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The search for more environmental friendly herbicides, aiming at the control of agricultural pests, combinated with less harmfulness to human health and the environment has grown. An alternative used by researchers is the application of products of secondary plant metabolism, which are investigated due to their potential bioactivities. Thus, species belonging to the Myrtaceae family are potential in these studies, since this family is recognized for having high biological activity. A species belonging to this genus is Psidium cattleyanum, which has a medicinal effect and its fruits are used in human food. Thus, the objective of this research was to evaluate and compare the phyto-cyto-genotoxicity of aqueous and ethanolic leaf extracts of the specie P. cattleyanum, from plant bioassays, as well as to identify the main classes of compounds present in the extracts. For this, the extracts were prepared, characterized and biological tests were carried out by evaluating, in seeds and seedlings of lettuce and sorghum, the variables: percentage of germination, germination speed index, root growth and aerial growth; and in meristematic lettuce cells the variables: mitotic phases, mitotic index, nuclear alterations and chromosomal alterations. Flavones, flavonones, flavonols, flavononols, flavonoids, alkaloids, resins, xanthones and anthraquinone glycoside were characterized in the ethanolic extract. Both evaluated extracts, in the highest concentration, inhibited the initial plant development. All treatments caused alterations in the mitotic phases and inhibited mitotic index. In addition, the treatments promoted an increase in nuclear and chromosomal alterations. The mechanism of action presented was aneugenic, clastogenic and determined in epigenetic alterations. The ethanolic extract was more cytotoxic, since it had a more expressive effect at a lower concentration. Despite the cytotoxicity of the extracts under study, they promoted alterations at lower levels than the glyphosate positive control. Resumo A busca por herbicidas mais amigáveis ao meio ambiente, visando o controle de pragas agrícolas, aliado a uma menor nocividade à saúde humana e ao meio ambiente tem crescido. Uma alternativa utilizada pelos pesquisadores é a aplicação de produtos do metabolismo secundário de plantas, que são investigados em virtude do seu potencial bioativo. Assim, espécies pertencentes à família Myrtaceae são potenciais nestes estudos, uma vez que esta família é reconhecida por possuir alta atividade biológica. Uma espécie pertencente a este gênero é Psidium cattleyanum, que possui efeito medicinal e seus frutos são utilizados na alimentação humana. Assim, o objetivo desta pesquisa foi avaliar e comparar a fitocitogenotoxicidade de extratos foliares aquosos e etanólicos da espécie P. cattleyanum, a partir de bioensaios vegetais, bem como identificar as principais classes de compostos presentes nos extratos. Para isso, os extratos foram preparados e caracterizados e foram realizados testes biológicos avaliando, em sementes e plântulas de alface e sorgo, as variáveis: porcentagem de germinação, índice de velocidade de germinação, crescimento radicular e crescimento aéreo; em células meristemáticas de alface foram avaliadas as variáveis: fases mitóticas, índice mitótico, alterações nucleares e alterações cromossômicas. Flavonas, flavononas, flavonóis, flavononóis, flavonóides, alcalóides, resinas, xantonas e glicosídeo de antraquinona foram caracterizados no extrato etanólico. Ambos os extratos avaliados, na maior concentração, inibiram o desenvolvimento inicial da planta. Todos os tratamentos causaram alterações nas fases mitóticas e inibiram o índice mitótico. Além disso, os tratamentos promoveram aumento de alterações nucleares e cromossômicas. O mecanismo de ação apresentado foi aneugênico, clastogênico e epigenético. O extrato etanólico foi mais citotóxico, pois teve efeito mais expressivo em menor concentração. Apesar da citotoxicidade dos extratos em estudo, eles promoveram alterações em níveis inferiores ao controle positivo glifosato.

The present research was made to determine the micronuclei and cytotoxic capacity of the antidepressant venlafaxine in an in vivo acute and subchronic assays in mouse. In the first study, we administered once 5, 50, and 250 mg/kg of the drug, and included a negative and a daunorubicin treated group. Observations were daily made during four days. The subchronic assay lasted 5 weeks with daily administration of venlafaxine (1, 5, and 10 mg/kg) plus a negative and an imipramine administered groups. Observations were made each week. In the first assay results showed no micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPE) increase, except with the high dose at 72 h. The strongest cytotoxic effect was found with 250 mg/kg at 72 h (a 51% cytotoxic effect in comparison with the mean control level). In the subchronic assay no MNPE increase was found; however, with the highest dose a significant increase of micronucleated normochromatic erythrocytes was observed in the last three weeks (a mean of 51% respect to the mean control value). A cytotoxic effect with the two high doses in the last two weeks was observed (a polychromatic erythrocyte mean decrease of 52% respect to the mean control value). Results suggest caution with venlafaxine. Resumo A presente pesquisa foi feita para determinar a capacidade micronuclei e citotóxica do antidepressivo venlafaxina em ensaios agudos e subcrônicos in vivo em camundongos. No primeiro estudo, administramos uma vez 5, 50 e 250 mg/kg do medicamento e incluímos um grupo negativo e um grupo tratado com daunorubicina. As observações foram feitas diariamente durante quatro dias. O ensaio subcrônico durou cinco semanas com administração diária de venlafaxina (1, 5, e 10 mg/kg) mais um grupo negativo e um grupo administrado de imipramina. As observações foram feitas a cada semana. No primeiro ensaio, os resultados não mostraram aumento de eritrócitos policromáticos micronucleados (MNPE), exceto com a dose elevada a 72 h. O efeito citotóxico mais forte foi encontrado com 250 mg/kg a 72 h (um efeito citotóxico de 51% em comparação com o nível médio de controle). No ensaio subcrônico não foi encontrado aumento de MNPE; entretanto, com a dose mais alta, um aumento significativo de eritrócitos normocromáticos micronucleados foi observado nas últimas três semanas (média de 51% em relação ao valor médio de controle). Foi observado um efeito citotóxico com as duas altas doses nas últimas duas semanas (uma diminuição média de 52% em relação ao valor médio de controle dos eritrócitos policromáticos). Os resultados sugerem cautela com a venlafaxina.

