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To investigate if there was an association between genetic polymorphisms in tumour necrosis factor (TNF)-⍺ and its receptors TNFRSF1A and TNFRSF1B with persistent apical periodontitis (PAP) in Brazilian subjects.Patients who had pulpal necrosis and apical periodontitis at the time of treatment, with at least 1-year of follow-up after non-surgical root canal treatment were recalled. Three hundred and seventy eight subjects were included, 150 subjects with signs/symptoms of PAP and 228 subjects with root canal-treated teeth exhibiting healthy perirradicular tissues (healed). Genomic DNA was extracted from saliva and used for TNF-⍺ (rs1800629), TNFRSF1A (rs1800693) and TNFRSF1B (rs1061622) genotyping by real-time PCR. Genotypes and alleles frequencies were evaluated by c2 or Fisher's exact tests and odds ratios were implemented (α = 5%).The genetic polymorphism in TNF-α (rs1800629) was associated as a protective factor for the development of PAP (p .05), once subjects who presented at least one allele A (AA+AG X GG), had a higher chance to lesion repair (p .05). The polymorphisms rs1800693 and rs1061622 in TNF receptors (TNFRSF1A and TNFRSF1B, respectively) were not associated with the development of PAP (p .05).The observed results demonstrate that polymorphism in TNF-α but not in its receptors is associated with PAP.

Objectives: High expression of MMP-2 and MMP-9 in periapical lesions plays an important role in the degradation of the extracellular matrix. This study aimed to investigate the effect of epigallocatechin-3-gallate (EGCG)-based endodontic paste as an intracanal dressing on the expression of MMP-2 and MMP-9 in periapical lesions. Materials and Methodss: Periapical lesions were experimentally induced in 35 mature beagle dog premolars randomly divided into healthy teeth, untreated periapical lesions, periapical lesionstreated in a single session, and periapical lesions treated in two sessions with EGCG or calcium hydroxide-based pastes. The operator monitored the animals and performed euthanasia after 120 days for histopathologic and immunofluorescence analyses to assess the expression of MMP-2 and MMP-9. Then we perform the statistical analysis. Results: Endodontic treatment in two sessions using EGCG and calcium hydroxide-based pastes provided similar levels of repair of the apical and periapical tissues and neoformation of periodontal ligament fibers, cementum and alveolar bone. In both groups, the expression of MMP-2 and MMP-9 was minimal,and it was observed in the cytoplasm of fibroblasts, osteoblasts, cementoblasts, cementocytes and vascular endothelium. In healthy teeth, the expression of MMPs was minimal and was found in odontoblasts. Endodontic treatment in a single session did not result in full repair of periapical lesions, and they presented intense expression of MMP-2 and MMP-9, including in the cytoplasm of persistent inflammatory cells, similar to untreated lesions. In both groups treated in two sessions, the expression of MMP-2 and MMP-9 was similar to that in healthy teeth, and it was significantly lower than that in periapical lesions treated in a single session or untreated (p Conclusions: The use of EGCG-based endodontic paste reduced the expression of MMP-2 and MMP-9 and allowed for the repair of periapical lesions, similar to calcium hydroxide-based paste, and it was superior to treatment performed in a single session. Clinical Relevance: This study was the first one that evaluated the use of EGCG- based paste as intracanal treatment resulted in a reduction of the expression of MMPs 2 and 9 and repair of periapical lesions, similarly to calcium hydroxide-based paste.

Introduction: The 2q37.3 deletion syndrome is a disorder caused by the microdeletion of a subband on chromosome 2, whose epidemiology is approximately 150 cases worldwide, and the prevalence of 1: 10000. Its characteristics are developmental delay, facial dysmorphia, musculoskeletal abnormalities, and increased risk of congenital diseases. The purpose is to present, for the first time in the literature, the oral and dental clinical findings associated with the syndrome. Case report: The main physical characteristics of the syndrome were identified during the physical examination: thin upper lip, prominent columella, and epicanthic folds. In the intraoral examination, dental characteristics were reported, which may be associated with the syndrome: accumulation of dental calculus, hypomineralization and hypoplasia, crossbite, open bite, agenesis, taurodontism, and dentigerous cyst. The dental treatment consisted of the application of behavior management techniques, hygiene and diet instruction, prophylaxis, supragingival scraping, topical fluoride application, and extraction of the lower second molar. This is the first report of oral characteristics of the 2q37.3 deletion syndrome, giving importance to the characteristics observed in this patient. Such findings will be useful in the characterization of the syndrome, which is extremely rare, and may contribute to the clinical diagnosis of these patients, in addition to subsidizing the dental treatment of other individuals. Conclusion: We present oral clinical findings such as hypomineralization and hypoplasia, crossed and an open bite, agenesis, taurodontism, and dentigerous cyst present in the patient with the syndrome and we suggest that the involved gene or its deletion may be responsible for such findings., Introdução: A síndrome de deleção 2q37.3 é uma desordem causada pela microdeleção de uma sub-banda no cromossomo 2, cuja epidemiologia é de aproximadamente 150 casos no mundo, e a incidência de 1:10000. As características da síndrome são: atraso no desenvolvimento, dismorfia facial, anormalidades musculoesqueléticas e aumento ao risco de doenças congênitas. O objetivo deste relato de caso é apresentar, pela primeira vez na literatura, os achados clínicos orais e dentários associados à síndrome. Relato de caso: As principais características físicas da síndrome foram identificadas na paciente durante o exame físico: lábio superior fino, columela proeminente e dobras epicânticas. No exame intraoral, relatou-se as características odontológicas, que podem estar associadas à síndrome: acúmulo de cálculo dental, hipomineralização e hipoplasia, mordida cruzada, mordida aberta, agenesias, taurodontia e cisto dentígero. O tratamento dental consistiu na aplicação de técnicas de manejo de comportamento, instrução de higiene e de dieta, profilaxia, raspagem supragengival, aplicação tópica de flúor, além da extração do segundo molar decíduo inferior. Este é o primeiro relato de características orais da síndrome de deleção 2q37.3 dando importância às características observadas nesta paciente. Tais achados também serão úteis na caracterização da síndrome, que é extremamente rara, podendo contribuir para o diagnóstico clínico desses pacientes, além de subsidiar o tratamento odontológico de outros indivíduos. Conclusão: Apresentamos os achados clínicos orais como hipomineralização e hipoplasia, mordida cruzada e aberta, agenesia, taurodontia e cisto dentígero presentes na paciente com a síndrome e sugerimos que o gene envolvido ou sua deleção possam ser responsáveis por tais achados.

