Search

Reported for the first time in 1996, aquagenic keratoderma is a rare condition which is characterized by edematous flat-topped papules appearing on palmar skin after water immersion. Multiple anecdotal associations have been described but, recently, the association with cystic fibrosis gene mutations (CFTR) has been highlighted.The authors describe an 18-year-old female, with one-month complaints of pruritus and swelling of palmar skin after water immersion. On examination, palmar skin was unremarkable but, 5 min after water immersion, multiple whitish papules became apparent. CFTR genotype study showed a F508del mutation in one allele (nonhomozygous). She had no other symptoms and no relevant family history.Aquagenic keratoderma is probably an under-diagnosed entity that might represent a manifestation of CFTR mutations, making carrier state identification and genetic counseling possible. Resumo: Descrita em 1996, a acroqueratodermia aquagénica é uma entidade rara, caracterizada pelo aparecimento de pápulas edematosas palmares após contacto com água. Múltiplas associações foram enumeradas mas, recentemente, a associação a mutações do gene da fibrose quística foi demonstrada.Descreve-se o caso de uma mulher de 18 anos, saudável, com prurido e edema palmar após imersão em água. O exame objetivo inicial não mostrava alterações mas, 5 min após imersão em água, observavam-se múltiplas pápulas esbranquiçadas palmares. O estudo do gene da fibrose quística (CFTR) revelou uma mutação F508del num dos alelos. A doente negava outras queixas ou história familiar relevante.A acroqueratodermia aquagénica é uma entidade provavelmente subdiagnosticada que poderá constituir uma manifestação de mutações do gene CFTR, o que possibilitaria a identificação de portadores e aconselhamento genético. Keywords: Aquagenic keratoderma, Cystic fibrosis, Genetic counseling, Palavras-chave: Acroqueratodermia aquagénica, Fibrose quística, Aconselhamento genético

A interrupção voluntária da gravidez (IVG) é uma situação de elevada complexidade a vários níveis, implicando um diagnóstico pré-natal preciso e uma corroboração post-mortem do mesmo, com eventual acréscimo de informação que contribua para um adequado aconselhamento genético aos casais. Os autores pretenderam avaliar a qualidade de diagnóstico pré-natal efectuado no seu centro, estudando a população submetida a IVG, nomeadamente identificando as suas indicações/causas e avaliando os exames feto-patológicos para estabelecer uma concordância entre os achados pré-natal e post-mortem. Foram analisados retrospectivamente 84 casos, no período de Janeiro de 2012 a Junho de 2016. A idade média materna foi de 32 anos, sendo maior no grupo das IVG’s por cromossomopatias, com significado estatístico. A mediana da idade gestacional na IVG foi de 18 semanas, sendo que apenas 5% se realizaram após as 24 semanas. A distribuição das causas de IVG foi feita por 4 grupos: cromossomopatias 47,5%, malformações fetais 35,5%, outras causas fetais 12% e causas maternas 6%. Foi estabelecida uma concordância entre os achados pré-natais e os post-mortem no grupo das malformações fetais e outras causas fetais de 66%. Estes resultados estão de acordo com publicações nesta área, corroborando a importância da complementaridade dos achados ecográficos pré-natais com a avaliação minuciosa anatomo-patológica, nomeadamente nas situações de malformações fetais não associadas a cromossomopatia, de modo a obter diagnósticos mais precisos e melhor aconselhamento genético. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

Anais do V Encontro de Iniciação Científica e I Encontro Anual de Iniciação ao Desenvolvimento Tecnológico e Inovação – EICTI 2016 - 05 e 07 de outubro de 2016 – Sessão Ciências Biológicas A genética clínica adquiriu importância para a população e os serviços de saúde pública, uma vez que a incidência de síndromes genéticas e doenças congênitas têm aumentado substancialmente. Nesse contexto, o Aconselhamento Genético é uma ferramenta que busca, através da identificação de problemas humanos relacionados com o aparecimento dos transtornos citados, atuar na prevenção dessas condições e reduzir sua frequência. Algumas situações requerem atenção especial de aconselhamento genético, já que representam alto risco para a ocorrência das síndromes genéticas ou doenças congênitas. Entre elas estão casais com abortos repetitivos, casais consanguíneos, feto portador de malformação detectada durante pré-natal, entre outras. Dessa forma, este trabalho teve como objetivo avaliação do estilo parental de pais de crianças portadoras de síndrome genética e do perfil de casais com histórico de abortos. Sendo assim, foi possível identificar as principais causas de transtornos em um indivíduo ou família, que serão confirmadas com pesquisas subsequentes, e obter mais informações sobre estas famílias, que poderão ser utilizadas para ações de intervenção e aconselhamento direcionado às reais necessidades de cada caso na região da tríplice fronteira.

Profissionais de saúde, atuantes em serviços que oferecem aconselhamento genético (AG), carecem de instrumentos objetivos para avaliar os desfechos do AG e para \"dar voz\" aos usuários desses serviços. O desconhecimento desses desfechos pode impactar diretamente na efetividade e nos benefícios do aconselhamento, na qualidade de vida, na promoção da saúde e no empoderamento dos aconselhados. Tais instrumentos são escassos na maioria dos países e inexistentes no Brasil. Nesse contexto, o presente estudo teve como objetivo adaptar culturalmente e validar a Genetic Counseling Outcome Scale/GCOS-24, originalmente elaborada no idioma inglês britânico. Após aprovação pelo Comitê de Ética em Pesquisa das instituições participantes, conduzimos uma investigação metodológica, que incluiu 204 usuários (pacientes, acometidos ou em risco para doenças genéticas, ou um de seus familiares/cuidadores) do Serviço de Genética Médica de um hospital universitário do interior paulista, durante o período de outubro de 2014 a dezembro de 2015. O processo de adaptação e validação da GCOS-24 compreendeu as fases de tradução e retrotradução, comitê de especialistas, validação semântica, estudo piloto e estudo de campo, por meio de análise estatística apropriada. A validação semântica demonstrou que a GCOS-24 é composta por itens considerados relevantes para a condição de saúde dos participantes do estudo, os quais foram facilmente compreendidos pelos mesmos. A versão adaptada apresentou confiabilidade satisfatória (?Cronbach=0,71) e estabilidade moderada (ICC=0,52), mensuradas, respectivamente, pelo Coeficiente Alfa de Cronbach e Coeficiente de Correlação Intraclasse. O processo de adaptação e validação da GCOS-24 para brasileiros foi finalizado. O produto final deste trabalho, a EDAG-24 (Escala de Desfechos do Aconselhamento Genético/EDAG-24), foi considerada válida e fidedigna à sua versão original, com potencial para mensurar os desfechos do aconselhamento genético, realizado em serviços de genética clínica Health professionals working in services that offer genetic counseling (GC) lack objective instruments to measure the GC outcomes and to give voice to the users of these services. The unawareness of these outcomes can directly impact the effectiveness and benefits of counseling, life quality, health promotion and the empowerment of the patients. Such instruments are scarce in most countries and nonexistent in Brazil. In this context, this paper aimed to culturally adapt and validate the Genetic Counseling Outcome Scale /GCOS-24, originally made in British English. After the approval of the Research Ethics Committee of the participating institutions, we conducted a methodological investigation, which included 204 users (patients, affected or at risk for genetic diseases, or one of their relatives/caregivers) from the Medical Genetics Service of a university hospital in the countryside of the state of Sao Paulo, during the period from October 2014 to December 2015. The process of adaptation and validation of the GCOS-24 comprehended the phases of translation and back-translation, committee of experts, semantic validation, pilot test and field study, through appropriate statistical analysis. The semantic validation revealed that GCOS-24 consists of items that were considered relevant to the health condition of the study participants, which were easily understood by them. The adapted version presented satisfactory reliability (?Cronbach=0,71) and moderate stability (ICC=0,52), measured, respectively, by the Cronbach\'s Alpha Coefficient and Intraclass Correlation Coefficient. The adaptation and validation process of the GCOS-24 to Brazilians was finalized. The final product of this paper, the EDAG-24 (Escala de Desfechos do Aconselhamento Genético/EDAG-24), was considered valid and reliable to its original version, with potential to measure the genetic counseling outcomes conducted in Clinical Genetics Services

Dissertação de Mestrado em Biotecnologia para as Ciências da Saúde As doenças genéticas raras, apesar da sua baixa prevalência em termos individuais, atingem, no seu conjunto, uma dimensão significativa que as torna num problema de saúde pública, dadas as implicações familiares, sociais e económicas. Sendo o tratamento uma realidade para apenas uma ínfima parte destas doenças, a intervenção primordial tem incidido na prevenção, baseada no aconselhamento genético, onde o diagnóstico pré-natal (DPN) assume o papel principal. Os testes bioquímicos e genéticos constituem as melhores formas de diagnóstico, uma vez que permitem obter informações antes do aparecimento dos primeiros sintomas e ajudam na escolha da terapia, planificação do acompanhamento e no aconselhamento genético. As Doenças de Sobrecarga Lisossomal (DSL’s) são um grupo heterogéneo de doenças causadas por defeitos genéticos numa hidrolase ácida lisossomal, num recetor, numa proteína ativadora, numa proteína de membrana, ou num transportador, que origina acumulação lisossomal de substratos. A acumulação é progressiva e pode levar à perda da função celular ou tecidular. As DSL’s são classificadas segundo o substrato que é acumulado e dividem-se essencialmente em quatro grupos: esfingolipidoses, mucopolissacaridoses, oligossacaridoses, e outras DL’s. (Raymond Y. Wang, 2011) O diagnóstico pré-natal consiste na utilização de várias técnicas que visam determinar o estado de saúde de um feto. De entre as várias técnicas de colheita de amostra fetal que podem ser utilizadas, atualmente, a amniocentese é a mais usual. No entanto, a utilização de biópsia de vilosidades coriónicas tem sido crescente, devido ao fato de poder ser realizada numa fase mais precoce de gestação contribuindo para evitar algumas condicionantes, como a ansiedade dos progenitores e o tempo curto para a realização das análises laboratoriais face ao limite legal para a interrupção medicamente assistida da gravidez. No sentido de contribuir para o diagnóstico pré-natal das DSL’s em vilosidades coriónicas foram realizados doseamentos enzimáticos de 10 enzimas associadas à hidrópsia fetal não-imune (β-galactosidase, α-manosidase, β-glucuronidase, β-glucosidase, α-neuraminidase, galactose-6-sulfatase, α-iduronidase, esfingomielinase, β-hexosaminidase A, hexosaminidase total) e a quantificação do ácido siálico e estabelecidos os respetivos valores de referência. Procedeu-se também à implementação do diagnóstico bioquímico da doença Ceróido-Lipofuscinose Neuronal tipo 10 pela determinação da atividade enzimática da catepsina D e a implementação do estudo molecular do gene GBE1 para o diagnóstico da doença Glicogenose Tipo IV, patologia associada também à etiologia de hidrópsia fetal. Os objetivos deste trabalho foram atingidos e com base nos resultados obtidos, estes novos métodos de diagnóstico foram implementados na Unidade de Bioquímica Genética do Centro de Genética Médica Dr. Jacinto de Magalhães do Centro Hospitalar do Porto, constituindo uma mais-valia para o estudo efetuado. Rare genetic diseases, despite its low prevalence in individual terms, reach, on the whole, a significant dimension that makes it a public health issue, given the familial, social and economic implications. Treatment is available for only a tiny fraction of these diseases, so, the primary intervention has focused on prevention, based on genetic counseling, where prenatal diagnosis (PND) takes the lead role. Biochemical and genetic tests are the best way of diagnosis, since they allow information before the onset of symptoms and help in the choice of therapy, planning monitoring and genetic counseling. The Lysosomal Storage Diseases (LSDs) are a heterogeneous group of disorders caused by genetic defects in a lysosomal acid hydrolase, receptor, activator protein, membrane protein, or transporter, which causes lysosomal accumulation of substrates. The accumulation is progressive, and can lead to loss of cellular and tissue function. The LSDs are classified according to the substrate is accumulated and divided essentially into four groups: mucopolysaccharidosis, oligosacaridoses, sphingolipidoses, and others LSDs. (Raymond Y. Wang, 2011) Prenatal diagnosis encompasses the use several techniques aimed at determining the state of health of a fetus. Among the various techniques that can be used to collect fetus samples, amniocentesis is the most used one. However, the use of chorionic villi biopsy has been increased due to the fact that it can be carried out earlier in gestation, thus avoiding some constraints such as the anxiety of parents and the short time to perform laboratory analyzes over the legal limit for medically assisted pregnancy interruption. In order to contribute to the prenatal diagnosis of DSL's in chorionic villi, enzymatic assays were carried out for 10 enzymes associated with non-immune hydrops fetalis (β-galactosidase, α-manosidase, β-glucuronidase, β-glucosidase, α-neuraminidase galactose-6-sulfatase, α-iduronidase, sphingomyelinase, β-hexosaminidase A, hexosaminidase total), as well as the quantification of sialic acid in order to establish the respective reference values. Biochemical diagnosis of Ceroido-lipofuscinosis Neuronal type 10 disease was also implemented by determination of the enzymatic activity of cathepsin D and the implementation of molecular study of GBE1 gene allowed for the diagnosis of glycogenosis type IV disease, pathology also associated with the etiology of fetal hydrops. The objectives were achieved and based on the results obtained, these new diagnostic methods were implemented in Biochemical Genetics Unit of the Medical Genetics Centre Dr. Jacinto de Magalhães of the OPorto Hospital Center, constituting an added value for the work performed.

Introdução: A aplasia cutis congénita consiste num grupo heterogéneo de distúrbios caracterizados pela ausência, ao nascimento, de uma porção da pele de uma forma localizada ou dispersa. Esta inclui 9 grupos com diferentes expressões clínicas. É maioritariamente um defeito isolado benigno, mas pode estar associada a outras anomalias ou síndromes malformativos. O seu tratamento depende do tamanho, profundidade e localização da lesão. Frequentemente, as lesões curam espontaneamente. A ocorrência de complicações major é rara e o prognóstico habitualmente é excelente. Contudo, é importante o aconselhamento genético na presença de outras anomalias associadas. Este de- verá ser aconselhado para pais e crianças afetadas, exceto as que pertençam ao grupo 1 ou 8. Caso Clínico: Recém-nascido do sexo masculino, gestação vigiada, serologias do 3º trimestre sem sinais de infeção aguda. Diagnóstico pré-natal de hidronefrose de 11mm à direita detetada em ecografia do 3º trimestre. Parto eutócico às 38 semanas e 6 dias. Índice de Apgar 9/10. Antropometria ao nascimento adequada à idade gestacional. Sob aleitamento materno exclusivo. Ao nascimento foi objetivada no couro cabeludo uma placa de 1x1cm circular na forma de úlcera discretamente deprimida, recoberta de crosta hemorrágica. Foi observado por Neonatologia e Dermatologia, tendo tido alta com o diagnóstico provável de aplasia cutis congénita, encaminhado para a consulta de Dermatologia Pediátrica, Pediatria Doenças Renais e Neonatologia. Aos 2 meses de vida, foi observado em consulta de Dermatologia Pediátrica. Ao exame objetivo, era notória uma placa eritematosa discretamente elevada, sem folículos pilosos, com cerca de 4-5mm de diâmetro. Deste modo, na ausência de outras anomalias e perante o processo de cicatrização da lesão, teve alta da consulta de Dermatologia, tendo sido realizada tranquilização dos pais acerca da situação clínica. Comentários: A aplasia cutis congénita é uma lesão que pode ser causadora de grande ansiedade parental, pelo que é importante ao Pediatra o seu reconhecimento e devido esclarecimento. Apesar de se tratar, na maioria das vezes, de um defeito benigno, é importante o conhecimento da sua relação com outras anomalias e síndromes de forma a otimizar a sua orientação precoce e adequada. Da mesma forma, é importante o aconselhamento genético, nos casos que assim o justifiquem., NASCER E CRESCER - BIRTH AND GROWTH MEDICAL JOURNAL, Vol 24 (2015): Supplement II: XVII Reunião Anual de Pediatria do CMIN

Introdução: A Síndrome de Insensibilidade aos Andrógenos Completa (SIAC) é uma doença recessiva ligada ao cromossomo X, na qual a paciente possui cariótipo XY com fenótipo feminino. Isto se explica devido à insensibilidade aos andrógenos, incluindo testosterona e DHT, pela anomalia ou ausência dos receptores de androgênio.Objetivo: Este estudo tem por principal objetivo abordar as novas terapêuticas perante as escolhas atuais em paciente portadores da síndrome de Morris. Métodos:O levantamento bibliográfico foi realizado entre Março e Abril de 2021 a partir de materiais como artigos científicos e publicações da Federação Brasileira das Associações de Ginecologia e Obstetrícia (Febrasgo), Revista Bioética, KargerPublishers, Publisher of Open Access Journals (MDPI), Repositório da Produção Científica e Intelectual da Unicamp e base de dados Scielo. Foram selecionados 17 artigos que correspondiam aos critérios propostos para execução do trabalho.Resultados:Devido ao pseudo-hermafroditismo masculino, o paciente apresenta órgãos sexuais externos femininos, porém, internamente, terá testículos. Ademais, podem ser percebidas alterações na genitália externa, nas mamas, na estatura e alterações hormonais significativas. Em suma, o diagnóstico é baseado na apresentação clínica, exames laboratoriais e de imagem em uma mulher com cariótipo 46, XY e poderá ser confirmado por meio de uma análise do gene AR. Durante a escolha do tratamento, a principal abordagem será em relação a atribuição de sexo, adequado ou não a genitália externa, reposição hormonal, resultado psicossexual, momento ideal para gonadectomia e aconselhamento genético . Contudo, após o diagnóstico, o acompanhamento psicológico tem função primordial no apoio ao paciente e familiares, pois é necessário abordar em diálogo claro todas as questões envolvidas.Conclusões:As escolhas atuais dos pacientes nos trazem grandes desafios, principalmente quando a escolha é para assumir o cariótipo masculino. Quando se assume o feminino parece mais simples, mas a questão psicológica também é muito desafiadora. Isto indica que são necessárias novas estratégias e muita atenção multidisciplinar para o tratamento destas pacientes.

