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Objectifs La methyltransferase EZH2 et la demethylase JMJD3 determinent les niveaux de trimethylation de la lysine 27 de l’histone H3 (H3K27me3). Le role d’EZH2 dans la promotion et la progression tumorale prostatique a ete largement etudie mais peu d’etudes impliquent JMJD3 dans ce cancer. L’objet de notre etude porte donc sur le role de JMJD3 dans la genese et le developpement du cancer de la prostate. Methodes L’etude des niveaux transcriptionnels et proteiques de JMJD3 et d’EZH2 a ete realisee par RT-qPCR et Western Blot sur deux lignees tumorales prostatiques (LNCaP et PC-3) et une lignee saine (PWR-1E) ainsi que sur des biopsies de prostate humaine. De plus, une analyse par immunoprecipitation de la chromatine suivie d’une qPCR (ChIP-qPCR) sur cellule, a permis d’identifier des genes cibles des deux proteines. Resultats Nos etudes moleculaires ont montre une deregulation simultanee de JMJD3 et d’EZH2 dans les differentes lignees tumorales prostatiques ainsi que sur des biopsies de prostate humaine. De plus, nous avons identifie in vitro trois genes cibles communs (ERα, RARβ2 et RGMA) a ces deux proteines, qui presentaient egalement une augmentation concomitante d’EZH2 et de H3K27me3 dans les tissus de cancer de prostate humaine. Conclusion Ces resultats corroborent avec le fait que JMJD3 pourrait agir comme suppresseur de tumeur. De plus, l’utilisation d’inhibiteurs chimiques specifiques de JMJD3 (GSK-J4) et/ou d’EZH2 (DZNeP) ou des shRNAs sur des lignees continues de cancer de prostate ainsi qu’une etude sur souris Nude par xenogreffe, permettront de determiner si elles sont des cibles preferentielles pour le developpement de nouvelles therapies.

Objectifs La marque epigenetique H3K27me3 et ses regulateurs, la methyltransferase EZH2 et la demethylase JMJD3 jouent un role important dans la progression tumorale prostatique. Le but de l’etude a ete de determiner le niveau transcriptionnel des genes enrichis en H3K27me3 dans le cancer de la prostate et d’identifier l’impact de JMJD3 et d’EZH2 par depletion chimique afin de comprendre leur implication sur la regulation ces genes. Methodes Une etude par microarrays a permis d’etablir la distribution de H3K27me3 a l’echelle du genome en relation avec les parametres clinicopathologiques dans le cancer de la prostate. Le profil d’expression d’une vingtaine de genes a ete etudie par analyse transcriptomique a l’aide de TaqMan Low Density Arrays (TLDA) sur des biopsies de prostate representant deux groupes tumoraux (score de Gleason > 7 et ≤ 7) et un groupe sain. De plus, trois lignees continues tumorales prostatiques (DU 145, PC-3 et LNCaP) ont ete traitees avec des inhibiteurs pharmacologiques de JMJD3 (GSK-J4) ou d’EZH2 (DZNeP) pour determiner leur implication sur l’expression de la vingtaine de genes etudies. Resultats L’etude des biopsies montre une discrimination significative de l’expression de l’ensemble des genes etudies entre les differents types tumoraux ainsi qu’avec le groupe sain. De plus, six genes ressortent davantage de cette etude selon les differents groupes cliniques : JMJD3, EZH2, MGMT, TRA2A, U2AF1 et RPS6KA2. L’etude in vitro a tout d’abord permis de determiner l’IC50 de la molecule GSK-J4 a 48 h de traitement sur les trois lignees DU 145 (22,9 μM), PC-3 (3,5 μM) et LNCaP (3,9 μM). Par ailleurs, le traitement au DZNeP est realise pendant 72 h a 10 μM. Les resultats montrent une difference de sensibilite au GSK-J4 significative selon les lignees. En effet, l’expression du pool de la vingtaine de genes se trouve significativement diminuee dans les LNCaP contrairement aux PC-3 et DU 145. Conclusion Cette etude permet de mieux comprendre l’impact de la marque epigenetique H3K27me3 et de ces regulateurs, JMJD3 et EZH2, sur l’expression transcriptionnelle des genes impliques dans le cancer de la prostate afin d’identifier de potentiels nouveaux marqueurs. De plus, l’utilisation d’« epidrugs », comme le GSK-J4 ou le DZNeP, permettra de developper de nouvelles strategies therapeutiques.