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International audience; Severe hypertriglyceridemia (HTG), characterized by triglycerides (TG) permanently over 10 mmol/L, may correspond to familial chylomicronemia syndrome (FCS), a rare disorder. However, hypertriglyceridemic patients more often present multifactorial chylomicronemia syndrome (MCS), characterized by highly variable TG. A few nonsense variants of LMF1 gene were reported in literature in FCS patients. In this study, we described a woman with an intermittent severe HTG. NGS analysis and the sequencing of a long range PCR product revealed a homozygous deletion of 6507 base pairs in LMF1 gene, c.730-1528\₈98-3417del, removing exon 6, predicted to create an in-frame deletion of 56 amino acids, p.(Thr244_Gln299del). Despite an exon 6 homozygous deletion of LMF1, the patient's highly variable lipid phenotype was suggestive of MCS diagnosis.

Epub ahead of print; Background: Klotho gene was identified as an aging suppressor. In animals klotho over-expression extends lifespan and defective klotho results in rapid aging and early death. The kidney is the main contributor to circulating klotho levels and during chronic kidney disease, renal klotho gene expression is drastically reduced in animals and humans as well.Objective: We aimed to determine the consequences of a serum klotho defect on cardiovascular morbidity and mortality during chronic dialysis.Design: The ARNOGENE study was designed to prospectively follow a cohort of hemodialysis patients for 2 years without specific intervention. 769 patients were recruited and followed from the end of 2008 until January 2011. 238 patients were analysed due to a technical sample conservation issue with other samples.Results: The median serum klotho was markedly reduced, 360.4 ng/L [IQR176.5] as compared with non-dialysis chronic kidney disease patients or healthy volunteers. Patients with a serum klotho above the first quartile (≥280 ng/L) had a significantly reduced occurrence of outcome combining cardiovascular events and cardiovascular death (OR=0.39; 0.19-0.78, p=0.008) compared to patient with klotho

Rationnel L'apoCIII est un regulateur majeur de la triglyceridemie plasmatique. De nombreux variants du gene APOC3 sont associes a la survenue d'une hypertriglyceridemie mais leur mecanisme d'action n'est pas bien elucide en particulier pour les variants de la region 3' non codante du gene (3' UTR), dont le variant Sst1 (c.*40G>C ou rs5128). Nous avons cherche a caracteriser les variants 3'UTR de l'APOC3 et a etudier leur potentielle regulation par des microARN hepatiques ou intestinaux. Materiels et Methodes Sequencage de la region 3'UTR d'APOC3 chez 100 patients diabetiques de type 2 (DT2) presentant une hypertriglyceridemie severe (TG>15mmol/l) (groupe HTG) compares a 100 DT2 normotriglyceridemiques (groupe NTG). Identification in silico par etude bioinformatique des potentielles pertes de site de fixation de miRNA induites par les variants identifies. Etude in vitro de la fonctionnalite des interactions entre variants geniques/ miRNA dans des cellules HepG2, HuH7 et Caco transfectees avec un vecteur luciferase contenant la 3'UTR de l'APOC3 (WT vs rs5128 et/ou rs5225). Resultats Seulement 2 variants geniques situes dans l'extremite 3'UTR de l'APOC3 ont ete identifies dans les 2 groupes de patients : SstI (rs5128) et BbvI (rs5225). Seul le variant rare S2 de SSt1 est significativement associe a l'hypertriglyceridemie (frequence allelique de 19,5 % dans le groupe HTG vs 9,5 % dans le groupe NTG, p =0,0045). Le variant S2 est systematiquement associe au variant rare B2 de Bbv1. Dans l'analyse in silico, les sites de fixation de six miRNA sont predits pour etre supprimes par le variant S2 et cinq par le variant B2. Ces miRNA sont connus pour etre exprimes dans le foie, l'intestin et les modeles cellulaires utilises. In vitro, dans les cellules HepG2, HuH7 et Caco, l'activite luciferase du vecteur exprimant les variants rares S2B2 n'est cependant pas significativement differente de celui exprimant les variants sauvages S1B1. Conclusions Nos resultats ne confirment pas l'hypothese d'une regulation du variant Sst1 de l'APOC3 par un miRNA hepatique ou intestinal.