The development, establishment and repair of apical periodontitis (AP) is dependent of several factors, which include host susceptibility, microbial infection, immune response, quality of root canal treatment and organism's ability to repair. The understanding of genetic contributions to the risk of developing AP and presenting persistent AP has been extensively explored in modern Endodontics. Thus, this article aims to provide a review of the literature regarding the biochemical mediators involved in immune response signaling, osteoclastogenesis and bone neoformation, as the genetic components involved in the development and repair of AP. A narrative review of the literature was performed through a PUBMED/MEDLINE search and a hand search of the major AP textbooks. The knowledge regarding the cells, receptors and molecules involved in the host's immune-inflammatory response during the progression of AP added to the knowledge of bone biology allows the identification of factors inherent to the host that can interfere both in the progression and in the repair of these lesions. The main outcomes of studies evaluated in the review that investigated the correlation between genetic polymorphisms and AP in the last five years, demonstrate that genetic factors of the individual are involved in the success of root canal treatment. The discussion of this review gives subsides that may help to glimpse the development of new therapies based on the identification of therapeutic targets and the development of materials and techniques aimed at acting at the molecular level for clinical, radiographic and histological success of root canal treatment. Resumo O desenvolvimento, estabelecimento e reparo da periodontite apical (PA) depende de vários fatores, que incluem a susceptibilidade do hospedeiro, infecção microbiana, resposta imune, bem como a qualidade do tratamento do canal radicular e a capacidade de reparo do organismo. A compreensão das contribuições genéticas para o risco de desenvolver a PA e apresentar PA persistente tem sido extensivamente explorada na Endodontia moderna. Assim, este manuscrito pretende fornecer uma revisão da literatura em relação aos mediadores bioquímicos envolvidos na sinalização da resposta imune, osteoclastogênese e neoformação óssea, bem como os componentes genéticos envolvidos no desenvolvimento e reparo da PA. Uma revisão narrativa da literatura foi realizada através de uma pesquisa nas bases PUBMED/MEDLINE e uma pesquisa manual nos principais livros sobre a PA. O conhecimento sobre as células, receptores e moléculas envolvidas na resposta imuno-inflamatória do hospedeiro durante a progressão da PA somado ao conhecimento da biologia óssea, especialmente o papel dos osteoblastos, osteócitos e osteoclastos no turnover ósseo, permite a identificação de fatores inerentes ao hospedeiro que podem interferir tanto na progressão como no reparo destas lesões. Os principais resultados dos estudos avaliados na revisão que investigaram a correlação entre polimorfismos genéticos e PA, nos últimos cinco anos, demonstram que os fatores genéticos do indivíduo estão envolvidos no sucesso do tratamento do canal radicular. A discussão desta revisão fornece subsídios que podem ajudar a vislumbrar o desenvolvimento de novas terapias baseadas na identificação de alvos terapêuticos e no desenvolvimento de materiais e técnicas destinadas a atuar a nível molecular para o sucesso clínico, radiográfico e histológico do tratamento endodôntico.

Objectives to investigate the association between dental caries, developmental defects of enamel (DDE) and genetic polymorphisms in vitamin D receptor (VDR) in Brazilian children. Methods Children examination to access the DMFT index was performed according to the World Health Organization's recommendations and the children were classified according their caries experience into ‘No caries experience’ (DMFT = 0), and ‘Caries experience’ (DMFT ≤1), and ‘Low caries experience’ (DMFT ≤3) or ‘High caries experience’ (DMFT≥4) groups. DDE were diagnosed using the modified DDE index based on the Federation Dentaire Internationale (FDI) recommendation. Children were included in the DDE group when presented at least one tooth with a DDE. Genomic DNA was extracted and genetic polymorphisms (rs2228570 and rs739837) were genotyped by TaqMan chemistry and end-point analysis. Chi-square or Fisher exact tests were used to compare genotype and allele distribution among the groups. Epi Info 7 was used to analyze data. The established alpha of this study was 5%. Results Among 157 included children, 19 children (12.1%) were caries free and were in the ‘No caries experience’ group, while 138 children (87.9%) were in the ‘Caries experience’ group. Sixty-seven children (42.7%) were in the ‘Low caries experience’ group while 90 children (57.3%) were in the ‘High caries experience’ group. Five children presented primary dentition, 29 presented mixed dentition and 123 presented permanent dentition. Forty-one (26.1%) children presented at least one tooth with DDE. Caries experience was not associated with DDE (p = 0.71). The polymorphisms rs2228570 and rs739837 were not associated with dental caries, neither DDE (p > 0.05). Allele distributions were also not associated with dental caries, neither DDE (p > 0.05). Conclusions The genetic polymorphisms rs2228570 and rs739837 were not associated with dental caries and developmental defects of enamel in Brazilian children.

