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International audience; Crops are often subject to intense attacks by pests and diseases. Among them, Maize Lethal Necrosis (MLN) is a serious disease that impact maize crops in many Southern countries. It results from the synergistic interaction of two plant viruses, transmitted by two vectors. In this paper, we develop a general deterministic epidemic model of crop-vector-borne disease for synergistic co-infection, with a particular focus on MLN disease. A theoretical analysis shows that different thresholds exists that drive the dynamics of the system: the well known basic reproduction numbers and also invasion reproduction numbers. The latter are essential for the emergence or not of the MLN disease. After a global sensitivity analysis, we illustrate our results through numerical simulations and discuss potential control methods such as vector control and roguing.

CONTEXTE ET OBJECTIF DE L'ÉTUDE. La radiothérapie stéréotaxique (RTS) est recommandée dans le traitement des oligo-métastases cérébrales chez des patients avec une maladie extra-cérébrale contrôlée offrant un bon contrôle local. Lorsque la lésion ciblée augmente de volume sur l'imagerie du suivi standard, il apparaît difficile de différencier progression (P) et radionécrose (RN). En dehors de la confirmation histologique, la prise de décision peut alors apparaître inappropriée et retardée. Les paramètres d'imagerie quantitative extraits des examens de routine pourraient être intéressants. Nous proposons d'explorer la valeur ajoutée de la méthode radiomics dans la démarche diagnostique différentielle de ces deux entités. MATÉRIEL ET MÉTHODES. 20 patients ayant reçu une RTS pour métastases cérébrales, tous primitifs confondus, ont été inclus rétrospectivement (8 RN documentées, 12 P documentées). A l'aide du logiciel IBEX, 1766 paramètres radiomics ont été extraits de la première IRM T1- gadolinium post-RTS présentant une modification du volume lésionnel. Une sélection de variables et un apprentissage sur les 1, 5 et 10 meilleures variables par famille sectionnée ont été conduits selon la méthodologie de Aerts et al. (Nature Comm., 2014). 7 méthodes de sélection de variables et 12 méthodes d'apprentissage ont été évaluées. La performance de classification a été mesurée à l'aide du Kappa de Cohen, calculé après une validation interne par leave-one-out-cross-validation. Toutes les analyses ont été réalisées sur R. RÉSULTATS. La meilleure classification a été obtenue par la combinaison du score de sélection de variables Chi square score et d'un algorithme Bagging pour l'apprentissage (AUC = 0,83). La performance de prédiction de RN était de 75% (6 cas sur 8 prédits) et de 91% pour les P (11 cas sur 12 prédits). La prédiction du statut du patient est en accord fort avec le statut réel (histologique) du patient avec un Kappa de Cohen à 0,68. CONCLUSION. La méthode radiomics semble capable de discriminer de manière probante, précoce et non invasive RN et P après RTS de métastases cérébrales. Cette étude aux résultats prometteurs est une preuve de concept. Ces données sont à étendre à une plus large cohorte afin de définir un modèle robuste pour aider à la prise de décision dans cette situation clinique délicate.

Purpose: to assess the interobserver agreement of categorizing pancreatic and peripancreatic collections using the revised Atlanta classification (RAC) in the first month of acute pancreatitis (AP), and to correlate the type of collection with outcome. Material and methods: among 131 consecutive patients hospitalized for 139 episods of AP, 195 CTs performed within the first month, and presenting peripancreatic anomalies, were analysed. Each episod of AP was classified into three degrees of severity adaptated and according to the RAC: mild, moderately severe and severe. Two radiologists blinded to the clinical data retrospectively categorized the collections as acute peripancreatic fluid collections (APFC) or acute necrotic collections (ANC), using the RAC criteria. Interobserver agreement was assessed by using ? statistics, and compared according to the timing of the CTs. Results: interobserver agreement to categorize peripancreatic collections was moderate (κ=0.45). This agreement did not increase with the timing of the CTs: κ was 0.51 before day 3, 0.36 between day 3 and day 7 and 0.53 after day 7. For the detection of parenchymal necrosis, the interobserver agreement was also moderate (κ=0.42). There was a tendency for less severity among patients with APFC compared with patients with ANC (p=0.06). Conclusion: the RAC shows a moderate interobserver agreement to categorize both peri and intra pancreatic collections. The type of collection occuring during the first month of an AP is associated with the severity of the pancreatitis.; Objectif : évaluer la reproductibilité inter-observateur de la classification révisée d’Atlanta de 2012 pour catégoriser les collections pancréatiques et péri-pancréatiques survenant lors du 1er mois d’une pancréatite aiguë et corréler le type de collection à la sévérité clinique. Matériel et méthodes : chez 131 patients consécutifs pris en charge pour 139 poussées de pancréatite aiguë, 195 scanners réalisés lors du premier mois d’évolution et présentant des anomalies péripancréatiques, ont été analysés. Les pancréatites aiguës ont été classées en trois degrés de sévérité clinique adaptés de la classification révisée d’Atlanta : peu grave, modérément grave, grave. Deux radiologues ont, rétrospectivement et en aveugle des données cliniques, classé les collections en collection liquidienne aiguë péri-pancréatique (CLAP) ou collection aiguë nécrotique (CAN) en utilisant la classification révisée d’Atlanta. La concordance inter-observateur a été évaluée en utilisant le coefficient κ, et a été comparée en fonction du délai de réalisation des scanners. Résultats : un total de 139 épisodes de pancréatite aiguë ont été analysés chez 131 patients (50 femmes et 81 hommes) âgés de 20 à 94 ans (âge moyen de 58,7 ± 18,0 ans). Une reproductibilité inter-observateur moyenne était retrouvée pour déterminer le type de collection (κ=0,45). Cette reproductibilité n’était pas améliorée avec l’allongement du délai entre le début des symptômes et la réalisation du scanner : le kappa était de 0,51 entre J0 et J2, de 0,36 entre J3 et J7 et de 0,53 après J7. Une reproductibilité inter-observateur moyenne (κ=0,42) était également retrouvée pour la mise en évidence d’une nécrose intraparenchymateuse. La sévérité clinique de la pancréatite avait tendance à être plus faible chez les patients présentant une CLAP que chez les patients présentant une CAN (p=0,06). Conclusion : la classification révisée d’Atlanta ne présente qu’une reproductibilité inter-observateur moyenne pour classer les collections pancréatiques et péri-pancréatiques lors du 1er mois d’une pancréatite aiguë. Le type de collection est associé à la sévérité clinique de la pancréatite aiguë.

International audience; INTRODUCTION:Loxosceles spiders are ubiquitous and responsible for many cases of envenomation in the world. The kind rufescens is present in the Provence and Occitan regions in France. During the summer 2015, we faced many Loxosceles rufescens cases of bites having led to extensive integumental necrosis whose features and singular evolution seems important to report.MATERIAL AND METHODS:We report the cases of nine patients who experienced a spider bite in the summer of 2015 in the Languedoc Roussillon.RESULTS:Of nine patients, eight patients had skin necrosis and five required surgical care. Five patients had a fever and had five other general signs such as important asthenia, joint pain, nausea and dizziness. CRP was very low normal in all patients. Finally, five of the nine patients reported a residual pain.DISCUSSION:L. rufescens is a small spider (7 to 15mm in diameter) having a cytotoxic venom. Loxoscelism diagnosis is usually made by removing a front necrotic skin lesion. Of systemic loxoscelism that have been described, some American species had fatal outcomes. The treatment remains controversial with various options: surgery, antibiotics, antihistaminics, antivenom.CONCLUSION:The diagnosis must be made in endemic areas when confronted to a necrosic integumentary infectious rapidly progressive, unresponsive to antibiotic treatment associated with atypical general signs.

Periodontal plastic surgery's main goal is to cover gingival recessions. This thesis aims to enable any practitioner (specialist or not) how to react in case of complications or failures during these surgeries. The first part reminds the fundamental principles to respect before, during and after periodontal plastic surgery. The second part describes and explains how to manage intraoperative and postoperative complications. The third part describes and explains how to manage failures both biological (necrosis) and aesthetics.; La chirurgie plastique parodontale a pour but principal de recouvrir les récessions gingivales. Cette thèse a pour objectif de permettre à tout praticien (spécialiste ou non)de savoir comment réagir en cas de complications ou d’échecs lors de ces chirurgies. La première partie rappelle les grands principes à respecter avant, pendant et après toute chirurgie plastique parodontale. La deuxième partie décrit et explique comment gérer les complications préopératoires puis post-opératoires. La troisième partie décrit et explique comment gérer les échecs à la fois biologiques(nécrose) et esthétiques.

