaliamos retrospectivamente os níveis do transcrito BCR-ABL por PCRquantitativo em tempo real (QPCR) aos três, seis e doze meses em portadores de LMC submetidos a TCTH alogênico, após falha terapêutica de ITQs, entre 01/05 e 10/19 erelacionamos com RC/H e sobrevida. Depois avaliamos os desfechos dos pacientes comvalores acima e abaixo de 0,1%. O teste de Fisher foi usado para variáveis categóricas. Ascurvas de sobrevida foram feitas usando o método de Kaplan e Meier e comparadas usandoLog Rank. Eventos foram definidos como morte ou recaída. Recidiva molecular (R/M) foiconsiderada se BCR-ABL/ABL (%) >0,1 % na Escala Internacional (EI). Resultados: Ascaracterísticas dos pacientes e dos transplantes são mostrados nas tabelas 1 e 2. Osresultados de BCR-ABL/ABL (EI) estão demonstrados na tabela 3. Ter um examepositivo aos três, seis ou 12 meses não se correlacionou com RC/H e não influenciou asobrevida. Cinco pacientes possuíam BCR-ABL>0.1% aos 3 meses. Destes três recaíram eum foi a óbito por recaída. 37 pacientes possuíam transcritos BCR-ABL

Introdução: Os basófilos estão envolvidos em diversas condições patológicas incluindo estados reativos, doenças autoimunes e neoplasias. Em pacientes com neoplasias mieloproliferativas crônicas (NMP) o número de basófilos e seus progenitores pode estar aumentado. Na Leucemia Mielóide Crônica (LMC) BCR/ABL+, a basofilia é um achado frequente e com significado prognóstico, basofilia >= 20% é um dos critérios da fase acelerada. O aumento de basófilos pode ocorrer em pacientes com síndrome mielodisplásica (SMD), NMPC com mutação de JAK-2, MDS/NMP e menos frequentemente em Leucemia Mielóide Aguda (LMA), particularmente quando associada à t(6;9). Leucemias basofílicas têm sido descritas, mas são raras e não bem definidas. Em muitos casos é detectada a pré existência de LMC, em outros casos, no entanto, não há presença do cromossomo Ph ou de outros marcadores citogenéticos ou moleculares e a leucemia basofílica deve ser considerada como uma doença primária. Nestes casos há dificuldade de diferenciação entre leucemia basofílica e mastocitária, especialmente quando as células são muito imaturas. A Organização Mundial de Saúde incluiu a Leucemia Basofílica Aguda (LBA) como entidade distinta na classificação das neoplasias hematopoéticas, sem critérios bem estabelecidos para o diagnóstico e classificação destas entidades e pouco se sabe sobre marcadores bioquímicos, imunohistoquímicos e moleculares na LBA e na leucemia basofílica crônica (LBC). Em 2017 foi elaborado um consenso com critérios diagnósticos e de classificação das leucemias basofílicas e doenças relacionadas, para melhor caracterização destes quadros. Neste trabalho relataremos um caso de difícil definição diagnóstica e classificação. Relato de caso: Paciente feminina, 52 anos, previamente hígida, iniciou quadro de náuseas e diarreia persistente há 1 mês da admissão. Exame físico: petéquias, hematomas, sem esplenomegalia. Avaliação laboratorial: Hemograma: Hb 5,5 mg/dL, Plaquetas 11.000/mm3, basofilia (32%/4.224 /mm3), basófilos morfologicamente anômalos e imaturos, células blásticas (36%) e DHL (744 U/L). A imunofenotipagem de sangue periférico foi discordante da morfologia e evidenciou 4% de blastos com expressão aberrante de CD7. Mielograma: 10% de blastos; citometria de fluxo: 6,4% de blastos com expressão de CD7, CD11b, CD11c, CD15, CD13, CD33, CD36, CD38, CD71, CD105, CD117, CD123, HLA-DR e cyMPO e 24,4% de células basofílicas sem marcadores anômalos. Escore de Ogata igual a 4 o que sugere displasia importante. Painel mieloide NGS com mutação do NPM1, WT1 e NRAS. Pesquisa do BCR-ABL negativa. A paciente recebeu indução convencional com 7+3, com boa tolerância, apresentando normalização do hemograma. A avaliação medular após indução demonstrou remissão citomorfológica e a pesquisa de DRM por NPM1 quantitativo foi 0,021% (21 transcritos para 105 transcritos ABL). Discussão/Conclusão: Destacamos a dificuldade diagnóstica e de classificação deste caso, como na distinção entre quadro de leucemia aguda e SMD/SMP com transformação leucêmica, além da estratificação prognóstica relacionada aos marcadores moleculares encontrados. Estas considerações são importantes para a melhor escolha terapêutica. No momento a paciente está recebendo esquema quimioterápico de consolidação com citarabina e será encaminhada para transplante de medula óssea alogênico.

