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Submitted by Mírian Farias Ribeiro (mirianfribeiro@yahoo.com.br) on 2022-05-16T11:12:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Machado.pdf: 985544 bytes, checksum: 8e21502c067dddbaf4eadceedf2616db (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2022-05-16T11:32:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Machado.pdf: 985544 bytes, checksum: 8e21502c067dddbaf4eadceedf2616db (MD5) Made available in DSpace on 2022-05-16T11:32:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Machado.pdf: 985544 bytes, checksum: 8e21502c067dddbaf4eadceedf2616db (MD5) Previous issue date: 2021-11-26 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Pesquisas científicas recentes têm revelado um crescente e notório interesse mundial pelo consumo de produtos benéficos à saúde. Nessa perspectiva, os probióticos têm ganhado uma grande visibilidade, por serem micro-organismos vivos que, ao serem ingeridos em quantidades adequadas, trazem benefícios à saúde do consumidor. Uma variedade de micro-organismos com potencial tecnológico e até mesmo probiótico, podem estar presentes em bebidas como o kefir e a kombucha. Assim, o consumo destes, pode favorecer a saúde humana, e consequentemente, têm sido objeto de estudo. Desta forma, objetivou-se no presente estudo caracterizar isolados de bactérias ácido-lácticas (BAL) oriundas de kefir e de kombucha, quanto aos aspectos de segurança in vitro, avaliar o potencial tecnológico e probiótico dos isolados. Foi realizada a caracterização dos isolados, com testes de coloração de Gram, presença de catalase e morfologia. Após, foi avaliado aspectos de segurança por meio da atividade das enzimas gelatinase, DNAse, hemolisina e susceptibilidade a antimicrobianos de uso clínico. As propriedades tecnológicas, foram verificadas por meio da atividade antimicrobiana frente a micro-organismos patogênicos pelo método de difusão em poços, produção de fermentação de glicose, determinação da capacidade antioxidante pelo método de captura do radical 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH) e reação ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Para analisar o potencial probiótico foram realizadas análises de autoagregação, coagregação e hidrofobicidade, tolerância às condições do trato gastrointestinal simulada, tolerância a diferentes concentrações ácidas e tolerância aos sais biliares. Ainda, foi realizado ensaio de citotoxicidade empregando o método MTT [3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazólio], utilizando linhagens de células VERO. De acordo com os resultados obtidos, dos oito (n=8) isolados caracterizados pertencentes ao grupo de BAL (A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7 e KAC), cinco (n=5) apresentam morfologia de cocos (A1, A3, A4, A5, A6) e três (n=3) de bacilos (A2, A7, KAC). Todos isolados apresentaram resultados negativos para os testes de gelatinase, DNAse e hemolisina. Para o teste de susceptibilidade aos antimicrobianos, verificou-se que todos os isolados apresentaram suscetibilidade à vancomicina, penicilina, meropenem e cloranfenicol. Quanto a avaliação de propriedades tecnológicas, cinco (n=5) isolados (A1, A2, A3, A7 e KAC) apresentaram características antimicrobianas frente a todos os microorganismos utilizados. Cinco (n=5) isolados (A1, A4, A6, A7, KAC) apresentaram metabolismo homofermentativo. Com oo métodoo de DPPH e TBARS, foi observado que todos os isolados apresentaram capacidade antioxidante. Para o teste de autoagregação, coagregação e hidrofobicidade, os isolados A2 e KAC apresentaram os maiores percentuais destes parâmetros. Desta forma, dois (n=2) isolados (A2 e KAC) foram selecionados para realização dos testes de tolerância a diferentes concentrações ácidas, sais biliares e trato gastrointestinal simulado. Ambos isolados apresentaram tolerância ao trato gastrointestinal de forma simulada. Para o ensaio de citotoxicidade, o isolado A2 foi utilizado e após uma hora de exposição, a suspensão bacteriana não apresentou citotoxicidade nas linhagens de células VERO. Estes resultados são promissores, pois os micro-organismos em estudo apresentaram características desejáveis visando futuras aplicações em matrizes alimentares. Recent scientific researches have revealed a growing and notorious interest in the consumption of products that are beneficial to health. From this perspective, probiotics have gained great visibility, as they are live microorganisms that, when ingested in enough numbers, bring benefits to the consumer's health. Beverages such as kefir and kombucha have a variety of microorganisms with probiotic potential. The consumption of these can promote human health, and consequently, have been the object of study. Thus, the aim of this study was to isolate, identify and characterize lactic acid bacteria (LAB) from kefir and kombucha with probiotic potential and to evaluate in vitro safety aspects. The isolation and characterization of microorganisms were carried out using Gram stain, presence of catalase and morphology tests. Afterwards, safety aspects were evaluated through the activity of gelatinase, DNAse, hemolysin enzymes and susceptibility to clinically used antimicrobials. Furthermore, the cytotoxicity assay was performed using the MTT method using VERO cell lines. The technological properties were verified through the antimicrobial activity against pathogenic microorganisms by the well diffusion method, determination of the antioxidant capacity by the 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH) radical capture method and reaction to thiobarbituric acid (TBARS). To analyze the probiotic potential, analyzes of tolerance to conditions of the simulated gastrointestinal tract, tolerance to different acid categories and tolerance to bile salts were analyzed. According to the results obtained, of the eight (n=8) isolates formed belonging to the BAL group (A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7 and KAC), five (n=5) showed cocci morphology (A1, A3, A4, A5, A6) and three (n=3) of bacilli (A2, A7, KAC). All isolates showed negative results for gelatinase, DNAse and hemolysin tests. For the antimicrobial susceptibility test, it was found that all isolates showed susceptibility to vancomycin, penicillin, meropenem and chloramphenicol. Regarding the evaluation of technological properties, five (n=5) isolates (A1, A2, A3, A7 and KAC) showed antimicrobial characteristics against all the microorganisms used. Five (n=5) isolates (A1, A4, A6, A7, KAC) showed homofermentative metabolism. With the DPPH and TBARS method, it was observed that all isolates showed antioxidant capacity. For the self-aggregation, coaggregation and hydrophobicity test, isolates A2 and KAC presented the highest percentages of these parameters. Thus, two (n=2) isolates (A2 and KAC) were selected to perform the tolerance tests to different concentrations of acids, bile salts and simulated gastrointestinal tract. Both isolates showed tolerance to gastrointestinal transit in a simulated way. For the cytotoxicity assay, the isolate A2 was used and after one hour of exposure, the bacterial suspension showed no cytotoxicity in the VERO cell lines. These results are promising, as the microorganisms under study showed desirable characteristics for future applications in food matrices.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2021-11-06T00:30:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Maria_Fernanda_Fernandes_Siqueira.pdf: 1160366 bytes, checksum: 8025fde7762ed2d88fd40edca2716eb0 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2021-11-09T17:20:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Maria_Fernanda_Fernandes_Siqueira.pdf: 1160366 bytes, checksum: 8025fde7762ed2d88fd40edca2716eb0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2021-11-09T17:20:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Maria_Fernanda_Fernandes_Siqueira.pdf: 1160366 bytes, checksum: 8025fde7762ed2d88fd40edca2716eb0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2021-08-25 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O desenvolvimento de fungos em alimentos, além de causar alterações sensoriais consideráveis, também apresenta um potencial risco à saúde, devido a possível presença de micotoxinas. Buscando minimizar os riscos de contaminação microbiana nos alimentos, e a crescente demanda pela utilização de compostos mais naturais e sustentáveis nas indústrias do setor alimentício, a elaboração de embalagens ativas e biodegradáveis, ganha destaque. Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana do óleo essencial de tomilho (Thymus vulgaris) - OET contra fungos isolados de alimentos, bem como avaliar seu potencial como componente ativo em filme de acetato de celulose. A ação antifúngica do OET foi avaliada in vitro, através das metodologias de difusão em ágar, microatmosfera, concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM), com isolados fúngicos de queijos comercializados na região de Pelotas-RS. Os isolados obtidos foram identificados molecularmente como sendo Penicillium crustosum, Aspergillus flavus e Fusarium oxysporum. Nos testes de ação antifúngica de difusão em ágar e micro-atmosfera, o OET apresentou ação de inibição frente a todos os fungos testados, com zonas de inibição superiores a 10 mm. O isolado Peniculiium crustosum apresentou uma CIM de 1 µL/mL e CFM de 3 µL/mL, enquanto Aspergillus flavus apresentou uma CIM de 0,8 µL/mL e CFM de 4 µL/mL, e o isolado Fusarium oxysporum apresentou uma CIM de 0,7 µL/mL e CFM de 3 µL/mL. Nos testes in vitro da atividade do filme ativo, destaca-se a inibição sobre o isolado Penicillium crustosum que apresentou uma maior sensibilidade ao filme ativo e Fusarium oxysporum com menor sensibilidade, quando comparado aos demais isolados fúngicos. Conclui-se que o OET tem potencial ação antifúngica contra as diferentes espécies testadas, e quando adicionado em filme de acetato de celulose, mostrou-se eficaz no controle fúngico, principalmente, contra Fusarium oxysporum. The development of fungi in food, in addition to causing considerable sensory changes, also poses a potential health risk due to the possible presence of mycotoxins. Seeking to minimize the risks of microbial contamination in food, and the growing demand for the use of more natural and sustainable compounds in the food industry, the development of active and biodegradable packaging is highlighted. Therefore, the aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of thyme (Thymus vulgaris) essential oil - OET against fungi isolated from food, as well as to evaluate its potential as an active component in cellulose acetate film. The antifungal action of OET was evaluated in vitro, through the methodologies of diffusion in agar, microatmosphere, minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC), with fungal isolates from cheeses sold in the region of Pelotas-RS. The isolated fungi were molecularly identified as Penicillium crustosum, Aspergillus flavus and Fusarium oxysporum. In the antifungal action tests of diffusion in agar and micro-atmosphere, the OET showed an inhibitory action against all tested fungi, with inhibition zone greater than 10 mm. Peniculiium crustosum isolate had a MIC of 1 µL/mL and a CFM of 3 µL/mL, while Aspergillus flavus had a MIC of 0.8 µL/mL and a CFM of 4 µL/mL and Fusarium oxysporum isolate had a MIC of 0 .7 µL/mL and CFM 3 µL/mL In the in vitro tests of the active film activity, the inhibition on the Penicillium crustosum isolate stands out, which showed a greater sensitivity to the active film and Fusarium oxysporum with lower sensitivity, when compared to the other fungal isolates. It is concluded that OET has potential antifungal action against the different species tested, and when added to a cellulose acetate film, it was effective in fungal control, mainly against Fusarium oxysporum.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2019-04-17T13:08:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Nata - FINAL.pdf: 1450605 bytes, checksum: 61feee52aa74589438f07f2491218198 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2019-04-17T19:48:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Nata - FINAL.pdf: 1450605 bytes, checksum: 61feee52aa74589438f07f2491218198 (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-17T19:48:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Nata - FINAL.pdf: 1450605 bytes, checksum: 61feee52aa74589438f07f2491218198 (MD5) Previous issue date: 2019-02-27 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES As bactérias do gênero Campylobacter, principalmente C. jejuni, são as principais causadoras de gastroenterite de origem alimentar em humanos, sendo a carne de frango a maior fonte de infecção por esse micro-organismo. A resistência aos antimicrobianos é causa de preocupação em todo o mundo, e a Organização Mundial da Saúde já classifica a resistência de C. jejuni às fluorquinolonas como de alto risco. Com isso, os objetivos desse estudo foram verificar o perfil fenotípico e genotípico de resistência a antimicrobianos, bem como avaliar a presença de plasmídeos em isolados de C. jejuni provenientes da cadeia produtiva de frangos de corte da região sul do Rio Grande do Sul, Brasil. Foram utilizados 28 isolados de C. jejuni com diferentes perfis clonais obtidos por PFGE. A resistência fenotípica foi avaliada qualitativamente pela técnica de Disco-Difusão (DD) em ágar, sendo os isolados resistentes submetidos a técnica quantitativa de microdiluição em caldo, para avaliação da Concentração Inibitória Mínima (CIM). Para identificação dos genes associados à resistência aos antimicrobianos foi utilizada a técnica de polymerase chain reaction (PCR). Foram avaliadas, ainda, mutações no gene gyrA, por meio do sequenciamento da região de ligação das quinolonas ao seu alvo na bactéria. Dos isolados avaliados, 18,8% foram suscetíveis a todos os antimicrobianos testados, enquanto resistência a pelo menos um antimicrobiano foi observada em 82,2% (n=23) dos isolados, dos quais 53,57% (n=15) apresentaram perfil de multirresistência, sendo resistentes a três ou mais classes de antimicrobianos. A resistência as quinolonas foi a mais frequente, ocorrendo em 