The trophic endosymbiosis interaction between a cnidarian host and its photosynthetic dinoflagellatessymbionts form the basis of coral reef ecosystems. Cnidarians host their symbionts in gastrodermis cells, in a phagocytosis-derived vacuole. Establishment and maintenance of the symbiotic interaction depend on an intimate molecular communication between the two partners. However, environmental and/or anthropogenic disturbances can lead to the breakdown of the symbiotic association, which is responsible for the worldwide decline of coral reefs. The main objectives of my research project are to improve the knowledge regarding symbiosis maintenance and disruption mechanisms, but also to define the molecular key players involved at the symbiotic interface in the sea anemone, Anemonia viridis. First, we have described the cellular mechanisms involved in the different types of symbiosis breackdown. Meanwhile, the characterization of npc1 and npc2 genes (involved in endosomal sterol transport), showed a duplication and a sub-functionalization of the npc2d gene. Both NPC1 and NPC2 proteins are expressed around symbionts. We therefore suggest that the duplicated protein NPC2-d is a biomarker of symbiosis health and that NPC1 protein is a marker of the perisymbiotic membrane. We then developed a protocol to characterize the proteome of the symbiotic interface between the two symbiotic partners. The newly-identified symbiotic key players will increase the general knowledge on the symbiotic interaction and its regulation during both stable and bleaching conditions.; L’endosymbiose trophique établie entre un hôte Cnidaire et ses symbiotes Dinoflagellés photosynthétiques est à l’origine du succès évolutif des écosystèmes coralliens. Les symbiotes sont internalisés par un mécanisme de phagocytose et maintenus dans les cellules du gastroderme de l'hôte. La symbiose est régie par un dialogue moléculaire intime entre les deux partenaires, interrompu lors de perturbations environnementales ou anthropiques, responsables du déclin mondial des récifs coralliens. Les objectifs de mon projet de recherche sont de définir les acteurs moléculaires localisés à l’interface symbiotique chez l’anémone de mer, Anemonia viridis. Premièrement, nous avons étudié les mécanismes cellulaires impliqués dans différents types de rupture de la symbiose et mis en évidence des phénomènes d’apoptose, nécrose et symbiophagie. Parallèlement, nous avons caractérisé chez l’anémone les gènes npc1 et npc2, impliqués chez les vertébrés dans le transport endosomal de stérols, et dont l’expression est modulée par l’état symbiotique. Nous avons pu montrer que le gène npc2d est issus d’une duplication et vraisemblablement d’une sub-fonctionnalisation et que les protéines NPC1 et NPC2 sont exprimées au voisinage des symbiotes. Nous proposons donc que la protéine NPC2-d soit utilisée comme marqueur de l’état de santé des Anthozoaires symbiotiques et que la protéine NPC1 soit un marqueur de la membrane périsymbiotique. Nous avons également développé un protocole afin d’identifier les protéines associées à l’interface symbiotique entre les deux partenaires. A terme, les cibles identifiées permettront une meilleure compréhension des mécanismes qui régulent la relation symbiotique.

National audience

International audience; nécrose palatine secondaire à une embolisation de l'artère sphéno-palatine

Non-Hodgkin lymphoma (NHL) include a diverse range of pathologies originate from the lymphatic cells. Among the mature B-cell NHL, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is the most common adult leukemia in the western countries. The pathophysiology of mature B-cell NHL is marked by the inhibition of cell death mechanisms, particularly through the overexpression of MCL-1 protein. The first part of this thesis was to determine which deubiquitinating enzymes (DUBs) are involved in the survival of mature B-cell NHL and in the stabilization of MCL-1. Our study identified the DUB USP14, which is linked to the ubiquitin-proteasome system, as able to regulate MCL-1 and cell survival. Our work also shows for the first time that the DUB activity of the cells and the activity of USP14 are directly regulated by BCR signaling through the activity of the SYK tyrosine kinase. FTY720, a sphingosine analog used as an immunosuppressive drug in multiple sclerosis, showed a cytotoxic effect in hematological malignancies but its mechanism of action is not well understood. A second part of this thesis was to characterize the death induced by FTY720. Our study shows that the characterization of the cellular morphology and markers induced by death due to FTY720 in the LLC corresponds in fact to a programmed RIPK1-independent necrosis cell death, but dependent on DRP1, a regulatory enzyme of the mitochondrial fission.; Les lymphomes non hodgkiniens (LNH) regroupent un panel hétérogène de pathologies originaires de cellules lymphatiques. Parmi les LNH à cellules B matures, la leucémie lymphoïde chronique (LLC) constitue la forme de leucémie de l’adulte la plus fréquente en Occident. La physiopathologie des LNH à cellules B matures est marquée par l’inhibition des mécanismes de la mort cellulaire, notamment via la surexpression de la protéine MCL-1. Une première partie de ce travail de thèse a été de déterminer quelles pouvaient être les enzymes de déubiquitination (DUBs) impliquées dans la survie des LNH à cellules B matures et la stabilisation de MCL-1. Notre étude a permis d’identifier la DUB USP14, qui est liée au système ubiquitine-protéasome, comme capable de réguler MCL-1 et la survie cellulaire. Nos travaux montrent également pour la première fois que l’activité DUB des cellules, ainsi que l’activité d’USP14, sont directement régulées par la signalisation du BCR via l'activité de la tyrosine kinase SYK. Le FTY720, un analogue de la sphingosine utilisé comme immunosuppresseur dans la sclérose en plaques, a montré un effet cytotoxique dans des hémopathies malignes sans toutefois que son mécanisme d’action soit clairement expliqué. Une deuxième partie de ce travail de thèse a été de caractériser la mort induite par le FTY720. Notre étude montre que la caractérisation de la morphologie cellulaire et des marqueurs induits par la mort due au FTY720 dans les LLC correspond en fait à une nécrose cellulaire programmée indépendante de RIPK1, mais dépendante d'une enzyme régulatrice de la fission mitochondriale, DRP1.

Non-Hodgkin lymphoma (NHL) include a diverse range of pathologies originate from the lymphatic cells. Among the mature B-cell NHL, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is the most common adult leukemia in the western countries. The pathophysiology of mature B-cell NHL is marked by the inhibition of cell death mechanisms, particularly through the overexpression of MCL-1 protein. The first part of this thesis was to determine which deubiquitinating enzymes (DUBs) are involved in the survival of mature B-cell NHL and in the stabilization of MCL-1. Our study identified the DUB USP14, which is linked to the ubiquitin-proteasome system, as able to regulate MCL-1 and cell survival. Our work also shows for the first time that the DUB activity of the cells and the activity of USP14 are directly regulated by BCR signaling through the activity of the SYK tyrosine kinase. FTY720, a sphingosine analog used as an immunosuppressive drug in multiple sclerosis, showed a cytotoxic effect in hematological malignancies but its mechanism of action is not well understood. A second part of this thesis was to characterize the death induced by FTY720. Our study shows that the characterization of the cellular morphology and markers induced by death due to FTY720 in the LLC corresponds in fact to a programmed RIPK1-independent necrosis cell death, but dependent on DRP1, a regulatory enzyme of the mitochondrial fission., Les lymphomes non hodgkiniens (LNH) regroupent un panel hétérogène de pathologies originaires de cellules lymphatiques. Parmi les LNH à cellules B matures, la leucémie lymphoïde chronique (LLC) constitue la forme de leucémie de l’adulte la plus fréquente en Occident. La physiopathologie des LNH à cellules B matures est marquée par l’inhibition des mécanismes de la mort cellulaire, notamment via la surexpression de la protéine MCL-1. Une première partie de ce travail de thèse a été de déterminer quelles pouvaient être les enzymes de déubiquitination (DUBs) impliquées dans la survie des LNH à cellules B matures et la stabilisation de MCL-1. Notre étude a permis d’identifier la DUB USP14, qui est liée au système ubiquitine-protéasome, comme capable de réguler MCL-1 et la survie cellulaire. Nos travaux montrent également pour la première fois que l’activité DUB des cellules, ainsi que l’activité d’USP14, sont directement régulées par la signalisation du BCR via l'activité de la tyrosine kinase SYK. Le FTY720, un analogue de la sphingosine utilisé comme immunosuppresseur dans la sclérose en plaques, a montré un effet cytotoxique dans des hémopathies malignes sans toutefois que son mécanisme d’action soit clairement expliqué. Une deuxième partie de ce travail de thèse a été de caractériser la mort induite par le FTY720. Notre étude montre que la caractérisation de la morphologie cellulaire et des marqueurs induits par la mort due au FTY720 dans les LLC correspond en fait à une nécrose cellulaire programmée indépendante de RIPK1, mais dépendante d'une enzyme régulatrice de la fission mitochondriale, DRP1.