Wood vinegar has been used for over a century as a fertilizer and antimicrobial agent, but its impacts on ecosystems are poorly understood; further research is necessary to understand its chemical characteristics and avoid negative impacts. This study assessed the chemical characteristics, phytotoxicity, potential cytotoxicity, and greenhouse gas emissions of wood vinegar made from slow pyrolysis in a hot-tail kiln using cambara wood (Qualea sp.). Incubation experiments with varying concentrations of wood vinegar were established in samples of clayey, loamy, and sandy tropical soils, measuring CO2, N2O, and CH4 over a 120-day period. Toxic effects on the germination, root tips, and meristematic cells of Lactuca sativa were also assessed. The findings confirmed that wood vinegar can function as a chemical fertilizer and pesticide, as well as a co-solvent for chemicals, particularly in agricultural and pharmaceutical applications, while the phytotoxicity indicated that this substance must be diluted for agricultural uses. Wood vinegar was seen to inhibit CO2 and N2O emissions from loamy and clayey soils, but this effect was not observed in sandy soil. Wood vinegar also blocked cell division in some dilutions, but at concentrations of less than 0.5% it did not present a potential risk to the environment or plants in general. Keywords: pyroligneous acid; biomass; pyrolysis; residues; cytotoxicity. Vinagre de madeira: características químicas, efeitos fitotóxicos e impactos nas emissões de gases RESUMO: O vinagre de madeira é usado há mais de um século como fertilizante e agente antimicrobiano, mas seus impactos nos ecossistemas são pouco conhecidos; pesquisas são necessárias para entender suas características e evitar impactos negativos. Este estudo avaliou as características químicas, fitotoxicidade, potencial citotoxicidade e emissões de gases do vinagre de madeira obtido a partir de pirólise lenta em forno de cauda quente utilizando madeira de cambará (Qualea sp.). Experimentos de incubação com concentrações variadas do vinagre foram estabelecidos em amostras de solos tropicais argilosos, textura média e arenosos, medindo CO2, N2O e CH4 durante 120 dias. Efeitos tóxicos no modelo Lactuca sativa também foram avaliados. Os resultados confirmaram que o vinagre de madeira pode funcionar como fertilizante químico e pesticida, bem como um co-solvente para produtos químicos, principalmente em aplicações agrícolas e farmacêuticas, enquanto a fitotoxicidade indicou que essa substância deve ser diluída para uso agrícola. O vinagre de madeira parece inibir as emissões de CO2 e N2O de solos argilosos e argilosos, mas esse efeito não foi observado em solo arenoso. O vinagre de madeira também bloqueou a divisão celular em algumas diluições, mas em concentrações inferiores a 0,5% não apresentou risco potencial ao meio ambiente ou às plantas em geral. Palavras-chave: ácido pirolenhoso; biomassa; pirólise; resíduos; citotoxicidade. ABSTRACT: Wood vinegar has been used for over a century as a fertilizer and antimicrobial agent, but its impacts on ecosystems are poorly understood; further research is necessary to understand its chemical characteristics and avoid negative impacts. This study assessed the chemical characteristics, phytotoxicity, potential cytotoxicity, and greenhouse gas emissions of wood vinegar made from slow pyrolysis in a hot-tail kiln using cambara wood (Qualea sp.). Incubation experiments with varying concentrations of wood vinegar were established in samples of clayey, loamy, and sandy tropical soils, measuring CO2, N2O, and CH4 over a 120-day period. Toxic effects on the germination, root tips, and meristematic cells of Lactuca sativa were also assessed. The findings confirmed that wood vinegar can function as a chemical fertilizer and pesticide, as well as a co-solvent for chemicals, particularly in agricultural and pharmaceutical applications, while the phytotoxicity indicated that this substance must be diluted for agricultural uses. Wood vinegar was seen to inhibit CO2 and N2O emissions from loamy and clayey soils, but this effect was not observed in sandy soil. Wood vinegar also blocked cell division in some dilutions, but at concentrations of less than 0.5% it did not present a potential risk to the environment or plants in general. Keywords: pyroligneous acid; biomass; pyrolysis; residues; cytotoxicity. Vinagre de madeira: características químicas, efeitos fitotóxicos e impactos nas emissões de gases RESUMO: O vinagre de madeira é usado há mais de um século como fertilizante e agente antimicrobiano, mas seus impactos nos ecossistemas são pouco conhecidos; pesquisas são necessárias para entender suas características e evitar impactos negativos. Este estudo avaliou as características químicas, fitotoxicidade, potencial citotoxicidade e emissões de gases do vinagre de madeira obtido a partir de pirólise lenta em forno de cauda quente utilizando madeira de cambará (Qualea sp.). Experimentos de incubação com concentrações variadas do vinagre foram estabelecidos em amostras de solos tropicais argilosos, textura média e arenosos, medindo CO2, N2O e CH4 durante 120 dias. Efeitos tóxicos no modelo Lactuca sativa também foram avaliados. Os resultados confirmaram que o vinagre de madeira pode funcionar como fertilizante químico e pesticida, bem como um co-solvente para produtos químicos, principalmente em aplicações agrícolas e farmacêuticas, enquanto a fitotoxicidade indicou que essa substância deve ser diluída para uso agrícola. O vinagre de madeira parece inibir as emissões de CO2 e N2O de solos argilosos e argilosos, mas esse efeito não foi observado em solo arenoso. O vinagre de madeira também bloqueou a divisão celular em algumas diluições, mas em concentrações inferiores a 0,5% não apresentou risco potencial ao meio ambiente ou às plantas em geral. Palavras-chave: ácido pirolenhoso; biomassa; pirólise; resíduos; citotoxicidade.

The study aim was to evaluate the cytotoxic activity, using the MTT test [3-(4,5-Dimethilthiazol-2-yl)-2,5-diphenil tetrazolium bromide], from the crude extract of Picrasma crenata (Pau Tenente) and its isolated compounds, quassin and parain, in culture of rat liver tumor cells (HTC). The test was carried out exposing the cells for 24, 48 and 72 hours to concentrations of 5, 10, 50, 100, 200, 300, 400, 500 and 1000 μg of crude extract of Pau Tenente/mL of culture medium and 1, 5, 10, 15, 20, 40, 60, 80 and 100 μg of quassin or parain compounds/mL of culture medium. The absorbances averages results obtained showed that the crude extract did not present cytotoxicity for the HTC cells in all the concentrations and evaluated times. For quassin, the concentrations of 80 and 100 μg/mL were cytotoxic, after 72 hours of treatment. For parain, the concentrations of 1, 5, 20, 40, 60, 80 and 100 µg/mL, in 72 hours, were cytotoxic, revealing a new activity for this compound. Thus, the results demonstrate a first indication of the cytotoxic activity of compounds quassin and parain, adding an important social and economic value to them, and may have application in future research and in pharmaceutical industry. Resumo O objetivo do estudo foi avaliar a atividade citotóxica, por meio do teste MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio], do extrato bruto de Picrasma crenata (Pau Tenente) e seus compostos isolados, quassina e paraína, em cultura de células tumorais de fígado de rato (HTC). O teste foi realizado expondo as células por 24, 48 e 72 horas às concentrações de 5, 10, 50, 100, 200, 300, 400, 500 e 1000 μg de extrato bruto de Pau Tenente/mL de meio de cultura e 1, 5, 10, 15, 20, 40, 60, 80 e 100 μg de compostos de quassina ou paraína/mL de meio de cultura. Os resultados das médias de absorbâncias obtidos mostraram que o extrato bruto não apresentou citotoxicidade para as células HTC em todas as concentrações e tempos avaliados. Para quassina, as concentrações de 80 e 100 μg/mL foram citotóxicas, após 72 horas de tratamento. Para a paraína, as concentrações de 1, 5, 20, 40, 60, 80 e 100 µg/mL, em 72 horas, foram citotóxicas, revelando uma nova atividade para este composto. Assim, os resultados demonstram uma primeira indicação da atividade citotóxica dos compostos quassina e paraína, agregando-lhes importante valor social e econômico, podendo ter aplicação em pesquisas futuras e na indústria farmacêutica.

Introdução: A Moringa oleifera pertence à família Moringaceae. Acredita-se que a planta atue como antioxidante, antibacteriana, anti-inflamatória, anticancerígena, anti-hiperglicémica e neuroprotetora. Muitos são os estudos focados na pesquisa de atividades biológicas em extratos de M. oleifera, porém poucos são os realizados em produtos comerciais [1-4]. Objetivo: Avaliar, in vitro, a atividade antioxidante, antibacteriana e citotóxica do extrato aquoso de um produto comercial contendo Moringa e Limão. Métodos: Para a obtenção do extrato aquoso preparou-se uma infusão do produto (uma saqueta em 250 ml de água fervente, por 5 minutos), que foi filtrada e posteriormente liofilizada. Na avaliação da atividade antioxidante in vitro, recorreu-se ao ensaio do peróxido de hidrogénio (H2O2) e do 2,2-azinobis (3-etilbenzotiazolina-acidosulfónico) (ABTS), assim como à determinação do teor total de compostos fenólicos (TPC). Para avaliação da atividade antibacteriana, recorreu-se ao ensaio de difusão em discos (concentrações testadas: 0,5; 1; 5; e 10 mg/m) e à determinação da Concentração Mínima Inibitória (CMI), por microdiluição. Por fim, avaliou-se a citotoxicidade às 48h, pelo ensaio do 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-brometo de difeniltetrazólio (MTT), em células A549 (linha celular epitelial de carcinoma do pulmão). Resultados: Obteve-se um TPC de 45,7 ± 0,0 mg GAE/g extrato. Nos ensaios antioxidantes, os valores de IC50 foram de 3,1 µg/ml e 200,8 ± 0,3 µg/ml para o ensaio de H2O2 e ABTS, respetivamente. Quanto à atividade antibacteriana, obteve-se um halo de inibição de 12 mm na concentração de 10 mg/ml, para a Escherichia coli e Staphylococcus aureus, e um valor de CMI de 5 mg/ml para a E.coli. Por fim, no ensaio de MTT, a % de viabilidade celular variou entre 56,6% e 61,2% às 48h. Conclusões: O extrato aquoso da mistura parece ter potencial antioxidante e antibacteriano que poderá estar associado aos compostos das plantas, porém mais estudos são necessários para confirmar os dados obtidos., Proceedings of Research and Practice in Allied and Environmental Health, Vol. 1 N.º 1 (2023): I Jornadas do CISA: 'Jovens Com a Ciência'

For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-1 and 1.0 mg mL-1 MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-1). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-1, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA. Resumo Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-1 e 1,0 mg mL-1 foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-1 de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-1, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