75% (n=23) dos isolados, enquanto 60,7% (n=17) foram resistentes as tetraciclinas. Para os macrolídeos avaliados, 21,4% (n=6) dos isolados apresentaram resistência fenotípica, sendo observada, ainda, resistência aos aminoglicosídeos (canamicina) e aos β-lactâmicos (ampicilina) em 39,3% (n=11) e 32,1% (n=9) dos isolados, respectivamente. Quanto aos mecanismos moleculares de resistência, os genes que compõem o operon cmeA, cmeB e cmeC foram encontrados, respectivamente, em 78,3% (n=18), 91,3 (n=21) e 100% (n=23) dos isolados que apresentaram resistência fenotípica no teste de DD. A bomba de efluxo cmeG também foi observada nos isolados de C. jejuni avaliados, estando presente em 91,3% dos isolados com resistência fenotípica as quinolonas. O gene apha-3 foi observado em 100% (n=11) dos isolados resistentes à canamicina. Além disso, verificou-se a presença de plasmídeos em 85,7% (n=24) dos isolados, albergando os genes tet(O) e apha-3 em 82,3% (n=14) e 81,8% (n=9) dos isolados que apresentaram resistência fenotípica à tetraciclina e à canamicina, respectivamente. Os resultados obtidos no presente estudo ressaltam a importância do monitoramento da resistência aos antimicrobianos em isolados de C. jejuni provenientes da cadeia produtiva de frangos, visto que a presença de isolados com perfil de resistência e multirresistência a antimicrobianos representa um grande risco à saúde pública. Campylobacter spp., mainly C. jejuni, are the main cause of foodborne gastroenteritis in humans, with poultry meat being the major source of infection by this microorganism. Antimicrobial resistance raises global concerns, and according the World Health Organization C. jejuni is a high-risk pathogen because of its resistance to fluoroquinolones. Therefore, the objectives of this study was to verify the phenotypic and genotypic profile of antimicrobial resistance, as well as, to evaluate the presence of plasmids in C. jejuni isolates from the productive chain of broilers (broiler farms, slaughterhouse and poultry meat products sold on the retail market) of the southern region of Rio Grande do Sul, Brazil. Twenty-eight isolates of C. jejuni with different PFGE patterns were studied. The phenotypic resistance was evaluated qualitatively by the agar Disk-Diffusion (DD) testing, and the resistant isolates were submitted to broth microdilution test, to quantify this minimum inhibitory concentration (MIC), the polymerase chain reaction (PCR) was used to identify genes associated with antimicrobial resistance. Mutations in the gyrA gene were evaluated by sequencing the binding region of the quinolones to their target in C. jejuni. Among the isolates evaluated, 17,8% (n=5) were susceptible to all antimicrobials evaluated, while resistance to at least one antimicrobial tested was observed in 82,2% (n=23) of the isolates, of which 53,57% (n=15) presented a multidrug resistance (MDR) profile, being resistant to three or more classes of antimicrobials. Resistance to quinolones was the most found, present in 75% (n=23) of C. jejuni isolates, while 60,7% (n=17) were resistant to tetracyclines in the disc-diffusion test. For the macrolides evaluated, 21,4% (n=6) of the isolates presented phenotypic resistance, resistance to aminoglycosides (kanamycin) and β-lactams (ampicillin) were observed in 39,3% (n=11) and 32,1% (n=9) of the isolates, respectively. In relation to the molecular mechanisms of resistance, the genes cmeA, cmeB and cmeC were found respectively in 78,3% (n=18), 91,3% (n=21) and 100% (n=23) resistant isolates in DD testing. The cmeG efflux pump was also observed in the isolates of C. jejuni, being present in 91,3% of the isolates with phenotypic resistance to quinolones. The apha-3 gene was observed in 100% (n=11) of the isolates with resistance to kanamycin. The presence of plasmids in 85,7% (n=24) of the isolates was also detected, harboring the tet(O) and apha-3 in 82,3% (n=14) and 81,8% (n=9) of the isolates that had phenotypic resistance to tetracycline and kanamycin, respectively. The results obtained in the present study highlight the importance of the monitoring of antimicrobial resistance in isolates of C. jejuni from the production chain of broilers, since the presence of isolates with resistance or MDR profile to antimicrobials represents a great risk to public health.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2020-05-27T00:48:52Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) _Fernanda_Bordini_Dissertacao.pdf: 1071126 bytes, checksum: 95b0206bb0a3f8b4c6bdc78fcd9ee5c5 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-05-27T22:53:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 _Fernanda_Bordini_Dissertacao.pdf: 1071126 bytes, checksum: 95b0206bb0a3f8b4c6bdc78fcd9ee5c5 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-05-27T22:53:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 _Fernanda_Bordini_Dissertacao.pdf: 1071126 bytes, checksum: 95b0206bb0a3f8b4c6bdc78fcd9ee5c5 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2019-02-22 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq É crescente a busca por novos alimentos probióticos, como bases lácteas e não-lácteas, com alta taxa de sobrevivência capazes de promover benefícios a saúde do consumidor. Para isto, o isolamento e a caracterização de micro-organismos tem sido amplamente estudado, assim como a busca por tecnologias capazes de armazenar e promover a proteção dessas células em condições adversas e, consequentemente, potencializar seus benefícios agregados. Como alternativa se utiliza a microencapsulação por spray drying, uma técnica de baixo custo que possibilita tanto a secagem, objetivando preservação, quanto a encapsulação para proteção a condições adversas. Diferentes materiais encapsulantes são utilizados e testados, a exemplo da pectina, do soro de queijo e da goma xantana. O objetivo deste estudo foi investigar o uso de soro de queijo associado a pectina e a xantana como agentes encapsulantes de Pediococcus pentosaceus P107 por spray drying. Para isto as células de Pediococcus pentosaceus P107 foram cultivadas em biorreator de bancada e após adicionadas aos materiais encapsulantes, soro de queijo, pectina e xantana. Todas soluções foram secas pelo equipamento spray dryer com temperatura de entrada de 100 °C, saída 68 °C com fluxo de alimentação em 250 mL/h. De acordo com os resultados a técnica eficiente na produção de três diferentes microcápsulas contendo Pediococcus pentosaceus P107, as quais promoveram diferentes níveis de proteção as células nos testes de armazenamento, passagem pelo trato gastrintestinal e tratamento térmico. Destaca-se a microcápsula de soro de queijo e xantana (WX) que forneceu proteção as células de Pediococcus pentosaceus P107 em alta viabilidade celular, e também melhor estabilidade ao armazenamento em -20 e 4 °C. Na temperatura de 25 °C a microcápsula de soro de queijo (W) e a célula livre apresentaram viabilidade durante o período de 110 dias, sendo encontradas contagens celulares acima do mínimo estabelecido para probióticos (>6 Log UFC.g-1) em alimentos. Já para o teste de resistência térmica a microcápsula de soro de queijo e pectina (WP) se mostrou efetiva na proteção, apresentando alta viabilidade celular no tratamento térmico (72 °C/ 15 seg). Além disso todas microcápsulas apresentaram alta eficiência de encapsulação, acima de 90%. Conclui-se que a técnica e a escolha dos parâmetros foram eficientes na preservação das células de Pediococcus pentosaceus P107 e também foi claramente eficiente, em conjunto a escolha dos materiais de parede, em fornecer proteção adicional as células, por meio da microencapsulação, perante aos diferentes testes realizados. Estes resultados sugerem a aplicação deste micro-organismo microencapsulado em uma ampla faixa de temperatura, sendo esta uma característica positiva para o futuro uso deste micro-organismo com potencial probiótico. There is a growing search for new probiotic foods, such as dairy and non dairy bases, with a high survival rate capable of promoting health benefits for consumers. For this, the isolation and characterization of microorganisms has been widely studied, as well as the search for technologies able to store and promote the protection of these cells in adverse conditions and, consequently, to potentiate their added benefits. As an alternative microencapsulation is used by spray drying, a low cost technique that allows both drying, aiming preservation, and encapsulation to protect against adverse conditions. Different encapsulating materials are used and tested, such as pectin, whey and xanthan gum. The objective of this study was to investigate the use of pectin associated whey and xanthan as encapsulating agents of Pediococcus pentosaceus P107 by spray drying. For this the cells of Pediococcus pentosaceus P107 were cultured in bench bioreactor and after addition to the encapsulating materials, whey, pectin and xanthan were added. All solutions were dried by the spray dryer equipment with inlet temperature of 100 ° C, outlet 68 ° C with feed flow in 250 mL / h. According to the results the efficient technique in the production of three different microcapsules containing Pediococcus pentosaceus P107, which promoted different levels of protection the cells in the tests of storage, passage through the gastrointestinal tract and heat treatment. Of note is the whey and xanthan (WX) microcapsule that provided protection to Pediococcus pentosaceus P107 cells in high cell viability, and also improved storage stability at -20 and 4 ° C. At the temperature of 25 ° C the whey microcapsule (W) and the free cell presented viability during the period of 110 days, being found cell counts above the minimum established for probiotics (> 6 Log CFU.g-1) in food. As for the thermal resistance test, the microcapsule of whey and pectin (WP) was effective in the protection, presenting high cellular viability in the heat treatment (72 ° C / 15 sec). In addition, all microcapsules showed high encapsulation efficiency, above 90%. It was concluded that the technique and the choice of the parameters were efficient in the preservation of Pediococcus pentosaceus P107 cells and it was also clearly efficient, together with the choice of wall materials, to provide additional protection to the cells through microencapsulation, performed. These results suggest the application of this microencapsulated microorganism over a wide temperature range, which is a positive feature for the future use of this microorganism with probiotic potential.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2018-08-13T19:13:59Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_garcia_marcelle_oliveira.pdf: 1055386 bytes, checksum: 1f647fb5a10c4cf0687a2319f62ebb9b (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-08-16T19:38:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_garcia_marcelle_oliveira.pdf: 1055386 bytes, checksum: 1f647fb5a10c4cf0687a2319f62ebb9b (MD5) Made available in DSpace on 2018-08-16T19:38:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_garcia_marcelle_oliveira.pdf: 1055386 bytes, checksum: 1f647fb5a10c4cf0687a2319f62ebb9b (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 As doenças transmitidas por alimentos são um grande problema de saúde pública. Nos últimos anos, estudos têm sido realizados com frutas nativas do Brasil e direcionados à descoberta de novos agentes antimicrobianos, provenientes de plantas, para que possam ser utilizados como antimicrobianos naturais por apresentarem compostos bioativos na sua composição. O objetivo deste estudo foi caracterizar quimicamente, avaliar e comparar a atividade antimicrobiana de óleos essenciais e extratos metanólicos de Psidium cattleianum S. (araçá) e Eugenia uniflora L. (pitanga) contra cepas padrão e isolados provenientes de alimentos cárneos de Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. Através da cromatografia gasosa acoplada a espectrofotometria realizada para os óleos essenciais foi identificado 21 compostos para P. cattleianum S., sendo o beta-cariofileno (20,40%) o principal e 14 constituintes para E. uniflora L. com o elixeno (24,47%) como majoritário. Já na caracterização química dos extratos utilizando cromatografia por HPLC-UV encontraram como ácidos fenólicos 2,95mg.g- 1 de ácido gálico (E. uniflora L.) e 2,08mg.g-1 de ácido cafeico (P. cattleianum S.). Na determinação de compostos fenólicos totais, os resultados mostraram 1,72mg.g-1 de fenóis totais para o extrato de E. uniflora L. e 7,1mg.g-1 para P. cattleianum S.. A análise do perfil de sensibilidade das cepas e isolados mostrou que os isolados e cepa padrão de Salmonella apresentaram 100% de sensibilidade a pelo menos 4 antimicrobianos (estreptomicina, gentamicina, norfloxacina e levofloxacina), os isolados e a cepa padrão de S. aureus apresentaram 100% de sensibilidade frente a norfloxacina, ciprofloxacina e gentamicina; a cepa padrão e os isolados de E. coli foram sensíveis a onze dos dezesseis antimicrobianos avaliados; e a cepa e os isolados de Listeria apresentaram 100% de sensibilidade a cloranfenicol, gentamicina, trimetoprima e levofloxacina. Foram realizadas análises microbiológicas: potencial antimicrobiano, concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM), sendo que nos testes o óleo essencial de E. uniflora L. foi utilizado em concentrações variando entre 270mg.mL-1 a 1,6mg.mL- 1, P. cattleianum entre 291,3mg.mL-1 a 1,7mg.mL-1. Já para os extratos, o extrato metanólico de E. uniflora L. variando entre 251,7mg.mL-1 a 1,5mg.mL-1 e o de P. cattleianum S. entre 244,4mg.mL-1 a 1,4mg.mL-1. Os resultados mostraram que as concentrações de CIM de 107,8mg.mL-1 para o extrato de E. uniflora L., de 244,4mg.mL-1 para o extrato de P. cattleianum S., 291,3 mg.mL-1 para o óleo essencial de P. cattleianum S. e 54 mg.mL-1 para o óleo de E. uniflora L. foram as concentrações que garantiram a inibição de todos os micro-organismos testados. O óleo essencial de E. uniflora L. foi o mais eficaz para inibir o crescimento de bactérias de importância alimentar, pois apresentou a concentração de 54mg.mL-1 como a menor concentração suficiente para inibir todas as bactérias testadas e 270mg.mL-1 para eliminá-las Foodborne diseases are a major public health