Les nématodes à kystes sont l’un des bioagresseurs causant le plus de dégâts sur les cultures de pommes de terre. La résistance trouvée chez l'accession spl88S.329.18, issue de l'espèce Solanum sparsipilum est caractérisée par un déterminisme oligogénique avec un QTL à effet fort localisé sur le chromosome V (GpaVspl) et un QTL mineur localisé sur le chromosome XI (GpaXIspl). Pour obtenir une résistance de haut niveau, l'effet du QTL GpaVspl, doit être complémenté par celui du QTL à effet faible GpaXIspl. Par génomique comparative, le locus GpaV a été localisé dans un intervalle compris entre 16 et 60 kb sur les génomes de la tomate et des espèces apparentées à la pomme de terre, Solanum demissum et Solanum phureja. Deux gènes ont été annotés dans cet intervalle sur les génomes de la tomate et de S. demissum: le premier appartient à la famille des TIR-NBS-LRR (TNL), famille de gènes de résistance classiques, et le second appartient à la famille des « mitochondrial, transcription termination factor » (mTERF), dont l’implication dans des mécanismes de résistance n’a jamais été démontrée. Les objectifs de ma thèse étaient d'identifier le(s) gène(s) responsable(s) de la résistance à G. pallida, conférée par le locus GpaVspl, et d'étudier sa régulation. Suite à la publication de la séquence du génome de S. phureja, en 2011, nous avons mis en évidence que le locus GpaV était dupliqué chez S. phureja et que cette duplication était également présente chez S. sparsipilum. Les quatre gènes annotés au locus GpaVspl ont été nommés Spl_mTERF18430, Spl_TNL18429, Spl_mTERF18453 et Spl_TNL18428. L'effet des deux gènes Spl_mTERF18430 et Spl_TNL18428 sur la résistance à G. pallida a été analysé via des expériences de transformation génétique suivies par des tests de résistance sur les plantes transformées. Un effet partiel du gène Spl_TNL18428 sur la résistance à G. pallida a été mis en évidence par complémentation de plantes sensibles. Aucun effet significatif n'a été détecté pour le gène Spl_mTERF18430. Des expériences d'extinction génique suggèrent que le deuxième gène TIR-NBS-LRR, Spl_TNL18429, qui est également exprimé dans les racines et qui présente un fort pourcentage d'identité de séquence avec le gène Spl_TNL18428, pourrait également être impliqué dans la résistance à G. pallida. L'expression du gène rapporteur GFP, placé sous le contrôle du promoteur du gène Spl_TNL18428, est fortement induite dans les cellules situées autour du syncytium. Ceci renforce l'hypothèse d'une implication du gène Spl_TNL18428 dans la résistance à G. pallida, car la localisation de l'expression de la GFP est similaire à celle de la nécrose, qui est caractéristique de la réaction développée par les plantes résistantes autour du syncytium induit par les nématodes. En tenant compte des données bibliographiques récentes, montrant que plusieurs gènes NBS-LRR peuvent être indispensables à l'expression d'une résistance, nos résultats suggèrent que les deux gènes Spl_TNL18428 et Spl_TNL18429 sont nécessaires à l'expression de la résistance à G. pallida.

Photodynamic therapy (PDT) is a therapeutic strategy for the treatment of small localized tumors accessible to the visible light irradiation. It is based on the combined action of photosensitizer (PS), light and molecular oxygen. Tumoricidal effect of PDT is triggered by direct damage of malignant cells and indirect vascular damage followed by an activation of the immune system. The present study investigates the relationship between photoinduced apoptosis in each compartment of interest (vascular versus neoplastic) and mTHPC-PDT treatment efficiency in function of the intratumoral distribution of mTHPC. The latter was defined by the drug-light intervals. In the first part, we demonstrated the importance of the intratumoral distribution of mTHPC to optimize photodynamic parameters. The fractionation of the PS administration permitted to obtain a tumor cure rate of 100% correlated to a massive apoptosis of pathological tissues. Moreover, this treatment strategy induced only limited skin damages and few inflammation which could be an advantage in clinical context. In the second part, we evidenced the mTHPC redistribution from liposomal formulations (Foslip®, Fospeg®) in vivo in the chick chorioallantoic membrane model (CAM) and its influence on photoinduced vascular damage; La thérapie photodynamique (PDT) est une modalité de traitement des petites tumeurs accessibles à la lumière. Elle repose sur l'action combinée d'un photosensibilisateur qui, en présence d'oxygène et sous l'effet d'une irradiation lumineuse, induit la synthèse d'espèces réactives de l'oxygène cytotoxiques. L'effet tumoricide de la PDT se traduit par des dommages directs sur les cellules ainsi que des dommages indirects de la néovascularisation tumorale et une activation du système immunitaire. Dans cette étude, nous avons démontré dans une première partie l'intérêt de se baser sur la distribution intratumorale de la mTHPC et non pas sur les études de biodistribution pour l'optimisation des conditions de traitement par PDT et en particulier de l'intervalle drogue-lumière (IDL). Un co-ciblage des vaisseaux et du parenchyme tumoral via un fractionnement de l'administration de la mTHPC a permis d'obtenir un taux de guérisons de 100%. Cette efficacité a été corrélée à la potentialisation de la mort des cellules par apoptose et valorisée par son association à des dommages secondaires cutanés restreints. La stratégie de fractionnement de l'administration s'avère donc être très prometteuse dans un contexte clinique. Dans la seconde partie de cette étude, nous avons établi la redistribution de la mTHPC in vivo dans le modèle de la membrane chorioallantoïdienne de poulet (CAM) à partir de formulations liposomales (Foslip®, Fospeg®) et son impact sur les dommages vasculaires photoinduits par la PDT

Apoptosis is a programmed cell death process necessary for tissue homeostasis duringdevelopment. Cancer cells acquire the capacity to evade apoptosis. Restoring tumor cellsability to die is a therapeutic strategy against cancer. It is therefore important to identify newtherapeutic targets within the apoptotic signaling and to test new molecules.Mitochondrion being a central integrator of cell death signals and a key player inapoptosis execution, it is a target of choice to develop new anticancer therapies. ANT(Adenine Nucleotide Translocase) is the main protein of the inner mitochondrial membrane. Itpresents a ADP/ATP transporter function in physiological conditions and acquire a lethal poreactivity upon apoptotic stimulus. It is thus interesting to inhibit the transporter function and- 6 -activate ANT pore function in order to induce apoptosis. There are four isoforms: ANT1, 2, 3and 4. We studied the role of the recently discovered ANT4 in apoptotic signaling. Our studyemphasize ANT4 anti-apoptotic role in cancer cells and ANT potential as an anticancertherapeutic target.Increase in anti-apoptotic proteins, adaptation to cellular stress and activation ofsurvival pathways are the main mechanisms responsible for chemoresistance. Using cellularmodels we studied the ability of two molecules: Withaferin A (WFA) and Plumbagin (PBG)to stimulate apoptosis and determined the molecular mechanisms involved. We showed WFAcapacity to specifically induce the mitochondrial pathway of apoptosis in melanoma cellsthrough reactive oxygen species (ROS) generation leading to mitochondrial pathwayactivation and the decrease in anti-apoptotic protein Bcl-2 expression level. However, PBG isresponsible for apoptosis and necrosis induction in melanoma cells. In both cases PBG actsthrough an increase in ROS following endoplasmic reticulum stress. WFA and PBG are thustwo pro-oxidant molecules able to induce the death of melanoma cells by taking advantage oftheir vulnerability to oxidative stress.Our work took part in the demonstration of a potential anticancer target and two agentsable to induce cell death in a context of chemoresistance., L’apoptose est une mort cellulaire programmée nécessaire à l’homéostasie tissulaireau cours du développement. Les cellules cancéreuses acquièrent la capacité à échapper àl’apoptose. Restaurer la capacité des cellules tumorales à mourir est une stratégiethérapeutique qui permettrait de lutter contre le cancer. Il est donc important d’identifier denouvelles cibles au sein de la signalisation apoptotique et de tester de nouvelles molécules.La mitochondrie, intégrateur central des signaux de mort cellulaire et actrice de l’exécution de l’apoptose, est une cible de choix pour développer des thérapies anti-tumorales.L’ANT (Adenine Nucleotide Translocase) est la protéine majoritaire de la membrane internemitochondriale. Elle est possède une fonction de transporteur ATP/ADP, en conditionphysiologique, et suite à un stimulus apoptotique, acquiert une activité de pore létal. Ainsi, ilest intéressant d’inhiber la fonction transporteur et d’activer la fonction pore d’ANT pourinduire l’apoptose. Il existe quatre isoformes d’ANT : ANT1, 2, 3 et 4. Nous avons étudié lerôle d’ANT4, récemment identifiée, dans la signalisation apoptotique. Notre étude montre lerôle anti-apoptotique d’ANT4 dans des cellules cancéreuses et l’intérêt d’ANT comme ciblethérapeutique anti-cancéreuse.Une augmentation de l’expression de protéines anti-apoptotiques, l’adaptation auxstress cellulaires et l’activation de voies de survie sont les mécanismes les plus fréquemmentdécrits pour expliquer la chimiorésistance du mélanome. A l’aide de modèles cellulaires, nousavons étudié la capacité de deux nouvelles molécules : Withaférine A (WFA) et Plumbagine(PBG) à stimuler l’apoptose et déterminé les mécanismes moléculaires impliqués. Nous avonsmontré la capacité de WFA à induire spécifiquement la voie mitochondriale de l’apoptose decellules de mélanome par un mécanisme dépendant de la production d’espèces activées del’oxygène (EAO) qui déclenchent la voie mitochondriale et de la diminution du niveaud’expression de la protéine anti-apoptotique Bcl-2. En revanche, PBG induit une mortapoptotique et une mort nécrotique des cellules de mélanomes. Dans les deux cas, PBG agitpar l’augmentation des EAO suite au déclenchement d’un stress du reticulum endoplasmique.WFA et PBG sont donc deux molécules pro-oxydantes capables d’induire la mort des cellulesde mélanome en tirant partie de leur vulnérabilité au stress oxydant.Nos travaux ont participé à la mise en évidence d’une cible thérapeutique anticancéreusepotentielle et de deux agents capables d’induire la mort cellulaire dans un contextede chimiorésistance.