A Uncaria tomentosa (Unha-de-Gato) é usada amplamente pela população brasileira por ser de fácil aquisição, logo, a compreensão dos seus efeitos toxicológicos contribui para evitar ação nociva ocasionada por seus constituintes. A toxicidade dessas substâncias pode ser analisada por vários métodos que utilizam modelos in vitro, in vivo, ex vivo e in silico. Nesse contexto, buscou-se avaliar a toxicidade da Uncaria tomentosa. O presente estudo tratou-se de uma pesquisa do tipo revisão integrativa da literatura, na qual foram selecionados artigos nas bases de dados PubMed/Medline, LILACS, Science Direct e SciELO, durante o período de agosto de 2002 a agosto de 2022. Os resultados apontam que Uncaria tomentosa não é genotóxica, mas é citotóxica, tanto nas análises realizadas com seus extratos aquosos e hidroetanólico (água e etanol), quanto suas substâncias obtidas a partir do isolamento dos extratos como alcalóides e glicosídeos, avaliados em diversos modelos de estudo como células humanas não neoplásicas e neoplásicas, Drosophila melanogaster, células de ratos Wistar, células de camundongos e zebrafish (Danio rerio). Além de sua possível ação antimutagênica e antigenotóxica, apresentando atividade de proteção a danos ao DNA possivelmente relacionada com suas substâncias como alcalóides e glicosídeos presentes nos extratos que podem desempenhar papel antioxidante de maneira isolada ou com efeito sinérgico, combatendo os radicais livres. Portanto, Uncaria tomentosa apresenta um uso seguro quanto sua toxicidade. Uncaria tomentosa (Cat's Claw) is widely used by the Brazilian population because it is easy to acquire, so understanding its toxicological effects helps to avoid harmful action caused by its constituents. The toxicity of these substances can be analyzed by several methods that use in vitro, in vivo, ex vivo and in silico models. In this context, we sought to evaluate the toxicity of Uncaria tomentosa. The present study was an integrative literature review, in which articles were selected from the PubMed/Medline, LILACS, Science Direct and SciELO databases, during the period from August 2002 to August 2022. The results point out that Uncaria tomentosa is not genotoxic, but is cytotoxic, both in the analyzes carried out with its aqueous and hydroethanolic extracts (water and ethanol), and its substances obtained from the isolation of extracts such as alkaloids and glycosides, evaluated in several study models such as non-neoplastic and neoplastic human cells, Drosophila melanogaster, cells from Wistar rats, cells from mice and zebrafish (Danio rerio). In addition to its possible antimutagenic and antigenotoxic action, it has a protective activity against DNA damage possibly related to its substances such as alkaloids and glycosides present in the extracts that can play an antioxidant role in isolation or with a synergistic effect, fighting free radicals. Therefore, Uncaria tomentosa presents a safe use regarding its toxicity. La Uncaria tomentosa (Uña de Gato) es ampliamente utilizada por la población brasileña porque es fácil de adquirir, por lo que conocer sus efectos toxicológicos ayuda a evitar la acción nociva causada por sus componentes. La toxicidad de estas sustancias puede analizarse por varios métodos que utilizan modelos in vitro, in vivo, ex vivo e in silico. En este contexto, buscamos evaluar la toxicidad de Uncaria tomentosa. El presente estudio fue una revisión integrativa de la literatura, en la que se seleccionaron artículos de las bases de datos PubMed/Medline, LILACS, Science Direct y SciELO, durante el período de agosto de 2002 a agosto de 2022. Los resultados apuntan que la Uncaria tomentosa no es genotóxica, pero es citotóxico, tanto en los análisis realizados con sus extractos acuosos e hidroetanólicos (agua y etanol), como sus sustancias obtenidas del aislamiento de extractos como alcaloides y glucósidos, evaluados en varios modelos de estudio como humanos no neoplásicos y neoplásicos células de Drosophila melanogaster, células de rata Wistar, células de ratón y pez cebra (Danio rerio). Además de su posible acción antimutagénica y antigenotóxica, tiene una actividad protectora frente al daño del ADN posiblemente relacionado con sus sustancias como los alcaloides y glucósidos presentes en los extractos que pueden desempeñar un papel antioxidante de forma aislada o con efecto sinérgico, combatiendo los radicales libres. Por lo tanto, Uncaria tomentosa presenta un uso seguro en cuanto a su toxicidad.