Objetivos: A amplitude de distribuição eritrocitária (RDW, do inglês Red Blood Cell Distribution Width) demonstra aplicações únicas de diagnóstico que podem ser incorporadas à prática clínica, contribuindo para uma melhor compreensão sobre a condição do paciente, tanto para patologias hematológicas como não hematológicas. O RDW expresso como coeficiente de variação (RDW-CV) e como desvio-padrão (RDW-SD) são dados matemáticos e estatísticos, calculados a partir do histograma eritrocitário, que apresentam diferenças em sua forma de obtenção pelo analisador hematológico. Portanto, o objetivo desse estudo foi avaliar as variações do RDW-CV e RDW-SD de acordo com diferentes intervalos do volume corpuscular médio (VCM): microcítico, normocítico e macrocítico. Material e métodos: Foram selecionados do analisador hematológico XN-1000® (Sysmex, Kobe, Japan): contagem de eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, VCM, RDW-CV e RDW-SD. Idade e sexo foram obtidos do prontuário médico eletrônico. Os pacientes foram divididos em três grupos de acordo com diferentes intervalos do VCM: microcítico, normocítico e macrocítico. O grau de variação de anisocitose detectado pelas diferentes expressões de RDW foi calculado em porcentagem de aumento em relação aos valores de referência, pelas seguintes equações: i) RDW-CV=(valor encontrado-15.5)*100/15.5, para o sexo feminino; ii) RDW-CV=(valor encontrado-15.6)*100/15.6, para o sexo masculino e iii) RDW-SD=(valor encontrado-47.0)*100/47.0, para ambos os sexos. Resultados: Foram avaliados 150 indivíduos com idade média de 60,36 ±17,17 anos, sendo 72 (48%) do sexo feminino e 78 (52%) do sexo masculino; 51 (34%) apresentaram microcitose, 52 (35%) normocitose e 47 (31%) macrocitose. Nos hemogramas com microcitose, 30 (58%) indivíduos não exibiram alteração para o RDW-SD, no restante houve discrepância entre o grau de variação de anisocitose detectado pelo RDW-CV e RDW-SD. Na normocitose observou-se maior congruência entre RDW-CV e RDW-SD. Na macrocitose o RDW-SD demonstrou grau de variação de anisocitose superior ao RDW-CV na maioria das amostras. Na avaliação da correlação entre o RDW-CV, RDW-SD e os outros parâmetros eritrocitários, o grupo com microcitose não apresentou nenhuma relação. Na normocitose houve forte correlação (r = 0.760, p < 0.001) entre RDW-CV e RDW-SD e fraca correlação entre RDW-SD com VCM (r = 0.390, p = 0.004). Na macrocitose houve fraca correlação negativa (r = -0.463, p = 0.001) entre RDW-CV e RDW-SD e fraca correlação entre RDW-SD e VCM (r = 0.310, p = 0.034). Discussão: Ao interpretar anisocitose eritrocitária, o uso do RDW-CV em conjunto com o RDW-SD é altamente recomendado. A literatura demonstra que o RDW-CV apresenta maior sensibilidade em detectar anisocitose em VCM microcíticos e o RDW-SD em VCM normocíticos e macrocíticos. Os resultados do presente estudo demonstraram que apenas na normocitose os resultados de RDW-CV e RDW-SD apresentam relação para detectar anisocitose. Isso pode ser explicado porque o RDW-CV é um desvio padrão da largura do histograma ao nível de aproximadamente 68,2% de frequência dividido pelo VCM e o RDW-SD é a largura do histograma ao nível de 20%. Conclusão: O analista clínico deve estar atento aos resultados de RDW-CV e RDW-SD na interpretação de anisocitose, principalmente nos hemogramas microcíticos e macrocíticos.