Dickeya dadantii is a broad host range phytopathogenic bacterium provoking soft rot disease on many plants including Arabidopsis. We showed that, after D. dadantii infection, the expression of the Arabidopsis BOS1 gene was specifically induced by the production of the bacterial PelB/C pectinases able to degrade pectin. This prompted us to analyze the interaction between the bos1 mutant and D. dadantii. The phenotype of the infected bos1 mutant is complex. Indeed, maceration symptoms occurred more rapidly in the bos1 mutant than in the wild type parent but at a later stage of infection, a necrosis developed around the inoculation site that provoked a halt in the progression of the maceration. This necrosis became systemic and spread throughout the whole plant, a phenotype reminiscent of that observed in some lesion mimic mutants. In accordance with the progression of maceration symptoms, bacterial population began to grow more rapidly in the bos1 mutant than in the wild type plant but, when necrosis appeared in the bos1 mutant, a reduction in bacterial population was observed. From the plant side, this complex interaction between D. dadantii and its host includes an early plant defence response that comprises reactive oxygen species (ROS) production accompanied by the reinforcement of the plant cell wall by protein cross-linking. At later timepoints, another plant defence is raised by the death of the plant cells surrounding the inoculation site. This plant cell death appears to constitute an efficient defence mechanism induced by D. dadantii during Arabidopsis infection.

Photodynamic therapy (PDT) is a therapeutic strategy for the treatment of small localized tumors accessible to the visible light irradiation. It is based on the combined action of photosensitizer (PS), light and molecular oxygen. Tumoricidal effect of PDT is triggered by direct damage of malignant cells and indirect vascular damage followed by an activation of the immune system. The present study investigates the relationship between photoinduced apoptosis in each compartment of interest (vascular versus neoplastic) and mTHPC-PDT treatment efficiency in function of the intratumoral distribution of mTHPC. The latter was defined by the drug-light intervals. In the first part, we demonstrated the importance of the intratumoral distribution of mTHPC to optimize photodynamic parameters. The fractionation of the PS administration permitted to obtain a tumor cure rate of 100% correlated to a massive apoptosis of pathological tissues. Moreover, this treatment strategy induced only limited skin damages and few inflammation which could be an advantage in clinical context. In the second part, we evidenced the mTHPC redistribution from liposomal formulations (Foslip®, Fospeg®) in vivo in the chick chorioallantoic membrane model (CAM) and its influence on photoinduced vascular damage., La thérapie photodynamique (PDT) est une modalité de traitement des petites tumeurs accessibles à la lumière. Elle repose sur l'action combinée d'un photosensibilisateur qui, en présence d'oxygène et sous l'effet d'une irradiation lumineuse, induit la synthèse d'espèces réactives de l'oxygène cytotoxiques. L'effet tumoricide de la PDT se traduit par des dommages directs sur les cellules ainsi que des dommages indirects de la néovascularisation tumorale et une activation du système immunitaire. Dans cette étude, nous avons démontré dans une première partie l'intérêt de se baser sur la distribution intratumorale de la mTHPC et non pas sur les études de biodistribution pour l'optimisation des conditions de traitement par PDT et en particulier de l'intervalle drogue-lumière (IDL). Un co-ciblage des vaisseaux et du parenchyme tumoral via un fractionnement de l'administration de la mTHPC a permis d'obtenir un taux de guérisons de 100%. Cette efficacité a été corrélée à la potentialisation de la mort des cellules par apoptose et valorisée par son association à des dommages secondaires cutanés restreints. La stratégie de fractionnement de l'administration s'avère donc être très prometteuse dans un contexte clinique. Dans la seconde partie de cette étude, nous avons établi la redistribution de la mTHPC in vivo dans le modèle de la membrane chorioallantoïdienne de poulet (CAM) à partir de formulations liposomales (Foslip®, Fospeg®) et son impact sur les dommages vasculaires photoinduits par la PDT.

Apoptosis is a programmed cell death process necessary for tissue homeostasis duringdevelopment. Cancer cells acquire the capacity to evade apoptosis. Restoring tumor cellsability to die is a therapeutic strategy against cancer. It is therefore important to identify newtherapeutic targets within the apoptotic signaling and to test new molecules.Mitochondrion being a central integrator of cell death signals and a key player inapoptosis execution, it is a target of choice to develop new anticancer therapies. ANT(Adenine Nucleotide Translocase) is the main protein of the inner mitochondrial membrane. Itpresents a ADP/ATP transporter function in physiological conditions and acquire a lethal poreactivity upon apoptotic stimulus. It is thus interesting to inhibit the transporter function and- 6 -activate ANT pore function in order to induce apoptosis. There are four isoforms: ANT1, 2, 3and 4. We studied the role of the recently discovered ANT4 in apoptotic signaling. Our studyemphasize ANT4 anti-apoptotic role in cancer cells and ANT potential as an anticancertherapeutic target.Increase in anti-apoptotic proteins, adaptation to cellular stress and activation ofsurvival pathways are the main mechanisms responsible for chemoresistance. Using cellularmodels we studied the ability of two molecules: Withaferin A (WFA) and Plumbagin (PBG)to stimulate apoptosis and determined the molecular mechanisms involved. We showed WFAcapacity to specifically induce the mitochondrial pathway of apoptosis in melanoma cellsthrough reactive oxygen species (ROS) generation leading to mitochondrial pathwayactivation and the decrease in anti-apoptotic protein Bcl-2 expression level. However, PBG isresponsible for apoptosis and necrosis induction in melanoma cells. In both cases PBG actsthrough an increase in ROS following endoplasmic reticulum stress. WFA and PBG are thustwo pro-oxidant molecules able to induce the death of melanoma cells by taking advantage oftheir vulnerability to oxidative stress.Our work took part in the demonstration of a potential anticancer target and two agentsable to induce cell death in a context of chemoresistance., L’apoptose est une mort cellulaire programmée nécessaire à l’homéostasie tissulaireau cours du développement. Les cellules cancéreuses acquièrent la capacité à échapper àl’apoptose. Restaurer la capacité des cellules tumorales à mourir est une stratégiethérapeutique qui permettrait de lutter contre le cancer. Il est donc important d’identifier denouvelles cibles au sein de la signalisation apoptotique et de tester de nouvelles molécules.La mitochondrie, intégrateur central des signaux de mort cellulaire et actrice de l’exécution de l’apoptose, est une cible de choix pour développer des thérapies anti-tumorales.L’ANT (Adenine Nucleotide Translocase) est la protéine majoritaire de la membrane internemitochondriale. Elle est possède une fonction de transporteur ATP/ADP, en conditionphysiologique, et suite à un stimulus apoptotique, acquiert une activité de pore létal. Ainsi, ilest intéressant d’inhiber la fonction transporteur et d’activer la fonction pore d’ANT pourinduire l’apoptose. Il existe quatre isoformes d’ANT : ANT1, 2, 3 et 4. Nous avons étudié lerôle d’ANT4, récemment identifiée, dans la signalisation apoptotique. Notre étude montre lerôle anti-apoptotique d’ANT4 dans des cellules cancéreuses et l’intérêt d’ANT comme ciblethérapeutique anti-cancéreuse.Une augmentation de l’expression de protéines anti-apoptotiques, l’adaptation auxstress cellulaires et l’activation de voies de survie sont les mécanismes les plus fréquemmentdécrits pour expliquer la chimiorésistance du mélanome. A l’aide de modèles cellulaires, nousavons étudié la capacité de deux nouvelles molécules : Withaférine A (WFA) et Plumbagine(PBG) à stimuler l’apoptose et déterminé les mécanismes moléculaires impliqués. Nous avonsmontré la capacité de WFA à induire spécifiquement la voie mitochondriale de l’apoptose decellules de mélanome par un mécanisme dépendant de la production d’espèces activées del’oxygène (EAO) qui déclenchent la voie mitochondriale et de la diminution du niveaud’expression de la protéine anti-apoptotique Bcl-2. En revanche, PBG induit une mortapoptotique et une mort nécrotique des cellules de mélanomes. Dans les deux cas, PBG agitpar l’augmentation des EAO suite au déclenchement d’un stress du reticulum endoplasmique.WFA et PBG sont donc deux molécules pro-oxydantes capables d’induire la mort des cellulesde mélanome en tirant partie de leur vulnérabilité au stress oxydant.Nos travaux ont participé à la mise en évidence d’une cible thérapeutique anticancéreusepotentielle et de deux agents capables d’induire la mort cellulaire dans un contextede chimiorésistance.

