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Esta investigación presenta resultados de los efectos ecotoxicológicos de las aguas de lastre transportada por los buques que arriban de viajes internacionales al puerto del Callao sobre juveniles de Odontesthes regia regia (Pejerrey), mediante un bioensayo agudo que determinó la mortandad de más del 50% de los organismos a partir de la concentración C3; asi como de una evaluación de parámetros fisicoquímicos y microbiológicos que reveló valores de pH fuera del rango normal de las aguas marinas con presencia de bacterias heterótrofas en cantidades de 210 unidades. Asimismo, se evaluó la gestión de los residuos que los buques dispusieron a través de artefactos navales e instalaciones de recepción acuática durante los años del 2017 al 2019 en 11 puertos marítimos del Perú, siendo el puerto del Callao el mayor receptor con 1,044.95 m3 de mezclas oleosas y 385.71 t de residuos y el puerto de Chancay el de menor transferencia con 28.99 m3 de mezclas oleosas y 16.19 t de residuos, debido a la presencia de un mayor número de buques en la flota naviera y a la concentración de actividades acuáticas en cada zona de operación.

Grado en Ingeniería Química

La araña roja, Tetranychus urticae Koch., es una de las plagas más importantes de la rosa de corte, (Rosa x hybrida), en el Estado de México y su combate se realiza principalmente mediante el uso de acaricidas como el propargite; mismo que los productores usaron inicialmente con resultados satisfactorios y actualmente no controla esta plaga. Con el objetivo de estimar el nivel de resistencia a dicho acaricida, en el año 2007 se evaluó su respuesta a dicho acaricida en poblaciones provenientes de Coatepec Harinas, Tenancingo, Villa Guerrero y Zumpahuacán, Estado de México. De cada localidad se recolectaron al menos 4 000 ninfas y 2 000 adultos en el cultivo de rosa de corte bajo invernadero y se reprodujeron hasta F1 para realizar los bioensayos. Se determinó el rango de dosis que eliminaba el 0 a 100% de los individuos tratados (ventana biológica). Posteriormente se incluyeron de cinco a siete concentraciones que cubrieron dicho rango. Se realizaron cinco repeticiones cuatro en días consecutivos diferentes. Las poblaciones de araña roja provenientes de Coatepec Harinas (RR95= 7.9×), Villa Guerrero (RR95=1.3×) y Zumpahuacán (RR95= 11×) se consideran susceptibles a propargite; mientras que la población de Tenancingo (RR95 = 90.1×) se considera resistente a dicho acaricida.

Las investigaciones en macrófitas acuáticas neotropicales son escasas, principalmente en Colombia comparadas con países como Brasil, aunque se consideran comunidades apropiadas en diversas aplicaciones por su gran capacidad reproductiva y alta sensibilidad a condiciones cambiantes del ambiente. Se propuso aclimatar y cultivar un clon de Lemna minuta, lenteja de agua flotante de amplia distribución en Colombia y América. Sus frondas hijas se mantuvieron dos meses en el medio de cultivo APHA y posteriormente se comparó su propagación en tres medios de cultivo: Hoagland’s E+, APHA y AAP20x. Se analizaron variables de crecimiento poblacional como tasa de crecimiento, mortalidad, tiempo de duplicación y tiempo de vida. Adicionalmente, se evaluó la eficiencia del método de limpieza de frondas propuesto por Acreman para obtener cultivos axénicos. Los resultados indicaron que el medio Hoagland’s E+ (sin compuestos orgánicos) es el más adecuado para el crecimiento de las frondas en condiciones de laboratorio, debido a su mayor tasa de producción de frondas (0,16 frondas·d-1) y tiempo de vida (13,8 días), con menor mortalidad (0,11 frondas·d-1) y tiempo de duplicación (4,61 días). Conocer los parámetros de crecimiento poblacional y las condiciones de cultivo de L. minuta permiten proponerla como una macrófita relevante y candidata para diversos bioensayos de calidad de agua. Although neotropical macrophytes are considered appropriate for diverse applications due to their great reproductive capacity and high sensitivity to changing environmental conditions, research on these plants is currently scarce, especially in Colombia when compared to countries such as Brazil. The current research work intended to acclimatize and cultivate a clone of the duckweed Lemna minuta, which is widely distributed in Colombia and America. After keeping daughter fronds of this species for two months in APHA culture medium, their propagation was compared in three culture media: Hoagland's E+, APHA and AAP20x. Population growth variables such as growth rate, mortality, doubling time and life span. Additionally, the efficiency of the frond cleaning method proposed by Acreman to obtain axenic cultures was evaluated. The results indicated that Hoagland's E+ medium (without organic compounds) is the most suitable one when it comes to frond growing under laboratory conditions, due to its associated higher frond production rate (0.16 fronds•d-1) and life span (13.8 d), as well as lower mortality (0.11 fronds•d-1) and doubling time (4.61 d). Knowing the population growth and cultivation conditions of L. minuta allows proposing it as a relevant macrophyte and candidate for various water quality bioassays.

Esta investigación evaluó la capacidad de la microalga Chlorella sp. viva en suspensión para remover el color del efluente de una empresa textil en el departamento del Atlántico (Colombia). La metodología empleada consistió inicialmente en cultivar la microalga en un biorreactor de 2,5 L de capacidad efectiva, empleando un fertilizante comercial como medio de cultivo bajo aireación continua a la temperatura del laboratorio, con fotoperiodos de luz/oscuridad de 12 horas. Luego el agua residual se sometió a tratamiento usando diferentes concentraciones de microalga equivalente a 0,10, 0,20 y 0,30 en absorbancia con sus respectivos controles. Los resultados muestran que el bioensayo de 0,30 en absorbancia removió el 97,2% del colorante presente y, disminuyó en un 94,6% el DQO y 95,4% el DBO5, entre otros parámetros de caracterización antes y después del tratamiento, mostrando la mejor bioremoción en este estudio. Estos resultados permiten sugerir que el tratamiento biológico con la microalga Chlorella sp. del agua residual es un método eficiente.

