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Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária Ainda muito pouca informação existe no que diz respeito aos processos de resistência à quimioterapia em medicina veterinária, e principalmente em gatas, sendo que os tumores mamários estão entre os tumores mais comuns e mais imprevisíveis ao tratamento e poderão fornecer-nos dados oncológicos de grande importância, principalmente no que diz respeito aos processos de resistência à quimioterapia e aos fatores de prognóstico, devido à sua heterogeneidade dentro do processo de carcinogénese. Como tal, o objetivo deste estudo foi precisamente analisar as características clinocopatológicas e imunoexpressão de proteínas frequentemente associadas a processos de multiresistência à quimioterapia e para isso recorremos à imunohistoquímica de forma a quantificar a expressão das proteínas glicoproteína P, LRP (em inglês Lung Resistance Protein), Metalotioneína e BCRP (em inglês breast cancer resistance protein) em 24 amostras de tumores mamários de gata. Os resultados deste estudo revelaram que a maioria das gatas (76,7%) eram Europeus comuns, e as restantes 23,3% pertenciam à raça siamesa. A média de idades em que foi diagnosticado o tumor de mama foi aos 11 anos, com uma média de 1,33 tumores por animal. Em todos os tumores analisados foi detetada expressão de pelo menos um dos marcadores (100%), e em 33,3 % dos tumores foi detetada expressão dos 4 marcadores analisados simultaneamente. Foram encontradas relações estatisticamente significativas entre a expressão da glicoproteína P e o tipo histológico (p=0,019), onde detetámos que os carcinomas sólidos e criviformes estão geralmente associados a maiores scores de expressão desta proteína. Encontrámos também associação entre a expressão da LRP e o índice mitótico (p

Dissertação de Mestrado em Genética Molecular Comparativa e Tecnológica Os sarcomas felinos associados ao local de injeção (SFALI) são tumores que ocorrem em locais onde previamente foi efetuada administração medicamentosa ou vacinal. Esta neoplasia tem um elevado grau de recorrência, e apesar da existência de vários tratamentos, a taxa de sucesso terapêutico é relativamente baixa. Para além disso, os estudos existentes acerca destes tumores são escassos. Assim, torna-se necessário a realização de mais estudos com vista a encontrar potenciais alvos terapêuticos no tratamento dos SFALI. Neste trabalho, foram determinadas as expressões de Cox-2 e Ki-67 em 58 tumores, pela técnica de imunohistoquímica. Os tumores foram classificados em três graus histológicos de malignidade (GHM), tendo em conta a sua diferenciação, a presença e extensão da necrose e o índice mitótico. Outras características histopatológicas, como a presença de células gigantes e o infiltrado inflamatório linfoide foram igualmente avaliados. A expressão da Cox-2 foi avaliada através de um método semi-quantitativo, sendo considerada positiva quando mais de 10% das células tumorais apresentavam marcação positiva, independentemente da intensidade de marcação. No caso do Ki-67, a avaliação foi realizada através de um método quantitativo, determinando-se a fração de núcleos positivos num total de pelo menos 1000 células tumorais, contabilizadas em 8 a 10 campos. Quarenta e oito tumores (72%) apresentavam positividade para a Cox-2 e 28% não expressavam esta enzima (n=16). A positividade à Cox-2 apresentou associação ao grau histológico de malignidade, estando presente principalmente em tumores com GHM III (p=0.011), à presença de necrose (p=0.043) e à diferenciação, sendo os tumores menos diferenciados os mais frequentemente positivos (p=0.013). Não houve associação com a presença de células gigantes nem com o infiltrado inflamatório linfoide ou com o índice mitótico. A expressão do Ki-67 foi mais elevada em tumores com GHM II e III (p=0.032). Não houve associação com qualquer outro parâmetro histológico estudado. Assim, este estudo demonstrou expressão da Cox-2 num número considerável de casos de sarcomas associados ao local de injeção e sugere que inibidores seletivos de Cox-2 devem ser utlizados como adjuvante de tratamentos multimodais no tratamento destes tumores. Em relação ao Ki-67, este parece estar associado a uma maior agressividade tumoral, mas a sua utilização como alvo terapêutico necessita de mais estudos. Feline injection site sarcomas (FISS) are tumours that occur in places where it was previously conducted vaccine or drug administration. This neoplasia has a high degree of recurrence, and