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For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-1 and 1.0 mg mL-1 MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-1). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-1, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA. Resumo Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-1 e 1,0 mg mL-1 foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-1 de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-1, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

Flavoring additives are of great technological importance for the food industry. However, there is little information regarding the toxicological properties of these micro-ingredients, especially at the cellular level. The present study used meristematic root cells of Allium cepa L. to evaluate the toxicity of a liquid, aroma and flavor synthetic chocolate additive, manufactured and widely marketed throughout Brazil and exported to other countries in South America. The flavoring concentrations evaluated were 100.00; 50.00; 25.00; 1.00; 0.50 and 0.25 µL/L, where the highest concentration established was one-hundred times lower than that commercially suggested for use. The concentration 100 µL/L substantially reduced cell division of meristems within 24- and 48-hours exposure. Concentrations from 100.00 to 0.50 µL/L resulted in a significant number of prophases to the detriment of the other phases of cell division, indicating an aneugenic activity, and induced a significant number of cellular changes, with emphasis on micronuclei, nuclear buds and chromosomal breaks. Under the established analysis conditions, with the exception of concentration 0.25 µL/L, the flavoring of chocolate caused cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to root meristems. Resumo Os aditivos aromatizantes têm grande importância tecnológica para a indústria de alimentos. Contudo, poucas são as informações quanto as propriedades toxicológicas desses microingredientes, especialmente, em nível celular. No presente estudo avaliou-se, sobre as células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., a toxicidade de um aditivo sintético líquido de aroma e sabor de chocolate, fabricado e amplamente comercializado em todo Brasil, e exportado para outros países da América do Sul. As concentrações de aromatizante avaliadas foram 100,00; 50,00; 25,00; 1,00; 0,50 e 0,25 µL/L, onde a maior concentração estabelecida foi cem vezes menor que a sugerida comercialmente para uso. Com base na interpretação dos resultados, a concentração 100 µL/L reduziu substancialmente a divisão celular dos meristemas nas 24 e 48 horas de exposição. As concentrações 100,00 a 0,50 µL/L demonstraram número significativo de prófases em detrimento as outras fases da divisão celular, indicando ação aneugênica, e induziram número significativo de alterações celulares, com ênfase a micronúcleos, broto nucleares e quebras cromossômicas. Nas condições de análises estabelecidas, com exceção a concentração 0,25 µL/L, o aromatizante de chocolate causou citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade aos meristemas radiculares.

O Glifosato (GLY) foi sintetizado no ano de 1950, inicialmente com propriedades fitotóxicas e com capacidade herbicida reconhecida somente em 1970. O GLY é um organofosfato, formado por apenas uma molécula de glicina e uma de fosfonometila, denominado N-(fosfonometil) glicina, usado em todo o mundo para diminuir perdas de produtividade agrícola. O Round-up® é o herbicida a base de GLY mais conhecido no mercado. Muitos estudos demonstram a citotoxicidade de GLY e Round-up® em células de câncer. Os Glioblastomas (GBMs) são os tumores primários mais comuns no Sistema Nervoso Central (SNC), que correspondem a 16 % de todos os tumores cerebrais primários e neoplasias do SNC. GBMs são mais frequentes na população adulta, geralmente a partir dos 60 anos de idade, apresentando os piores diagnósticos, resultando em uma sobrevida muito baixa. Os principais tratamentos para esta neoplasia são ressecção cirúrgica, radioterapia e quimioterapia com Temozolamida. Mesmo utilizando estas estratégias terapêuticas, pacientes com GBM tem alta taxa de recorrência deste tumor e uma sobrevida muito baixa após 5 anos de tratamento. Dessa forma, a busca por estratégias que possam ser mais eficientes em aumentar a sobrevida ou mesmo curar este tumor são necessárias. Nesse estudo, foi avaliada a citotoxicidade do tratamento agudo (24, 48 e 72 horas) e crônico (5 dias de tratamento mais 23 dias de intervalo) do GLY e do Round-up® em linhagens de GBMs humano e de rato bem como a indução de senescência celular. Demonstramos pela primeira vez que o GLY e o Round-up® (nas concentrações de 0,0025 %, 0,005% e 0,001%) apresentaram efeitos citotóxicos em linhagens de GBMs, diminuindo a viabilidade celular, o número de células, a formação de colônias e a duplicação populacional. Não foi observado indução de senescência celular. Os resultados também apontaram que os efeitos citotóxicos foram mais pronunciados ao realizar o tratamento com Round-up® do que com o GLY. Dessa forma, este estudo indica pela primeira vez um potencial citotóxico do GLY e do Round-up, que precisa ser melhor compreendido a fim de se buscar um potencial mecanismo de ação e segurança para futuramente incluir como possível estratégia terapêutica.

Fungi are a prolific source of biologically active metabolites, including a wide range of clinically important drugs. Therefore, this study aims to evaluate the antimicrobial and cytotoxic activity of secondary metabolites extracted from fungal mycelia isolated from freshwater samples in the state of Amazonas. Mycelial extracts from 12 fungal were used, extracted with MeOH/AcOEt (1:1) according to the criteria established by Souza et al. (2004). For antimicrobial activity, the extracts were tested against the pathogens Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus feacalis, Candida albicans and C. tropicalis. To identify the minimum inhibitory dosage (MID) the microdilution method was used. To perform the cytotoxicity assay, the VERO strain (ATCC® CCL-81TM) was used. The assays were determined by the Alamar Blue method according to Ahmed et al. (1994). The tested extracts did not show antibacterial activity. Five extracts (41.7%), obtained from the fungi Aspergillus - 1283, Chrysoporther - 1169, Diaporther – 1203, Fusarium – 1085, and Trichoderma, showed antifungal activity against C. albicans. Diaporther extract (8.3%) - 1203 was active against C. tropicalis. In the cytotoxicity assay, 58.3% of the evaluated extracts showed no significant toxic effect. Five extracts, Cladosporium - 1135, Chrysoporther - 1169, Cytospora - 1098, Fusarium - 1085, and Talaromyces - 1244, showed cytotoxic potential, exhibiting viability lower than 70%. The results obtained suggest that mycelial extracts of fungi isolated from water samples from the Amazon region have potential against yeasts of medical interest. Only two of the active extracts were revealed potentially cytotoxic. Los hongos son una fuente prolífica de metabolitos biológicamente activos, incluida una amplia gama de fármacos clínicamente importantes. Así, el objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antimicrobiana y citotóxica de metabolitos secundários extraídos de micelios fúngicos aislados de muestras de agua en el estado de Amazonas. Se utilizaron extractos miceliales de 12 hongos, extraídos con MeOH/ AcOEt (1:1) según los criterios establecidos por Souza et al. (2004). En la prueba antimicrobiana, los extractos fueron evaluados frente a los patógenos Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus feacalis, Candida albicans y C. tropicalis. Para identificar la dosis mínima inhibitoria (MID) se utilizó el método de microdilución. Para realizar el ensayo de citotoxicidad se utilizó la cepa VERO (ATCC® CCL-81TM). Los ensayos se determinaron mediante el método Alamar Blue según Ahmed et al. (1994). Los extractos probados no mostraron actividad antibacteriana. Cinco (41,7%) extractos obtenidos de los hongos Aspergillus - 1283, Chrysoporther - 1169, Diaporther – 1203, Fusarium - 1085 y Trichoderma, mostraron actividad antifúngica contra C. albicans y un extracto (8,3%) del hongo Diaporther - 1203 fue activo contra C. tropicalis. En el ensayo de citotoxicidad, el 58,3% de los extractos evaluados no mostraron ningún efecto tóxico significativo y cinco extractos, Cladosporium - 1135, Chrysoporther - 1169, Cytospora - 1098, Fusarium - 1085 y Talaromyces - 1244, mostraron potencial citotóxico com una viabilidad inferior al 70%. Los resultados obtenidos sugieren que extractos miceliales de hongos aislados de muestras de agua de la región amazónica tienen potencial contra levaduras de interés médico. Solo dos de los extractos activos fueron potencialmente citotóxicos. Os fungos são uma fonte prolífica de metabólitos biologicamente ativos, incluindo uma ampla gama de drogas clinicamente importantes. Portanto, este estudo tem como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e citotóxica de metabólitos secundários extraídos de micélios fúngicos isolados de amostras de água doce do estado do Amazonas. Foram utilizados extratos miceliais de 12 fungos, extraídos com MeOH/ AcOEt (1:1) de acordo com os critérios estabelecidos por Souza et al. (2004). Para atividade antimicrobiana, os extratos foram testados contra os patógenos Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus feacalis, Candida albicans e C. tropicalis. Para identificar a dosagem inibitória mínima (MID) foi utilizado o método de microdiluição. Para a realização do ensaio de citotoxicidade, foi utilizada a cepa VERO (ATCC® CCL-81TM). Os ensaios foram determinados pelo método Alamar Blue de acordo com Ahmed et al. (1994). Os extratos testados não apresentaram atividade antibacteriana. Cinco extratos (41,7%), obtidos dos fungos Aspergillus - 1283, Chrysoporther - 1169, Diaporther - 1203, Fusarium - 1085 e Trichoderma, apresentaram atividade antifúngica contra C. albicans. O extrato de Diaporther (8,3%) - 1203 foi ativo contra C. tropicalis. No ensaio de citotoxicidade, 58,3% dos extratos avaliados não apresentaram efeito tóxico significativo e cinco extratos, Cladosporium - 1135, Chrysoporther - 1169, Cytospora - 1098, Fusarium - 1085 e Talaromyces - 1244, apresentaram potencial citotóxico exibindo viabilidade menor que 70%. Os resultados obtidos sugerem que extratos miceliais de fungos isolados de amostras de água da região amazônica apresentam potencial contra leveduras de interesse médico. Apenas dois dos extratos ativos foram potencialmente citotóxicos.

Essential oils are an important natural source of pesticides and can be suitable used in ectoparasite control. The goal of this paper was to investigate the chemical composition of the volatile oils obtained from leaves and stems of Philodendron meridionale Buturi & Sakur by gas chromatography/mass spectrometry and to evaluate their insecticidal effect against Ctenocephalides felis Bouché adult insects and their cytotoxicity on human Jurkat leukemic T-cells by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5diphenyltetrazoluim bromide (MTT) reduction method. The main compound was ent-kaur-16-ene at concentrations of 20.78 and 22.46% for volatile oils from leaves and stems, respectively. These volatile oils provided insecticidal effect against C. felis with an average knockdown time of 9.61 and 7.35 min for fumigant test performed with the leaves and stems samples, respectively. Considering the topical application, these P. meridionale volatile oils extracted from leaves and stems demonstrated average knockdown values of 14.70 and 20.0 min, respectively. A very low cytotoxic effect of 9.48 and 11.32% was observed for P. meridionale volatile oils from leaves and stems even at the highest tested concentration of 400 μg.mL-1, respectively. Therefore, it is possible to propose a biological selectivity to the volatile oils under study, which guarantees, at the same time, effect against this insect with no evident damage to human biological system. Los aceites esenciales son una importante fuente natural de pesticidas y pueden usarse de manera adecuada en el control de ectoparásitos. El objetivo de este trabajo fue investigar la composición química de los aceites volátiles obtenidos de hojas y tallos de Philodendron meridionale Buturi & Sakur por cromatografía de gases / espectrometría de masas y evaluar su efecto insecticida contra insectos adultos Ctenocephalides felis Bouché y su citotoxicidad em línea celular Jurkat - células-T leucêmicas humanos- por el método de reducción de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5difeniltetrazoluim (MTT). El compuesto principal fue ent-kaur-16-eno en concentraciones de 20,78 y 22,46% para aceites volátiles de hojas y tallos, respectivamente. Estos aceites volátiles proporcionaron un efecto insecticida contra C. felis con un tiempo de remoción promedio de 9,61 y 7,35 min para la prueba de fumigante realizada con las muestras de hojas y tallos, respectivamente. Considerando la aplicación tópica, estos aceites volátiles de P. meridionale extraídos de hojas y tallos mostraron valores promedio de caída de 14,70 y 20,0 min, respectivamente. Se observó un efecto citotóxico muy bajo de 9,48 y 11,32% para los aceites volátiles de P. meridionale de hojas y tallos, incluso a la concentración más alta probada de 400 μg.mL-1, respectivamente. Por tanto, es posible proponer una selectividad biológica a los aceites volátiles en estudio, lo que garantiza, al mismo tiempo, efecto contra este insecto sin daño evidente al sistema biológico humano. Os óleos essenciais são uma importante fonte natural de pesticidas e podem ser usados de forma adequada no controle de ectoparasitas. O objetivo deste trabalho foi investigar a composição química dos óleos voláteis obtidos de folhas e caules de Philodendron meridionale Buturi & Sakur por cromatografia gasosa / espectrometria de massa e avaliar seu efeito inseticida contra insetos adultos Ctenocephalides felis Bouché e sua citotoxicidade em linhagem celular Jurkat - células T leucêmicas humanas - pelo método de redução de brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazoluim (MTT). O principal composto majoritário foi o ent-kaur-16-eno em concentrações de 20,78 e 22,46% para óleos voláteis de folhas e caules, respectivamente. Esses óleos voláteis proporcionaram efeito inseticida contra C. felis com um tempo médio de remoção de 9,61 e 7,35 min para o teste de fumigação realizado com as amostras de folhas e caules, respectivamente. Considerando a aplicação tópica, esses óleos voláteis de P. meridionale extraídos de folhas e caules apresentaram valores médios de queda de 14,70 e 20,0 min, respectivamente. Um efeito citotóxico muito baixo de 9,48 e 11,32% foi observado para os óleos voláteis de P. meridionale de folhas e caules, mesmo na maior concentração testada de 400 μg.mL-1, respectivamente. Portanto, é possível propor uma seletividade biológica aos óleos voláteis em estudo, o que garante, ao mesmo tempo, um efeito contra este inseto sem danos evidentes ao sistema biológico humano.

This study reviews the use of Apocynaceae species for cancer and tumor treatment in the Amazon. Databases and books were searched for ethnobotanical and phytochemical evaluations of the cytotoxic and anticancer activities of Apocynaceae species. The literature reports the use of several Amazonian species, such as Asclepias curassavica, Himatanthus articulates, and Macoubea sprucei, in treating tumors and cancers. Phytochemical studies on A. curassavica and H. articulatus have shown their chemical compositions to be variable, possessing cardenolides, iridoids, flavonoids, steroids, and terpenes. Most of the species have not been subjected to in vitro experiments for anticancer activity, and the evaluated species showed moderate-to-weak responses or were inactive. Other studies have shown that iridoids, flavonoids, and steroids are promising as antitumor treatments. The following action mechanisms have been attributed to iridoids: topoisomerase I-DNA complex stabilization, cellular cytoskeleton alteration, and induction of apoptosis. The activities of flavonoids have been reported to include apoptosis induction in liver tumor cells. Some authors suggest that flavonoids reduce oxidative stress cellular response which reduces mitochondrial dysfunction and cell death. In summary, Apocynaceae species appear to be promising as a source for antitumor agents; however, further studies are required to confirm their antitumor activities and to better elucidate the underlying mechanisms involved. Este estudio revisa el uso de especies de Apocynaceae para el tratamiento del cáncer y tumores en la Amazonía. Se buscaron bases de datos y libros para realizar evaluaciones etnobotánicas y fitoquímicas de las actividades citotóxicas y anticancerígenas de las especies de Apocynaceae. La literatura reporta el uso de varias especies amazónicas, como Asclepias curassavica, Himatanthus articulate y Macoubea sprucei, en el tratamiento de tumores y cánceres. Los estudios fitoquímicos sobre A. curassavica y H. articulatus han demostrado que sus composiciones químicas son variables y poseen cardenólidos, iridoides, flavonoides, esteroides y terpenos. La mayoría de las especies no se han sometido a experimentos in vitro para determinar la actividad anticancerosa, y las especies evaluadas mostraron respuestas de moderadas a débiles o estuvieron inactivas. Otros estudios han demostrado que los iridoides, flavonoides y esteroides son prometedores como tratamientos antitumorales. Se han atribuido a los iridoides los siguientes mecanismos de acción: estabilización del complejo topoisomerasa I-ADN, alteración del citoesqueleto celular e inducción de apoptosis. Se ha informado que las actividades de los flavonoides incluyen la inducción de apoptosis en células tumorales hepáticas. Algunos autores sugieren que los flavonoides reducen la respuesta celular al estrés oxidativo, lo que reduce la disfunción mitocondrial y la muerte celular. En resumen, las especies de Apocynaceae parecen prometedoras como fuente de agentes antitumorales; sin embargo, se requieren más estudios para confirmar sus actividades antitumorales y para dilucidar mejor los mecanismos subyacentes involucrados. Este estudo revisa o uso de espécies de Apocynaceae para o tratamento de câncer e tumores na Amazônia. Bancos de dados e livros foram pesquisados para avaliações etnobotânicas e fitoquímicas das atividades citotóxicas e anticâncer de espécies de Apocynaceae. A literatura relata o uso de várias espécies amazônicas, como Asclepias curassavica, Himatanthus articulatus e Macoubea sprucei, no tratamento de tumores e cânceres. Estudos fitoquímicos em A. curassavica e H. articulatus mostraram que suas composições químicas são variáveis, possuindo cardenolideos, iridoides, flavonoides, esteroides e terpenos. A maioria das espécies não foi submetida a experimentos in vitro para atividade anticâncer, e as espécies avaliadas apresentaram respostas moderadas a fracas ou eram inativas. Outros estudos mostraram que iridoides, flavonoides e esteroides são promissores nos tratamentos antitumorais. Os seguintes mecanismos de ação foram atribuídos aos iridóides: estabilização do complexo topoisomerase I-DNA, alteração do citoesqueleto celular e indução de apoptose. Foi relatado que as atividades dos flavonoides incluem a indução de apoptose em células tumorais do fígado. Alguns autores sugerem que os flavonoides reduzem a resposta celular ao estresse oxidativo, o que reduz a disfunção mitocondrial e a morte celular. Em resumo, as espécies Apocynaceae parecem ser promissoras como fonte de agentes antitumorais; no entanto, mais estudos são necessários para confirmar suas atividades antitumorais e para melhor elucidar os mecanismos subjacentes envolvidos.