International audience; Trunk phloem necrosis (TPN) is a major constraint in rubber (Hevea brasiliensis) plantations. Current knowledge supports a scenario of a multi-factor physiological 'disease' caused by an accumulation of endogenous and exogenous stresses. Without evidence of a pathogen, the apparent spread of the syndrome from tree to tree along the planting line, strongly suggested the implication of a major local soil constraint. The objectives of the study were to address, within a plot, three points of the above scenario: the short-distance aggregation of affected trees; their correspondence with local micro-areas facing the highest environmental constraints; and the relative weakness of TPN trees that had accumulated several stresses since planting. The study was conducted in a young rubber tree stand (clone RRIM 600) of Northeast Thailand, where the number of TPN affected individuals was 8% after 3 years of tapping. Trunk girth and trunk basal area were used as indicators of local environmental constraints. Spatial patterns were analysed using the framework of marked point processes and K functions. The results confirmed the short-distance aggregation of TPN affected trees. But, TPN trees were not located within micro-areas where trees had a lower trunk basal area than average. Hence, the clusters of TPN do not occur in the most constraining environmental micro-areas of the plot in terms of growth since planting. Moreover, from comparison of girth, current girth increment and height of bark consumption, we infer that TPN trees were not smaller and less vigorous than other trees before the syndrome outbreak. Finally, our conclusions mean the previous scenario driven by major soil constraints becomes a 'more complex scenario' in which specific soil conditions (not the most constraining in term of cumulated growth), possibly in interaction with inter-individual competition, induce a late and subtle stress favouring a necrotic reaction against tapping stress.

Les bisphosphonates, molécules notamment approuvées dans la prévention des fractures ostéoporotiques et dans le cadre de pathologies cancéreuses, ont été associés depuis quelques années à l'émergence d'un "nouvel" effet indésirable : l'ostéonécérose de la mâchoire. Si l'incidence est relativement faible dans le cadre de bisphosphonates pris par voie orale, de l'ordre de 0,01 %, elle est loin d'être négligeable. Elle est en plus relativement élevée, jusqu'à 10 %, si le traitement a été reçu par voie intra-veineuse pour des traitements d'oncologie. Une chirurgie dentaire augmente nettement le risque d'ostéonécrose de la mâchoire. Les mécanismes responsables de ces dommages sont pour l'instant mal connus et plusieurs hypothèses coexistent. De nombreuses pistes de traitement sont évoquées, de l'oxygène hyperbare et au laser à la chirurgie lourde, mais, pour la plupart, elles ne sont pas validées. C'est pourquoi la prévention de cette pathologie doit occuper une place majeure, appuyée par les recommandations de l'Afssaps émises en décembre 2007. Les patients doivent être informés de cet effet indésirable et bénéficier d'un suivi dentaire plus ou moins rapproché selon le contexte de la prescription.

Fluoride damaged leaves of the Jerbi grape vine tree (Vitis vinifera L) growing in the vicinity of a phosphate fertilizer manufacturing plant near Sfax, Tunisia, were used to study the distribution of the chemical elements F, Ca, Mg, and P in the leaves and stalks. Photosynthesis and the chlorophyll content of healthy leaf parts were also investigated to determine tolerance mechanisms of this species to fluoride. The subdivision of the necrotic zone into concentric necrotic halos evidently reflects a series of plant reactions to preserve a large portion of the leaf assimilatory surface. Photosynthesis still occurred with 30 to 40% necrosis of the leaves. Preferential accumulation of F was found in the leaf margins along with a parallel accumulation of Ca. Necrosis becomes evident when a fall in Ca occurs with an excess of F. After this happens, the plant tends to maintain high Mg and P concentrations in its healthy leaf parts. At 60% leaf necrosis, F seems to be effective in reducing photosynthesis and chlorophyll content.

International audience; De 1999 à 2002, de très nombreux hêtres furent colonisés par des insectes xylophages dans les Ardennes essentiellement. Sur ces arbres, des suintements importants sur le fût, orientés en général du côté nord, ont pu être associés à une nécrose cambiale en bande. Après investigation, l'origine probable de cette nécrose semble être une chute de température brutale en novembre 1998, alors que les arbres n'étaient pas encore préparés aux froids hivernaux. Cette nécrose permet la colonisation par divers champignons lignivores qui dégradent rapidement le bois, induisant des pertes économiques considérables. Le phénomène lié à un événement climatique ponctuel est en voie de résorption cinq années après. Les insectes xylophages, parasites de faiblesse confirmés par les études réalisées, furent essentiellement opportunistes et attirés par les suintements.

International audience; Bien qu'elle soit largement pratiquée dans tous les essais phoma d'évaluation variétale du CETIOM et du CTPS, la note G2 a fait l'objet d'études pour mieux cerner ses avantages et ses limites. Sa fiabilité dépend en effet de la date de réalisation, du mode d'observation de la nécrose et de la taille de l'échantillon à observer.

To explore the regulation of the acute phase response in vivo, the effects of pentoxifylline (PX) treatment (100 mg/kg ip 1 h before infection) were investigated in infected and pair-fed rats 2 and 6 days after an intravenous injection of live bacteria ( Escherichia coli). PX treatment prevented the increase in plasma tumor necrosis factor (TNF)-α (peak 1.5 h after the infection) and resulted in an 84 and 61% inhibition of plasma interleukin (IL)-1β and IL-6, respectively (peaks at 3 h). Plasma corticosterone kinetics were not modified by the treatment. Infection increased α1-acid glycoprotein (AGP), α2-macroglobulin (A2M), and fibrinogen plasma concentrations and decreased albumin levels. PX significantly reduced AGP plasma concentration as early as day 2 in infected animals but reduced A2M and fibrinogen plasma levels only at day 6. The treatment had no effect on the albumin plasma concentration. Hepatic AGP and fibrinogen mRNA levels increased in infected rats, whereas those of A2M were unchanged and those of albumin were decreased. Two days after infection, AGP and fibrinogen mRNA levels were reduced in treated infected animals. PX was ineffective in modifying those of A2M and albumin. These data demonstrate, in vivo, that different acute phase proteins are individually regulated in sepsis. The in vivo effects of PX treatment support the hypothesis that TNF-α plays an important role in the regulation of AGP production, whereas other factors seem to be involved in the regulation of A2M, fibrinogen, and albumin expression.

Walnut blight is the major disease in the walnut orchards of Dauphiné (France). The causal bacterium Xanthomonas campestris pv. juglandis can infect leaves, catkins, buds and nuts and can induce important crop losses. Field observations have shown that the nature of the soil seems to play a prominent role in crop losses. The hypothesis that soil may modify the amount of polyphenols in walnut tissues and modify the natural resistance of fruits to necrosis has been assumed. We have shown that the nature of the soil, especially its permeability, induces variations in polyphenols in walnut tissues. Differences of susceptibility to walnut blight between the two cultivars studied, Franquette and Parisienne, may also be explained by different behaviours in relation to polyphenols. Moreover, the massive use of copper treatments against walnut blight may induce an imbalance in polyphenol contents and could explain crop losses despite repeated copper sprays. (© Inra/Elsevier, Paris.), Une explication possible des différences observées dans l’expression de la bactériose du noyer. La bactériose est la principale maladie des noyers dans les vergers du Dauphiné (France). La bactérie responsable de cette maladie, Xanthomonas campestris pv. juglandis, infecte les feuilles, les chatons, les bourgeons, les fruits et peut causer d’importantes pertes de récolte. Des observations de terrain ont montré que la nature du sol semblait influencer l’importance des pertes de récolte. L’hypothèse que la nature du sol puisse modifier la composition en polyphénols des tissus et ainsi modifier la résistance naturelle des fruits à la nécrose a été faite. Nous avons montré que la nature du sol, spécialement sa perméabilité, induit des variations dans la teneur en polyphénols des tissus. De même, les différences de sensibilité entre Franquette et Parisienne, les deux variétés étudiées, pourraient être expliquées par des différences de teneur en polyphénols. De plus, l’emploi massif de traitements cuivriques peut provoquer un déséquilibre dans la composition polyphénolique des tissus et pourrait expliquer dans certains cas, le manque d’efficacité de ces traitements. (© Inra/Elsevier, Paris.)