Context: GPIHBP1 is a new endothelial binding site for lipoprotein lipase (LPL), the key enzyme for intravascular lipolysis of triglyceride-rich lipoproteins (TGRL). We have identified two new missense mutations of the GPIHBP1 gene, C89F and G175R, by systematic sequencing in a cohort of 376 hyperchylomicronemic patients without mutations on the LPL, APOC2, or APOA5 gene. Objective: Phenotypic expression and functional consequences of these two mutations were studied. Design: We performed clinical and genotypic studies of probands and their families. GPIHBP1 functional alterations were studied in CHO pgsA-745 transfected cells. Results: Probands are an adult with a homozygous G175R mutation and a child with a hemizygous C89F neomutation and a deletion of the second allele. C89F mutation was associated with a C14F signal peptide polymorphism on the same haplotype. Both patients had resistant hyperchylomicronemia, low LPL activity, and history of acute pancreatitis. In CHO pgsA-745 cells, both G175R and C14F variants reduce the expression of GPIHBP1 at the cell surface. C89F mutation is responsible for a drastic LPL-binding defect to GPIHBP1. C14F may further potentiate C89F effect. Conclusions: The emergence of hyperchylomicronemia in the generation after a neomutation further establishes a critical role for GPIHBP1 in TGRL physiopathology in humans. Our results highlight the crucial role of C65-C89 disulfide bond in LPL binding by GPIHBP1 Ly6 domain. Furthermore, we first report a mutation of the hydrophobic C-terminal domain that impairs GPIHBP1 membrane targeting.

Objective: To provide phenotypic and functional data in new patients with APOA5 mutations and to identify genetic and metabolic factors influencing their phenotypic expression. Methods and results: By sequencing APOA5 gene in a cohort of 286 hyperchylomicronemic subjects, free of LPL or APOC2 mutations, we identified 4 unrelated carriers of the Q97X mutation (3 heterozygotes and 1 homozygote) and one heterozygote with a new L242P mutation. Postheparin LPL activity level was reduced by about 50% in Q97X heterozygotes and more than 90% in the Q97X homozygote, but was normal in the L242P patient after resolution of hyperchylomicronemia. Plasma apoAV was undetectable in the Q97X homozygote and in the normal range in the L242P and Q97X heterozygous carriers. In Western blot studies, the association of apoAV with plasma lipoproteins was altered in Q97X heterozygous carriers but not in the L242P carrier. Hyperchylomicronemic heterozygotes for both mutations carried an additional APOA5 variant haplotype and/or APOE variant (E2 or E4). Type 2 diabetes or metabolic syndrome were not a major phenotypic determinant. Conclusions: The L242P mutation was present in a hyperchylomicronemic proband but its causal involvement remains to be established. The Q97X mutation was clearly involved in hyperchylomicronemia with evidence of concomitant altered intravascular lipolysis, and a complete apoAV deficiency in the homozygote. The phenotypic expression variability of APOA5 mutations was mostly influenced by compound heterozygosity with APOA5 variant haplotypes plus additional genetic factors, and in a lesser extent by the metabolic environment.