The objective of this work was to evaluate the antiparasitic potential and cytotoxic effect of extracts by the leaves and roots of S. tuberosa. The results show that the extracts of S. tuberosa have low antipromastigote activity against strains of L. braziliensis, since there was no action at concentrations ≤ 500 µg/mL. While for L. infantum there was a significant action of the hydroalcoholic extract of the roots against promastigote forms, since there was 29.33 ± 1.94% of mortality for the treatment of 1000 µg/mL. The same extract showed antiepimastigote action against T. cruzi at a concentration ≥ 1000 µg/mL. Despite the low antiparasitic activities, it is possible to observe that the extracts of S. tuberosa have no cytotoxic action, except the hydroalcoholic extract of the roots. In this extract there was a total of 27.85 ± 2.41% of cytotoxicity against fibroblastic cells, in the highest concentration evaluated (1000 µg/mL). El objetivo de este trabajo fue evaluar el potencial antiparasitario y efecto citotóxico de extractos de hojas y raíces de S. tuberosa. Los resultados muestran que los extractos de S. tuberosa tienen baja actividad antipromastigota contra cepas de L. braziliensis, ya que no hubo acción a concentraciones ≤ 500 µg/mL. Mientras que para L. infantum hubo una acción significativa del extracto hidroalcohólico de las raíces contra las formas de promastigote, ya que hubo 29.33 ± 1.94% de mortalidad para el tratamiento de 1000 µg / mL. El mismo extracto mostró acción antiepimastigota contra T. cruzi a una concentración ≥ 1000 µg/mL. A pesar de las bajas actividades antiparasitarias, es posible observar que los extractos de S. tuberosa no tienen acción citotóxica, excepto el extracto hidroalcohólico de las raíces. En este extracto hubo un total de 27.85 ± 2.41% de citotoxicidad contra células fibroblásticas, en la concentración más alta evaluada (1000 µg/mL). O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antiparasitário e o efeito citotóxico de extratos de folhas e raízes de S. tuberosa. Os resultados mostram que os extratos de S. tuberosa apresentam baixa atividade antipromastigota contra cepas de L. braziliensis, uma vez que não houve ação em concentrações ≤ 500 µg/mL. Já para L. infantum houve uma ação significativa do extrato hidroalcoólico das raízes contra as formas promastigotas, já que houve 29,33 ± 1,94% de mortalidade para o tratamento de 1000 µg/mL. O mesmo extrato apresentou ação antiepimastigota contra T. cruzi na concentração ≥ 1000 µg/mL. Apesar da baixa atividade antiparasitária, é possível observar que os extratos de S. tuberosa não apresentam ação citotóxica, exceto o extrato hidroalcoólico das raízes. Neste extrato houve um total de 27,85 ± 2,41% de citotoxicidade contra células fibroblásticas, na maior concentração avaliada (1000 µg/mL).

The red seaweed species Gelidium sesquipedale and Pterocladiella capillacea are commercially explored as one of the main seaweed resources in Portugal. However, they are essentially harvested for extraction of agar, leaving a large biomass share needing an adequate valorization. The two studied red seaweed species were characterized by a large share of saturated fatty acids (SFA) in the vicinity of 60% (of the total FAs). Concerning ω3 highly unsaturated FAs, only EPA reached a significant percentage in P. capillacea and G. sesquipedale, 13.0 ± 0.5% and 7.7 ± 0.1%, respectively. In comparison with other seaweeds, the phenolic content was low for both species and aqueous and ethanolic extracts. The antioxidant activity was also low or even undetected. Regarding anti-inflammatory activity, as measured by inhibition of cyclooxygenase-2, it was not detected in the aqueous extracts of the seaweed, but was significant in the ethanolic extracts, 69 ± 3% and 54 ± 6%, for P. capillacea and G. sesquipedale, respectively. Concerning cytotoxicity, while ethanolic extracts did not cause any detectable cytotoxicity, the biomass and the aqueous extracts reduced HeLa cell viability. Finally, the elemental composition showed differences between the two seaweed species. In particular, G. sesquipedale contained a higher I level than P. capillacea, 807 ± 51 mg/kg dw vs 435 ± 18 mg/kg dw. On the whole, attained results were promising and warrant further study. This work was supported by the following Grants: Ref.: SFRH/BPD/102689/2014 (“Fundação para a Ciência e a Tecnologia”, FCT) for Carlos Cardoso, DIVERSIAQUA (MAR2020, Ref.: 16-02-01-FEAM-66) for Cláudia Afonso, and (SFRH/BD/129795/2017; FCT) for Joana Matos. The experimental work was funded by the projects AQUAMAX (Ref.: 16-02-01-FMP-0047) and I9+ PROALGA (Ref.: 16-01-03-FMP-0011). info:eu-repo/semantics/publishedVersion

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico O complexo ternário de Cobre(II), 1,10-fenantrolina e doxiciclina [Cu(dox)(phen)]2+, desenvolvido como um candidato a droga antitumoral, mostrou alta citotoxicidade e atividade de clivagem do DNA por mecanismo oxidativo e intercalação à molécula, sugerindo estudos que auxiliem na melhor compreensão de seu mecanismo de ação. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi investigar sua atividade citotóxica e potencial genotóxico em células tumorais e não-tumorais cultivadas in vitro e sua atividade antitumoral in vivo utilizando camundongos BALB/C inoculados com as linhagens celulares de sarcoma 180 e tumor de Ehrlich, bem como avaliar os efeitos mutagênicos e recombinogênicos do [Cu(dox)(phen)]2+ utilizando o teste para detecção de mutação e recombinação somática (SMART) em Drosophila melanogaster. O coeficiente de partição de [Cu(dox)(phen)]2+ foi determinado em sistema água octanol em pH 7,4. A avaliação da citotoxicidade foi realizada usando o ensaio de resazurina em três linhagens de células tumorigênicas (sarcoma TG180, sarcoma S180 e melanoma B16F10) e uma linhagem não tumorigênica (macrófagos RAW 264.7) em diferentes concentrações. A atividade genotóxica foi avaliada pelo Teste de Micronúcleo in vitro nas concentrações de 1; 0,25; 0,1; e 0,05μM. O teste de atividade antitumoral in vivo foi realizado utilizando sarcoma S180 nas concentrações de 5, 10 e 15 mg/Kg de animal e foi determinado o tempo de sobrevivência e alterações no peso de camundongos usando um modelo de tumor ascítico de Ehrlich nas concentrações de 1 e 8mg/Kg de animal. O teste SMART foi realizado com larvas de 72h nos cruzamentos padrão e de alta bioativação em três concentrações de [Cu(dox)(phen)]2+ (6,92; 13,84 ou 27,6mM). Foram analisados indivíduos trans-heterozigotos marcados e heterozigotos balanceados para determinar os eventos mutacionais e recombinogênicos ocorridos nas células. Os resultados obtidos em linhagens celulares mantidas in vitro indicaram que o composto apresenta moderado potencial citotóxico, com inibição de crescimento celular seletiva para células tumorais, especialmente B16F10. Seu mecanismo de ação principal parece ser por meio da geração de EROs. [Cu(dox)(phen)]2+ reduziu significativamente o tamanho do tumor implantado no modelo animal, sugerindo grande potencial antitumoral. [Cu(dox)(phen)]2+ é seletivamente citotóxico para B16F10 e mostrou elevado potencial quimioterápico in vivo contra sarcoma S180 e tumor ascítico de Ehrlich. Em relação aos efeitos mutagênicos e recombinogênicos foi verificado que [Cu(dox)(phen)]2+ aumentou significativamente as frequências de células mutantes em ambos os cruzamentos de D. melanogaster, principalmente por recombinação. Esses dados mostram que [Cu(dox)(phen)]2+ é um agente recombinogênico direto, independente da bioativação. Os resultados obtidos indicam que [Cu(dox)(phen)]2+ é um candidato promissor para o desenvolvimento de novas drogas quimioterápicas, uma vez que apresentou comportamento seletivo para células tumorais e possui seletividade satisfatória para atravessar a membrana e chegar ao DNA, seu principal alvo de ação. The ternary complex of Copper(II), 1,10-phenanthroline and doxycycline [Cu(dox)(phen)]2+, developed as a candidate for the antitumoral drug, showed high cytotoxicity and DNA cleavage activity by oxidative mechanism and interleaving to the molecule, suggesting studies that help to better understand its mechanism of action. In this context, the aim of the present study was to investigate its cytotoxic activity and genotoxic potential in tumor and non-tumor cells cultured in vitro and its antitumoral activity in vivo using BALB/C mice inoculated with the cell lines of sarcoma 180 and Ehrlich's tumour, as well as evaluating the mutagenic and recombinogenic effects of [Cu(dox)(phen)]2+ using the somatic mutation and recombination test (SMART) on Drosophila melanogaster. The partition coefficient of [Cu(dox)(phen)]2+ was determined in octanol water at pH 7.4. Cytotoxicity was assessed using the resazurin test on three lines of tumorigenic cells (sarcoma TG180, sarcoma S180 and melanoma B16F10) and a non-tumogenic lineage (macrophages RAW 264.7) in different concentrations. Genotoxic activity was evaluated by in vitro Micronucleus Test at concentrations of 1; 0.25; 0.1; and 0.05μM. The in vivo antitumoral activity test was performed using sarcoma S180 at concentrations of 5, 10 and 15 mg/Kg of animal and the survival time and changes in weight of mice were determined using an Ehrlich ascitic tumor model at concentrations of 1 and 8 mg/Kg of animal. The SMART test was performed with 72h larvae at standard and high bioactivation crossings at three concentrations of [Cu(dox)(phen)]2+ (6.92; 13.84 or 27.6mM). Marked trans-heterozygous and balanced heterozygous individuals were analyzed to determine the mutational and recombinogenic events that occurred in the cells. The results obtained from cell lines maintained in vitro indicated that the compound presents moderate cytotoxic potential, with selective cell growth inhibition for tumor cells, especially B16F10. Its main mechanism of action seems to be through the generation of EROs. [Cu(dox)(phen)]2+ significantly reduced the size of the tumor implanted in the animal model, suggesting great antitumor potential. [Cu(dox)(phen)]2+ is selectively cytotoxic to B16F10 and showed high in vivo chemotherapy potential against S180 sarcoma and Ehrlich's ascitic tumor. Regarding the mutagenic and recombinogenic effects it was verified that [Cu(dox)(phen)]2+ significantly increased the frequencies of mutant cells in both crossings of D. melanogaster, mainly by recombination. These data show that [Cu(dox)(phen)]2+ is a direct recombinogenic agent, independent of bioactivation. The results obtained indicate that [Cu(dox)(phen)]2+ is a promising candidate for the development of new chemotherapeutic drugs, once it has shown selective behavior for tumor cells and has satisfactory selectivity to cross the membrane and reach the DNA, its main target of action. Tese (Doutorado)

Leaves and roots of Acanthospermum australe (Asteraceae) have been used in Brazilian folk medicine for the treatment of various ailments including diarrhea, skin diseases, blennorrhagia, dyspepsia, parasitic worms and malaria. The aim of study was to characterize the chemical profiles of the aqueous and hydroalcoholic extracts of leaves and roots of A. australe, and to evaluate their antimicrobial activities against diarrhea-inducing bacteria (Enterococcus faecalis, Shigella dysenteriae and Yersinia enterocolitica), as well as their cytotoxic properties. Aqueous leaf extracts were obtained by infusion, while aqueous root extracts were obtained by decoction. The hydroalcoholic leaf and root extracts were prepared by maceration in 90% ethanol for 3 days. Antimicrobial activity was assessed using standard techniques and cytotoxicity was evaluated using Chinese hamster ovary cells CHO-K1. Chemical analysis revealed the presence of tannins, flavonoids, saponins and phenolic compounds in the extracts. Although root extracts were not effective against E. faecalis, leaf extracts at concentrations of 20 mg/mL exhibited bactericidal activities against this microorganism. The hydroalcoholic root extract was unique in presenting a bactericidal effect against S. dysenteriae. None of the extracts showed bacteriostatic or bactericidal activities against Y. enterocolitica. The results presented herein demonstrate that the Gram-positive E. faecalis and the Gram-negative S. dysenteriae were susceptible to A. australe extracts, although bacteriostatic/bactericidal activities were only observed at concentrations considered too high for clinical application. Our results support the ethnopharmacological use of A. australe in the treatment of gastrointestinal disorders, particularly diarrhea caused by infectious bacteria, although further studies are required to determine the anti-diarrhea effects and the toxicities of the extracts in vivo. Resumo Folhas e raízes de Acanthospermum australe (Asteraceae) têm sido usadas na medicina popular brasileira para o tratamento de várias doenças, incluindo diarreia, doenças de pele, blenorragia, dispepsia, vermes parasitas e malária. O objetivo deste estudo foi caracterizar os perfis químicos dos extratos aquosos e hidroalcoólicos das raízes e folhas de A. australe, e avaliar as suas atividades antimicrobianas contra as bactérias indutoras de diarreia (Enterococcus faecalis, Shigella dysenteriae e Yersinia enterocolitica), bem como sua citotoxicidade. Os extratos aquosos de folhas foram obtidos por infusão, enquanto que os extratos aquosos de raízes foram obtidos por decocção. Os extratos hidroalcoólicos de folhas e raízes foram preparados por maceração em etanol a 90% durante 3 dias. A atividade antimicrobiana foi avaliada utilizando técnicas padrão e a citotoxicidade foi avaliada utilizando células de ovário de hamster chinês CHO-K1. A análise química revelou a presença de taninos, flavonóides, saponinas e compostos fenólicos nos extratos. Apesar de extratos de raiz não foram eficazes contra E. faecalis, extratos de folhas em concentrações de 20 mg/mL apresentaram atividades bactericidas contra este microrganismo. O extrato hidroalcoólico de raiz foi o único a apresentar um efeito bactericida contra S. dysenteriae. Nenhum dos extratos apresentaram atividades bacteriostáticas ou bactericidas contra Y. enterocolitica. Os resultados apresentados demonstram que a bactéria Gram-positiva E. faecalis e a Gram-negativa S. dysenteriae foram suscetíveis aos extratos de A. australe, embora as atividades bacteriostáticos/bactericidas tenham sido apenas observados em concentrações consideradas elevadas para aplicação clínica. Os nossos resultados apoiam a utilização de etnofarmacológica de A. australe no tratamento de perturbações gastrointestinais, especialmente diarreia causadas por bactérias infecciosas, embora sejam necessários mais estudos para determinar os efeitos anti-diarreia e as toxicidades dos extratos in vivo.