Objective: The present study aimed to evaluate, in pediatric patients, the concordance of intraoral scanner for dental measurements, comparing the measurements obtained clinically with digital models, 3D printed filament models, and conventional plaster models. Materials and Methods: For this study, 31 patients with mixed dentition were selected, with at least the upper central incisors and upper first permanent molars erupted. The dental size measurement obtained with 3Shape Trios Scanner was compared with that obtained clinically with the aid of a digital caliper, as well as the measurements made with plaster models and filament printed models. For data analysis, the intraclass correlation coefficient (ICC) was performed and the agreement was categorized according to it. The Bland–Altman analysis was also applied to the data to graphically display the concordance. Results: There was no difference in agreement between measurements made in plaster and filament models compared to the reference method, and for measurements in the digital model, the agreement was low or zero in the molar region. Conclusion: According to the present study, we can conclude that both plaster and filament models presented values that are faithful to those obtained clinically and that the evaluated region affected the agreement with the reference method.

Background Leukotriene B4 (LTB4) is a potent lipid mediator that stimulate the immune response. Because dental pulp inflammation and dentin repair are intrinsically related responses, the aim of this research was to investigate the potential of LTB4 in inducing differentiation of dental pulp stem cells. Methods Microspheres (MS) loaded with LTB4 were prepared using an oil emulsion solvent extraction evaporation process and sterility, characterization, efficiency of LTB4 encapsulation and in vitro LTB4 release assay were investigated. Mouse dental pulp stem cells (OD-21) were stimulated with soluble LTB4 or MS loaded with LTB4 (0.01 and 0.1 μM). Cytotoxicity and cell viability was determined by lactate dehydrogenase and methylthiazol tetrazolium assays. Gene expression were measured by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction after 3, 6, 24, 48 and 72 h. Mineralized nodule formation was assessed after 28 days of OD-21 cell stimulation with LTB4 in mineralized media or not. Groups were compared using one-way ANOVA test followed by Dunnett’s post-test (α = 0.05). Results Treatment with LTB4 or MS loaded with LTB4 (0.01 and 0.1 µm-μM) were not cytotoxic to OD-21 cells. Treatment with LTB4 modulated the expression of the Ibsp (integrin binding sialoprotein) and Runx2 (runt-related transcription factor 2) genes differently depending on the experimental period analyzed. Interestingly LTB4 loaded in microspheres (0.1 μM) allowed long term dental pulp cell differentiation and biomineralization. Conclusion LTB4, soluble or loaded in MS, were not cytotoxic and modulated the expression of the Ibsp and Runx2 genes in cultured OD-21 cells. When LTB4 was incorporated into MS, odontoblast differentiation and mineralization was induced in long term culture.

Background: Leukotriene B4 (LTB4) is a potent lipid mediator that stimulate the immune response. Because dental pulp inflammation and dentin repair are intrinsically related responses, the aim of this research was to investigate the potential of LTB4 in inducing differentiation of dental pulp stem cells. Methods: Microspheres (MS) loaded with LTB4 were prepared using an oil emulsion solvent extraction evaporation process and sterility, characterization, efficiency of LTB4 encapsulation and in vitro LTB4 release assay were investigated. Mouse dental pulp stem cells (OD-21) were stimulated with soluble LTB4 or MS loaded with LTB4 (0.01 and 0.1 μM). Cytotoxicity and cell viability was determined by lactate dehydrogenase (LDH) and MTT (methylthiazol tetrazolium) assays . Gene expression were measured by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) after 3, 6, 24, 48 and 72 h. Results: Mineralized nodule formation was assessed after 28 days of OD-21 cell stimulation with LTB4. Groups were compared using the one-way ANOVA test followed by Dunnett's post-test (α = 0.05). Treatment with LTB4 or MS loaded with LTB4 (0.01 and 0.1 micrometer- μM) were not cytotoxic to OD-21 cells. Treatment with LTB4 modulated the expression of the Ibsp (integrin binding sialoprotein) and Runx2 (runt-related transcription factor 2) genes differently depending on the experimental period analyzed. Interestingly LTB4 loaded in microspheres (0.1 μM) allowed long term dental pulp cell differentiation and biomineralization. LTB4 loaded in MS was not cytotoxic and induced an odontoblastic cell phenotype differentiation. Conclusion: These findings shed light on a novel pharmacological strategy to induce dental pulp cell differentiation.

Leukotriene BMicrospheres (MS) loaded with LTBTreatment with LTBLTB

The outcome of root canal treatment has been reported as intimately related to the host response. Genetic polymorphisms might be associated with apical periodontitis repair. The aim of this study was to evaluate the association between receptor activator of nuclear factor kappa B (RANK), receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL), and osteoprotegerin (OPG) genetic polymorphisms with persistent apical periodontitis (PAP) in Brazilian subjects.Subjects with at least 1 year of follow-up after nonsurgical root canal therapy were recalled. Sixty-four subjects with signs/symptoms of PAP and 86 subjects with root canal-treated teeth exhibiting healthy periradicular tissues (healed) were included. Genomic DNA was extracted from saliva and used for RANK (rs3826620), RANKL (rs9594738), and OPG (rs2073618) genotyping by real-time exact tests, and odds ratio were implemented using Epi Info 3.5.2 (Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA). A logistic regression analysis was also performed using the time of follow-up as the covariate. All tests were performed with an established alpha of 0.05 (P = .05).An association between allele distribution and the polymorphism in RANK was observed. Subjects who carry the T allele had a lower risk of having PAP (P.05). In RANKL polymorphism, the genotype distribution was statistically significant different between the PAP and healed groups (P = .05). The time of follow-up was associated with PAP (P.05). In the logistic regression analysis using time as a covariant, RANK (P.05) and RANKL (P.05) were associated with PAP. The polymorphism rs2073618 in OPG was not associated with PAP (P.05).These findings suggest that polymorphisms in RANK and RANKL genes are associated with PAP.