International audience

La nécrose bactérienne de la vigne : données biologiques et épidémiologiques, bases d'une stratégie de lutte

Une affection particulière sur plants de pomme de terre de la variété Lola est apparue en 1988 au Liban et s’est maintenue en 1989 et 1990. Elle se caractérise par la présence, sur tubercules, d’importantes nécroses superficielles de formes variables, mais le plus souvent en arcs ou en anneaux. Ces lésions nécrotiques apparaissent au moment de la récolte et s’intensifient au cours des premières semaines de conservation. La maladie est transmise à la descendance naturellement ou par inoculation mécanique à partir d’extraits de plantes infectées. Les techniques de détection mises en oeuvre (test Elisa, microscopie électronique, indexage biologique, plantes pièges) révèlent l’existence de 2 virus, les virus X et Y de la pomme de terre, ce dernier étant systématiquement présent dans les plantes issues des tubercules malades. Aucun virus susceptible de provoquer des nécroses tuberculaires comme le virus du Rattle du tabac, le virus du Mop Top de la pomme de terre ou le virus de la nécrose du tabac n’a été mis en évidence. L’isolement sur tabac du virus Y et sa réinoculation à des pommes de terre saines permet de reproduire les nécroses sur tubercules, ce qui n’est pas le cas avec le virus X; la présence de celui-ci au sein de l’inoculum ne modifie pas l’expression de ces symptômes. L’isolat du virus Y en cause appartient au sous-groupe YN par ses propriétés sérologiques et son comportement sur Nicotiana tabacum; cependant, les réactions qu’il induit sur les feuilles de pomme de terre (mosaïque forte de type YO) et sur d’autres plantes hôtes le distinguent de souches YN classiques ou d’autres isolats de PVY également associés à des nécroses tuberculaires. Cette maladie semble en effet proche d’affections décrites sur d’autres variétés au cours des dernières années en Europe de l’Est., A disease observed for the first time in 1988 and still present in 1989-1990 occurred in Lebanon on seed potatoes of the Lola cultivar. Tuber surface showed severely necrotic areas which varied in shape. Generally these had the appearance of fairly regular bows and rings (figs 1, 4), firstly protruding, then later becoming sunken and dark brown (fig 3). In some cases the skins were cracked. Under these superficial necroses, the adjacent flesh was brown, but there was no deep abnormality inside the tuber (figs 2, 6). The first symptoms appeared rather suddenly at the harvest period in a large number of tubers; in the others, they occurred during the first weeks of storage. The disease was tuber- and sap-transmitted. In tubers or leaves from infected plants, 2 viruses, potato virus Y (PVY) and potato virus X (PVX) were identified by ELISA and IEM, the former virus being systematically present. These serological detection methods, biological indexing, bait plants, and dip-method did not reveal any other viruses such as those which normally induce tuber necrosis, like tobacco rattle virus, potato mop-top and tobacco necrosis virus. PVY and PVX isolated from potato plants were mutiplied on tobacco and back-inoculated onto potatoes; the same necrotic symptoms on tubers were obtained with either PVY alone or associated with PVX. PVX alone did not provoke necrosis symptoms, nor did it modify the reaction of the plants when present in the inoculum with PVY. So it was clearly demonstrated that PVY was alone responsible for the necrotic reactions in the tubers. This PVY isolate was characterized as PVYN first serologically by using Mabs specific to this PVY subgroup, and also from the reactions that it induced on Nicotiana tabacum L Xanthi, Samsum or White Burley. However, when its host range and its effect on potato foliage were taken into consideration, it appeared distinct from our standard PVYN strain (tobacco veinal necrosis strain). Our results were also different from those of other authors who previously isolated PVYN from tubers showing identical necrosis. Indeed, such tuber necrotic ringspot diseases, consistently associated with PVY, have previously been reported in several European countries, including Hungary and Yugoslavia.

L’intensité et la fréquence des symptômes de la maladie du « Green crinkle » sur les fruits de la variété de pommier ’Golden Delicious’ varient d’une année à l’autre. Les symptômes sont soit de faibles déformations des fruits (« Green crinkle ») soit de fortes déformations accompagnées de nécroses (« Star crack »). Une étude conduite pendant 7 années en conditions naturelles a mis en évidence le rôle de l’action chaleur au cours des deux premiers mois de la vie du fruit, sur la sévérité d’expression des symptômes. Une somme d’actions chaleur exprimée en système exponentiel de base Q10 = 3,0 supérieure à 350 unités le 1er mois, suivie le 2e mois d’une somme d’actions chaleur inférieure à 550 unités favorisera l’expression des symptômes de « Green crinkle ». Ils seront associés à des symptômes de « Star crack » si la somme d’actions chaleur du 1er mois est comprise entre 350 et 300 unités. Une somme d’actions chaleur inférieure à 300 unités le 1er mois, favorisera l’expression du « Star crack » quelles que soient les températures du 2e mois., Green crinkle symptoms are variable according to year. Under the same conditions, very severe deformations of fruits (star crack) may take the place of slight deformations (green crinkle). Growth of fruits, symptoms on fruits and daily heat units during 60 days after full bloom were recorded over 7 years. Cumulated heat units were calculated according to an exponential system with the base Q10 = 3.0. A clear relation appeared between cumulated heat units and the frequency and nature of symptoms. When cumulated heat units were over 350 during the first month after blooming and under 550 during the second month, the symptoms observed were only of the green crinkle type. However, when the temperature during the first month was low (less than 300 heat units), all fruits showed symptoms of star crack type, whatever the temperature during the second month.

National audience; The behaviour of 4 strains of Cocksfoot Mild Mosaic Virus (CMMV) towards various lines of Triticum aestivum and T. turgidum was studied. Among 36 inoculated lines of Triticum, 3 are immune to the French strain known as CMMV-wheat. Some of the lines are locally infected at 15 and 24 °C : hypersensitivity occurs at 15 °C and rarely at both 15 and 24 °C. Other lines are immune at 15 °C but multiply the virus locally at 24 °C without producing symptoms. Some of the lines are systemically invaded at both 15 and 24 °C, or only at 24 °C, or only at 15 °C, after 4 days at 24 °C. Some of theses lines express mosaic symptoms at 15 °C or at 24 °C or at 15 and 24 °C. A final set of systemically invaded lines (Etoile de Choisy, Hardi, Rouge de Bordeaux) shows mosaic symptoms only after plants are transferred from 24 °C to 15 °C. Hypotheses are suggested to explain the behaviour of these lines of Triticum towards CMMV in relation to temperature.; Le comportement de quatre souches du virus de la mosaïque modérée du dactyle (VMMD) vis-à-vis de différentes lignées de Triticum aestivum et T. turgidum a été étudié. Sur 36 lignées de Triticum inoculées, 3 se sont avérées immunes à la souche française du VMMD appelée VMMD blé (VMMDB) Certaines lignées sont infectées localement à 15 et 24 °C ; elles expriment une modérée locale, réaction d’hypersensibilité soit à 15 °C soit plus rarement à 15 et 24 °C. D’autres lignées sont immunes à 15 °C mais multiplient localement ce virus à 24 °C sans donner de symptôme. Enfin, certaines lignées sont infectées d’une manière systémique à 15 et 24 °C, ou à 24 °C seulement, ou mosaïque. encore à 15 °C, après un séjour de 4 jours à 24 °C. Certaines de ces lignées expriment des symptômes de mosaïque à 15°C ou à 24 °C ; une dernière catégorie de lignées à infection systémique n’exprime des symptômes de mosaïque qu’après un transfert de température des plantes de 24 °C vers 15 °C. C’est le cas des variétés « Etoile de Choisy », « Hardi » et « Rouge de Bordeaux ». Des hypothèses sont proposées sur le déterminisme du comportement de ces lignées de Triticum, vis-à-vis du VMMDB, en fonction de la température.