En el año 1992, la Conferencia de Naciones Unidas sobre el Medio Ambiente y el Desarrollo generó un programa para promover el desarrollo sostenible denominado Agenda 21. Este programa es un plan detallado de acciones que deben ser acometidas a nivel mundial, nacional y local para articular las relaciones existentes entre salud, desarrollo y degradación ambiental. Uno de los temas conflictivos planteados fue la disminución de la calidad y la disponibilidad del agua En lo referente a la evaluación de efectos producidos por contaminantes ambientales, se han venido desarrollando métodos de alta sensibilidad basados en el análisis de la toxicidad con organismos de diferente nivel de organización y escala trófica. En estos ensayos la realidad ecológica es inversamente proporcional a la complejidad del método. Para el monitoreo de muestras ambientales se está prestando particular atención a aquellos que utilizan microorganismos y enzimas como sistema de diagnóstico, muchos de los cuales se comercializan como ‘kits’, los que frecuentemente recurren a las bacterias como organismos de referencia por su factibilidad y simplicidad en el manejo. Estas pruebas se caracterizan por requerir pequeños volúmenes de muestra, posibilitar la realización de gran cantidad de réplicas, mejorándose de esta manera la reproducibilidad de los resultados; también permite el procesamiento de un número elevado de muestras en forma simultánea a campo ó en pequeños laboratorios, ser de bajo costo y sencillos de practicar. Generalmente, los kits de diagnóstico ambiental responden de manera general a los tóxicos, sin diferenciar respuestas específicas a metales pesados o contaminantes orgánicos. Sin embargo, existen algunos antecedentes de TM bioensayos con mayor especificidad a metales tales como MetPAD, TM TM MetPLATE, MetPLANT basados en la inhibición de la enzima B- galactosidasa clonada en Escherichia coli. En el presente trabajo de tesis, se desarrolla el bioensayo de toxicidad basado en la inhibición de la actividad de la enzima B-galactosidasa de la levadura Kluyveromices lactis in vitro, teniendo en cuenta que los antecedentes existentes., Facultad de Ciencias Exactas

El presente documento describe el desarrollo de los experimentos de exposición a hidrocarburos que se realizaron durante la Etapa 2, como parte del Subproyecto “Evaluación del posible impacto de un derrame de petróleo por medio de bioensayos de laboratorio y mesocosmos”, dentro de la línea de acción 5. Las especies marinas de interés presentes en el Golfo de México, y que fueron seleccionadas para los bioensayos de exposición a contaminantes (hidrocarburos), son el lenguado Achirus lineatus, de hábitos bentónicos, y la corvina roja Sciaenops ocellatus, de hábitos pelágicos. A continuación, se encuentra la información detallada de los organismos seleccionados para los bioensayos y las adecuaciones realizadas para su mantenimiento, los diseños experimentales utilizados en los ensayos de exposición, los procedimientos para la toma y procesamiento de las muestras, su posterior análisis y la integración de los resultados de los bioensayos realizados con estas dos especies.

Many species of medicinal plants have been used as a therapeutic alternative in the treatment of diseases around the world, as well as promoting advances in the production of herbal medicines. However, this use is often done indiscriminately and leads to serious consequences in the body of those who use them. Therefore, studies on the toxic, cytotoxic, and genotoxic potentials of medicinal plant species are necessary for their safe use. Cenostigma gardnerianum Tul, popularly known as Caneleiro or Canela-de-velho, is widely used by the population for its anti-inflammatory, antispassmolytic, antitussive, antifungal properties, among others. The aim of this research was to study and analyze a possible toxicity, cytotoxicity, and genotoxicity of the ethanolic extract from the bark of the stem of Cenostigma gardnerianum Tul. by means of the Allium cepa in vivo bioassay. The extract was divided into four concentrations, divided into groups A, B, C and D, respectively: 0.5mg/ml, 1.0mg/ml, 2.0mg/ml and 5.0mg/ml, in addition to the Negative Control (dechlorinated water), Positive Control (dimethyl sulfoxide) and Blank control (distilled water). The roots were measured for toxicity evaluation, the Mitotic Index (MI) was calculated for cytotoxicity research, and finally micronuclei count was performed to study the genotoxicity of each extract concentration. The low growth of the meristems indicated the presence of toxicity; the mitotic indices found were statistically lower than in the negative control, revealing cytotoxicity; and the high micronucleus count showed the presence of genotoxicity. From the results obtained, it was concluded that the ethanolic extract of the Caneleiro bark presents toxic, cytotoxic, and genotoxic activity, with statistically significant values for concentrations starting from 2mg/ml. Muchas especies de plantas medicinales han sido utilizadas como alternativa terapéutica en el tratamiento de enfermedades en todo el mundo, así como promoviendo avances en la producción de medicamentos fitofármacos. Sin embargo, este uso a menudo se hace de forma indiscriminada y tiene graves consecuencias en el organismo de quien las utiliza. Por consiguiente, los estudios sobre los potenciales tóxicos, citotóxicos y genotóxicos de las especies de plantas medicinales son necesarios para su uso seguro. Cenostigma gardnerianum Tul, popularmente conocida como Canela-de-velho o Caneleiro, es ampliamente utilizada por la población por sus propiedades anti-inflamatorias, antiespasmolíticas, antitússico, antifúngicas, entre otras. El objetivo de esta investigación era estudiar y analizar la posible toxicidad, citotoxicidad y genotoxicidad del extracto etanólico de la corteza del tallo de Cenostigma gardnerianum Tul. por medio del bioensayo in vivo de Allium cepa. Se dividió el extracto en cuatro concentraciones, divididas en grupos A, B, C y D, respectivamente: 0,5mg/ml, 1,0mg/ml, 2,0mg/ml y 5,0mg/ml, además del Control Negativo (agua sin cloro), Control Positivo (dimetilsulfóxido) y Blanco (agua destilada). Se realizó la medición de las raíces para la evaluación de la toxicidad, se calculó el Índice Mitótico (IM) para la investigación de la citotoxicidad y, finalmente, se realizó el recuento de micronúcleos para el estudio de la genotoxicidad de cada concentración. El bajo crecimiento de los meristemas indicó presencia de toxicidad; los índices mitóticos encontrados fueron estadísticamente menores que en el control negativo, revelando citotoxicidad; y el alto recuento de micronúcleos mostró presencia de genotoxicidad. A partir de los resultados obtenidos, se llegó a la conclusión de que el extracto etanólico de la corteza del Canelero presenta una actividad tóxica, citotóxica y genotóxica, con valores estadísticamente más significativos para concentraciones a partir de 2mg/ml. Muitas espécies de plantas medicinais vêm sendo utilizadas como alternativa terapêutica no tratamento de enfermidades ao redor do mundo, bem como promovendo avanços na produção de medicamentos fitoterápicos. Contudo, esse uso muitas vezes é feito de forma indiscriminada e leva a sérias consequências no organismo de quem as utiliza. Portanto, estudos sobre os potenciais tóxico, citotóxico e genotóxico de espécies de plantas medicinais são necessários para seu uso seguro e eficaz. Cenostigma gardnerianum Tul, popularmente conhecida como Canela-de-velho ou Caneleiro, é largamente utilizada pela população por suas propriedades anti-inflamatórias, antiespasmolíticas, antitussivas, antifúngicas, entre outras. O objetivo da presente pesquisa foi estudar e analisar possíveis toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade do extrato etanólico da casca do caule de Cenostigma gardnerianum Tul. por meio do bioensaio in vivo de Allium cepa. Dividiu-se o extrato em quatro concentrações, divididas nos grupos A, B, C e D, respectivamente: 0,5mg/ml, 1,0mg/ml, 2,0mg/ml e 5,0mg/ml, além do Controle Negativo (água sem cloro), Controle Positivo (dimetilsulfóxido) e Branco (água destilada). Realizou-se a medição das raízes para avaliação da toxicidade, calculou-se o Índice Mitótico (IM) para pesquisa de citotoxicidade e, por fim, fez-se a contagem de micronúcleos para estudo da genotoxicidade de cada concentração. O baixo crescimento dos meristemas indicou presença de toxicidade; os índices mitóticos encontrados foram estatisticamente menores do que no controle negativo, revelando citotoxicidade; e a alta contagem de micronúcleos mostrou presença de genotoxicidade. A partir dos resultados obtidos, concluiu-se que o extrato etanólico da casca do caneleiro apresenta atividade tóxica, citotóxica e genotóxica, com valores estatisticamente mais significativos para concentrações a partir de 2mg/ml.