despite of the existence of several treatments, the treatment success rate is relatively low. In addition, existing studies on these tumours are scarce. Thus, it becomes necessary to carry out more studies to find potential therapeutic targets in the treatment of FISS. In this study, expression of Cox-2 and Ki-67 was determined in 58 tumours by immunohistochemistry. Tumours were classified into three degrees of histological malignancy (HGM), taking into account their differentiation, the presence and extent of necrosis and mitotic index. Other histopathological features such as the presence of giant cells and lymphocytic inflammatory infiltration were also evaluated. Cox-2 expression was measured using a semi-quantitative method and labelling was considered positive when more than 10% of tumour cells showed positive staining, regardless the staining intensity. In Ki-67 evaluation was realized by a quantitative method. Positive nuclei fractions were counted in a total of at least 1000 tumour cells in 8 to 10 fields. Forty eight tumours (72%) showed positivity for Cox-2 expression and 28% did not express this enzyme (n = 16). Cox-2 positivity was associated with the histological grade of malignancy and was present mainly in tumours with HGM III (p = 0.011), with necrosis (p = 0.043) and with differentiation, with less differentiation tumours being more frequently positive (p = 0.013). There was no association with the presence of giant cells neither with lymphocytic inflammatory infiltrate or mitotic index. Ki-67 expression was higher in tumours with HGM II and III (p = 0.032). There was no association with any other histological parameters studied. Therefore, this study has demonstrated Cox-2 expression in a considerable number of cases of feline injection site sarcoma, and suggests that Cox-2 selective inhibitors should be evaluated as an adjuvant in multimodal treatments of these tumours. Regarding to Ki-67, it appears to be associated with increased tumour aggressiveness, but its use as a therapeutic target needs further studies.

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária Os tumores melanocíticos são tumores de células redondas comuns em cães, tendo apresentação e comportamento biológico variável. Podem-se localizar na cavidade oral (56%), lábios (23%), pele (11%) e dedos (8%), sendo que as outras localizações, incluindo o olho, representam apenas 2%. Algumas características clínicas e histopatológicas como o grau de pigmentação, localização (dérmica ou hipodérmica no caso de melanomas cutâneos), ulceração e dimensão contribuem significativamente para definir o prognóstico em casos de melanomas. Um dos mecanismos mais importantes implicados na regulação do crescimento das células tumorais é a resposta imunitária mediada por células. No entanto, o papel do infiltrado inflamatório nas lesões neoplásicas não é ainda totalmente compreendido devido à disparidade de resultados nos estudos já realizados. A enzima cicloxigenase-2 (COX-2) não existe nas células em condições normais, apenas quando induzida por fatores de crescimento, reacções inflamatórias, promotores tumorais e oncogenes. Assim, ocorre em condições patológicas como o cancro e é responsável pela angiogénese, metástases, pela inibição da apoptose, pela imunossupressão e pela proliferação de células neoplásicas. Desta forma, associa-se a sua presença à malignidade. Assim, neste trabalho estudou-se o significado do infiltrado linfóide por linfócitos T CD3+, tanto em número de linfócitos como no tipo de infiltrado que estes apresentam. Estudou-se ainda a presença de cicloxigenase-2 nos tecidos tumorais de forma a corroborar os resultados obtidos para o infiltrado linfocitário, uma vez que não existem estudos em número suficiente para se poder comparar e discutir os resultados obtidos. Na ausência de dados relacionados com a sobrevida dos animais que permitam fazer estudos de prognóstico, foram avaliadas características histológicas apontadas por alguns autores como associadas à agressividade dos tumores e associadas aos dados do infiltrado inflamatório e à reacção do tecido tumoral com a COX-2. O objetivo de comprovar que os linfócitos T e a cicloxigenase-2 estão presentes em tumores melanocíticos, principalmente, nos malignos, é o facto de se poderem considerar novas possibilidades terapêuticas como a utilização de anti-inflamatórios inibidores específicos da COX-2. Com o objetivo de pesquisar biomarcadores da agressividade biológica passíveis de poderem constituir novos alvos