problem. In the last years, studies have been carried out with Brazilian native fruits and directed to the discovery of new antimicrobial agents from plants, so that they can be used as natural antimicrobials because they present bioactive compounds in their composition. The objective of this study was to characterize chemically, evaluate and compare the antimicrobial activity of essential oils and methanolic extracts of Psidium cattleianum S. (araçá) and Eugenia uniflora L. (pitanga) against standard strains and isolated strains of Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella spp. and Listeria monocytogenes. Gas chromatography coupled to spectrophotometry was performed for the essential oils 21 compounds were identified for P. cattleianum S., with betacaryophyllene (20,40%) being the main constituent and 14 constituents for E. uniflora L., with elixene (24,47%) as the majority. In the chemical characterization of the extracts using HPLC-UV chromatography, were found as phenolic acids, 2.95 mg.g-1 of gallic acid (E. uniflora L.) and 2.08 mg.g-1 of caffeic acid (P. cattleianum S.). In the determination of total phenolic compounds, the results showed 1.72mg.g-1 of total phenols for the extract of E. uniflora L. and 7.1mg.g-1 for P. cattleianum S.. Analysis of the sensitivity profile of strains and isolates showed that the isolates and standard strain of Salmonella showed 100% sensitivity to at least 4 antimicrobials (streptomycin, gentamicin, norfloxacin and levofloxacin), the isolates and the standard strain of S. aureus presented 100% sensitivity to norfloxacin, ciprofloxacin and gentamicin; the standard strain and E. coli isolates were sensitive to eleven of the sixteen antimicrobials evaluated; and the strain and Listeria isolates showed 100% sensitivity to chloramphenicol, gentamicin, trimethoprim and levofloxacin. Microbiological analyzes were performed: antimicrobial potential, minimum inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC), and in the tests the essential oil of E. uniflora L. was used in concentrations varying between 270mg.mL-1 to 1.6mg.mL -1, P. cattleianum S. from 291.3mg.mL-1 to 1.7mg.mL-1. For the extracts, the methanolic extract of E. uniflora L. ranging from 251.7mg.mL-1 to 1.5mg.mL-1 and P. cattleianum S. from 244.4mg.mL-1 to 1, 4mg.mL-1. The results showed that MIC concentrations of 107.8mg.mL-1 for the extract of E. uniflora L., 244.4mg.mL-1 for extract of P. cattleianum S., 291.3mg.mL-1 for P. cattleianum S. essential oil and 54mg.mL-1 for E. uniflora L. oil were the concentrations that ensured the inhibition of all tested microorganisms. The essential oil of E. uniflora L. was the most effective to inhibit the growth of food-grade bacteria, as it presented the concentration of 54mg.mL-1 as the lowest concentration sufficient to inhibit all the bacteria tested and 270mg.mL-1 to eliminate them.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2018-08-13T19:38:54Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Letícia-Final.pdf: 1670426 bytes, checksum: ab2b251db5406cfbebb79dcc3b6f9add (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-08-16T19:59:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Letícia-Final.pdf: 1670426 bytes, checksum: ab2b251db5406cfbebb79dcc3b6f9add (MD5) Made available in DSpace on 2018-08-16T19:59:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Letícia-Final.pdf: 1670426 bytes, checksum: ab2b251db5406cfbebb79dcc3b6f9add (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O emprego das Boas Práticas de Fabricação na indústria de alimentos, como a higienização de superfícies, é importante para evitar a formação de biofilmes. Campylobacter jejuni, que é o principal agente etiológico da campilobacteriose, pode sobreviver em condições adversas no ambiente pela capacidade de formação de biofilme. As bactérias formadoras de biofilme podem adquirir resistência à compostos utilizados como sanitizantes na etapa de sanitização, como o cloreto de benzalcônio (CB). Assim, faz-se necessário a busca por novos compostos com ação antibacteriana que possam ser utilizados em alternativa aos sanitizantes sintéticos. Os extratos de plantas vêm sendo amplamente estudados devido às suas características antimicrobianas e por serem compostos naturais. O extrato metanólico de Butia odorata Barb. Rodr. (EMB) teve sua ação antibacteriana comprovada em estudos anteriores. Portanto, os objetivos deste estudo foram avaliar a influência da superfície, temperatura, atmosfera e co-cultura com Pseudomonas aeruginosa sobre a formação de biofilme de Campylobacter jejuni isolados de abatedouro de frangos da região sul do Rio Grande do Sul, bem como identificar a presença de alguns genes relacionados à formação de biofilme nesses isolados. Também objetivou-se avaliar a suscetibilidade desses isolados ao EMB e ao CB, através do teste qualitativo de disco difusão em ágar para o EMB, e da concentração inibitória mínima (CIM) e da concentração bactericida mínima (CBM) para o EMB e para o CB. A atmosfera não afetou a formação de biofilme monoespécie de C. jejuni tanto em poliestireno como em aço inoxidável. Houve maior formação de biofilme em temperaturas que não são as ótimas para a multiplicação d e C. jejuni. A forma como P. aeruginosa foi inoculada para formar biofilmes duoespécie com C. jejuni (concomitante ou pré-formado por P . aeruginosa), não influenciou a formação de biofilme pelos isolados. Nos biofilmes duo-espécie com P. aeruginosa, as maiores contagens de biofilme por C. jejuni em aço inoxidável ocorreram a 25 oC. Os sete isolados de C. jejuni avaliados possuem 10 genes envolvidos no processo de formação de biofilme, porém o gene katA não foi encontrado em três isolados, e o gene kpsM não foi encontrado em um isolado, o que não afetou a formação de biofilme por esses isolados. O EMB apresentou atividade antibacteriana contra os sete isolados no teste qualitativo de disco difusão em ágar, com halos de inibição acima de 23 mm. A CIM do EMB ficou entre 83,3 e 166,6 μL.mL-1, e a CBM foi o mesmo valor de CIM em todos os isolados. Já para o CB, o valor de CIM ficou entre 1 e 2 μg.mL-1, e a CBM variou entre 1 e 4 μg.mL-1 entre os isolados. Dessa forma, o EMB pode tornar-se uma boa alternativa ao CB empregado na etapa de sanitização em indústrias de alimentos. The employment of good manufacturing practice in the food industry, as surfaces sanitization, is important to avoid the biofilm formation. Campylobacter jejuni, which is the main etiological agent of campilobacteriosis, can survives in adverse environmental conditions by capacity of biofilm formation. Biofilm forming bacteria can acquire resistance to compounds used as sanitizers in sanitization step, such as benzalkonium chloride (BC). Thereby, it is necessary the search for new compounds with antibacterial activity which can be used in alternative to syntetic sanitizers. The plants extracts have been widely studied due to it’s antimicrobial characteristics and for being natural compounds. The Butia odorata Barb. Rodr. methanolic extract (BME) had it’s antibacterial activity proven in studies performed previously. Therefore, the aims of this study were evaluate the factors that influence of surface, temperature, atmosphere and co-culture with Pseudomonas aeruginosa on biofilm formation in Campylobacter jejuni isolated from poultry slaughterhouse of Southern Rio Grande do Sul, Brazil, as well identify the presence of some genes related to biofilm formation in these isolates. Moreover, was aimed to evaluate the susceptibility of these isolates to the BME and to the BC, through the agar disc diffusion qualitative test for BME, and minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) for BME and BC. The atmosphere did not affected the monospecies biofilm formation both in polystyrene and stainless steel. There was greater biofilm formation in temperatures that are not the optimals for C. jejuni growth. The way how P. aeruginosa was inoculated to form dual-species biofilms with C. jejuni (concomitant or preformed by P. aeruginosa) did not influenced the biofilm formation by the isolates. In duo-species biofilms with P. aeruginosa, the higher biofilm counts of C. jejuni in stainless steel occurred at 25 oC. The seven isolates had 10 genes that are involved in biofilm formation process, but the katA gene was not found in three isolates, and the kpsM gene was not observed in one isolate, which did not affected the biofilm formation by these isolates. The BME presented antibacterial activity against the seven C. jejuni isolates tested in the qualitative test of agar disc diffusion, resulting in inhibition halos above of 23 mm. The MIC of BME ranged between 83,3 and 166,6 μL.mL-1, and the MBC was the same value that MIC in all isolates. Already for BC, the MIC value stay between 1 and 2 μg.mL-1, and the MBC value ranged between 1 and 4 μg.mL- 1 among isolates. In this way, the BME can become a good alternative to the BC employed in sanitization step in food industries.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2018-08-14T18:01:06Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Charlene - VERSÂO Final CD.docx: 1141880 bytes, checksum: 525cb42fb5cb9562edb967f1bbd44c49 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-08-17T12:31:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Charlene - VERSÂO Final CD.docx: 1141880 bytes, checksum: 525cb42fb5cb9562edb967f1bbd44c49 (MD5) Made available in DSpace on 2018-08-17T12:31:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Charlene - VERSÂO Final CD.docx: 1141880 bytes, checksum: 525cb42fb5cb9562edb967f1bbd44c49 (MD5) Previous issue date: 2017-12-15 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A procura por bactérias ácido-láticas (BAL) com propriedades benéficas a saúde, melhoria nas características sensoriais, digestibilidade, qualidade nutricional, bem como na preservação dos alimentos tem sido o foco de intensas pesquisas na última década.O isolamento e caracterização de novas espécies são vantajosos para obtenção de linhagens com características taxonômicas, tecnológicas e funcionais diferenciadas. O objetivo deste trabalho foi avaliar fatores de virulência e atividade probiótica do isoladoEnterococcus durans(LAB18s), proveniente de queijo minas frescal, bem como isolar, identificar, caracterizar, avaliar o potencial probiótico e os aspectos de segurança de isolados de BAL, provenientes de queijo ricota, para possível aplicação como cultura probiótica. Verificou-se que o isolado LAB18séhomofermentativo, lipase positiva e gelatinase negativa, possui atividade antagonista contra Salmonella Enteritidis, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus eEscherichia coli. Não foi detectada a presença do operon icaADBC, os quais são relacionados à formação de biofilme,indicando segurança em relação a um possível uso em alimentos. Além disso, o isolado LAB18scarreia dois genes de enterocinas, o gene L50A/B e o gene P. O isolado R7, obtido de queijo ricota, foi identificado molecularmente como Lactococcus lactis subsp lactise apresentou característicasprobióticas nasanálises de tolerância ao pH ácido, sais biliares, suco gástrico simulado e suco intestinal simulado. Além disso, foi sensível aos seis antimicrobianos testados, não forma biofilme, é homofermentativo, bem como não apresentou atividade hemolítica, nem das enzimas DNAse, gelatinase e lipase. O isolado R7 apresentou ainda, capacidade de autoagregação, coagregação e hidrofobicidade, indicando potencial para ser utilizado como probiótico. Da mesma forma, apresentou atividade antagonista contra Salmonella Enteritidis,Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus eEscherichia coli e atividade antioxidante. Por meio dos resultados obtidos conclui-se que, tanto o LAB18s isolado de queijo minas frescal quanto o R7 isolado de queijo ricotaapresentaram características probióticas e aspectos de segurança compatíveis para futura utilização como culturas iniciadoras em alimentos. São resultados promissores, no entanto, há necessidade de pesquisa de genes codificadores de virulência e toxicidade para possível aplicação. The search for new lactic-acid bacteria (LAB) with beneficial properties has been the focus of intensive research in the current years. The isolation and characterization of new species are advantageous to obtain lineages with different taxonomic, technological and functional properties. The am of this study was to evaluate the virulence and antimicrobial activity of Enterococcus durans (LAB18s) isolated from cheese "minas frescal", as well as to isolate, identify, characterize and evaluate the probiotic potential and safety aspects of a new strain of BAL from Cheese "ricotta type" for the possible application as a probiotic culture. In the results of isolateLAB18s, gelatinase negative, lipase positive, homofermentative activity, antagonistic activity against the Salmonella Enteritidis, Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus were observed in the well diffusion assay by well, and activity against E. coli, S. Enteritidis, L. monocytogenes by the "Spot on the lawn" method. The presence of the icaADBC operon was not detected indicating safety in relation to a possible alimentary use; the presence of two enterocin genes, the L50A/B gene and the P gene werepronounced. The R7 strain isolated from ricotta cheese, identified as Lactococcus lactis subsp lactis, presented probiotic characteristics against tolerance analysis at acid pH, bile salts, simulated gastric juice and simulated intestinal juice. It was classified as sensitive against all antibiotics tested, non-biofilm forming, homofermentative, presented negative activity for analysis of hemolysis, DNAse, gelatinase and lipase. The isolate R7 also presented self-aggregation, coagregation and hydrophobicity capacity indicating potential to be used as probiotic. Likewise, it presented antagonistic activity against Salmonella Enteritidis, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus eEscherichia coli, and antioxidant activity both by the TBARS and DPPH methods. By means of the results obtained, it was concluded that both LAB18s isolated from fresh minas cheese and R7 isolated from ricotta cheese presented probiotic characteristics and safety aspects compatible for future use as starter cultures in foods. There are promising results, however, there is a need for research on genes coding for virulence and toxicity for possible application.