RESUMEN Este articulo informa sobre la valoracion de la fitotoxicidad del Material Particulado Sedimentable (MPS) en la zona urbana del canton Cuenca. El MPS se recolecto en tres sitios de la zona urbana, mediante el metodo descrito en el Texto Unificado de Legislacion Ambiental Secundaria del Ministerio del Ambiente (TULASMA). Por el material particulado se realizo la determinacion de la concentracion de los componentes utilizando el analisis gravimetrico, la de los metales pesados por espectroscopia de absorcion atomica, y la de aniones por metodo adaptado de referencia EPA 300.1. Posteriormente se evaluo su fitotoxicidad en cuatro especies, mediante el bioensayo de germinacion y elongacion de raiz e hipocotilo, en semillas de Lactuca sativa, Brassica oleracea italica, Allium cepa y Raphanus sativus. En el bioensayo las semillas se expusieron a diferentes diluciones de la suspension acuosa de MPS. Los resultados muestran que el efecto de los MPS dependio de la concentracion y de la especie analizada, evidenciando diferentes grados de fitotoxicidad. Palabras clave: Fitotoxicidad, material particulado sedimentable, bioensayo. ABSTRACT This paper reports on the phytotoxicity of Sedimentable Particulate Material (acronym in Spanish: MPS) in the urban area of Cuenca. MPS was collected at three sites in the city of Cuenca applying the method described in the Unified Text of Secondary Environmental Legislation of the Ministry of Environment (acronym in Spanish: TULASMA). The concentration of components in the sedimentable particulates was measured using gravimetric analysis, atomic absorption spectroscopy for heavy metals, and a method adopted from the EPA 300.1 reference for anions. The phytotoxicity of MPS was evaluated in bioassays measuring respectively the germination, and the root and hypocotyl elongation of seeds of the following plants: Lactuca sativa, Brassica oleracea italica, Allium cepa, and Raphanus sativus. In the bioassay seeds were exposed to different dilutions of the aqueous suspension of MPS. Results clearly revealed that the effect is concentration and species dependent, showing different levels of phytotoxicity. Keywords: Phytotoxicity, sedimentable particulate material, bioassay.

Comunicación presentada al XVI Congreso de la Sociedad Española de Malherbología, celebrado en la Universidad Pública de Navarra, Pamplona-Iruña, entre los días 25 y 27 de octubre de 2017. En este trabajo se ha estudiado el comportamiento químico del herbicida profoxidim y de su formulado Aura. Los resultados muestran que en ambas sustancias la degradación del herbicida es muy rápida con tiempos de vida media inferiores a un día, por lo que será poco probable encontrar este herbicida en el medio ambiente. El estudio de sus productos de degradación nos permitió identificar productos resultantes de su isomerización y su oxidación. También, se ha observado que el perfil y evolución de estos compuestos va a depender en gran medida de la formulación y las condiciones ambientales. Además, se realizaron bioensayos de germinación de semillas para determinar el efecto del profoxidim en el crecimiento de raíz y coleoptilo de la especie Echinochlo.a crus-galli (L.) Beauv. Se obtuvieron las curvas dosis-respuesta de este herbicida y se calcularon los valores de EC50 In this work, we have studied the chemical behavior of the herbicide profoxydim and its formulated Aura. The results showed that in both samples the degradation of the herbicide is quick with half-lives less than one day, so it will be difficult to find this compound in the environment. Regarding degradation products, we could identify three major compounds that are the result of reactions of isomerization and oxidation of the sulfur atom. Besides, the concentration and evolution of degradation products depends to a great extent on the formulation and the environmental conditions. In addition, seed germination bioassays were conducted to determine the effect of profoxydim on root and coleoptile elongation of the species Echinochloa crus-galli (L.) Beauv. We obtained the doses-response curves of this herbicide and calculated the EC50 values. Este trabajo ha sido financiado por el proyecto RTA2014-00044-00-00.

Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac) produce cancro cítrico en todas las especies cítricas comerciales. La bacteria puede diseminarse mediante material vegetal de propagación contaminado y asintomático. Con el objetivo de optimizar técnicas de detección de bacterias para el análisis de rutina de material vegetal cítrico asintomático, se compararon las técnicas ELISA, Inmunoflorescencia, PCR, qRT_PCR e inoculación en plantas indicadoras (bioensayo). Las pruebas se realizaron a partir de diluciones al décimo entre 10(8) ufc.mL-1 y 10² ufc.mL-1 de un cultivo puro de cepa 49b. El nivel de detección obtenido fue de 1,8 x 10² ufc. mL-1 utilizando inmunoflorescencia, 1,8x10(4) ufc.mL-1 con ELISA indirecto, 1,8x10³ ufc. mL-1 mediante la técnica de PCR, 10 ufc. mL-1 a través de qRT_PCR, y 230 ufc.mL -1 en plantas inoculadas de naranjo amargo. En base a estos resultados y teniendo en cuenta que para el análisis masivo de muestras es importante además de la sensibilidad, el costo y la practicidad, las técnicas de PCR e inoculación en plantas hospedero fueron las que reunieron las mejores características para ser evaluadas en material vegetal asintomático. Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac) produces citrus canker disease in all citrus commercial species. The bacteria can be disseminated through vegetative propagation material in asymptomatic form. To optimize bacteria detection techniques applicable to asymptomatic citrus plant tissue routine analysis, ELISA, Immunofluorescence, PCR, qRT_PCR and host plant inoculation (bioassay) diagnostic techniques were compared. Tests were made from decimal dilutions between 10(8) ufc.mL-1 and 10² ufc.mL-1 using a pure culture of 49b strain.The detection level obtained was 1.8 x 10² ufc.mL-1 using Inmunofluorescence; 1.8x10(4) ufc.mL-1 with indirect ELISA, 1.8 x 10³ ufc.mL-1 by means of PCR; 10 ufc.mL-1 through of qRT_PCR and 230 ufc.mL-1 in sour orange inoculated plants. The experiment was repeated at least three times for each technique. Considering this result, and taking into account that sensitivity, practicity and cost, are important when a great number of plants need to be tested, the PCR and inoculation in host plants were those that met the best characteristics to be evaluated in asymptomatic plant material

Se evaluó el efecto insecticida de tres extractos de la planta endémica de Chile, Lepechinia chamaedryoides (Balb.) Epling (extracto polar, exudado resinoso y aceite esencial), sobre larvas del díptero Drosophila melanogaster Meigen con el fin de determinar cuál o cuáles de éstos poseen actividad biológica insecticida. El bioensayo se realizó sobre la base de un diseño experimental completamente aleatorio, con 15 tratamientos y tres repeticiones, que contempló el estudio de variables de mortalidad y de concentración letal 50 % (CL50) y 90 % (CL90), y observación de organismos mediante lupa, microscopía óptica y microscopía electrónica de transmisión. Se registró una mortalidad mayor al 90 % en cuatro concentraciones evaluadas del aceite esencial. En el caso de extracto polar y exudado resinoso no hubo diferencias significativas entre las distintas concentraciones evaluadas, respecto al control, presentándose valores de mortalidad inferiores a un 23 %. La concentración letal 50% (CL50) del aceite esencial fue de 0,46 % v/v y la concentración letal 90% (CL90) de 0,77 % v/v. Se observaron cambios en la morfología externa e interna de las larvas en el tercer estado. Externamente, se observó oscurecimiento de la cutícula y un aumento de volumen del organismo. Internamente, se observó una fragmentación de las glándulas salivales además de diferencias en los tubos de Malpighi y discos imaginales en relación al grupo control. A nivel celular, también se presentaron cambios, entre ellos, variaciones en aspecto de organelos como en retículo endoplasmático rugoso, mitocondrias y aparato de Golgi.

[EN] Tetracyclines are used for the prevention and control of dairy cattle diseases. Residues of these drugs can be excreted into milk. Thus, the aim of this study was to develop a microbiological method using Bacillus megaterium to detect tetracyclines (chlortetracycline, oxytetracycline and tetracycline) in milk. In order to approximate the limits of detection of the bioassay to the Maximum Residue Limit (100 g/l) for milk tetracycline, different concentrations of chloramphenicol (0, 1000, 1500 and 2000 g/l) were tested. The detection limits calculated were similar to the Maximum Residue Limits when a bioassay using B. megaterium ATCC 9885 spores (2.8 × 108 spores/ml) and chloramphenicol (2000 g/l) was utilized. This bioassay detects 105 g/l of chlortetracycline, 100 g/l of oxytetracycline and 134 g/l of tetracycline in 5 h. Therefore, this method is suitable to be incorporated into a microbiological multi-residue system for the identification of tetracyclines in milk., This research work has been carried out as part of the CAI + D'11 Projects (PI 501 201101 00575 LI, H.C.D. Resol 205/13 Universidad Nacional del Litoral, Santa Fe, Argentina) and PICT 2011-368 (Res. No 140/12, Agencia Nacional de Promocion Cientifica y Tecnologica).