Metallodrugs like cisplatin and related platinum compounds, widely used for the treatment of cancer patients, have severe side effects and acquired resistance, which are limiting their use. In addition, several cancer conditions are not responsive to available treatments and thus, viable clinical solutions are still lacking. Metal-based drugs have received a great deal of attention in recent years owing to their properties and benefits in biomedical, therapeutic and diagnostic systems. A wider understanding of the anticancer properties of transition metal complexes like Ru, V, Cu, and Zn and their interactions in biological media is very necessary to ensure their effectiveness and safety. In the current work, four Schiff base ligands derived from the condensation of 8-hydroxy-2-quinolinecarbaldehyde and benzohydrazides (H2L1-H2L4), and their corresponding zinc complexes, ZnL1, ZnL2, ZnL3, and ZnL4 were synthesized. All compounds were characterized by elemental analyses, FTIR, UV–Vis and NMR spectroscopies as well as ESI-MS spectrometry. The stability of the complexes was evaluated in DMSO and under physiological conditions (HEPES buffer (10 mM, pH 7.4) containing DMSO). The interaction between Schiff bases and their corresponding Zn(II) complexes with biological molecules, namely bovine serum albumin (BSA) was investigated using UV-Vis and fluorescence spectroscopies at 298 K. Fluorescence quenching of BSA upon interaction with the complexes was also analyzed at 298, 301, 305 and 310 K. Using the Stern-Volmer formalism, the binding constants indicated moderate to strong binding to albumin with values ranging from Kb = 0.63 to 7.81×104 M-1 for the first three complexes. These results reveal good binding propensity with the protein. Additionally, evaluation of thermodynamic parameters revealed that hydrophobic interactions are the main interactive forces involved in the zinc complexes binding to BSA. In vitro cytotoxic activity of the ligands and their complexes was evaluated on prostate carcinoma (LNCaP FGC), acute T-cell leukaemia (Jurkat E6-1), myeloma (MM.1S), and non-cancerous immortalized human HEK-293 cell lines. Strong cytotoxic activities of both ligands and complexes were observed against all three cancer cell lines. In the non-cancer cell line, the ligands exhibited lower IC50 values than their counterpart complexes. However, the metal complexes have solubility issues, making it difficult for their evaluation.Overall, the current ligand system shows high potential for cancer treatment due to the high selectivity towards the studied cancer cells. Os complexos de metais como a cisplatina e compostos de platina relacionados, amplamente utilizados para o tratamento de doentes com cancro, têm efeitos secundários graves e problemas de resistência adquirida, que limitam a sua utilização. Além disso, várias tipos de cancro não respondem aos tratamentos disponíveis e, por conseguinte, são necessárias soluções clínicas alternativas. Os fármacos à base de metais têm recebido muita atenção nos últimos anos devido às suas propriedades e benefícios em sistemas biomédicos, quer terapêuticos, quer e de diagnóstico. Uma compreensão mais ampla das propriedades anticancerígenas de complexos metálicos de transição como Ru, V, Cu, e Zn e as suas interacções nos meios biológicos é muito importante para garantir a sua eficácia e segurança. No trabalho actual, foram sintetizados quatro ligandos base de Schiff derivados da condensação de 8-hidroxi-2-quinolinocarbaldeído e benzohidrazidas (H2L1-H2L4), e os seus correspondentes complexos de zinco, ZnL1, ZnL2, ZnL3, e ZnL4. Todos os compostos foram caracterizados por análise elementar, espectroscopias de absorção no IV, UV-Vis e RMN, bem como espectrometria de massa (ESI-MS). A estabilidade dos complexos em solução foi avaliada em dimetilsulfóxido (DMSO) e sob condições fisiológicas (tampão HEPES (10 mM, pH 7,4) contendo DMSO). A interacção entre as bases de Schiff e os seus correspondentes complexos de Zn(II) com macromoléculas biológicas, nomeadamente albumina de soro bovino (BSA) foi investigada utilizando espectroscopias de UV-Vis e fluorescência a 298 K. A extinção da fluorescência da BSA após interacção com os complexos foi também analisada a 298, 301, 305 e 310 K. Usando o formalismo de Stern-Volmer, as constantes de ligação indicaram ligação moderada a forte à albumina com valores que variaram entre Kb = 0,63 a 7,81×104 M-1 para os três primeiros complexos. Estes resultados revelam uma boa propensão de ligação para com a proteína. Além disso, a avaliação dos parâmetros termodinâmicos revelou que as interacções hidrofóbicas são as principais forças de interacção entre os complexos de zinco e a BSA. A actividade citotóxica in vitro dos ligandos e seus complexos foi avaliada em células de carcinoma da próstata (LNCaP FGC), leucemia aguda das células T (Jurkat E6-1), mieloma (MM.1S), e uma linhas de células humanas não-cancerosas imortalizadas, HEK-293. Foram observadas elevadas fortes actividades citotóxicas de ambos os ligandos e complexos contra as três linhas de células cancerígenas. Na linha celular não-cancerígena, os ligandos apresentaram valores de IC50 inferiores aos dos seus complexos homólogos. No entanto, os complexos metálicos têm problemas de solubilidade, o que dificultou a sua avaliação. Em geral, o actual sistema de ligandos mostra um elevado potencial para o tratamento do cancro devido à elevada selectividade em relação às células cancerígenas estudadas. My sincere gratitude also goes to the European commission for the financial support from start to finish of this programme. My heartfelt appreciation goes to Professor Bjørn Grung, University of Bergen (UIB) -Norway and Erasmus Mundus Master in Quality in Analytical Laboratory (EMQAL) programme director for his love, care and support throughout the entire programme.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Diptera of the Calliphoridae family play an important role in forensic analysis, veterinary and medical science. Its use in biotherapy is well known and important due to the biological activity of the larvae and the constituents of their secretion that help in tissue healing. An advantage of using larval secretion is the low toxicity in normal cells, little or no side effects with low production cost. This work evaluated the in vitro biological activity of larval secretion of L. cuprina and S. chlorogaster in protozoa and cell lines. In the first study, the secretion of L. cuprina was evaluated against L. amazonensis promastigotes, T. cruzi epimastigotes, B16-F10 tumor lineage and HFF-1 non-tumor cell lineage to evaluate cytotoxicity and safety. The results revealed that the secretion was effective in reducing the viability of parasites and tumor cells. It also proved to be safe against the fibroblast lineage. In the second study, secretions of L. cuprina and S. chlorogaster were evaluated against other tumor cell lines (A549, A375 and Hela), antiproliferative activity, DNA cleavage and identification of constituents by mass spectrometry. The results showed the ability of L. cuprina to reduce cell viability and increase reactive oxygen and nitrogen species against tumor cell lines A549, A375 and HeLa in all tests applied VN, ON, MTT, LDH, Adherence and DCFH-DA. Both secretions exerted antiproliferative activity and were able to cleave plasmid DNA. Regarding the analysis of the constituents, it was possible to identify components such as fatty acid, cembranoid valine, stearoylhistidine and tripeptide in the secretion of L. cuprina. The secretion of S. chlorogaster presented chemical structures not recognized in the database, suggesting the possibility of unpublished components. Taken together, the presented results demonstrate that dipteran secretion becomes an important resource to be analyzed due to its biological properties with in vitro action against protozoa and carcinomas. Dípteros da família Calliphoridae desempenham um papel importante em análises forenses, veterinárias e ciência médica. Seu uso em bioterapia é bem conhecido e importante devido à atividade biológica das larvas e aos constituintes da sua secreção que ajudam na cicatrização de tecidos. Uma vantagem do uso da secreção larval, é a baixa toxicidade em células normais, pouco ou nenhum efeito colateral com baixo custo para produção. Este trabalho avaliou a atividade biológica in vitro da secreção larval de L. cuprina e S. chlorogaster em protozoários e linhagens celulares. No primeiro estudo a secreção de L. cuprina foi avaliada frente à promastigotas de L. amazonensis, epimastigotas de T. cruzi, linhagem tumoral B16-F10 e não tumoral HFF-1 para avaliar citotoxicidade e segurança. Os resultados revelaram que a secreção foi eficaz em reduzir a viabilidade dos parasitas e células tumorais. Também mostrou-se segura frente à linhagem de fibroblastos. No segundo estudo foram avaliadas as secreções de L. cuprina e S. chlorogaster frente à outras linhagens de células tumorais (A549, A375 e Hela), atividade antiproliferativa, clivagem de DNA e identificação dos constituintes por espectrometria de massas. Os resultados mostraram a capacidade de L. cuprina em reduzir a viabilidade celular e aumentar de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio frente às linhagens tumorais A549, A375 e HeLa, nas concentrações de 0,1, 0,25, 0,5, 1, 2, 5 e 10%, em todos os testes aplicados VN, ON, MTT, LDH, Aderência e DCFH-DA. Ambas as secreções exerceram atividade antiproliferativa e foram hábeis à clivar DNA plasmidial. Em relação à análise dos constituintes foi possível identificar componentes como ácido graxo, valina cembranoid, estearoil-histidina e tripeptídeo na secreção de L. cuprina. Já a secreção de S. chlorogaster apresentou estruturas químicas não reconhecidas no banco de dados, sugerindo possibilidade de componentes inéditos. Tomados em conjunto, os resultados apresentados demonstram que a secreção de dípteros torna-se um importante recurso a ser analisado devido a suas propriedades biológicas com ação in vitro contra protozoários e carcinomas.

Dissertação de mestrado em Biologia Molecular, Biotecnologia e Bioempreendedorismo em Plantas, O própolis é uma mistura resinosa e balsâmica natural produzida por abelhas rica em flavonóides e compostos fenólicos, que são geralmente associados às atividades antioxidante, citotóxica e antimicrobiana. Mesmo sendo o própolis um produto reconhecido e bem estudado mundialmente, ainda há poucos estudos sobre o própolis português, sendo este um produto subvalorizado. O presente trabalho é uma extensão de trabalhos realizados anteriormente sobre o própolis português do apiário do Pereiro, Beira Alta. Nesses trabalhos foi observada uma diferença nos efeitos de extratos etanólicos de amostras colhidas em 2010 (P10.EE) e em 2013 (P13.EE) no modelo biológico Saccharomyces cerevisiae, sendo que P13.EE apresentava um efeito pouco citotóxico e um efeito antioxidante, enquanto P10.EE se apresentou bastante citotóxico e pouco antioxidante. Estas diferenças entre amostras do mesmo apiário levaram à questão de quais seriam os seus mecanismos de ação e o que os causaria. Os resultados anteriores sugeriram que o P10.EE induz um tipo de morte celular regulada, que poderia ser apoptótica ou necrótica, e, também, que este extrato causa danos no DNA. No presente estudo, no caso do P13.EE, os resultados de viabilidade e de análise da oxidação intracelular por citometria de fluxo com a estirpe parental BY4741 e mutantes deficientes na resposta ao stresse oxidativo demonstraram um efeito anti e pró oxidante dependente da concentração, possivelmente devido à presença de ester fenetil do ácido cafeico, pinobanksina e pinocembrina no extrato, apresentando atividade antioxidante em concentrações menores, que, por sua vez parece estar envolvida com a eliminação direta de radicais livres e a ativação das defesas antioxidantes celulares. Já no estudo de P10.EE, os resultados de ensaios distintos de microscopia de fluorescência com os marcadores 4’,6-diamino-2-fenil-indol e iodeto de propídio sugeriram que o extrato não causa morte celular por apoptose, mas sim por uma via necrótica. A análise do ciclo celular por citometria de fluxo indicou que o extrato causa uma paragem reversível nas fases G1/S do ciclo celular. Em suma, P13.EE e P10.EE exibem atividades antioxidante e citotóxica, respetivamente; porém, tais diferenças não estarão relacionadas com o seu teor fenólico, uma vez que os cromatogramas das análises cromatográficas de ultra eficiência de P10.EE e P13.EE não revelaram diferenças entre os dois extratos. Este estudo contribuiu para um maior conhecimento dos seus mecanismos de ação, para o crescimento do valor nacional deste produto português, e para a sua possível aplicação em diversas indústrias., Propolis is a natural resinous and balsamic mixture made by honeybees, rich in flavonoids and phenolics, which are generally associated with propolis’ antioxidant, cytotoxic and antimicrobial activities. Although propolis is generally recognized and well-studied worldwide, Portuguese propolis research is still scarce and this product is nationally undervalued. The present work is an extension to previous works on Portuguese propolis from the Pereiro apiary, located in Beira Alta. Ethanol extracts of Pereiro propolis samples harvested in 2010 (P10.EE) and 2013 (P13.EE) were found to have different effects on the biological model Saccharomyces cerevisiae, with P13.EE presenting a low cytotoxic effect and a promising antioxidant effect, while P10.EE exhibited high cytotoxicity and very low antioxidant effects. These intriguing differences in samples from the same apiary led to the question of what their mechanisms of action could be and what could be causing these differences. The previous studies were able to hint on the P10.EE mechanism of action, inferring that the extract induces a type of regulated cell death, that could either be apoptotic or necrotic, and that it also causes DNA damage. In the present work, regarding the study of the P13.EE, results from viability assays and flow cytometry intracellular oxidation analysis with the parent strain BY4741 and derived mutants with a deficient oxidative stress response suggested a dose-dependent anti and pro-oxidant effect, that could be related to the presence of compounds like caffeic acid phenethyl ester, pinobanksin and pinocembrin in the extract, presenting antioxidant activity at lower concentrations, which in turn appears to result from both direct radical scavenging and activation of the cellular antioxidant defenses. Regarding the study of P10.EE, results from separate fluorescent microscopy assays with 4’,6-diamidino-2-phenylindole and propidium iodide staining suggested that the extract is not inducing cell death through apoptosis but instead through a necrotic pathway. Cell cycle analysis through flow cytometry indicated that P10.EE causes a reversible arrest in the G1/S cell cycle phases. In conclusion, P13.EE and P10.EE exhibit promising antioxidant and cytotoxic activities, respectively, but these differences are probably not related to their phenolic content, since the chromatograms from the ultra-performance chromatographic analysis of both extracts did not reveal differences between the two. This study was able to successfully uncover parts of their intriguing mechanisms of action, contributing to the growth of Portuguese propolis national value and their possible applications in various industries.