Bacteria of Streptomyces genus are a promising source of biologically active products, with applications in medicine, industry and agriculture. Therefore, the objective of this work was to evaluate the cytotoxic, antioxidant and antimicrobial activities of fermented rice extract and their semipurified fractions from Streptomyces spp. isolated of the rhizosphere of Paullinia cupana, Amazon-Brazil. For this, a bioguided study was carried out by the cytotoxic activity with methanolic extract of Streptomyces sp. ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) partitioned with n-hexane, ethyl acetate and 2-butanol. The antioxidant activity was analyzed using the DPPH, ABTS and phosphomolybdenum methods, while the antimicrobial activity was investigated by microdilution method to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against species of bacteria and yeast. In the cytotoxicity test, the butanolic phase (FbuOH-12H) presented IC50 of 1.1 µg/mL against MOLT-4, with cell death probably by apoptosis, but did not cause cytotoxicity on peripheral blood mononuclear cell (PBMC) or human erythrocytes. Chemical prospecting detected the presence of saponins and reducing sugars on 2-butanol fraction (FBuOH-12H), which can be related to cytotoxicity. On the antioxidant activity by ABTS, the partition with ethyl acetate (FAcOEt-12H) showed antioxidant capacity of 1161.7 ± 0.04 µM of Trolox/g of extract, indicating an expressive reactivity of the phase with this radical. The aqueous phases (from hexane, ethyl acetate and methanol extracts) were active in all tested microorganisms, except E. faecalis. Las bacterias del género Streptomyces son una fuente prometedora de productos biológicamente activos, con aplicaciones en medicina, industria y agricultura. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue evaluar las actividades citotóxicas, antioxidantes y antimicrobianas de los extractos y fracciones semipurificadas de Streptomyces spp. aislada de la rizósfera de Paullinia cupana, Amazonas-Brasil. Para ello, se realizó un estudio bioguiado de la actividad citotóxica con extracto metanólico de Streptomyces sp. El extracto ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) fue fraccionado con n-hexano, acetato de etilo y 2-butanol. La actividad antioxidante fue analizada a través de los métodos de DPPH, ABTS y fosfomolibdeno, mientras que la actividad antimicrobiana fue investigada por el método de microdilución para determinar la concentración minima inhibitoria (MIC) contra especies de bacterias y levaduras. En la prueba de citotoxicidad la fase butanólica (FbuOH-12H) presentó una IC50 de 1.1 µg/mL contra MOLT-4, con muerte celular probablemente por apoptosis, pero no causó citotoxicidad en las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) o en eritrocitos humanos, La prospección química detectó la presencia de saponinas y azúcares reductores en la fracción de 2-butanol (FBuOH-12H), que pueden estar relacionados con la citotoxicidad. Sobre la actividad antioxidante por ABTS, la fracción de acetato de etilo (FAcOEt-12H) mostró una capacidad antioxidante de 1161.7 ± 0.04 µM de Trolox/g de extracto, indicando una expresiva reactividad de la fase con este radical. Las fases acuosas (de los extractos de hexano, acetato de etilo y metanol) fueron activas en todos los microorganismos probados, excepto E. faecalis. As bactérias de gênero Streptomyces são fontes promissoras de produtos biologicamente ativos, com aplicações na medicina, indústria e agricultura. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades citotóxica, antioxidante e antimicrobiana do extrato fermentado em arroz e suas frações semipurificadas de Streptomyces spp. isolado da rizosfera de Paullinia cupana, Amazônia, Brasil. O estudo bioguiado foi realizado através da atividade citotóxica com o extrato metanólico de Streptomyces sp. ACTMS-12H UFPEDA 3405 (EMeOH-12H) particionado com n-hexano, acetato de etila e 2-butanol. A atividade antioxidante foi analizada pelos métodos do DPPH, ABTS e fosfomilibidênio, enquanto que a atividade antimicrobiana foi feita pelo método da microdiluição para determinar a concentração inibitória minima (MIC) frente a espécies de bactérias e levedura. No teste de citotoxicidade, a fase butanólica (FbuOH-12H) apresentou IC50 de 1,1 µg/mL frente à linhagem MOLT-4, com morte celular provavelmente por apoptose, mas não causou citotoxicidade em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) nem em eritrócitos humanos. A prospecção fitoquímica detectou a presença de saponinas e açúcares redutores na fração 2-butanol (FBuOH-12H), e estes compostos podem estar relacionados à citotoxicidade. Na atividade antioxidante pelo ABTS, a partição com acetato de etila (FAcOEt-12H) apresentou capacidade antioxidante de 1161,7 ± 0,04 µM de Trolox/g do extrato, indicando uma expressiva reatividade da fase com este radical. A fase aquosa (dos extratos hexano, acetate de etila e metanol) foi ativa para todos os microrganismos testados, exceto E. faecalis.

Anthropogenic activities in tropical rivers favor the eutrophication process, which causes increased concentration of heavy metals. The presence and bioaccumulation of metals are directly related to the presence of genotoxic damage in aquatic organisms. Thus, we evaluated the presence of heavy metals (Fe, Zn, Cr, Cu and Al) and performed toxicogenetic tests in surface (S) and bottom (B) of water samples of the Poti river (Piaui/Brazil). Cytotoxicity and genotoxicity tests were performed in Allium cepa, and micronucleus (MN) and comet assay were performed in Oreochromis niloticus. The chemical analysis showed concentrations above the limit for Cu, Cr, Fe and Al according to Brazilian laws, characterizing anthropogenic disturbance in this aquatic environment. Toxicogenetic analysis presented significant cytotoxic, mutagenic and genotoxic effects in different exposure times and water layers (S and B), especially alterations in mitotic spindle defects, MN formations, nuclear bud and DNA strand breaks. Correlations between Fe and cytotoxicity, and Al and mutagenicity were statistically significant and point out to the participation of heavy metals in genotoxic damage. Therefore, Poti river water samples presented toxicogenetic effects on all bioindicators analyzed, which are most likely related to heavy metals pollution. As atividades antrópicas em rios tropicais favorecem o processo de eutrofização, que causa aumento da concentração de metais pesados. A presença e bioacumulação de metais estão diretamente relacionadas à presença de danos genotóxicos em organismos aquáticos. Assim, avaliamos a presença de metais pesados ​​(Fe, Zn, Cr, Cu e Al) e realizamos testes toxicogenéticos em amostras de superfície (S) e de fundo (B) de água do rio Poti (Piauí/Brasil). Testes de citotoxicidade e genotoxicidade foram realizados em Allium cepa, e micronúcleo (MN) e ensaio cometa foram realizados em Oreochromis niloticus. A análise química mostrou concentrações acima do limite para Cu, Cr, Fe e Al de acordo com a legislação brasileira, caracterizando perturbação antrópica neste ambiente aquático. A análise toxicogenética apresentou efeitos citotóxicos, mutagênicos e genotóxicos significativos em diferentes tempos de exposição e camadas de água (S e B), especialmente alterações nos defeitos do fuso mitótico, formações de MN, brotos nucleares e quebras de fitas de DNA. As correlações entre Fe e citotoxicidade, e Al e mutagenicidade foram estatisticamente significativas e apontam para a participação de metais pesados ​​nos danos genotóxicos. Portanto, as amostras de água do rio Poti apresentaram efeitos toxicogenéticos em todos os bioindicadores analisados, que provavelmente estão relacionados à poluição por metais pesados.

Vernonanthura polyanthes, popularly known as assa-peixe, is a medicinal plant that has been widely used by Brazilian Cerrado population for treatment of diseases without a detailed evaluation of their effectiveness, toxicity, and proper dosage. Thus, more studies investigating the safety of V. polyanthes aqueous extract before the use are needed. The purpose of this study was to evaluate the toxicity, cytotoxicity and genotoxicity of V. polyanthes leaves aqueous extract using the Artemia salina and Allium cepa assays. For the A. salina assay, three groups of 10 larvae were exposed to V. polyanthes leaves aqueous extract at the concentrations of 5, 10, 20, 40, and 80 mg/ml. For the A. cepa assay, 5 onion bulbs were exposed to V. polyanthes leaves aqueous extract at 10, 20, and 40 mg/ml, and then submitted to macroscopic and microscopic analysis. As result it was identified a toxicity and cytotoxicity of V. polyanthes dependent on the extract concentration. The A. salina assay suggests that the concentration of 24 mg/ml of the V. polyanthes extract is able to kill 50% of naupllis; while the A. cepa assay suggests that V. polyanthes leaves aqueous extract is toxic at concentrations higher than 20 mg/ml; however the cytotoxic effect in A. cepa root cells was observed at 40 mg/ml of the extract. It is important to say that the V. polyanthes leaves aqueous extract concentration commonly used in popular medicine is 20 mg/ml. Thus, the popular concentration used is very close to toxicity limit in A. salina model (24 mg/ml) and is the concentration which showed toxic effect in A. cepa root cells (20 mg/ml). No genotoxic activity of V. polyantes leaves aqueous extract was observed in the conditions used in this study. Because of the antiproliferative action and no genotoxic activity, V. polyanthes leaves aqueous extract may present compounds with potential use for human medicine. However more detailed studies need to be performed to confirm this potential. Resumo Vernonanthura polyanthes, popularmente conhecida como assa-peixe, é uma planta medicinal amplamente utilizada pela população brasileira do Cerrado para o tratamento doenças, sem uma avaliação detalhada de sua eficácia, toxicidade e dosagem adequada. Dessa forma, são necessários estudos para investigar a segurança do uso do extrato aquoso de V. polyanthes. O objetivo deste estudo foi avaliar a toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade do extrato aquoso de folhas de V. polyanthes utilizando os ensaios de Artemia salina e Allium cepa. Para o ensaio de A. salina, três grupos de 10 larvas foram expostos ao extrato aquoso de folhas de V. polyanthes nas concentrações de 5, 10, 20, 40 e 80 mg/ml. Para o ensaio de A. cepa, 5 bulbos de cebola foram expostas ao extrato aquoso de folhas de V. polyanthes nas concentrações de 10, 20 e 40 mg/ml, e então submetidos a análise macroscópica e microscópica. O ensaio de A. salina sugere que a concentração de 24 mg/ml do extrato de V. polyanthes é capaz de matar 50% dos náuplios; enquanto o ensaio de A. cepa sugere que o extrato aquoso das folhas de V. polyanthes é tóxico em concentrações superiores a 20 mg/ml. O efeito citotóxico nas células da raiz de A. cepa foi observado apenas na concentração de 40 mg/ml. É importante dizer que a concentração de extrato aquoso de folhas de V. polyanthes comumente usada na medicina popular é de 20 mg/ml. Assim, a concentração popular utilizada está muito próxima do limite de toxicidade no modelo de A. salina (24 mg/ml) e é a mesma concentração que apresentou efeito tóxico nas células da raiz de A. cepa (20 mg/ml). Não foi observada atividade genotóxica do extrato aquoso de folhas de V. polyantes nas condições utilizadas neste trabalho. Por causa da ação antiproliferativa e ausência de atividade genotóxica, o extrato aquoso de folhas de V. polyanthes pode ser uma boa fonte natural de compostos antitumorais e pode apresentar potencial para uso na medicina. No entanto, estudos mais detalhados precisam ser realizados para confirmar esse potencial.

O veneno de abelha (VA) ou apitoxina é um produto apícola que tem sido utilizado desde os tempos ancestrais para múltiplas finalidades, nomeadamente em medicina tradicional na apiterapia. Trata-se de uma mistura complexa de substâncias que lhe conferem propriedades bioativas. No presente trabalho, analisaram-se cinco amostras de VA obtidas a partir de Apis mellifera iberiensis de dois apiários diferentes (Aveleda e Milhão, na região de Bragança). Foram, caracterizadas quimicamente e avaliadas quanto às suas propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e citotóxicas. A análise das amostras por LC-DAD-ESI/MSn demonstrou que a melitina (MEL) era o composto maioritário, seguido da fosfolipase A2 (PLA2) e da apamina (APA). Todas as amostras demonstraram atividade antioxidante, medida pela capacidade captadora de radicais livres, poder redutor e inibição da peroxidação lipídica, e anti-inflamatória, determinada pela capacidade de diminuir a formação de NO em macrófagos de rato (RAW 264,7). No entanto, não foi observada uma relação direta entre as propriedades bioativas mencionadas e o perfil químico (qualitativo ou quantitativo) das amostras. Os resultados obtidos evidenciam, sim, que existem concentrações específicas, nas quais estes compostos são mais ativos (e.g., presentes na única amostra obtida no apiário de Aveleda). As amostras de VA demonstraram também propriedades citototóxicas semelhantes para todas as linhas celulares tumorais testadas (MCF-7, NCI-H460, HeLa e HepG2), sendo as linhas MCF-7 (carcinoma de mama) e HeLa (carcinoma cervical) as mais suscetíveis. Apesar disso, as amostras estudadas parecem não ser adequadas para o tratamento de carcinoma de mama, hepatocelular e cervical porque, nas concentrações ativas, as amostras também foram tóxicas para células não tumorais (cultura primária de células de fígado de porco, PLP2). Relativamente ao carcinoma do pulmão, o VA deve ser utilizado abaixo da concentração tóxica para as células não tumorais. Em geral, o presente estudo evidenciou o enorme potencial bioativo do VA, sendo o primeiro trabalho realizado com amostras Portuguesas., Revista de Ciências Agrárias, vol. 40 n.º spe (2017)

The benzophenones are synthetic and natural compounds presenting a variety of activities, including photoprotective, cytotoxic and antiviral. It is herein described the preparation of a series of twenty-seven benzophenone derivatives bearing 1,2,3-triazole functionalities and the evaluation of their photoprotective, cytotoxic and antiviral on Zika Virus (ZIKV) activities. The compounds were prepared in three steps, namely reduction of benzophenone, alkylation of diphenylmethanol and CuAAC reactions. The in vitro evaluation of the photoprotective activity revealed that the most active derivative 4-((benzhydryloxy)methyl)-1-(4-nitrobenzyl)-1H-1,2,3-triazole (4k) displayed UVB sun protection factor equal to 6,9±0,53, which make this compound a possible candidate to be used in formulations for photoprotective applications. In terms of cytotoxicity, the compounds were evaluated against MDA-MB-231 and B16F10 cell lines. It was observed that the compounds were more active against MDA-MB-231 cells and three of them were capable of reducing cell viability by approximately 55% at 100 µmol L-1. In the antiviral screening against ZIKV, compound 4-(3-benzhydryloxy)propyl)-1-(3-methylbenzyl)-1H-1,2,3-triazole (5j) was the most effective in mantaining Vero cell viability.