En el Perú, las microalgas marinas Isochrysis galbana Parke y Chaetoceros gracilis Schütt, son utilizadas como alimentos de varias especies zoológicas de la cadena trófica marina; a su vez en condiciones de cultivo evita la utilización de la levadura de panificación, disminuyendo la acidificación del medio de cultivo y evitando así perjudicar a la acuicultura marina. El cromo es un contaminante de importancia antropogénica en el ecosistema acuático. En este trabajo se analiza el efecto del Cr+6 bajo la forma de K2Cr2O7 en las microbiopruebas de ecotoxicidad de inhibición con las microalgas marinas, I. galbana y C. gracilis usando un estimador de crecimiento poblacional específico para cuantificar la respuesta de toxicidad. Se realizó el bioensayo teniendo como resultado el análisis de sensibilidad al K2Cr2O7, productividad, costo-eficiencia y su aplicación potencial como una herramienta para el monitoreo ambiental de rutina. Los valores de Concentración de Inhibición media (CI50) entre 24 h hasta 120 h para I. galbana fueron: 11.55 mg L-1 (8.15 - 16.38) (24 h); 14.14 mg L-1 (11.60 - 17.24) (48 h); 4.47 mg L-1 (3.24 - 6.15) (72 h); 11.94 mg L-1(8.14- 17.49) (96 h) y 19.20 mg L-1 (13.64- 27.26) (120 h). En cambio los valores de CI50 entre 24 h hasta 120 h para C. gracilis fueron: 9.21 mg L-1 (7.46 - 11.08) (24 h); 8.13 mg L-1 (2.09 - 15.24) (48 h); 12.51 mg L-1 (6.80 - 20.04) (72 h); 12.17 mg L-1(2.23- 34.32) (96 h) y 13.34 mg L-1 (1.19- 77.61) (120 h). Los valores de pH y Tº fueron evaluados a través de todo el bioensayo. Se compara la toxicidad del cromo con otras microbiopruebas acuáticas. Finalmente se analizan las perspectivas de empleo, en el Perú, de esta herramienta ecotoxicológica para la evaluación del riesgo ambiental del cromo. In Peru, marine microalgaes Isochrysis galbana Parke and Chaetoceros gracilis Schütt, are employed as food source for many zoological species of the marine trophic chain. During culture conditions they prevent the use of yeasts, diminishing the acidification of culture media and in that way, avoiding injuries to the marine aquaculture. Chromium is a pollutant of anthropogenic importance in the aquatic ecosystem. In this research, the effect of Cr+6 in form of K2Cr2O7 was analyzed in ecotoxicity inhibition microbioassays with marine microalgae, I. galbana and C. gracilis using an estimator of specific population growth to quantify ecotoxicity responses. Bioassays were performed providing results related to the sensibility to K2Cr2O7 analysis, productivity, cost-efficiency and their potential application as tools for routine environmental monitoring. The values of medial Concentration of Inhibition (IC50) from 24 h to 120 h for I. galbana were: 11.55 mg L-1 (8.15 - 16.38) (24 h); 14.14 mg L-1 (11.60 - 17.24) (48 h); 4.47 mg L-1 (3.24 - 6.15) (72 h); 11.94 mg L-1(8.14- 17.49) (96 h) and 19.20 mg L-1 (13.64- 27.26) (120 h). Conversely the values of IC50 from 24 h to 120 h for C. gracilis were: 9.21 mg L-1 (7.46 - 11.08) (24 h); 8.13 mg L-1 (2.09 - 15.24) (48 h); 12.51 mg L-1 (6.80 - 20.04) (72 h); 12.17 mg L-1(2.23- 34.32) (96 h) and 13.34 mg L-1 (1.19- 77.61) (120 h). Temperature and pH values were evaluated in all bioassays. The toxicity of chromium was compared with other aquatic microbioassays. Finally, perspectives of employing these ecotoxicological tools to evaluate environmental risk assessment of chromium in Peru are analyzed.

Elodea (Egeria densa), a problem in lakes and lagoons of Colombia, could be a raw material to produce cheap and good quality organic fertilizers. To evaluate the elodea for organic compost production, fertilizers were elaborated with six formulations: 1) Elodea 50%; dolomitic lime 20%; yeast 5%; melasse 5%; hene manure 20%. 2) Elodea 60%; dolomitic lime 10%; yeast 3%; melasse 8%; hene manure 19%. 3) Elodea 70%; dolomitic lime 15%; yeast 2%; melasse 3%; hene manure 10%. 4) Formulation 1 + earthworm fertilizer. 5) Formulation 2 + earthworm fertilizer. Formulation y 6) Formulation 3 + earthworm fertilizer. For each fertilizer the total content of N, P2O5, K2O, MgO, CaO, total oxidised carbon, coliforms and C:N were analyzed. Under greenhouse conditions the effect of the fertilizers were evaluated in an Andisol and with lettuce as indicator. During production of the fertilizer temperature and pH were observed. The results showed significant effect of the elements among organic fertilizer. The composition of these fertilizers was according to the requisites for Colombian Organic Fertilizers. The greenhouse experiment showed significant effect of sources and levels on yield and N-P-K content of the lettuce. In general, the formulation three was the best. The pH of the fertilizers varied from 7.0 to7.3, considered adequate. The feasibility to produce good quality organic fertilizers from elodea was demonstrated. La elodea (Egeria densa), un problema para lagos y lagunas en Colombia, puede ser materia prima para la producción de abonos orgánicos de bajo costo y de buena calidad. Para emplearla en la obtención de abonos orgánicos, se elaboraron fertilizantes a partir de seis formulaciones, así: 1) Elodea 50%; cal dolomítica 20%; levadura 5%; melaza 5%; gallinaza 20%. 2) Elodea 60%; cal dolomítica10%; levadura 3%; melaza 8%; gallinaza 19%. 3) Elodea 70%; cal dolomítica 15%; levadura 2%; melaza 3%; gallinaza 10%. 4) Formulación 1 + lombricompuesto; 5) Formulación 2 + lombricompuesto y 6) Formulación 3 + lombricompuesto. Para cada uno de los abonos, se determinó el contenido total de N, P2O5, K2O, MgO, CaO, carbón oxidable total, coliformes y relación C:N. Bajo condiciones de invernadero, se evaluó el efecto de los abonos en un Andisol sobre el cultivo de lechuga e igualmente, se monitoreó la temperatura y el pH a través del periodo de producción de los abonos. En general, el contenido de los elementos analizados y la relación C:N cumplen los requisitos para estos abonos. Hubo efecto significativo del contenido entre formulaciones y en el bioensayo para rendimiento entre formulaciones y dosis, siendo la formulación tres la de más alto rendimiento. De igual manera hubo efecto significativo de fuentes y de dosis en el contenido de N-P-K en la lechuga. El pH de los seis abonos fue de 7,00 a 7,30, considerado apropiado. Se demostró la factibilidad de producción de abonos orgánicos de buena calidad a partir de elodea. Incluye referencias bibliográficas