terapêuticos, estudamos por imunohistoquímica os linfócitos infiltrantes no tumor (LITs), nomeadamente os linfócitos T CD3+, e a expressão de cicloxigenase-2 (Cox-2) em 39 tumores melanocíticos caninos. O número de linfócitos T CD3+ foi superior nos melanomas do que nos melanocitomas e em tumores localizados na cavidade oral do quer nos tumores da pele. Observou-se ainda um maior número de LITs em tumores com características histológicas associadas classicamente à agressividade do tumor, como necrose, ulceração, êmbolos tumorais, atipia nuclear e o índice mitótico. Em relação à localização dos LITs, verificou-se ainda que os tumores malignos apresentam, na maior parte dos casos, um infiltrado intratumoral assim como os tumores orais. Quanto à imunoreatividade com a COX-2, esta foi mais elevada nos tumores malignos, nos tumores orais e com características histológicas de maior agressividade biológica. Os LITs e a COX-2, associam-se de forma estatisticamente significativa entre si, isto é, tumores com maior número LITs, apresentam uma maior percentagem de células positivas e com maior intensidade de marcação para a cicloxigenase-2. Uma percentagem de células marcadas pela COX-2 (p=0,002) e a intensidade de marcação (p=0,005) associaram-se a uma infiltração intratumoral. Já quando a intensidade é negativa, é mais frequente não existir infiltrado de linfócitos T CD3+. Estas associações perdem-se nos tumores malignos. Este estudo sugere que os moduladores da resposta inflamatória, incluindo os inibidores da Cox-2 poderão ter um papel importante no tratamento do melanoma canino. Melanoma is a round cell tumour with variable presentation and biological behaviour that is common in dogs. Melanomas can be found in the oral cavity (56%), lips (23%), skin (11%), digits (8%) and eye (2%). Some clinical and histological characteristics such as the degree of pigmentation, site, ulceration and size contribute to define the prognosis. One of the most important mechanisms implicated on regulating the growth of tumour cells is the immune response mediated by cells. However, the role of inflammatory infiltrate in tumours is not fully understood yet due to the contradictory results of the studies available. Cycloxigenase-2 (COX-2) is an enzyme that doesn’t exist in cells under normal conditions. It is only synthetized when stimulated by growth factors, inflammation, tumour promoters and oncogenes. Therefore, it occurs in cancer and is associated with malignancy because it is responsible for angiogenesis, metastasis, apoptosis inhibition, immunosuppression and tumour cells proliferation. The number and the type of infiltrate of T lymphocytes CD3+ were studied in this thesis as well as the presence of COX-2 on tumour tissue in order to associate the two markers since there aren’t enough studies on this matter in veterinary medicine. Since the data for survival time of the animals included in this study was unavailable, we associated some of the histological features that are known to be correlated with malignancy with the T lymphocyte infiltrate and the immunostaining for COX-2. The main goal of identifying T lymphocytes and COX-2 in melanomas is to explore new therapeutic approaches like anti-inflammatory drugs, including COX-2 specific inhibitors. 39 melanoma samples were stained by immunohistochemistry techniques to identify both T lymphocytes CD3+ and COX-2. The results of this study showed that the number of T lymphocytes CD3+ was higher in malignant oral melanoma rather than in benign cutaneous melanoma. Their number was also higher in melanomas that presented histological features that indicated malignancy such as necrosis, ulceration, intravascular tumour cells, nuclear atypia and high mitotic index. Concerning the position of the T lymphocyte CD3+ infiltrate, the results showed that malignant and oral melanoma frequently presented an intratumoral infiltrate. COX-2 stained a higher number of cells in malignant oral melanomas with histologic features that indicate malignancy. T lymphocytes CD3+ and COX-2 showed to be statistically correlated. That is when the number of T lymphocytes CD3+ was high, so was the number of tumour cells stained by COX-2 and the T lymphocyte infiltrate was intratumoral. When the staining for COX-2 was negative, the T lymphocyte CD3+ infiltrate was usually absent. These statistical associations were lost when considering just the malignant tumours. These findings show that the use of anti-inflammatory drugs should be considered as a therapeutic option for melanomas.