INTRODUÇÃO: A primeira doença humana atribuída à resistência hormonal foi o pseudo-hipoparatireoidismo (PHP), uma doença rara caracterizada por hipocalcemia, hiperfosfatemia e níveis elevados de hormônio paratireoidiano (PTH) na presença de função renal normal, quadro condizente com resistência ao PTH. A classificação original do PHP leva em consideração a osteodistrofia hereditária de Albright (AHO): presente no PHP1a e ausente no PHP1b. Na medida em que as bases moleculares do PHP têm sido compreendidas, uma classificação baseada no genótipo tem surgido. Segundo ela, pacientes com PHP1a apresentam mutações na região codificadora da Gsalfa do GNAS e o padrão de herança é autossômico dominante relacionado à transmissão materna. Por outro lado, o PHP1b é caracterizado por alterações nas regiões diferencialmente metiladas (DMRs) do GNAS por mecanismos não completamente esclarecidos, limitando a previsão do seu padrão de herança. Pacientes que apresentam a AHO na ausência de resistência hormonal têm o diagnóstico de pseudopseudo-hipoparatireoidismo (PPHP) e seu padrão de herança é autossômico dominante relacionado à transmissão paterna de mutações na região codificadora da Gsalfa do GNAS. OBJETIVOS: Classificar 25 pacientes com PHP com base em defeitos no GNAS e caracterizar seu fenótipo. Pesquisar mutações no GNAS nos quatro pacientes com PPHP e também caracterizar seu fenótipo. MÉTODOS: A avaliação fenotípica incluiu análise das resistências hormonais, pesquisa de repercussões crônicas da hipocalcemia/hiperfosfatemia (calcificações em sistema nervoso central: SNC e catarata) e identificação da AHO. A análise do GNAS foi feita por sequenciamento automático e MLPA (região codificadora da Gsalfa) e por MS-MLPA (região regulatória: DMRs). RESULTADOS: Resistência ao PTH foi identificada nos 25 pacientes com PHP e resistência ao TSH em 17/25. Calcificações em SNC e catarata estiveram presentes em 18 e 10 pacientes com PHP, respectivamente. A AHO foi caracterizada por: face arredondada (n=18), braquidactilia (n=11), baixa estatura (n=8), ossificações subcutâneas (n=6), obesidade (n=9) e retardo mental (n=3). Identificamos oito mutações (cinco novas) na região codificadora da Gsalfa em 10 pacientes com PHP1a e quatro pacientes com PPHP. Quinze pacientes apresentaram alteração no padrão de metilação das DMRs (genótipo: PHP1b). O fenótipo dos pacientes foi semelhante nos dois grupos. DISCUSSÃO E CONCLUSÃO: Nenhuma das classificações do PHP foi capaz de predizer gravidade ou o curso clínico da doença. Porém, o diagnóstico do PHP1a baseado no genótipo possibilitou a identificação precoce de uma paciente, a exclusão de PHP1a na filha de outra paciente e o aconselhamento genético em duas famílias. O diagnóstico de PHP1b em uma paciente só foi possível graças ao genótipo, visto que seu perfil laboratorial osteometabólico era inconclusivo. Com base no fenótipo, 8/15 pacientes com PHP1b seriam classificados como PHP1a considerando a presença de dois ou mais estigmas da AHO, podendo levar a falhas no aconselhamento genético. Portanto, concluímos que a classificação do PHP baseada na análise do GNAS é mais informativa do que a baseada no fenótipo, permitindo o diagnóstico precoce e o aconselhamento genético de casos familiais de PHP1a. A identificação do PHP1b deve ser promissora na medida em que seus mecanismos de transmissão forem mais bem entendidos BACKGROUND: The first human disease attributed to hormone resistance was pseudohypoparathyroidism (PHP), a rare disease characterized by hypocalcemia, hyperphosphatemia and elevated parathyroid hormone (PTH) levels in the presence of normal renal function, consistent picture of PTH resistance. The original classification of PHP takes into account the Albright hereditary osteodystrophy (AHO): present in PHP1a and absent in PHP1b. As the molecular bases of PHP have been understood, a classification based on genotype has emerged. According to it, PHP1a patients present mutations in the Gsalpha coding region of the GNAS and the pattern of inheritance is autosomal dominant related to maternal transmission. On the other hand, PHP1b is characterized by alterations in differentially methylated regions (DMRs) of the GNAS by mechanisms not completely clear, limiting the prediction of the pattern of inheritance. Patients who present AHO in the absence of hormone resistance have the diagnosis of pseudopseudohypoparathyroidism (PPHP) and their pattern of inheritance is autosomal dominant related to paternal transmission of mutations in the Gsalfa coding region of the GNAS. OBJECTIVE: To classify 25 patients with PHP based on GNAS molecular defects and to characterize their phenotype. To search for GNAS mutations in four patients with PPHP and also to characterize their phenotype. METHODS: The phenotypic evaluation included analysis of hormone resistances, research of chronic repercussions of hypocalcemia/hyperphosphatemia (calcifications in central nervous system: CNS and cataract) and identification of AHO. The analysis of the GNAS was done by automated sequencing and MLPA (Gsalphaa coding region) and by MS-MLPA (regulatory region: DMRs). RESULTS: PTH resistance was identified in 25 patients with PHP and TSH resistance in 17/25. Calcifications in CNS and cataract were present in 18 and 10 patients with PHP, respectively. AHO was characterized by: rounded face (n=18), brachydactyly (n=11), short stature (n=8), subcutaneous ossifications (n=6), obesity (n=9) and mental retardation (n=3). We identified eight mutations (five novels) in the Gsalpha coding region in 10 patients with PHP1a. Fifteen patients presented alterations in the methylation pattern of DMRs (genotype: PHP1b). The phenotype of patients was similar in both groups. DISCUSSION AND CONCLUSION: None of the PHP classifications was able to predict the severity or clinical course of the disease. However, the diagnosis of PHP1a based on genotype allowed the early identification of one patient, the exclusion of PHP1a in the daughter of another patient and genetic counseling in two families. The PHP1b diagnosis in one patient was only possible due to the genotype, as her bone metabolism profile was inconclusive. Based on phenotype, 8/15 PHP1b patients would have been classified as PHP1a considering the presence of two or more AHO stigmas, being able to lead to failures in genetic counseling. Therefore, we conclude that the PHP classification based on GNAS analysis is more informative than that based on phenotype, allowing the early diagnosis and the genetic counseling for familial cases of PHP1a. The identification of PHP1b may be promising as its transmission mechanisms are better clarified

Submitted by MAÍSA PINHEIRO null (maisapinheiro12@gmail.com) on 2016-04-12T16:55:15Z No. of bitstreams: 1 Pinheiro, M. 2016 - Tese de Doutorado (IBB-UNESP).pdf: 3923989 bytes, checksum: f24cc69144ac6ae68f5d0145d6beadb5 (MD5) Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-04-13T17:29:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pinheiro_m_dr_bot_par.pdf: 696369 bytes, checksum: 2426284c07a873aad01ced326fd05a78 (MD5) Made available in DSpace on 2016-04-13T17:29:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pinheiro_m_dr_bot_par.pdf: 696369 bytes, checksum: 2426284c07a873aad01ced326fd05a78 (MD5) Previous issue date: 2016-02-12 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) A identificação de fatores de predisposição e a caracterização de fatores genéticos de risco para o desenvolvimento do câncer são essenciais para o diagnóstico, prognóstico e aconselhamento genético dos pacientes afetados e seus familiares. Há uma alta incidência de pacientes que possuem carcinomas de mama (CM) e/ou carcinoma de tireoide (CT) e com história familial destes tumores, sugerindo o envolvimento de gene(s) associado(s) com a predisposição hereditária ao câncer. O objetivo deste trabalho foi investigar a presença de genes de predisposição ao desenvolvimento de CM e CT por meio do sequenciamento total do exoma, em pacientes que sejam afetados por pelo menos um destes tumores e possuam história familial de câncer. Foram incluídas seis pacientes que apresentavam CM, 12 com CT e seis com ambos os tumores, todos com história destes tumores em suas famílias. O DNA de sangue periférico foi sequenciado pela plataforma HiSeq 1000 (Illumina). Após análise de bioinformática foram identificadas alterações em genes de alta e baixa penetrância comuns e raras. As alterações raras destes genes foram consideradas como patogênicas quando presentes em pelo menos três bancos de dados e em até dois indivíduos. A paciente 14 teve diagnóstico de síndrome de Cowden confirmado pela presença da mutação p.R233X no gene PTEN. Também foram investigadas outras alterações em novos genes o que resultou em 911 SNVs (single nucleotide variations), sendo 287 não- sinônimas e 50 alterações raras consideradas patogênicas em pelo menos três bancos de dados. Entre as 50 alterações patogênicas, 13 mostraram interação proteica com produtos codificados por genes de alta ou baixa penetrância previamente descritos em síndromes hereditárias clássicas. Também foram identificadas alterações em genes recentemente descritos como associados à CT e ou CM hereditários (HABP2, PARP4 e SRRM2). Foi verificado que as vias de produção de hormônios tireoidianos e de sinalização RAP1 podem ter suas funções comprometidas por alterações deletérias que foram detectadas em 10 e 14 pacientes deste estudo, respectivamente. Especificamente a via de síntese de hormônio tireoidiano revelou estar potencialmente desregulada nas Famílias I e II por meio das alterações em PLCB3 e PAX8, respectivamente. As alterações consideradas mais promissoras incluem a rs35169799 (PLCB3), as classificadas como de manutenção do genoma (rs61997220: ZC3H12D, rs61902276: DDIAS, rs61754785: MUS81 e rs62619782: RNASEH2A) e as potencialmente desreguladas em vias importantes (rs3188996: PAX8). As variantes rs61754785 (MUS81) e rs7080536 (HABP2) foram confirmadas e validadas nos pacientes índice e em seus familiares; a última dando suporte adicional a dados da literatura como não envolvida em casos com CT não papilífero hereditário e CM. Este estudo revelou genes candidatos com potencial para contribuir para o diagnóstico molecular e aconselhamento genético destes pacientes e suas famílias. The identification of predisposing genes and characterization of genetic risk factors for cancer development are essential for the diagnosis, prognosis and genetic counseling of affected patients and their families. A significant number of patients with breast (BC) and papillary thyroid carcinomas (TC) and family history of these tumors suggest the involvement a hereditary cancer predisposition gene. The aim of this study was to evaluate new predisposing genes related to BC and TC by whole exome sequencing, in patients who are affected by at least one of these tumors and have cancer family history. Six patients with CM, 12 with CT and six with both tumors were included in the study, all of them with family history of these tumors. DNA from peripheral blood sample was sequenced by HiSeq 1000 platform (Illumina). After the bioinformatics analysis, variations in high and lowpenetrance genes were identified; most of them were considered common according to 1000 Genomes and 6500 Exomes. Furthermore, rare variations were described in these genes, which were considered pathogenic in at least three databases and observed in up to two patients. Patient 14 presented the p.R233X mutation in PTEN confirming the diagnosis of Cowden Syndrome. Other genes were investigated in order to characterize new variations related to the phenotype studied. This analysis resulted in 911 SNVs (single nucleotide variations), 287 non-synonymous alterations and 50 rare pathogenic variations (detected in at least three databases). From these, 13 alterations were mapped in genes that interact with high and low-penetrance genes previously described in literature. Alterations were also identified in genes recently described as associated with hereditary PTC and BC (HABP2, PARP4 and SRRM2). Enrichment analysis revealed compromised functions in the Thyroid hormone Synthesis and RAP1 Signaling pathways, involving deleterious alterations in 10 and 14 patients, respectively. Specifically, the thyroid hormone synthesis pathway may be potentially deregulated in individuals from Families I and II through PLCB3 and PAX8 alterations, respectively. Promising SNP candidates included the rs35169799 (PLCB3), one of the most frequent alterations, those classified as genome maintenance (rs61997220: ZC3H12D, rs61902276: DDIAS, rs61754785: MUS81, rs62619782: RNASEH2A), and mapped in potentially deregulated pathways (rs3188996: PAX8). Confirmation and validation analysis were performed for two variants rs61754785 (MUS81) and rs7080536 (HABP2) in 7 and 9 index patients, and also in their family members; the last one gives an additional support for literature data as not involved in hereditary PTC and BC. Furthermore, the data generated in this study could be incorporated into the general knowledge of cancer genetics, allowing the development of prevention strategies, screening and genetic counseling in these families. FAPESP: 2014/03983-8