The search for natural resources with antiviral potential, as an alternative to synthetic drugs, has been growing and, in this sense, oregano presents itself as a potential candidate. However, the antiviral studies with oregano are still poorly explored. BoHV-1 stands out among veterinary pathogens, for its economic impact on cattle production. In this study, the antiviral and virucidal activity of polar extracts of Origanum vulgare was evaluated against BoHV-1. Infusion (INF10), decoction (DEC), and hydroalcoholic (HAE) extracts were tested to cytotoxic and antiviral assays on MDBK cells. Cytotoxic effects were analyzed through MTT assay and the antiviral activity was expressed as a percentage of inhibition (PI). BoHV-1 was incubated with O. vulgare extracts as virucidal assay. Concentrations ≤3.12 mg/ml (INF10) and ≤1.56 mg/ml (DEC/HAE) preserved the cell viability above 60%, and all extracts were safe (>96%) between 0.78 and 0.39 mg/ml. Regarding the antiviral activity, pre-treatment of all extracts highlighted in comparison to the post-treatment. The pre-treatment of infusion at 2 mg/ml highlighted due to the high cell viability (84.69%) and the elimination of the viral load. All extracts inactivated BoHV-1 from 2 hours of incubation (20 mg/ml), showing virucidal activity. These findings may be related to 4-hydroxybenzoic acid as prevalent in all extracts. These findings showed the in vitro antiviral and virucidal activity of oregano polar extracts against BoHV-1 and may be promising for the therapeutic use against herpesviruses infections. La búsqueda de recursos naturales con potencial antiviral, como alternativa a las drogas sintéticas, ha ido creciendo y, en este sentido, el orégano se presenta como un candidato potencial. Sin embargo, los estudios antivirales con orégano aún están poco explorados. El BoHV-1 se destaca entre los patógenos veterinarios por su impacto económico en la producción ganadera. En este estudio, se evaluó la actividad antiviral y virucida de extractos polares de Origanum vulgare contra BoHV-1. Se probaron extractos de infusión (INF), decocción (DEC) e hidroalcohólicos (HAE) para ensayos citotóxicos y antivirales en células MDBK. Los efectos citotóxicos se analizaron mediante el ensayo MTT y la actividad antiviral se expresó como porcentaje de inhibición (PI). Se incubó BoHV-1 con extractos de O. vulgare como ensayo virucida. Las concentraciones ≤3,12 mg/ml (INF) y ≤1,56 mg/ml (DEC / HAE) preservaron la viabilidad celular por encima del 60%, y todos los extractos fueron seguros (>96%) entre 0,78 y 0,39 mg/ml. En cuanto a la actividad antiviral, se destacó el pretratamiento de todos los extractos en comparación con el postratamiento. El pretratamiento de infusión a 2 mg/ml destacó por la alta viabilidad celular (84,69%) y la eliminación de la carga viral. Todos extractos inactivaron BoHV-1 en 2 horas de incubación (20 mg/ml), mostrando actividad virucida. Estos hallazgos pueden estar relacionados con el ácido 4-hidroxibenzoico, predominante en todos extractos. Estos hallazgos mostraron la actividad antiviral y virucida in vitro de los extractos polares de orégano contra BoHV-1 y pueden ser prometedores para el uso terapéutico contra infecciones por herpesvirus. A busca por recursos naturais com potencial antiviral, como uma alternativa aos fármacos sintéticos, tem sido crescente e, neste sentido, o orégano apresenta-se como um candidato em potencial. No entanto, estudos antivirais com orégano ainda são pouco explorados. O alphaherpesvírus bovino 1 (BoHV-1) destaca-se entre os patógenos veterinários por seu impacto econômico na pecuária. Neste estudo foi avaliada a atividade antiviral e virucida de extratos polares de Origanum vulgare contra o BoHV-1. Extratos de infusão (INF10), decocção (DEC) e hidroalcoólico (HAE) foram testados em ensaios citotóxicos e antivirais em células MDBK. Os efeitos citotóxicos foram analisados ​​por meio de ensaio MTT e a atividade antiviral expressa em Porcentagem de Inibição (PI). O BoHV-1 foi incubado com os extratos de O. vulgare para avaliação do potencial virucida. As concentrações de ≤3,12 mg/ml (INF10) e ≤1,56 mg/ml (DEC / HAE) preservaram a viabilidade celular acima de 60%, e todos os extratos foram seguros (>96%) entre 0,78 e 0,39 mg/ml. Em relação à atividade antiviral, o pré-tratamento de todos os extratos destacou-se em comparação ao pós-tratamento. O pré-tratamento da infusão de 2 mg/ml destacou-se pela alta viabilidade celular (84,69%) e pela eliminação da carga viral. Todos os extratos inativaram o BoHV-1 a partir de 2 horas de incubação (20 mg/ml), mostrando atividade virucida. Esses achados podem estar relacionados ao ácido 4-hidroxibenzóico, prevalente em todos os extratos. Esses achados demonstram atividade antiviral e virucida in vitro de extratos polares de orégano contra BoHV-1, podendo ser promissores no uso terapêutico contra infecções por herpesvírus.

Calotropis procera belongs to the Apocynaceae family and is found in the Northeast of Brazil. Several activities are attributed to this species, such as anti-inflammatory, antibacterial and anti-cancer activities. This research aimed to conduct a bioguided study of C. procera in order to isolate and identify triterpenes of the species and evaluate the cytotoxic activity of products of the plant species. The crude ethanolic extract (CEE) was obtained and partitioned. The hexanic phase was chromatographed giving the compound Cp-1, which was identified using spectroscopic techniques and thermal analysis. It was possible to identify Cp-1 as a triterpene called calotropenyl acetate, already reported in the literature. The cytotoxicity test was performed using the MTT technique and it was observed a good activity of CEE and hexanic phase against HL-60 and KS62 lines with an IC50 ranging between 26.8 ± 0.4 µg mL-1 and 47.0 ± 0.5 µg mL-1, besides no toxicity in normal lines, while Cp-1 showed no relevant activity against the tumor cells tested. The results indicated that the species contains in its chemical composition products with pharmacological interest, in addition to cytotoxic for leukemic cells, which can be further explored in complementary studies. Calotropis procera es una planta arbustiva perteneciente a la familia Apocynaceae, que se encuentra ampliamente en la región noreste de Brasil. A la especie se le atribuyen diversas actividades, como antiinflamatorias, antibacterianas y anticancerígenas, y el género Calotropis se caracteriza por presentar flavonoides, terpenos, taninos y compuestos fenólicos. Esta investigación tuvo como objetivo realizar un estudio bioguiado de C. procera con el fin de aislar e identificar triterpenos de la especie y evaluar la actividad citotóxica de productos de la especie vegetal. El extracto etanólico crudo (EEB) se obtuvo mediante maceración en etanol al 96% y se repartió con disolventes orgánicos, utilizando un gradiente de polaridad. La fase de hexano se cromatografió en columna con gel de sílice y se eluyó con disolventes orgánicos puros o en mezclas binarias dando lugar al compuesto codificado por Cp-1, que se identificó mediante técnicas espectroscópicas (RMN y IV) y análisis térmico. La evaluación de los datos del análisis espectroscópico y térmico permitió identificar al Cp-1 como un triterpeno denominado acetato de calotropenilo, ya reportado en la literatura. La prueba de citotoxicidad de productos obtenidos de la especie también se realizó mediante la técnica MTT. En la prueba de citotoxicidad, se observó una buena actividad de la EEB y de la fase hexano contra las cepas HL-60 y KS62 con un IC50 que varió de 26,8 ± 0,4 µg mL-1 a 47,0 ± 0,5 µg mL-1, además de ausencia de toxicidad en cepas normales, mientras que Cp-1 no mostró actividad relevante contra las células tumorales ensayadas. Los resultados indicaron que la especie contiene en su composición química productos con potencial fitoquímico para el aislamiento e identificación de compuestos por técnicas espectroscópicas y termoanalíticas, así como citotóxicos para células leucémicas, que pueden ser explorados con mayor profundidad en estudios complementarios. Calotropis procera é um vegetal arbustivo pertencente à família Apocynaceae, sendo amplamente encontrado na região Nordeste do Brasil. Diversas atividades são atribuídas a espécie, tais como as atividades anti-inflamatórias, antibacteriana e anticancerígena e o gênero Calotropis caracteriza-se por apresentar flavonoides, terpenos, taninos e compostos fenólicos. Esta pesquisa teve como objetivo realizar um estudo bioguiado de C. procera com o intuito de isolar e identificar triterpenos da espécie e avaliar a atividade citotóxica dos produtos da espécie vegetal. O extrato etanólico bruto (EEB) foi obtido por maceração em etanol a 96% e particionado com solventes orgânicos, utilizando um gradiente de polaridade. A fase hexânica foi cromatografada em coluna com gel de sílica e eluída com solventes orgânicos puros ou em misturas binárias dando origem ao composto codificado por Cp-1, que foi identificado utilizando técnicas espectroscópicas (RMN e IV) e de análise térmica. A avaliação dos dados espectroscópicos e de análise térmica permitiu identificar Cp-1 como sendo um triterpeno denominado acetato de calotropenil, já relatado na literatura. Também foi realizado o ensaio de citotoxicidade dos produtos obtidos da espécie utilizando a técnica de MTT. No ensaio de citotoxicidade observou-se uma boa atividade do EEB e da fase hexânica frente as linhagens HL-60 e KS62 com um IC50 variando entre 26.8 ± 0.4 µg mL-1 e 47.0 ± 0.5 µg mL-1, além de nenhuma toxicidade em linhagens normais, enquanto que Cp-1 não mostrou atividade relevante contra as células tumorais testadas. Os resultados indicaram que a espécie contém na sua composição química produtos com potencial fitoquímico para isolamento e identificação de compostos por técnicas espectroscópicas e termoanalíticas, além de citotóxico para células leucêmicas, que podem ser mais explorados em estudos complementares.

The objective of this study was to evaluate the action of Hymenaea stigonocarpa bark hydroalcoholic extract against a mutagenic compound using A. cepa meristematic root cells as a test system. The treatment groups were: Negative Control (NC) – distilled water; Positive Control (PC) – paracetamol at a concentration of 0.008 mg/mL, Jatoba Control (JC) – aqueous fraction jatobá-do-cerrado at 0.5 or 1.0 or 1.5 mg/mL, and Simultaneous Treatment (ST) - jatobá-do-cerrado aqueous fraction at a concentration of 0.5 or 1.0 or 1.5 mg/mL associated with paracetamol solution at a concentration of 0.008 mg/mL. All groups were analyzed at 24 and 48 h. Five onion bulbs (five replications) were used for each treatment group. The root tips were fixed in Carnoy and slides prepared by the crush technique. Cells were analyzed throughout the cell cycle, totaling 5,000 for each treatment group at each exposure time. Mitotic indices were subjected to statistical analysis using the chi-square test (p

RESUMO Cyrtocymura scorpioides (sin. Vernonia scorpioides (Lam.) Pers.), Piracá é utilizada popularmente para tratamento de úlceras, traumatismos, candidíase, processos inflamatórios e dores musculares. Objetivou-se verificar nas plantas cultivadas na Vila Nair, Jardim São Dimas e Urbanova em São José dos Campos - SP, a influência da poluição veicular nos rendimentos da matéria seca (folhas), no óleo essencial, e no extrato bruto, bem como a ação citotóxica em células HEP-2 e L929, e identificar os componentes do óleo essencial e ação fungicida em Candida albicans. As estacas (54) foram cultivadas durante 6 meses em solo + adubo (2:1) na Universidade do Vale do Paraíba - UNIVAP, e distribuídas nas estações Dutra (E1 - tráfego intenso), Teotônio (E2 - tráfego médio) e Urbanova (E3 - tráfego baixo), onde 18 mudas foram cultivadas durante 6 meses, sendo 3 repetições de 6 plantas. O óleo essencial foi extraído por hidrodestilação e seus componentes identificados por cromatografia gasosa acoplado a espectrômetro de massas (CG-MS), através de indice de similaridade com a base de espectros Wiley L. O extrato bruto foi concentrado por rotavapor. A ação fúngica foi avaliada pelo teste de difusão em disco e a citotoxicidade pelo teste MTT. Em Urbanova (E3) verificouse maior rendimento da matéria seca, do extrato bruto e do óleo essencial. Identificou-se no óleo essencial: ß-cariofileno, α-cariofileno, germacreno D, delta-cadineno e cariofileno. O Óleo Essencial possui possui baixa ação fungicida em C. albicans, enquanto o extrato hidroalcóolico se mostrou citotóxico para L929 e HEp-2. ABSTRACT Cyrtocymura scorpioides (syn. Vernonia scorpioides (Lam.) Pers.), known as Piracá, is popularly used for the treatment of ulcers, trauma, candidiasis, inflammatory disorders, and muscle pain. This study aimed to assess the influence of vehicular pollution on the yield of dry matter (leaves), essential oil, and crude extract, and the cytotoxic action in HEP-2 and L929 cells. This study also aimed to identify the components of the essential oil, and verify its fungicidal action against Candida albicans in plants grown in Vila Nair, Jardim São Dimas, and Urbanova, São José dos Campos - SP, Brazil. The seedlings (54) were grown in soil + fertilizer (2:1) at the Universidade do Vale do Paraiba - UNIVAP, and distributed to different stations, Dutra (E1 - heavy traffic), Teotônio (E2 - medium traffic), and Urbanova (E3 - low traffic), where 18 seedlings were cultivated for 6 months, with 3 replicates of 6 plants. The essential oil was extracted by hydrodistillation and its components were identified by by Gas chromatography - mass spectrometry (GC-MS), with a similarity index computed using the Wiley L spectra. The crude extract was concentrated in a Buchi Rotary Evaporator R-114, the fungicidal action and cytoptoxicity were evaluated using the disk diffusion method and the MTT test, respectively. In Urbanova (E3), high yields of dry matter, crude extract, and essential oil were obtained. The following components were identified in the oil: ß-caryophyllene, α -caryophyllene, germacrene D, delta-cardinene, and caryophyllene oxide. The oil was found to have low fungicidal action against C. albicans, while the hydroalcoholic extract was cytotoxic to L929 and HEP-2.

The use bulbs of Eleutherine bulbosa for treatament of diseases caused by malaria, amoeba and bacteria. This study accomplished the botanical and phytochemical characterization, antimicrobial activity and cytotoxic of E. bulbosa. For the anatomical studies, the studied material was fixed in formaldehyde – acetic acid and ethanol and it was dyed in safranin and in astra blue. For histochemistry, was fixed in buffered neutral formalin and in ferrous sulphate in formalina. Ethanolic Extract (EE) was submitted to fractionation in a chromatographic column and four (4) fractions were obtained from it. The Dichloromethane Fraction (DF) was submitted to a new fractionation. The biological activity was evalueted by diffusion in agar, microdilution and celular viability MTT. The bulb of E. bulbosa is characterized by a reduced caulinar axis and by succulent amiliferous cataphylls, epidermis with the presence of anthocyanins, homogeneous mesophyll with idioblasts of prismatic crystals of calcium oxalate and phenolic compounds. In agar diffusion it was observed that EE, DF and ethyl acetate fraction (ACF) were active for Staphylococcus aureus. In microdilution, DF (Inhibitory minimum concentration= 125 µg/ mL) was more active. For all samples the Minimous Bactericidal Concentration was >1000 µg/ mL. The fractionation contributes positively with the citotoxicity, being subfractions S1 and S2 the most citotoxic ones. The Fraction Dichloromethane was the most active one for S. aureus and more citotoxicity to VERO cells. Probably the less citotoxicity of EE is related to the presence of anthocyanins that are present on bulbs epidermis. El uso de bulbos de Eleutherine bulbosa para el tratamiento de enfermedades causadas por malaria, ameba y bacterias. Este estudio logró la caracterización botánica, fitoquímica, antimicrobiana y citotóxica de E. bulbosa. Para los estudios anatómicos, el material estudiado se fijó en formaldehído - ácido acético y etanol y se tiñó con safranina y azul astra. Para histoquímica, se fijó en formalina neutra tamponada y en sulfato ferroso en formalina. El Extracto Etanólico (EE) se sometió a fraccionamiento en columna cromatográfica y de él se obtuvieron cuatro (4) fracciones. La Fracción de Diclorometano (DF) se sometió a un nuevo fraccionamiento. La actividad biológica se evaluó mediante difusión en agar, microdilución y viabilidad celular MTT. El bulbo de E. bulbosa se caracteriza por un eje caulinar reducido y por suculentos catafilos amilíferos, epidermis con presencia de antocianinas, mesófilo homogéneo con idioblastos de cristales prismáticos de oxalato cálcico y compuestos fenólicos. En difusión en agar se observó que EE, DF y fracción de acetato de etilo (ACF) fueron activos para Staphylococcus aureus. En microdilución, DF (concentración mínima inhibitoria = 125 µg / mL) fue más activo. Para todas las muestras, la concentración bactericida mínima fue> 1000 µg / ml. El fraccionamiento contribuye positivamente con la citotoxicidad, siendo las subfracciones S1 y S2 las más citotóxicas. La Fracción Diclorometano fue la más activa para S. aureus y más citotoxicidad para las células VERO. Probablemente la menor citotoxicidad de EE esté relacionada con la presencia de antocianinas presentes en la epidermis de los bulbos. Bulbos de Eleutherine bulbosa são usados para tratamento de malária, ameba e bactérias. Este estudo realizou a caracterização botânica e fitoquímica, atividade antimicrobiana e citotóxica de E. bulbosa. Para os estudos anatômicos, o material estudado foi fixado em formaldeído - ácido acético e etanol e corado em safranina e azul astra. Para histoquímica, foi fixado em formalina neutra tamponada e em sulfato ferroso em formalina. O Extrato Etanólico (EE) foi submetido ao fracionamento em coluna cromatográfica e a partir dele foram obtidas quatro frações. A Fração Diclorometano (DF) foi submetida a um novo fracionamento. A atividade biológica foi avaliada por difusão em ágar, microdiluição e viabilidade celular MTT. O bulbo de E. bulbosa é caracterizado por eixo caulinar reduzido e por catafilos amilíferos suculentos, epiderme com presença de antocianinas, mesofilo homogêneo com idioblastos de cristais prismáticos de oxalato de cálcio e compostos fenólicos. Na difusão em ágar observou-se que EE, DF e fração acetato de etila (ACF) foram ativos para Staphylococcus aureus. Na microdiluição, o DF (concentração mínima inibitória = 125 µg / mL) foi mais ativo. Para todas as amostras, a Concentração Bactericida Mínima foi> 1000 µg / mL. O fracionamento contribui positivamente com a citotoxicidade, sendo as subfrações S1 e S2 as mais citotóxicas. A Fração Diclorometano foi a mais ativa para S. aureus e com maior citotoxicidade para as células VERO. Provavelmente, a menor citotoxicidade do EE está relacionada à presença de antocianinas que estão presentes na epiderme dos bulbos.