Dissertação de Mestrado em Biologia Clínica Laboratorial O cancro da mama é a neoplasia mais frequentemente diagnosticada na mulher, nos países desenvolvidos e nos países em desenvolvimento. Esta é a neoplasia maligna mais comum no sexo feminino e a segunda causa de morte entre o mesmo. O Transforming Growth factor beta (TGFβ) e as células T reguladoras (Treg) FOXP3 estão envolvidos na carcinogénese mamária humana. Nos tumores mamários caninos, este tema ainda não se encontra bem documentado. Este estudo teve como objetivo a avaliação da expressão do TGFβ e do FOXP3 através da aplicação da técnica de imunohistoquímica numa série de carcinomas mamários; a avaliação da relação existente entre a imunoexpressão dos dois marcadores em estudo com características clínico-patológicas dos tumores incluídos na amostra e a investigação da associação entre a imunoexpressão dos marcadores nos tumores estudados. No presente estudo, identificou-se uma associação significativa entre a presença de características histopatológicas de elevada malignidade e de alta expressão do TGFβ. Os tumores com níveis mais elevados de TGFβ estavam associados a um alto índice mitótico (p=0,001), a um pleomorfismo nuclear marcado (p=0,002), a tumores indiferenciados (p

Dissertação de Mestrado em Biologia Clínica Laboratorial Em cães, os tumores melanocíticos apresentam uma biologia extremamente diversificada e o comportamento altamente agressivos. Com o objectivo de estudar o índice proliferativo nos tumores melanocíticos caninos e comparar esses índices com a localização e os critérios histopatológicos classicamente associados à agressividade, foram analisados 48 tumores melanocíticos sendo 9 melanocitomas e 39 melanomas. De cada animal foram registados os dados referentes ao animal (idade, sexo e raça) e os dados referentes ao tumor (localização e tamanho) tendo sido feita, posteriormente, uma avaliação das lesões na coloração de rotina com hematoxilina-eosina (HE), relativamente aos parâmetros histopatológicos definidos, nomeadamente o tipo de células, actividade juncional, atipia nuclear, Infiltrado linfoplasmocitário necrose, células gigantes, proliferação intraepitelial, ulceração, estroma e as células tumorais intravasculares. O índice de proliferação marcada pelo Ki-67 foi avaliado por meio da imunohistoquímica enquanto o índice mitótico foi avaliada pela coloração de HE com branqueamento da melanina. Com esse estudo pudemos verificar que o índice proliferativo, determinado pela contagem de mitoses e pela marcação imunohistoquímica pelo Ki-67 variou significativamente entre tumores melanocíticos localizados na cavidade oral e cutânea, sendo que nos melanocitomas o índice proliferativo foi menor quando comparado com os melanomas. Também o índice proliferativo mostrou uma correlação significativa com a atipia nuclear e a Infiltrado linfoplasmocitário. O Ki-67 e o índice mitótico mostraram ser estatisticamente significativos tanto nos melanomas assim como nos tumores melanocíticos no geral, com o nível de significância de P=0,026 e P=0,001 respectivamente. Sendo assim, o estudo dos índices proliferativos pode ser bastante útil para o diagnóstico dos melanomas caninos, auxiliando o médico na escolha do melhor tratamento. The melanocytic tumors in dogs present a biology extremely diversified and a highly aggressive behavior. With the aim of studying the proliferative melanocytic index tumors in canines and comparing these rates with the location and histopathological criteria classically associated with aggressiveness 48 melanocytic tumors were analyzed; 9 melanocytomas and 39 melanomas. Each one of the animals was recorded with the appropriate data regarding it (age, gender, and race) and the data regarding the tumor (location and size). These records having been previously made, an evaluation of the lesions in routine staining with hematoxylin-eosin, in relation to histopathological parameters defined, and in particular the type of cells, junctional activity, nuclear atypia, necrosis, inflammation, cell proliferation, large intraepithelial, ulceration, stroma and the intravascular tumor cells followed. The proliferation index marked by Ki-67 was evaluated by means of immunohistochemistry while the mitotic index was assessed by staining with HE bleaching of melanin. With this study we can check that the proliferative index determined by counting mitoses and the immunohistochemical staining for the Ki-67 varied significantly between melanocytic tumors located in the oral cavity and skin, being that in the melanocytomas the proliferative index was much lower when compared with the melanomas. Also, the proliferative index showed a significant correlation with the nuclear atypia and the inflammation. The Ki-67 and the mitotic index showed to be statistically significant in both melanomas as well as in the melanocytic tumors in general, with the significant level of P=0.026 and P=0.001 respectively. Thus, the study of proliferative indices can be very useful for the diagnosis of canine melanomas and assisting the physician in choosing the best treatment.