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:22:37Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:33:38Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-35349019691.pdf: 4144234 bytes, checksum: 9b86846640bd2e66375c65e289357bd0 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:22:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-10-24 Aicardi-Goutières syndrome (AGS) is a genetic encephalopathy whose clinical features mimic those of acquired in utero viral infection. AGS exhibits locus heterogeneity, with mutations identified in genes encoding the 3′→5′ exonuclease TREX1 and the three subunits of the RNASEH2 endonuclease complex. To define the molecular spectrum of AGS, we performed mutation screening in patients, from 127 pedigrees, with a clinical diagnosis of the disease. Biallelic mutations in TREX1, RNASEH2A, RNASEH2B, and RNASEH2C were observed in 31, 3, 47, and 18 families, respectively. In five families, we identified an RNASEH2A or RNASEH2B mutation on one allele only. In one child, the disease occurred because of a de novo heterozygous TREX1 mutation. In 22 families, no mutations were found. Null mutations were common in TREX1, although a specific missense mutation was observed frequently in patients from northern Europe. Almost all mutations in RNASEH2A, RNASEH2B, and RNASEH2C were missense. We identified an RNASEH2C founder mutation in 13 Pakistani families. We also collected clinical data from 123 mutation-positive patients. Two clinical presentations could be delineated: an early-onset neonatal form, highly reminiscent of congenital infection seen particularly with TREX1 mutations, and a later-onset presentation, sometimes occurring after several months of normal development and occasionally associated with remarkably preserved neurological function, most frequently due to RNASEH2B mutations. Mortality was correlated with genotype; 34.3% of patients with TREX1, RNASEH2A, and RNASEH2C mutations versus 8.0% RNASEH2B mutation-positive patients were known to have died (P = .001). Our analysis defines the phenotypic spectrum of AGS and suggests a coherent mutation-screening strategy in this heterogeneous disorder. Additionally, our data indicate that at least one further AGS-causing gene remains to be identified. © 2007 by The American Society of Human Genetics. All rights reserved. Leeds Institute of Molecular Medicine, Leeds DNA Laboratory Department of Clinical Genetics St. James's University Hospital, Leeds Cancer Research UK Mutation Detection Facility, Leeds Department of Paediatric Neurology Leeds General Infirmary, Leeds Department of Paediatric Neurology Erasme Hospital, Brussels Children's Hospital Queen Fabiola, Brussels Service de Neuropédiatrie Hôpital Trousseau Department of Paediatric Neurology Hôpital Trousseau Pediatric Neurology Department Hôpital Bicêtre Institut de Myologie Groupe Hospitalier Pitié-Salpêtrière Service de Virologie Hôpital Cochin-St. Vincent de Paul, Paris Department of Clinical Biochemistry Hospital Sant Joan de Déu-Ciberer, Barcelona Department of Barcelona Pediatric Neurology Hospital Sant Joan de Déu-Ciberer, Barcelona Department of Paediatrics St. Luke's Hospital, Guardamangia Department of Molecular and Human Genetics Baylor College of Medicine, Houston Serive de Neurologie Centre Hospitalier, Pau Department of Paediatrics Children's Hospital, Sheffield Developmental and Metabolic Neurology Branch National Institute of Neurological Disorders and Stroke National Institutes of Health, Bethesda Department of Human Genetics Rheinisch-Westfälische Technische Hochschule Aachen University, Aachen Unit of Molecular Medicine Bambino Gesù Children's Research Hospital, Rome Istituto di Ricerca e Cura a Carattere Scientifico (IRCCS) Casa Sollievo Della Sofferenza Mendel Institute, Rome Muscular and Neurodegenerative Disease Unit G. Gaslini Institute, Genova Department of Clinical Genetics Churchill Hospital, Oxford Division of Clinical Chemistry and Biochemistry University Children's Hospital, Zurich Clinical Genetics Unit Birmingham Women's Hospital, Birmingham Department of Paediatrics Sandwell and West Birmingham NHS Trust, Birmingham Neurology Department Birmingham Children's Hospital, Birmingham Department of Human Genetics Radboud University, Nijmegen Department of Pediatric Neurology Radboud University, Nijmegen Department of Paediatric Neurology Royal Children's Hospital, Brisbane, QLD Genetic Health Queensland Royal Children's Hospital, Brisbane, QLD Serviço de Aconselhamento Genético Universidade Estadual de São Paulo, Botucatu Academic Unit of Medical Genetics St. Mary's Hospital, Manchester Kinderkrankenhaus Auf der Bult, Hannover Department of Paediatrics Bradford National Health Service (NHS) Trust, Bradford Developmental Neurology Department Fondazione Istituto Neurologico C. Besta, Milan Grampian Clinical Genetics Centre, Aberdeen Department of Neonatology University Hospital, Ghent Department of Pediatrics University Hospital, Ghent Department of Clinical Genetics Maastricht University Hospital, Maastricht Department of Neurology Maastricht University Hospital, Maastricht Department of Paediatrics and Imaging Sciences Imperial College Great Ormond Street Hospital, London St. Mary's NHS Trust Great Ormond Street Hospital, London Department of Ophthalmology Great Ormond Street Hospital, London North East Thames Regional Genetics Service Great Ormond Street Hospital, London Evelina Children's Hospital Guy's and St. Thomas' NHS Trust, London Department of Paediatrics Université Laval Medical School, Québec Clinical Genetics Unit Hospital de Cruces, Baracaldo Service de Génétique Médicale Centre Hospitalier Universitaire Pellegrin Enfants, Bordeaux Unité de Neurologie de l'Enfant et de l'Adolescent Centre Hospitalier Universitaire Pellegrin Enfants, Bordeaux National Centre for Medical Genetics Our Lady's Hospital, Dublin Department of Paediatric Neurology Children's University Hospital, Dublin Department of Medical Genetics Rikshospitalet-Radiumhospitalet, Oslo Department of Paediatrics Rikshospitalet-Radiumhospitalet, Oslo Rikshospitalet-Radiumhospitalet, Oslo Department of Pediatrics Academic Medical Center, Amsterdam Department of Child Neurology Vrije Universiteit Medical Center, Amsterdam Medical Research Council Human Genetics Unit Western General Hospital, Edinburgh Department of Clinical Genetics Leiden University Medical Center, Leiden Division of Pediatric Neurology Oregon Health and Science University, Portland, OR Pediatric Neurology Klinikum Aschaffenburg, Aschaffenburg Department of Neurology Royal Children's Hospital, Parkville, Vic. Division of Clinical Genetics Department for Medical Genetics Medical University Innsbruck, Innsbruck Department of Pediatrics Division of Pediatric Neurology and Inborn Errors of Metabolism Children's Hospital Innsbruck, Innsbruck Klinik für Kinder und Jugendliche, Konstanz Paediatric Neurology University Hospitals of Gasthuisberg, Leuven Department of Child Neurology and Psychiatry IRCCS Casimiro Mondino Institute of Neurology, Pavia Department of Neurogenetics School of Medicine of Ribeirao Preto, Ribeirao Preto Greenwood Genetic Center, Greenwood, SC Raphael Recanati Genetic Institute Rabin Medical Center, Petach-Tikva Department of Paediatrics Crosshouse Hospital, Ayr Fraser of Allander Neurosciences Unit Royal Hospital for Sick Children, Glasgow Duncan Guthrie Institute of Medical Genetics Royal Hospital for Sick Children, Glasgow Division of Medical Genetics Montreal Children's Hospital, Montreal Department of Paediatric Neurology University Hospitals of Leicester NHS Trust, Leicester University Hospital of Aarhus, Aarhus Division of Pediatric Dermatology British Columbia's Children's Hospital, Vancouver, BC Institut de Pathologie et de Génétique, Gosselies Pediatric Neurology Department Guide Chauliac Hospital, Montpellier Servicio de Pediatría Hospital Universitario Doctor Peset, Valencia Genetic Institute Ha'Emek Medical Center, Afula Rappaport Faculty of Medicine Technion, Haifa Neuropediatrics Unit Complejo Hospitalario de Jean, Jean Department of Paediatrics Manor Hospital, Walsall Division of Neuropediatrics University Hospital, Freiburg Genetic Health Services Victoria Royal Children's Hospital, Vic. Service de Génétique Hôpital Debrousse, Lyon Lancashire Teaching Hospitals Trust, Preston Neonatal Intensive Care Unit Arcispedale Santa Maria Nuova, Reggio Emilia Center for Medical Genetics, Antwerp Department of Neurology Children's National Medical Center, Washington, DC Department of Neuropediatrics Humboldt University, Berlin Leeds Institute of Molecular Medicine St. James's University Hospital Wellcome Trust Brenner Building, Leeds LS9 7TF Serviço de Aconselhamento Genético Universidade Estadual de São Paulo, Botucatu

A doença de von Hippel-Lindau (VHL) é uma síndrome de câncer familial herdada de forma autossômica dominante que predispõe ao desenvolvimento de diversos tipos de neoplasias benignas e malignas. É causada por mutações germinativas e somáticas no gene VHL e tem uma incidência aproximada de um a cada 36.000 nascimentos. O gene VHL é um supressor tumoral e codifica a proteína VHL, a qual possui, entre outras funções, uma atividade ubiquitina-ligase, responsável pela poliubiquitinização e degradação proteassômica da subunidade alfa do fator induzido por hipóxia (HIF) na presença de oxigênio. As principais características da doença de VHL são: hemangioblastomas de sistema nervoso central (SNC), principalmente do cerebelo e medula espinhal; angiomas de retina e carcinoma renal de células claras. A probabilidade de desenvolver cada um desses tumores ao longo da vida é estimada em maior que 70%, podendo manifestar-se desde a infância até a fase adulta, principalmente entre a 2ª e 3ª décadas de vida. Classifica-se a doença de VHL conforme a ausência (tipo 1) ou presença de feocromocitoma (tipo 2). A doença do tipo 2 é causada, essencialmente, por mutações missense no gene VHL. As mutações podem ser grandes deleções (20%) ou pontuais (80%) do tipo missense, frameshift, nonsense ou em regiões de splicing. O teste genético é considerado padrão para o manejo clínico dos pacientes e dos familiares em risco, pois permite o diagnóstico e o tratamento precoce das neoplasias, melhorando assim a expectativa de vida. Técnicas de biologia molecular, como o seqüenciamento direto do DNA e o Southern blotting quantitativo, permitem a detecção de mutações germinativas em até 100% dos casos. Técnicas mais recentes, como o PCR quantitativo em tempo real e o MLPA, têm sido empregadas para uma detecção mais eficaz de grandes deleções no gene VHL. Os objetivos do presente estudo foram: (1) diagnosticar os pacientes com suspeita da doença de VHL; (2) identificar e caracterizar mutações germinativas pontuais no gene VHL nos pacientes e em seus parentes de 1º grau; (3) fornecer o aconselhamento genético pré e pós-teste. Dos 37 indivíduos com suspeita da doença de VHL, 14 pacientes de sete famílias diferentes preencheram os critérios diagnósticos. Um paciente apresentou hemangioblastoma cerebelar isolado e sete parentes de 1º grau estavam assintomáticos. Foram realizadas as técnicas de PCR, RFLP e seqüenciamento direto do DNA genômico e após clonagem. Foram identificadas quatro mutações pontuais na região codificadora do gene VHL em quatro famílias diferentes, sendo que duas delas haviam sido descritas na literatura [c.226_228delTTC (F76del), c.217C>T (Q73X)]. As outras duas mutações são descritas pela primeira vez neste estudo e afetam o sitio de splicing (IVS1-1 G>A, IVS2-1 G>C). É provável que as demais três famílias sejam portadoras de deleções germinativas no gene VHL. Em resumo, os resultados apresentados neste estudo ampliam o conhecimento da base molecular da doença de VHL e consiste na primeira pesquisa de pós-graduação produzida pelo ambulatório de aconselhamento genético do câncer do HCFMRP-USP. Von Hippel-Lindau disease (VHL) is an autosomal dominant hereditary cancer syndrome that predisposes to the development of a variety of benign and malignant tumors. VHL is caused by germline and somatic mutations in the VHL gene and it has an incidence of approximately one in 36,000 livebirths. The VHL gene is a tumor suppressor that is translated into the VHL protein, which has many functions, mainly an ubiquitin-ligase activity, responsible for the polyubiquitylation and proteasomal degradation of the alpha subunit of the hipoxia-inducible factor (HIF) in the presence of oxygen. The main clinical features of VHL are: CNS hemangioblastomas, especially of the cerebellum and spinal cord; retinal angiomas and clear-cell renal carcinomas. The lifetime probability of developing one of these tumors is estimated at more than 70%, whichever may present since childhood until adulthood, more often during the 2nd and 3rd decades. VHL is classified into type 1 (without pheochromocytoma) and type 2 (with pheochromocytoma), the latter being mainly caused by missense mutations. VHL germline mutations may be rearrangements and large deletions (~20%) or point mutations (~80%), such as missense, frameshift, nonsense or in the splicing sites. VHL gene testing is considered standard for the clinical manegement of patients and relatives at risk, whereby it provides early diagnosis and treatment of tumors, improving their life expectancies. Molecular biology techniques such as sequencing and quantitative Southern blotting may detect virtually 100% of VHL germline mutations. More recent methods, such as quantitative real-time PCR and MLPA, have been shown to detect VHL gene gross deletions efficiently. The objectives of this study were: (1) to diagnose patients with VHL clinically; (2) to detect germline point mutations in the VHL gene in the patients and their close relatives at risk; (3) to provide pre and post-testing genetic counseling. Fourteen out of 37 patients from seven unrelated families fulfilled the VHL clinical diagnostic criteria, one patient presented a single cerebellar hemangioblastoma and seven at-risk relatives were still asymptomatic. The methods included: PCR, RFLP, genomic DNA direct sequencing and after cloning. Four germline point mutations in the coding region of the VHL gene were identified, two of whom had been described in literature [c.226_228delTTC (p.F76del), c.217C>T (p.Q73X)]. The other two mutations had not been described so far and affect the splicing sites (IVS1-1 G>A, IVS2-1 G>C). The other three families may carry gross germline deletions in the VHL gene. In conclusion, the outcome presented in this study provides with a greater knowledge of molecular basis of VHL disease and relies on the first post-graduation research carried out at the HCFMRP-USP cancer genetic counseling service.

Rearranjos cromossômicos envolvendo a presença de cromossomos marcadores extranumerário são achados citogenéticos freqüentes em pacientes que apresentam deficiência mental, alterações de crescimento, dismorfias e/ou malformações. A presença desse material é responsável por trissomia ou tetrassomia parcial de determinadas regiões cromossômicas, causando quadros clínicos distintos e inespecíficos. A variabilidade fenotípica está relacionada principalmente com os diferentes graus de mosaicismo, os genes presentes na região adicional, o cromossomo de origem, entre outros fatores. Sendo assim, a caracterização desse material cromossômico é de importância fundamental para a determinação do prognóstico e do aconselhamento genético dos pacientes e suas famílias. O presente estudo teve como objetivo a análise de cromossomos marcadores extranumerários por meio de técnicas de citogenética convencional e molecular. Foram selecionados onze pacientes que são acompanhados pelo o Serviço de Genética Médica do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto USP, todos com diagnóstico citogenético convencional por bandeamentos GTG de cromossomo marcador extranumerário. Para determinação da origem e caracterização dos cromossomos marcadores foram aplicadas as técnicas de Cariótipo Espectral (SKY) e de Hibridação in situ Fluorescente (FISH). Em dez pacientes foi possível determinar a origem e composição dos marcadores. Dois pacientes apresentam cromossomos marcadores identificados como duplicações invertidas do cromossomo 15, com cariótipos definidos, respectivamente, como 47,XY,+idic(15)(pterq15::q15pter) e 47,XX,+idic(15)(pterq21::q21p11.2), um paciente possui cromossomo marcador derivativo do cromossomo 15, com cariótipo 47,XX,+der(15)(pterq21) e dois pacientes, sendo uma menina e seu pai, possuem cromossomos marcadores derivativos do cromossomo 15 com cariótipos, respectivamente, 48,XX,+2der(15)(pterq12) e 48,XY,+2der(15)(pterq12). Dois pacientes possuem cromossomos marcadores derivativos do cromossomo 9, com cariótipos definidos, respectivamente, como 47,XX,+der(9)(pterq21) e 47,XX,+der(9)(pterq32) e um paciente apresenta cromossomo derivativo do cromossomo 4 [47,XX,+der(4)(p16q21)[9]/48,XX,+der(4)(p16q21),+mar[91]]. Um paciente possui um cromossomo marcador translocado derivativo do cromossomo 22 [47,XY,+der(22)t(11;22)(q25:q11.2)] e outro paciente, um cromossomo translocado derivativo do cromossomo 15 [47,XY,+der(15)t(15;16)(q13;q13)], ambos herdados de mães portadoras de translocações aparente balanceadas. Em um caso, não foi possível a caracterização dos cromossomos marcadores por meio das técnicas aplicadas. Há uma grande variação fenotípica associada à presença de cromossomos marcadores e muitas vezes o prognóstico e o aconselhamento genético são difíceis de determinar. As técnicas de citogenética molecular são ferramentas importantes para a caracterização dos cromossomos marcadores, tanto durante o pré-natal, como para uma família que já possui um membro afetado, auxiliando no mapeamento gênico de cada região envolvida para futura correlação cariótipo-genótipo-fenótipo. Chromosomal rearrangements involving supernumerary marker chromosomes are frequently found in patients with mental retardation, growth defects and malformations. The genetic materials presented in trisomy/tetrasomy are responsible by distinct and unspecific clinical symptoms. The phenotypic variation is related mainly to different mosaicismo degrees, genetic content and chromosomal origin. Thus, the characterization of marker chromosomes is important to determine the prognosis and genetic counseling to the patients and their families. The aim of this study was to analyze supernumerary marker chromosomes using conventional and molecular cytogenetic techniques. Eleven patients were included in this study, all assisted in Medical Genetic Division of Clinical Hospital of School of Medicine of Ribeirao Preto USP. They all presented supernumerary marker chromosomes detected by GTG band. The origin and composition were determined using Spectral Karyotype (SKY) and Fluorescence in situ Hybridization (FISH) techniques. To ten patients, the origin and composition were determined. Two patients presented inverted duplications of chromosome 15, and their karyotype were defined as 47,XY,+idic(15)(pterq15::q15pter) and 47,XX,+idic(15)(pterq21::q21p11.2), one patient had a derivative chromosome 15, with karyotype 47,XX,+der(15)(pterq21), and two patients, a girl and her father, had two derivatives chromosomes 15, with karyotypes 48,XX,+2der(15)(pterq12) e 48,XY,+2der(15)(pterq12), respectively. Two patients presented derivative chromosomes 9 and their karyotype were defined as 47,XX,+der(9)(pterq21) and 47,XX,+der(9)(pterq32), and one patient had a derivative chromosome 4, with karyotype 47,XX,+der(4)(p16q21)[9]/48,XX,+der(4)(p16q21),+mar[91]. One patient had a translocated marker chromosome, derivative 22, [47,XY,+der(22)t(11;22)(q25:q11.2)] and another patient had a translocated marker chromosome, derivative 15 [47,XY,+der(15)t(15;16)(q13;q13)]. In one case, was not possible to define the origin and composition of the marker chromosome using SKY and FISH techniques. A large phenotypic variation is associated with supernumerary marker chromosomes and many times, the prognosis and genetic counseling is difficult to determine. The molecular cytogenetic techniques are important tools to its characterization, during prenatal diagnosis or to a family with an affected person, helping the genetic mapping of each region to a future correlation karyotype-genotype-phenotype.