National audience; Capsidiol concentration was determined at different levels of pepper stems inoculated with Phytophthora capsici. A decreasing gradient from top to bottom was found. The concentration was maximum in the invaded necrotized tissues and decreased in a nearly exponential way as samples were taken lower and lower. A detailed study seemed to show that the capsidiol gradient was determined more by the localization of necrotized tissues than in relation to the advancing mycelial front. With the resistant line « Phyo 636 » at 22 °C, the presence of internal nccrotic zones containing high quantities of capsidiol entailed the heterogeneous distribution of the phytoalexin in the stems. There was no correlation between the capsidiol concentration and the induced resistance scored at different levels of inoculated stems. Therefore, capsidiol seems to play only a minor role in the genetic resistance of pepper to P. capsici.; Des dosages de capsidiol ont été réalisés au cours de l’infection à différents niveaux dans les tiges contaminées. Ils montrent l’existence d’un gradient décroissant du haut vers le bas. Les concentrations sont maximales dans les tissus envahis et nécrosés et diminuent lorsqu’on s’en éloigne de manière approximativement exponentielle. Une étude fine du phénomène semble indiquer que le gradient de capsidiol dans la tige s'établit plus en fonction de la position des tissus nécrosés que de celle des hyphes mycéliens. L’existence de zones nécrotiques internes, particulièrement riches en capsidiol et se rencontrant préférentiellement chez la variété résistante « Phyo 636 » à 22 °C, introduit cependant une certaine hétérogénéité dans la distribution du capsidiol. Il n’y a pas de relation entre la concentration en capsidiol et le degré de résistance induite aux différents niveaux de tiges infectées : il est suggéré que le capsidiol ne joue pas un rôle majeur dans l’expression de la résistance génétique du piment à P. capsici.

A fumigated nursery bed on a sandy loam was inoculated with the ectomycorrhizal fungus Laccaria laccata and seeded with Douglas fir. Two types of inoculum were compared : mycelium grown in a vermiculite/peat mixture, and mycelium grown in liquid medium and entrapped in a calcium alginate gel with different quantities of mycelium. At the end of the first growing season, the alginate inoculum at the dose of 5 g mycelium (dry weight) per m2 proved to be the most efficient. The top dry weight of the seedlings in this treatment was 2.3 fold that of the noninoculated fumigated controls. This inoculation treatment also ensured nearly total mycorrhizal infection by L. laccata and reduced root necrosis caused by fungal pathogens., Des semis de Douglas (Pseudotsuga menziesii) ont été cultivés en pépinière sur un sol sablo-limoneux désinfecté au bromure de méthyle. L’inoculation par le champignon ectomycorhizien Laccaria laccata a été réalisée à l’aide de mycélium ayant poussé dans un mélange de vermiculite et de tourbe ou de mycélium produit en milieu liquide et inclus dans un gel d’alginate de calcium, avec trois doses différentes. Pendant toute la saison de végétation, des observations ont porté sur la croissance des semis, l’infection ectomycorhizienne et le développement des nécroses racinaires dues à Fusarium oxysporum. En fin d’année, les meilleurs résultats (par comparaison avec un témoin non inoculé) ont été obtenus avec l’inoculum inclus dans l’alginate à la dose de 5 g de mycélium (poids de matière sèche par m2), qui procure une infection presque totale par L. laccata, ramène l’intensité des nécroses racinaires à un niveau tolérable, et double la biomasse des semis. L’analyse de l’évolution de l’infection au cours de la saison de végétation montre que la supériorité de l’inoculum alginate est essentiellement due à une meilleure survie du champignon et à une infection plus étalée dans le temps que dans le cas de l’inoculum classique vermiculite/tourbe. Ces résultats sont d’un grand intérêt pratique, car on sait par ailleurs que L. laccata, dans ce type de pépinière, permet de produire des plants plus sains et de taille commerciale en 2 ans au lieu de 3 ans, et qu’il assure une meilleure reprise et une meilleure croissance initiale après transplantation en forêt.

L’ARN satellite du VMC (ARN-5) est retrouvé, biologiquement actif, plusieurs jours après son apport à une plante. Il ne s’accumule pas dans l’organe où il avait été apporté et ne migre pas à partir de cet organe. Cette propriété de survie a été établie selon deux méthodes : 1) Mise en évidence de l’ARN satellite dans un broyat de feuilles où il avait été antérieurement apporté ; 2) Inoculations, sur des feuilles d’étages différents d’une tomate, de l’ARN satellite et du génome viral. Cette dernière étude a été précédée par celle du mouvement, dans la tomate, du virus inoculé à un étage donné et donc, de la durée requise pour que les particules soient activement synthétisées dans les diverses parties de la plante. Les ARN-5 de type D (responsables du développement du syndrome nécrotique létal de la tomate) et de type R (inducteurs de la réduction des symptômes dus à l’infection par le génome viral chez cet hôte) présentent la même aptitude à survivre in vivo. La durée de survie de l’ARN-5 est de l’ordre de 25 j chez la tomate, 15 j chez le tabac et le concombre., The satellite RNA of CMV (RNA-5) keeps its biological activity several days after inoculation into leaves of a plant. Under these conditions, it does not accumulate in the inoculated organ and it does not migrate from this organ. This property of survival has been demonstrated by two methods : 1) recovery of the satellite RNA in crude sap from inoculated leaves ; 2) inoculation of different leaves of a tomato plant with satellite RNA in the presence of helper virus. A check was first made of the movement, within the tomato, of the virus inoculated into a given leaf, and then, of the time required for the particles to be actively synthesized in the various parts of the plant. RNA-5 of D type (causing tomato lethal necrosis) and of R type (reducing the symptoms induced in tomato by the helper virus) have the same capacity to survive in vivo. RNA-5 can survive for at least 25 days in tomato, or for 15 days in tobacco and cucumber.

National audience; Experiments of aphid transmission of CMV, with satellite RNA added at high (5 μg/ml) or very low (5 x 10-6 μg/ml) concentration, to tomato plants lead us to the following conclusions : 1) The transmission rate from a source plant is not directly correlated with its virus concentration. However, the transmission rate is dependent on the host species. So, muskmelon seems to be a better source than tomato or tobacco, although it is a less efficient host for virus multiplication. 2) The possibility of transmission of the satellite RNA, with the genomic RS,NA is associated with its concentration in the particles synthetized in the source. RNA-5 is always transmitted by aphids when it represents a great proportion of the viral RNA (tomato or tobacco as source plants, 45 to 50 per cent of RNA-5). So infected tomato plants only display necrosis. Nevertheless, RNA-5 may be not transmitted when it is produced in lower proportion in the source (muskmelon, 15 per cent of the viral RNA) since the inoculated tomato plants sometimes show mosaic and fern leaf symptoms, characteristic of the absence of replication of the satellite RNA. These last results differ from those obtained, with the same source, by mechanical inoculation. 3) A host plant in which satellite RNA has been actively replicated is a less efficient source for aphids than one containing a small amount of it. 4) Tomato plants, when 30 to 40 days old, stage of development to which they are usually transplanted in the field, are still very susceptible to CMV inoculation by aphids.; Les essais de transmission par pucerons du VMC, additionné de son ARN satellite à forte (5 μg/ml) ou très faible (5 x 10-6 μg/ml) concentration, à la tomate ont conduit aux conclusions suivantes : 1) Il n’existe pas de proportionnalité entre le taux de transmission assuré à partir d’une plante et sa concentration en particules virales infectieuses. L’espèce hôte joue par contre un rôle plus important au niveau de son efficacité comme source de virus. Ainsi, le melon constitue une source aussi efficace pour l’acquisition du VMC par les pucerons que la tomate ou le tabac bien qu’il soit moins favorable à la multiplication du virus. 2) La possibilité de transmission de l’ARN satellite avec les ARN du génome est liée à sa concentration dans les particules virales. Il est toujours transmis par les pucerons lorsqu’il a été abondamment répliqué dans la plante source (tomate ou tabac, 45 à 50 p. 100 de l’ARN viral encapsidé). Les tomates contaminées développent alors uniquement le syndrome nécrotique. Par contre, il peut ne pas être transmis s’il ne représente que 15 p. 100 environ de l’ARN viral encapsidé, puisque les tomates infectées extériorisent parfois les symptômes de filiformisme grave, caractéristiques de l’absence de réplication de l’ARN satellite nécrogène. Dans ce cas, les résultats diffèrent de ceux obtenus, à partir des mêmes sources, par transmission mécanique. 3) Lorsque la plante source de virus est riche en ARN satellite, son efficacité pour l’acquisition du virus par les aphides paraît nettement réduite. 4) Des tomates âgées de 30 à 40 j, stade auquel elles sont généralement repiquées au champ, sont toujours très sensibles à l’inoculation par pucerons.

