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Increasing resistance to common antibiotics is becoming a major challenge that requires the development of new antibacterial agents. Peptidoglycan is an essential heteropolymer of the bacterial envelope that ensures the integrity and shape of all bacteria and is also an important target for antibiotics. The biosynthesis of peptidoglycan depends on a lipid carrier, undecaprenyl phosphate. As a byproduct of peptidoglycan polymerization, the lipid carrier is released as undecaprenyl pyrophosphate, which must be recycled to allow new polymerization cycles. To this end, it undergoes a dephosphorylation process catalyzed by the membrane phosphatase BacA, which is specific and highly conserved in bacteria. In the present study, we identified small molecules displaying inhibitory potency towards BacA. We began by preparing a commercial compound library, followed by high-throughput virtual screening by ensemble docking using the 3D structure of BacA and molecular dynamics snapshots to account for the flexibility of the protein. Of 83 compounds computationally selected and tested in a biochemical assay, one sulfamoylthiophene molecule showed significant inhibition of the undecaprenyl pyrophosphate dephosphorylation activity catalyzed by BacA. Subsequently, an additional 33 scaffold analogs were selected and acquired, of which 6 compounds exhibited BacA inhibition. The IC

Resume Introduction L’automatisation de la dispensation individuelle nominative induit des changements de pratique sur l’ensemble du circuit du medicament, c’est pourquoi l’integration d’un automate doit etre anticipee. Une analyse preliminaire des risques a ete realisee avant l’automatisation. Neanmoins, des difficultes organisationnelles intrinseques au sein de la pharmacie a usage interieur (PUI) ont surgi suite a l’automatisation. Objectif L’objectif de notre demarche etait de realiser une analyse de processus et des pratiques pour identifier les causes de ces difficultes puis de mettre en place des mesures correctives ad hoc. Materiels et methodes Une cartographie du processus, une ethnographie organisationnelle et une enquete de satisfaction ont ete realisees. Resultats Suite a l’identification des causes, des mesures correctives ont ete mises en place, telles que : la redaction de nouvelles procedures en fonction des besoins, la designation d’un informaticien referent, la reorganisation de l’espace de travail, du materiel et de la gestion du temps. Depuis la mise en place des mesures correctives nos taux de non-conformite releves etaient de 1,14 % apres 199 jours et de 0,97 % apres 462 jours et sont semblables a ceux retrouves dans la litterature. Discussion/conclusion Il semble que la plupart des difficultes rencontrees soient liees a un changement de pratique majeur, lie a la possibilite d’obtenir rapidement des doses unitaires, et aux conditions de l’environnement de travail. Une nouvelle demarche d’amelioration continue sera initiee pour l’etape d’administration des medicaments.

Summary Intranasal naloxone aims at preventing opioid overdose related deaths in active drug users. In France, it has been available since July 2016 through a temporary approval which requires a hospital-based pharmacy and a nominative registration of each patient. We present the characteristics of the first patients who could receive this prescription in our hospital-based addiction center and how they used naloxone during follow-up. Results favor a larger dispensing of naloxone. Patients’ as well as peers’ and families’ education is needed.

Enzymes catalyzing the biosynthesis of bacterial peptidoglycan represent traditionally a collection of highly selective targets for novel antibacterial drug design. Four members of the bacterial Mur ligase family—MurC, MurD, MurE and MurF—are involved in the intracellular steps of peptidoglycan biosynthesis, catalyzing the synthesis of the peptide moiety of the Park’s nucleotide. In our previous virtual screening campaign, a chemical class of benzene-1,3-dicarboxylic acid 2,5-dimethylpyrrole derivatives exhibiting dual MurD/MurE inhibition properties was discovered. In the present study we further investigated this class of compounds by performing inhibition assays on all four Mur ligases (MurC–MurF). Furthermore, molecular dynamics (MD) simulation studies of one of the initially discovered compound 1 were performed to explore its geometry as well as its energetic behavior based on the Linear Interaction Energy (LIE) method. Further in silico virtual screening (VS) experiments based on the parent active compound 1 were conducted to optimize the discovered series. Selected hits were assayed against all Escherichia coli MurC–MurF enzymes in biochemical inhibition assays and molecules 10–14 containing benzene-1,3-dicarboxylic acid 2,5-dimethylpyrrole coupled with five member-ring rhodanine moiety were found to be multiple inhibitors of the whole MurC–MurF cascade of bacterial enzymes in the micromolar range. Steady-state kinetics studies suggested this class to act as competitive inhibitors of the MurD enzyme towards d -Glu. These compounds represent novel valuable starting point in the development of novel antibacterial agents.

MurF ligase is a crucial enzyme that catalyses the ultimate intracellular step of bacterial peptidoglycan biosynthesis, and thus represents an attractive target for antibacterial drug discovery. We designed, synthesized and evaluated a new series of cyanothiophene-based inhibitors of MurF enzymes from Streptococcus pneumoniae and Escherichia coli. The target compounds had increased polarity compared to the first generation of inhibitors, with demonstrated enzyme inhibitory potencies in the low micromolar range. Furthermore, the best inhibitors displayed promising antibacterial activities against selected Gram-positive and Gram-negative strains. These results represent an important step towards the development of new antibacterial agents targeting peptidoglycan biosynthesis.

We present a modern in silico virtual screening workflow towards novel MurB inhibitors. Namely, the field of antibacterial research is in crucial need of novel lead compounds on new or underexplored therapeutic targets such as MurB. We identified three structurally distinct compounds that indicated promising micromolar inhibitory activity on E. coli MurB. All three compounds did not display cytotoxicity on HepG2 cell line, but also did not possess in vitro antimicrobial activity against S. aureus and E. coli. After the second biological evaluation using radio-labelled substrates in a MurA-MurB coupled test, only marginal inhibitory potency could be reproduced on MurB. As no compound in the series was able to significantly decrease the residual activity of the enzyme, we decided to report the complete inactive compound set to be used as decoys.