O osteossarcoma canino é o tumor ósseo mais comum em cães. Ele apresenta intensa capacidade metastásica e a sobrevida do paciente é baixa nessa doença. A curcumina, o composto mais importante derivado da planta Curcuma longa L., tem sido amplamente estudada e mostrou efeitos antineoplásicos consideráveis contra vários tumores. Este estudo tem por objetivo identificar a ativação de proteínas específicas de vias de apoptose, sobrevivência tumoral e mau prognóstico dessa doença em células OSC da linhagem D-17. Para isso, as células foram cultivadas e tratadas com a curcumina nas concentrações de 20μM, 50 μM e 100 μM em lâminas, que foram preparadas e fixadas. Posteriormente, foi realizada a técnica de imucitoquímica, com os anticorpos anti-caspase3, anti-JNK, anti-AMPK, anti-p53, anti-AKT e anti-mTOR. Foi observado que a curcumina ativou em células de osteossarcoma canino in vitro as proteínas de morte celular caspase-3, JNK e AMPK, reduziu a expressão da proteína p53 mutada e não alterou as proteínas AKT e mTOR. Assim, verificou-se que a curcumina promove apoptose extrínseca mediada por caspase, JNK e cAMP/AMPK em células de osteossarcoma canino. Além disso, tem o potencial de melhorar o prognóstico tumoral dessa doença por inativação da p53 mutada. No entanto, ela não interfere na expressão de AKT/mTOR, relacionado a proliferação e sobrevivência tumoral. Tais resultados servirão de base para estudos futuros que analisem o efeito da curcumina in vivo nessa doença.

The goal of this study was to analyze cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to bone marrow cells of mice of nature identical synthetic flavorings, passion fruit and strawberry, and artificial synthetic flavorings, vanilla, chocolate, tutti-frutti and cookie, at doses 0.5; 1.0; 2.0; 5.0 and 10.0 mL/kg. The additives were given to the animals by gavage in a single daily application for seven days. Data were subjected to analysis of variance (ANOVA) followed by post Tukey’s post hoc test, p

A number of studies has shown that antioxidants, fatty acids and trace minerals may modulate different immune cell activities, and that their deficiency may be associated with diseases and impaired immune responses. In innate immunity, natural killer (NK) cells have a central role, killing virally infected and cancerous cells, and also secreting cytokines that shape adaptive immune responses. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of enriched diets in selenium plus vitamin E and/or canola oil on complete blood count and on NK cell cytotoxicity from blood lymphocytes of Nellore bulls. Bulls that received selenium plus vitamin E had (P=0.0091) higher NK cell cytotoxicity than control bulls. This result positively correlated with serum selenium levels. To the best of our knowledge, this is the first study that showed immunostimulatory effects of selenium plus vitamin E on NK cell cytotoxicity of Nellore bulls. Vários estudos demonstraram que antioxidantes, ácidos graxos e minerais podem modular a atividade de diferentes células do sistema imunológico e que as suas carências podem estar associadas a doenças e a respostas imunes comprometidas. Na imunidade inata, os linfócitos natural killer (NK) têm um papel central matando células infectadas por vírus e células cancerígenas, ao mesmo tempo em que também secretam citocinas que modulam as respostas imunes adaptativas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de dietas enriquecidas em selênio e vitamina E e/ou óleo de canola no hemograma e na citotoxicidade das células NK do sangue de bovinos da raça Nelore. Os animais que receberam selênio e vitamina E tiveram (P = 0,0091) maior citotoxicidade das células NK do que os animais do grupo controle. Este resultado foi positivamente correlacionado com os níveis de selênio no sangue. Para o melhor do nosso conhecimento, este é o primeiro estudo que mostrou efeitos imunoestimulatórios do selênio e vitamina E sobre a citotoxicidade das células NK de bovinos Nelore.

Aniba riparia (Lauraceae) is an important medicinal plant found in the Amazon region and presents alkaloids of the type alkamide known as riparins. Riparin A is structurally represented as the fundamental core of all Amazon riparins. This work aimed to assess the in vitro antioxidant, antitumor and antileishmanial effects of riparin A. Riparin A presented weak antioxidant capacity by tecniques of DPPH• (EC50 of 296.2 μg mL-1) and ABTS•+ (EC50 of 450.1 μg mL-1), showed moderate activity against colon carcinoma (HCT-116: IC50 of 21.7 μg mL-1) and leishmanicidal activity on promastigotes of L. amazonensis (IC50 of 307.0 ± 79.6, 193.7 ± 44.3 and 81.8 ± 11.2 μg mL-1, respectively, after 24, 48 and 72 h of incubation). Then, in addition to its structural simplicity, riparin A revealed promising biological activities and remarkable in vitro leishmanicidal action, an important result in epidemiological point of view to control leishmaniasis in Brazil, including in the Amazon region. RESUMO Aniba riparia (Lauraceae) é uma importante planta medicinal encontrada na região amazônica que apresenta alcaloides do tipo alcamida e conhecidos como riparinas. Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos antioxidantes, antitumorais e leishmanicidas in vitro da riparina A. Riparina A apresentou fraca capacidade antioxidante pelas técnicas do DPPH• (CE50 de 296,2 μg mL-1) e ABTS•+ (CE50 de 450,1 μg mL-1), mostrou moderada atividade contra carcinoma de cólon (HCT-116: CI50 de 21,7 μg mL-1) e atividade leishmanicida sobre formas promastigotas de Leishmania amazonensis (CI50 de 307,0 ± 79,6; 193,7 ± 44,3 e 81,8 ± 11,2 μg mL-1, respectivamente, após 24, 48 e 72 h de incubação). Assim, além de sua simplicidade estrutural, a riparina A revelou atividades biológicas promissoras e significativa ação leishmanicida in vitro, resultado importante diante da relevância epidemiológica para controle da leishmaniose no Brasil, inclusive na região amazônica.

Mesenchymal stem cells (MSCs) are known for their important properties involving multilineage differentiation potential., trophic factor secretion and localization along various organs and tissues. On the dark side, MSCs play a distinguished role in tumor microenvironments by differentiating into tumor-associated fibroblasts or supporting tumor growth via distinct mechanisms. Cisplatin (CIS) is a drug widely applied in the treatment of a large number of cancers and is known for its cytotoxic and genotoxic effects, both in vitro and in vivo. Here we assessed the effects of CIS on MSCs and the ovarian cancer cell line OVCAR-3, by MTT and comet assays. Our results demonstrated the resistance of MSCs to cell death and DNA damage induction by CIS, which was not observed when OVCAR-3 cells were exposed to this drug.

The mouth and oropharynx cancer is the 6th most common type of cancer in the world. The treatment may involve surgery, chemotherapy and radiotherapy. More than 50% of drugs against cancer were isolated from natural sources, such as Catharanthus roseus and epipodophyllotoxin, isolated from Podophyllum. The biggest challenge is to maximize the control of the disease, while minimizing morbidity and toxicity to the surrounding normal tissues. The Erythroxylum suberosum is a common plant in the Brazilian Cerrado biome and is popularly known as "cabelo-de-negro". The objective of this study was to evaluate the cytotoxic activity of Erythroxylum suberosum plant extracts of the Brazilian Cerrado biome associated with radiotherapy in human cell lines of oral and hypopharynx carcinomas. Cells were treated with aqueous, ethanolic and hexanic extracts of Erythroxylum suberosum and irradiated at 4 Gy, 6 Gy and 8 Gy. Cytotoxicity was evaluated by MTT assay and the absorbance was measured at 570 nm in a Beckman Counter reader. Cisplatin, standard chemotherapy, was used as positive control. The use of Erythroxylum suberosum extracts showed a possible radiosensitizing effect in vitro for head and neck cancer. The cytotoxicity effect in the cell lines was not selective and it is very similar to the effect of standard chemotherapy. The aqueous extract of Erythroxylum suberosum, combined with radiotherapy was the most cytotoxic extract to oral and hypopharynx carcinomas. Resumo O câncer de boca e de orofaringe emerge como o 6º tipo de câncer mais comum no mundo. O tratamento pode envolver cirurgia, quimioterapia e radioterapia. Mais de 50% das drogas com atividade de combate ao câncer foram isoladas de fontes naturais, tais como a Catharanthus roseus e a epipodofilotoxina, isolada de Podophyllum. O maior desafio é maximizar o controle da doença, enquanto minimiza a morbidade e toxicidade para os tecidos normais circundantes. O Erythroxylum suberosum é uma planta comum no bioma Cerrado brasileiro e é popularmente conhecida como "cabelo-de-negro". O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade dos extratos da planta Erythroxylum suberosum do bioma Cerrado brasileiro, associados à radioterapia em linhagens celulares humanas de carcinomas de língua e de hipofaringe. As células foram tratadas com os extratos aquoso, etanólico e hexânico do Erythroxylum suberosum e irradiadas com 4 Gy, 6 Gy e 8 Gy. A citotoxidade foi avaliada pelo ensaio de MTT e a absorvância foi medida a 570 nm em uma leitora Beckman. A cisplatina, quimioterápico padrão, foi utilizada como controle positivo. O uso de extratos de Erythroxylum suberosum mostrou potencial efeito radiosensibilizante in vitro no câncer de cabeça e pescoço. O efeito da citotoxicidade nas linhagens foi de forma não seletiva e muito semelhante ao efeito da quimioterapia padrão. O extrato aquoso de Erythroxylum suberosum, combinado com radioterapia, foi o extrato mais citotóxico para os carcinomas de língua e hipofaringe, associados à radioterapia.

Spondias tuberosa Arruda, popularly named as umbu, is native from savanna-like vegetation and widely used for medicinal purposes, however, the toxicological profile is not available yet. This study evaluated the phytochemical profile and acute toxicity and citoxicity of Ethanolic Extract of Spondias tuberosa Arruda Bark (EEStb) in hematological, biochemical and histopathological parameters. Female Wistar rats were divided into: control (C) and animal treated single doses of 300mg/Kg (EEStb300) or 2.000mg/kg body weight (ESStb2.000) of the EEStb. After 24 hours and 14 days from gavage, the behavior, hematological, biochemical and histopathological parameters were assayed. Cytotoxicity effect was evaluated on HEp-2 cell lines. Neither EEStb300 nor EEStb2.000 produced mortality nor changes in body weight during the 14-days of observation, but EEStb2.000 reduced quietly the food and water intake as well as locomotor activity at first day. There were no changes in macroscopic, histopathological, biochemical and hematological parameters. EEStb in concentrations of 6.25- 50μg ml−1 on HEp-2 cell did not produce cytotoxic effect. These results suggest that EEStb did not cause acute toxicity and cytotoxic, suggesting a good safety rate for Spondias tuberosa Arruda. RESUMO Spondias tuberosa Arruda, popularmente conhecida como umbu, é uma espécie nativa da Caatinga amplamente utilizada na medicina popular, cujo perfil toxicológico ainda não é conhecido. Deste modo, este estudo avaliou o perfil fitoquímico, a toxicidade aguda e a citotoxicidade do extrato etanólico da casca da Spondias tuberosa Arruda (EEStb) nos parâmetros hematológicos, bioquímicos e histopatológicos. Foram utilizados ratos fêmeas Wistar (±210g) e divididos em: grupo controle (C) e tratados com uma dose única de 300mg/Kg (EEStb300) ou 2.000mg/kg do peso corporal (ESStb2.000) do EEStb. Após 24 horas e 14 dias da gavagem, os parâmetros comportamentais, hematológicos, bioquímicos e histopatológicos foram determinados. O efeito citotóxico foi avaliado em células HEp-2. Não foi observada mortalidade ou alterações de massa corporal durante os 14 dias de experimento nos grupos EEStb300 e EEStb2.000, mas EEStb2.000 provocou uma redução discreta no consumo hídrico e alimentar, assim como na atividade locomotora no 1º dia de tratamento. Não houve alterações nos parâmetros histopatológicos, macroscópicos, bioquímicos e hematológicos. EEStb2000 nas concentrações de 6.25-50μg.ml-1) não produziu efeito citotóxico. na célula HEp-2. Estes resultados sugerem que EEStb não promoveu toxicidade aguda ou citotóxica, sugerindo boa margem de segurança para uso da Spondias tuberosa Arruda.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:57:49Z No. of bitstreams: 1 S0102-695X2010000500015.pdf: 834382 bytes, checksum: c3cc184e2e67a055a79dec0571934fac (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:57:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0102-695X2010000500015.pdf: 834382 bytes, checksum: c3cc184e2e67a055a79dec0571934fac (MD5) Previous issue date: 2010-11-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T18:48:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0102-695X2010000500015.pdf: 834382 bytes, checksum: c3cc184e2e67a055a79dec0571934fac (MD5) S0102-695X2010000500015.pdf.txt: 43205 bytes, checksum: 9b2f2d4d8b0a1ef882374e3f76a799d8 (MD5) Previous issue date: 2010-11-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:57:12Z No. of bitstreams: 2 S0102-695X2010000500015.pdf: 834382 bytes, checksum: c3cc184e2e67a055a79dec0571934fac (MD5) S0102-695X2010000500015.pdf.txt: 43205 bytes, checksum: 9b2f2d4d8b0a1ef882374e3f76a799d8 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:57:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0102-695X2010000500015.pdf: 834382 bytes, checksum: c3cc184e2e67a055a79dec0571934fac (MD5) S0102-695X2010000500015.pdf.txt: 43205 bytes, checksum: 9b2f2d4d8b0a1ef882374e3f76a799d8 (MD5) Previous issue date: 2010-11-01 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) Extratos etanólicos de dezoito espécies vegetais pertencentes à família Bignoniaceae, das quais sete são descritas como de uso medicinal, foram avaliados, pelo ensaio colorimétrico do MTT, para atividades citotóxica, em células Vero, e antiviral, frente aos vírus herpes simplex-tipo 1, vaccinia e encefalomiocardite murina. A maior parte dos extratos não apresentou citotoxicidade até a concentração de 500 μg/mL. Dos 28 extratos testados quatorze (50%) apresentaram atividade antiviral com valores de CE50 na faixa de 4,6+03 a 377,2+17,7 μg/mL. Somente duas espécies, Arrabidaea samydoides e Callichlamys latifolia, foram ativas frente aos três vírus. Os extratos foram caracterizados pelos seus perfís cromatográficos em CCD e CLAE-FR. Análises por CLAE-FR mostraram que a mangiferina é o constituinte majoritário em A. samydoides mas a substância isolada foi menos ativa do que o extrato bruto. Esta é a primeira vez que se relata a atividade antiviral de extratos das dezoito espécies avaliadas. Ethanol extracts of eighteen Bignoniaceae species have been evaluated by the MTT assay for cytotoxicity in Vero cells and for antiviral activity against Human herpes virus type 1, Vaccinia virus and murine Encephalomyocarditis virus. Among such species, seven are reported to be of traditional medicinal use No cytotoxicity was observed for most of the extracts up to the concentration of 500 μg/mL. Fourteen (50%) of the 28 extracts assayed have disclosed antiviral activity with EC50 values in the range of 4.6+0.3 to 377.2+17.7 μg/mL. Only two species, Arrabidaea samydoides and Callichlamys latifolia, have shown activity against all the three viruses. The extracts were chemically characterized by their TLC and HPLC-DAD profiles. Mangiferin is the major constituent of A. samydoides but the isolated compound has been less active than the crude extract. This is the first report on the antiviral evaluation of the eighteen Bignoniaceae species assayed. Universidade Federal de Minas Gerais Faculdade de Farmácia Laboratório de Fitoquímica Universidade Federal de Minas Gerais Laboratório de Vírus Instituto de Ciências Biológicas Universidade Federal de Minas Gerais Laboratório de Taxonomia Vegetal Instituto de Ciências Biológicas Universidade Estadual Paulista Instituto de Biociências de Rio Claro Departamento de Botânica Universidade Estadual Paulista Instituto de Biociências de Rio Claro Departamento de Botânica

Crude ethanolic extracts from Blepharocalyx salicifolius (Kunth) O. Berg, Myrtaceae, was fractioned by Gel Permeation Chromatography, using SephadexTM LH-20 gel. Sixteen fractions were obtained and were supplied to cytotoxicity in vitro assay against Leishmania (L.) amazonensis amastigota cells. It was observed eight cytotoxic fractions against Leishmania (L.) amazonensis amastigota cells at range of 19 to 29 µg.mL-1. Two of them were not citotoxic against human peripheral blood mononuclear cell, with a great potential to isolation of more selective leishmanicidal substances. O extrato etanólico bruto de Blepharocalyx salicifolius (Kunth) O. Berg, Myrtaceae, foi fracionado por meio de Cromatografia de Permeação em Gel, utilizando-se SephadexTM LH-20. Dezesseis frações foram obtidas e foram submetidas ao ensaio de citotoxicidade in vitro contra células amastigotas de Leishmania (Leishmania) amazonensis. Verificou-se atividade citocida contra células amastigotas de Leishmania (L.) amazonensis em oito frações, a uma concentração de 19 a 29 µg.mL-1. Duas destas frações apresentaram baixa toxicidade para células mononucleares de sangue periférico humano, com grande potencial de isolamento de substâncias leishmanicidas mais seletivas.