Recent studies suggested that genetics contribute to differences in dental fluorosis (DF) susceptibility among individuals having the same environmental exposure. This study evaluated if MMP2, MMP9 and MMP20 are expressed during enamel development and assessed the association between polymorphisms in these genes with DF. Mice susceptible and resistant to DF were used to evaluate if MMPs were candidate genes for DF. The animals received fluoride and their enamels were used for immunohistochemistry. Additionally, 481 subjects from a city with fluoridation of public water supplies were recruited. Genotyping was performed using real time PCR. Allele/genotype frequencies were compared between groups. MMP2, MMP9 and MMP20 immunostaining was detected in both animal groups. DF was observed in 22.4% of the subjects. A borderline association was observed in MMP2 (rs243865), MMP9 (rs17576) and in MMP20 (rs1784418) (p = 0.06, p = 0.08 and p = 0.06 respectively). Briefly, MMPs were expressed during enamel maturation and genetic polymorphisms were not associated with DF.

The aim of this study was to investigate the association between genetic polymorphisms in MMP8, MMP13, and MMP20 with caries experience and developmental defects of enamel (DDE) in children from the Amazon region of Brazil. Den tal caries and DDE data were collected through clinical examination from 216 children. Genomic DNA was extracted from saliva, and genotyping of selected polymorphisms in MMP8 (rs17099443 and rs3765620), MMP13 (rs478927 and rs2252070), and MMP20 (rs1784418) was performed using TaqMan chemistry and endpoint analysis. χ2 or Fisher’s exact tests were used to compare allele and genotype distributions between children with caries experience and caries-free children and between DDE-affected and -unaffected children with an established alpha of 5%. The polymorphism rs478927 in MMP13 was associated with caries experience and DDE (p < 0.05). The analysis performed comparing children with both conditions (caries experience plus DDE) and children with neither of the conditions (caries-free chil dren without DDE) demonstrated that children carrying the MMP13 rs478927 TT genotype were more likely to have concomitant occurrence of these two conditions (OR = 5.8, 95% CI 2.1–15.8; p = 0.0003). In conclusion, the genetic polymorphism rs478927 in MMP13 was associated with caries experience and DDE.

In addition to essential clinical parameters, orthodontic treatment outcomes should also consider patients' opinions and perceptions, which could be comprehensively clarified with a qualitative scientific approach. Considering that the information on younger patients' views is scarce, the objective of this study was to investigate how adolescent orthodontic patients perceive malocclusion, and their motivations and expectations concerning orthodontic corrective treatment.In this descriptive qualitative study, 12 adolescents aged 12 to 14 years and of both genders, covering a heterogeneous collection of malocclusions, were recruited from the waiting list of an Orthodontics Graduate Course. They were individually interviewed before the appliance insertion by an experienced researcher using an interview guide and photographic records to stimulate patients' self-perception of their oral condition. The interviews proceeded simultaneously with transcription analyses until saturation. After the transcription evaluation, the framework analysis technique was performed.Data derived from the transcription analyses were grouped into 3 major themes: perceptions concerning the concepts of normality and abnormality regarding oral health; self-perceptions regarding malocclusion and other discrepancies; and motivations for seeking orthodontic treatment and expectations related to the results.Attractiveness was exceptionally relevant among adolescent patients. Most interviewees seemed to focus their attention on esthetically upsetting dentofacial traits, which they expected to be corrected by orthodontic treatment. In addition to self-oriented appearance-driven motivations, parents, other health professionals, friends, and peers also influenced adolescents' perception of their need for treatment. The achievement of a normal dentofacial status seems to be closely attached to social and individual aspirations.

Langerhans cell histiocytosis (LCH) is an inflammatory myeloid neoplasia commonly affecting children with frequent somatic mutations in MAPK pathway genes including BRAFV600E and MAP2K1. Some studies suggest that LCH cells can recruit and modulate inflammatory cells, which could provide reciprocal survival signals. To characterize the immune profile of infiltrating inflammatory cells, and to clarify their participation in LCH pathogenesis, a detailed immunohistochemical analysis was performed. Fifteen (10 children, 5 adults) LCH cases were assessed through macrophage (CD68 and CD163), mature dendritic cell (mDC; CD83 and CD208), regulatory T cell (Treg; CD4, CD25 and FOXP3) and cytotoxic lymphocyte (CL; CD56, CD57, perforin and granzyme B) immunomarkers. Moreover, lymphocytic and LCH markers were also analysed. All cases were S100, CD1a, CD207 and CD4-positive. Bcl-2 and cyclin D1 expression was observed in 13 of 15 cases. In the immune microenvironment, M2-polarized macrophages and Tregs were the predominant cell populations, followed by significantly (P < .005) smaller levels of mDCs and CLs. Additionally, the number of CD3 + cells was significantly higher than that of CD20 + cells. In the CD3 + cell population, there were a significantly higher number of CD4 + cells than CD8 + cells. While there were no differences when comparing the paediatric and adult populations, FOXP3 + cells were significantly higher in patients with multisystem involvement and treated with chemotherapy, than single-site cases and those without chemotherapy. Our results suggest that M2-polarized macrophages and Treg infiltration can promote LCH development and survival, probably through pro-tumoral, immunosuppressive and/or cytokine-mediated mechanisms. This work highlights the need for further exploration of immune-targeted therapy for LCH.