Introduction La Haute Autorite de Sante promeut la reevaluation de l’antibiotherapie a 72 h (indicateur l’ICATB2, item A11d). Nous avons souhaite connaitre la faisabilite du suivi de cet item, avec un focus sur les cephalosporines de 3e (C3G) et 4e (C4G) generation, qui figurent dans la liste des antibiotiques (ATB) critiques de l’ANSM. Materiels et methode Les identites de tous les patients avec prescription de C3G/C4G ont ete recherchees dans le logiciel d’aide a la prescription medicamenteuse (LAP) (Genois/Phedra®, deploye sur 482 lits de MCO soit 84 % des lits de l‘hopital ; exclus : reanimations, USIC, urgences) sur 14 jours (avril 2018). Deux sources ont ensuite ete auditees : (1) dossier informatise (Middlecare®) : compte-rendus d’hospitalisation (CRH) et avis specialises formalises (contenu saisi en texte libre) ; (2) champ dedie « reevaluation », a saisie facultative, dans le LAP. – Audit « donnees CRH » : les CRH et avis specialises ont ete analyses manuellement a l’aide d’une grille a 13 items. La prescription etait consideree comme reevaluee si le CRH citait explicitement l’ATB, ET mentionnait une poursuite ou une modification. – Audit « donnees LAP » : une requete Business Object® a extrait les donnees du LAP. La prescription etait consideree comme reevaluee a 72 h si le champ « Reevaluation » avait ete renseigne par le medecin OU si l’ATB avait ete arrete dans les 72 h suivant son initiation. Resultats et discussion Soixante-dix-huit dossiers patients ont ete analyses. (1) Audit « CRH » : sur 78 dossiers, la cephalosporine prescrite est mentionnee dans 68 cas (87 %) (ceftriaxone, cefotaxime, ceftazidime, cefepime), la date d’initiation dans 60 cas (77 %), et le site infecte dans 76 cas (98 %). Dans 4 % des dossiers (3/78), la tracabilite de la reevaluation a ete, apres analyse, consideree comme non requise (C3G/C4G en derniere ligne, choix argumente et pertinent). Pour les 75 autres CRH, la reevaluation etait tracee dans 79 % des cas (59/75) : 37 % des patients dans les 72 h, 24 % de reevaluations plus tardives et 39 % non datees. (2) Audit « LAP » : 22 % des prescriptions ont ete considerees comme reevaluees a 72 h (arret de l’ATB). En revanche, le champ « reevaluation » du LAP n’a jamais ete renseigne. Conclusion Un audit de 2 semaines cible sur les C3G/C4G montre que dans un hopital avec dossier patient informatise, la tracabilite de la reevaluation de l’antibiotherapie dans les CRH est possible (retrouvee dans 8 CRH sur 10). Cependant, seul un suivi exhaustif (tous les CRH, tous les antibiotiques sensibles, en continu) permettrait de suivre de facon quantitative l’amelioration des pratiques. Un tel suivi est inenvisageable manuellement. Une evolution rapide des outils informatiques, notamment un champ dedie obligatoire dans les LAP, semble la solution la plus simple a mettre en œuvre. Ces difficultes seront communiquees aux tutelles a l’origine de la redaction de l’indicateur A11d pour le faire evoluer.

Introduction La melatonine est une hormone impliquee dans les rythmes circadiens. Une specialite a base de Melatonine a liberation prolongee (MLP) 2 mg est disponible pour les troubles du sommeil chez les plus de 55 ans. L’objectif etait de realiser un etat des lieux des prescriptions de MLP en SSR geriatrie. Materiels et methode Etude retrospective. Pour les patients ayant beneficies de MLP du 10/02/2017 au 10/08/2018, les informations suivantes ont ete recueillies dans le logiciel prescription et le dossier medical informatise : âge, sexe, taille, poids, IMC, dose journaliere et duree de traitement, prise de benzodiazepine (BZD) a l’entree et a la sortie d’hospitalisation, comorbidites (demence, AVC). Les poursuites du traitement etaient objectivees : en hospitalisation, par la conciliation de sortie realisee systematiquement, et en ambulatoire, par la pharmacie d’officine. Resultats et discussion Sur 18 mois, 31 patients (13 femmes, 18 hommes) d’âge moyen 85,73 ans ont beneficie de MLP. La posologie et la duree moyenne etait de 2,38 mg (min = 2 mg, max = 6 mg) pour 45,22 jours. Aucune influence significative de l’âge, du nombre et du type de comorbidites, de l’IMC, du sexe n’a ete trouvee sur la posologie prescrite. Les comorbidites les plus representees etaient la demence (42 %) et les antecedents d’AVC (34 %). Pour 39 % (n = 12), 32 % (n = 10), 29 % (n = 9) des patients la MLP a ete : arretee la veille de la sortie, au cours du sejour et poursuivi au moment de la sortie. Sur les 9 patients sortis avec de la MLP, 22 % (n = 2) ont recupere de maniere reguliere leur traitement a la pharmacie et 33 % (n = 3) uniquement le premier mois. Soixante-et-onze pourcents (n = 22) des patients avaient une BZD a l’entree et 42 % a la sortie (n = 13). Soixante-six pourcents (n = 6) des patients beneficiaient a la sortie d’une co-prescription de MLP avec une BZD. Dans la litterature les posologies efficaces varient en fonction des comorbidites. Il est retrouve une posologie de 2 mg de MLP pendant 4 semaines pour les patients presentant une demence et de 2 mg de MLP pendant 24 semaines pour les patients aux antecedents d’AVC. La MLP est frequemment arretee la veille de la sortie d’hospitalisation, ainsi qu’au cours du sejour suite a une reponse partielle ou une inefficacite. De plus seul 22 % des patients poursuivent leur traitement par MLP en ville. Cela peut s’expliquer par le cout (environ 30€ non rembourses pour 30 comprimes) mais aussi par un mesusage. En effet la MLP a une action chronobiotique sur le rythme circadien en plus d’une action soporifique. L’action chronobiotique peut provoquer, lors d’une prise trop precoce ou tardive par rapport a l’heure habituelle de coucher, un retard ou une avance de phase du sommeil. Le patient ou le clinicien peuvent alors juger a tort d’une inefficacite ou d’une reponse partielle de la MLP motivant alors l’introduction concomitante de BZD. Conclusion La MLP pourrait presenter un interet pour les personnes âgees atteintes d’insomnie associe a un antecedent d’AVC ou demence. Neanmoins, aucune recommandation de bon usage n’existe encore. Pour le moment, en raison de son cout et de ses modalites d’utilisation, la MLP semble difficile a utiliser correctement.

Background: MurE controls stereochemical incorporation of lysine or diaminopimelate into peptidoglycan stem peptides. Results: The structure of S. aureus MurE reveals an unexpected lack of specificity for lysine within the active site. Conclusion: Incorporation of lysine is supported by the comparatively high concentration of cytoplasmic lysine, not enzyme specificity. Significance: This study provides new perspectives in targeting Gram-positive peptidoglycan assembly for antimicrobial discovery., Formation of the peptidoglycan stem pentapeptide requires the insertion of both l and d amino acids by the ATP-dependent ligase enzymes MurC, -D, -E, and -F. The stereochemical control of the third position amino acid in the pentapeptide is crucial to maintain the fidelity of later biosynthetic steps contributing to cell morphology, antibiotic resistance, and pathogenesis. Here we determined the x-ray crystal structure of Staphylococcus aureus MurE UDP-N-acetylmuramoyl-l-alanyl-d-glutamate:meso-2,6-diaminopimelate ligase (MurE) (E.C. 6.3.2.7) at 1.8 Å resolution in the presence of ADP and the reaction product, UDP-MurNAc-l-Ala-γ-d-Glu-l-Lys. This structure provides for the first time a molecular understanding of how this Gram-positive enzyme discriminates between l-lysine and d,l-diaminopimelic acid, the predominant amino acid that replaces l-lysine in Gram-negative peptidoglycan. Despite the presence of a consensus sequence previously implicated in the selection of the third position residue in the stem pentapeptide in S. aureus MurE, the structure shows that only part of this sequence is involved in the selection of l-lysine. Instead, other parts of the protein contribute substrate-selecting residues, resulting in a lysine-binding pocket based on charge characteristics. Despite the absolute specificity for l-lysine, S. aureus MurE binds this substrate relatively poorly. In vivo analysis and metabolomic data reveal that this is compensated for by high cytoplasmic l-lysine concentrations. Therefore, both metabolic and structural constraints maintain the structural integrity of the staphylococcal peptidoglycan. This study provides a novel focus for S. aureus-directed antimicrobials based on dual targeting of essential amino acid biogenesis and its linkage to cell wall assembly.