A necessidade da introdução de novos agentes quimioterápicos é uma realidade no controle de doenças infecciosas. O Brasil é o país mais rico em biodiversidade, e o Laboratório de Extração da Universidade Paulista tem coletado plantas na Amazônia e Mata Atlântica com a finalidade de identificar extratos vegetais antibacterianos e antitumorais. Estudos prévios demonstraram que a fração etanólica obtida do extrato bruto orgânico do caule de Tabernaemontana angulata Mart. ex Müll. Arg. apresentou atividade antimicrobiana significante contra Staphylococcus aureus ATCC6538, no ensaio de diluição em caldo. Verificou-se por cromatografia em camada delgada que os compostos majoritários presentes na fração ativa eram alcalóides. No presente trabalho, foi obtida a fração de alcalóides totais a partir do extrato bruto, da qual os compostos majoritários foram isolados por sucessivas cromatografias e, posteriormente, identificados por CG-EM e ¹H-RMN como os alcalóides indólicos coronaridina e voacangina. As frações obtidas do isolamento foram testadas no ensaio biológico, porém não demonstraram atividade antimicrobiana. Introducing new chemotherapeutic agents is a great demand in the control of infectious diseases. Brazil is one of the richest countries in biodiversity and the Laboratório de Extração at UNIP has been collecting plants from the Amazon and Atlantic Rain Forests with the aim of screening for new antibacterial and antitumor plant extracts. Previous studies demonstrated that the ethanol fraction obtained from the crude extract of Tabernaemontana angulata stems showed an antibacterial activity against Staphylococcus aureus (ATCC 6538) in the microdilution broth assay. Two alkaloids were the major compounds in the active fraction, verified by thin layer chromatography analysis. In the present study, the total alkaloids were obtained from the crude extract and were fractionated by preparative thin layer chromatography for the isolation of the main components. The isolated compounds were identified by GC/MS and ¹H-NMR as coronaridine and voacangine. The alkaloid fractions obtained from the isolation procedure were tested for antibacterial activity, but no activity was detected.

Thirty-six plant extracts from the brazilian Atlantic Forest were tested for their antimycobacterial activity against Mycobacterium tuberculosis H37Rv and M. kansasii, using the method REMA in seriate concentrations of 100 to 0.20 µg/mL. Among the thirty six extracts tested, five were active against M. tuberculosis, and three of these extracts also showed activity against M. kansasii. Cytotoxicity test with VERO cells was performed with the five extracts active against M. tuberculosis. Only the extract of Peschiera affinis was identified as non-toxic in the concentration of 100µg/mL. Trinta e seis extratos vegetais originários da Mata Atlântica foram testados quanto à sua atividade antimicobacteriana frente ao M. tuberculosis H37Rv e M. kansasii, utilizando o método REMA em concentrações seriadas de 100 a 0,20 µg/mL. Dentre os trinta e seis extratos testados, cinco mostraram atividade frente ao M. tuberculosis, e destes apenas, três mostraram atividade ao M. kansasii, que apresentou susceptibilidade a outros dez. O teste de citotoxicidade com células VERO foi realizado com os cinco extratos ativos frente ao M. tuberculosis em que identificou-se a não toxicidade em apenas um extrato (Peschiera affinis) na concentração de 100 µg/mL.

During the past several years, various species of Cousinia (Asteraceae) have been authenticated in Iran. However, data concerning their biological activities remain limited. The main purpose of this research was to assess potential cytotoxicity and matrix metalloproteinases (MMP) inhibitory effects of seven ethanol extracts of Cousinia using a cell line model (Fibrosarcoma-WEHI 164). We further investigated the antibacterial activity of these Cousinia ethanol extracts, using disk diffusion method. Among the ethanol extracts, the total extract of C. sulabadensis elicited significant inhibition of MMP activity in a dose-response fashion (49.2 ± 0.51, p < 0.05). However, this extract exhibited the lowest cytotoxicity effect at all tested concentrations. The concentration necessary to produce a 50% cell death rate (IC50) with C. shulabadensis was 304.5 ± 0.61 µg/mL. The calculated IC50 for cytotoxicity of the other Cousinia species extracts ranged between 18.4 ± 0.59 to 87.9 ± 0.58 µg/mL. The highest antibacterial activity was observed for the total extract of Cousinia phyllocephala. In conclusion, this study supports that Cousinia species display a remarkable inhibition of matrix metalloproteinases activity. The concomitant MMP-inhibitory and low cytotoxicity effects observed in C. sulabadensis might coin this extract for future potential anti-invasive herbal medicine studies.

The advanced oxidation process (AOP) is used to increase the treatment efficiency of effluents however, it is necessary to compare the toxicity of treated and untreated effluents to evaluate if the decontamination process does not cause any biological harm. Cultured cells have been previously used to assess the genotoxic and cytotoxic potential of various compounds. Hence, the aim of this work was to assess the applicability of cytotoxicity assays to evaluate the toxicity related to the AOP treatment. Samples of an industrial effluent were collected after their treatment by a conventional method. Cytotoxicity of standard and AOP treated effluents was assessed in CRIB and HEp-2 cell line using the MTT and neutral red assays. We observed decrease at cell viability in the both assays (50% MTT and 13% NRU) when cells were exposed to the AOP treatment in the highest concentration. Thus, cytotoxic assays in cultured cells can be explored as an useful method to evaluate toxicity as well as to optimize effluents treatment process. Resumo O processo de oxidação avançada (POA) tem sido usado para aumentar a eficiência do tratamento de efluentes; no entanto, é necessário comparar a toxicidade de efluentes tratados e não tratados para avaliar se o processo de descontaminação não é capaz de causar algum risco biológico. Cultivos celulares têm sido utilizados para avaliar o potencial genotóxico e citotóxico de vários compostos. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicabilidade de ensaios de citotoxicidade para avaliar a toxicidade relacionada ao tratamento com POA. As amostras de um efluente industrial foram recolhidas após o tratamento por um método convencional. A citotoxicidade dos efluentes padrão e tratado com POA foi avaliada nas linhagens celulares CRIB e HEp-2 usando os ensaios do MTT e do vermelho neutro. Observou-se diminuição da viabilidade celular em ambos os ensaios (50% MTT e 13% VN) quando as células foram expostas à concentração mais elevada do efluente tratado com POA. Assim, os ensaios de citotoxicidade em cultivos celulares podem ser explorados como um método útil para avaliar a toxicidade, bem como para otimizar os processos de tratamento de efluentes.

Twenty species of marine invertebrates from the Brazilian coast were screened for hemagglutinating/hemolytic activity. In at least twelve tested species, hemagglutinating activity was different for different blood types, suggesting the presence of lectins. Extracts from four species showed hemolytic activity. Two new lectins were purified from the marine sponge Cliona varians (CvL-2) and sea cucumber Holothuria grisea (HGL). CvL-2 was able to agglutinate rabbit erythrocytes and was inhibited by galactosides. The hemagglutinating activity was optimal in pH neutral and temperatures below 70 °C. CvL-2 is a trimeric protein with subunits of 175 kDa. On the other hand, HGL showed both hemagglutinating and hemolytic activity in human and rabbit erythrocytes, but hemolysis could be inhibited by osmotic protection, and agglutination was inhibited by mucin. HGL was stable in pH values ranging from 4 to 10 and temperatures up to 90 °C. In electrophoresis and gel filtration, HGL was a monomeric protein with 15 kDa. CvL-2 and HGL showed different levels of toxicity to Artemia naplii. CvL-2 showed LC50 of 850.1 μg/mL, whereas HGL showed LC50 of 9.5 µg/mL. Vinte espécies de invertebrados marinhos, coletados na costa brasileira, foram avaliados quanto à presença de atividade hemaglutinante/hemolítica. Em pelo menos doze espécies testadas, a atividade hemaglutinante foi diferencial para diferentes grupos sanguíneos, sugerindo a presença de lectinas. Extratos de quatro espécies apresentaram atividade hemolítica. Duas novas lectinas foram purificadas da esponja marinha Cliona varians (CvL-2) e do pepino-domar Holothuria grisea (HGL). CvL-2 foi capaz de aglutinar eritrócitos de coelho e foi inibida por galactosídeos. A atividade hemaglutinante foi estável em pH neutro e temperaturas abaixo de 70 °C. CvL-2 é uma proteína trímero com subunidades de 175 kDa. Por outro lado, HGL apresentou atividade hemaglutinante e hemolítica em eritrócitos humanos e de coelho, mas a hemólise pôde ser inibida por proteção osmótica, enquanto que a aglutinação foi inibida por mucina. HGL mostrou-se estável em valores de pH de 4-10 e temperaturas até 90 °C. Em eletroforeses e gel filtração, HGL foi uma proteína monômero de 15 kDa. CvL-2 e HGL mostraram diferentes níveis de toxicidade contra náuplios de Artemia. CvL-2 apresentou LC50 de 850,1 μg/mL, enquanto que HGL apresentou LC50 de 9,5 μg/mL.

Background: The methicillin resistance of bacteria from the genus Staphylococcus and its ability to form biofilms are important factors in pathogenesis of these microorganisms. Thus, the search for new antimicrobials agents, especially from plants, has been intensified. In this context, Terminalia species have been the subject of research for many pharmacological activities. In this study we evaluated the antibacterial, antibiofilm and cytotoxic activities of the ethanol extract (EtE) from Terminalia fagifolia stem bark as well as that of three fractions of the extract (AqF, HaF and WSF). Methods: We determined the minimum inhibitory concentration (MIC) by microdilution in 96-well plates, where the strains were exposed to serial dilutions of the ethanol extract and fractions, ranging from 12.5 to 400 μg/mL. We then determined the minimum bactericidal concentration (MBC), seeding the inoculum (10 μL) with concentrations equal to or greater than the MIC in Mueller-Hinton agar. To test the antibiofilm activity biofilm formation was induced in the presence of concentrations equivalent to 1/2, 1/4 and 1/8 of the MIC extract or fraction tested. In addition, the effect of the EtE and the fractions on cell viability was tested by the MTT assay on human MCF-7 breast cancer and mouse fibroblast NIH/3T3. To obtain high-resolution images of the effect of the aqueous fraction on the bacterial morphology, atomic force microscopy (AFM) imaging of treated S. aureus cells was performed. Results: We observed antibacterial activity of EtE and fractions with MICs ranging from 25–200 μg/mL and MBCs ranging from 200–400 μg/mL. Regarding antibiofilm activity, both the EtE as the AqF, HaF and WSF fractions showed significant inhibition of the biofilm formation, with inhibition of biofilms formation of over 80% for some strains. The EtE and fractions showed a moderate cytotoxicity in cell line NIH/3T3 viability and potential antitumoral activity on human breast cancer cell line MCF-7. The microscopic images obtained revealed morphological changes to the S. aureus ATCC 29213 surface caused by AqF, as well as significant size alterations. Conclusions: The results show potential antibacterial, antibiofilm and antitumoral activities of the ethanol extract and fractions of T. fagifolia.

Eleven phthalimide derivatives were evaluated with regards to their antiproliferative activity on tumor and normal cells and possible toxic effects. Cytotoxic analyses were performed against murine tumors (Sarcoma 180 and B-16/F-10 cells) and peripheral blood mononuclear cells (PBMC) using MTT and Alamar Blue assays. Following, the investigation of cytotoxicity was executed by flow cytometry analysis and antitumoral and toxicological potential by in vivo techniques. The molecules 3b, 3c, 4 and 5 revealed in vitro cytotoxicity against Sarcoma 180, B-16/F-10 and PBMC. Since compound 4 was the most effective derivative, it was chosen to detail the mechanism of action after 24, 48 and 72 h exposure (22.5 and 45 µM). Sarcoma 180 cells treated with compound 4 showed membrane disruption, DNA fragmentation and mitochondrial depolarization in a time- and dose-dependent way. Compounds 3c, 4 and 5 (50 mg/kg/day) did not inhibit in vivotumor growth. Compound 4-treated animals exhibited an increase in total leukocytes, lymphocytes and spleen relative weight, a decreasing in neutrophils and hyperplasia of spleen white pulp. Treated animals presented reversible histological changes. Molecule 4 had in vitro antiproliferative action possibly triggered by apoptosis, reversible toxic effects on kidneys, spleen and livers and exhibited immunostimulant properties that can be explored to attack neoplasic cells. Onze derivados da ftalimida foram avaliados quanto a sua atividade antiproliferativa em células tumorais e normais e possíveis efeitos tóxicos. Avaliou-se a citotoxicidade contra tumores murinos (células de Sarcoma 180 e B-16/F-10) e células mononucleares do sangue perférico (CMSP) usando os ensaios de MTT e Alamar Blue. Em seguida, a investigação de citotoxicidade foi executada por citometria de fluxo e potencial antitumoral e toxicológico por meio de métodos in vivo. As moléculas 3b, 3c, 4 e 5 revelaram citotoxicidade in vitro contra Sarcoma 180, B-16/F-10 e PBMC. Uma vez que o composto 4 foi o derivado mais efetivo, ele foi escolhido para detalhar o mecanismo de ação após 24, 48 e 72h de exposição (22.5 e 45 µM). Células de Sarcoma 180 tratadas com o composto 4 mostraram desintegração de membrana, fragmentação de DNA e despolarização mitocondrial de maneira tempo e concentracão dependente. Os compostos 3c, 4 e 5 (50 mg/kg/dia) não inibiu o crescimento tumoral in vivo. Os animals tratados com o composto 4 exibiram aumento do total de leucócitos, linfócitos e no peso relativo do baço, diminuição de neutrófilos e hiperplasia da polpa branca esplênica. Os animais tratados apresentaram alterações histológicas reversíveis. A molécula 4 tem ação antiproliferativa in vitro provavelmente por ativação de apoptose, efeitos tóxicos reversíveis e exibiu propriedades imunoestimulantes que podem ser exploradas para atacar células neoplásicas.