Made available in DSpace on 2021-06-25T10:48:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2020-11-01 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) We report a 7-year-old boy who presented with a nodule on the upper lip. A previous clinical history of mechanical trauma in the lesional area had been noted. After surgical excision, microscopy revealed fibrocollagenous fascicles associated with neurovascular bundles and skeletal striated muscle fibers in diffuse subepithelial distribution, suggesting rhabdomyomatous mesenchymal hamartoma. However, strict clinicopathological correlation favored a healing process with trapped striated skeletal muscle tissue. After three years of follow-up, an improvement in the aesthetic appearance of the upper lip was observed. To the best of our knowledge, a case of pseudo-rhabdomyomatous mesenchymal hamartoma has not been reported to date. Department of Pediatric Dentistry School of Dentistry of Ribeirão Preto FORP/USP University of Sao Paulo Oral Medicine Department of Diagnosis and Surgery Araraquara Dental School Universidade Estadual Paulista (UNESP) Oral Pathology Department of Stomatology Public Oral Health and Forensic Dentistry School of Dentistry of Ribeirão Preto FORP/USP University of São Paulo Oral Medicine Department of Diagnosis and Surgery Araraquara Dental School Universidade Estadual Paulista (UNESP) FAPESP: 2016/02713-2

The aim of this study was to evaluate the association between timing of permanent tooth emergence with overweight and obesity in children from Brazilian Amazon region. The studied population consisted of 192 children, 09 to 12 year-old, from public schools at Manaus, Amazonas-Brazil. Clinical examination was performed and the tooth emergence was evaluated according to the number of permanent erupted teeth. Body mass index z-score was calculated. For the statistical analysis ‘Overweight/obese’ group was compared with ‘Normal weight’ group in a case to control ratio 1:2. The t-test based on age was used for means comparison between the groups. A linear regression analysis using age and gender as co-variants was used. The established alpha was 5%. One hundred twenty-seven children were classified as normal weight and 65 were classified as overweight/obese (49 were overweight and 16 were obese). Overweight/obesity condition was associated with the gender, in which boys had a higher chance to present higher weight conditions (OR=1.84; CI 95% 1.06-3.37; p=0.04). The mean number of permanent teeth was higher in the overweight/obesity group (p

Hypophosphatemic rickets is a rare genetic disorder involving the regulation of fibroblast growth factor 23 (FGF23), a phosphaturic agent, clinically showing bowing of the legs, short stature and dentoalveolar abscesses. A 7-year-old boy, with previous hypochondroplasia diagnosis, was referred to our pediatric dentistry clinic presenting short stature, bone deformities and sinus tracts at deciduous teeth apex levels not related with trauma, restorations or dental caries. After deciduous teeth extraction, due to root resorption and mobility, light microscopy exhibited typical hypophosphatemic dentin, and micro-computed tomography revealed tubular clefts and porosities throughout the teeth. Laboratory tests confirmed the HR diagnosis, after which the treatment was initiated.

This study evaluated the association between polymorphisms in genes encoding estrogen receptors 1 (ESR1) and 2 (ESR2), vitamin D receptor (VDR) and in microRNA17 (which binds to ESR1 and VDR) with persistent apical periodontitis (PAP) after the endodontic treatment. We included 162 patients who completed endodontic treatment at least one year ago and presented apical periodontitis at the beginning of the root canal therapy. Clinical and radiographic exams were performed to evaluate the presence of PAP or healthy periradicular tissues (healed). Saliva samples were collected as a genomic DNA. The genotyping of ESR1 (rs2234693 and rs9340799), ESR2 (rs1256049 and rs4986938), VDR (rs739837 and rs2228570) and miRNA17 (rs4284505) were performed by real-time PCR. Chi-square test was used to the distribution of genotype and allele frequencies. Haplotype analysis was also performed. Eighty-nine patients were included in the “healed” group and 73 in the “PAP” group. No association was found between the allelic and genotypic polymorphisms studied and PAP (p>0.05). Haplotype analysis also did not demonstrated an association (p>0.05). In conclusion, the genetic polymorphisms in ESR1, ESR2, VDR and miRNA17 are not associated with PAP.

The aim of this study was to investigate the association between genetic polymorphisms in MMP8, MMP13, and MMP20 with caries experience and developmental defects of enamel (DDE) in children from the Amazon region of Brazil. Den tal caries and DDE data were collected through clinical examination from 216 children. Genomic DNA was extracted from saliva, and genotyping of selected polymorphisms in MMP8 (rs17099443 and rs3765620), MMP13 (rs478927 and rs2252070), and MMP20 (rs1784418) was performed using TaqMan chemistry and endpoint analysis. χ2 or Fisher's exact tests were used to compare allele and genotype distributions between children with caries experience and caries-free children and between DDE-affected and -unaffected children with an established alpha of 5%. The polymorphism rs478927 in MMP13 was associated with caries experience and DDE (p0.05). The analysis performed comparing children with both conditions (caries experience plus DDE) and children with neither of the conditions (caries-free chil dren without DDE) demonstrated that children carrying the MMP13 rs478927 TT genotype were more likely to have concomitant occurrence of these two conditions (OR = 5.8, 95% CI 2.1-15.8; p = 0.0003). In conclusion, the genetic polymorphism rs478927 in MMP13 was associated with caries experience and DDE.

Introduction: The study aimed to correlate the Periapical Index (PAI), obtained by way of periapical radiographs, with the volume of chronic periapical lesion, obtained through cone-beam computed tomography (CBCT), in the permanent teeth. Methods and Materials: Radiographs and CBCT images were selected from 35 single-rooted permanent teeth, with fully formed apices, with a diagnosis of pulp necrosis and chronic apical periodontitis that was radiographically visible. Two independent raters evaluated the radiographs on two separate occasions and classified the periapical lesions in accordance with Ørstavik’s PAI. The periapical lesion volume was calculated in the CBCT images. The correlation between the PAI and the lesion volume was calculated using Spearman’s correlation test. Results: There was a positive, moderate correlation between the PAI and the volume (rs=0.596; P