International audience; Peptidoglycan is an essential component of the bacterial cell wall, and enzymes involved in its biosynthesis represent validated targets for antibacterial drug discovery. MurF catalyzes the final intracellular peptidoglycan biosynthesis step: the addition of D-Ala-D-Ala to the nucleotide precursor UDP-MurNAc-L-Ala-γ-D-Glu-meso-DAP (or L-Lys). As MurF has no human counterpart, it represents an attractive target for the development of new antibacterial drugs. Using recently published cyanothiophene inhibitors of MurF from Streptococcus pneumoniae as a starting point, we designed and synthesized a series of structurally related derivatives and investigated their inhibition of MurF enzymes from different bacterial species. Systematic structural modifications of the parent compounds resulted in a series of nanomolar inhibitors of MurF from S. pneumoniae and micromolar inhibitors of MurF from Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Some of the inhibitors also show antibacterial activity against S. pneumoniae R6. These findings, together with two new co-crystal structures, represent an excellent starting point for further optimization toward effective novel antibacterials.

The cluster of genes of capsular K5 heparosan is composed of three regions, involved in the synthesis and the exportation of the polysaccharide. The region 2 possesses all the necessary genes involved in the synthesis of heparosan, namely kfiA, encoding alpha-4-N-acetylglucosaminyltransferase, kfiD, encoding β-3-glucuronyl transferase, kfiC, encoding UDP-glucose dehydrogenase (UDP-glucuronic acid synthesis), and kfiB encoding a protein of unknown function. The cloning and expression of kfiADCB into Escherichia coli K-12 were found to be sufficient for the production of heparosan, which accumulates in the cells due to a lack of the exporting system. The concentration of recombinant heparosan reached one gram per liter under fed-batch cultivation. The cytoplasmic localization of heparosan inside the bacteria allowed subsequent enzymatic modifications such as a partial degradation with K5 lyase when expressed intracellularly. Under these conditions, the production of DP 2-10 oligosaccharides occurred intracellularly, at a concentration similar to that of recombinant intracellular heparosan.

International audience; Colicin M (ColM) is the only enzymatic colicin reported to date that inhibits cell wall peptidoglycan biosynthesis. It catalyzes the specific degradation of the lipid intermediates involved in this pathway, thereby provoking lysis of susceptible Escherichia coli cells. A gene encoding a homologue of ColM was detected within the exoU-containing genomic island A carried by certain pathogenic Pseudomonas aeruginosa strains. This bacteriocin (pyocin) that we have named PaeM was crystallized, and its structure with and without an Mg2+ ion bound was solved. In parallel, site-directed mutagenesis of conserved PaeM residues from the C-terminal domain was performed, confirming their essentiality for the protein activity both in vitro (lipid II-degrading activity) and in vivo (cytotoxicity against a susceptible P. aeruginosa strain). Although PaeM is structurally similar to ColM, the conformation of their active sites differs radically; in PaeM, residues essential for enzymatic activity and cytotoxicity converge toward a same pocket, whereas in ColM they are spread along a particularly elongated active site. We have also isolated a minimal domain corresponding to the C-terminal half of the PaeM protein and exhibiting a 70-fold higher enzymatic activity as compared with the full-length protein. This isolated domain of the PaeM bacteriocin was further shown to kill E. coli cells when addressed to the periplasm of these bacteria.

D-Glutamic acid-adding enzyme (MurD ligase) catalyses the addition of D-glutamic acid to UDP-N-acetylmuramoyl-L-alanine, an essential cytoplasmic step in the pathway for bacterial cell-wall peptidoglycan synthesis. As such, it represents an important antibacterial drug-discovery target enzyme. Recently, several series of compounds have been synthesised and found to inhibit MurD from Escherichia coli, the best one having an IC(50) value of 8 μM. In the present work, we have tested 20 of these compounds against the MurD enzymes from Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Borrelia burgdorferi and Mycobacterium tuberculosis. Most of the E. coli MurD inhibitors appeared less efficient against the four other orthologues. This divergent result can be explained by the differences in amino acid sequences and topologies of the active sites of the MurD ligases studied.

Undecaprenyl phosphate is the essential lipid involved in the transport of hydrophilic motifs across the bacterial membranes during the synthesis of cell wall polymers such as peptidoglycan. A HPLC procedure was developed for the quantification of undecaprenyl phosphate and its two derivatives, undecaprenyl pyrophosphate and undecaprenol. During the exponential growth phase, the pools of undecaprenyl phosphate and undecaprenyl pyrophosphate were ca. 75 and 270 nmol/g of cell dry weight, respectively, in Escherichia coli, and ca. 50 and 150 nmol/g, respectively, in Staphylococcus aureus. Undecaprenol was detected in S. aureus (70 nmol/g), but not in E. coli (