A deficiência auditiva constitui uma importante categoria de defeitos congênitos que podem se manifestar isoladamente ou fazer parte do espectro fenotípico de várias síndromes. O presente trabalho refere-se ao estudo genéticoclínico de pacientes portadores de deficiência auditiva não sindrômica, com os objetivos de estabelecer a razão sexual, tipo, grau, simetria, lateralidade e progressão da deficiência auditiva; determinar diagnósticos etiológicos prováveis da deficiência auditiva, estabelecendo, quando possível, o padrão de herança genética e fornecer meios para o aconselhamento genético. Foram avaliados 306 pacientes no serviço de Genética Clínica do Centro de Atendimento aos Distúrbios da Audição, Linguagem e Visão do Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais-USP, no período de dezoito meses. Dos 306 pacientes avaliados, 278 eram portadores de deficiência auditiva, 27 portadores de distúrbio de linguagem e 1 portador de deficiência visual. De acordo com o critério estabelecido (presença de deficiência auditiva isolada), 144 pacientes foram selecionados para este estudo, através da história clínica, história familial, dados pré, peri e pós-natais e audiometria (dados de prontuário). A análise estatística não mostrou associação significativa entre a ocorrência de deficiência auditiva não sindrômica e o sexo dos propósitos. Dos 144 pacientes estudados, 95.8% dos casos tinham etiologia genética e 4.2% etiologia ambiental. Nos portadores de deficiência auditiva de etiologia genética, o padrão de herança indefinido (53.6%) foi o mais freqüente, seguido o de herança autossômica recessiva (23.9%) e autossômica dominante (22.5%); as anomalias maiores e menores associadas à deficiência auditiva não estavam relacionadas com esta deficiência. O tipo de perda auditiva predominante foi o neurossensorial (99.3%) e deficiência auditiva severa a profunda foi a mais freqüente (34.8%). Da amostra, 68.1% dos casos apresentaram perda auditiva pré-lingüística, 54.9% apresentaram perda auditiva assimétrica, 95.8% perda auditiva bilateral e 95.1% perda auditiva não progressiva. O estudo permitiu concluir que história clínica e familial são informações importantes no diagnóstico etiológico da deficiência auditiva; que as configurações da curva audiométrica são avaliações de apoio ao esclarecimento diagnóstico da deficiência auditiva; que o aconselhamento genético é dificultado nos casos com padrão de herança indefinido e que análises moleculares são dados subsidiários à definição etiológica da deficiência auditiva. Hearing loss constitutes an important category of congenital defects that can be expressed isolately or making part of the phenotypical spectrum of several syndromes. The aim of this study is to establish the sex-ratio, type, degree, symmetry, laterality, progression , and to find out the etiology of non syndromic hearing loss, establishing, when possible, the inheritance pattern providing ways to genetic couseling. During 18 months, 306 patients were evaluated at Centro de Atendimento aos Distúrbios da Audição, Linguagem e Visão of the Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais-USP. Nonsyndromic hearing loss was observed in 144 of them; syndromic hearing loss in 134; only speech impairment in 27, and only visual impairment in 1. According criteria only the 144 patients with nonsyndromic were selected for this study. There were 83 females (57.6%) and 61males (42.4%); genetic etiology was found in 95.8% of the sample and environmental etiology in 4.2%; major and minor associated anomalies were not related with hearing loss. Sensorineural hearing loss was found in 99.3% and severeprofound hearing loss was the most frequent (34.8%). Others results were: asymmetrical hearing loss in 54.9%, bilateral hearing loss in 95.8%, and non progressive in 95.1%. This study allow to conclude that the familial and clinical data were important to define etiological diagnosis; the shape of audiograms were evaluations that help to clarify, but not define, the diagnosis. Genetic counseling is difficult when the pattern of inheritance is unknown; and molecular studies are important subsidiary test to define the etiology of the hearing loss.

Introdução: As malformações congênitas (MCs) são a segunda causa de mortes fetais e infantis no Brasil e, em grande parte dos casos, a sua etiologia não é bem definida. Devido às consequências clínicas das MCs, alguns pacientes falecem sem tempo hábil para uma investigação etiológica acurada. Dessa forma, a maioria dos casos permanece sem uma confirmação molecular das suspeitas clínicas, dificultando o aconselhamento genético para as famílias. Objetivos: O presente trabalho utilizou técnicas citogenômicas para caracterizar molecularmente a presença de anormalidades no DNA, desde aneuploidias até a variação do número de cópias gênicas (CNVs) em diferentes tecidos de pacientes falecidos portadores de MC encaminhados ao Serviço de Verificação de Óbitos para avaliação anatomopatológica. Casuística e Métodos: Foram avaliadas amostras de 30 pacientes portadores de MC submetidos à necropsia. O DNA foi extraido de diferentes tecidos (cérebro, coração, fígado, pele e diafragma) previamente conservados em RNA later, formol ou emblocados em parafina. Foram utilizadas as técnicas de Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) com os kits P095, P064 e P070 (MRC-Holland®), Marcadores Microssatélites (MMS) com o kit MiniFiler (Life Technologies®), a Fluorescence in Situ Hybridization (FISH), a técnica de array (Infinium® CytoSNP-850K BeadChip - Illumina) e o Sequenciamento Bidirecional por Sanger. A interpretação dos resultados foi realizada utilizando os softwares GeneMarker, Coffalyser, BlueFuse Multi, Sequencher e com os bancos de dados Database of Genomic Variants (DGV - http://projects.tcag.ca/variation/), Database of Chromosomal Imbalance and Phenotype in Humans Using Ensembl Resources (DECIPHER - http://decipher.sanger.ac.uk/), UCSC Genome Bioinformatics (http://genome.ucsc.edu) e Mutation Taster. Resultados: Dos 30 pacientes avaliados, 13 apresentaram alterações patogênicas. Entre eles, oito apresentaram aneuploidias envolvendo os cromossomos 13, 18, 21, X e Y, sendo dois deles com mosaicismo intratecidual. Quatro pacientes apresentaram microdeleções ou microduplicações envolvendo diferentes genes, sendo um paciente com duplicação do gene TYMS em 18p11.32; um com deleção do gene CHL1 em 3p26.3; um com deleção para o gene HIC1 em 17p13.3 e um paciente com deleção do gene TOM1L2 em 17p11.2; um paciente apresentou mutação de base única, patogênica, g.8535C > G (c.746C > G) no éxon 7 do gene FGFR3 compatível com Displasia Tanatofórica tipo I. Por fim, dois pacientes com doenças do desenvolvimento sexual apresentaram resultados dos testes citogenômicos normais. Discussão: Sugere-se que todas as alterações encontradas estão relacionadas ao fenótipo clínico ou participam na via de sinalização de genes correlatos. As técnicas de MLPA e MMS mostraram viabilidade e eficiência para a detecção de alterações genômicas em tecidos de pacientes falecidos, contudo são dependentes da integridade e quantidade do DNA obtido. Conclusão: O estudo citogenômico post-mortem é importante para a elucidação diagnóstica de casos sem etiologia definida, para o aconselhamento genético familiar, para a caracterização de mosaicismo inter e intratecidual e para a compreensão da patogênese das MCs Introduction: Congenital malformations (CMs) are the second leading cause of fetal and infant deaths in Brazil and in most cases the etiology is not well defined. Also, the patients remain without a conclusive diagnostic making difficult the genetic counseling. Objectives: This study applied cytogenomics techniques in order to characterize the presence of DNA abnormalities, as well as, aneuploidies and genomic copy number variations (CNVs) in different tissues from deceased patients with CM from \"Serviço de Verificação de Óbitos\". Patients and Methods: We evaluated samples from 30 patients undergoing necropsy. The DNA was extracted from different tissues (brain, heart, liver, skin and diaphragm) stored in RNA later, formaldehyde and embedded in paraffin. We performed Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) with P095 kits, P064 and P070 (MRC-Holland®), microsatellite markers (MMS) with MiniFiler kit (Life Technologies), Fluorescence In Situ Hybridization (FISH), array technique (Infinium® CytoSNP-850K BeadChip - Illumina) and bidirectional sequencing by Sanger. The results was analyzed using different softwares: GeneMarker, Coffalyser, BlueFuse Multi Sequencher and databases Database of Genomic Variants (DGV - http://projects.tcag.ca/variation/) Database of Chromosomal Imbalance and Phenotype in Humans Using Ensembl Resources (Decipher - http://decipher.sanger.ac.uk/), UCSC Genome Bioinformatics (http://genome.ucsc.edu) and Mutation Taster. Results: The results showed 13 patients with pathogenic CNVs, and among them, eight presented aneuploidies involving chromosomes 13, 18, 21, X and Y. Two of them presented intra-tissue mosaicism. Also four patients showed several different microdeletions or microduplications: duplication of TYMS gene (18p11.32); deletion of CHL1 gene (3p26.3); deletion of HIC1 gene (17p13.3); deletion of TOM1L2 gene (17p11.2 ). One patient showed a pathogenic missense mutation of g.8535C>G (c.746C > G) in exon 7 from FGFR3 gene compatible with Thanatophoric Dysplasia type I. And two patients presented sexual development disorders and normal molecular results. Discussion: We conclude that the genomic abnormalities found in different tissues are pathogenic and associated to clinic manifestations in all patients studied. Besides, the cytogenomic techniques applied were efficient to help in the conclusive diagnostic; however, there are dependent of integrity and quality of DNA. Conclusion: Indeed the post-mortem cytogenomic study is crucial to genetic counseling, to characterize the presence of intra-tissue mosaicism and also to better understand the pathogenesis of congenital malformations

Introdução: A Síndrome de Patau, ou trissomia do 13, é um distúrbio autossômico. A principal causa dessa síndrome é a não disjunção do cromossomo 13 durante a primeira divisão meiótica e sua incidência é cerca de 1:20.000 a 25.000. Apresentação do caso: Paciente do sexo feminino,37 anos de idade, natural e procedente de Goiânia/Go,casada e dona de casa.G3P2A0C0 com 33 semanas e 2 dias de gestação.Admitida no hospital das Clínicas de Goiânia com quadro de sangramento vaginal em pequena quantidade e dor em baixo ventre há 2 horas.Negou comorbidades, tabagismo, etilismo e uso de drogas ilícitas. Discussão: A Síndrome de Patau está relacionada a várias malformações, sendo as principais do trato gastrointestinal, sistema nervoso central e cardiopatias. Certas anomalias ou malformações são incompatíveis com a vida, mas alguns casos de trissomia parcial do cromossomo 13 podem ter sobrevida mais longa. Portadores dessa anomalia costumam vir a óbito devido a complicações cardiorrespiratórias. A idade materna avançada é o principal fator de risco. O diagnóstico dessa síndrome pode ser feito por ultrassom obstétrico de qualidade. Conclusão: Logo, nota-se que é primordial que as mulheres realizem o pré-natal adequado. E caso apresentem os fatores de risco é importante o aconselhamento genético pré-natal e pré-concepcional para que a mulher e o feto tenham a assistência adequada.

Por conta da pandemia de COVID-19, diversas atividades de extensão universitária, muito relevantes por formar laços entre a universidade e a sociedade, precisaram ser adaptadas ao contexto remoto. As atividades do Serviço de Aconselhamento Genético da Universidade Estadual de Londrina – SAG-UEL também foram afetadas, entre elas uma iniciativa em que jovens em cumprimento de medidas socioeducativas visitam o espaço físico do programa de extensão. Este artigo busca explicitar como a palestra “Visitando o SAG-UEL” foi estruturada e adaptada ao contexto remoto, além de tratar dos impactos gerados ao incentivar esses jovens a enxergarem a universidade e a formação profissional como uma possibilidade viável e interessante. Para isso, foram apresentadas as atividades realizadas pelos colaboradores do SAG-UEL durante a graduação. Com a necessidade de adaptação à modalidade remota, foi formulado um roteiro de informações a serem abordadas, além do acréscimo de vídeos que mostram o prédio do projeto e fornecem outras informações pertinentes, o que tornou a apresentação e o envio de materiais produzidos pelo SAG-UEL aos participantes mais dinâmica. Como resultado, os colaboradores que apresentaram a palestra desenvolveram diversas habilidades pertinentes a sua formação profissional. Além disso, eles puderam conhecer os diferentes contextos sociais em que os adolescentes estavam inseridos, propiciando aos jovens mais acesso à universidade e aos programas oferecidos por ela. O trabalho serve também de modelo para que outras pessoas possam adaptar ações presenciais ao meio remoto, mantendo a integração entre a universidade e a comunidade durante o período pandêmico.

A síndrome de Li-Fraumeni (SLF) consiste em um distúrbio autossômico dominante, associado a mutações no gene da proteína tumoral p53. Apresenta uma maior expressão em mulheres jovens e está associada à ocorrência de determinados tipos de câncer, tais como sarcomas, leucemias, tumores cerebrais, câncer de mama e carcinomas adrenocorticais. Esta síndrome não apresenta quadro clínico ou fenótipo específico, suas manifestações clínicas estão em linha com o tipo de câncer apresentado e seu diagnóstico é baseado em critérios clínicos e confirmado por testes genéticos que analisam a mutação do gene p53. Dessa forma, a detecção precoce da mutação, a realização de testes de rastreamento e o aconselhamento genético podem ser capazes de alterar a história natural da doença e, consequentemente, reduzir a mortalidade associada aos principais tipos de neoplasias associadas à síndrome. Assim como no quadro clínico, não há tratamento específico para tal diagnóstico. A abordagem oncológica será, portanto, de acordo com o tipo de câncer que o paciente desenvolve. Pacientes com SLF parecem apresentar uma maior sensibilidade para desenvolver neoplasias induzidas por radiação, devendo-se então, avaliar individualmente indicações de alguns exames diagnósticos de imagem e propostas terapêuticas envolvendo radiação. Diante do contexto de novas perspectivas diagnósticas, de rastreio e seguimento trazemos aqui uma atualização sobre a SLF, ilustrada sob o panorama de um caso clínico norteador.

Introdução: Existe um grande número de hemoglobinas anormais, as quais compreendem um grupo de distúrbios hereditários que afetam os genes que codificam as cadeias globínicas alfa (α) e beta (β) da molécula de hemoglobina. Os portadores do traço falciforme são clínica e hematologicamente saudáveis, portanto aptos à doação de sangue. Objetivo: Avaliar a prevalência de traço falcemico em doadores de sangue na região Norte do Estado do Rio de Janeiro. Materiais e métodos: A metodologia empregada foi pesquisa com caráter exploratório de natureza retrospectiva baseada em informações do banco de dados do Hemocentro Regional de Campos dos Goytacazes/RJ, abrangendo o período de 2004 à 2020. Resultados: Foram avaliados um total de 167.215 amostras de ambos os sexos, onde 4.992 amostras foram positivas, representando 2,99% para o traço falciforme (HbS), o que comparado com dados publicados de pesquisas em outras regiões do Brasil no mesmo período, observa-se que obtivemos na presente pesquisa valores que chegam ao dobro do percentual encontrado nas demais regiões brasileiras. Os resultados demostram um número considerável de doadores portadores de traço falcêmico, o que também reflete como o traço falcêmico encontra-se presente na população brasileira, demonstrando a importância da atenção nos serviços de hemoterapia, para as unidades de hemocomponentes oriundos de doadores portadores de traço falcêmico, no intuito de promover a sua adequada utilização transfusional. Conclusão: Através da presente pesquisa foi possível estimar a incidência de traço falcêmico em 2,99% da população de doadores do Hemocentro Regional de Campos – RJ, o que reflete uma realidade da Região Norte Fluminense. Tais fatos demonstram a importância da triagem hematológica na doação sanguínea, e a necessidade de orientação aos portadores de traço da Hbs com aconselhamento genético visando reduzir o risco nascimento de crianças portadoras de doença falciforme, onde estima-se um elevado risco baseado na incidência de traço falcemico na população estudada.

Segundo dados da Organização Mundial da Saúde (OMS) 7,6 milhões de crianças nascem com alguma desordem genética a cada ano, dentre essas desordens destaca-se o Transtorno do Espectro Autista (TEA). Essa condição é definida como um conjunto de disfunções do neurodesenvolvimento que compromete as habilidades sociais, de comunicação e comportamentos, apresenta diferentes graus de comprometimento e pode estar associada a outros distúrbios. Estudos epidemiológicos demonstram que a prevalência do TEA cresce a cada ano, sendo mais comum no sexo masculino. É ainda considerado como um espectro multifatorial e heterogêneo, o que dificulta a identificação de sua etiologia em cada paciente em particular. Este cenário tem mudado substancialmente nas últimas décadas, devido ao desenvolvimento do conhecimento sobre os aspectos genéticos e moleculares do autismo, bem como o aperfeiçoamento de ferramentas biotecnológicas para o diagnóstico. Atualmente, alguns exames genéticos podem ser realizados para triagem da condição, como: PCR, cariótipo, CGH-arrays e sequenciamento, que juntamente com a história clínica do paciente contribuem para o desfecho do diagnóstico. Desta forma, este artigo traz um levantamento dos principais testes disponíveis para auxiliar no diagnóstico de crianças com suspeita de TEA, incluindo vantagens, desvantagens e sua influência na conduta terapêutica e aconselhamento genético, baseado em uma revisão da literatura.