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2017-07-07T15:23:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) TESE - Dannenberg 2017.pdf: 1125673 bytes, checksum: 659297f040c56e3fca1291a9ee608e18 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-07-17T19:55:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 TESE - Dannenberg 2017.pdf: 1125673 bytes, checksum: 659297f040c56e3fca1291a9ee608e18 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2017-07-17T19:55:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE - Dannenberg 2017.pdf: 1125673 bytes, checksum: 659297f040c56e3fca1291a9ee608e18 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-05-30 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A utilização de conservantes naturais bem como de embalagens ativas vêm ganhando espaço na indústria de alimentos. Neste trabalho, objetivou-se avaliar as características antimicrobianas do óleo essencial de pimenta rosa (OEPR) e, utilizá- lo como componente ativo na elaboração de filmes para aplicação no desenvolvimento de embalagens bioconservantes para alimentos. Através da análise cromatográfica (CG/MS), detectou-se 18 compostos, 4 monoterpenos e 14 sesquiterpenos, dos quais β-mirceno (41%), β-cuvebeno (12%) e Limoneno (9%) foram os majoritários. Na atividade antimicrobiana do OEPR em ágar e caldo, verificou-se ação contra cinco bactérias patogênicas. A CIM (Concentração Inibitória Mínima) para S. aureus e L. monocytogenes foi de 0,68 e 1,36 mg/mL, respectivamente e a CBM (Concentração Bactericida Mínima) foi de 2,72 mg/mL, para ambas. Em micro-atmosfera a redução foi de 100% no desenvolvimento de S. aureus e L. monocytogenes e, 16 e 15% para E. coli e S. Typhimurium. O tempo de contato necessário para a CBM agir sobre bactérias Gram positivas foi inferior ao período de 12 h, e bactérias Gram negativas não foram inibidas. Além disso, foram verificadas alterações na permeabilidade e integridade da membrana citoplasmática de todas as bactérias avaliadas, indicando que o dano no envoltório celular é um dos seus mecanismos de ação. O OEPR foi aplicado como componente ativo em filmes de acetato de celulose, avaliados in vitro (ágar, caldo e micro-atmosfera) e in situ (queijo mozarela fatiado) contra bactérias patogênicas. Foi verificado que concentrações de 2, 4 e 6% de OEPR na matriz polimérica, conferiu atividade em todos os meios avaliados contra L. monocytogenes e S. aureus. Escherichia coli foi sensível em meio liquido e em micro-atmosfera, enquanto S. Typhimurium não demonstrou sensibilidade aos filmes antibacterianos. A inibição in situ, demonstrou que a afinidade entre as moléculas apolares do OEPR e os componentes lipídicos do queijo permite a migração do OE do interior do polímero para a superfície facilitando sua dispersão no alimento, indicando favorável sua aplicação como embalagem ativa. The use of natural preservatives as well as active packaging has sparked interest in the food industry. The objective of this work was to evaluate the antimicrobial characteristics of the essential oil of pink pepper (PPEO) and to use it as an active component in the elaboration of films for application in the development of bioconservant packaging for food. Through the chromatographic analysis (GC/MS) 18 compounds, 4 monoterpenes and 14 sesquiterpenes were detected, of which β- myrcene (41%), β-cuvebene (12%) and Limonene (9%) were the majority. In the antimicrobial activity of PPEO in agar and broth, action was observed against five pathogenic bacteria. The MIC for S. aureus and L. monocytogenes was 0.68 and 1.36 mg/mL, and the MBC was 2.72 mg/mL for both. In micro-atmosphere the reduction was 100% in the development of S. aureus and L. monocytogenes, and 16 and 15% for E. coli and S. Typhimurium. The contact time required for MBC to act on Gram positive bacteria was lower than the 12 h period, and Gram negative bacteria were not inhibited. In addition, changes in the permeability and integrity of the cytoplasmic membrane of all evaluated bacteria were observed, indicating that damage in the cellular envelope is one of its mechanisms of action. PPEO was applied as an active component in cellulose acetate films evaluated in vitro (agar, broth and micro-atmosphere) and in situ (sliced mozzarella cheese) against pathogenic bacteria. It was found that concentrations of 2, 4 and 6% PPEO in the polymer matrix conferred activity on all média evaluated against L. monocytogenes and S. aureus. Escherichia coli was sensitive in liquid medium and in microatmosphere, while S. Typhimurium showed no sensitivity to antibacterial films. In situ inhibition has demonstrated that the affinity between the OEPR apolar molecules and the lipid components of the cheese allows migration of the OE from the interior of the polymer to the surface and facilitates its dispersion in the food, indicating its favorable application as an active packaging. Keywords: Essential oil; Antibacterial activity

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2017-03-27T13:33:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Helena Reissig Soares Vitola.pdf: 1434457 bytes, checksum: 51af522eb00ca36c96559b364913e8d2 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-03-28T20:26:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação Helena Reissig Soares Vitola.pdf: 1434457 bytes, checksum: 51af522eb00ca36c96559b364913e8d2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2017-03-28T20:26:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Helena Reissig Soares Vitola.pdf: 1434457 bytes, checksum: 51af522eb00ca36c96559b364913e8d2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Bactérias ácido lácticas, com potencial probiótico, são consideradas de grande interesse para o mercado de alimentos funcionais, os quais estão em expansão, devido à contribuição desses alimentos à saúde dos indivíduos. Objetivou-se no presente estudo isolar, caracterizar bactérias acido lácticas com potencial probiótico e imobilizar em grãos de soja, a fim de manter sua viabilidade durante o armazenamento. Foram realizados testes para isolamento e caracterização (coloração de Gram, presença de catalase, propriedades tecnológicas, fermentação de carboidratos) dos isolados a partir de silagem de colostro bovino; avaliação dos parâmetros de segurança microbiológica (atividade das enzimas, hemolisina, DNase e gelatinase, susceptibilidade a antimicrobianos de uso clínico e perfil plasmidial), avaliação do potencial probiótico (simulação da tolerância ao trânsito gastrointestinal, capacidade de auto-agregação, co-agregação, hidrofobicidade, atividade da enzima β galactosidase e atividade antagonista), avaliação da produção de exopolissacarídeos, identificação molecular, imobilização celular utilizando como suporte grãos de soja e microscopia eletrônica de varredura do biocatalizador. Dos isolados caracterizados como bactérias ácido lácticas, seis foram eleitos em testes preliminares (potencial tecnológico, resistência a diferentes concentrações de bile e fermentação de açúcares), três apresentaram-se seguros microbiológicamente e um caracterizou-se como potencialmente probiótico. A bactéria selecionada para imobilização, SCL3, pertencente ao gênero Lactobacillus da espécie casei, produtora de exopolissacarídeo, passou por processo fermentativo que permitiu a adsorção de células na superfície dos grãos de soja. A imobilização possibilitou a viabilidade das células em concentração de 6,23 log UFC.g -1 e 6,71 log UFC.g -1 até o final do 300 dia de armazenamento após secagem (liofilização) e em refrigeração, respectivamente. A microscopia eletrônica de varredura permitiu a visualização das células aderidas a superfície dos grãos de soja. Lactic acid bacteria, with probiotic potential, are considered of great interest for the functional food market, which are expanding due to the contribution of these foods to the health of individuals. The objective of this study was to isolate, characterize lactic acid bacteria with probiotic potential and immobilize them in soybean grains, in order to maintain their viability during storage. Isolation and characterization tests (Gram staining, presence of catalase, technological properties, carbohydrate fermentation) of the isolates were carried out from bovine colostrum silage; Evaluation of microbiological safety parameters (enzyme activity, hemolysin, DNase and gelatinase, susceptibility to antimicrobials of clinical use and plasmid profile), evaluation of probiotic potential (simulation of gastrointestinal transit tolerance, selfaggregation capacity, co-aggregation, Hydrophobicity, β-galactosidase enzyme activity and antagonist activity), evaluation of exopolysaccharide production, molecular identification, cellular immobilization using as support soybean grains and scanning electron microscopy of the biocatalyst. Of the isolates characterized as lactic acid bacteria, six were selected in preliminary tests (technological potential, resistance to different concentrations of bile and fermentation of sugars), three were microbiologically safe and one was characterized as potentially probiotic. The bacterium selected for immobilization, SCL3, belonging to the genus Lactobacillus of the casei species, exopolysaccharide producer, undergoes a fermentative process that allowed the adsorption of cells on the surface of the soybean grains. The immobilization made possible the viability of the cells at a concentration of 6.23 log CFU.g-1 and 6.71 log CFU.g-1 until the end of the 300 day of storage after drying (lyophilization) and in refrigeration, respectively. Scanning electron microscopy allowed the cells to adhere to the surface of the soybean grains.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2017-04-24T11:45:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Tassiana Ramires.pdf: 1728606 bytes, checksum: a63d0903f11cb3f858c5a7fd4e32ad97 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-04T18:58:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação Tassiana Ramires.pdf: 1728606 bytes, checksum: a63d0903f11cb3f858c5a7fd4e32ad97 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2017-05-04T18:58:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Tassiana Ramires.pdf: 1728606 bytes, checksum: a63d0903f11cb3f858c5a7fd4e32ad97 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Campylobacter termofílicos são, atualmente, as principais bactérias causadoras de doenças gastrointestinais em todo o mundo. Esse grupo é assim denominado devido a sua temperatura ótima de multiplicação oscilar entre 42 °C e 43 °C, sendo Campylobacter jejuni, C. coli, C. lari e C. upsaliensis, as principais espécies envolvidas nos casos de campilobacteriose em humanos. Dentre essas espécies, a mais relacionada à essa doença é C. jejuni, seguida por C. coli. O principal reservatório desses micro-organismos são as aves, principalmente os frangos, possivelmente pela temperatura corporal desses animais ser similar à temperatura ótima para Campylobacter termofílicos. Com isso, o objetivo desse estudo foi avaliar a ocorrência, a diversidade genética, o perfil de resistência a antimicrobianos e a presença de genes associados à virulência em isolados de Campylobacter termofílicos provenientes de frangos de corte e na cama de aviário em granjas aviárias da região sul do Rio Grande do Sul, Brasil. Um total de 48 amostras foram coletadas em três diferentes granjas (A, B e C), incluindo uma amostra de swab de arrasto da cama do aviário e 15 pools de amostras de swab de cloaca em cada granja. Das três granjas amostradas, apenas a granja C apresentou contaminação por Campylobacter termofílicos, sendo todos os isolados identificados por técnicas fenotípicas e moleculares como C. jejuni. Dessas 16 amostras positivas, obtiveram-se 28 isolados, sendo 16 pelo isolamento em ágar Preston e 12 do ágar mCCD. A diversidade genética entre os isolados foi avaliada por PFGE, verificando-se que todos os isolados apresentaram um único padrão de macrorestrição, sugerindo clonalidade entre os isolados e a presença de apenas uma fonte de infecção por Campylobacter nessa granja. O perfil de resistência a antimicrobianos foi avaliado pelo teste de disco difusão em ágar, utilizando-se oito antimicrobianos distintos, de três classes diferentes: tetraciclina, quinolonas e macrolídeos. Os isolados apresentaram perfil similar de resistência a antimicrobianos, sendo resistentes às quinolonas e tetraciclinas e sensíveis aos macrolídeos. Devido a relação clonal e ao perfil de resistência similar, um isolado representativo foi selecionado para detecção dos genes de virulência. A técnica de PCR foi utilizada para detectar a presença dos genes ciaB, cadF, cdtA, cdtB e cdtC, sendo o isolado selecionado positivo todos os genes pesquisados. Dessa forma, a presença de C. jejuni resistente a antimicrobianos e com potencial de virulência em frangos de corte prontos para o abate e na cama de aviário durante o período de produção é um risco à saúde pública, pois esses micro-organismos podem ser introduzidos no ambiente do abatedouro e contaminar as carcaças durante o abate. Thermophilic Campylobacter are currently the leading bacteria causing of gastrointestinal diseases worldwide. This group is so named because its optimal multiplication temperature oscillates between 42 °C and 43 °C, being Campylobacter jejuni, C. coli, C. lari and C. upsaliensis, the main species involved in cases of human campylobacteriosis. Among these species, the most related to this disease is C. jejuni, followed by C. coli. The main reservoir of these microorganisms are birds, especially chickens, possibly because the body temperature of these animals coincides with the optimal temperature for thermophilic Campylobacter. Therefore, the aim of this study was to verify the occurrence, genetic relationship, antimicrobial susceptibility, and the presence of virulence genes in thermophilic Campylobacter from broilers and broiler bedding from the southern region of Rio Grande do Sul, Brazil. A total of 48 samples were collected in three different farms (A, B and C), which comprising one sample of drag swab and 15 pools of cloacal swabs in each farm. From the three farms sampled, only the farm C showed thermophilic Campylobacter contamination. All isolates were identified by phenotypic and molecular techniques such as C. jejuni. Of these 16 positive samples, 28 isolates were obtained, 16 being isolated by Preston agar and 12 by mCCD agar. The genetic diversity among the isolates was evaluated by PFGE, and it was observed that all the isolates belonged to the same macrorestriction pattern, suggesting clonality among the isolates and the presence of only one source of Campylobacter infection in this farm. The antimicrobial resistance profile was evaluated by the agar disc diffusion test using eight distinct antimicrobial agents from three different classes: tetracyclines, quinolones and macrolides. The isolates presented a similar antimicrobial resistance profile, being resistant to quinolones and tetracyclines and susceptible to macrolides. As the isolates shared the same PFGE pattern and similar resistance profile, a representative isolate was chosed for investigation of virulence genes. A PCR assay was carried out aiming to identify the presence of ciaB, cadF, cdtA, cdtB and cdtC virulence genes and all the genes evaluated were found. Thus, the presence of C. jejuni resistant to antimicrobial agents and harboring virulence genes in broilers and broiler farm during the broiler production period may represents a potential risk to public health, because these microorganisms can be introduced into the abattoir environment and may contaminate the carcasses during slaughter.