Introduction La scintigraphie aux leucocytes radiomarques a l’exametazime-99mTc (Ceretec®-99mTc) est utilisee dans le cadre des etudes de foyers infectieux. Un controle de viabilite des cellules radiomarquees a ete mis en place en suivant la « methode manuelle par coloration d’exclusion » de la pharmacopee europeenne. Cet essai necessitant l’observation au microscope d’un echantillon radioactif, la question de la radio-exposition du cristallin s’est posee. Une etude a alors ete realisee en vue d’estimer et d’optimiser l’ensemble des doses recues par l’operateur, en particulier lors de l’etape de numeration sous microscope. Materiels et methode La methodologie de l’etude a ete definie avec une Personne competente en radioprotection. Le controle de viabilite a ete decompose en 4 etapes depuis le recueil de la solution mere de leucocytes radiomarques jusque leur observation au microscope. A chaque etape, les activites manipulees ont ete mesurees avec un activimetre CRC15®. Tout au long du processus, les principes fondamentaux de radioprotection (temps, ecran, distance) ont ete appliques. Pour chaque controle (n = 10), une surveillance dosimetrique de l’operateur a ete menee par le port de dosimetres passifs et operationnels (dosimetrie corps entier), et d’une bague thermoluminescente (dosimetrie extremites). Pour le cristallin, en l’absence de dosimetre dedie, une estimation a ete realisee par des mesures a 25 cm avec un radiametre Identifinder®. La prise en compte de la duree de chaque etape (de 30 a 150 s) a permis de passer des debits de doses mesurees (μSv/h) aux doses recues (μSv). Ces mesures estiment egalement la dose corps entier. Resultats et discussion Les activites manipulees ont ete tres basses : de 25 MBq en moyenne pour la solution mere a 0,025 MBq pour la solution observee au microscope. Quant aux mesures de surveillance dosimetrique corps entier et extremites, elles n’ont pas atteint les seuils de detection des appareils et sont donc bien inferieures aux limites reglementaires (20 mSv/an pour le corps entier, 500 mSv/an pour les extremites). L’utilisation d’ecrans adaptes (pot, paravent et valisette plombes) ainsi que l’eloignement de la solution mere restante des la fin de son utilisation a permis de diminuer les doses cristallin (et corps entier) de 12 a 3 nSv (de 0,012 μSv a 0,003 μSv) pour chaque controle. L’exposition restante correspond essentiellement a l’etape d’observation sous microscope qui est la plus longue (2 nSv/150 s). Bien que la Commission Internationale de Protection radiologique (CIPR) propose de diminuer la limite reglementaire de la dose au cristallin de 150 a 20 mSv/an, l’exposition de quelques nSv/controle n’augmente pas le risque de cataracte radio-induite. Conclusion L’etude dosimetrique du controle de viabilite des leucocytes radiomarques a permis de verifier que l’exposition de l’operateur aux rayonnements ionisants est tres inferieure aux limites reglementaires et, en particulier, au niveau du cristallin. Elle a egalement contribue a ameliorer sa radioprotection lors de la realisation de ce controle.

Introduction Notre etablissement est passe de la Depakine Chrono® au valproate de sodium cp LP generique en mars 2016. Notre logiciel de prescription, Phedra [Genois] V6 web (base de donnees Thesorimed), propose au medecin, apres saisie de « DEPAK », toutes les specialites commencant par « DEPAK… » (DEPAKine*, DEPAKote*) et toutes celles contenant le meme principe actif (acide valproique). En octobre 2016, a l’occasion du passage en dispensation nominative du valproate avec analyse pharmaceutique systematique, des erreurs ont ete detectees, notamment prescription de valproate (forme non LP) a la place de la forme LP. L’hypothese causale etait celle de libelles confusionnants dans le referentiel medicament. Nous avons souhaite valider cette hypothese. Materiels et methode Analyse de toutes les prescriptions Phedra de valproate per os (formes seches) sur 4 periodes d’un mois : trois en retrospectif (P1, P2, P3), une (P4) en prospectif apres modification du libelle : « valproate de sodium LP (cp de 500 mg) » en « valproate LP (cp de 500 mg) [=Depakine Chrono] » ; comparaison des prescriptions au compte rendu medical (CR) (logiciel Middlecare). Libelles pour le prescripteur : – P1 (10/2015) : valproate cp [= Depakine*] et Depakine Chrono cp ; – P2 et P3 (04/2016 et 10/2016) : valproate cp [= Depakine*] et valproate LP cp (P2 : analyse a posteriori des dossiers ; P3 : analyse pharmaceutique prospective systematique) ; – P4 (01/2017) : valproate cp [= Depakine*] et valproate LP cp [= Depakine Chrono*] (analyse pharmaceutique prospective systematique). Resultats et discussion Cinquante-quatre prescriptions ont ete analysees. P1 (Depakine Chrono® princeps au livret) : 11 prescriptions sur 12 (92 %) conformes aux CR (prescription discordante : valproate non LP au lieu de Depakine Chrono®). P2 et P3 (changement de marche : Depakine Chrono® remplace par le generique valproate LP*) : 19 prescriptions sur 30 (63 %) conformes aux CR. Sur les 11 prescriptions discordantes : 7 valproate (non LP) au lieu de valproate LP ; 2 valproate LP au lieu de valproate (non LP) ; 2 valproate LP au lieu de Depakote®. P4 (ajout de « = Depakine Chrono* » au libelle du generique valproate LP*) : 11 prescriptions sur 12 (92 %) conformes aux CR (prescription discordante : valproate non LP au lieu de valproate LP). La franche diminution des erreurs de prescription apres ajout de la mention « = Depakine Chrono* » a la fin du libelle du generique conforte notre hypothese d’erreur de nomenclature, et peut s’expliquer par une tendance du prescripteur a selectionner plus volontiers un libelle contenant un nom du princeps. Conclusion Les erreurs dites de nomenclature sont frequentes. Dans les logiciels d’aide a la prescription medicamenteuse, l’affichage du nom du princeps, en plus de celui de la DCI, apparait comme un outil de detrompage utile, y compris pour les generiques, surtout lorsque cohabitent dans un meme hopital des princeps et des generiques pour une meme substance active. Une gestion rigoureuse de la base medicamenteuse est donc primordiale, releve de la responsabilite pharmaceutique et participe a la lutte contre la e-iatrogenie.

Introduction Le « midline » est un catheter (KT) veineux peripherique profond, insere dans la veine basilique ou cephalique, pour une utilisation de courte ou moyenne duree (souvent Materiels et methode Apres recensement des besoins des services et analyse bibliographique, les medecins et pharmaciens ont rencontre les fournisseurs de midlines. Les DM pre-retenus ont ete testes au moyen de fiches d’evaluation, dont les criteres principaux etaient la facilite de pose et l’identification du DM une fois pose. L’Equipe operationnelle d’hygiene (EOH) a aussi ete impliquee afin d’encadrer l’utilisation du DM selectionne. Resultats et discussion Finalement, deux services souhaitent poser ce DM, la RMT et le departement d’anesthesie et reanimation. Leur choix est de le reserver aux patients difficiles a piquer lors de therapeutiques en IV peripherique : les patients a faible capital veineux comme les personnes âgees, les patients obeses, et les patients avec un œdeme generalise classiquement hospitalises en reanimation, les therapeutiques concernees etant des antibiotherapies ou de la rehydratation durant 1 a 4 semaines. Le besoin est estime a 2 patients par mois. Ce DM permet d’eviter l’utilisation d’un KT central avec les risques engendres et les praticiens apprecient la facilite de pose car elle est echoguidee. La bibliographie met en evidence la possible confusion avec le PICCline, avec risque d’administration de produits veinotoxiques sur le midline. Ce risque serait majore par la faible utilisation de ce DM dans les services poseurs. Au total, 3 fournisseurs commercialisent des kits de midlines : 2 sont retenus car leur technique de pose Seldinger est connue des medecins, le 3e presentant une technique nouvelle est ecarte. Les essais ont ete realises de janvier a mars 2017, par 3 medecins sur 5 patients. Les 2 DM ont ete juges equivalents en termes de facilite de pose, d’echogenicite de l’aiguille et du KT, d’ergonomie du kit et d’identification apres la pose. Le DM choisi a l’avantage de disposer d’une etiquette « midline » a rajouter sur le KT une fois pose. Le protocole d’entretien du midline a ete redige en collaboration avec l’EOH. Conclusion Ce travail pluridisciplinaire a permis de selectionner le midline le mieux adapte, en diminuant le risque de confusion avec une voie centrale. Il precise l’emploi de ce DM dans notre etablissement, et pourra servir de base si une extension a d’autres services etait envisagee.