Huntington's disease (HD) is a rare neurodegenerative disease with a multitude of symptoms, which requires access to specialized multidisciplinary care for adequate management. The aim of this study was to survey the characteristics of care in various HD centers in South America (SA). Methods A questionnaire was sent to 24 centers involved in the care for HD patients in SA. Results Of the total 24 centers, 19 (79.2%) are academic units. The majority of centers (62.5%) are general movement disorders clinics. Multidisciplinary care is available in 19 (79.2%) centers and in 20 (83.3%) care is provided free of charge. Genetic testing and counseling are available in 25 and 66.6% of centers, respectively. The majority of centers (83.3%) have no institutional support for end-stage care. Conclusions Although HD centers in SA are committed to providing multidisciplinary care, access to genetic counseling and end-stage care are lacking in most centers. A doença de Huntington (DH) é uma doença neurodegenerativa rara que requer tratamento multidisciplinar especializado para manejo adequado. O objetivo do presente trabalho foi pesquisar as características da assistência à saúde em centros de DH na América do Sul (AS). Métodos Um questionário foi enviado para 24 centros envolvidos no cuidado de pacientes com DH na AS. Resultados Dos 24 centros, 19 (79,2%) são unidades acadêmicas. A maioria (62,5%) são clínicas de distúrbios dos movimentos. Cuidado multidisciplinar é disponível em 19 (79,2%) dos centros e em 20 (83,3%), o tratamento é gratuito. O teste e o aconselhamento genético estão disponíveis em 25 e 66,6% dos centros, respectivamente. Não há suporte institucional para cuidado terminal em 83,3% dos centros. Conclusões Apesar dos centros de DH na AS terem compromisso com o provimento de cuidados multidisciplinares, o acesso a aconselhamento genético e a tratamento na fase terminal são falhos na maioria dos centros.

Síndrome de Angelman (SA) é um transtorno neurocognitivo caracterizado por retardo motor e intelectual grave, distúrbio de movimento ou equilíbrio, comportamentos anormais típicos e limitações graves na fala e na linguagem, hipotonia e epilepsia. A maioria é causada pela ausência da contribuição materna ou erros de impressão genômica em 15q11-q13. Translocações recíprocas são anormalidades cromossômicas comuns, com incidência de 1/500 a 1/625 nativivos. Cerca de 6% estão relacionadas ao fenótipo anormal, porém, devem ser sempre consideradas em termos de aconselhamento genético. Com o desenvolvimento de diversas metodologias moleculares, a citogenética clássica vem sendo cada vez menos utilizada no diagnóstico, direcionando a busca especificamente para a síndrome investigada. Aqui, apresentamos um caso de SA concomitante a uma translocação balanceada entre os cromossomos 8 e 19. Paciente, nascido a termo, mãe 37 anos e pai 36 anos, não consanguíneos. Relato de aborto de primeiro trimestre. Ao exame clínico: Pele e cabelos claros, dentes espaçados, agito de mãos, sorridente, inquieto, espasticidade nos membros inferiores. Citogenética a partir de sangue periférico estimulado por fito-hemaglutinina, bandeamento GTG e classificação segundo ISCN, 2016. Técnica FISH: Segundo protocolo padrão com sonda LPU05 (SNRPN/GABRB3). O bandeamento GTG revelou translocação equilibrada entre os cromossomas 8 e 19 (8q12 e 19q13). Cariótipo paterno normal e materno mostrou a mesma translocação do paciente. A técnica FISH identificou deleção em 15q11.2, confirmando o diagnóstico. Cariótipo: 46,XY,t(8; 19)(q12;q13)mat. ish del (15)(q11.2q11.2) (SNRPN/GABRB3x1). A técnica FISH foi fundamental para a confirmação diagnóstica. Entretanto, este caso, onde há alteração cromossômica familiar balanceada, não relacionada ao diagnóstico, fortalece a ideia de que a citogenética clássica (bandeamento GTG) deve ser ainda aplicada para todos os casos de malformações congênitas e/ou retardo mental, mesmo naqueles suspeitos de síndromes bem caracterizadas, acrescida pelo fato que as metodologias utilizando CGH-array não detectam anomalias estruturais balanceadas. Devemos considerar que, mesmo raros, a ocorrência de alteração balanceada familiar modifica os critérios de aconselhamento genético, tanto para a doença em questão, cujo o risco é desprezível, quanto para outras malformações ou abortos espontâneos, cujo risco é elevado associado a rearranjos balanceados familiares.

Neurofibromatose consiste em um conjunto de três entidades nosológicas distintas, a Neurofibromatose tipo 1 (NF 1), Neurofibromatose tipo 2 (NF 2) e Schwannomatose (SCH). Ambas possuem etiopatogenia genética autossômica dominante. a NF 1 especificamente atinge 1 a cada 2.500 a 3.000 em todas as raças, com potencial redução da sobrevida em 15 anos. Desenvolve-se a partir de mutações no cromossomo 17q11.2. As manifestações típicas da doença são, máculas de aspecto café com leite, neurofibromas dérmicos e plexiformes e sardas intertriginosas. Com respeito a terapêutica do tumor, não há drogas ou procedimentos capazes de prevenir ou reverter as lesões características da NF 1. Em contrapartida, é possível realizar aconselhamento genético e detecção precoce de possíveis complicações. O presente relato aborda e discute um caso atípico de NF1. Descritores: Nerurofibromatose tipo 1. Neurofibromatose tipo 2. Neurofibromas.

Introdução: Variações do número de cópias (CNV) no cromossoma X estão associadas a diversas doenças, nomeadamente perturbações no neurodesenvolvimento. Várias regiões suscetíveis de doença foram identificadas no cromossoma X, alguns já associados a síndromes genéticos conhecidos, outros carecem de identificação. Array comparative genomic hybridization (aCGH) é um método útil pra identificar CNVs patogénicos ou provavelmente patogénicos num grupo de doentes. O objetivo principal deste estudo é mostrar uma correlação entre o genótipo e o fenótipo em CNVs presentes no cromossoma X. Métodos: O estudo utilizou a base de dados de aCGH do Departamento de Genética da Faculdade de Medicina e os registos clínicos de dois hospitais. Doentes com CNVs patogénicos ou provavelmente patogénicos no cromossoma X foram incluídos no estudo. Bases de dados e literatura relacionada foram usados para uma melhor compreensão da corrleção genótipo-fenótipo. Resultados: De 2852 doentes estudados com recurso à técnica de aCGH, em 42 foram identificados CNVs clinicamente relevantes no cromossoma X: 47,62% foram classificados como provavelmente patogénico e 52,38% como patogénicos. Os 20 pacientes classificados como provavelmente patogénicos: 5% são referentes a material prenatal, enquanto 95% foi realizado no contexto pós-natal. Relativamente aos 22 CNVs patogénicos, 41% são relativos a casos pré-natais enquanto 59% são pós-natais. As regiões cromossómicas Xp22.31, Xp22.32 e Xq28 são as que mais frequentemente apresentam CNVs. As regiões Xp11.22, Xp11.3 e Xq11.2 também mostraram diversos CNVs relevantes. Conclusões: Com este estudo, contribuímos para uma melhor compreensão dos CNVs associados a patologia no cromossoma X, especialmente aqueles relacionados com perturbações do neurodesenvolvimento, permitindo um diagnóstico mais preciso, melhorando o aconselhamento genético, especialmente no diagnóstico pré-natal. Introduction: Copy number variants (CNVs) on X chromosome are associated with several human diseases, especially impairment of the neurodevelopment. Several disease susceptibility regions have been identified on X chromosome, some already associated with known genetic syndromes, nonetheless others remain to be clarified. Array comparative genomic hybridization (aCGH) is a useful method to access pathogenic or likely-pathogenic CNVs in a clinical population. The main goal of this study was to provide a genotype-phenotype correlation focused on CNVs present on the X chromosome. Methods: A cross-sectional study was performed using the aCGH database of the Genetic Department of the Faculty of Medicine and clinical records from hospitals database. Patients with pathogenic or likely pathogenic CNVs on chromosome X were included in the study. Databases and related literature were used for a better understanding of the genotypephenotype correlation. Results: From 2852 patients studied using aCGH, 42 presented clinically relevant CNVs on X chromosome: 47,62% were classified as likely pathogenic and 52,38% as pathogenic. Among the 20 likely pathogenic CNVs, 5% were identified in the prenatal context, while 95% were postnatal. Concerning to the 22 pathogenic CNVs, 41% were prenatal cases and 59% were postnatal cases. Chromosomal regions Xp22.31, Xp22.32 and Xq28 exhibited a higher incidence of CNVs. Frequently Xp11.22, Xp11.3 and Xq11.2 regions showed clinically relevant CNVs. Conclusions: We contributed for a better understanding of the disease-associated CNVs on the X chromosome, especially those related with neurodevelopment disorders, allowing a more accurate diagnosis, improving genetic counseling namely in prenatal diagnosis setting.

OBJECTIVE: To assess the knowledge of nurses involved in the care of oncology patients in a public university hospital, regarding breast cancer and hereditary breast cancer, and to verify the use of such knowledge in their daily practice.METHODS: This is a descriptive cross-sectional study. Data were obtained through a structured, self-administered questionnaire. Out of 154 nurses, 137 (88.9%) agreed to participate in the study. Two questionnaires were excluded such that 135 questionnaires were analyzed.RESULTS: The global percentage of correct answers was not associated with age (p=0.173) or degree/specialization (p=0.815). Questions were classified into categories. In categories involving knowledge of established breast cancer risk factors and indicators of hereditary breast cancer, the rate of correct answers was 65.8% and 66.4%, respectively. On the practice of genetic counseling, 40.7% of those interviewed were not sure about the definition of genetic counseling and 78.5% reported never having identified or referred a patient at genetic risk for specialized risk assessment. Practice of educational actions regarding this subject was reported by 48.5% of those interviewed.CONCLUSION: This study reinforces the need to develop qualifying actions for nurses, so that strategies to control breast cancer become effective in their health care practice. OBJETIVO: avaliar os conhecimentos de enfermeiros envolvidos nos cuidados de pacientes oncológicos em um hospital público universitário, em relação ao câncer de mama e ao câncer de mama hereditário e verificar o uso de tais conhecimentos em sua prática diária.MÉTODOS: este é um estudo transversal. Os dados foram obtidos por meio de um questionário estruturado autoaplicado. De um total de 154 enfermeiros convidados a participar do estudo, 137 (88,9%) concordaram. Dois questionários foram excluídos, totalizando 135 analisados.RESULTADOS: a porcentagem global de respostas corretas não estava associada à idade (p = 0,173) ou à formação/especialização (p = 0,815). As perguntas foram classificadas em categorias. Nas categorias que abrangiam conhecimentos relacionados aos fatores de risco estabelecidos para o câncer de mama e aos indicadores do câncer de mama hereditário, a taxa de respostas corretas foi de 65,8% e 66,4%, respectivamente. Em relação à prática de aconselhamento genético, 40,7% dos entrevistados não tinham certeza sobre a definição de aconselhamento genético, e 78,5% relataram nunca ter identificado ou encaminhado um paciente com risco genético para uma avaliação de riscos especializada. A prática de ações educativas em relação a esse tema foi relatada por 48,5% dos entrevistados.CONCLUSÃO: este estudo reforça a necessidade de desenvolver ações qualificadoras para enfermeiros de modo que as estratégias para o controle do câncer tornem-se eficientes em suas prática de cuidados de saúde. OBJETIVO: evaluar los conocimientos del personal de enfermería involucrado en el cuidado de los pacientes de oncología de un hospital universitario público, en relación con el cáncer de mama y el cáncer de mama hereditario, y verificar el uso de esos conocimientos en su práctica diaria.MÉTODOS: estudio descriptivo de corte transversal; los datos se obtuvieron mediante un cuestionario estructurado autoadministrado. De un total de 154 enfermeros/as, 137 (88,9%) aceptaron participar en el estudio. Se excluyeron dos cuestionarios, totalizando 135 cuestionarios analizados.RESULTADOS: el porcentaje global de respuestas correctas no se asoció con la edad (p=0,173) o título/especialización (p=0,815). Las preguntas fueron clasificadas en categorías. En las categorías que implican el conocimiento de los factores de riesgo establecidos del cáncer de mama y los indicadores del cáncer de mama hereditario, la tasa de respuestas correctas fue de 65,8% y 66,4%, respectivamente. En relación con la práctica del consejo genético, el 40,7% de los entrevistados/as no estaban seguros/as acerca de la definición de consejo genético y el 78,5% informó que nunca habían identificado o derivado a un paciente en situación de riesgo genético para una evaluación de riesgos especializada. La práctica de acciones educativas con respecto a este tema se reportó en el 48,5% de los entrevistados/as.CONCLUSIÓN: este estudio refuerza la necesidad de desarrollar acciones de calificación para el personal de enfermería, para que las estrategias de control del cáncer de mama sean efectivas en su práctica asistencial.

O estudo das hemoglobinopatias em Portugal permitiu estabelecer, há já duas décadas, a prevalência de portadores de beta talassémia e de drepanocitose nas diferentes regiões do país1. Ficou a saber-se que as mesmas distribuem-se essencialmente pelo centro e sul do país, apresentando tanto a beta-talassémia como a drepanocitose uma prevalência global de 1-2%. Contudo, existem regiões onde a prevalência pode atingir valores de 5 a 10% (ex. beta-talassémia no barlavento Algarvio, drepanocitose nas bacia dos rios Tejo e Sado e alguns concelhos da região de Lisboa onde existe um maior número de residentes de origem africana). Complementarmente, os estudos de genética molecular da beta-talassémia revelaram que existem quatro mutações mais frequentes2, as quais também predominam nos países da bacia do mediterrâneo. Contudo, face aos movimentos migratórios globais, ao diagnóstico e investigação contínuos, na nossa população também existem alterações clinicamente relevantes que, sendo relativamente raras em Portugal, são frequentes noutras regiões/países (p. ex. HBB: c.364G>C (HB D Punjab); HBB:c.364G>A (Hb O-Arab). Estes estudos, em conjunto com o aconselhamento genético, contribuem de forma continuada para a prevenção das referidas doenças hereditárias em Portugal, permitem alargar o rastreio hematológico e bioquímico a familiares dos casos índex, identificar portadores assintomáticos e principalmente detetar novos casais em risco de terem descendência afetada com qualquer uma das formas mais graves de hemoglobinopatias (drepanocitose, talassémia major e intermédia e talassodrepanocitose), para as quais está indicado/pode ser oferecido o diagnóstico pré-natal molecular. Dado serem doenças autossómicas recessivas, o risco de cada casal ter, em cada gravidez, descendência afetada é de 25%. Assim, conhecendo-se as alterações moleculares de cada elemento de cada casal, cumpre-se o objetivo primordial do Programa Nacional de Controlo das Hemoglobinopatias (ativo durante vários anos em Portugal), ou seja, pode atuar-se de forma a prevenir o surgimento de novos indivíduos com a doença em causa. A referida prevenção fundamenta-se no diagnóstico clínico junto das populações, no diagnóstico hemotológico e bioquímico, na investigação molecular, no estabelecimento de testes genéticos fiáreis e no aconselhamento genético, culminando estas atividades tanto na identificação da natureza da alteração como na identificação de portadores e de casais em risco. O diagnóstico molecular de hemoglobinopatias, atualmente tem por base a PCR (amplificação enzimática de DNA) através da pesquisa direta das mutações mais frequentes na população ou identificadas no caso índice ou na família, recorrendo por exemplo a ARMS, restrição enzimática ou através da sequenciação do gene HBB, complementadas quando aplicável, com a pesquisa de deleções mais ou menos extensas por GAP-PCR ou por MLPA. A identificação molecular da alteração patogénica no gene beta-globina, beta zero(β0) (se não há síntese de cadeias beta-globina), β+ (se ocorre uma redução significativa da síntese de cadeias beta-globina), ou a identificação de alterações que dão origem a cadeias globínicas funcionalmente anormais, constitui a ferramenta indispensável para disponibilizar o DPN a casais e famílias e, para que a prevenção em causa se torne efetiva. 1 – Martins MC et al (1993). J Med Genet 30:235-239. 2 – Faustino P et al (1992). Hum Genet 89:573-576.