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2017-03-14T17:41:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Darla Silveira Volcan Maia.pdf: 1194381 bytes, checksum: b604e15daa48092534ea10a3647416c8 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-03-17T22:15:15Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação Darla Silveira Volcan Maia.pdf: 1194381 bytes, checksum: b604e15daa48092534ea10a3647416c8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2017-03-17T22:15:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Darla Silveira Volcan Maia.pdf: 1194381 bytes, checksum: b604e15daa48092534ea10a3647416c8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-01 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq A demanda por alimentos livres de conservantes químicos sintéticos tem aumentado. Nos últimos anos, vários estudos foram realizados a fim de se obter compostos antimicrobianos naturais. Alguns estudos foram realizados com frutas nativas do Brasil, no entanto, não existem estudos avaliando o potencial antibacteriano do butiá. O objetivo deste estudo foi prospectar a atividade antibacteriana de extratos de butiá (Butia odorata) com diferentes polaridades e caracterizar quimicamente o extracto com a melhor atividade. Um extrato hexânico e um metanólico de butiá foram avaliados quanto à sua atividade antibacteriana contra três bactérias Gram-positivas (Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus e Bacillus cereus) e três bactérias Gram-negativas (Salmonella Typhimurium, Escherichia coli O157:H7 e Pseudomonas aeruginosa), pelo método de difusão em ágar, Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM). Ambos extratos apresentaram atividade antibacteriana, entretanto, o extrato hexânico (EHB) apresentou desempenho superior, portanto realizou-se a caracterização química por CG-MS deste extrato. Interessantemente, o EHB apresentou maior atividade contra bactérias Gram-negativas, sendo E. coli O157:H7, a mais sensível (CBM 5 µL.mL-1 ). Entre as bactérias Gram-positivas, S. aureus (CBM 20 μL.mL-1 ) foi a mais sensível. Os fitoesteróis representaram 51% do EHB, sendo gama-sitosterol o composto predominante, constituindo 22% do extrato. Demand for synthetic chemical preservative free foods has increased. In recent years several studies have been conducted in order to obtain natural antimicrobial compounds. Some studies were performed with native fruit from Brazil, however there are no studies evaluating the potential antibacterial of jelly palm fruits (butiá). The objective of the study was exploring the antibacterial activity of butiá (Butia odorata) extracts with different polarities and chemically characterize the extract with the best activity. A hexane and a methanol extract of butiá were evaluated for their antibacterial activity against three Grampositive (Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, and Bacillus cereus) and three Gram-negative bacteria (Salmonella Typhimurium, Escherichia coli O157:H7, and Pseudomonas aeruginosa) by the agar diffusion method, Minimal Inhibitory Concentration (MIC), Minimal Bactericidal Concentration (MBC). Both extracts showed antibacterial activity, however of hexane extract (BHE) showed superior performance, therefore the chemical characterization by CG-MS for this extract. Interestingly, the BHE higher activity against Gram-negative bacteria, and E. coli O157:H7 was the most sensitive (MBC 5 μL.mL-1 ). Of the Gram-positive bacteria, S. aureus (MBC 20 μL.mL-1 ) was the most sensitive. Phytosterols represented 51% of the BHE and gamma-sitosterol was the predominant compound constituting 22% of the extract.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2022-09-12T18:31:24Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) TESE_KARLA_SEQUEIRA_MENDONCA.pdf: 22555572 bytes, checksum: 39ae3455080f827f04832a6a0f708433 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2022-09-23T20:43:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 TESE_KARLA_SEQUEIRA_MENDONCA.pdf: 22555572 bytes, checksum: 39ae3455080f827f04832a6a0f708433 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2022-09-23T20:43:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE_KARLA_SEQUEIRA_MENDONCA.pdf: 22555572 bytes, checksum: 39ae3455080f827f04832a6a0f708433 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2013-06-14 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Os avanços na engenharia genética permitem que muitas espécies de bactérias que são normalmente não luminescentes sejam desenvolvidas, de modo que se tornem organismos bioluminescentes. Atualmente, micro-organismos como Salmonella spp. estão sendo geneticamente construídos a fim de produzir esse sinal mensurável. Desse modo, a utilização do cassete luxCDABE completo permite que a bioluminescência possa ser expressa de forma contínua, sem necessidade da adição de substratos exógenos. Assim, as bactérias biorrepórteres bioluminescentes permanecem inteiramente auto-suficientes em sua capacidade de produzir luz visível. Além disso, uma importante vantagem da bioluminescência é que as medições utilizando bactérias biorrepórteres não são invasivas e destrutivas para a célula, e ainda fornecem resultados em tempo real, o que permite a oportunidade de empregar a emissão de luz com muito sucesso em distintas aplicações em microbiologia de alimentos, como a avaliação da eficácia antimicrobiana para a inativação de agentes patogênicos. Portanto, o objetivo deste estudo foi construir cepas biorrepórteres bioluminescentes de Salmonella e utilizá-las para avaliar a resistência desse patógeno microbiano frente a compostos antimicrobianos naturais, bem como investigar a expressão da proteína Lux e de outras proteínas em diferentes cepas de bactérias recombinantes utilizando um sensor que capta imagens de dispersão. Advances in genetic engineering allow different bacterial species that are normally non-luminescent can be developed to become bioluminescent organisms. Nowadays, living microorganisms such as Salmonella spp. are genetically engineered to produce this measurable signal. Many studies have been using the gene lux to modify micro-organisms in other to produce visible light. Besides, the use of the complete luxCDABE cassette allows the bioluminescence can be expressed continuously, without addition of exogenous substrates. Thus, bioluminescent bioreporter bacteria remain entirely self-sufficient in its ability to produce visible light. Moreover, an important advantage is that the bioluminescence measurements using bioreporter bacteria are not invasive and destructive to the cell, and also provide realtime results, which allows the opportunity to employ light emission with great success in several applications in Food Microbiology, as evaluating the antimicrobial efficacy to inactivate pathogens. Therefore, the objective of this study was to construct bioreporter bioluminescent strains of Salmonella and use them to evaluate the microbial resitant against natural antimicrobial compounds, as well as to investigate Lux protein expression and other proteins in different strains of recombinant bacteria using a light-scattering sensor.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-17T16:43:22Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DISSERTACAO_MICHELLE_NOGUEIRA.pdf: 1474011 bytes, checksum: 513289e0794c0d83324ae44dcdb6367a (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-18T10:44:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 DISSERTACAO_MICHELLE_NOGUEIRA.pdf: 1474011 bytes, checksum: 513289e0794c0d83324ae44dcdb6367a (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-18T10:44:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTACAO_MICHELLE_NOGUEIRA.pdf: 1474011 bytes, checksum: 513289e0794c0d83324ae44dcdb6367a (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2013-05-21 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES As bactérias ácido láticas (BAL) são um grupo de micro-organismos que apresentam como principal característica em comum a capacidade de fermentar açúcares, produzindo ácido lático como produto majoritário ou como único produto de seu metabolismo fermentativo. Algumas espécies de BAL, destacando-se àquelas pertencentes aos gêneros Lactobacillus e Bifidobacterium, apresentam potencial probiótico, sendo capazes de conferir efeitos benéficos à saúde do hospedeiro, uma vez ingeridas vivas e em quantidades adequadas. Dentre as vantagens acarretadas pela ingestão de bactérias probióticas é possível citar o crescimento da população na microbiota intestinal, a atividade antagonista contra patógenos e a melhoria do sistema imunológico. Além disso, estudos comprovam que muitas BAL apresentam a capacidade de auxiliar no tratamento de algumas patologias, como na melhoria da digestão da lactose em indivíduos intolerantes a lactose, no tratamento de diarréia, para promover a redução do colesterol e para a prevenção de cáries. A ocorrência da cárie se dá em função da formação de uma cavidade na superfície dentária, causada pela destruição da proteína do esmalte por bactérias, destacando-se o Streptococcus mutans, por ser um dos micro-organismos mais relacionados a esse problema. Uma vez que BAL mostre-se capaz de inibir a bactéria cariogênica, torna-se interessante sua veiculação através de alimentos visando a prevenção da patologia. Com isso, o objetivo do trabalho foi verificar a atividade antagonista de L. brevis e B. lactis contra S.mutans e estudar a viabilidade destas bactérias aplicadas em goma de mascar microencapsuladas por atomização e na forma livre durante o período de estocagem analisados no intervalo de 8 em 8 dias, totalizando 33 dias. Ambos os micro-organismos testados apresentaram capacidade significativa de inibição da bactéria cariogênica, quando comparados ao anti-séptico bucal (clorexidina 0,2%), comprovando a influência de bacteriocinas no antagonismo através da sensibilidade a enzimas proteolíticas. A microencapsulação mostrou-se eficiente visto que a viabilidade das bactérias foi mantida após o processo. Durante o período de armazenamento das gomas de mascar acrescidas das bactérias livres e microecapsuladas, foram verificadas variações na viabilidade das mesmas. Em se tratando de B. lactis, a viabilidade foi satisfatória ao fim do período no caso da bactéria microencapsulada, apresentando contagem superior a 8 Log UFC . mL-1, porém insatisfatória no caso da bactéria livre, que apresentou redução quase total de sua viabilidade. Já para L.brevis a viabilidade do micro-organismo tanto livre quanto microencapsulado manteve-se elevada, atingindo os 33 dias com contagem superior a 8 Log UFC . mL-1. The lactic acid bacteria (LAB) are a group of micro-organisms that have as main characteristic in common the ability to ferment sugars, producing lactic acid as a major product or as only product of its fermentative metabolism. Some species of BAL, especially those belonging to the genera Lactobacillus and Bifidobacterium, have potential probiotic, being able to confer beneficial health effects of the host, once eaten alive and in adequate quantities. Among the advantages brought about by the ingestion of probiotic bacteria can cite population growth in the intestinal microbiota, the antagonistic activity against pathogens and enhancing the immune system. Furthermore, studies have shown that many BAL have the capacity to assist in the treatment of certain pathologies, such as improving the digestion of lactose lactose intolerant individuals in the treatment of diarrhea, to promote the reduction of cholesterol and for the prevention of caries. The occurrence of caries occurs due to the formation of a cavity in the tooth surface caused by destruction of enamel protein by bacteria, especially Streptococcus mutans, as one of the micro-organisms related to this problem. Once show BAL is capable of inhibiting the cariogenic bacteria, it is interesting through food conveying aimed at preventing disease. Thus, the aim of this study was to determine the antagonistic activity of L. and B. brevis lactis against S. mutans and studying the viability of the bacteria applied in chewing gum microencapsulated by spray drying, in free form during the storage period in the range of 8 analyzed in 8 days, totaling 33 days. Both micro-organisms tested showed significant capacity to inhibit cariogenic bacteria when compared to oral antiseptic (chlorhexidine 0.2%), demonstrating the influence of bacteriocins in antagonism by sensitivity to proteolytic enzymes. Microencapsulation was effective because the viability of the bacteria was retained after the process. During the storage of chewing gum and free of bacteria added micoecapsuladas, changes were observed in the viability of the same. In the case of B. lactis viability was satisfactory after the period in the case of microencapsulated bacteria, with count greater than 8 Log CFU. mL-1, but with unsatisfactory in the case of bacteria free, which declined almost total viability. As for L. brevis the viability of micro-organism both free and microencapsulated remained high, reaching 33 days with score greater than 8 Log UFC. mL-1.