Norepinephrine, 5-hydroxytryptophan, octopamine, dihydroxyphenylacetic acid, N-acetyldopamine, dopamine, 5-hydroxyindoleacetic acid, N-acetylserotonin, tyramine, tryptophan and serotonin in larvae (third free stage and parasitic stages) and adult males and females (at defined ages during the intestinal phase) of the parasitic nematode Nippostrongylus brasiliensis were quantified simultaneously by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection. Biogenic amine levels depended on the stage, the age and the sex of parasites and on environmental conditions. Their physiological roles in reproductively competent adults of this nematode are discussed in relation to exuviation and egg laying. Parallel fluctuations in free ecdysteroids and norepinephrine were observed in females from the same worm populations.

Introduction Depuis 27 ans, la pharmacie realise une DIN manuelle dans le service LS. Pour ameliorer la securisation du circuit du medicament (mdt) et permettre un redeploiement de l’activite, la pharmacie a acquis un automate de DIN : l’Acced S300 (Ecodex ® ). Le but de cette etude est de comparer le temps consacre par les preparateurs en pharmacie hospitaliere (PPH) aux differentes activites de DIN en LS, avant et apres acquisition de l’automate. Materiels & methode Cette etude a ete realisee sur 4 semaines (smn) : 2 pour la DIN manuelle en septembre 2015 et janvier 2016 (1) et 2 pour la DIN automatisee en aout 2016 (2). Chaque PPH s’est chronometre sur les differentes activites de la DIN. Les temps sont donnes pour 1 smn et correspondent a un cumul pour l’ensemble des PPH. Resultats & discussion Pour 7 jours (j) de LS, nous avons prepare en (1) 147 piluliers pour 74 patients et 529 piluliers pour 76 patients en (2). En DIN manuelle, les piluliers etaient prepares 2 fois/smn avec 1 pilulier/patient pour les differents jours alors qu’en DIN automatisee, les piluliers sont faits pour 7 j avec 1 pilulier/j/patient. L’impression des plans de cueillette prend 40 minutes (min) en (1) vs 9 min pour imprimer les ordonnances en (2). La preparation des piluliers occupe 5h15 en (1) vs 5h06 en (2). Ces 5h06 correspondent a une etape de complementation car l’AccedS ne prend en charge que les formes orales seches. Cela comprend la sortie des mdt de la liste de complementation (53 min), la complementation (3h40) et la preparation de la liste verte (mdt non pris en charge pas l’automate, non mis dans les piluliers et en dispensation reglobalisee comme le paracetamol) (34 min). Le temps de production des piluliers par l’automate n’est pas comptabilise car a lieu la nuit. Le double controle des piluliers est fait en aleatoire et prend 39 min en (1) vs 26 min en (2). L’acheminement des chariots vers les services occupe 43 min en (1) vs 21 min en (2) (passage d’une dispensation bi-hebdo a hebdo). Le reapprovisionnement des bacs de cueillette prend 42 min en (1) vs 95 min en (2) pour preparer les mdt de la liste de reassort pour la coupe. Nous gagnons du temps sur la sortie des consommations : 2h09 en (1) vs 17 min en (2) car l’automate facture les mdt qu’il introduit dans les piluliers. Le lancement informatique des prescriptions vers l’automate (40 min), le lancement de l’automate (20 min) et l’entree/sortie des chariots (11 min) sont des etapes specifiques de la DIN automatisee. La coupe (2h55 min) et le retour dans l’automate des doses non utilisees par les services (70 min) sont des etapes confiees aux agents hospitaliers sous la responsabilite des PPH. Au final, le temps de DIN/smn pour les PPH pour le service LS est de 10h07 en (1) vs 9h04 en (2), sans les etapes de coupe ni de retour des doses. Conclusion La DIN automatisee en LS ne nous fait pas gagner de temps car l’automatisation implique des etapes de complementation et manutention importantes. Cependant, l’automatisation participe a l’amelioration de la securisation du circuit du mdt (risque d’erreur humaine diminue, production d’1 pilulier/j/patient, homogeneisation des doses).

Introduction En septembre 2014, l’ANSM a informe les praticiens hospitaliers du retrait d’AMM de la specialite Vistide ® (cidofovir), suite a la diminution de l’incidence des retinites a CMV chez les patients VIH au stade sida, a l’existence d’alternatives therapeutiques dans cette indication, ainsi qu’a des difficultes de fabrication. Depuis, le cidofovir fait l’objet d’une demande d’autorisation temporaire d’utilisation nominative (ATUn). Au sein de notre etablissement, cette ATUn est essentiellement utilisee dans le cadre des papillomatoses oropharyngees recidivantes, dues au virus du papillome humain (ou HPV), avec realisation d’injections en intra-lesionnel. Les papillomatoses sont des affections rares et une des conditions d’acces au traitement par le cidofovir est l’echec de therapeutiques anterieures. L’objectif de cette analyse est de comparer les donnees de la litterature aux pratiques usuelles du service d’ORL. Materiels et methode (1) Analyse des donnees de la litterature depuis la base de donnees PubMed. (2) Recueil de donnees (âge, sexe, type HPV, nombre d’injections et concentrations, antecedents medicaux et chirurgicaux) realise par l’interne en pharmacie avec la participation des medecins du service d’ORL. Analyse retrospective des demandes d’ATUn realisees entre septembre 2014 et septembre 2016. (3) Entretiens avec les 2 praticiens realisant les prescriptions de cidofovir. Resultats et discussion (1) Six articles ont ete retenus, mentionnant des concentrations variant de 2,5 a 75 mg/mL dont les plus utilisees sont : 5 et 7,5 mg/mL. Les effets indesirables les plus frequemment rapportes sont une toxicite renale et/ou hematologique. (2) Sinq patients âges de 19 a 70 ans (2 hommes, 3 femmes, âge moyen 49 ans). Pour 3/5 de ces patients, les papillomes etaient larynges, 1/5 avec une localisation nasale et 1/5 chez qui les papillomes ont ete retrouves dans le nez et le pharynx. Le typage HPV a ete effectue pour 3/5 patients, il a ete retrouve 2 HPV6 et 1 HPV11. Pour un patient, le typage a ete demande mais les resultats n’ont pas encore ete communiques et aucun typage n’a ete demande pour le dernier patient. Concernant les antecedents, des exereses sans injection des papillomes ont ete faites (avec ou sans laser) pour 4/5 patients, et 1/5 a recu un traitement par interferon α-2a. Le protocole utilise consiste en 2 injections espacees de 3 semaines avec de possibles injections ulterieures en cas de recidives. Seulement un patient a necessite une 3 e injection, plus d’un an apres les premieres. (3) Aucun effet indesirable n’a ete rapporte. Conclusion Les donnees emanant de divers articles mettent en evidence la difficulte de proposer un schema therapeutique standardise. Neanmoins, les concentrations utilisees par les praticiens sont celles les plus frequemment retrouvees dans la litterature. Un suivi au long cours de ces patients permettrait de s’assurer de l’absence d’effets indesirables et/ou de recidives des papillomatomes.