Objective This replication study aimed to evaluate an association between caries experience and polymorphisms in DEFB1 and miRNA202 in two different Brazilian groups. Design The population consisted in 312 Brazilian children. Genomic DNA for was extracted from buccal cells isolated from saliva. The genotyping analysis of the polymorphisms in DEFB1 and miRNA202 was performed by real-time polymerase chain reactions. The associations between caries experience, genotype and allele distribution was performed, with an alpha of 0.05. Results A statistical significant difference was observed between allele distribution and the polymorphism rs12355840 in the miRNA202 for permanent dentition in the Manaus group, in which individuals that carry the allele C had almost three times more chance to have caries (p = .021; OR = 2.7, 95% CI = 1.1–6.7). In the Ribeirao Preto group there was a statistical significant difference for the polymorphism rs11362 in the DEFB1 for both dentition in alleles (p = .043) and genotype (p = .020) distributions. The T allele increased in two times the chance to have caries (OR = 2.03; 95% CI = 1.05–4.07). Conclusion In conclusion, the allelic distribution of the polymorphism rs12355840 in miRNA202 was associated with caries experience in the Manaus group. In the Ribeirao Preto group, the allelic and genotypic distributions in the polymorphism rs11362 in DEFB1 were associated with caries experience.

Permanent teeth that remain impacted could lead to the early loss of primary teeth and cause space problems in dental arches. We present two cases of ectopic eruption of the permanent maxillary first molars treated with soft distal movements using a modified Nance palatal arch (NPAm). The wire was soldered to the band and positioned distally to serve as support for the elastic chain, which was attached to a bonded button on the occlusal surface. After a few months, the ectopic eruption was corrected, preserving the adjacent primary teeth and restoring the occlusion. An NPAm is a viable option for distalization and space recovery in the maxillary arch.

This study evaluated physiochemical proprieties of a calcium hydroxide-based paste (Calen(r)) combined with a zinc oxide cement at different ratios (1:0.5, 1:0.65, 1:0.8 and 1:1). Materials were compared regarding setting time, pH variation, radiopacity, solubility, dimensional changes, flow and release of chemical elements. Data were analyzed statistically by ANOVA and Tukey's test (α=0.05). Longer setting time and higher dimensional changes and solubility values were exhibited by 1:0.65 and 1:0.5 ratios (p0.05). Considering the evaluated proprieties, combinations of Calen(r) paste with ZO at 1:0.5 and 1:0.65 ratios had the best results as root canal filling materials for use in primary teeth. Resumo O objetivo do presente estudo foi avaliar propriedades físico-químicas da pasta à base de hidróxido de cálcio (Calen(r)) combinado com diferentes proporções de óxido de zinco (OZ) (1:0,5 e 1:0,65, 1:0,8 e 1:1) (Calen(r) /OZ). Os materiais foram comparados quanto ao tempo de endurecimento, variação do pH, radiopacidade, solubilidade, alterações dimensionais, escoamento e liberação de elementos químicos. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância (nível de 5% de significância). Maior grau de endurecimento, valores de alterações dimensionais, e solubilidade foram encontrados para Calen(r) /OZ 1:0,65 e 1:0,5. Calen(r) /OZ 1:0,5 e 1:0,65, apresentaram os maiores valores de pH em todos os momentos. Todos os materiais apresentaram valores elevados de radiopacidade com diferenças significativas (p>.05). Foram encontradas diferenças significativas apenas entre Calen(r) /OZ de 1:0,5 e 1:1 na liberação de cálcio e zinco (p< 0,05), enquanto que a quantidade de zircônia foi semelhante entre todos os grupos analisados (p>.05). Em relação às propriedades avaliadas no presente estudo, as combinações de Calen(r) com óxido de zinco nas proporções 1:0,5 e 1:0,65 são mais adequadas como material obturador para os canais radiculares de dentes decíduos.

O Brasil tem recebido milhares de refugiados venezuelanos que, em sua grande maioria, entra no território nacional pela fronteira com o estado de Roraima em busca de melhores condições de vida ou mesmo para escapar da fome. Fica evidente que o fenômeno da imigração tem representado um importante desafio na área da saúde pública, com impacto ao nível das dinâmicas dos serviços de saúde dos países de acolhimento. As unidades observacionais consideradas foram crianças imigrantes em Boa Vista, capital do estado de Roraima. A amostra foi constituída por todas as crianças que residem nos abrigos para refugiados, de 2 a 13 anos, que aceitaram a participar da pesquisa no período de outubro a dezembro de 2021, caracterizando amostra por conveniência. Diante dos resultados, podemos concluir que existe a necessidade de políticas públicas voltadas para a saúde bucal dos imigrantes e refugiados. Tendo em vista a realidade ser de difícil acesso aos serviços de saúde oferecidos pelo Estado de acolhimento, tanto por questões de idioma, cultural, financeiro, e até mesmo a falta de informação. Com isso, mostra a necessidade de implantar medidas de políticas públicas, a fim de planejar e executar ações de saúde, de forma curativa e preventiva. Afinal, em nossa constituição e pelo regimento do SUS, todo e qualquer ser humano em território nacional temo direito à saúde. É dever do estado promover esta saúde nos refugiados que acolhemos. Brazil has received thousands of Venezuelan refugees who, for the most part, enter the national territory through the border with the state of Roraima in search of better living conditions or even to escape hunger. It is evident that the phenomenon of immigration has represented an important challenge in the area of public health, with an impact on the dynamics of health services in host countries. The observational units considered were immigrant children in Boa Vista, capital of the state of Roraima. The sample consisted of all children residing in shelters for refugees, aged 2 to 13 years, who agreed to participate in the research from October to December 2021, characterizing a convenience sample. In view of the results, we can conclude that there is a need for public policies aimed at the oral health of immigrants and refugees. In view of the reality that access to health services offered by the host State is difficult, due to language, cultural, financial, and even lack of information. Thus, it shows the need to implement public policy measures in order to plan and execute health actions, in a curative and preventive way. After all, in our constitution and by the SUS regiment, every human being in the national territory has the right to health. It is the duty of the state to promote this health in the refugees we host.