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-17T17:34:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Caroline_Bastos.pdf: 1156565 bytes, checksum: 3e166a0243a6f583200dcbd5c0bc39ce (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-18T10:56:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese_Caroline_Bastos.pdf: 1156565 bytes, checksum: 3e166a0243a6f583200dcbd5c0bc39ce (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-18T10:56:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese_Caroline_Bastos.pdf: 1156565 bytes, checksum: 3e166a0243a6f583200dcbd5c0bc39ce (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2013-03-17 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Staphylococcus aureus (S. aureus) é, entre as bactérias do gênero Staphylococcus, a espécie mais relacionada a casos e/ou surtos de intoxicação alimentar, os quais são causados pelas enterotoxinas estafilocócicas (EE). Estas bactérias podem ser facilmente encontradas em alimentos de origem animal. Das 22 EE descritas na literatura, aproximadamente 95% dos surtos de intoxicação alimentar estão associados às EE clássicas (EEA, EEB, EEC, EED e EEE). Sendo assim, este trabalho teve como objetivos verificar a presença e os níveis de expressão dos genes das EE clássicas em 13 S. aureus provenientes de diferentes surtos de intoxicação estafilocócica ocorridos no estado do Rio Grande do Sul (RS), e em S. aureus isolados de carcaça de frango no sul do Brasil, por PCR e por PCR em tempo Real (qPCR). Além disso, avaliou-se os efeitos da temperatura (8ºC e 12ºC) e da concentração salina (2,5% NaCl) sobre os níveis de expressão transcricional dos genes das EE clássicas em S. aureus através da análise do mRNA. Observou-se que, com exceção de dois isolados provenientes dos surtos, os demais apresentaram expressão transcricional igual ou maior que a das cepas padrão, para, pelo menos, um dos genes das enterotoxinas clássicas. Além disso, observou-se que quatro isolados expressaram genes de uma enterotoxina, enquanto os demais apresentaram expressão dos genes de, no mínimo, duas enterotoxinas. Embora não se tenha informação a respeito de qual enterotoxina causou a intoxicação alimentar nos surtos avaliados, a prevalência das EE clássicas, associada aos elevados níveis de expressão transcricional encontrados, demonstram que uma ou mais EE clássicas causaram os surtos de intoxicação alimentar nos quais os isolados de S. aureus foram obtidos. Doze isolados de S. aureus provenientes de carcaças de frango portavam os genes dessas EE, sendo que em apenas cinco observou-se sua expressão transcricional. Nos cinco isolados houve expressão de mais de um gene de EE, demonstrando seu potencial toxigênico. Estes cinco isolados e as cepas padrão foram submetidos a quatro tratamentos: 1) nas condições ideais de multiplicação de S. aureus; 2) em concentração salina de 2,5% de NaCl; 3) com incubação em temperatura de12°C e; 4) com incubação em temperatura de 8°C. A concentração salina e as baixas temperaturas interferem na expressão dos genes das EE clássicas, diminuindo seus valores, entretanto, mesmo em concentração salina de 2,5% e em temperatura de 12ºC os isolados expressaram os genes de EE clássicas, demonstrando seu potencial toxigênico. Temperaturas de 8ºC mostraram-se mais eficientes no controle da expressão gênica das EE clássicas de S. aureus. Staphylococcus aureus (S. aureus) is among the bacteria of the genus Staphylococcus, species more related to cases and/or outbreaks of food poisoning, which are caused by staphylococcal enterotoxins (SE). These bacteria can be easily found in foods of animal origin. From the 22 SE described in the bibliography, approximately 95% of food poisoning outbreaks are associated to classic SE (SEA, SEB, SEC, SED and SEE). Thus, this study aimed at verifying the presence and the levels of expression of genes of classic SE in 13 S. aureus derived from different staphylococcal food poisoning outbreaks which took place in the state of Rio Grande do Sul (RS) and S. aureus isolated of chicken carcass in southern Brazil, by PCR and PCR real time (qPCR). Moreover, evaluated the effects of temperature (8° and 12°C) and saline concentration (2,5% NaCl) in the levels of transcriptional expression of genes of classic SE S. aureus through mRNA analysis. It has been observed that, with exception two isolated derived from outbreaks, the other shave shown transcriptional expression equal or bigger than standard strain for at least one of the genes of classic enterotoxins. Moreover, it has been observed that four isolated have expressed genes of one enterotoxin, while the others have shown expressions of at least two enterotoxins genes.Although there is no information related to which enterotoxin has caused the food poisoning in the evaluated outbreaks, the prevalence of classic SE, along with high levels of transcriptional expression showed that one or more classic SE caused of food poisoning outbreaks in which the isolated of S. aureus were obtained. Twelve isolated of S. aureus originated from chicken carcass carried the genes of these SE, being that in only five has been observed the transcriptional expression. In the five isolated there was expression of more of SE gene, demonstrating their potential toxigenic. These five isolates and standard strains were submitted to four treatments: 1) in ideal S .aureus multiplication; 2) in saline concentration of 2,5 of NaCI; 3) with incubation temperature of 12°C and; 4) with incubation in temperature of 8°C. The saline concentration and the low temperatures interfere in the expressions of genes of classic SE diminishing their values, nevertheless, even in saline concentration of 2,5 and in temperature of 12°C the isolated have expressed the genes of classic SE, demonstrating their toxigenic potential. Temperatures of 8°C have shown to be more efficient in the control of gene expression of S. aureus classic SE.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-16T15:55:05Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Julia_Goldbeck.pdf: 6542384 bytes, checksum: e69caf496b3e03444beec75be9fd73aa (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-16T19:07:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Julia_Goldbeck.pdf: 6542384 bytes, checksum: e69caf496b3e03444beec75be9fd73aa (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-16T19:07:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Julia_Goldbeck.pdf: 6542384 bytes, checksum: e69caf496b3e03444beec75be9fd73aa (MD5) Previous issue date: 2012-09-11 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O objetivo do presente trabalho foi avaliar o potencial antimicrobiano do composto 3-(pclorofenil) tio citronelal frente a bactérias com importância em alimentos. Com o intuito de observar o potencial antibacteriano do 3-( p-clorofenil)tio citronelal bem como verificar se a adição de tiol potencializa a bioatividade do citral, através de estudo qualitativo e quantitativo, comparou-se a atividade antibacteriana de citral, (R)-citronelal e 3-(p-clorofenil)tio citronelal. Foi realizada análise por microscopia eletrônica de varredura das células expostas aos compostos com o propósito de inferir o possível mecanismo de ação e observar o comportamento de bactérias Gram-positivas (L. monocytogenes) e Gram-negativas (P. fluorescens), além de verificar se há alteração no alvo celular quando citral foi modificado. A partir dos resultados dos testes qualitativos, todas as bactérias testadas mostraram-se potencialmente sensíveis aos compostos analisados, os quais possuem ação bactericida, no entanto, após análise quantitativa, observou-se que as Gram-positivas são mais sensíveis. A curva de cinética de ação demonstrou que a morte celular, tanto para L. monocytogenes como para P. fluorescens, ocorre significativamente mais rapidamente quando tratadas com o 3-( pclorofenil) tio citronelal, não obstante, quando se compara o tempo de morte celular entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, L. monocytogenes mostrou-se mais sensível aos compostos. Além disso, a concentração inibitória mínima para que o 3-(p-clorofenil)tio citronelal exerça atividade antibacteriana foi cerca de 100 vezes menor quando comparada ao citral precursor. A microscopia eletrônica de varredura permitiu mostrar alterações morfológicas nas células tratadas com os compostos. Aparentemente, a adição de tiol na molécula de citral não muda seu alvo celular, todavia, possivelmente o alvo celular do citral, 3-(p-clorofenil)tio citronelal e (R)-citronelal seja diferente em bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Concluiu-se que a adição de tiol potencializa a bioatividade do citral frente a bactérias Gram-negativas e Gram-positivas funcionalizando esta molécula, tornando-a um potente composto com ação bactericida, de baixa toxicidade, passível de ser utilizado em alimentos. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial potential of the compound 3-(pchlorophenyl) thio citronellal against bacteria of importance in foods. In order to observe the antimicrobial activity of 3-(p-chlorophenyl)thio citronellal and to verify that the addition of thiol enhances the bioactivity of citral, through qualitative and quantitative study, we compared the antibacterial activity of citral, (R)-citronellal and 3-(p-chlorophenyl)thio citronellal. Analysis was performed by scanning electron microscopy of cells exposed to the compounds in order to infer the possible mechanism of action and observe the behavior of Gram-positive bacteria (L. monocytogenes) and Gram-negative bacteria (P. fluorescens), and check if there are changes in the target cell when citral was modified. From the results of qualitative tests, all bacteria tested were potentially susceptible to the compounds tested, which have antibacterial action, however, quantitative analysis showed that the Gram-positive bacteria are most susceptible. The kinetic curve action cell death demonstrated that for both L. monocytogenes to as P. fluorescens occurs significantly faster when treated with 3-(p-chlorophenyl)thio citronellal, however, when comparing the time of cell death from Gram-positive and Gram-negative bacteria, L. monocytogenes was more sensitive to the compounds. Furthermore, the minimal inhibitory concentration for the 3-(pchlorophenyl) thio citronellal carries antibacterial activity was 100 fold lower compared to the precursor citral. The scanning electron microscopy allowed to show morphological changes in cells treated with the compounds. Apparently, the addition of the thiol molecule citral does not change its cellular target, however, possibly the cellular target of citral, 3-(p-chlorophenyl)thio citronellal and (R)-citronellal is different in Gram-positive and Gram negative. It was concluded that the addition of thiol enhances the bioactivity of citral against Gram-negative and Gram-positive functionalizing this molecule, making a compound having potent bactericidal activity, low toxicity, which can be used in foods.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-13T21:54:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Graciele_Daiana_Funck.pdf: 992417 bytes, checksum: 0232ddc4f3f4c142062fd35a9142be5a (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-15T17:28:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Graciele_Daiana_Funck.pdf: 992417 bytes, checksum: 0232ddc4f3f4c142062fd35a9142be5a (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-15T17:28:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Graciele_Daiana_Funck.pdf: 992417 bytes, checksum: 0232ddc4f3f4c142062fd35a9142be5a (MD5) Previous issue date: 2012-08-16 Sem bolsa O leite é um alimento básico, rico em nutrientes. O queijo, produto derivado do leite, é também um concentrado proteico-gorduroso de alto valor nutritivo. As bactérias ácido lácticas, naturalmente presentes no leite, são de fundamental importância para produção de queijos, pois são responsáveis pelo processo fermentativo que confere sabor e odor característico. O objetivo deste estudo foi isolar bactérias ácido lácticas com atividade antagonista em relação à Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Salmonella Typhimurium e Staphylococcus aureus, caracterizar a qualidade microbiológica e físico-química de amostras de leite in natura e queijos coloniais provenientes da região Fronteira Noroeste do RS e verificar a influência nestas características de dois dos períodos de coleta que caracterizam verão e inverno. Para isto foram selecionados dez unidades de sistema familiar agrícola que fabricavam queijo colonial a partir de leite cru e sem adição de fermento lácteo. Realizaram-se duas coletas (janeiro/julho) de amostras de leite e queijos. Procedeuse, então, o isolamento, a detecção da atividade antagonista e a verificação das características homo e heterofermentativas das bactérias ácido lácticas nativas, bem como a caracterização microbiológica e físico-química do leite e queijos da região. Considerando os testes realizados, das bactérias ácido lácticas isoladas, 37,49% pressupõe-se que sejam do gênero Lactococcus/Enterococcus e que 25,89% sejam Lactobacillus. Destes, 33,87% apresentaram atividade antagonista contra todos os patógenos testados e estes possuem característica homofermentativa. Em geral, as amostras de leite e queijos analisadas possuem qualidade microbiológica deficitária devido apresentarem contagens de micro-organismos indicadores de higiene. Não foi detectada a presença de Salmonella spp. e de Listeria monocytogenes nas amostras de leite e queijos. Os desvios padrões acima de um nos parâmetros analisados como umidade, proteína, gordura e teor de sal nos mostram que não há