O câncer de endométrio (CE) é o tipo de neoplasia mais comum do aparelho reprodutor feminino. Cerca de noventa por cento dos casos deste tipo de câncer são esporádicos e os dez por cento restantes estão associados a fatores genéticos. A Síndrome de Lynch (SL) é uma afecção genética de predisposição hereditária a câncer que é responsável por grande parcela dos casos de CE hereditários. Os tumores que se desenvolvem em portadores dessa síndrome são, geralmente, deficientes do sistema de reparo de pareamento incorreto de DNA (MMR) e esta característica molecular pode ser detectada por imuno-histoquímica (IHQ) das principais proteínas desse sistema de reparo (MLH1, MSH2, MSH6 e PMS2) ou pela análise de instabilidade de microssatélites (MSI). Adicionalmente, a análise de metilação no promotor do gene MLH1 é utilizada para identificar casos esporádicos de câncer de endométrio. A identificação de portadores da SL é crucial para o correto aconselhamento genético e seguimento dos indivíduos afetados e de suas respectivas famílias, tendo em vista que essa síndrome aumenta consideravelmente o risco de desenvolvimento de diversos outros tipos de câncer. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi caracterizar tumores de endométrio quanto à proficiência do sistema de reparo MMR em uma casuística brasileira não selecionada. Casos de adenocarcinoma endometrioide de endométrio foram caracterizados quanto à proficiência do sistema de reparo MMR e os dados moleculares obtidos foram correlacionados com características clínico-patológicas. Cento e vinte e sete casos de CE foram caracterizados quanto à proficiência do sistema MMR e foram distribuídos em três categorias: 17/127 (13,39%) tumores dMMR Metilados (deficientes do sistema de reparo MMR por serem negativos para a expressão da proteína MLH1, com presença de metilação no promotor do gene MLH1); 52/127 (40,94%) tumores dMMR Não-metilados (negativos para a expressão de uma ou mais das quatro proteínas avaliadas por imuno-histoquímica ou tumores exibindo instabilidade de microssatélites, com ausência de metilação no promotor do gene MLH1) e, por fim, 58/127 (45,67%) tumores pMMR (proficientes da atividade do sistema MMR por expressarem as quatro proteínas de reparo avaliadas e não apresentarem instabilidade de microssatélites). Das características clínico-patológicas avaliadas, a presença de invasão tumoral em região angiolinfática demostrou estar significativamente (p= 0,006 - Teste do Qui Quadrado) associada à deficiência do sistema de reparo MMR. Tumores de endométrio classificados como dMMR Metilado exibiram invasão angiolinfática com maior frequência do que tumores dMMR Não-metilados (p=0,002) e do que tumores pMMR (0,0129). Não foi observada diferença estatística (p=0,4759) entre os tumores dMMR Não-metilados e os pMMR. A perda de expressão da proteína MSH6 foi o evento mais frequente e tem sido pouco relatado na literatura. A análise de MSI identificou 11 tumores deficientes do sistema MMR que não foram detectados pela técnica de IHQ. A análise de mutações germinativas em genes associados à síndrome de Lynch é fortemente recomendada para as mulheres cujos tumores de endométrio foram caracterizados como sendo deficientes do sistema de reparo MMR. Endometrial cancer (EC) is the most common gynecologic malignancy in the world. About ninety percent of the cases of this type of cancer are sporadic and the remaining cases are associated with genetic factors. Lynch syndrome (LS) is a genetic disorder of hereditary predisposition to cancer that is responsible for a large portion of cases of hereditary CE. Tumors developed in LS carriers are generally deficient of the DNA mismatch repair system (MMR). This molecular feature can be detected by immunohistochemistry (IHC) of the main proteins of this repair system (MLH1, MSH2, MSH6 and PMS2) or by microsatellite instability analysis (MSI). In addition, methylation analysis in the promoter of the MLH1 gene is used to identify sporadic cases of endometrial cancer. The identification of LS carriers is crucial for the correct genetic counseling and follow up of the affected individuals and their respective relatives, since this syndrome increases the risk of development of several other types of cancer. Thus, the objective of this study was to characterize endometrial tumors for the proficiency of the MMR system in a Brazilian series of unselected EC. Cases of endometrioid adenocarcinoma of the endometrium were characterized for the proficiency of the MMR repair system and the molecular data were correlated with clinicopathologic characteristics. One hundred and twenty-seven EC cases were characterized for the MMR proficiency and were distributed into three categories: 17/127 (13.39%) Methylated dMMR tumors (MMR repair system deficient, since they were negative for the expression of the MLH1 protein in association with the presence of methylation in the MLH1 promoter); 52/127 (40.94%) Non-Methylated dMMR tumors (negative for the expression of one or more of the four proteins assessed by IHQ or tumors exhibiting microsatellite instability, with no methylation in the promoter of the MLH1 gene); and, finally, 58/127 (45.67%) pMMR tumors (MMR system proficient, since they expressed the four proteins evaluated and did not present microsatellite instability). Of the clinicopathologic characteristics evaluated, the presence of tumor invasion in the angiolymphatic region was shown to be significantly (p = 0.006 - Chi-square test) associated with the MMR repair system deficiency. EC classified as Methylated dMMR exhibited angiolymphatic invasion more frequently than the Non-Methylated dMMR tumors (p = 0.002) and more frequently than the tumors classified as pMMR (p=0.0129). No statistical difference (p=0.4759) was observed between the Non-Methylated dMMR and the pMMR endometrial tumors. Loss of MSH6 was the most frequent event and has been little reported in the literature. MSI analysis identified 11 tumors deficient for the MMR system that were not detected by the IHC technique. The analysis of germline mutations in genes associated with Lynch syndrome is strongly recommended for women whose endometrial tumors were characterized as being deficient in the MMR repair system.

Introdução: Anemia Falciforme está relacionada a uma alteração hereditária e genética que ocorre na hemoglobina S (HbS), que altera a morfologia das hemácias assumindo um formato de foice, reduzindo a velocidade da circulação sanguínea, ocasionando crises dolorosas, vaso oclusão e isquemia, além da hemólise precoce crônica. Objetivos: Descrever o perfil clínico, diagnósticos laboratoriais e tratamento da anemia falciforme. Metodologia: Trata-se de uma pesquisa de revisão integrativa da literatura. Como estratégia de busca, adotou-se a lógica baseada em descritores específicos e ao operador booleano (AND/OR) o qual desenvolvido nas bases de dados da SciELO e BVS. Resultados: Após as buscas, foram selecionados 11 artigos, demonstrando que no Brasil os exames realizados para identificar as alterações da HbS são análise da hemoglobina por cromatografia líquida de alta eficiência, eletroforese ou focalização isoelétrica. O perfil clínico- epidemiológico tem maior prevalência em indivíduos afrodescentes. Entretanto, embora a AF possua uma forte relação com a genética negroide a sua distribuição tem tendenciado a um atingir a população que possui 97% de miscigenação com a presença de síndromes vaso-oclusivas e anemia hemolítica crônica. Já o aconselhamento genético demonstrou ser uma medida de suma importância para vida dos indivíduos portadores da doença e do traço falciforme Conclusão: O estudo possibilitou verificar a importância do diagnóstico precoce por meio dos exames de triagem neonatal, os quais são importantes para nortear a conduta médica dos pacientes com a anemia falciforme e aumentar a sua sobrevida.

Introdução: A síndrome de QT longo é uma doença cardíaca, na maioria dos casos com uma hereditariedade autossómica dominante, caracterizada por prolongamento do intervalo QT no electrocardiograma e por um risco acrescido de síncope e de morte súbita. Até ao momento foram já identificados treze genes associados a esta patologia, tendo o seu estudo molecular uma rentabilidade de 75 a 80%. Métodos: Caracterização clínica e molecular de quinze casos com diagnóstico de síndrome de QT longo referenciados ao Serviço de Genética Médica do Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra para aconselhamento genético. Foi igualmente realizado o aconselhamento genético a 28 familiares em risco. Resultados: Foram identificadas mutações em 11 casos: uma mutação no gene KCNQ1 (6,67%); seis mutações no gene KCNH2 (40%); uma mutação no gene SCN5A (6,67%); e uma mutação no gene KCNE2 (6,67%). Em dois casos foram detectadas mutações em mais do que um gene (13,33%). Ocorreram mutações de novo em quatro casos (44,44%). Seis dos 12 familiares estudados, excluindo os progenitores, eram portadores das mutações previamente identificadas nos casos índex. Discussão e Conclusões: Os resultados obtidos estão de acordo com a literatura, exceptuando a menor percentagem de casos atribuídos ao gene KCNQ1 e a maior frequência de mutações de novo. Demonstrou-se a importância do estudo molecular nesta doença, quer para o seu diagnóstico, prognóstico e terapêutica, quer para o aconselhamento genético dos doentes e seus familiares. Palavras-chave: síndrome do QT longo; aconselhamento genético; gene KCNQ1; gene KCNH2; gene SCN5A; gene KCNE1; gene KCNE2 Introduction: The long QT syndrome is a cardiac disease with an autosomal dominant inheritance in most cases. It is characterized by a prolongation of the QT interval on the electrocardiogram and by the occurrence of syncope and sudden death. Thirteen genes have been identified in this pathology and the molecular analysis has a yield of 75-80%. Methods: Clinical and molecular characterization of fifteen cases with the diagnosis of long QT syndrome that have been referred to Medical Genetics Department of the Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra for genetic counseling. Genetic counseling was also performed in 28 at-risk family members. Results: Mutations were identified in 11 cases: one mutation in the KCQN1 gene (6,67%); six in the KCNH2 gene (40%); one in the SCN5A gene (6,67%); and one in the KCNE2 gene (6,67%). In two cases, mutations were detected in more than one gene (13,3%). De novo mutations were found in four cases (44,44%). Half of the relatives studied, not including the parents, were also carriers of the familial mutations. Discussion and Conclusion: The obtained results are consistent to those described in the literature, except for the lower proportion of cases with KCNQ1 mutations and the higher frequency of de novo mutations. This study showed the relevance of the molecular analysis in this disease, not only for the diagnosis, prognosis and therapy, but also for the genetic counseling of these families. Key-words: long QT syndrome; genetic counseling; KCNQ1 gene; KCNH2 gene; SCN5A gene; KCNE1 gene; KCNE2 gene

INTRODUÇÃO: A Doença de Fabry (DF) é uma doença lisossomal de herança ligada ao X, causada pela deficiência da enzima alfa-galactosidase A (alfa-Gal A), que leva ao acúmulo gradual de glicoesfingolipídeos, em especial a globotriaosilceramida, nos lisossomos do endotélio vascular de tecidos cardíaco, renal, cerebral, olhos e pele. Os principais sintomas iniciais são: dores neuropáticas de extremidades, hipoidrose, dores abdominais recorrentes, angioqueratomas e córnea verticillata. As complicações, que aparecem a partir da terceira década de vida, incluem morte prematura por insuficiência renal, cardíaca e alterações cerebrovasculares. Angioqueratomas são uma das manifestações mais precoces da DF. OBJETIVOS: detectar os portadores da DF a partir de casos de angioqueratoma diagnosticados através de exames anatomopatológicos de biópsia cutânea; descrever o quadro clínico dos afetados e portadoras heterozigotas; realizar aconselhamento genético. MÉTODOS: Uma revisão sistemática de biópsias de pele de 2003 a 2012 foi feita em quatro hospitais universitários. Os pacientes foram convocados para anamnese, exame físico e coleta de história familial. A dosagem enzimática de alfa-Gal A por papel filtro e em leucócitos em homens e a análise molecular por PCR e sequenciamento do gene GLA em homens e mulheres foram realizados naqueles com suspeita de DF. RESULTADOS: Foram localizados 125 registros de angioqueratomas, sendo possível convocar 52 pacientes. Destes, 45 (M:21 e F:24) compareceram para serem examinados. O diagnóstico de DF foi confirmado 3/45 (6,6%), todos do sexo masculino, pela baixa atividade enzimática da alfa-Gal A. A idade dos pacientes eram 16, 21 e 32 anos. Foram identificados outros 13 familiares (cinco homens e oito mulheres) destas 3 famílias. Os principais achados clínicos nos oito homens afetados foram: dores de extremidades (62,5%), angioqueratomas (87,5%), alterações renais (87,5%), cardíacas (12,5%) e presença de córnea verticillata(37,5%) Nas oito mulheres os achados clínicos foram: dores de extremidades (75%), angioqueratomas (12,5%), alterações renais (37,5%) cardíacas (12,5%) e presença de córnea verticillata(0%). A frequência desses achados mostrou-se semelhante à descrita na literatura. As mutações patogênicas no gene GLA, herdadas da mãe, foram identificadas nas 3 famílias e já haviam sido descritas anteriormente. CONCLUSÕES: A DF foi identificada em 3/45 pacientes (6,6%) pelos registros histopatológicos. Portanto, o angioqueratoma é um marcador útil para a detecção da doença. A dosagem enzimática de alfa-Gal A e/ou estudo molecular foram fundamentais para a confirmação diagnóstica da DF. Foi possível identificar outros 13 familiares afetados (5 homens, 8 mulheres), o que reforça a importância do aconselhamento genético. Todos os pacientes apresentavam outros achados clínicos da DF além dos angioqueratomas, os quais, no entanto, não haviam sido diagnosticados. O diagnóstico da DF ainda é tardio e há necessidade de reconhecimento dos médicos sobre as manifestações dessa doença para possibilitar um diagnóstico precoce INTRODUTION: Fabry disease (FD) is an X-linked lysosomal disorder, caused by the deficiency of the enzyme alfa-galactosidase A (alfa-Gal A), which leads to gradual accumulation of glycosphingolipids, especially globotriaosylceramide, in lysosomes of the vascular endothelium of the cardiac tissue, kidney, brain, eyes and skin. The main initial symptoms are: neuropathic pain in the extremities, hypohidrosis, recurrent abdominal pain, angiokeratomas and cornea verticillata. Complications, which appear from the third decade of life on, include premature death from renal, cardiac and cerebrovascular abnormalities. Angiokeratomas are one of the earliest manifestations of FD. OBJECTIVES: to identify relatives with FD from cases of angiokeratoma diagnosed by pathological examinations of skin biopsy; to describe the clinical features of the affected individuals and heterozygotes; to perform genetic counseling. METHODS: A systematic review of skin biopsies from 2003 to 2012 was done in four university hospitals. Patients were submitted to anamnesis, physical examination and family history collection. The enzymatic assay of alfa-Gal A using dried blood spot in filter paper and leukocytes in men and molecular analysis by PCR and sequencing of the GLA gene in men and women were performed in patients with suspected FD. RESULTS: We found 125 biopsy records of angiokeratomas, and were able to contact 52 patients. Of these, 45 (M: 21 and F: 24) were evaluated. The diagnosis of FD was confirmed in 3/45 (6.6%), all male, with low enzymatic activity of alfa-Gal A. The patients\' ages were 16, 21 and 32 years. We identified 13 other family members (five men and eight women) of these three families. The main clinical findings in the eight affected men were pain in the extremities (62,5%), angiokeratomas (87,5%), renal abnormalities (87,5%), cardiac abnormalities (12,5%) and cornea verticillata (37,5%). In the eight female patients the clinical findings were: pain in the extremities (75%), angiokeratomas (12,5%), renal abnormalities (37,5%) cardiac abnormalities (12,5%) and cornea verticillata (0%). The frequency of these findings was similar to that described in the literature. The pathogenic mutations in the GLA gene, maternally inherited, were identified in three families and had been described previously. CONCLUSIONS: FD was identified in 3/45 patients (6.6%) by histopathologic records. Therefore, angiokeratoma is a useful marker for the detection of disease. The enzymatic measurement of alfa-Gal A and / or molecular studies were essential to confirm the diagnosis of FD. It was possible to identify 13 other affected family members (5 men, 8 women), which reinforces the importance of genetic counseling. All patients, in addition to angiokeratomas, had other clinical manifestations of FD; however these had not been diagnosed before. The diagnosis of FD is still late and doctors need to be aware of the manifestations of this disease to enable early diagnosis

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:30:44Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:32:59Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-84884226340.pdf: 250988 bytes, checksum: 8b9f2a6be971109ac60c79125f145acd (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:30:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-23 Williams-Beuren syndrome (WBS) is a genetic disorder characterized by physical and intellectual developmental delay, associated with congenital heart disease and facial dysmorphism. WBS is caused by a microdeletion on chromosome 7 (7q11.23), which encompasses the elastin (ELN) gene and about 27 other genes. The gold standard for WBS laboratory diagnosis is FISH (fluorescence in situ hybridization), which is very costly. As a possible alternative, we investigated the accuracy of three clinical diagnostic scoring systems in 250 patients with WBS diagnosed by FISH. We concluded that all three systems could be used for the clinical diagnosis of WBS, but they all gave a low percentage of false-positive (6.0-9.2%) and false-negative (0.8-4.0%) results. Therefore, their use should be associated with FISH testing. © FUNPEC-RP. Serviço de Aconselhamento Genético Departamento de Genética Instituto de Biociências de Botucatu, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP Centro Nacional de Genética Médica Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud, Buenos Aires Departamento de Saúde Pública Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP Serviço de Aconselhamento Genético Departamento de Genética Instituto de Biociências de Botucatu, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP Departamento de Saúde Pública Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP

