1. Delineation of the Xrcc4-interacting Region in the Globular Head Domain of Cernunnos/XLF
- Author
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Patrick Revy, Raphael Guerois, Guilhem Faure, Isabelle Callebaut, Virginie Ropars, Pascal Drevet, Laurent Malivert, Jean-Pierre de Villartay, Jean-Baptiste Charbonnier, Jean-Paul Mornon, Marcela Nunez, Simona Miron, Developpement Normal et Pathologique du Système Immunitaire, Université Paris Descartes - Paris 5 (UPD5)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Laboratoire de Biologie Structurale et Radiobiologie (LBSR), Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives (CEA), the Integrative Imaging Unit, INSERM 759, Institut Curie, Institut Curie, Institut de minéralogie et de physique des milieux condensés (IMPMC), Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 (UPMC)-IPG PARIS-Université Paris Diderot - Paris 7 (UPD7)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Service d'immuno-hématologie pédiatrique [CHU Necker], Assistance publique - Hôpitaux de Paris (AP-HP) (APHP)-CHU Necker - Enfants Malades [AP-HP], Centre Référence des Maladies Héréditaires du Métabolisme de l'Enfant et de l'Adulte [CHU Necker] (MaMEA Necker), Assistance publique - Hôpitaux de Paris (AP-HP) (AP-HP)-CHU Necker - Enfants Malades [AP-HP], Assistance publique - Hôpitaux de Paris (AP-HP) (AP-HP), Système membranaires, photobiologie, stress et détoxication (SMPSD), Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives (CEA)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Institut de Biologie Intégrative de la Cellule (I2BC), Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives (CEA)-Université Paris-Saclay-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Integrative Imaging Unit-INSERM 759, Institut de pharmacologie moléculaire et cellulaire (IPMC), Université Nice Sophia Antipolis (1965 - 2019) (UNS), COMUE Université Côte d'Azur (2015-2019) (COMUE UCA)-COMUE Université Côte d'Azur (2015-2019) (COMUE UCA)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 (UPMC)-Université Paris Diderot - Paris 7 (UPD7)-Institut de Physique du Globe de Paris (IPG Paris)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université Paris Descartes - Paris 5 (UPD5), CHU Necker - Enfants Malades [AP-HP], Institut Curie [Paris], Université Paris Descartes - Paris 5 ( UPD5 ) -Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale ( INSERM ) -Centre National de la Recherche Scientifique ( CNRS ), Laboratoire de Biologie Structurale et Radiobiologie ( LBSR ), Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives ( CEA ), INSTITUT CURIE, Institut de minéralogie et de physique des milieux condensés ( IMPMC ), Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 ( UPMC ) -IPG PARIS-Université Paris Diderot - Paris 7 ( UPD7 ) -Centre National de la Recherche Scientifique ( CNRS ), Assistance publique - Hôpitaux de Paris (AP-HP)-CHU Necker - Enfants Malades [AP-HP], Système membranaires, photobiologie, stress et détoxication ( SMPSD ), Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives ( CEA ) -Centre National de la Recherche Scientifique ( CNRS ), and Université Paris Descartes - Paris 5 ( UPD5 )
- Subjects
Protein Folding ,Protein Structure ,Ku80 ,DNA Repair ,DNA repair ,Protein Conformation ,Protein domain ,Biology ,LIG4 ,Crystallography, X-Ray ,XLF ,Biochemistry ,DNA-binding protein ,03 medical and health sciences ,chemistry.chemical_compound ,Protein structure ,Protein Domains ,Humans ,Computer Simulation ,[SDV.BBM]Life Sciences [q-bio]/Biochemistry, Molecular Biology ,Amino Acids ,Molecular Biology ,[ SDV.BBM ] Life Sciences [q-bio]/Biochemistry, Molecular Biology ,NHEJ ,030304 developmental biology ,Genetics ,0303 health sciences ,Cernunnos ,Binding Sites ,030302 biochemistry & molecular biology ,Cell Biology ,Xrcc4 ,DNA repair protein XRCC4 ,Protein Structure, Tertiary ,DNA-Binding Proteins ,DNA Repair Enzymes ,chemistry ,Protein Structure and Folding ,Mutagenesis, Site-Directed ,DNA ,Protein Binding - Abstract
International audience; In mammals, the majority of DNA double-strand breaks are processed by the Non Homologous End-Joining pathway (NHEJ), composed of seven factors: Ku70, Ku80, DNA-PKcs, Artemis, Xrcc4 (X4), DNA Ligase IV (L4) and Cernunnos/XLF. Cernunnos is part of the ligation complex, constituted by X4 and L4. In order to improve our knowledge on the structure and function of Cernunnos, we performed a systematic mutagenesis study on positions selected from an analysis of the recent 3D structures of this factor. Ten out of 27 screened mutants were non functional in several DNA repair assays. Outside amino acids critical for the expression and stability of Cernunnos, we identified three amino acids (Arg$^{64}$, Leu$^{65}$, and Leu$^{115}$) essential for the interaction with X4 and the proper function of Cernunnos. Docking the crystal structures of the two factors further validated this probable interaction surface of Cernunnos with X4.
- Published
- 2010