Introduction L’adrenaline injectable est prescrite en aerosol dans le service d’oto-rhino-laryngologie (ORL) adulte de notre hopital. Bien que cette pratique soit hors-AMM, elle est courante et prescrite de maniere empirique. Il a ete decide de realiser un etat des lieux sur l’utilisation de l’adrenaline i.v. en aerosol dans les services d’ORL d’Ile-de-France (IdF) de maniere a connaitre les pratiques de prescription. Materiels et methode Un audit telephonique a ete realise du 7 aout au 16 septembre 2015 a l’aide d’un questionnaire, aupres des internes en medecine et chefs de cliniques assistants (CCA) de 11 services d’ORL adultes et 2 pediatriques d’hopitaux d’IdF dont 6 de l’AP-HP. Les donnees recueillies etaient l’indication, le protocole (dose, frequence d’administration, duree de traitement), le choix de la presentation (avec ou sans sulfites) et le suivi d’efficacite et de tolerance. Resultats et discussion Cinquante-trois pourcent (7/13) des services d’ORL appeles ont repondu dont 6 de l’AP-HP. Les repondeurs sont des internes en medecine (n = 6) et des CCA (n = 3). Dans 2 services d’ORL, l’interne et le CCA ont repondu. Tous les medecins ont cite la meme indication la dyspnee aigue laryngee principalement causee par un œdeme pour 55 % (5/9) d’entre eux, ou due a une laryngite aigue virale, un cancer et la paralysie des cordes vocales dans 45 % des cas. Chez les adultes, 77 % (7/9) des praticiens prescrivent 1 mg toute les 6–8 h diluee dans 3–5 mL du NaCl 0,9 % ± corticoides (i.v., per os, en aerosol) pendant 48 a 72 heures. Les 23 % (2/9) restants prescrivent 5 mg toutes les 4 h maximum pure ou dilue dans du NaCl 0,9 %. Quatre-vingt-neuf pourcent (8/9) des praticiens n’ont pas connaissance de specialites d’adrenaline injectables avec ou sans sulfites. Cent pourcent (9/9) des praticiens ont cite que la surveillance de l’efficacite et de la securite sont uniquement cliniques : disparition des signes de lutte respiratoire, monitoring cardiovasculaire pendant et jusqu’a 48–72 heures apres l’administration. Conclusion Cet audit montre qu’en ORL, pour les aerosols d’adrenaline chez l’adulte, le protocole majoritairement utilise est de 1 mg toutes les 8 h diluee dans 3–5 mL de NaCl ± corticoides (i.v., per os, en aerosol) pendant 2–3 jours. Etant donne la faible proportion de services ORL ayant repondus, il serait interessant de realiser cet audit a echelle nationale. Dernierement, l’adrenaline 1 mg sans sulfites etait en rupture, le pharmacien doit rester attentif au choix d’une specialite sans sulfites en cas d’administration en aerosol.

Introduction Afin de securiser la dispensation des medicaments experimentaux (ME), une fiche de dispensation (FD) est redigee par l’equipe pharmaceutique du secteur essais cliniques (EC) apres chaque mise en place a l’aide du logiciel Pharmessai (editeur JK Concept). Cette fiche doit permettre a de multiples intervenants de dispenser les ME, quelle que soit leur qualification (PPH, interne, pharmacien) et leur connaissance de l’EC. L’objectif de cette etude est de realiser un audit des FD au regard des informations presentes dans le dossier Pharmacie. Materiels et methode Les FD ont ete selectionnees selon les criteres suivants : ME les plus frequemment dispenses et/ou ME dispenses en urgence. Douze items juges necessaires a la dispensation per protocole ont ete definis : liste des prescripteurs autorises/type de dispensation/support de prescription/espacement des dispensations/posologie-plan de prise/nombre de dispensation(s) par patient/modalites d’attribution du traitement/lieu de stockage des produits/conditions de conservation/prescription informatisee (via le logiciel Genois/Phedra ® )/preparation ou reconditionnement a la PUI/modalites particulieres. Pour chaque FD analysee, la conformite, c’est-a-dire la presence et l’exactitude, des 12 items d’interet a ete verifiee. Resultats et discussion Trente-huit FD, correspondant a 38 EC, ont ete analysees. Pour 4 FD, l’integralite des informations reportees sont conformes. Pour les 34 autres FD, 104 non-conformites ont ete relevees, soit un taux global de non-conformite de 28 % (104/368). Les non-conformites etaient liees a une imprecision des informations et concernaient principalement les items « modalites d’attribution du traitement » (21 %), « support de prescription » (20 %) et « liste des prescripteurs autorises » (12,5 %). Neuf non-conformites jugees critiques, c’est-a-dire pouvant donner lieu a une erreur de dispensation, ont ete relevees sur 5 FD differentes. Elles concernaient l’item « nombre de dispensation par patient » (5/9) et l’item « espacement des dispensations » (4/9). Conclusion Cet audit interne a permis : (1) un renforcement immediat de la securisation du circuit des ME (correction des FD non-conformes) ; (2) la mise en place d’une FD standardisee (sur le fond et la forme) dorenavant utilisee pour tout nouvel EC. Un deuxieme audit sera realise pour evaluer l’impact de cette derniere action correctrice.