The Guandu River is the main source of water supply for the metropolitan region of Rio de Janeiro and has been facing serious environmental problems due to increasing population and industrial pollution, as well as the presence of polluted tributaries. This study analyzed the cytotoxic and genotoxic potential of the Guandu River's waters, through the use of the Allium cepa test system. Collection points were chosen at the greatest confluences of pollutant sources. The sampling included two different seasons: the rainy season (January and February) and the dry season (June and July). The analyses of 5000 cells per treatment showed that all the points studied had some degree of cytotoxicity and/or genotoxicity. Two sampling locations, which receive major influxes from the polluted waters of the Poços/Queimados and Cabuçu/Ipiranga Rivers, stood out for the strong presence of micronuclei, sticky chromosomes, mitotic spindle abnormalities, necrotic cells and nucleolar changes compared to the negative control. At least two locations also found changes in the mitotic index. The existence of variations in the number of cytotoxic and genotoxic changes between periods of rain and drought indicates that the cytotoxic and genotoxic potential of the water pollutants varies according to time, depending on the discharges of the tributary rivers and the increase of contaminated effluents. The results highlight the importance of bio-monitoring to assist managers in the control of effluent discharge. O Rio Guandu é a principal fonte de água para abastecimento da região metropolitana do Rio de Janeiro e enfrenta sérios problemas ambientais devido à crescente poluição tanto de origem populacional quanto industrial acentuada pela presença de afluentes com águas poluídas. Este trabalho teve por objetivo analisar o potencial citotóxico e genotóxico das águas do Rio Guandu, utilizando para isto o sistema teste de Allium cepa. Foram escolhidos pontos de coleta nos quais ocorrem as maiores confluências de fontes poluidoras. As coletas foram realizadas em duas épocas distintas: na estação chuvosa (Janeiro e Fevereiro) e na estação de estiagem (Junho e Julho). As análises realizadas em 5000 células por tratamento demonstraram que todos os pontos estudados apresentaram algum nível de citotoxicidade e ou genotoxicidade. Dois locais de coleta, os quais recebem maiores influências das águas poluídas dos rios Poços/Queimados e Cabuçu/Ipiranga, se destacaram quanto à presença acentuada de micronúcleos, aderência cromossômica, anormalidades no fuso mitótico, células em necrose e alterações nucleolares em relação ao controle negativo. Foram encontradas também alterações no índice mitótico em pelo menos dois locais. A existência de variações no número de alterações citotóxicas e genotóxicas entre os períodos chuvosos e de seca indicam que o potencial citotóxico e ou genotóxico dos poluentes na água variam em função do tempo, dependendo das descargas vindas dos afluentes e do aumento na emissão de efluentes contaminados. Estes resultados ressaltam a importância de estudos de biomonitoramento que auxiliem as ações de manejo visando o controle do lançamento de efluentes.

Micotoxinas representam um vasto grupo de contaminantes químicos naturais originados a partir do metabolismo secundário de fungos filamentosos patogênicos. Elas são produzidas, principalmente, pelos gêneros Fusarium, Alternaria, Aspergillus e Penicillium, os quais podem contaminar grãos e cereais, como trigo, milho e soja. Conforme sua natureza e níveis de concentração, micotoxinas podem induzir efeitos tóxicos em animais de produção e humanos. Um estudo in vitro foi realizado para avaliar a susceptibilidade das células linfocitárias de frangos de corte a diferentes concentrações de ocratoxina A, deoxinivalenol e zearalenona. Cada micotoxina foi adicionada ao meio celular em diferentes concentrações (0,001; 0,01; 0,1 e 1μg/mL). A viabilidade celular e atividade de ecto-adenosina desaminase foram analisadas em 24, 48 e 72 horas através de ensaios colorimétricos. Para isso, foram utilizados 0,7x10(5) linfócitos/mL em meio RPMI 1640, suplementado com 10% de soro fetal bovino e 2,5 UI de penicilina/estreptomicina por mL, incubados em atmosfera de 5% de CO2 a 37 °C. Todos os experimentos foram realizados em triplicata e os resultados foram expressos como média e erro padrão da média. Os resultados obtidos demonstraram que tanto ocratoxina A como deoxinivalenol induziram proliferação linfocitária e baixa atividade enzimática in vitro (P0,05). Foi possível correlacionar os dados referentes à viabilidade celular e atividade de ecto-adenosina desaminase, sugerindo que, em concentrações mínimas, as micotoxinas testadas não estimularam a atividade da enzima, que possui ação pró-inflamatória e contribui para o processo de imunossupressão e, portanto, evitando um decréscimo na viabilidade celular. Este é o primeiro estudo feito com OCRA, DON e ZEA sobre linfócitos de frangos de corte em cultivos in vitro na avaliação desses parâmetros. Mycotoxins are a group of chemically diverse naturally occurring substances resulting from the secondary metabolism of pathogenic filamentous fungi. They are produced mainly by the genera Fusarium, Alternaria, Aspergillus and Penicillium which can contaminate grains and cereals such as wheat, corn and soy. According to the nature and the concentration levels, mycotoxins can induce toxic effects in food-production animals and humans. An in vitro study was conducted to evaluate the susceptibility of broiler chickens lymphocytes to different concentrations of ochratoxin A, deoxynivalenol and zearalenone. Each toxin was added to the cell medium at different concentrations (0.001, 0.01, 0.1 and 1μg/mL). Cell viability and ecto-adenosine deaminase activity were assessed at 24, 48 and 72 hours by colorimetric assays. Thus, it were used 0.7x10(5) lymphocytes/mL in RPMI 1640 medium, supplemented with 10% fetal bovine serum and 2.5 IU of penicillin/streptomycin per mL, incubated at 37°C in a 5% CO2 atmosphere. All the experiments were carried out in triplicate and the results were expressed as mean ± standard error of the mean. The results showed that OTA and DON induced lymphocyte proliferation and reduced enzymatic activity in vitro (P0,05). It was possible to correlate the results about viability cell and ecto-adenosine deaminase activity, suggesting that, at minimal concentrations, the evaluated mycotoxins do not stimulated the enzymatic activity, which has proinflammatory action and contributes for the immunosuppression process, thus, avoiding a decrease on the viability cell. This is the first in vitro study conducted with OTA, DON and ZON in broiler chickens lymphocytes evaluating these parameters.

Ethnobotanical surveys of Cerrado native plants show that leaves of Celtis iguanaea (Jacq.) Sargent (Cannabaceae), popularly known in Brazil as “esporão de galo”, are used in folk medicine for body pain, asthma, cramps, poor digestion, urinary infection, kidney dysfunctions, as well as a stimulant and diuretic. This work aimed at evaluating possible C. iguanaea aqueous leaf extract (CALE) cytotoxicity, genotoxicity, and antigenotoxicity using the mouse bone marrow micronucleous test. To assess CALE genotoxicity, Swiss mice were orally treated with three different extract concentrations (100, 300, and 500 mgkg−1). To evaluate its antigenotoxicity, the same doses were used simultaneously with a single i.p. dose of mitomycin C (MMC, 4mg.kg−1). The frequencies of micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCE) were evaluated 24 h and 48 h after administration except for the negative control (24 h). Genotoxicity was evaluated using the frequency of micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCE), whereas cytotoxicity was assessed by the polychromatic and normochromatic erythrocytes ratio (PCE/NCE). The results showed that CALE did not exhibit a significant reduction in the PCE/NCE ratio, neither a considerable increase in the frequency of MNPCE. Nonetheless, CALE reduced bone marrow toxicity (increased PCE/NCE ratio) and decreased the micronuclei frequency induced by MMC. We can conclude that CALE presented no cytotoxic and genotoxic effects, but showed antigenotoxic and anticytotoxic actions under the experimental conditions applied in this study. Levantamentos etnobotânicos de plantas nativas do cerrado evidenciam que as folhas de Celtis iguanaea (Jacq.) Sargent (Cannabaceae), popularmente conhecidas como “esporão-de-galo” são usadas na medicina popular para dores no corpo, asma, cólicas, má-digestão, infecções urinárias, disfunções renais, como estimulante ou como diurético. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as possíveis atividades citotóxica, genotóxica e antigenotóxica do extrato aquoso das folhas de C. Iguanaea (CALE) através do teste do micronúcleo em medula óssea de camundongos. Para avaliar a genotoxicidade de CALE, os camundongos foram tratados por via oral com três diferentes concentrações de extrato (100, 300 e 500 mg.kg−1). Para a investigação da atividade antigenotóxica, foram utilizadas as mesmas doses concomitantemente a uma única dose i.p. de Mitomicina C (MMC, 4mg.kg−1). Com exceção do controle negativo (apenas 24h), todas as outras doses tiveram as frequências de eritrócitos policromáticos micronucleados (EPCMN) avaliadas em 24 e 48 horas após o tratamento. A Genotoxicidade foi avaliada por meio da frequência de eritrócitos policromáticos micronucleados (MNPCE), enquanto que a citotoxicidade foi mensurada pela razão entre eritrócitos policromáticos e normocromáticos (PCE / NCE). Os resultados mostraram que CALE não apresentou uma redução significativa na razão PCE/NCE, nem um aumento considerável na frequência de EPCMN. No entanto, CALE reduziu a toxicidade na medula óssea (aumento na razão PCE/NCE) e diminuiu a frequência de micronúcleos induzidos pela MMC. Nos resultados obtidos, CALE não apresentou efeitos citotóxicos e genotóxicos, contudo apresentou ações antigenotóxicas e anticitotóxicas nas condições experimentais aplicadas neste estudo.

Manihot multifida (L.) Crantz (Euphorbiaceae) is widely used in popular medicine for the treatment of infected wounds. This study evaluated thein vitro antioxidant and antimicrobial potential of this species against strains of Gram-positive and Gram-negative bacteria and fungi, known to cause infections in humans. The extracts showed minimal inhibitory concentration (MIC) varying from 39 to 2500 µg/mL for antimicrobial activity. The methanolic extract of fruits, aqueous and hexane extracts of leaves showed a very strong activity against Candida albicans(ATCC 18804) with MIC of 39 µg/mL. Furthermore, the methanolic extract of M. multifida leaves exhibited DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) scavenging potential with inhibitory concentration (IC50) values of 46.9 μg/mL, followed by hexane extract of leaves with IC50 values of 59.2 μg/mL. The cytotoxic activity against brine shrimp was stronger for the methanolic extract of leaves (lethal concentration - LC50 of 15.6 µg/mL). These results suggest that M. multifida has interesting antimicrobial and antioxidant activities. Moreover, these results corroborate the popular use of this specie in treating fungal infections since it demonstrates significant activity againstC. albicans. Manihot multifida(L.) Crantz (Euphorbiaceae) é amplamente utilizada na medicina popular no tratamento de feridas infectadas. Esse estudo avaliou o potencial antioxidante e antimicrobiano in vitrode extratos dessa espécie frente às cepas bacterianas Gram-positiva e Gram-negativa e fungo que causam infecções em humanos. Os extratos mostraram concentração inibitória mínima (CIM) variando de 39 a 2500µg/mL para a atividade antimicrobiana. O extrato metanólico de frutos, hexânico e aquoso de folhas mostraram atividade muito forte para Candida albicans (ATCC 18804), com CIM de 39µg/mL. Além disso, o extrato metanólico de folhas deM. multifidamostrou potencial antioxidante contra o radical DPPH com valor de concentração inibitória (CI50) de 46,9μg/mL, seguido pelo extrato hexânico de folhas, com valor de CI50 de 59,2μg/mL. A atividade citotóxica foi maior no extrato hexânico de folhas com concentração letal (CL50) de 15,6μg/mL. Esses resultados sugerem que M. multifida possui atividades antimicrobiana e antioxidante interessantes. Sendo assim, corroboram o uso popular dessa espécie no tratamento de infecções fúngicas, uma vez que demonstrou uma atividade significativa frente à C. albicans.

The objective of this study was to evaluate the cytotoxic effect of the food dyes sunset yellow, bordeaux red, and tartrazine yellow on the cellular cycle of Allium cepa L. Each dye was evaluated at the doses of 0.4 and 4.0 mL, at the exposure times of 24 and 48 hours in root tip cells of Allium cepa L. Slides were prepared and cells were analyzed during the whole cell cycle for cellular aberrations totaling 5,000 total cells for each dose evaluated. The mitotic index was calculated, and statistical analysis was performed using the Chi-squared test (p < 0.05). The results showed that the three dyes used under the evaluated doses and exposure times were cytotoxic to the cells of the system-test used. Further cytotoxicity studies should be conducted for additional results and a proper evaluation of the effect of these three dyes on a cellular level. Este estudo teve por objetivo avaliar o efeito citotóxico dos corantes alimentares amarelo crepúsculo, vermelho bordeaux e amarelo tartrazina sobre o ciclo celular de Allium cepa L. Cada corante foi avaliado nas doses de 0,4 e 4,0 mL, nos tempos de exposição de 24 e 48 horas, em células de pontas de raízes de Allium cepa L. Prepararam-se lâminas e analisaram-se células, em todo o ciclo celular, e a presença de aberrações celulares, totalizando 5.000 células para cada dose avaliada. Foi calculado o índice mitótico e a análise estatística foi feita por meio do teste quiquadrado (p < 0,05). Os resultados mostraram que os três corantes, nas doses e tempos de exposição avaliados, foram citotóxicos às células do sistema-teste utilizado. Estudos adicionais de citotoxicidade devem ser conduzidos para se somar a estes resultados e, assim, avaliar, com propriedade, a ação destes três corantes em nível celular.

a b s t r a c t In vitro cytotoxicity testing of dental acrylic resins is fundamental to establish clinical safety limits, requiring suitable cell models that closely simulate physiological processes. This study’s main aim is to evaluate the viability of an untransformed human gingival fibroblast cell line, as an oral cell model for acrylic resin cytotoxicity tests. For this purpose, cell viability was compared to a control cell line (Chinese hamster lung fibroblast), following exposure to increasing concentrations of methyl methacrylate and formaldehyde (acrylic resins’ leachable compounds). Additionally, because of the volatile nature of these compounds and their harmful effects on the respiratory tract, a human fetal lung fibroblast line was also tested. Two-way ANOVA of generated data (p < 0.05) showed that all cell types are significantly affected in a dose dependent manner by these chemicals. Further characterization of the human gingival fibroblast line shall be addressed in future biocompatibility studies.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T19:05:33Z No. of bitstreams: 1 S1516-05722012000200016.pdf: 216461 bytes, checksum: 573bbc846a19f594ba46df7e39514e7c (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T19:05:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S1516-05722012000200016.pdf: 216461 bytes, checksum: 573bbc846a19f594ba46df7e39514e7c (MD5) Previous issue date: 2012-01-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T18:48:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1516-05722012000200016.pdf: 216461 bytes, checksum: 573bbc846a19f594ba46df7e39514e7c (MD5) S1516-05722012000200016.pdf.txt: 16104 bytes, checksum: a45cf16cda7dd87639f5f41119952680 (MD5) Previous issue date: 2012-01-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:57:14Z No. of bitstreams: 2 S1516-05722012000200016.pdf: 216461 bytes, checksum: 573bbc846a19f594ba46df7e39514e7c (MD5) S1516-05722012000200016.pdf.txt: 16104 bytes, checksum: a45cf16cda7dd87639f5f41119952680 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:57:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1516-05722012000200016.pdf: 216461 bytes, checksum: 573bbc846a19f594ba46df7e39514e7c (MD5) S1516-05722012000200016.pdf.txt: 16104 bytes, checksum: a45cf16cda7dd87639f5f41119952680 (MD5) Previous issue date: 2012-01-01 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O presente estudo teve como objetivo avaliar a citotoxicidade sobre Artemia salina de vinte e dois extratos de cinco espécies do gênero Lychnophora e de uma espécie de Lychnophoriopsis. Os extratos solubilizados em DMSO, preparados nas concentrações finais de 100, 250, 375, 500 e 600 μg mL-1, foram adicionados a recipientes contendo náuplios de Artemia salina (10 unidades cada) e completou-se o volume para 5 mL com solução marinha. Lapachol e DMSO 5% foram usados como controles positivo e negativo, respectivamente. As amostras foram mantidas sob iluminação e as larvas mortas foram contadas após 24 horas de contato. O cálculo da LC50 foi feito utilizando-se o programa Probitos. Os extratos etanólicos brutos de cinco espécies apresentaram baixa letalidade na seguinte ordem: Lychnophora trichocarpha (LC50 = 672,38 μg mL-1) > Lychnophora pinaster (LC50 = 678,73 μg mL-1) > Lychnophora ericoides (LC50 = 738,09 μg mL-1) > Lychnophoriopsis candelabrum (LC50 = 812,57 μg mL-1) > Lychnophora passerina (LC50 = 921,78 μg mL-1). Todos os extratos testados de Lychnophoriopsis candelabrum e o extrato clorofórmico de Lychnophora staavioides mostraram leve toxicidade sobre A. salina. Os resultados indicaram que existem substâncias com potencial atividade farmacológica em todas as espécies testadas. The present study aimed to evaluate on Artemia salina the citotoxicity of twenty-two extracts from five species of the genus Lychnophora and one species of the genus Lychnophoriopsis. The extracts solubilized in DMSO and prepared at the final concentrations of 100, 250, 375, 500 and 600 μg mL-1 were added to tubes containing Artemia salina nauplii (10 units each) and filled to 5 mL total volume with artificial salt water. Lapachol and 5% DMSO were used as positive and negative controls, respectively. The samples were kept under light and dead larvae were counted after 24 hours of contact. LC50 was calculated by using Probit software. The crude ethanol extracts from five species showed low lethality in the following order: Lychnophora trichocarpha (LC50 = 672.38 μg mL-1) > Lychnophora pinaster (LC50 = 678.73 μg mL-1) > Lychnophora ericoides (LC50 = 738.09 μg mL-1) > Lychnophoriopsis candelabrum (LC50 = 812.57 μg mL-1) > Lychnophora passerina (LC50 = 921.78 μg mL-1). All tested extracts from L. candelabrum and chloroform extract from L. staavioides showed light toxicity on A. salina. Results indicated that there are substances with potential pharmacological activity in all tested species. Universidade Federal de Ouro Preto Escola de Farmácia Departamento de Farmácia UNESP Instituto de Biociências de Rio Claro Departamento de Botânica UNESP Instituto de Biociências de Rio Claro Departamento de Botânica