uma padronização para produção dos queijos coloniais da região Fronteira Noroeste. A composição do leite utilizado para fabricação dos queijos foi variada sendo esta observada também nos queijos. O período do ano ocasionou diversificação na microbiota dos leites e queijos, bem como variação nos teores de umidade, atividade de água e teor de sal dos queijos e do extrato seco total do leite. Os isolados devem passar por testes futuros para identificação das espécies. Milk is an essential food, rich in nutrients. The cheese, a product derived from milk is protein-fat concentrate also a high nutritional value. The lactic acid bacteria, naturally present in milk, are fundamental for the production of cheeses, because they are responsible for the fermentation process that gives flavor typical. The aim of this study was to isolate lactic acid bacteria with antagonistic activity in relation to Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Salmonella Typhimurium and Staphylococcus aureus, characterization the microbiological and physico-chemical of raw milk and cheeses from the northwestern region of Rio Grande do Sul state and the influence of the seasons in these characteristics was studied. For this, were selected ten farmers who manufactured artisan cheese from raw cow milk and without addition of starter cultures. There were two collections (summer/winter) of samples of milk and cheese. The procedure was then the isolation, detection and checking of the antagonistic activity of the fermentation profile of native lactic acid bacteria as well as the microbiological and physic-chemical characterization of milk and cheeses regional. Considering the testes, of lactic acid bacteria isolated, 37,49% premise to be of the genus Lactococcus/Enterococcus and Lactobacillus are 25.89%. The activity antagonist against all tested pathogens was showed for 33,87% isolates and these have homofermentative profile. In general, the samples of milk and cheeses analyzed have low microbiological quality due to high numbers of microorganism hygiene indicator. Was not detected the presence of Salmonella spp. and Listeria monocytogenes in samples of milk and cheese. The high standard deviations for moisture, protein, fat and salt content show that there is a rule for artisanal cheese production in the northwestern region of Rio Grande do Sul state. The composition of milk used for cheese production was varied and this is also observed in the cheeses. The season resulted in microbial diversification milks and cheeses, as well as variation in moisture, water activity and salt content of cheese and the total solids of milk. Bacterial isolates should be further tests for confirmation and species identification.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-16T14:51:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Liziane_Schittler.pdf: 2089543 bytes, checksum: ded080f80c0ce5a4ddb7335963e132b0 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-16T19:06:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Liziane_Schittler.pdf: 2089543 bytes, checksum: ded080f80c0ce5a4ddb7335963e132b0 (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-16T19:06:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Liziane_Schittler.pdf: 2089543 bytes, checksum: ded080f80c0ce5a4ddb7335963e132b0 (MD5) Previous issue date: 2012-04-11 Sem bolsa As bactérias ácido lácticas (BAL) são um grupo de micro-organismos que podem estar presentes em diversos alimentos, incluindo o leite in natura, e que apresentam a capacidade de produzir várias substâncias com atividade antagonista, como ácidos orgânicos, peróxido de hidrogênio, diacetil e bacteriocinas, que têm potencial para serem utilizadas na bioconservação de alimentos. Este estudo teve como objetivo isolar e realizar a caracterização bioquímica e molecular de BAL bacteriocinogênicas em leite in natura da região oeste de Santa Catarina, Brasil. Dezoito amostras de leite in natura, coletadas em dias diferentes no tanque de recepção de um laticínio foram inoculados nos ágares de Man, Rogosa e Sharpe (MRS) e M17 e incubados a 25 e 35°C, sob aerobiose e anaerobiose, sendo o primeiro por 72h e, o segundo, por 48h, obtendo-se contagens de BAL entre 3,2 e 7,46 log UFC mL-1 de leite. Obtiveram-se 478 isolados, Gram-positivos e catalase negativa, os quais foram avaliados quanto a sua atividade antagonista contra Listeria monocytogenes, bem como se identificou a natureza da atividade antagonista, através do método spot-on-the-lawn, utilizando os meios ágar MRS, ágar Infusão de Cérebro e Coração (BHI) e ágar BHI com catalase (BHI+ catalase). Os 28 isolados que apresentaram antagonismo contra L. monocytogenes e nos quais a atividade antagonista foi devida a um peptídeo, confirmada pela sensibilidade a pelo menos uma das enzimas testadas (pepsina, –quimotripsina, proteinase K e tripsina), foram identificados em nível de gênero e espécie através do sistema ViteK®2. Vinte e quatro isolados puderam ser identificados por este sistema, sendo vinte (20) Enterococccus faecium, três (3) Leuconostoc pseudomesenteroides e um (1) E. gallinarum. Entre os 20 isolados identificados bioquimicamente como E. faecium, 16 foram confirmados em nível de gênero por PCR e em nível de espécie através do sequenciamento do gene pheS. Esses 16 isolados foram agrupados por Rep-PCR e avaliados por PCR quanto a presença dos genes das enterocinas A, B, P e L50A/B. Todos os isolados carreavam pelo menos um dos genes dessas enterocinas e, apesar de terem gerado quatro diferentes perfis moleculares por Rep-PCR, não houve relação direta entre a presença dos genes das enterocinas e os perfis moleculares. Além disso, foram testados para dois marcadores de virulência: atividade da -hemolisina e sensibilidade a antimicrobianos de uso clínico. Nenhum isolado apresentou atividade da enzima -hemolisina. A sensibilidade a antimicrobianos foi avaliada pelo método de difusão em disco, utilizando-se os antibióticos ampicilina (10μg), vancomicina (30μg), tetraciclina (30μg) e penicilina G (10μg). Todos os isolados foram sensíveis a vancomicina, 94% a ampicilina, e 88% a tetraciclina. Os maiores níveis de resistência foram para penicilina (44%) e tetraciclina (19%). Verifica-se que isolados de E. faecium provenientes de leite in natura da região oeste de Santa Catarina, apresentam grande potencial para serem utilizados como bioconservadores, no entanto, há necessidade de se realizar mais estudos para verificar a presença de genes de virulência nesses isolados e/ou a viabilidade de purificação das enterocinas para sua utilização em alimentos. Lactic acid bacteria (LAB) are a group of microorganisms that may be present in many foods, including raw milk, and have the capacity of produce several substances with antagonist activity, such as organic acids, hydrogen peroxide and bacteriocins, where can have the potential to be used in the conservation of foods. The aim of this study was to carry out the isolation of bacteriocinogenic LAB and perform its biochemical and molecular characterization from raw milk in the west region of Santa Catarina, Brazil. Eighteen samples of raw milk were collected from a reception tank at different days in a dairy industry. After, the isolates were inoculated in the MRS agar and M17 agar, and then incubated at 25 and 37°C, under aerobic and anaerobic conditions, being the first for 72h and the second for 48 hours. The average counting of LAB was 3.2 to 7.46 log CFU.mL-1 of milk. A total of 478 Gram-positive and catalase-negative bacteria were isolated. Using the spot-on-the-lawn method, all isolates were evaluated regarding of the antagonistic activity against Listeria monocytogenes on MRS agar, BHI agar and BHI agar with catalase (BHI + catalase). Also, the identity of the antagonism was performed through the same spot-on-thelawn method. From those, 28 isolates that showed antagonistic reaction against L. monocytogenes, and in which the antagonistic activity it was a peptide, confirmed by sensitivity test for at least one of the enzymes,pepsin, -chymotrypsin, proteinase K or trypsin, were then identified at genus and species levels by the ViteK®2 system. Twenty four isolates were identified by this device, being twenty Enterococccus faecium, three Leuconostoc pesudomesenteroides and one Enterococcus gallinarum. Among the 20 isolates identified biochemically as E. faecium, 16 were confirmed at genus level by PCR and at species level through sequencing of the gene pheS. These 16 isolates were grouped by Rep-PCR and evaluated by PCR according to the presence of enterocins genes A, B, P and L50A/B. All the isolates carried at least one of the genes of these enterocins and, despite of having generated four different molecular profiles of Rep-PCR, there was not a direct relation between the presence of enterocins genes and the molecular profiles. Moreover, these 16 isolates were evaluated by two markers of virulence: activity of the -hemolysin and sensitivity the clinical antimicrobials. None of the isolates showed activity of the -hemolysin enzyme. The sensitivity to antimicrobials was evaluated by disc diffusion method, using the antibiotics ampicillin (10μg), vancomycin (30μg), tetracycline (30μg) and penicillin G (10μg). All isolates were sensitivity to vancomycin, and had 94% to ampicillin, and 88% of sensitivity to tetracycline. The highest levels of resistance were for penicillin (44%) and tetracycline (19%). It was verified that the isolates of E. faecium from raw milk of the west region of Santa Catarina presents great potential to be used as bioconservation. However, there is a necessity to conduct further studies to verify the presence of virulence genes in these isolates and/or the feasibility of the enterocins purification for its uses in foods.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-13T22:29:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Regina_Maria_Castelli.pdf: 598099 bytes, checksum: bc56f0ac4d5b9b6e1c5560a98b5a445d (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-15T17:29:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Regina_Maria_Castelli.pdf: 598099 bytes, checksum: bc56f0ac4d5b9b6e1c5560a98b5a445d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-15T17:29:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Regina_Maria_Castelli.pdf: 598099 bytes, checksum: bc56f0ac4d5b9b6e1c5560a98b5a445d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2011-07-13 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq A associação entre probióticos pode gerar uma resposta superior ou similar a soma da resposta obtida individualmente por cada um deles, ou seja, proporcionar um efeito sinérgico. A levedura Saccharomyces boulardii e a bactéria Bacillus cereus var. Toyoi apresentam a propriedade benéfica de modular a resposta imune do hospedeiro. O objetivo desse trabalho foi avaliar a associação entre os probióticos S. boulardii e B. Toyoi sobre a resposta imune humoral e celular em camundongos, utilizando a proteína recombinante internalina A (rInlA) de Listeria monocytogenes como antígeno modelo. Primeiramente, foi avaliada a resistência desses micro-organismos associados às adversidades simuladas do trato gastrointestinal (TGI) de humanos e à passagem através do TGI de camundongos. Após, foi avaliada a capacidade da associação desses micro-organismos estimular a resposta imune humoral e celular de camundongos. Para isso, camundongos alimentados com ração contendo ambos os probióticos e com cada um dos probióticos individualmente foram imunizados com rInlA, amostras de sangue foram coletadas nos dias 0 e 29 após a imunização e os soros submetidos a ELISA indireto para a titulação de Ig totais, IgG1 e IgG2a específicas. Para avaliação da resposta celular, níveis de Inteferon (IFN) produzida pelos esplenócitos dos camundongos cultivados e estimulados com rInlA foi determinada. Ambos os probióticos avaliados individualmente e em associação apresentaram elevadas taxas de sobrevivência à simulação do TGI de humanos e ao TGI de camundongos. Os animais do grupo onde S. boulardii e B. Toyoi foram co-administrados apresentaram títulos de anticorpos Ig totais e soroconversões significativamente superiores (p