O escaneamento intraoral apresenta vantagens em relação à moldagem com alginato, uma vez que é menos propenso a erros técnicos e provenientes das características do material de moldagem, além de proporcionar um conforto maior ao paciente. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar em pacientes pediátricos a concordância do escaneamento intraoral em relação a mensurações dentárias, comparando as medidas obtidas clinicamente aos modelos digitais, modelos impressos de filamento e modelos convencionais de gesso. Para a realização desse estudo, foram selecionados pacientes em dentição mista, com idades entre 7 a 12 anos, apresentando pelo menos os incisivos centrais e molares permanentes superiores irrompidos e respeitando outros critérios de inclusão previamente estabelecidos. A mensuração do tamanho dentário obtida com o equipamento Scanner 3Shape Trios (3Shape A/S, Copenhague, Dinamarca) foi comparada com aquela obtida clinicamente com auxílio de paquímetro digital (método de referência), assim como as medidas realizadas em modelos de gesso provenientes de moldagem com alginato e modelos de filamento impressos a partir da moldagem digital. Para a análise dos dados, foi realizado o coeficiente de correlação intraclasse e a concordância foi categorizada segundo o mesmo. Todas as análises foram realizadas no programa R versão 3.6.0 (Universidade de Auckland, Nova Zelândia). De acordo com o presente estudo, não houve diferença na concordância entre as medidas realizadas nos modelos de gesso e nos modelos de filamento, em relação ao método de referência e para as medidas no modelo digital, a concordância em relação ao método de referência foi baixa ou nula na região dos molares. A partir dos resultados obtidos, pode-se concluir que houve uma alta concordância entre as medidas realizadas nos modelos de gesso obtidos via moldagem com alginato e nos modelos de filamento obtidos via impressão de moldagem digital, em relação ao método de referência (avaliação intrabucal) e para todos os métodos avaliados, a concordância com relação ao método de referência foi alta para as medidas na região de incisivos. Intraoral scanning has advantages over alginate molding since it is less prone to technical errors and from the characteristics of the molding material, in addition to providing greater comfort to the patient. Thus, the objective of the present study was to evaluate the agreement of intraoral scanning for dental measurements, comparing digital models, printed filaments models and conventional gypsum models to the clinically evaluated measures (intrabuccal evaluation - reference method), in pediatric patients. To perform this study patients with mixed dentition (7 to 12 years of age) with at least central incisors and permanent maxillary molars were selected and followed the inclusion criteria previously determined. The measurement of the tooth size obtained with the Scanner 3Shape Trios equipment (3Shape A / S, Copenhagen, Denmark) was compared with that obtained clinically with the aid of a digital caliper (reference method), as well as the measurements performed on gypsum models from molding with alginate and filament models printed from the digital molding. For the data analysis, the intraclass correlation coefficient (ICC) was performed and the agreement was categorized according to the same. All analyzes were performed in the R program 3.6.0 (University of Auckland, New Zealand). According to the present study, there was no difference in agreement between the measurements performed on gypsum models and on filament models, in relation to the reference method, and for the measurements in the digital model, the agreement in relation to the reference method was low or null in the molar region. From the obtained results, it can be concluded that there was a high concordance between the measurements made in the plaster models obtained by alginate molding and in the filament models obtained by digital impression printing, in relation to the reference method (intraoral evaluation). And for all evaluated methods, concordance with the reference method was high for measurements in the incisor region.

O câncer de cabeça e pescoço (CCP) é um dos tipos mais comuns de câncer, e a Radioterapia (RT) e Quimiorradioterapia (QRT) são os tipos mais comuns de tratamento. Ambos são muito eficientes, porém podem causar efeitos colaterais inclusive aos substratos dentais. O objetivo do presente estudo foi avaliar as alterações ocorridas no esmalte e na dentina coronária de dentes permanentes, provenientes de indivíduos submetidos à RT, à QRT e que não foram submetidos a nenhum tratamento antineoplasico, após indução de desenvolvimento de lesões de cárie (in situ), de erosão (in situ), e de abrasão por escovação (in vitro). Foram selecionados dentes extraídos de pacientes que realizaram RT ou QRT para tratamento do CCP no Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto e no Hospital do Câncer de Barretos. Os dentes foram divididos em grupos de acordo com o tratamento antineoplásico a que os pacientes foram previamente submetidos, n=84 fragmentos para cada fase (42 fragmentos de esmalte e 42 fragmentos de dentina): Controle (CO): fragmentos de dentes extraídos de pacientes que não foram submetidos à RT ou QRT; Radioterapia (RT): fragmentos de dentes extraídos de pacientes que já concluíram a RT para CCP, acima de 45Gy; Quimiorradioterapia (QRT): fragmentos de dentes extraídos de pacientes que já concluíram a RT combinada a quimioterapia a baseada em platina. Todos fragmentos de esmalte e dentina foram aletoriamente distribuídos. O estudo foi dividido em três fases: Na primeira fase foi realizado o processo DES/RE nos substratos dentais, in situ; na segunda fase a suscetibilidade dos tecidos à erosão, in situ; e na 3ª fase o teste de abrasão por escovação, in vitro. As variáveis de resposta foram: perfil de desgaste, degrau formado, contagem de túbulos dentinários, perímetro dos túbulos dentinários, rugosidade da superfície, volume perdido e microdureza longitudinal. Os dados obtidos foram avaliados por meio de testes estatísticos apropriados para comparação entre os grupos, com nível de significância estabelecido em 5% (p