Le virus de la mosaïque modérée du dactyle souche blé (VMMDB) décrit en France en 1977 sous le nom de virus de la nécrose et mosaïque du dactyle, se distingue des différentes souches du virus type décrit en Allemagne par sa gamme d’hôtes et en particulier sa capacité à infecter le blé. L’expression du VMMDB chez le blé var. « Etoile de Choisy » a été étudiée. Chez cette plante, on peut mettre en évidence la multiplication du virus pour différentes températures comprises entre 10 et 29 °C. Les symptômes nécrotiques observés sur la feuille inoculée ne se manifestent qu’entre 10 et 17 °C à température constante. Néanmoins, un séjour de 6 h à 15 °C est suffisant pour induire l’apparition des symptômes nécrotiques à 24 °C. L’infection systémique de la plante par le virus n’est observée qu’à une température au moins égale à 17 °C. Seuls les transferts de température permettent l’expression des symptômes de type mosaïque. Ceux-ci sont obtenus si les plantes séjournent au moins 36 h à 24 °C avant d’être transférées à 15°C. Une forte lumière accélère l'apparition des symptômes et en augmente l’importance. Des transferts alternés entre 24 et 15 °C permettent un accroissement considérable de la concentration virale ; celle-ci peut atteindre 1 mg par g dans la 81 feuille de blé. Les conditions d’expression des symptômes de nécrose et de mosaïque dus au virus de la mosaïque du tabac sur Nicotiana tabacum var. xanthi « nc » se distinguent fondamentalement de celles qui sont exigées dans le cas du VMMDB sur blé. En effet, pour ce dernier virus, les symptômes de nécrose et mosaïque sont observés à la même température. Lorsque l’infection systémique est acquise, après un séjour suffisant à haute température celle-ci se maintient à basse température., Virus content of symptoms expression have been investigated in CMMVB-infected wheat (var. « Etoile de Choisy ») at temperatures ranging from 10 to 29 °C. Necrotic symptoms were observed on the inoculated leaves only between 10 and 17 °C. Nevertheless only 6 h at 15 °C were required for the production of necrotic symptoms at 24 °C. Systemic infection of the plant by the virus could be observed only at temperatures exceeding 15 °C. Production of mosaic symptoms occurred only after transfers in temperature. They occured when the plants were kept at least 36 h at 24 °C before transfer to 15 °C. They appeared earlier and were more pronounced under intense illumination. Successive transfers between 24 °C and 15 °C resulted in a considerable increase in virus concentration that was in the order of 1 mg/g in the 8th wheat leaf. Conditions for production of necrotic and mosaic symptoms in tobacco mosaic virus-infected Nicotiana tabacum var. xanthi nc are basically different from those required in VMMDB-infected wheat. For the latter combination, virus necrosis and mosaic symptoms could be observed at the same temperatures. Once the systemic symptoms had appeared after sufficient time at high temperature, they remained after transfer to lower temperatures.

Une bactérie du genre Erwinia cause un dépérissement grave qui limite la culture du papayer en Guadeloupe. La maladie, systémique, se signale par le flétrissement puis la nécrose d’une feuille apicale et la présence de taches sombres, huileuses, situées au point d’insertion du pétiole et sur le tronc, desquelles exsude un mucus bactérien abondant. L’observation des symptômes à la suite d’infections naturelles et d’inoculations sous serre permet de caractériser deux types d’expression de la maladie en fonction de l’origine, aérienne ou tellurique, de l’inoculum. Une contamination d’origine aérienne provoque les symptômes caractéristiques, mais si l’origine est tellurique, la racine se nécrose, les taches huileuses apparaissent aussi au collet et le xylème est colonisé. L’étude de cultures échelonnées permet : (1) de démontrer le caractère saisonnier des épidémies (septembre à novembre) ainsi qu’une progression de la maladie du type « intérêts composés », en relation avec la pluviométrie ; (2) de conclure à une contamination primaire tellurique, puis secondaire aérienne ; (3) de définir la période de plantation favorable (octobre à mars) permettant d’assurer une certaine production fruitière en échappant à la maladie., Papaya decline caused by Erwinta sp. limits the development of this crop in the French West Indies. This systemic disease may be characterized by wilt, apical leaf burn and dark, regular, greasy, water-soaked spots on the petiole insertion and stem. Abundant bacterial slime oozes from these spots. Symptoms observed on naturally infected material, as well as pathogenicity tests, distinguished two types of disease expression : airborne infections causing typical symptoms, and soil-borne infections causing root necrosis, collar spots and xylem colonization. Staggered plantations have shown : (1) a seasonal pattern of epidemics (September through November), with progression of the compound interest type, related to rainfall ; (2) soil-borne primary infections followed by air-borne secondary ones ; (3) the advantage of planting in October through March to ensure reasonable yield.

Des inoculations sont faites sur disques de feuilles de Gerbera blessés et maintenus en survie pour voir si ce test peut être un indicateur satisfaisant de la sensibilité du matériel végétal vis-à-vis de Phytophthora cryptogea, parasite tellurique. On constate, d’une part, que les 23 isolats de P. cryptogea inoculés sur clone sensible induisent tous des nécroses nettes mais à des degrés divers (tabl. 1), d’autre part, que l’inoculation avec une souche de P. cryptogea de 24 clones de Gerbera et de 80 descendants issus de 8 croisements montre des différences nettes de sensibilité au sein du matériel végétal (tabl. 2 et 3). Les premiers résultats d’inoculations clones végétaux - souches du parasite ne permettent pas de trancher sur l’existence possible d’une interaction clones-souches (fig. 1a et 1b). Dans la cinétique de l’infection les paramètres importants paraissent être la dose d’inoculum pour l’installation (tabl. 4), l’âge des feuilles (fig. 2) et les conditions d’éclairement durant l’infection (tabl. 5, fig. 3 et 4) ; quant à la relation entre réponses données par le « test feuille » et infection par voie racinaire, les résultats actuels (tabl. 6 et 7) paraissent relativement satisfaisants bien que, dans le détail, certaines réponses soient à vérifier ultérieurement., Inoculations are performed on discs of Gerbera leaves to state the susceptibility of Gerbera plants towards the P. cryptogea. Twenty three isolates of P. cryptogea were inoculated on susceptible variety and extended necrosis appeared varying with isolates (table 1). On the other hand, 24 varieties of Gerbera and 80 progenies from 8 crossings between parent plants differing in susceptibility were inoculated with a strain of P. cryptogea ; clear-cut differences were obvious in the necrosis observed (tables 2 and 3). First results obtained, when different varieties were inoculated with various strains of P. cryptogea (fig. 1a and 1b), are not sufficient to conclude wether an interaction varieties-strains exists or not. For the development of infection, important factors are the amount of inoculum (table 4), age of leaves (fig. 2) and the light (table 5, fig. 3 and 4). At last the relation between results obtained on discs of Gerbera leaves and results after inoculation on roots seems to be correct enough (tables 6, 7) though some results are curious and are to test again.

Des tomates infectées par le VMC extériorisent des symptômes de mosaïque et filiformisme ou de nécrose létale. Le développement du syndrome nécrotique est caractéristique de la présence d’ARN-5 (satellite du VMC) dans les nucléoprotéines. De plus, l’addition d’ARN-5 purifié à partir de différentes souches du virus (I17N, D, TL, S) à des isolats dépourvus d’ARN satellite et inducteurs de mosaïque et filiformisme (I17F, K, M) provoque le développement de la nécrose. Une souche particulière de VMC (la souche R), pourvue d’ARN-5, n’induit pas de nécrose chez les tomates qu’elle infecte. L’adjonction de cet ARN satellite aux génomes viraux I17F, K ou M se traduit par la réduction des symptômes de filiformisme résultant de l’infection par le seul génome viral. Ces résultats suggèrent l’existence de deux types d’ARN satellite se différenciant par leur aptitude à induire ou non la nécrose létale de la tomate. Lorsqu’ils sont simultanément présents dans l’inoculum, l’effet provoqué par la synthèse de l’ARN satellite nécrogène domine si sa concentration initiale est suffisante pour que toutes les tomates où il a été inoculé seul avec le génome viral se nécrosent., Tomato plants when infected with cucumber mosaic virus may develop mosaic and fern leaf symptoms or lethal necrosis. The necrotic syndrome is associated with the presence of RNA-5 (CMV-satellite) in the nucleoproteins. When added to different viral genomes (I17F, K, M) inducing fern leaf symptoms, RNA-5 of various strains (I17N, D, TL, S) provokes the development of typical necrosis on so infected tomato plants. A particular CMV strain (R strain) cannot induce the necrosis, although great amount of RNA-5 is synthesized on tomato. The inoculation of the genomes I17F, K or M with CMV-R satcllite RNA results in an important decrease of the symptoms of mosaic and fern leaf caused by the infection with the genome alone. These results suggest that there are two types of satellite RNAs differing by their capacity to induce the tomato necrosis. When they are present together in the inoculum, the plants essentially develop necrosis if the concentration of the " necrogen "satellite RNA is important enough to induce necrosis in all the tomato plants where it has been inoculated with the genome RNAs. In other cases, it seems that the two satellite RNAs may interfere.

La nécrose hivernale des rameaux du pêcher. Reproduction expérimentale des symptômes à la suite des traitements pesticides