Dissertação de Mestrado em Biologia Clínica e Laboratorial Os tumores mamários são a neoplasia mais comum na cadela. O estudo das neoplasias mamárias da cadela tem um elevado interesse clínico e científico, uma vez que estas são muito semelhantes ás da espécie humana. A cadela emergiu como um bom modelo comparativo para estudar vários aspectos da carcinogénese e da evolução clínica das neoplasias em ambas as espécies. O objectivo deste trabalho foi determinar a expressão de Cox-2, da proliferação tumoral medida pelo Ki-67 e da Caspase-3 activa, por detecção imunohistoquímica, com vista à pesquisa de uma possível correlação entre estes marcadores, pela participação comum em etapas da carcinogénese. No presente estudo, a Cox-2 e o IP do Ki-67 manifestaram uma maior expressão em tumores malignos e exibiram relação estatisticamente significativa com diversas variáveis clínico-patológicas que reflectem a agressividade do tumor. A Caspase-3 activa mostrou-se superior de forma estaticamente significativa nos tumores benignos relativamente aos malignos. No grupo dos tumores malignos, observou-se uma correlação positiva estatisticamente significativa entre a expressão da Cox-2 e o IP do Ki-67 e uma correlação negativa entre a expressão do IP do Ki-67 e a Caspase-3 activa. Não se observou uma correlação entre a expressão da Cox-2 e a Caspase-3 activa. Os nossos resultados sugerem que a Cox-2 desempenha um papel importante nos TMCs e parece estar envolvida na proliferação tumoral. Neste sentido, o uso de inibidores selectivos da Cox-2 apresenta-se como uma possibilidade no tratamento dos TMC. Mammary tumours are the most common neoplasm in the female dog. The study of the female dog’ mammary neoplasm is of high clinic and scientific interest, since they’re very similar to those of the human species. The female dog became, therefore, a good comparative model to study the various aspects of carcinogenesis and the clinical evolution of both species neoplasms. The purpose of this study was to determine the expression of the cox-2, of the tumour proliferation measured by the Ki-67 and the expression of the active Caspase-3, by immunohistochemical detection, with the intention of researching a possible correlation between theses markers, since they both participate in stages of carcinogenesis. In this study, the Cox-2 and the proliferation index of Ki-67 expressed a more extensive expression on malignant tumours and displayed a more significant statistic relation with various clinicopathological variables that reflect the aggressiveness of the tumour. The active Caspase-3 proved superior in a statically significant way on benign tumours comparatively to malign tumours. In the malign tumours’ group, it was observed a statically significant positive correlation between the expression of Cox-2 and the proliferation index of Ki-67 and a negative correlation between the expression of the proliferation index of Ki-67 and the active Caspase-3. There was no significant correlation between the expression of Cox-2 and active Caspase-3. Our results suggest that the Cox-2 performs an important role on canine mammary tumours (CMTs) and seems to be involved on the tumour proliferation. The use of the Cox-2’ selective inhibitors, therefore, present themselves as a possibility to the treatment of the CMTs.

Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias A disciplina de oncologia veterinária tem assistido a enormes progressos nos últimos anos e a doença oncológica constitui hoje a principal causa de morte de animais de estimação seniores. Novos e sofisticados tratamentos estão hoje disponíveis no tratamento da doença oncológica fruto de avanços tecnológicos e da alteração de atitudes dos proprietários de animais domésticos que cada vez mais os encaram como membros da família exigindo assim o melhor tratamento disponível e com fortes preocupações relativas à qualidade de vida dos mesmos. O papel da enzima COX tem vindo a ser demonstrado de uma forma crescente na carcinogénese tanto em pessoas como em animais domésticos sendo um importante fator de prognóstico em vária neoplasias e potencialmente um alvo terapêutico. O objetivo deste estudo consistiu em analisar as expectativas de proprietários de animais de companhia com doença oncológica relativamente a serviços veterinários e avaliar se elas difeririam da população geral de donos de animais de companhia. Nesse sentido foi utilizada a metodologia SERVQUAL, um instrumento popularmente utilizado em marketing de serviços, para avaliar expectativas e perceções de consumidores e, assim, quantificar indiretamente a satisfação desses mesmos consumidores. De facto, esta metodologia é comumente utilizada em serviços de saúde quer como ferramenta de gestão, quer como ferramenta de investigação científica. Através da análise de inquéritos SERVQUAL distribuídos a proprietários de animais de companhia submetidos a tratamentos oncológicos e tratamentos não oncológicos concluiu-se que o primeiro grupo possuía expetativas específicas sobre o que constituiria um serviço veterinário ideal atribuindo maior importância a questões relacionadas com a ´segurança´ as quais não foram correspondidas pela equipa veterinária que por sua vez atribuíram maior importância a questões relacionadas com a tangibilidade dos serviços. Esta melhor compreensão das necessidades dos donos de animais com cancro permite melhor ajustar os serviços veterinários gerando maiores satisfações e melhores “compliances” e resultados dos tratamentos. A COX-2 é uma enzima diretamente implicada em diversas etapas da carcinogénese tais como a iniciação, a promoção, a invasão, a inibição da apoptose e a metastização. Os anti-inflamatórios com as suas propriedades de inibição da COX-2 são potencialmente candidatos óbvios a serem incluídos em terapêuticas de cancro providenciando analgesia e consequente melhoria da qualidade de vida (QoL) e, simultaneamente, atividade anticancerígena. Neste trabalho são revistas as ações da COX-2 nas diversas etapas chave da carcinogénese e é apresentada uma revisão sistemática sobre o valor prognóstico das COX em diversas neoplasias malignas do cão e do gato. Através da análise da literatura constatou-se que a expressão de COX-2 está associada a uma diminuição da sobrevida total no melanoma canino, no osteossarcoma canino e nos tumores mamários da cadela, mas não nos mastocitomas, carcinomas da próstata e carcinomas nasais. Esta revisão permitiu também constatar a escassez de estudos complementares para cada tipo de neoplasia e ausência de estudos para diversos grupos de neoplasias comuns, assim como identificar algumas falhas metodológicas em vários estudos potencialmente conduzindo a riscos de “bias”. De seguida investigámos os mecanismos de ação da COX-2 em 2 grupos de neoplasias importantes em cães: mastocitomas e melanomas- onde demonstrámos a associação da expressão da COX-2 com variáveis clinico-patológicas de agressividade elucidando o papel da COX-2 na carcinogénese destas 2 neoplasias apontando para a contribuição na angiogénese e alteração no microambiente inflamatório peri-tumoral no caso dos melanomas e proliferação e angiogénese nos mastocitomas. Embora a bibliografia publicada não tenha não tenha associado a COX-2 a um prognóstico negativo nos mastocitomas caninos, o nosso trabalho encontrou uma associação entre a intensidade da expressão de COX-2 e a menor sobrevida total em cães com mastocitomas. Finalmente descrevemos um estudo observacional onde a ação de um inibidor COX-2 específico- firocoxib- utilizado sozinho, ou combinado num esquema metronómico com clorambucil, foi avaliada num conjunto de 30 neoplasias em estádio avançado constatando-se atividade clínica com registo de 1 remissão completa e 2 remissões parciais, com um bom perfil de segurança e com melhorias significativas dos scores de QoL. Em conclusão, demonstrámos as especificidades das expectativas dos donos de animais de companhia e a importância dos clínicos se ajustarem às suas necessidades de forma a melhor garantir o cumprimento dos planos de tratamento. Identificámos a COX-2 como um importante fator de prognóstico em várias neoplasias malignas caninas e identificámos a utilidade potencial do uso de inibidores COX-2 no tratamento e melhoria da qualidade de vida de animais com neoplasias em estádio clínico avançado. A expressão de COX-2 poderá de futuro ser usada na clínica como marcador de previsão de agressividade em neoplasias de prognóstico