El desarrollo de hongos entomopatógenos para el control de plagas de insectos ha experimentado en los últimos años un considerable progreso. El empleo de estos agentes de control biológico presenta numerosas ventajas, seguridad para la salud humana y para la fauna útil, reducción de la presencia de residuos insecticidas en los alimentos e incremento de la biodiversidad del medio. Los hongos son únicos y sobresalientes entre los microorganismos entomopatógenos porque infectan a los hospedantes a través del tegumento, acción por contacto, lo que les confiere ventaja para el control de varios grupos de insectos fitófagos de gran relevancia en la agricultura mediterránea. Sin embargo, un empleo más eficiente y generalizado de estos agentes en el control depende en gran medida de la mejora de su velocidad de acción, reducción de los tiempos letales. Algunas cepas fúngicas secretan proteínas insecticidas durante el desarrollo de la infección, que se postulan entre las mejores dianas para la selección y mejora biotecnológica a efectos de control, así como una fuente inexplorada de nuevas moléculas insecticidas de origen natural. El Grupo AGR 163 “Entomología Agrícola” de la Universidad de Córdoba dispone de una colección de más de 300 aislados autóctonos de los ascomicetos mitospóricos Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae procedentes de suelos de la Península Ibérica y archipiélagos Canario y Balear, que es una buena base para la selección de aislados que produzcan in vitro proteínas insecticidas, para (1) estudiar su desarrollo como micoinsecticidas; (2) determinar si la secreción de estas proteínas ocurre también in vivo y su función como determinantes de virulencia; (3) evaluar el posible empleo de estas proteínas como nuevas moléculas insecticidas de origen natural; (4) desarrollar marcadores moleculares que permitan identificar los aislados más importantes y detectar los genes que codifican para esta proteínas, para la posible mejora genética

Para estimar incorporaciones desconocidas de sustancias radiactivas en el organismo, especialmente en condiciones de accidente, puede ser necesaria la realización de bioensayos (ej.: medidas con un contador de radiactividad pulmonar o corporal, excreción urinaria y fecal). La cantidad incorporada se calcula por ajuste estadístico de los resultados de los bioensayos a un modelo matemático que representa la biocinética de la sustancia incorporada. En estos modelos se suele suponer que el único parámetro desconocido es la incorporación, I, asumiéndose como conocidos otros parámetros (ej.: en el caso de una inhalación accidental, se supone conocido el diámetro (AMAD) de los aerosoles, la fracción f1 que se trasfiere desde el sistema gastrointestinal a la sangre). Esta simplificación implica añadir bastantes incertidumbres en la estimación de la dosis. Hemos desarrollado un método matemático, que aplica técnicas de diseño óptimo de experimentos (DOE) a modelos no lineales, donde además de I se puede asumir como desconocidos otros parámetros como es el AMAD o f1. El método es aplicable para establecer los momentos más adecuados en los que realizar las medidas de los bioensayos minimizando la incertidumbre de las estimaciones. Hemos aplicado el método a las condiciones que se dan en la fábrica de Juzbado, donde se procesa uranio que puede dar lugar a aerosoles de oxido de uranio. Bioassays can be used to estimate the intake for the case of accidental intake. The bioassay measures can be used to estimate by fitting the parameters unknown. In this paper optimal designs for the estimation of the unknown parameters are developed.. The method described applies Optimal Design to find the best moments where the bioassay measurements should be taken. The method has been implemented in a computer program.

Se describen las caracterísiticas incluidas en el programa BIOKMOD relacionadas con los Modelos ICRP. Here it is described the features included in the computer code BIOKMOD related with the ICRP Models. BIOKMOD has been applied to analyze several sources of uncertainties in the evaluation of internal exposures using the bioassay data: (i) Multiple constant and random intakes in occupational exposurestaking into account periods without intake (weekends, holidays, etc.) are evaluated, and they are compared with the chronic intakes showing that the chronic approximation is not always good; (ii) An analytical method to evaluate the statistical uncertainties associated with the biokinetic model is described; (iii) Nonlinear techniques are applied to estimate the intakes using bioassay data, where not only the quantities intaken are assumed unknown but also other non linear parameters (AMAD, f1, etc). The methods described are accompanied with examples.

A reliable bioassay procedure was developed to test ingested Bacillus thuringiensis (Bt) toxins on the rice delphacid Tagosodes orizicolus. Initially, several colonies were established under greenhouse conditions, using rice plants to nurture the insect. For the bioassay, an in vitro feeding system was developed for third to fourth instar nymphs. Insects were fed through Parafilm membranes on sugar (10 % sucrose) and honey bee (1:48 vol/vol) solutions, observing a natural mortality of 10-15 % and 0-5 %, respectively. Results were reproducible under controlled conditions during the assay (18±0.1 °C at night and 28±0.1 °C during the day, 80 % RH and a 12:12 day:light photoperiod). In addition, natural mortality was quantified on insect colonies, collected from three different geographic areas of Costa Rica, with no significant differences between colonies under controlled conditions. Finally, bioassays were performed to evaluate the toxicity of a Bt collection on T. orizicolus. A preliminary sample of twenty-seven Bt strains was evaluated on coarse bioassays using three loops of sporulated colonies in 9 ml of liquid diet, the strains that exhibited higher percentages of T. orizicolus mortality were further analyzed in bioassays using lyophilized spores and crystals (1 mg/ml). As a result, strains 26-O-to, 40-X-m, 43- S-d and 23-O-to isolated from homopteran insects showed mortalities of 74, 96, 44 and 82 % respectively while HD-137, HD-1 and Bti showed 19, 83 and 95 % mortalities. Controls showed mortalities between 0 and 10 % in all bioassays. This is the first report of a reliable bioassay procedure to evaluate per os toxicity for a homopteran species using Bacillus thuringiensis strains. Se desarrolló una metodología de bioensayo para evaluar toxinas de Bacillus thuringiensis (Bt) ingeridas por Tagosodes orizicolus, plaga del arroz y vector del virus de la hoja blanca. Se establecieron colonias del insecto en condiciones de invernadero usando plantas de arroz como alimento. Para el bioensayo, se desarrolló un sistema de alimentación in vitro para ninfas de tercer y cuarto estadío. Los insectos se alimentaron de soluciones de miel de abeja (1:48 vol/vol) y sacarosa (10 %) a través de membranas de Parafilm. Se observaron mortalidades del 10-15 % y 0-5 %, respectivamente, en ambas dietas. Los resultados fueron reproducibles en condiciones controladas de humedad y temperatura (18±0.1 °C de noche y 28±0.1 °C de día, 80 % H.R y a 12:12 fotoperíodo día:noche). Asimismo, se analizó la mortalidad natural de los insectos según su procedencia, sin embargo, no se observaron diferencias significativas en condiciones controladas. Finalmente, se elaboraron bioensayos para evaluar la toxicidad de una colección de cepas de Bt contra T. orizicolus. Se evaluó preliminarmente, una submuestra de 27 cepas de Bt en bioensayos burdos usando tres asadas como inóculo para 9 ml de dieta líquida. Posteriormente, las cepas que mostraron los mayores porcentajes de mortalidad se evaluaron en bioensayos usando esporas y cristales liofilizados (1 mg/ml). Como resultado, las cepas aisladas a partir de homópteros 26-O-to, 40-X-m, 43-S-d y 23-O-to mostraron mortalidades de 74, 96, 44 y 82 % respectivamente, mientras que las HD-137, HD-1 y Bti mostraron 19, 83 y 95 % de mortalidad. Los controles presentaron mortalidades de 0 y 10 % en los bioensayos. Este es el primer informe de un bioensayo para evaluar la toxicidad de cepas de Bt utilizando la especie T. orizicolus. UCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias Básicas::Centro de Investigación en Biología Celular y Molecular (CIBCM)