Introduction De janvier 2014 a janvier 2015, 11 cas d’accidents d’exposition au sang (AES) ont ete rapportes a la Medecine du travail suite au mesusage de curettes dermatologiques steriles a usage unique dans deux services. En effet, les curettes dermatologiques sont dotees d’une lame circulaire aceree qui permet de retirer en douceur une peau superficielle, sans endommager les tissus environnants mais presente un risque de coupure pour l’utilisateur. La Medecine du travail et l’unite des dispositifs medicaux ont engage, en cooperation avec les cadres des services concernes, des mesures pour sensibiliser les infirmieres au bon usage des curettes dermatologiques steriles a usage unique et eviter qu’elles ne se blessent a nouveau. Materiels et methode – Analyse des cas d’AES ; – bilan des consommations de curettes en 2014 ; – entretiens avec les cadres des services et les infirmieres ; – declaration d’incident aupres du laboratoire LCH. Resultats et discussion Les 11 AES se sont produits dans les services de Medecine interne et diabetologie, lors de l’essuyage de la lame de la curette avec une compresse au cours de soins de plaies. Cette pratique n’est pas conforme a la notice d’utilisation du fabricant qui precise d’eviter tout contact avec la lame et de ne pas la nettoyer a cause du risque de blessure. En 2014, 3160 curettes de differents diametres ont ete utilisees dans l’ensemble des services : 4 mm (41 %), 5 mm (25 %), 7 mm (34 %). Les deux plus grands services consommateurs sont la diabetologie (61 %) et la medecine interne (16 %). Le choix des diametres de lame est tres dependant du service. Ainsi, 90 % des curettes de 4 mm ont ete utilisees par la diabetologie et 64 % des curettes de 5 mm ont ete utilisees par la medecine interne. Des lames de petit diametre (≤ 4 mm) favorisent le risque de coupure car il y a une accumulation de fragments de tissus dans la lame qui oblige l’utilisateur a la desencombrer pour poursuivre les soins. Les diametres de lame de 5 ou 7 mm sont donc a privilegier. Suite a la declaration d’incident en juillet 2015, le fournisseur est intervenu dans les services pour presenter les curettes avec des lames de grand diametre, peu connues des services. Les gestes de bon usage ont ete rappeles (mettre des gants, utiliser des curettes avec des lames de grand diametre [5 ou 7 mm], ne pas nettoyer la curette en appliquant une compresse sur la lame, ne pas reutiliser la curette) et une fiche de bon usage des curettes dermatologiques steriles a usage unique reprenant ces points a ete redigee et validee. Conclusion Le rappel des gestes de bon usage a permis de preciser et d’encadrer l’utilisation des curettes dermatologiques, jusque-la tres informelle et peu argumentee. Les services de diabetologie et medecine interne commandent davantage de curettes de 5 et 7 mm depuis aout 2015 et aucun AES impliquant les curettes n’a ete declare depuis. L’ensemble des actions mises en place, grâce a une cooperation multidisciplinaire, rappelle que la declaration d’incidents a l’hopital est essentielle pour faire evoluer les pratiques. Cela souligne le role fondamental du pharmacien pour garantir le bon usage des dispositifs medicaux.

1. The effects of long-term starvation and isolation on biogenic amine contents of the central nervous system of the male cockroach Blaberus craniifer Burm. were investigated. 2. Levels of tryptophan, 5-hydroxytryptophan, 5-hydroxytryptamine, a 5-hydroxyindolacetic acid-like substance, N-acetyl-5-hydroxytryptamine, dopamine, N-acetyldopamine and octopamine were measured by HPLC with electrochemical detection in fasted-isolated and fed-crowded insects from day 0 (imaginal molt) to day 30. 3. Isolation and fasting resulted in general lower levels, except for serotoninergic pathway at day 10. 4. From these data, by comparison with the isolation effect registered in females: (i) it is hypothesized that fasting exerts an inhibitory influence; and (ii) it is speculated that this effect is convergent with that of the loss of mechanical feeding stimuli on neurosecretory cells, as described in other male cockroaches.

Introduction Le dossier pharmaceutique (DP) a ete mis en place au sein de notre PUI en avril 2014 a titre experimental avec le service de geriatrie aigue. Nous pouvons ainsi consulter et/ou creer des DP apres accord des patients. De plus, le DP facilite la conciliation medicamenteuse. Dans le cadre de cette experimentation, nous avons realise une intervention pharmaceutique qui a permis d’etablir differents diagnostics chez une patiente presentant une insuffisance renale aigue d’origine fonctionnelle et une hyponatremie d’origine inconnue. Patients et methode En aout 2014, une patiente de 90 ans, est hospitalisee en geriatrie aigue pour une cruralgie douloureuse et l’aggravation d’une hyponatremie : diminution de 135 a 115 mmol/L en 10 jours. A son arrivee, une insuffisance renale aigue a 57,6 mL/min (MDRD) est decouverte. Trois diagnostics ont d’abord ete envisages : un syndrome nephrotique, une secretion inappropriee de l’hormone antidiuretique et une decompensation cardiaque. Ils ont pu etre elimines suite a des bilans biologiques et des examens complementaires negatifs. Avec les geriatres, nous avons pu consulter le DP de la patiente grâce a sa carte Vitale et visualiser les dispensations des 4 derniers mois, notamment des dispensations mensuelles de furosemide 40 mg et une dispensation ponctuelle de diclofenac 25 mg et de furosemide 20 mg. Resultats et discussion L’hypothese d’une iatrogenie medicamenteuse est posee. En effet, cette patiente est traitee notamment par le furosemide 40 mg, un comprime par jour, pour son insuffisance cardiaque. Le DP indique une dispensation de furosemide 40 mg et une autre de 20 mg sur une periode de 10 jours, suite a une diminution de posologie confirmee par le medecin traitant. La patiente gerant seule ses traitements, a pu consommer par erreur du furosemide 20 mg et 40 mg en meme temps, ce qui pourrait expliquer l’apparition brutale d’une hyponatremie. D’autre part, l’insuffisance renale aigue pourrait etre due a la dispensation au cours de la meme periode de diclofenac 25 mg pour ses douleurs articulaires. Apres interrogation de la patiente, elle aurait pris jusqu’a 4 comprimes/jour pendant 4 jours. L’arret du furosemide et du diclofenac a l’arrivee de la patiente dans le service et une bonne hydratation ont rapidement ameliore son etat. Conclusion Ce cas demontre l’avantage du DP a l’hopital. Il nous a aides a detecter une redondance de principe actif et la prise d’un medicament nephrotoxique qui ont cause des effets indesirables chez cette patiente. Le DP permet de prendre connaissance des traitements des patients ayant un DP existant et alimente, de rationaliser la prescription et deceler une eventuelle iatrogenie medicamenteuse. Cependant notre experience montre aussi les limites du DP car les posologies et les durees de traitements ne sont pas indiquees.