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-06-13T22:58:12Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Rodrigo_Correa_França.pdf: 750756 bytes, checksum: 590bd437103f1fdbb5d022c72c24eae6 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-06-15T17:30:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Rodrigo_Correa_França.pdf: 750756 bytes, checksum: 590bd437103f1fdbb5d022c72c24eae6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-15T17:30:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Rodrigo_Correa_França.pdf: 750756 bytes, checksum: 590bd437103f1fdbb5d022c72c24eae6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2011-05-18 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Probióticos são micro-organismos vivos que quando administrados em quantidades adequadas, conferem benefícios à saúde do hospedeiro. Um critério importante para que um micro-organismo apresente potencial probiótico é a capacidade de proteger o trato gastrointestinal (TGI) do hospedeiro da ação de enteropatógenos, tais como a Escherichia coli e Salmonella Typhimurium. Pichia pastoris é uma levedura utilizada como sistema de expressão de proteínas recombinantes em larga escala, capaz de realizar modificações pós-traducionais. O objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial probiótico de P. pastoris. Primeiramente foi avaliada a resistência da levedura as adversidades simuladas do TGI de monogástricos. Após, foram avaliadas a segurança da utilização de P. pastoris como probiótico, a sua resistência ao armazenamento em solução sob refrigeração e sua capacidade de inibir o crescimento de S. Typhimurium e E. coli em meios de cultura. Por fim, foi avaliado o efeito de P. pastoris sobre a sobrevivência de camundongos infectados por S. Typhimurium. A levedura não causou alterações histopatológicas quando administrada aos animais, resistiu às adversidades do trato gastrointestinal in vitro e in vivo e foi capaz de inibir o crescimento de enteropatógenos in vitro. Além disso, o grupo suplementado com P. pastoris obteve maior sobrevivência do que o grupo controle quando desafiado com S. Typhimurium. Concluímos que a levedura P. pastoris possui potencial probiótico, porém novos testes deve ser realizado para a confirmação da característica antimicrobiana e para observar um possível efeito sobre a resposta imunológica. Probiotics are live microrganisms which when administered in adequate amounts can confer health benefits to the host. An important criterion for a potential probiotic microrganism it is to present the ability to protect the gastrointestinal tract (TGI) of the host from the action of pathogens such as Escherichia coli and Salmonella Typhimurium. Pichia pastoris is a yeast that is commonly used as expression system to produce recombinant proteins in large scale, where is capable to do post-translational modifications. The purpose of this study was to evaluate the probiotic potential of P. pastoris. At first, we evaluated the resistance of the yeast to adversities of the monogastric TGI simulated in vitro. After, we assessed the safety of using P. pastoris as a probiotic, its resistance to refrigerated storage solution and its ability to inhibit the growth of S. Typhimurium and E. coli in culture media. Finally, we examined the effect of P. pastoris on the survival of mice infected with S.Typhimurium. P. pastoris did not cause histopathological changes when given to animals; withstood the hardships of the gastrointestinal tract in vitro and in vivo and it was able to inhibit the growth of pathogens in- vitro. In addition, the group fed with P. pastoris had the highest survival than the control group when challenged with S. Typhimurium. We conclude that the yeast P. pastoris has the potential probiotic, but the development of new tests should be performed to confirm the antimicrobial characteristics and to observe a possible effect on the immune response.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:42:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Denise da Fontoura Prates.pdf: 535436 bytes, checksum: c3acb08e8f12a05440096b13c688b6f2 (MD5) Previous issue date: 2010-12-17 Listeria monocytogenes is a Gram-positive of ubiquitous natural, psychrotropic pathogen which colonizes the surfaces of equipment and utensils in food processing industries. Milk and dairy products, especially cheeses with medium and high humidity have been implicated in listeriosis cases and outbreaks. Microbial contamination could be originated in raw material or be incorporated during the development stages of the product, coupled with inadequate hygiene practices. The general aim of this study was to evaluate the occurrence of Listeria spp. along the processing line of cheese with middle and high humidity, in three dairy subjected to different levels of sanitary survey located in Southern Brazil. From 208 samples tested Listeria spp. were isolated 7.69%, being isolated 43.75%, 25%, 31.25%, respectively, in dairy products A, B and C. From these isolates, 25% were found in raw milk, 18.75% in contact surfaces with the product, 50% in areas without contact with the product and 6.25% in the final product. L. innocua and L. monocytogenes were the only species identified between the isolates being L. innocua the prevalent species (68.7%). Among the serotypes of L. innocua, the serotype 6a was prevalent (72.7%) and between L. monocytogenes serotype 4b was prevalent (55.6%). All Listeria strains isolated from raw material and final product showed multiresistance to five antibiotics (penicillin, amoxicillin, chloramphenicol, cefaclor and clindamycin) of the fifteen antibiotics tested. Among the samples of raw material assessed microbiologically, the raw milk showed the highest levels of contamination and the highest levels found between them were > 1.1x106 MPN/mL for fecal Overall, 1.1x105 MPN/mL for fecal coliform, 4x105 CFU/ml for coagulase-positive staphylococci and Salmonella spp. in one of the samples. Among six samples of the final product, only one showed himself at odds with the existing regulatory standard, exceeding the allowed limit for ECP. Listeria spp. and L. monocytogenes were present along the lines of the three dairy processing plants, regardless of the size of the industry, highlighting the risk of contamination during food manufacturing. Therefore, it becomes necessary to introduce effective measures to reduce such contamination or improvements in the practices already adopted by the industry, because of the risks to public health. Listeria monocytogenes é uma bactéria Gram-positiva de natureza ubíqua, psicrotrófica, que coloniza superfícies de equipamentos e utensílios dentro de indústrias processadoras de alimentos. Leites e derivados lácteos, em especial queijos com média e alta umidade, têm sido incriminados em casos e surtos de listeriose, por serem alimentos que favorecem o desenvolvimento microbiano, além de serem prontos para o consumo. A contaminação microbiana pode ter origem na matéria-prima, ou ser incorporada durante as etapas de elaboração do produto, associada a práticas inadequadas de higiene. O objetivo geral neste trabalho foi avaliar a ocorrência de Listeria spp., em especial de L. monocytogenes, ao longo da linha de processamento de queijos de média e alta umidade, em três laticínios, localizados na região sul do Rio Grande do Sul, submetidos a diferentes níveis de inspeção sanitária. Das 208 amostras avaliadas 7,69% apresentaram Listeria spp., sendo isoladas, 43,75%, 25%, 31,25%, respectivamente, nos laticínios A, B e C. Destes isolados, 25% foram encontrados no leite cru, 18,75% em superfícies de contato com o produto, 50% em superfícies sem contato com o produto e 6,25% no produto final. L. innocua e L. monocytogenes foram as únicas espécies identificadas entre os isolados, sendo L. innocua a espécie prevalente (68,7%). Entre os sorotipos de L. innocua, o prevalente foi 6a (72,7%) e entre L. monocytogenes o sorotipo prevalente foi 4b (55,6%). Todas as cepas de Listeria isoladas da matéria-prima e do produto final apresentaram multirresistência a cinco (penicilina, amoxilina, cloranfenicol, cefaclor e clindamicina) dos 15 antibióticos testados. Dentre as amostras de matéria-prima avaliadas microbiologicamente, as de leite cru, foram as que apresentaram os maiores níveis de contaminação, sendo que, os níveis mais elevados encontrados entre as amostras de leite cru foram: >1,1x106 NMP.mL-1 para coliformes totais, 1,1x105 NMP.mL-1 para coliformes termotolerantes, 4x105 UFC.mL-1 para estafilococos coagulase positiva (ECP) e a presença de Salmonella spp. em uma das amostras avaliadas. Entre as seis amostras de produto final, apenas uma apresentou-se em desacordo com o padrão regulamentar vigente, excedendo o limite permitido para ECP. Listeria spp. e L. monocytogenes foram isoladas ao longo das linhas de processamentos nos três laticínios, independente do porte da indústria, evidenciando risco de contaminação durante a fabricação dos dois tipos de queijo, os quais são produtos prontos para o consumo. Dessa forma, torna-se necessária a implantação de medidas eficazes para redução dessas contaminações, ou melhorias nas práticas já adotadas pelas indústrias, em virtude dos riscos à saúde pública.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:42:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Francine_ Novack_ Victoria.pdf: 1036234 bytes, checksum: 1fea71545d5ff3ff1e433c5ceaff9a37 (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 Java citronella (Cymbopogon nardus (L) Rendle) belongs to the genus Cymbopogon and the essential oil extracted from the plant is constituted mainly by the (+)-R-citronellal (3,7-dimethyl-6-octenal), formed by the secondary metabolism plants. Essential oils and plant extracts have a growing interest to industry and scientific research due to its antimicrobial activity, and as well as compounds organosselênios that are of great interest for scientific research because of its wide spectrum of biological activity. Thus, we performed a study of α-selenation of aldehydes and ketones, including the (+)-( R)-citronellal, as a major component of essential oil of citronella, using PEG/KF/Al2O3, as a recyclable medium. Derivatives of (+)- (R)-citronellal containing organoselenium were assessed for their potential antimicrobial, the antimicrobial activity was determined by the techniques of disk diffusion and minimum inhibitory concentration. The 2-phenylseleno citronellal and 2 phenylseleno citronellol provided yields of 71 and 73% respectively. The antimicrobial activity of 2- phenylseleno citronellal showed the best results, soon the addition of a organoselenium to (+)-R-citronellal increased the antimicrobial activity of (+)-R-citronellal against foodborne pathogenic bacteria Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus and Salmonella Typhimurium. O capim citronela (Cymbopogon nardus(L) Rendle) pertence ao gênero Cymbopogon, o óleo essencial extraído da planta tem como principal constituinte o (+)-R-citronelal (3,7-dimetil-oct-6-enal), predominantemente formado pelo metabolismo secundário das plantas. Os óleos essenciais e os extratos das plantas possuem um interesse crescente para a indústria e para a pesquisa científica devido a sua atividade antimicrobiana, assim como os compostos organosselênios que são de grande interesse para a pesquisa científica devido ao seu grande espectro de atividade biológica. Desta forma, foi realizado um estudo da α-selenização de aldeídos e cetonas, incluindo o (+)-(R)-citronelal, principal componente do óleo essencial de citronela, utilizando PEG/KF/Al2O3, como meio reciclável. Os derivados do (+)-(R)-citronelal contendo organosselênio foram avaliados em relação aos seus potenciais antimicrobianos, determinados pelas técnicas de difusão do disco e concentração inibitória mínima. Os produtos 2-fenilselenocitronelal e 2-fenilselencitronelol apresentaram rendimentos de 71 e 73%, respectivamente. Nos ensaios de atividade antimicrobiana o produto 2-fenilselenocitronelal apresentou os melhores resultados, inclusive melhores que o (+)-R-citronelal. Logo, a adição de um grupamento de selênio ao composto (+)-R-citronelal aumentou sua atividade antimicrobiana contra Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus e Salmonella Typhimurium.

The excessive intake of sodium is related to hypertension and consequently to an increased risk of cardiovascular diseases. The consumption of sodium exceeds the nutritional recommendations in most industrialized countries. Sodium chloride is the main source of sodium in the diet. In developed countries, meat products are one of the major sources of sodium in the form of sodium chloride. This study was aimed at producing a Hamburg-type dry fermented sausage with low sodium levels, but keeping the traditional characteristics appreciated in this product. For this purpose, we evaluated potassium chloride and magnesium chloride as partial substitutes for sodium chloride (45, 50 and 55% substitution on mass basis). The pH, temperature, weight loss, lactic acid bacteria counts, aerobic mesophilic bacteria counts, Salmonella, total and fecal coliforms were assessed during and after the production of dry fermented sausages. At the end of the production the sausages were also submitted to proximate composition, mineral, water activity, objective color and sensory analyses. Results indicate that the replacement of 45 to 55% NaCl with KCl or MgCl2 yields Hamburg-type dry fermented sausages that have physico-chemical and microbiological characteristics suitable for trading. These products were within the Brazilian legal limits for moisture, protein, fat, water activity, coliforms and Salmonella. Among the formulations developed, the highest moisture was found in MgCl2-containing sausages, which also had the lowest contents of ash and chloride. Water activity was lower in the sausages with KCl. Although the replacement of 45% NaCl with KCl or MgCl2 have improved the sensory characteristics of Hamburg-type dry fermented sausage, the replacement of 50% NaCl with KCl and 55% NaCl with MgCl2 also appear to be viable, since they yielded products with sensory acceptability similar to that of control. A ingestão excessiva de sódio está sendo relacionada com hipertensão e conseqüentemente com o aumento do risco de doenças cardiovasculares. O consumo de sódio excede a recomendação nutricional na maioria dos países industrializados. A principal fonte de sódio na dieta é o cloreto de sódio. Em países industrializados, os produtos cárneos são uma das principais fontes de sódio na forma de cloreto de sódio. Com o objetivo de produzir um salame tipo hamburguês com diminuição dos riscos associados ao sódio, mantendo as características já tradicionalmente apreciadas neste produto, no presente estudo avaliou-se a substituição do cloreto de sódio, em diferentes níveis (45, 50 e 55%), por cloreto de potássio e por cloreto de magnésio. Foram avaliados os parâmetros de pH, temperatura, perda de peso, contagens de bactérias ácido láticas, microrganismos mesófilos aeróbios, Salmonella, coliformes fecais e coliformes totais durante a fabricação e ao final da produção dos salames. Ao final da produção dos salames foram avaliados ainda a composição centesimal, minerais, atividade de água, cor objetiva e características sensorais. Os resultados do presente estudo indicam que a substituição de 45 a 55% do NaCl de salame tipo hamburguês por KCl ou MgCl2 (em base de massa) resulta em produtos com características físico-químicas e microbiológicas adequadas para a comercialização, permanecendo dentro dos padrões legais do Brasil para teores de umidade, proteína, gordura, atividade de água, contagens de coliformes e ausência de Salmonella. Dentre as formulações avaliadas, maior umidade foi encontrada naquelas contendo MgCl2, que também apresentaram menores valores de cinzas e cloretos. Quanto aos valores de atividade de água, estes foram menores nas formulações com KCl. Ainda que as substituições de 45% do NaCl por KCl ou MgCl2 tenham melhorado as características sensoriais do salame tipo hamburguês, as substituições de 50% do NaCl por KCl e de 55% do NaCl por MgCl2 também parecem ser viáveis, uma vez que resultaram em produtos com aceitação sensorial semelhante a do controle.