The burrowing behaviour of two marine clam species, Venerupis decussata (Linnaeus, 1758) and Venerupis pullastra (Montagu, 1803), was assayed in laboratory tests. By standardising abiotic and biotic factors, a routine static-renewal biotest for laboratory assays with V. decussata and V. pullastra was conducted, using burial as the principal sublethal endpoint. Measured burial times in marine sediments with different textures showed that both clam species are generalist burrowers for a wide range of medium-to-fine sand sediments with up to 40 % silt content. Sandy sediment was spiked with copper to examine clam response to heavy-metal contamination. Slowing of burial was observed in relation to added copper. After 24 h clams were observed to re-emerge from sediment. By counting re-emerged clams on the surface 4 days after starting the assay, a relation between re-emergence behaviour and spiked copper was observed. Experimental data suggest that porewater Cu concentrations, rather than sediment Cu concentrations, were responsible for both burial delay and re-emergence. Whereas burial delay cannot be viewed as a directed behavioural response, re-emergence might be part of a survival strategy to avoid toxic sediment conditions. The LC₅₀ in a 10-day exposure period compared to significant levels of the burial endpoint, while re-emergence and reburial ability after 10-day exposure were considerably more sensitive. Since the observed threshold concentrations are in naturally occurring ranges, an application of the assay, especially with the endpoint of re-emergence, to examine contamination in the field seems possible., El comportamiento de enterramiento de dos especies de bivalvos marinos, Venerupis decussata (Linnaeus, 1758) y Venerupis pullastra (Montagu, 1803), se estudió en ensayos de laboratorio. La estandarización de los factores bióticos y abióticos permitió poner a punto un biotest tipo static-renewal para ensayos de laboratorio usando el parámetro de enterramiento. En ensayos con sedimentos marinos de textura variable, V. decussata y V. pullastra se demostraron como generalistas en un rango amplio de texturas de arena media y fina hasta un contenido de 40 % de fango. A un sedimento arenoso se añadió cobre para examinar la respuesta de los bivalvos a una contaminación de metales pesados. Se observó una reducción en la velocidad de enterramiento con relación a la cantidad de cobre añadido. Después de 24 horas se observó a las almejas reemergiendo del sedimento. Al contar los bivalvos en la superficie cuatro días después del inicio del ensayo, se pudo establecer también una relación entre el rechazo al sedimento y el cobre añadido. Los datos experimentales sugieren que eran los niveles de cobre en el agua intersticial los que causaron el enterramiento ralentizado y el rechazo al sedimento, y no el cobre encontrado en el sedimento. Según estos ensayos, el entierro ralentizado no se puede considerar una respuesta de comportamiento directa, mientras el rechazo puede ser parte de una estrategia de supervivencia para esquivar condiciones tóxicas. El LC50 de una exposición de 10 días es parecido a los niveles significativos de enterramiento, mientras el rechazo y la capacidad de reenterramiento después de una exposición de diez días son más sensibles. El margen de las concentraciones se encuentra dentro del rango de concentraciones encontradas en el campo. Por eso, también parece posible la aplicación del bioensayo para examinar la contaminación de sedimentos naturales., Instituto Español de Oceanografía