The essential oil obtained by hydrodistillation from fresh leaves of Casearia lasiophylla Eichler, Salicaceae, was analyzed by gas capillary (GC/FID and GC/MS). The cytotoxicity of the leaves essential oil was tested in vitro againstU251 (glioma), UACC-62 (melanoma), MCF-7 (breast), NC1-ADR/RES (ovarian-resistant), NCI-H460 (lung), PC03 (prostate), OVCAR-3 (ovarian), HT-29 (colon) and K562 (leukemia) human cancer cells and against VERO (no cancer cell). The yield of oil was 0.02%. Fifty two compounds were identified, representing 87.1% of the total of the oil. The main components were identified as germacrene D (18.6%), β-caryophyllene (14.7%), δ-cadinene (6.2%), and α-cadinol (5.4%). The oil exhibited antiproliferative activity against all cell lines (TGI

Extracts from natural products, especially microorganisms, have served as a valuable source of diverse molecules in many drug discovery efforts and led to the discovery of several important drugs. Identification of microbial strains having promising biological activities and purifying the bio-molecules responsible for the activities, have led to the discovery of many bioactive molecules. Extracellular, as well as intracellular, extracts of the metabolites of thirty-six bacterial and twenty-four fungal isolates, grown under unusual conditions such as high temperature, high salt and low sugar concentrations, were in vitro tested for their cytotoxic potential on various cancer cell lines. The extracts were screened on HeLa and MCF-7 cell lines to study the cytotoxic potential. Nuclear staining and flow cytometric studies were carried out to assess the potential of the extracts in arresting the cell cycle. The crude ethylacetate extract of isolate F-21 showed promising results by MTT assay with IC50 as low as 20.37±0.36 µg/mL on HeLa, and 44.75±0.81 µg/mL on MCF-7 cells, comparable with Cisplatin. The isolate F-21 was identified as Aspergillus sp. Promising results were also obtained with B-2C and B-4E strains. Morphological studies, biochemical tests and preliminary chemical investigation of the extracts were also carried out.Extratos de produtos naturais, especialmente de microrganismos, constituíram-se em fonte valiosa de diversas moléculas em muitas descobertas de fármacos e levaram à descoberta de fármacos importantes. A identificação de espécies microbianas que apresentam atividade biológica e a purificação de biomoléculas responsáveis pelas atividades levou à descoberta de muitas moléculas bioativas. Extratos extracelulares tanto quanto intracelulares de metabólitos de 36 isolados de bactérias e 24 isolados de fungos, que cresceram sob condições não usuais, como alta temperatura, alta concentração de sal e baixa concentração de açúcar, foram testados in vitro quanto ao seu potencial citotóxico em várias linhagens de câncer. Os extratos foram ensaiados em células HeLa e MCF-7 para o estudo do potencial citotóxico. A coloração nuclear e os estudos de citometria de fluxo foram realizados para avaliar o potencial dos extratos em bloquear o ciclo celular. O extrato bruto em acetato de etila do isolado F-21 mostrou resultados promissores no ensaio de MTT, com IC50 de 20,37±0,36 µg/mL em células HeLa e 44,.75±0,81 µg/mL em células MCF-7, comparativamente à cisplatina. O isolado F-21 foi identificado como Aspergillus sp. Resultados promissores foram obtidos com cepas B-2C e B-4E. Realizaram-se, também, estudos morfológicos, testes bioquímicos e investigação química preliminar dos extratos.

Annona crassiflora (araticum), Eugenia dysenterica (cagaita), and Caryocar brasiliense (pequi) are tropical fruits of the second biggest Brazilian biome: the cerrado. Nowadays, the cerrado faces two different realities: 1) the great possibility of food production since it is considered as the biggest storehouse of the world; and 2) the rich biodiversity that has been newly discovered and known. Previous studies showed that certain cerrado fruits demonstrate high content of total phenols and excellent antioxidant activity in in vitro models. Moreover, using fingerprinting analysis, important bioactive molecules were identified as probably responsible for their antioxidant activity. In this study, the cytotoxicity and phototocixity of ethanolic extracts from cerrado fruits were evaluated using the in vitro Neutral Red Uptake (NRU). Regarding cytotoxicity, the extracts of araticum peel and cagaita seed did not shown any cytotoxic potential up to 300 µg.mL-1. Ethanolic extracts of araticum seed and pequi peel presented low cytotoxic potential and, according to linear regressions, the estimated LD50 were de 831.6 and 2840.7 mg.kg-1, respectively. In the evaluated conditions, only the araticum peel extract presented a phototoxic potential. This is the first attempt to screen the toxicity of cerrado fruits with high antioxidant activity. Annona crassiflora (araticum), Eugenia dysenterica (cagaita) e Caryocar brasiliense (pequi) são frutas do segundo maior bioma brasileiro: o cerrado. Atualmente, o cerrado enfrenta duas realidades diferentes: 1) a grande possibilidade de produção de alimentos, sendo considerado o maior celeiro do mundo; e 2) a riquíssima biodiversidade recentemente descoberta e conhecida. Estudos prévios demonstraram que algumas frutas do cerrado possuem alto conteúdo fenólico e excelente atividade antioxidante em modelos in vitro. Adicionalmente, por meio de análises de fingerprinting, importantes moléculas bioativas foram identificadas como prováveis responsáveis pela atividade antioxidante. Neste estudo, foram avaliadas a citotoxicidade e a fototoxicidade dos extratos etanólicos de frutas do cerrado usando o método in vitro de Neutral Red Uptake (NRU). Em relação à citotoxicidade, os extratos de casca de araticum e semente de cagaita não apresentaram potencial citotóxico até a concentração de 300 µg.mL-1. Extratos etanólicos de semente de araticum e casca de pequi apresentaram baixo potencial citotóxico e por meio de regressões lineares, as LD50 estimadas foram de 831,6 e 2840,7 mg.kg-1, respectivamente. Nas condições avaliadas, somente o extrato de casca de araticum apresentou potencial fototóxico. Esse estudo representa a primeira abordagem para screening de toxicidade de frutos do cerrado com alto poder antioxidante.

Made available in DSpace on 2019-09-12T16:25:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 Este trabalho é parte de uma investigação sobre o potencial citotóxico e genotóxico da água do Rio Paraíba do Sul (Brasil) utilizando raízes de Allium cepa. Foi analisado um parâmetro anátomo-morfológico (crescimento das raízes), bem como o índice mitótico e a frequência de micronúcleos. Aleatoriamente oito bulbos foram submetidos aos tratamentos de 24 a 120 horas com água do Rio proveniente dos pontos de coleta das cidades de Tremembé e Aparecida nos anos de 2005 e 2006. O comprimento das raízes de cada bulbo foi acompanhado diariamente ao longo do experimento. O índice mitótico (IM) e a frequência de micronúcleos (MN) foram determinados pela análise de 2.000 células por raiz, sendo utilizadas 3-5 raízes de outros bulbos (7-10). Somente as raízes tratadas com amostras de água coletadas em 2005 na cidade de Tremembé, apresentaram decréscimo no comprimento das raízes quando comparadas com o controle. Entretanto, foi observada redução do IM nas raízes tratadas com água de ambos os pontos de coleta no mesmo ano. Considerando os dados de crescimento de raiz e especialmente IM, um potencial citotóxico é sugerido para a água do Rio Paraíba do Sul em Tremembé e Aparecida, no ano de 2005. Por outro lado, para este mesmo ano, a frequência de micronúcleos não foi alterada; assim, a genotoxicidade não foi assumida para a água do Rio nos pontos mencionados. This work investigated the cytotoxic and genotoxic potential of water from the River Paraíba do Sul (Brazil) using Allium cepa roots. An anatomo-morphological parameter (root length), mitotic indices, and frequency of micronuclei were analysed. Eight bulbs were chosen at random for treatment for 24 to 120 hours with the River water collected in the years of 2005 and 2006 from sites in the cities of Tremembé and Aparecida (São Paulo state, Brazil). Daily measurements of the length of the roots grown from each bulb were carried out throughout the experiment. Mitotic index (MI) and frequency of micronuclei (MN) were determined for 2000 cells per root, using 3-5 root tips from other bulbs (7-10). Only in the roots treated with samples of the River water collected in 2005 in Tremembé city was there a decrease in the root length growth compared to the respective control. However, a reduction in MI values was verified for both sites analysed for that year. Considering the data involving root length growth and especially MI values, a cytotoxic potential is suggested for the water of the River Paraíba do Sul at Tremembé and Aparecida, in the year of 2005. On the other hand, since in this year the MN frequency was not affected with the river water treatments, genotoxicity is not assumed for the river water sampled at the aforementioned places. [Barbério, A.; Voltolini, JC.] Universidade de Taubaté, Brazil Barbério, A.; Barros, L.; Mello, MLS.] Universidade Estadual de Campinas, Brazil

In the present study, 32 hexane and ethanol extracts of Protium bahianum, P. heptaphyllum, Croton sellowii, C. rhamnifolius, C. jacobinensis, C. micans and Muntingia calabura were screened for antibacterial activity by the disc-diffusion method. Cytotoxicity assays using the brine shrimp Artemia salina Leach as a model were performed to determine lethal doses for 50% of individuals (LC50 µg/mL). Antibacterial activity was found in flowers hexane extracts of M. calabura against B. subtilis, and leaves ethanol extracts against S. aureus and B. subtilis at concentration of 1mg/mL. Among 32 extracts, 19 showed low or no toxicity (LC50 > 250 µg/mL), 6 showed moderate toxicity (LC50 between 80 µg/mL and 250µg/mL), and 7 were highly toxic (LC50 < 80 µg/mL).

Bromelia antiacantha (known as wild banana) is traditionally used to treat coughs, as an emollient and antitussive, and to treat mouth and skin ulcers. To investigate the radical scavenger properties, DPPH and phosphomolybdenium were used, with low antioxidant activity being observed for both (below 5 mg/ml of extract presented no activity for both techniques). An HPLC fingerprint of phenolic compounds was developed and total phenolics through Folin-Ciocalteau method was an average of 500 µg/g of fresh fruits. Any cytotoxicity was observed on L929 fibroblasts cells for aqueous, methanol and lipid extracts between 500 and 0.01 µg/ ml. The wild banana extract (1000 µg/mL) shown a lower genotoxicity when compared to the negative and positive (MMS) controls. Abundant calcium oxalate crystals and sucrose were found and characterized through NMR and X-ray diffraction respectively. Its centesimal composition indicated abundant carbohydrates (45%) and lipids (18%). The carbohydrate analysis showed acidic monosaccharides, and the lipid analysis shown palmitic and linoleic acids in similar quantities (30% each) and oleic acid 20%, among others, through GC-FID. The viscosity of the water-soluble polysaccharide sub-fraction (5 g/L) was similar to that of water. O chá dos frutos maduros de Bromelia antiacantha (banana-de-bugre; banana-do-mato) é usado tradicionalmente para tratar desordens respiratórias, como antitussígeno e também para tratar ulceras de pele e boca. Neste trabalho pesquisou-se o potencial de captação de radicais livres do extrato aquoso e extrato metanólico através da reação de redução do DPPH e do fosfomolibdenio, sendo encontrada baixa atividade nos dois modelos (abaixo de 5 mg/ml nenhuma atividade foi detectada em ambos extratos). Os compostos fenólicos totais foram determinados através de Folin-Ciocalteau, sendo encontrados 500 µg/g de fruto maduro fresco, e foi desenvolvido fingerprint dos compostos fenólicos através de CLAE-DAD. Nenhuma citotoxicidade foi observada em fibroblastos L929 para extratos aquoso, metanólico e lipídico entre 500 e 0,01 µg/ml, assim como baixa genotoxicidade (1000 µg/mL) quando comparados aos controles negativo e positivo (MMS). Abundantes cristais de oxalato de cálcio e de sacarose foram observados e caracterizados por RMN e difração de Raios-X respectivamente, e a composição centesimal do fruto indicou abundantes carboidratos (45%) e lipídeos (18%). A analise de carboidratos encontrou componentes monosacarídicos ácidos e foram encontrados acido palmítico e linoléico em quantidades similares (30% cada) e 20% de acido oléico, entre outros ácidos graxos através de CG-DIC. A viscosidade da sub-fração polissacarídica solúvel em água (5 g/L) foi semelhante a da água.

A leishmaniose é considerada uma importante causa de morbidade e mortalidade a nível mundial, principalmente nos países tropicais. As formas cutânea e mucocutânea são causadas, entre outras espécies, por Leishmania braziliensis. Na procura de compostos leishmanicidas de origem natural, foi estudada a atividade da mistura de alcalóides de Ervatamia coronaria (Apocynaceae) contra amastigotas de L. braziliensis em 6 concentrações diferentes (1, 10, 20, 25, 50 e 100 µg/mL). Foram tratados macrófagos de ratos da linha J774, infectados com promastigotas de L. braziliensis, com a mistura de alcalóides 1 hora após-infecção e diariamente por 3 dias sem mudança de meio. As experiências de citotoxicidade foram efetuadas sobre os macrófagos com azul tripam. Todos os cultivos foram feitos de forma triplicada e os grupos de controle não foram submetidos à mistura de alcalóides. Foi obtido que o composto adicionado exerce atividade doses/dependente sobre a parasita. No entanto, as concentrações mais altas (50 e 100 µg/mL), adicionado durante 3 dias, mostraram os maiores índices de infecção, provavelmente devido a diminuição no número de macrófagos, sobre os quais não foi observado efeito tóxico do tratamento durante 24 horas DL50/24h = 233,52 µg/mL. Os resultados dessa pesquisa revelaram uma nova atividade farmacológica de alcalóides da espécie Ervatamia coronaria sobre a forma amastigota de Leishmania braziliensis, com IC50 = 2,6 e 12,4 µg/mL sem mostrar toxicidade sobre a célula hospedeira. Leishmaniasis, caused by Leishmania sp., is one of the mean reason of considerable mortality and morbidity throughout the world, especially in the tropics. Cutaneous and mucocutaneous manifestations are caused by Leishmania braziliensis, and the cutaneous form is the most common one in Colombia. In the search for antileishmanial compounds from natural sources, we studied the alkaloids mixture from Ervatamia coronaria against L. braziliensis at six different concentrations (1.0, 10, 20, 25, 50 and 100 µg/mL). Macrophages J774 infected with L. braziliensis were treated with alkaloids one hour, and once a day for three days, after parasitic infection and preserving the same culture medium. Cytotoxicity with trypan blue was undertaken in macrophages J774 by using the same concentrations. Three different cultures samples were carried out. As a control we used medium alone. The alkaloids mix showed a dose/dependent activity on amastigote, but by increasing concentrations from 50 to 100 µg/mL for three days, we saw a high index of infection, probably caused by cellular death. We did not see any toxic effect on macrophages J774 at 100 µg/mL, LD50/24h= 233.52 µg/mL. These results revealed a novel pharmacological activity of alkaloids from E. coronaria against amastigotes of L. braziliensis IC50 = 2.6 and 12.4 µg/mL without toxicity on host cells.