Introduction Le clonazepam est une benzodiazepine a longue demie-vie, dont l’AMM est limitee au traitement de l’epilepsie. Depuis mars 2012, l’ANSM a restreint la prescription aux Neurologues et Pediatres, en raison d’une utilisation dans des indications hors AMM (notamment douleurs neuropathiques et troubles du sommeil), dans lesquelles le rapport benefice-risque n’est pas etabli, et d’un usage detourne chez les toxicomanes. Une etude des prescriptions de clonazepam per os avait ete conduite dans notre hopital en 2010, avant la mise en place de la prescription restreinte. Nous avons souhaite savoir si les caracteristiques de la prescription, notamment le respect de l’indication AMM, avaient evolue depuis. Materiels et methode Etude retrospective de toutes les prescriptions de clonazepam per os retrouvees chez des patients hospitalises dans des services informatises (logiciel Phedra ® , 513 lits de MCO soit 90 % des lits de l’hopital) sur une duree de 10 semaines (01/05/2014 au 15/07/2014) : – recueil de l’indication et de la posologie ; – comparaison avec les resultats de l’etude menee en 2010 sur 10 semaines. Resultats et discussion En 2014, sur une periode de 10 semaines, 41 patients (48 sejours) ont eu une prescription de clonazepam per os au cours de leur hospitalisation (150 patients en 2010, reduction de 73 %). Parmi eux, 26 % etaient hospitalises en Rhumatologie (41 % en 2010, p = 0,05), 19 % en medecine interne (8 % en 2010 p = 0,035) 12 % en diabetologie (8 % en 2010), 10 % en neurochirurgie (10 % en 2010), 8 % en chirurgie orthopedique (13 % en 2010). Six services representaient 75 % des prescriptions (vs 4 en 2010). Trente-six patients sur 41, soit 88 % (97 % en 2010) etaient traites dans une indication hors AMM : douleurs neuropathiques 44 % (51 % en 2010), douleurs nociceptives 15 % (16 % en 2010), insomnie 5 % (15 % en 2010). L’epilepsie representait 12 % des prescriptions (3 % en 2010, p = 0,039). Dans les indications hors AMM, les posologies moyennes de clonazepam etaient de 1,6 mg en 2014 (0,96 mg en 2010, p Conclusion En 2014, sur la periode etudiee, le nombre de patients hospitalises traites par clonazepam per os a diminue de plus de 70 %. Cependant, comme en 2010, l’essentiel de l’utilisation (pres de 90 % des patients) a lieu dans une indication hors AMM (principalement douleurs neuropathiques), avec des posologies plus elevees qu’en 2010. Dans leur grande majorite (plus de 80 %), ces prescriptions hors AMM au cours de l’hospitalisation resultent de la poursuite d’un traitement qui existait deja avant l’hospitalisation. La persistance de cette utilisation de clonazepam hors AMM a l’hopital reflete la difficulte de modifier, au cours d’un sejour souvent bref, un traitement pre-existant. Une action de l’ANSM sur les prescriptions executees en ville provenant des Neurologues semble necessaire pour modifier la tendance.

1. Tryptophan, 5-hydroxytryptophan, 5-hydroxytryptamine, a 5-hydroxyindolacetic acid-like substance, N -acetyl-5-hydroxytryptamine, dopamine, N -acetyldopamine and octopamine were assayed simultaneously in the central nervous system of virgin and fed females Blaberus craniifer Burm. 2. Amounts were quantified by HPLC and electrochemical detection in both crowded and isolated females during the first weeks of imaginal life, from days 0–30. 3. Amine contents were modified by housing conditions, and in general, higher levels were found in the isolated individuals, with the most pronounced differences observed at D10 and D30. 4. The relationship between these fluctuations and the speeding up of ovarian maturation by isolation is discussed.

1. Simultaneous quantification (HPLC and electrochemical detection) of biological extracts have shown dopamine, N-acetyl dopamine, tryptophan, 5-hydroxytryptamine, a 5-hydroxyindolacetic acid-like substance in nervous tissue and hemolymph of Blaberus craniifer and Periplaneta americana. 2. 5-Hydroxytryptophan was only detected in head and thoraco-abdominal nerve cord. 3. Octopamine, but not N-acetyl-5-HT was quantified in the hemolymph.

1. Apart from octopamine, the same indolamines and catecholamines were detected in the whole nervous system of the cockroach Blaberus craniifer Burm., at the same time. 2. However, levels were found to depend on sex, age, and the anatomic region within the nervous system. 3. Although not established, it is thought that these substances act synchronously from the ganglia. 4. The differences in levels between males and females and between anatomical regions during imaginal life suggest, in this species of cockroach, the physiological importance of the metameric organization in metabolic pathways or functional aspects of biogenic amines.

1. Indolamine levels were determined in the cerebral ganglion, the thoraco-abdominal nerve cord (except the last ganglion), and the 6th abdominal ganglion of females of Blaberus craniifer . 2. Measurements were made at the imaginal molt and on fed and crowded imagos at 10, 20 and 30 post-imaginal days. 3. Indolamines were found in the nervous system of young females, but 5-hydroxytryptophan was only detected in the thoraco-abdominal nerve cord. 4. Amine levels were related to the age of the cockroach, particularly during this period, to post-ecdysi events and ootheca formation.

Introduction Un nouveau reglement europeen relatif aux essais cliniques (EC) de medicaments experimentaux (ME) a usage humain est paru au Journal Officiel de l’Union Europeenne le 27 mai 2014. Il entrera en vigueur le 28 mai 2016 et abrogera la directive actuelle de 2001. Ce reglement modifie les exigences en matiere d’etiquetage des ME. Ainsi, sur les 12 items pouvant figurer sur l’etiquetage, 6 seront dorenavant obligatoires : item b « nom de la substance, dosage », item c « forme pharmaceutique, voie d’administration, quantite d’unite », item d « numero de lot », item f « numero de patient/de kit et le cas echeant numero de visite », item j « conditions de conservation » et item k « date de peremption ». L’objectif de cette etude est de realiser un etat des lieux de la conformite des etiquetages des ME au regard de la future reglementation. Materiels et methode Soixante ME correspondants a 48 EC ont ete retenus selon les criteres suivant : stock disponible a la pharmacie, ME dispenses directement aux patients ambulatoires et administration per os. Pour chaque ME, la presence ou non des 6 items d’interet a ete verifiee. Resultats et discussion Trente-six ME (60 %) correspondant a 30 EC ont un etiquetage non conforme. 97 % des non-conformites concernent l’item f « numero patient ou numero de kit et le cas echeant du no de visite ». Pour ces etiquetages, le numero de patient/kit est inscrit, par contre, le numero de visite est generalement absent. Les items b « nom de la substance/dosage » et j « conditions de conservation » sont absents pour 1 ME. Pour 2 ME d’un meme EC, la date de peremption n’est pas mentionnee. La forme pharmaceutique, la voie d’administration, la quantite d’unites et le numero de lot de fabrication sont systematiquement renseignes. Quatre-vingt-trois pour cent des etiquetages non conformes proviennent de promotion industrielle. Conclusion Les pharmaciens des essais cliniques sont souvent les premiers acteurs de sante a etre en contact avec les ME. Ils devront donc etre vigilants et signaler tout defaut d’etiquetage qui pourrait entrainer un risque pour le patient.

Some putative neurotransmitters in three experimental filariasis models were investigated by a new relevant chromatographic method. sensitive and specific. No catecholaminergic compounds have been detected, but serotonin was found in Dipetalonema vitae. However, further investigations revealed very high levels of gammaamino butyric acid (GABA) in the macro-filariae. These data allow us to foresee new fields in filariasis therapeutics.