Introdução: O câncer de mama é tumor maligno mais incidente nas mulheres brasileiras, sendo considerado um dos maiores problemas de saúde pública do Brasil. Além dos fatores de risco relacionados à idade, a fatores hormonais e a fatores reprodutivos, já bem estabelecidos na literatura, fatores genéticos também estão associados ao maior risco de desenvolvimento do câncer de mama. O profissional enfermeiro tem um papel de educador em saúde e deve estar qualificado para realizar ações preventivas na detecção precoce do câncer de mama, sendo muito importante o domínio do conhecimento sobre o assunto. Objetivos: (a) avaliar o conhecimento dos enfermeiros envolvidos na assistência a pacientes oncológicos acerca dos temas câncer de mama e câncer hereditário da mama, (b) avaliar o conhecimento dos enfermeiros quanto ao processo do aconselhamento genético, (c) identificar se os mesmos desenvolvem ações preventivas nesse âmbito e (d) se o reconhecimento de fatores de riscos genéticos está incluído nestas ações. Metodologia: Foi realizado um estudo descritivo transversal com enfermeiros envolvidos no cuidado de pacientes oncológicos a partir do preenchimento de um questionário auto-respondido com perguntas referentes ao tema. O período da coleta de dados foi de março a setembro de 2013 no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Participaram do estudo 137 enfermeiros atuantes em unidades de internação clínica e cirúrgica, radioterapia, quimioterapia e das unidades do ambulatório, envolvidos no cuidado de pacientes oncológicos adultos. Resultados: A média global de acertos na área do conhecimento em câncer de mama e câncer de mama hereditário foi de 70,03% e 70,64% respectivamente. Enfermeiros com mais anos de formado apresentaram menor conhecimento em relação aos temas abordados. Quanto ao conhecimento em câncer de mama, 65,79% dos entrevistados conhecem aos fatores de risco mas apenas 2,2% estão familiarizados com as diretrizes do Ministério da Saúde em relação à periodicidade e faixa etária do rastreamento mamográfico. A prática de ações educativas neste tema foi relatada por 48,5% dos participantes. Em relação ao conhecimento sobre câncer de mama hereditário, 80,6% referiu abordar na anamnese dados relevantes da história familiar, porém 40,7% não tem conhecimento sobre aconselhamento genético e 78,5% nunca orientou paciente ou familiar para buscar esse tipo de avaliação mais especializada. Conclusão: Os resultados produzidos demonstram a importância de definir estratégias de capacitação dos profissionais enfermeiros frente aos temas abordados para que exerçam seus papéis de educadores e cuidadores em saúde no desenvolvimento de ações pertinentes a prevenção e detecção precoce do câncer de mama em sua prática assistencial. Introduction: The breast cancer is a malignant tumor that is more incident in Brazilian women, being considered one of the major public health problems in Brazil. Besides the risk factor related to age, there are hormonal factors and reproductive factors that are well established in literature, genetic factors are also associated to a great risk of breast cancer evolution. The Professional nurse has a role as a health educator. Due to that, this professional must be qualified to carry out preventive actions in early detection of breast cancer, so it is important the knowledge about the subject. Purpose: (a) to evaluate the nurse’s knowledge envolving the assistance to oncological pacients about the subjects breast cancer and hereditary breast cancer, (b) to evaluate the nurse’s knowledge about the genetic advice process, (c) to identify if they develop preventive actions in this scope and (d) if the recognition of the genetic risk factors is included in this actions. Methodology: A cross-sectional and descriptive study has been realized with nurses involved in oncological pacients care from the filling of a questionnare with closed questions about the subject. The data collection period was from March to September 2013 at “Hospital de Clínicas de Porto Alegre”. A hundred-thirty-seven nurses active in clinic and surgery admissions unit, radiotherapy, chemotherapy and from ambulatory units, involved in adults oncological pacients care participated in the study. Results: the global average of hits in breast cancer and hereditary breast cancer knowledg area was 70,03% and 70,64% respectively. Nurses with more years of graduation have presented less knowledge in relation to the addressed subjects. As for breast cancer knowledge, 65,79% from the interviewed know the risk factors but only 2,2% are familiar with the guidelines of Ministry of Health in relation to the periodicity and age-group of the mammographic tracking. The practice of educational actions in this subject was reported by 48,5% of the participants. In relation to the knowledge about the hereditary breast cancer, 80,6% referred to approach in the anamenesis relevants data of the familiar history, however 40,7% do not have the knowledge about genetic advice and 78,5% has never oriented pacient or a member of the family to seek this kind of evaluation more specialized. Conclusion: The produced results show the importance of defining empowerment strategy of the professional nurses toward the approached subjects for them to play their roles as health educators and carers in the development of relevant actionsin prevention and early detection of breast cancer in their assistantial practice.

Cerca de 10% dos casos de câncer de mama e/ou ovário são caracterizados como hereditários, onde a presença de mutações germinativas no gene de suscetibilidade BRCA1 aumenta o risco de desenvolver esses cânceres durante a vida da mulher. O BRCA1 é um gene supressor tumoral envolvido na resposta de danos ao DNA, controle do ciclo celular, na remodelação da cromatina, ubiquitinação e regulação da transcrição. O presente estudo tem como objetivo central caracterizar as mutações do gene BRCA1 associadas a Síndrome Hereditária do Câncer de Mama e/ou Ovário (HBOC) em pacientes atendidos no Serviço de Aconselhamento Genético do Câncer do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (HCFMRP/USP). Os vinte e dois éxons codificantes do BRCA1 foram analisados utilizando o método de High Resolution Melting (HRM) para triagem de mutações pontuais, seguido pelo sequenciamento de DNA dos casos selecionados para validação. A técnica de MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification) também foi usada para detectar grandes deleções e duplicações. Uma vez confirmada a mutação, membros da família considerados de alto risco, serão investigados para a mutação específica, a fim de proporcionar-lhes um aconselhamento genético apropriado para a detecção precoce do câncer. No presente estudo, foram investigados 41 pacientes que preencheram os critérios para o teste genético de acordo com NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology v.1.2010. Um total de 21 mutações foram identificadas, duas das quais são patogênicas: a deleção dos éxons 17-18 e a deleção dos éxon 19. Ambas estão localizadas no domínio BRCT do gene BRCA1, essencial para a ligação de fosfoproteínas críticas para a ativação do complexo de reparo do DNA. Outra mutação, a S616del, foi tratada como patogênica, mas apresenta informações controversas em diferentes estudos. O trabalho também identificou uma nova mutação, Val1117Ile. Um estudo de haplótipos das mutações identificadas nos pacientes foi realizado e revelou que um dos haplótipos, denominado de 6, contendo quatro resíduos mutados (871Leu, 1038Gly, 1183Arg e 1613Gly) estava presente em 50% das pacientes. O estudo de associação com 82 indivíduos saudáveis, mostrou diferença significativa (p=0,026) nos pacientes, sugerindo assim um risco aumentado de HBOC. Adicionalmente, foi analisada a mutação germinativa R337H no gene p53 para os casos suspeitos de Síndrome de Li-Fraumeni. Em síntese, o presente estudo contribui com a identificação de uma nova mutação não-sinônina no gene BRCA1 e sugere que o haplótipo 871Leu-1038Gly-1183Arg-1613Gly possa conferir risco aumentado do câncer de mama e/ou ovário em pacientes diagnosticados com HBOC. About 10% of cases of breast and/or ovary cancer are characterized as hereditary, where the presence of germline mutations in susceptibility BRCA1 gene increases the risk of developing these cancers during womans lifetime. BRCA1 is a tumor suppressor gene involved in DNA damage response, cell cycle control, chromatin remodeling, ubiquitination and transcriptional regulation. The present study aims to characterize BRCA1 gene mutations associated with Hereditary Breast/Ovary Cancer Syndrome (HBOC) in patients from the Cancer Genetic Counseling Service of the General Hospital of the Medical School of Ribeirão Preto, University of São Paulo (HCFMRP-USP). The twenty two coding exons of BRCA1 were analyzed using High Resolution Melting (HRM) method for the screening of point mutations, followed by DNA sequencing of the cases selected to validation. MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification) technique was also used to detect gross deletions and duplications. Once confirmed the mutation, family members most at risk will be analyzed for the specific mutation in order to provide them with an appropriate genetic counseling for early detection of cancer. In the present study, we investigated 41 patients that fulfilled the criteria for genetic testing according to NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology v.1.2010. A total of 21 mutations were identified, two of them are pathogenic: a deletion of exons 17-18 and a deletion of exon 19. Both of them are located in the BRCT domain of BRCA1 gene, impairing the binding of essential phosphoproteins critical to the activation of DNA repair complex. Another mutation, S616del, shows controversial information about its pathogenesis in different studies.The present study also describes a new mutation, Val1117Ile. A study of haplotypes of the mutations identified in patients was performed and revealed that one of the haplotypes, called 6, containing four mutated residues (871Leu, 1038Gly, and 1183Arg 1613Gly) was present in 50% of patients. The association study with 82 healthy subjects showed a significant difference (p = 0.026) in patients, thus suggesting an increased risk for HBOC. Additionally, the germline mutation R337H on p53 gene was also analyzed in the present study for suspected cases of Li-Fraumeni Syndrome. In summary, this study contributes to the identification of a new missense mutation in the BRCA1 gene and suggests that the haplotype-871Leu-1038Gly 1183Arg-1613Gly may confer increased risk of breast cancer and / or ovarian cancer in patients diagnosed with HBOC.

A Fenilcetonúria Clássica é causada pela deficiência da enzima hepática fenilalaninahidroxilase. Se não diagnosticada e tratada precocemente, causa retardo mental. O objetivo deste estudo foi identificar indivíduos submetidos à triagem neonatal no Rio Grande do Sul entre 1986 e 2003, com teste positivo para hiperfenilalaninemia, estimar a prevalência de hiperfenilalaninemias, verificar níveis de controle e correlacionar os anos de realização do teste, início do tratamento, evolução e quadro clínico. Métodos: Casos de hiperfenilalaninemia foram identificados nos laboratórios e clínicas de tratamento. Foi aplicado questionário, contendo variáveis demográficas e sobre a patologia, o desenvolvimento infantil, a escolaridade, o aconselhamento genético e o rastreamento neonatal. Foram avaliados pacientes entre 6 meses e 16 anos de idade. Na análise estatística, utilizou-se o teste do qui quadrado e ANOVA para avaliar a associação entre ano do diagnóstico e controle de fenilalanina e regressão logística para avaliar o efeito conjunto de idade do diagnóstico e controle de fenilalanina sobre o atraso no desenvolvimento. Resultados: De 1986 a 2003, 418 crianças apresentaram teste positivo para fenilalanina. Destes, 351 (84,0%) apresentaram resultados normais na segunda amostra, 58 (13,9%) foram considerados portadores de hiperfenilalaninemia e 9 (2,1%) tiveram o seguimento perdido. A cobertura do programa foi de 50%. Sobre o aconselhamento genético, 39 entrevistados (72,2%) responderam não saber, não lembrar ou deram respostas incorretas. Conclusão: Não se observou tendência histórica do diagnóstico ter se tornado mais precoce ou do controle laboratorial ter se tornado melhor. O controle bioquímico da fenilalanina não dependeu da precocidade do diagnóstico e sim, da idade dos pacientes. Classical phenylketonuria is caused by deficiency of the hepatic enzyme phenylalanine hydroxylase. If not diagnosed and treated early, it causes mental retardation. The aim of this study was to identify patients who underwent neonatal screening in Rio Grande do Sul between 1986 and 2003 and tested positive for hyperphenylalaninemia, to estimate the prevalence of hyperphenyl-alaninaemias, to check the levels of control, and to correlate the years of testing, initiation of treatment, evolution and clinical picture. Methods: Cases of hyperphenylalaninemia were identified in laboratories and treatment clinics. A questionnaire was administered containing demographic variables and about the pathology, child development, education, genetic counseling and neonatal screening. We evaluated patients between 6 months and 16 years of age. The statistical analysis used the chi-square test and ANOVA to assess the association between year of diagnosis and control of phenylalanine and logistic regression to assess the combined effect of age at diagnosis and control of phenylalanine on the developmental delay. Results: From 1986 to 2003, 418 children tested positive for phenylalanine. Of these, 351 (84.0%) had normal results in the second sample, 58 (13.9%) were considered with hyperphenylalaninemia, and 9 (2.1%) were lost for follow-up . The coverage of the program was 50%. Concerning genetic counseling, 39 respondents (72.2%) reported not knowing, not remembering or gave incorrect answers. Conclusion: There was no historical trend of diagnosis having become earlier or of laboratory control having improved. The biochemical control of phenylalanine was dependent on patient age rather than on early diagnosis.

Este trabalho teve o objetivo de estimar a frequência de deficiência mental causada por mutações no cromossomo X entre pacientes do sexo masculino, que constituem casos isolados de deficiência mental. A estratégia adotada foi a determinação do padrão de inativação do cromossomo X nas mães dos afetados, com base (a) nas indicações de que desvios extremos do padrão casual de inativação do cromossomo X têm alta probabilidade de estar relacionados à presença de mutações do cromossomo X e (b) na observação de que a frequência desses desvios está significantemente aumentada em mulheres certamente portadoras de mutações que causam deficiência mental de herança ligada ao X. A vantagem seletiva das células que possuem o alelo não mutado no cromossomo X ativo é uma explicação para tais desvios extremos da inativação do cromossomo X, raramente encontrados na população geral. Selecionamos 115 meninos portadores de deficiência mental moderada a grave associada a outros sinais clínicos, não característicos de síndrome conhecida e que tinham cariótipos normais e teste negativo para a síndrome do cromossomo X frágil; suas genitoras concordaram com a participação no estudo. Esses pacientes foram encaminhados ao Serviço de Aconselhamento Genético do Laboratório de Genética Humana, Departamento de Genética e Biologia Evolutiva, por diferentes serviços médicos, para diagnóstico e orientação quanto a riscos de recorrência na família. O padrão de inativação do cromossomo X nas mães dos afetados foi investigado, com base na metilação diferencial dos alelos do gene AR (Androgen Receptor gene) , no cromossomo X ativo e inativo. As mães de 100 desses meninos se revelaram heterozigóticas quanto à repetição polimórfica CAG do gene AR, requisito do teste para determinar o padrão de inativação do cromossomo X. Onze mulheres (11%) apresentaram desvios extremos do padrão de inativação do X (≥ 98:2), frequência significativamente maior (P = 0.0001; teste exato de Fisher) do que aquela que a literatura registra, em estudo utilizando o mesmo ensaio, entre mulheres adultas da população geral (0,017; IC 95% = 0,007 0,034). A raridade de desvios tão extremos na população geral permite admitir que as mães dos afetados que apresentam tais desvios sejam portadoras de mutação no cromossomo X, que causa a deficiência mental em seus filhos. Sendo assim, estimamos em 11% a frequência de deficiência mental em nossa amostra de 100 meninos casos isolados de deficiência mental (IC 95% = 0,056 0,188), sem incluir a síndrome do X frágil, responsável por 2,5% a 3% da deficiência mental no sexo masculino. Essa nossa estimativa para a proporção de deficiência mental moderada grave ligada ao X entre indivíduos do sexo masculino com DM é da mesma ordem de grandeza daquelas relatadas na literatura, baseadas (a) na frequência da síndrome do X frágil em coortes de homens com deficiência mental e entre famílias com deficiência mental de herança ligada ao X ou (b) nas inferências da prevalência de deficiência mental e de deficiência mental causada por mutações no cromossomo X na população geral masculina. Entretanto, a frequência por nós determinada deve ser uma subestimativa, considerando que os desvios extremos do padrão de inativação ocorrem em apenas um terço das portadoras obrigatórias de mutações que causam deficiência mental com herança ligada ao X. Com base nos resultados deste estudo, consideramos indicada a avaliação do padrão de inativação do cromossomo X em mães de indivíduos do sexo masculino, casos isolados de deficiência mental. A detecção de desvio extremo da inativação deve ser considerada indicativa de deficiência mental de herança ligada ao X, constituindo subsídio para o aconselhamento genético da família e podendo levar á identificação da mutação causadora da deficiência mental. Nearly a third of obligate carriers of mutations causative of X-linked mental retardation (XLMR) have been reported to have extreme X-inactivation skewing in peripheral blood cells, compared to their non-carrier relatives. Selective advantage of cells with the non-mutated allele on the active X chromosome would explain this skewing. Based on these findings, we used the pattern of X-inactivation in mothers of mentally retarded boys, as a parameter to evaluate the frequency of XLMR among non-familial cases. To determine the X-inactivation pattern in these women, we investigated the methylation status of the AR (Androgen Receptor) alleles in blood cells. We selected 115 boys with moderate to severe mental retardation of unknown cause, who had normal karyotypes and tested negative for fragile X syndrome; the mothers of 100 of these boys were found to be heterozygous for the polymorphic CAG repeat of the AR gene, a requisite of the X-inactivation assay. Eleven women (11%) had extremely skewed X-inactivation (≥ 98:2), a frequency significantly higher (P = 0.0001; Fisher exact test) than the frequency reported for adult women from the general population (1.7%; 95% CI = 0.007 0,034). Assuming that every mother with extremely skewed X-inactivation is a carrier of an X-chromosome mutation that causes mental retardation in her son, the frequency of XLMR in our sample of 100 boys is 11% (95% CI = 0,056 0,188), the fragile X syndrome being excluded. Although these figures are quite in agreement with previous estimations of the frequency of XLMR among mentally retarded men, they might be an underestimation, when it is taken into account that only about a third of obligate carriers of XLMR mutations have highly skewed X inactivation.