Introduction: Sickle cell disease (SCD) is one of the most frequent genetic disorders in the world, making it a public health problem in several countries. Nevertheless, there are still few data regarding mortality of this population in Brazil. Methodology: This is a retrospective, epidemiological and descriptive study of mortality from sickle cell disease at the regional level. The sample consisted of living and deceased patients followed at the hemoglobinopathies outpatient clinic at the Reginal Blood Center of Ribeirão Preto between the years 2005 and 2020. The data were obtained from physical or electronic medical records linked to the Medical School of Ribeirão Preto Clinical Hospital. Results: 54 deaths occurred among 641 patients (37 in SS, 6 in SB0, 10 in SC and 1 in SD). The overall death rate was 8.4% and the annual general death rate was 0.56%. Surprisingly, the mortality rate among children below 5 years old was zero, and 1.8% in children below 18 years old. Patients with HbSS/SB had a higher death rate (9.4%, 0.62%/year) compared to SC patients (5.7%, 0.38%/year, p = 0.005). The mean age at death was 38.6/36.6 years for the SS/SB group and 44 years for the SC group. Prior to death, patients had a mean of 2.4 complications, 3.5 in the SS/SB group and 1.7 in the HbSC group. The most common cause of death was acute chest syndrome (50%), followed by pulmonary thromboembolism and sepsis (9.20% each). Discussion: Despite advances in the understanding of pathophysiology, causes of death and treatment, morbidity and mortality in SCD still remain a clinical challenge, especially in middle-income countries such as Brazil. Nevertheless, our results are more similar to high-income countries than published data from other regions in Brazil. Neonatal screening, antibiotic prophylaxis, close follow up since diagnosis and early treatment may have contributed to the reduction of mortality in our sickle cell population. Conclusions: In our centre, young patients with SCD have a low mortality rate, comparable to what is observed in high-income countries. SS/SB patients, as expected, present a higher mortality rate than SC patients. Herein, we believe to have shown that in Brazil it is possible to improve survival rates in patients with SCD.

Introduction: Covid-19 is an infectious disease with systemic involvement, which causes intense changes in the blood system, such as neutrophilia and lymphopenia, as well as changes in coagulation function and the concentration of acute phase proteins. Infected patients require laboratory follow-up to assist in clinical and therapeutic management. It is important to define efficient parameters to predict the clinical course of the disease, especially when the overall symptoms are becoming worse, in an attempt to anticipate therapeutic measures and to ensure the most appropriate assistance. Purpose: To correlate neutrophil and lymphocyte counts and their subtypes with the severity and outcome of patients with Covid-19. Materials and methods: Patients hospitalized for severe Covid-19, of both genders and without evidence of bacterial pneumonia, seen at the CHC-UFPR between April and June 2020, were included. Lymphocyte subpopulation analysis was performed by multiparametric flow cytometry (MFC) on whole blood sample using antibodies against CD45, CD3, CD4, CD8 and CD19. A BD FACSCanto™ II cytometer and Infinicyt™ 2.0 analysis software were used. ROC curve and other statistical relationships were performed with IBM SPSS™ v. 25 software. Results: Patients were divided as moderate (not intubated, n = 41) and severe (intubated, n = 35). From the median total leukocyte, neutrophil and lymphocyte counts and their subsets, we define the cutoff values with the highest correlation with hospital discharge. Patients with lymphocyte counts higher than 489/μL, CD4 counts higher than 326 and CD8 counts higher than 121 had a greater chance of evolving with a better prognosis (p < 0.001). Patients who had neutrophil-to-lymphocyte ratio (NLR) higher than 15.2 showed greater correlation with worse prognosis. Patients with lymphopenia below cutoff values are 40 to 55% more likely to be intubated and 50 to 63% to progress to death. Patients with NLR higher than 15.2 have 53.1% more chances of being intubated and 78.1% of evolving to death. Discussion: Laboratory evaluation is essential in the follow-up of patients with Covid-19. In addition to routinely used biochemical markers, cellular analysis can provide valuable information about the clinic and its progression. Lymphopenia and neutrophilia are common parameters in patients with severe disease, so NLR analysis presents itself as an objective scale for stratification of infected patients with a high correlation with possible outcomes. Associated with this, assessment of the immune profile with low levels of T-cells and especially low levels of positive CD4 cells has been associated with worse prognosis in patients with severe Covid-19. Conclusion: We conclude that analysis of the neutrophil/lymphocyte ratio routinely obtained from the complete blood count may provide relevant prognostic information for patients with Covid-19. In addition, flow cytometry analysis of CD4 and CD8 T-lymphocytes can complement the screening of patients with Covid-19 by providing information on the immune profile of the disease.