The burrowing behaviour of two marine clam species, Venerupis decussata (Linnaeus, 1758) and Venerupis pullastra (Montagu, 1803), was assayed in laboratory tests. By standardising abiotic and biotic factors, a routine static-renewal biotest for laboratory assays with V. decussata and V. pullastra was conducted, using burial as the principal sublethal endpoint. Measured burial times in marine sediments with different textures showed that both clam species are generalist burrowers for a wide range of medium-to-fine sand sediments with up to 40 % silt content. Sandy sediment was spiked with copper to examine clam response to heavy-metal contamination. Slowing of burial was observed in relation to added copper. After 24 h clams were observed to re-emerge from sediment. By counting re-emerged clams on the surface 4 days after starting the assay, a relation between re-emergence behaviour and spiked copper was observed. Experimental data suggest that porewater Cu concentrations, rather than sediment Cu concentrations, were responsible for both burial delay and re-emergence. Whereas burial delay cannot be viewed as a directed behavioural response, re-emergence might be part of a survival strategy to avoid toxic sediment conditions. The LC₅₀ in a 10-day exposure period compared to significant levels of the burial endpoint, while re-emergence and reburial ability after 10-day exposure were considerably more sensitive. Since the observed threshold concentrations are in naturally occurring ranges, an application of the assay, especially with the endpoint of re-emergence, to examine contamination in the field seems possible. El comportamiento de enterramiento de dos especies de bivalvos marinos, Venerupis decussata (Linnaeus, 1758) y Venerupis pullastra (Montagu, 1803), se estudió en ensayos de laboratorio. La estandarización de los factores bióticos y abióticos permitió poner a punto un biotest tipo static-renewal para ensayos de laboratorio usando el parámetro de enterramiento. En ensayos con sedimentos marinos de textura variable, V. decussata y V. pullastra se demostraron como generalistas en un rango amplio de texturas de arena media y fina hasta un contenido de 40 % de fango. A un sedimento arenoso se añadió cobre para examinar la respuesta de los bivalvos a una contaminación de metales pesados. Se observó una reducción en la velocidad de enterramiento con relación a la cantidad de cobre añadido. Después de 24 horas se observó a las almejas reemergiendo del sedimento. Al contar los bivalvos en la superficie cuatro días después del inicio del ensayo, se pudo establecer también una relación entre el rechazo al sedimento y el cobre añadido. Los datos experimentales sugieren que eran los niveles de cobre en el agua intersticial los que causaron el enterramiento ralentizado y el rechazo al sedimento, y no el cobre encontrado en el sedimento. Según estos ensayos, el entierro ralentizado no se puede considerar una respuesta de comportamiento directa, mientras el rechazo puede ser parte de una estrategia de supervivencia para esquivar condiciones tóxicas. El LC50 de una exposición de 10 días es parecido a los niveles significativos de enterramiento, mientras el rechazo y la capacidad de reenterramiento después de una exposición de diez días son más sensibles. El margen de las concentraciones se encuentra dentro del rango de concentraciones encontradas en el campo. Por eso, también parece posible la aplicación del bioensayo para examinar la contaminación de sedimentos naturales. Instituto Español de Oceanografía

La evaluación de la toxicidad del cromo en los sedimentos marinos en el Perú es un tema de interés emergente. Se evaluó la concentración letal media del cromo (Cr+6) usando el bivalvo marino Donax obesulus Reeve 1854 (Pelecypoda: Donacidae) a las 24 h, 48 h y 96 h de exposición, también fue estudiada la capacidad de enterramiento de D. obesulus sobre el sedimento frente al cromo (Cr+6). Para las condiciones de aclimatación y cría de D. obesulus se empleó a la microalga marina Dunaliella tertiolecta Butcher. El bioensayo se realizó con adultos de D. obesulus de 22.4 mm ± 1.5 mm La concentración letal media (CL50) del cromo Cr+6 en el sedimento marino usando a D. obesulus fue de 410.4 mg·kg-1, 156.1 mg·kg-1 y 61.12 mg·kg-1 a 24 h, 48 h y 96 h de exposición, respectivamente. El valor guía propuesto por Long et al. (1995) para el cromo en el sedimento acuático es de 370 mg·kg-1. Los resultados obtenidos en términos de CL50 a 48 h y 96 h para D. obesulus, expuestos al cromo, fueron 57.8% y 83.5% menores que el valor guía, respectivamente. El cromo presenta un notable efecto subletal sobre la capacidad de enterramiento de D. obesulus a las 48 h de exposición. El protocolo usando D. obesulus tiene como ventaja, además de su sensibilidad, el fácil uso y la simplicidad en la lectura, su bajo costo y su realismo ecológico. Chromium toxicity assessment of marine sediments in Peru is a topic of increasing interest. Mean lethal concentration of chromium (Cr+6) using the marine bivalve Donax obesulus Reeve 1854 (Pelecypoda: Donacidae) at 24 h, 48 h and 96 h of exposure was assessed, as well as its burying ability in a chromium (Cr+6) sediment. For D. obesulus acclimatization and rearing the marine microalga Dunaliella tertiolecta Butcher was employed. The assay was performed with 22.4 mm ± 1.5 mm D. obesulus adults. Mean lethal concentration (LC50) in chromium Cr+6 D. obesulus marine sediment was 410.4 mg·kg-1, 156.1 mg·kg-1 and 61.12 mg·kg-1 at 24 h, 48 h and 96 h of exposure, respectively. A guideline value proposed by Long et al. (1995) for chromium in an aquatic sediment is 370 mg·kg-1. The results obtained in terms of LC50 at 48 h and 96 h for D. obesulus, exposed to chromium, were 57.8% and 83.5%, lower than the guideline value, respectively. Chromium presented a notorious sublethal effect on D. obesulus burying ability at 48 h of exposure. The protocol using D. obesulus has advantages in terms of sensibility, easy use, simplicity of reading, low cost and ecological realism.

"Entre los métodos utilizados en el monitoreo de la calidad de agua en los ecosistemas dulceacuícolas encontramos el de evaluación de fitotoxicidad, el de germinación de semillas y la prueba de la elongación radical, que son de los más simples y recomendados para el biomonitoreo ambiental. Los objetivos de este trabajo consistieron en evaluar la toxicidad de las aguas del Río Chalma a través de un bioensayo con Lactuca sativa y establecer un índice biológico que permita conocer y evaluar las condiciones de contaminación del agua de este río. Se eligieron seis sitios de monitoreo representativos a lo largo del cauce, cuatro de ellos ubicados en el Estado de México y dos en el estado de Morelos. Los resultados se analizaron con métodos multivariados: un análisis de componentes principales y uno de similitud. Se diferenciaron tres zonas de acuerdo con los índices de toxicidad obtenidos: 1) los tres primeros sitios de estudio presentaron valores positivos y bajos en toxicidad, con altas concentraciones de nutrientes, que podrían estar promoviendo la elongación radical, 2) la parte media representada por el cuarto sitio, obtuvo el índice de elongación radical más bajo, lo que clasificó a este sitio en la categoría de toxicidad moderada y 3) la parte baja del río, cuyos índices clasificaron a esta zona con toxicidad de moderada a baja. Esta parte del río estuvo además asociada con la acumulación de compuestos lixiviados durante la época de lluvias. Finalmente, los índices obtenidos mostraron que la sensibilidad del bioensayo de germinación de las semillas de Lactuca sativa generó respuestas biológicas integradoras. Esta información puede ser utilizada para la evaluación de riesgos ecotoxicológicos."