As nanopartículas de óxido de ferro (IONPs) representam uma classe de nanomateriais magnéticos e biocompatíveis que têm sido amplamente utilizados em pesquisas e aplicações médicas, como estudos de hipertermia, como agentes de contraste para ressonância magnética, biossensores, entre outros. Entretanto, sua aplicação depende de fatores como, morfologia, tamanho e propriedade de superfície estejam ajustados. As IONPs podem ser obtidas por diferentes métodos de síntese, no entanto, a coprecipitação química representa uma rota de síntese mais simples, fácil e rápida, na qual soluções aquosas de precursores contendo íons ferro (Fe3+) e ferroso (Fe2+) são alcalinizadas sob controle de temperatura e pH. Este estudo propõe sintetizar nanopartículas de óxido de ferro pelo método de coprecipitação química e estabilizá-las com citrato de sódio (IONPs-CIT) e hidróxido de tetrametilamônio (IONPs-TMAOH). Além disso, caracterizar o diâmetro hidrodinâmico e o Potencial Zeta das amostras por espalhamento dinâmico da luz. A citotoxicidade das IONPs-CIT na linhagem celular MDA-MB-468 foi avaliada através da análise da atividade mitocondrial. Iron oxide nanoparticles (IONPs) represents a class of magnetic and biocompatible nanomaterials that have been widely used in research and medical applications, such as hyperthermia studies, as contrast agents for magnetic resonance imaging, biosensors, among others. However, their application depends on factors as surface properties, size, and morphology being appropriately balanced. IONPs can be obtained by different synthesis methods, however, chemical coprecipitation represents a simpler, easier and faster route, in which aqueous solutions of precursors containing iron (Fe3+) and ferrous (Fe2+) ions are alkalized under control of temperature and pH. This study proposes to synthesize iron oxide nanoparticles by the chemical coprecipitation method and to stabilize them with sodium citrate (IONPs-CIT) and tetramethylammonium hydroxide (IONPs-TMAOH). Furthermore, to characterize the hydrodynamic diameter and the Zeta Potential of the samples by Dynamic Light Scattering. The cytotoxicity of IONPs- CIT in the MDA-MB-468 cell line was evaluated through the analysis of mitochondrial activity. Las nanopartículas de óxido de hierro (IONPs) representan una clase de nanomateriales magnéticos y biocompatibles que han sido ampliamente utilizados en investigación y aplicaciones médicas, tales como estudios de hipertermia, agentes de contraste para resonancia magnética, biosensores, entre otros. Sin embargo, su aplicación depende de un balance apropiado en factores como la morfología, el tamaño y las propiedades superficiales. Los IONP se pueden obtener por diferentes métodos de síntesis, sin embargo, la coprecipitación química representa una ruta más simple, fácil y rápida, en la cual se alcalinizan soluciones acuosas de precursores que contienen iones de hierro (Fe3+) y ferroso (Fe2+) bajo control de la temperatura y el pH. Este estudio propone sintetizar nanopartículas de óxido de hierro por el método de coprecipitación química y estabilizarlas con citrato de sodio (IONPs-CIT) e hidróxido de tetrametilamonio (IONPs-TMAOH). Además, caracterizar el diámetro hidrodinámico y el Potencial Zeta de las síntesis de Dispersión Dinámica de Luz. La citotoxicidad de IONPs-CIT en la línea celular MDA-MB-468 se evaluó mediante el análisis de la actividad mitocondrial.

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Universitário Egas Moniz Introdução: Avaliar e comparar a citotoxicidade de resinas compostas autoadesivas experimentais, formuladas com diferentes monómeros funcionais, pelo método indireto de extrato, às 24 horas, utilizando células do tipo préodontoblásticas (MDPC23). Métodos: Para o presente estudo foram formuladas 5 resinas autoadesivas, com variação do monómero funcional adesivo/surfactante. A mistura de resina líquida consistiu em dimetacrilato de uretano (UDMA) a 60 wt%, com adição de 24 wt% de dimetacrilato de trietilenoglicol (TEGDMA) como diluente. Em 4 dos 5 grupos experimentais foram adicionados 10 wt% de diferentes monómeros funcionais: 10MDP, GPDM, HEAA e HEMA. A última formulação, de controlo, teve 10 wt% adicionais de UDMA, sem monómero funcional. Foi adicionado ainda 1% de canforoquinona à fase líquida. A fase particulada incluiu vidros de bário e aluminossilicatos (1,5 μm e 0,4 μm) e nanopartículas de sílica. Os compósitos foram misturados numa proporção pólíquido de 1.2:1, com recurso a uma misturadora centrífuga. Cada resina foi introduzida em anéis de silicone do tipo ORing de dimensões padronizadas, procedendo-se de seguida à polimerização de 8 discos de resina por grupo experimental. Os discos foram esterilizados com recurso a radiação UV, tendo sido subsequentemente introduzidos no condicionamento de meio celular numa proporção de 1:1 (incubação 24 horas sob agitação). Foi utilizada uma cultura celular do tipo préodontoblastos (MDPC23) num ensaio de citotoxicidade de 3 (4,5Dimetiltiazol2yl) 2,5Difenil Tetrazolium (MTT) realizado 24h após a exposição das células aos extratos em diferentes concentrações, tendo sido posteriormente calculada a viabilidade celular. Resultados: Foram registadas diferenças entre os grupos estudados em concentrações abaixo de 100% (50, 25, 12,5 e 6,25%) e entre os grupos experimentais contendo HEMA e HEAA como monómeros funcionais. Conclusões: Todas as resinas autoadesivas testadas demonstraram desencadear respostas de citoxicidade, em concentrações elevadas, 24 horas após a administração dos extratos, sendo que este nível de toxicidade varia em função da formulação. Introduction: To evaluate and compare the cytotoxicity of experimental selfadhesive compounds, formulated with different functional monomer resins, by the indirect extractor method, at 24h, using preodontoblast cells (MDPC23). Methods: For the present study, 5 different selfadhesive resins were formulated, with a set of adhesive/surfactant monomer. The liquid blend resin included 60 wt% urethane dimethacrylate (UDMA), combined with 24 wt% of triethylene glycol dimethacrylate (TEGDMA) as a diluent. In 4 of the 5 experimental groups, 10 wt% was composed by a different functional monomer: 10MDP, GPDM, HEAA and HEMA. The last formulation, the control group, had an additional 10 wt% of UDMA, not containing a functional monomer. A further 1wt% of camphorquinone was added to the liquid phase. The particulate phase included barium and aluminosilicate glasses (1.5 μm and 0.4 μm) and silica nanoparticles. The composites were blended in a 1.2:1 powdertoliquid ratio using a centrifugal mixer (45 s, 1500 rpm). Each resin was then introduced in silicone rings, being then polymerized and producing 8 discs per group. The discs were sterilized using UV radiation and were subsequently introduced into the cell medium conditioning at a ratio of 1:1 (24 hours incubation under agitation). A preodontoblasttype cell culture (MDPC23) was used in an 3 (4,5dimethylthiazol2yl) 2,5diphenyltetrazolium bromide (MTT) cytotoxicity assay performed 24h after cell exposure to the extracts at different concentrations. Cell viability was subsequently calculated. Results: Differences were only registered for concentrations below 100% (50, 25, 12.5 and 6.25%) and between the experimental groups containing HEMA and HEAA. Conclusions: All the selfadhesive resins tested showed to be cytotoxic, in high concentrations, 24 hours after cell exposure to the extracts, varying with the different formulations.