incerto tais como mastocitomas de grau intermédio e o uso de inibidores COX-2 no tratamento de diversas neoplasias caninas deverá ser equacionado e avaliado em ensaios clínicos randomizados avaliando como resultados finais a resposta clínica ou a melhoria da qualidade de vida dos animais. Veterinary oncology field has experienced huge progresses in recent years and oncologic disease constitutes today the leading cause of death among senior pets. New and sophisticated therapies are readily available today for the treatment of oncologic disease resulting from technologic advances and from an attitude shift of pet owners that now regard them as members of the family and so demand the best medical care available and with special concern on Quality of Life issues. COX-2 enzyme role in carcinogenesis has been increasingly demonstrated both in people as well as in animals being an important prognostic factor in several neoplasia and potentially constituting a therapeutic target. The goal of this work consisted in analysing pet owner’s expectations towards veterinary services and evaluate if they differ from general pet owner population. For that we used the SERVQUAL methodology, a popular marketing instrument used to evaluate consumer’s expectations and perceptions allowing to indirectly estimate service satisfaction. In fact this methodology is already routinely used in health care either as a management or research tool. Through SERVQUAL questionnaires distributed to pet owners of animals with oncologic disease and non-oncologic disease we concluded that the former had different expectations regarding an optimum veterinary care service giving extra importance to items related with assurance which were not recognized by the veterinary staff who in turn gave higher importance to questions related to the tangible dimension. This better understanding of the needs of pet owners with cancer will allow for better adjustment of veterinary services offer making way to better client satisfaction, better treatment compliance rates and better outcomes of treatments. COX-2 is an enzyme directly implicated in several hallmarks of carcinogenesis such as initiation, promotion, invasion, apoptosis inhibition and metastization. NSAIDs with its COX-2 inhibitory properties are obvious potential candidates to be included in cancer therapy providing analgesia with consequent improve in QoL and at the same time having anti-cancer activity. In this work we reviewed COX-2 role in several key steps of carcinogenesis and we performed a systematic review on the prognostic value of COX in several malignant neoplasias in the dog and cat. Through review of the literature we observed that COX-2 is associated with an overall decrease in survival in canine melanoma, canine osteosarcoma and canine mammary tumours, but not in canine mast cell tumours, prostatic carcinoma and nasal carcinoma. This systematic review also allowed to highlight the scarcity of complementary prognostic studies for each type of neoplasia and the absence of any study in particular important groups of neoplasias and also permitted to identify methodologic limitations of published studies potentially leading to increased risk of bias. Next we investigated mechanisms of action of COX-2 in 2 important neoplasias in dogs: mast cell tumours and melanomas. Here we showed the association between COX-2 expression and several clinic-pathological variables of aggressiveness enlightening the role of COX-2 in these 2 cancers: acting on angiogenesis and peritumoural inflammatory microenvironment modification in melanomas and proliferation and angiogenesis in mast cell tumours. Although published literature hadn´t found association between COX-2 expression and diminished OS in canine mast cell tumours our work did find such association when taking in account COX-2 intensity of expression. Finally we described an observational study where the action of firocoxib (a COX-2 specific inhibitor) used alone or combined with chlorambucil in a metronomic regimen, was evaluated in 30 end stage various types of canine neoplasia. Clinical response was observed and we recorded 1 complete remission and 2 partial remissions with a good safety profile and with significant improvements in QoL scores of patients. In conclusion we demonstrated the specific needs and expectations of owners of pets with oncologic disease and the importance for the clinicians to make adjustments in order to meet those demands and achieve client satisfaction and compliance of treatment plans. We identified COX-2 as an important prognostic factor in several neoplasias and the potential role of COX-2 inhibitors in the treatment of these malignancies or as palliative care to improve QoL in end stage disease. COX-2 expression could in the future be used to help ascertain the clinical behaviour of neoplasias of uncertain prognostic such as intermediate grade mast cell tumours and the use of COX-2 inhibitors in the treatment of canine malignancies should be contemplated and evaluated throw randomized clinical trials considering as final results clinical activity or improvements in QoL.