Introduction GPIHBP1 est un nouveau site de liaison endotheliale de la lipoproteine lipase (LPL), enzyme cle de la lipolyse intravasculaire des lipoproteines riches en triglycerides (LRTG). GPIHBP1 s’exprime comme la LPL dans le tissu adipeux, le foie, le muscle. Par sequencage du gene GPIHBP1 chez des patients ayant presente une hyperchylomicronemie majeure (TG > 15 mmol/l) avec activite LPL effondree ( Materiels et methodes L’objectif de cette etude est la caracterisation fonctionnelle in vitro de ces deux mutations par transfection transitoire des formes sauvage (WT) et mutees de GPIHBP1 dans le modele cellulaire CHO745, avec etude en Western Blot de l’expression de la proteine a la surface cellulaire et de la liaison de la LPL a GPIHBP1. Resultats L’expression des formes mutees de GPIHBP1 a la surface cellulaire est diminuee : −53 ± 6.4 % pour C14F, − 35 ± 13 % pour C89F, − 45 ± 12 % pour l’haplotype C14F/C89F, et − 48 ± 7 % pour G175R, versus WT. La fixation de la LPL sur GPIHBP1 est conservee pour C14F, mais est alteree pour C89F (− 78 ± 13 %), l’haplotype C14F/C89F (− 91 ± 5 %) et pour G175R (− 43 ± 13 %), versus WT. Discussion Ces 2 nouvelles mutations de GPIHBP1 entrainent a la fois une diminution de l’expression de la proteine a la surface cellulaire et de la liaison de la LPL, avec une association synergique entre la mutation C89F et le polymorphisme C14F responsable d’une alteration majeure de liaison de la LPL. La mutation G175R est la premiere mutation decrite du domaine C terminal de la proteine implique dans la liaison au groupement GPI anchor de la proteine. Ces travaux confirment le role majeur de GPIHBP1 dans la lipolyse intravasculaire des LRTG chez l’homme.

Objectif Les dysbetalipoproteinemies (type III, classification de Frederikson) sont des dyslipidemies primitives rares, lors desquelles les diabetiques de type 2 (DT2) sont surrepresentes (10 a 30 % des series). Pour preciser l’interaction entre ces pathologies nous avons compare dans une cohorte de malades dysbetalipoproteinemiques, ceux presentant un DT2 et ceux indemnes de diabete, et considere la survenue de decompensation en hypertriglyceridemie majeure (> 15 mmol/L) de type V (HTGM). Materiels et methodes Etude cas-temoin retrospective de 24 patients dysbetalipoproteinemiques. Nous avons etudie les parametres cliniques (IMC, âge, sexe), biologiques (triglyceridemie, cholesterolemie, HDL, LDL, apoB, genotypage apoE), les marqueurs phenotypiques diagnostiques (CT-VLDL (mmol/L)/Tg-total (mmol/L) > 0,30, CT-VLDL (mmol/L)/Tg-VLDL (mmol/L) > 0,40 et apoB (g/L)/CT (mmol/L) Resultats Les patients diabetiques (n = 12) sont plus âges que les non diabetiques (n = 12) : 65,7 ± 14,6 ans vs 50,1 ± 14,6 ans, p = 0,005, mais sont comparables en termes de sexe (60 % d’hommes) et d’IMC (29,7 ± 4,5 kg/m 2 ). La proportion de decompensation est similaire chez les diabetiques (3/12) et les non diabetiques (5/12), p = 0,6. Le phenotype lipidique est similaire. Les ratios diagnostiques de dysbetalipoproteinemie fonctionnent pour les patients diabetiques et non diabetiques. Cependant le ratio CT-VLDL/Tg-total en periode de suivi est moins eleve chez les patients diabetiques, mais reste valable (0,32 ± 0,09 vs 0,43 ± 0,13, p = 0,04). La prevalence des facteurs environnementaux de decompensation et celle des variants genetiques de susceptibilite aux hypertriglyceridemies sont similaires. Le polymorphisme C14F du gene GPIHBP1 est retrouve uniquement chez les diabetiques (n = 4, p = 0,09), 2/3 des patients diabetiques presentant une HTGM sont porteurs de ce polymorphisme, ce resultat est non significatif en raison des faibles effectifs. Conclusion Les patients dysbetalipoproteinemiques diabetiques sont comparables aux patients non diabetiques. Le DT2 n’apparait pas comme un facteur de risque preponderant de decompensation en HTGM. Les methodes diagnostiques habituellement utilisees demeurent fiables meme en presence d’un DT2.