The aim of the present study was to evaluate the cytotoxic potential of a new complex of silver(I) with furosemide (Ag-FSE) over a panel of tumor and non-tumor human cells, as well as its genotoxicological safety. According to the results obtained, cell line derived from colorectal adenocarcinoma (Caco-2) was the most sensitive to the Ag-FSE complex, and among the non-tumor cells was the non-transforming fibroblasts known as GM07492A, which stimulated the characterization of cytotoxic properties against these cells. In addition to interfering with the cellular metabolic profile (evidenced by the resazurin method), Ag-FSE alters the integrity of cell membranes (results obtained by the Trypan blue assay) regardless of the cell line evaluated. However, interference with clonogenic capacity is dependent on the cell being tested; the cytotoxic activity evaluated by the clonogenic survival assay was evidenced against Caco-2 cells, but not against GM07492A cells. Furthermore, Ag-FSE did not induce an increase in the extent of DNA damage detectable by the comet assay, nor in the frequency of micronuclei compared to the negative control, demonstrating the absence of genotoxicity under the experimental conditions used. The data of the present study provide information on various biological aspects of the Ag-FSE complex and help in the generation of new drug candidates with potential to impact the health area, targeting cancer treatment. El objetivo del presente estudio fue evaluar el potencial citotóxico de un nuevo complejo de plata(I) con furosemida (Ag-FSE) en un panel de células tumorales y no tumorales humanas, así como su seguridad genotoxicológica. De acuerdo con los resultados obtenidos, la línea celular derivada del adenocarcinoma colorrectal (Caco-2) fue la más sensible al complejo Ag-FSE, y entre las células no tumorales se encontraban los fibroblastos no transformantes conocidos como GM07492A, lo que estimuló la caracterización. de las propiedades citotóxicas contra estas células. Además de interferir con el perfil metabólico celular (evidenciado por el método de resazurina), Ag-FSE altera la integridad de las membranas celulares (resultados obtenidos por el ensayo de azul de tripano) independientemente del linaje celular evaluado. Sin embargo, la interferencia con la capacidad clonogénica depende de la célula que se esté analizando; la actividad citotóxica evaluada por el ensayo de supervivencia clonogénica se evidenció frente a las células Caco-2, pero no frente a las células GM07492A. Además, Ag-FSE no indujo un aumento en la extensión del daño del ADN detectable por el ensayo Comet, ni en la frecuencia de micronúcleos en relación con el control negativo, lo que demuestra la ausencia de genotoxicidad en las condiciones experimentales utilizadas. Los datos del presente estudio brindan información sobre varios aspectos biológicos del complejo Ag-FSE y ayudan en la generación de nuevos candidatos a fármacos con potencial impacto en el área de la salud, con miras al tratamiento del cáncer. O objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial citotóxico de um novo complexo de prata(I) com furosemida (Ag-FSE) sobre um painel de células humanas tumorais e não tumorais, bem como sua segurança genotoxicológica. De acordo com os resultados obtidos, a linhagem celular derivada do adenocarcinoma colorretal (Caco-2) foi a mais sensível ao complexo Ag-FSE, e dentre as células não tumorais foram fibroblastos não transformantes conhecidos como GM07492A, o que estimulou a caracterização das propriedades citotóxicas contra essas células. Além de interferir no perfil metabólico celular (evidenciado pelo método da resazurina), Ag-FSE altera a integridade das membranas celulares (resultados obtidos pelo ensaio do azul de Trypan) independentemente da linhagem celular avaliada. No entanto, a interferência na capacidade clonogênica depende da célula que está sendo testada; a atividade citotóxica avaliada pelo ensaio de sobrevivência clonogênica foi evidenciada contra células Caco-2, mas não contra células GM07492A. Além disso, Ag-FSE não induziu aumento na extensão do dano ao DNA detectável pelo ensaio Cometa, nem na frequência de micronúcleos em relação ao controle negativo, demonstrando ausência de genotoxicidade nas condições experimentais utilizadas. Os dados do presente estudo fornecem informações sobre diversos aspectos biológicos do complexo Ag-FSE e auxiliam na geração de novos candidatos a fármacos com potencial de impacto na área da saúde, visando o tratamento do câncer.

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Dentre as diversas formas de tratamento disponíveis, a quimioterapia é uma das mais aplicadas, tendo destaque para a cisplatina, um complexo de platina(II), que teve sua ação antitumoral descoberta na década de 70 e, desde então, tem sido aplicado com esse propósito. No entanto, o caráter tóxico somado a crescente resistência a fármacos (MDR) tem motivado a busca por novos candidatos a metalo-fármacos. Assim, complexos de paládio(II) aparecem como um candidatos promissores no design de compostos com potencial atividade antitumoral, já que possuem características estruturais semelhantes a platina(II), porém com a vantagem de geralmente não serem genotóxicos. Nesse sentido, duas séries de complexos de paládio(II) foram preparadas e reportadas neste trabalho. A primeira série compreende três complexos (R1-R3) derivados de pirazóis de fórmula geral [PdCl(nTPz)(PPh3)], {HTPz= 3,5-dimetilpirazol-1- iminotiolato (R1); MTPz= 3,5-dimetilpirazol-N-metil-1-iminotiolato (R2); FTPz= 3,5-dimetilpirazol-N-fenil-1-iminotiolato (R3); e PPh3 = trifenilfosfina. A segunda série, compreende dois complexos ciclopaladados derivados de benzilaminas de fórmula geral [Pd(C2 ,N-dmpa)(X)(lut)] {X = Cl− (RZ1) ou NNN− (RZ2)}, dmpa = N,N-dimetil-1-feniletilamina, lut = 2,6-Lutidina. Todos os complexos foram devidamente caracterizados por espectroscopia vibracional na região do IV, RMN de 1H e 13C, análise elementar e espectrometria de massas ESI/MS. Estudos de estabilidade química em solução aquosa também foram submetidos para as séries de complexos, por RMN ¹H, ³¹P, UV-Vis e condutividade molar. Ensaios in vitro de atividade antiproliferativa foram submetidos para a primeira série de complexos, frente as linhagens celulares MCF-7 (tumoral de mama) e MRC-5 (fibroblasto normal de pulmão). Os complexos foram ativos contra as células tumorais testadas, sendo o composto R2 com atividade comparável ao fármaco de referência cisplatina. Estudos de mecanismo de ação mostraram que os complexos da primeira série (R2-R3) tiveram a capacidade de inibir as enzimas catepsinas B e L, corroborados por estudos in sílico por ancoragem molecular com a enzima B. Por outro lado, os mesmos compostos não apresentaram atividade inibitória frente a enzima topoisomerase IIα, além de exibirem interações de natureza moderada com DNA. Para um dos compostos da segunda série (RZ2), a interação com DNA também foi estudada e apresentou um perfil de interação fraca com a biomolécula, porém mostrou boa capacidade de interação com a albumina de soro humano (HSA), especificamente no subdomínio II localizado no sítio I de Sudlow. Cancer represents the set of diseases that causes the most deaths worldwide, with cases related only to the respiratory tract appearing as the sixth leading cause of death in 2019, according to the WHO. Among the available forms of treatment, chemotherapy is one of the most applied, with emphasis on cisplatin, a platinum(II) complex, which had its antitumor activity discovered in the 1970s and since then has been applied with this purpose. However, the toxic character plus to the increasing drug resistance (MDR) has motivated the search for new candidates for metallodrugs. Thus, palladium(II) complexes appear as promising candidates for the design of compounds with potential antitumor activity, since they have structural characteristics similar to platinum(II), but with the advantage of not being genotoxic. In this sense, two series of palladium(II) complexes were prepared and reported in this work. The first series comprises three complexes (R1-R3) derived from pyrazoles of general formulae [PdCl(nTPz)(PPh3)], {HTPz= 3,5-dimethylpyrazole-1-iminothiolate (R1); MTPz= 3,5-dimethyl-pyrazole-N-methyl-1-iminothiolate (R2); FTPz= 3,5-dimethylpyrazole-N-phenyl-1-iminothiolate (R3); and PPh3 = triphenylphosphine. The second series comprises two cyclopallated complexes derived from benzylamines with the general formulae [Pd(C2,N-dmpa)(X)(lut)] {X = Cl− (RZ1) or NNN− (RZ2)}, dmpa = N,N-dimethyl-1-phenethylamine, lut = 2,6-Lutidine. All complexes were properly characterized by IR vibrational spectroscopy, 1H and 13C NMR, elemental analysis and ESI/MS mass spectrometry. Chemical stability studies in aqueous solution were also submitted for the series of complexes, by ¹H NMR, ³¹P, UV-Vis and molar conductivity. In vitro assays of antiproliferative activity were performed for the first series of complexes, against the cell lines MCF-7 (breast tumor) and MRC-5 (normal lung fibroblast). The complexes were active against the tested tumor cells, with the compound R2 with activity comparable to the reference drug cisplatin. Studies of the mechanism of action showed that the first series complexes (R2-R3) have had the ability to inhibit cathepsins B and L enzymes, corroborated by in silico studies by molecular docking with B enzyme. On the other hand, the same compounds do not showed inhibitory activity against topoisomerase IIα in addition to exhibiting moderate interactions with DNA. For one of the compounds of the second series (RZ2), the interaction with DNA was also studied and it showed weak interaction with the biomolecule, however it showed good ability to interact with human serum albumin (HSA), specifically in the subdomain II located at the Sudlow site I. 141023/2018-0