Mucopolissacaridose tipo VI é uma doença lisossômica causada pela deficiência de arilsulfatase B. A incidência de MPS VI é muito baixa, geralmente menos de 1 caso para cada 1.000.000 recém-nascidos. Até o presente momento, 133 mutações e 13 polimorfismos foram identificados no gene da arilsulfatase B. Entretanto, a maioria dos alelos mutantes ou está presente somente em um indivíduo ou em poucos pacientes, o que demonstra a grande heterogeneidade alélica da MPS VI. No município de Monte Santo, Nordeste do Brasil, foram identificados treze pacientes com MPS VI. O objetivo deste trabalho foi identificar a(s) mutação(ões) presente(s) nos pacientes com MPS VI de Monte Santo/BA e os heterozigotos nas famílias; definir haplótipos utilizando SNPs para identificação de uma possível origem comum do alelo mutado nesta população e permitir aconselhamento genético eficiente, bem como orientações sobre a doença aos familiares com indivíduos afetados. Os 13 pacientes com MPS VI apresentavam a mutação p.H178L em homozigose e o mesmo haplótipo para os SNPs intragênicos. Nas viagens realizadas até o município durante este trabalho foram coletadas 236 amostras de sangue dos familiares, a mutação p.H178L foi detectada em 98 (20,8%) alelos, sendo 41,5% da amostra composta por indivíduos heterozigotos. Com base em dados atuais, a prevalência de MPS VI nesta região é estimada em 1:5.000 recémnascidos. As análises dos heredogramas indicam a presença de vários indivíduos com chance de 25% ou até 50% de serem heterozigotos. Monte Santo é uma região pequena e isolada e, os altos índices de endogamia fazem com que o alelo p.H178L permaneça frequente nesta região. Estes resultados, juntamente com a análise dos heredogramas, sugerem um efeito fundador, o que reforça a necessidade de um programa abrangente de genética comunitária para esta área, incluindo uma triagem neonatal e estudos com os membros das famílias para promover um aconselhamento genético. Mucopolysaccharidosis type VI is a lysosomal disease caused by deficiency of arylsulfatase B. The incidence of MPS VI is very low, usually less than 1 case for every 1,000,000 newborns. To date, 133 mutations and 13 polymorphisms were identified in the arylsulfatase B gene. However, the majority of mutant alleles are present only in one individual or in a few patients, demonstrating the allelic heterogeneity of MPS VI. In the county of Monte Santo, northeast Brazil, thirteen patients with MPS VI were identified. The objective of this study was to characterize the mutation(s) present(s) in MPS VI patients from Monte Santo/BA and to detect heterozygous within the families. We also aimed to define haplotypes using SNPs to identify a possible common origin of the mutant allele in this population and allow efficient genetic counseling and assistance regarding the disease to families with affected individuals. The 13 MPS VI patients showed the p.H178L mutation in homozygosis and the same haplotype for intragenic SNPs. During field trips to Monte Santo along this study we collected 236 blood samples from family members, p.H178L mutation was detected in 98 (20.8%) alleles, and 41.5% of the samples were heterozygous individuals. Based on current data, the prevalence of MPS VI in this region is estimated at 1:5,000 newborns. Pedigree analysis indicates the presence of many individuals with a 50% and 25% chance of being heterozygous. Monte Santo is a small, isolated region and the high levels of inbreeding allows for p.H178L allele to remain common in this region. These results, together with the analysis of pedigrees suggest a founder effect, which reinforces the need for a comprehensive program of community genetics in this area, including a neonatal screening and studies of family members to promote a genetic counseling.

Background: Hereditary diseases are family diseases transmitted through a biological lineage. In psycho-social terms, these diseases are lived as transgenerational processes. Therefore, it is relevant to use an intergenerational perspective to access the family experience with the disease. Older family members have been dealing with the disease for a longer time and accumulating experience about it. Research on the effective roles performed by of the older family members is, however, scarce. Further, from an aging point of view, intergenerational roles may generate meaning for older persons. Aims: This study examined the roles of older relatives towards younger ones, in Portuguese families with hereditary diseases (using Huntington disease, HD as a model); and analyses of generativity in older affected individuals with transthyretin-related familial amyloid polyneuropathy, TTR-FAP). Methods: A mixed methodology was adopted and developed in two main stages. (i.) Qualitative methods (the Critical Incidents Technique, through semi-structured interviews) were used to assess older family-members’ health-related roles in families with HD. (ii.) Quantitative descriptive-comparative, were chosen to examine generative concerns (Loyola Generative Scale, Portuguese version); satisfaction with life (Satisfaction with Life Scale, Portuguese version); and self-rated health (single item of self-perceived health) in older individuals affected with TTR-FAP; and to compare those with individuals with no known family history of a hereditary disease. Main findings: Older family members in HD played influential roles in the health management of younger generations, namely shaping awareness about and influencing the management of HD. Older affected individuals with FAP had similar generativity scores as non-FAP ones, what was positively correlated with satisfaction with life and self-rated health. Implications: Findings support the relevancy of addressing hereditary diseases from an intergenerational perspective, where older family members perform health-related roles with influence in the health-management of younger generations. Additionally, older affected family members with TTR-FAP are attaining generativity, which seems to be meaningful to them. These results are relevant for the provision of genetic counselling and other healthcare services of these diseases. Our findings may also have implications for other hereditary diseases, particularly those with similar clinical characteristics and inheritance mode. Finally, they provide new contributions to developmental (particularly for older stages of life) and gerontological sciences, where the experiences of older persons in affected families remained unexplored. Introdução: As doenças hereditárias são doenças familiares, transmitidas por linhagem biológica (parental). Em termos psicossociais, a experiência destas doenças é transgeracional. Torna-se por isso relevante usar uma perspetiva intergeracional para aceder à experiência familiar da doença. Os familiares mais velhos convivem há mais tempo com a doença e por isso encontram-se numa posição privilegiada em termos da sua experiência com a doença. São, no entanto, escassos os estudos sobre os papéis intergeracionais que os membros mais velhos da família podem desempenhar. Além disso, do ponto de vista do envelhecimento, esses papéis podem gerar significado e serem relevantes para os próprios elementos mais velhos da família. Objetivos: Este estudo analisou os papéis dos familiares mais velhos em relação aos mais novos, em famílias portuguesas afetadas por doenças hereditárias (usando a doença de Huntington, DH, como modelo). E analisa a generatividade nos mais velhos da família com a doença (em famílias com transthyretin-related familial amyloid polyneuropathy, TTR-FAP). Métodos: Adotou-se uma metodologia mista, que foi desenvolvida em duas etapas principais: (1). Qualitativa (Técnica de Incidentes Críticos através de entrevistas semiestruturadas), para identificar os papéis dos mais velhos de famílias com DH em termos de gestão da saúde dos mais novos; (2). Quantitativa, descritiva-comparativa, para examinar a preocupação generativa (Loyola Generative Scale, versão portuguesa), satisfação com a vida (Escala de Satisfação com a Vida, versão em portuguesa) e perceção do estado de saúde (item único de auto-perceção de estado de saúde) dos mais velhos de famílias com TTR-FAP, e comparar com indivíduos sem história familiar conhecida de doença hereditária. Resultados Principais: Os membros mais velhos de famílias com DH desempenhavam papéis relevantes na gestão da saúde das gerações mais novas, nomeadamente influenciando a tomada de consciência sobre a DH e a sua gestão. Os mais velhos com TTR-FAP apresentavam scores de generatividade semelhantes aos não-afetados com FAP, correlacionando-se positivamente com a satisfação com a vida e perceção do seu estado de saúde. Implicações: Os resultados apoiam a relevância de abordar as doenças hereditárias de um ponto de vista intergeracional, onde os mais velhos da família desempenham papéis com influência na gestão da saúde das gerações mais jovens. Adicionalmente, os familiares mais velhos afetados com TTR-FAP revelaram preocupações generativas, o que parecia ser significativo para eles próprios. Esses resultados são relevantes para a prestação de aconselhamento genético e outros serviços de saúde. Os resultados desta pesquisa podem ter implicações para outras doenças hereditárias com características semelhantes. Finalmente, eles contribuem para o estudo do desenvolvimento psicossocial, nomeadamente de adultos mais velhos e para a gerontologia onde as experiências dos mais velhos das famílias permaneceram por explorar. Programa Doutoral em Gerontologia e Geriatria

Tese de doutoramento em Medicina (Ciências Biomédicas), apresentada à Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra Cromossomas marcadores supranumerários sSMCs, do inglês, small Supernumerary Marker Chromosomes) são pequenos cromossomas estruturalmente anormais que aparecem adicionalmente aos 46 cromossomas humanos e que não podem ser identificados ou caracterizados por citogenética convencional, tendo um tamanho inferior a um cromossoma 20 da mesma placa metafásica. Os sSMCs constituem um grupo heterógeneo de cromossomas anómalos que podem ter diferentes formas, como cromossomas duplicados invertidos (inv dup), cromossomas minute cêntricos (min) e cromossomas em anel (r). O risco de alterações fenotípicas associadas à presença de um sSMC depende de vários factores, como a hereditariedade, a origem do cromossoma, a morfologia, o conteúdo genético, a presença de dissomia uniparental ou o grau de mosaicismo. De facto, os fenótipos associados a um sSMC são variáveis, desde normais a severamente afectados. Os sSMCs podem ser detectados em diagnóstico pós-natal ou em pré-natal constituindo, sobretudo no último caso, um problema complexo para a investigação citogenética e o aconselhamento genético. Tendo em conta dados publicados na literatura que estimam uma frequência de 0.044% recém-nascidos portadores de um sSMC e que a população mundial é estimada actualmente em cerca de 6 823 000 000 pessoas, pode-se extrapolar o número de aproximadamente 3 milhões de indíviduos no mundo portadores de um sSMC. A grande maioria destes indíviduos não tem manifestações fenotípicas aparentes, no entanto cerca de 26% dos casos de indivíduos com um sSMC terão manifestações fenotípicas que poderão ser mais ou menos severas. A maioria dos cromossomas marcadores publicados na literatura não têm uma caracterização citogenética detalhada, quer da origem quer do conteúdo genético, que permita uma correlação robusta com o fenótipo esperado. Este facto dificulta o aconselhamento genético quando é encontrado um sSMC, sobretudo em diagnóstico pré-natal. Neste domínio é essencial sistematizar o conhecimento sobre o conteúdo genético envolvido nos sSMC e a descriminação das manifestações fenotípicas expectáveis de um indivíduo ou grupo de indivíduos, sejam elas normais ou anormais. Com este trabalho pretendeu-se contribuir para esta sistematização, procedendo-se à caracterização por citogenética molecular de um grupo de cromossomas marcadores supranumerários derivados de vários cromossomas, nomeadamente dos cromossomas 1, 2, 5, 11, 13, 15, 16, 17, 18 e 22. Pretendeu-se validar a técnica de hibridização Genómica Comparativa por array (array CGH, do inglês array Comparative Genomic Hybrydization) para caracterização da extensão genética do cromossoma marcador, após a sua microdissecção e amplificação. Concluiu-se que esta técnica será de grande utilidade para a correcta caracterização de sSMCs sobretudo quando o cromossoma marcador está presente em mosaico de baixa expressão. Após caracterização molecular do grupo de sSMC em estudo estabeleceu-se, na medida do possível, uma relação genótipo/fenótipo, comparando cada caso com outros casos reportados na literatura. Neste trabalho propõem-se ainda linhas de orientação para lidar com casos de sSMC num laboratório de diagnóstico em citogenética, tendo em consideração factores como por exemplo o tempo para a caracterização citogenética, o grau de mosaicismo e as técnicas disponíveis no laboratório. O trabalho incluído nesta dissertação reforça e clarifica a necessidade de uma caracterização citogenética molecular detalhada de cromossomas marcadores supranumerários, recorrendo nomeadamente a técnicas de M-FISH e de array CGH. Esta caracterização possibilita o estabelecimento de relações genótipo/fenótipo cada vez mais precisas e essenciais para um correcto aconselhamento genético, por parte do Geneticista Clínico. Small supernumerary marker chromosomes (sSMCs) are small structurally abnormal chromosomes that occur in addition to the 46 human chromosomes, that cannot be identified or characterized unambiguously by conventional banding cytogenetics alone, and are (in general) equal in size or smaller than a chromosome 20 of the same metaphase spread. sSMCs are a morphologically heterogeneous group of structural abnormal chromosomes that can appear in different shapes: inverted duplicated chromosomes (inv dup), centric minute chromosomes (min) and ring chromosomes (r). The risk for phenotypic abnormalities associated with a sSMC depends on several factors, including nheritance, chromosomal origin, morphology, genetic content, presence of uniparental disomy or grade of mosaicism. In fact, phenotypes associated with a sSMC are variable, from normal to severely affected. sSMCs can be detected postnatally or prenatally, the last being a major problem for cytogenetic investigation and genetic counselling. Taking into account data in the literature that estimate a 0.044% frequency of newborns with a sSMC and that the estimated world population is 6 823 000 000 people, there will be at present approximately 3 million living sSMC carriers. The great majority of these carriers will not have apparent phenotypical consequences. However, about 26% of individuals with a sSMC will have phenotypical manifestations, more or less severe. The majority of sSMCs published in the literature do not have an accurate cytogenetics characterization, of the origin and genetic content of the marker, which allows a robust correlation with the expected phenotype. This is a difficulty for genetic counselling when a sSMC is encountered, especially at prenatal diagnosis. It is essential to systematize the knowledge of the genetic content of markers and the phenotypical manifestations encountered, normal or abnormal. With this work we want to contribute to this systematization, by doing a detailed molecular cytogenetic characterization of a group of sSMC derived from different chromosomes, namely chromosomes 1, 2, 5, 11, 13, 15, 16, 17, 18 and 22. We aimed to validate array CGH technique, after the microdissection and amplification of the marker, for the characterization of the genetic extension of the sSMC. We concluded that this technique is of great value for an accurate characterization of the marker, especially when the sSMC is present in low levels of mosaicism. After the characterization of the group of sSMCs cases in study, it was established a genotype/phenotype correlation, whenever possible, and a comparison of each case with those described in the literature was done. In this work, guidelines are proposed for the management of sSMCs in a diagnostic cytogenetic laboratory, taking into account several factors, like time available for the cytogenetic characterization, levels of mosaicism and techniques availability in the lab. This work reinforces and clarifies the need of an accurate molecular cytogenetic characterization of sSMCs, using particularly M- FISH techniques or array CGH. This characterization allows the establishment of more precise enotype/phenotype correlations, which are essential for an accurate genetic counselling by the Clinic Geneticist.

O uso de antiepiléticos durante a gestação está estreitamente associado a um conjunto de malformações em recém-nascidos, levando a um quadro clínico que pode confundir com diversas síndromes genéticas. O presente artigo relata o caso de uma criança do sexo masculino que nasceu com anomalias congênitas e cuja mãe utilizou fenobarbital durante toda a gestação. Dentre suas queixas estava o retardo do crescimento por deficiência de hormônio do crescimento, exigindo conduta terapêutica e acompanhamento, que foi realizado até os 4 anos e 7 meses com resultados satisfatórios. O paciente revela um conjunto de alterações congênitas que se aproximam de sua linha média, muitas delas semelhantes às encontradas em algumas síndromes conhecidas. Ressalta-se aqui a dificuldade em conduzir este diagnóstico de exclusão pelos diversos diagnósticos diferenciais, possibilitando melhor aconselhamento genético para o paciente e seus familiares.