Objective: To evaluate the cytotoxic effects of carbamide peroxide (CP) and hydrogen peroxide (HP) bleaching agents, and their manifestations on teeth. Methods: A literature review was performed on the Pubmed database, using the following descriptors: tooth whitening, cytotoxicity, hydrogen peroxide, carbamide peroxide and pulpal reaction. 29 articles were selected. Review: The most commonly used tooth whitening gels are CP and HP, which achieve the same results at different application times. The inappropriate use of bleaching agents may cause adverse effects, such as cytotoxicity in the pulp tissue, causing from an inflammatory reaction to pulp necrosis, where dental sensitivity was the most common manifestation. HP in higher concentrations is indicated for office techniques, and implies a greater possibility of cytotoxic effect on the pulp tissue, especially if associated with the use of light source, and should also consider the thickness of the dentin in the dental element. Conclusion: Among the different bleaching agents, the use of CP (10%) in home bleaching will result in less cytotoxic effects on teeth, with effective bleaching action, and HP (17.5%) in office bleaching is less cytotoxic when compared to the conventional HP method (35%). Objetivo: evaluar los efectos citotóxicos de los agentes blanqueadores peróxido de carbamida (PC) y peróxido de hidrógeno (HP), y sus manifestaciones en los dientes. Métodos: Se realizó una revisión bibliográfica en la base de datos Pubmed, utilizando como descriptores: blanqueamiento dental, citotoxicidad, peróxido de hidrógeno, peróxido de carbamida y reacción pulpar, y se seleccionaron 29 artículos. Revisión: Los geles blanqueadores dentales más utilizados son el PC y el PH, que consiguen los mismos resultados en diferentes tiempos de aplicación. El uso inadecuado de agentes blanqueadores puede causar efectos adversos, como citotoxicidad en el tejido pulpar, causando desde una reacción inflamatoria hasta necrosis pulpar, donde la sensibilidad dental fue la manifestación más común. El PH en concentraciones más altas está indicado para técnicas de consultorio, e implica una mayor posibilidad de efecto citotóxico sobre el tejido pulpar, especialmente si se asocia con el uso de la fuente de luz, y también debe considerar el espesor de la dentina en el elemento dental. Conclusión: Entre los diferentes agentes blanqueadores, el uso de PC (10%) en el blanqueo domiciliario tendrá menos efectos citotóxicos en los dientes, con una acción blanqueadora eficaz, y el PH (17,5%) en el blanqueo en la consulta es menos citotóxico en comparación con el método convencional PH (35%). Objetivo: avaliar os efeitos citotóxicos dos agentes clareadores Peróxido de carbamida (PC) e peróxido de hidrogênio (PH), e suas manifestações nos dentes. Métodos: Foi feita uma revisão de literatura na base de dados Pubmed, utilizando como descritores: clareamento dental, citotoxicidade, peróxido de hidrogênio, peróxido de carbamida e reação pulpar, sendo selecionados 29 artigos. Revisão: Os géis clareadores mais utilizados para o clareamento dental são o PC e o PH, que alcançam os mesmos resultados em diferentes tempos de aplicação. O uso inadequado dos agentes clareadores pode ocasionar efeitos adversos, como citotoxicidade no tecido pulpar, ocasionando desde uma reação inflamatória até uma necrose pulpar, onde a sensibilidade dental foi a manifestação mais encontrada. O PH em concentrações mais elevadas é indicado para técnicas de consultório, e implica maior possibilidade de efeito citotóxico ao tecido pulpar, principalmente se for associado a uso de fonte de luz, devendo também se considerar a espessura da dentina no elemento dental. Conclusão: Entre os diferentes agentes clareadores, o uso do PC (10%) em clareamento caseiro, resultará em menos efeitos citotóxicos nos dentes, com eficaz ação clareadora, e o PH (17,5%) em clareamento de consultório é menos citotóxico quando comparado ao método convencional PH (35%).

Objective: To analyze the scientific literature that deals with the possible cytotoxicity developed by the use of ivermectin in patients with COVID-19: an integrative review. Methods: This is an integrative literature review, designed as an observational, cross-sectional and qualitative study, data collection was carried out from recent literary and scientific sources, from the year 2020 to the year 2022. Results: Ivermectin is metabolized in the liver, has a half-life four times longer than other drugs, and has great hepatoxic potential. Scientific evidence for its use was based on in vitro research, which shows insufficient results to determine its safety and efficacy. It was found that 05 days of treatment with ivermectin was a safe time to show effective results, with a dose of 0.4 - 0.6mg/kg per day. The interactions of ante - COVID 19 drug candidates with hepatic transporters were identified, these drugs have multiple inhibitory effects on hepatic membrane transporters and can cause toxicity and affect pharmacokinetics. Conclusion: The imprecision of data on the therapeutic use of ivermectiva is evidenced, together with low quality information for clinical guidance, with regard to use, dosage and duration of treatment. As for the possible cytotoxic effect of Ivermectin in patients with covid-19, there were no clinical studies to show such a result, however, its use is contraindicated due to the scarcity of data. Therefore, further randomized clinical trials are needed to determine the level of toxicity of ivermectin in the treatment of SARS-CoV-2. Objetivo: Analizar la literatura científica que trata sobre la posible citotoxicidad desarrollada por el uso de ivermectina en pacientes con COVID-19: una revisión integradora. Métodos: Se trata de una revisión integrativa de la literatura, diseñada como un estudio observacional, transversal y cualitativo, la recolección de datos se realizó de fuentes literarias y científicas recientes, desde el año 2020 hasta el año 2022. Resultados: La ivermectina se metaboliza en el hígado, tiene una vida media cuatro veces más larga que otras drogas, y tiene un gran potencial hepatotóxico. La evidencia científica para su uso se basó en investigaciones in vitro, que muestran resultados insuficientes para determinar su seguridad y eficacia. Se encontró que 05 días de tratamiento con ivermectina fue un tiempo seguro para mostrar resultados efectivos, con una dosis de 0,4 - 0,6 mg/kg por día. Se identificaron las interacciones de los candidatos a fármacos antI-COVID 19 con los transportadores hepáticos, estos fármacos tienen múltiples efectos inhibitorios sobre los transportadores de la membrana hepática y pueden causar toxicidad y afectar la farmacocinética. Conclusión: Se evidencia la imprecisión de los datos sobre el uso terapéutico de la ivermectiva, junto con información de baja calidad para la orientación clínica, en cuanto a uso, dosis y duración del tratamiento. En cuanto al posible efecto citotóxico de la Ivermectina en pacientes con COVID-19, no existen estudios clínicos que demuestren tal resultado, sin embargo, su uso está contraindicado por la escasez de datos. Por lo tanto, se necesitan más ensayos clínicos aleatorios para determinar el nivel de toxicidad de la ivermectina en el tratamiento del SARS-CoV-2. Objetivo: Analisar a literatura científica que trata da possível citotoxicidade desenvolvida pelo uso de ivermectina em pacientes com COVID-19: uma revisão integrativa. Métodos: Trata-se de uma revisão integrativa de literatura, delineado como um estudo observacional, transversal e qualitativo, realizou-se a coleta de dados a partir de fontes literárias e cientificas recentes, do ano de 2020 até o ano de 2022. Resultados: A metabolização da ivermectina ocorre no fígado, apresenta uma meia vida média de quatro vezes maior do que outros fármacos, grande potencial hepatóxico. As comprovações cientificas para sua utilização, se deram com base em pesquisa in vitro, o que apresenta resultados insuficientes para determinar sua segurança e eficácia. Constatou-se que 05 dias de tratamento com ivermectina, era um tempo seguro para apresentar resultados eficazes, com uma dose de 0,4 - 0,6mg/kg por dia. Identificou-se as interações de candidatos a medicamentos ante – COVID 19 com transportadores hepáticos, esses fármacos, têm múltiplos efeitos inibitórios nos transportadores de membrana hepática e podem causar toxicidade e afetar a farmacocinética. Conclusão: Evidencia-se a imprecisão de dados sobre o uso terapêutico da ivermectiva, juntamente a informações de baixa qualidade para orientação clínica, no que diz respeito ao uso, dosagem e duração do tratamento. Quanto ao possível efeito citotóxico da Ivermectina em pacientes com covid-19, não teve estudos clínicos para evidenciar tal resultado, porém, o seu uso é contraindicado devido à escassez de dados. Portanto, a realização de mais ensaios clínicos randomizados são necessários para determinar o nível de toxicidade da ivermectina no tratamento da SARS-CoV-2.

Copaiba oil extracted from the trunk of Copaifera langsdorffii Desf. and flaxseed oil extracted from the seeds of Linum usitatissimum L., are widely used for the prevention and treatment of many diseases, including cancer. The aim of this study was to assess the antimutagenic effect of these oils against the damage-inducing agent cyclophosphamide, in Rattus norvegicus treated in vivo, by gavage, using cytotoxicity and chromosomal alteration test. The animals were submitted to a single dose of copaiba oil and of flaxseed oil in the simultaneous treatment, pre-treatment and pos-treatment for 24 hours. None of these treatments presented cytotoxic effect. Treatments both oils and cyclophosphamide have significantly reduced the chromosomal damage caused by the clastogen. In groups treated with copaiba oil the reduction percentage was 77% for the simultaneous treatment, 83% for the pre-treatment and 75% for the pos-treatment, whereas in those treated with flaxseed oil was 94% for the pre-treatment and 96% for the simultaneous and pos-treatment. These results indicate that the both oils are not mutagenic, in contrast, they present antimutagenic activity against this clastogenic agent, which represents a protective effect on the cells against the drug that has damaged the genetic material. Aceite de copaiba extraído del tronco de Copaifera langsdorffii Desf. y el aceite de linaza extraído de las semillas de Linum usitatissimum L., son ampliamente utilizados para la prevención y tratamiento de diversas enfermedades, entre ellas el cáncer. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto antimutagénico de estos aceites contra el agente inductor de daño ciclofosfamida, en Rattus norvegicus tratados in vivo por sonda, mediante ensayos de citotoxicidad y alteración cromosómica. Los animales fueron sometidos a una dosis única de aceite de copaiba y aceite de linaza en el tratamiento simultáneo, pretratamiento y postratamiento durante 24 horas. Ninguno de estos tratamientos mostró un efecto citotóxico. Los tratamientos con aceites asociados a ciclofosfamida redujeron significativamente el daño cromosómico causado por el clastógeno. En los grupos tratados con aceite de copaiba, el porcentaje de reducción fue del 77% para el tratamiento simultáneo, del 83% para el pretratamiento y del 75% para el postratamiento, mientras que en los tratados con aceite de linaza fue del 94% para el pretratamiento y 96% para tratamiento simultáneo y post-tratamiento. Estos resultados indican que ambos aceites no son mutagénicos, por el contrario, tienen actividad antimutagénica frente a este agente clastogénico, lo que representa un efecto protector de las células frente al fármaco que dañó el material genético. O óleo de copaíba extraído do tronco de Copaifera langsdorffii Desf. e o óleo de linhaça extraído das sementes de Linum usitatissimum L., são amplamente utilizados para a prevenção e tratamento de diversas doenças, incluindo o câncer. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antimutagênico desses óleos contra o agente indutor de danos ciclofosfamida, em Rattus norvegicus tratado in vivo, por gavagem, por meio dos ensaios de citotoxicidade e de alteração cromossômica. Os animais foram submetidos a uma única dose de óleo de copaíba e de óleo de linhaça no tratamento simultâneo, pré-tratamento e pós-tratamento por 24 horas. Nenhum desses tratamentos apresentou efeito citotóxico. Os tratamentos com óleos associados com a ciclofosfamida reduziram significativamente os danos cromossômicos causados pelo clastógeno. Nos grupos tratados com óleo de copaíba o percentual de redução foi de 77% para o tratamento simultâneo, 83% para o pré-tratamento e 75% para o pós-tratamento, enquanto nos tratados com óleo de linhaça foi de 94% para o pré-tratamento e 96 % para o tratamento simultâneo e pós-tratamento. Esses resultados sugerem que ambos os óleos não são mutagênicos, ao contrário, apresentam atividade antimutagênica contra este agente clastogênico, o que representa um efeito protetor sobre as células frente o fármaco que danificou o material genético.

As nanoceluloses são nanomateriais inovadores com potencial para uma vasta gama de aplicações industriais e biomédicas. No entanto, a expansão da sua produção tem vindo a suscitar preocupações quanto aos possíveis efeitos, a longo prazo, na saúde humana. Este estudo teve como objetivo avaliar a segurança de algumas nanoceluloses produzidas a partir de matéria-prima nacional, através da caracterização da sua potencial toxicidade em células de mamífero. Para tal, testaram-se duas celuloses nano /microfibrilares (CNF e CMF ) e uma celulose nanocristalina (CNC). Analisou-se a citotoxicidade usando ensaios colorimétricos e o ensaio clonogénico, e a genotoxicidade pelo ensaio do micronúcleo in vitro em células pulmonares de mamífero (A549 e V79 ) e em osteoblastos humanos ( MG-63 ). A indução de espécies reativas de oxigénio (ROS) e a internalização celular foram também estudadas nas células A549. Observou- -se citotoxicidade no ensaio clonogénico, principalmente no caso da CNC, mas não nos restantes ensaios, não havendo também indução de ROS. Todas as nanoceluloses revelaram efeitos genotóxicos nalgumas concentrações, uma vez que induziram micronúcleos e /ou pontes nucleoplásmicas num dos modelos celulares. Para além disso, visualizou-se a internalização da CNF e CMF, mas não da CNC, em células A549. Esta primeira avaliação toxicológica veio contribuir para prevenir a exposição a materiais celulósicos potencialmente perigosos, procurando impulsionar o desenvolvimento de materiais inovadores e mais seguros. Nanocelluloses are innovative nanomaterials with potential for a wide range of industrial and biomedical applications. However, the expansion of its production has raised concerns about their possible long-term effects on human health. This study aimed to evaluate the safety of various nanocelluloses through the characterization of their potential toxicity in mammalian cells. Two samples of nano/microfibrillar celluloses with different pre-treatments (CNF and CMF) and a nanocrystalline cellulose (CNC) were tested. The cytotoxicity of the nanocelluloses was analyzed using colorimetric assays and the clonogenic assay, and genotoxicity by the in vitro micronucleus assay in human alveolar epithelial cells (A549), human osteoblasts (MG-63) and Chinese hamster fibroblasts (V79). Induction of reactive oxygen species (ROS) and cellular internalization were also studied in A549 cells. Cytotoxicity was observed through the clonogenic assay, mainly in the case of CNC, but not in the remaining assays, with no induction of ROS. All nanocelluloses, at some of the concentrations tested, induced micronuclei and/or nucleoplasmic bridges in one of the cellular models. Furthermore, the internalization of CNF and CMF, but not of CNC was visualized in A549 cells. These results aim to contribute to preventing exposure to potentially hazardous cellulosic materials, seeking to boost the development of innovative and safer materials. Projeto ToxApp4NanoCELFI – Uma abordagem de toxicologia preditiva para a caracterização dos potenciais efeitos respiratórios de fibras de nanocelulose funcionalizadas num sistema de co-cultura (PTDC/SAU-PUB/32587/2017). info:eu-repo/semantics/publishedVersion