Uma nutrição adequada é de extrema importância na manutenção óssea, especialmente nas mulheres após a menopausa, nas quais a incidência de doenças osteometabólicas é maior. Em grande maioria, apenas uma nutrição apropriada não é capaz de suprir os efeitos deletérios causados no tecido ósseo pelo déficit hormonal. Os exercícios físicos são altamente indicados como prevenção e tratamento por gerarem estímulos necessários aos ossos com mínimos efeitos colaterais. Sendo assim, o objetivo foi avaliar os efeitos do exercício físico de alto impacto como meio profilático e terapêutico em ossos osteopênicos de ratas submetidas à ovariectomia (OVX) e dieta hiperprotéica (DH). Foram utilizados 64 ratas Wistar, totalizando oito grupos (n=8), tratadas por 12 semana: os ratos submetidos a OVX foram divididos nos seguintes subgrupos: OVX, sedentárias e dieta padrão (DP); OVXE, treinadas e DP; OVXP, sedentárias e DH; OVXEP, treinados e DH; e os ratos submetidos a cirurgia simulada (SHAM): SH, sedentário e DP; SHE, treinados e DP; SHP, sedentárias e DH; SHEP, treinadas e DH. Foram realizadas no sangue as análises de imunoabsorção enzimática (RANKL e OPG), no fígado a glutationa reduzida (GSH), malondialdeido (MDA) e vitamina E, e no tecido ósseo densitometria, ensaio mecânico, histologia e imunoistoquimica (Osteocalcina e Osteopontina). Os dados foram analisados por teste estatístico em modelo linear generalizado (p

O diagnóstico diferencial do ameloblastoma é de grande interesse entre clínicos e pesquisadores, uma vez que sabe-se que o diagnóstico presuntivo inadequado pode acarretar em sérios problemas ao paciente. A busca por estabelecer critérios radiográficos para essa neoplasia é um desafio ainda atual. Dentro desse contexto, as reabsorções dentárias têm sido relatadas como um achado frequente e característico nas análises de ameloblastomas, mas ainda traz consigo certa insegurança quando a especificidade deste sinal. Esse trabalho tem o objetivo de avaliar a presença das reabsorções dentárias no ameloblastoma e seu padrão de aparecimento pela análise retrospectiva e revisão sistemática. Para o estudo retrospectivo foram selecionados 40 pacientes, com diagnóstico de ameloblastoma e 14 estudos foram incluídos na revisão sistemática. Com exceção da faixa etária, todos os resultados encontrados na casuística são consonantes com os da revisão sistemática. Não foi observado predileção por gênero e a localização mais comum foi a mandíbula. A reabsorção dentária foi observada em 95% dos 40 casos analisados e em 64,8% dos casos obtidos pela revisão sistemática. O padrão imaginológico mais frequente foi o em plano, seguido pelo irregular, e superficial, respectivamente. As lesões em sua grande maioria eram grandes no momento do diagnóstico, sendo que essas duas últimas variáveis foram avaliadas somente no estudo retrospectivo. Foi possível concluir que as reabsorções dentárias são uma característica frequente nos ameloblastomas e devem ser consideradas como um sinal importante e diferencial no momento de realização do diagnóstico presuntivo dessa neoplasia The differential diagnosis of ameloblastoma is of great interest among clinicians and researchers, since it is known that inadequate presumptive diagnosis can lead to several problems in the patient. The search for establishing radiographic criteria for this neoplasm is still a challenge in science. Within this context, dental resorptions have been reported as a frequent finding in ameloblastoma analyzes, but still carry some controversy. This study aims to evaluate the presence of dental resorptions and their pattern of appearance through retrospective analysis and a systematic review. For the retrospective study, 40 patients with a diagnosis of ameloblastoma were selected and 14 studies were included in the systematic review. Exception for age group, all the results found in the series agreed with those found in the systematic review. No predilection by gender was observed, the most common location was the mandible. Dental resorption was observed in 95% of the 40 cases analyzed and in 64,8% of the cases obtained by the systematic review. The most frequent pattern was flat-cutting, followed by irregular and superficial, respectively. The majority of lesions were large at the time of diagnosis, and the latter two variables were evaluated only in the retrospective study. It was possible to conclude that dental resorptions are a frequent feature in ameloblastomas and should be considered as an important sign at the time of the presumptive diagnosis of this neoplasm

Objetivo: Estudar e compreender aspectos topográficos e temporais do osso pré-maxilar e da sutura pré-maxilar - maxilar, por serem elementos anatômicos fundamentais pouquíssimos explorados clinicamente. Material e métodos: Foram avaliados 1138 crânios secos humanos, sendo que 116 (10,19%) dos espécimes eram crianças, e 1067 (89,81%) adultos. Os crânios foram fotografados e determinada a porcentagem de abertura da sutura pré-maxilar - maxilar. Posteriormente os dados foram tabulados e submetidos a análise estatística, adotando-se nível de significância de 5%. Resultados: A progressão de fechamento da sutura pré-maxila - maxilar foi de 3,72% ao ano. Em 100% dos crânios até 12 anos observou-se a sutura pré-maxilar - maxilar abertas na região palatina, enquanto 6,16% dos adultos. Conclusões: A pré-maxila existe de forma independente dentro do complexo maxilar e a presença da sutura pré-maxila - maxilar justifica o sucesso de expansões anteroposterior para o crescimento do terço médio da face e solução problemas anatômicos e funcionais Objective: To study and understand topographic and temporal aspects of premaxillary bone and premaxillary-maxillary suture, because they are fundamental anatomical elements that are rarely explored clinically. Material and methods: 1138 human dry skulls were evaluated, of which 116 (10,19%) of the specimens were children, and 1067 (89,81%) were adults. The skulls were photographed and the percentage of opening of the premaxillary - maxillary suture was determined. Subsequently the data were tabulated and submitted to statistical analysis, adopting a level of significance of 5%. Results: The progression of premaxillary suture closure was 3.72% per year. In 100% of the skulls up to 12 years the premaxillary suture was observed open in the palatal region, while 6.16% of adults. Conclusions: The premaxilla exists in an independ way within the maxillary complex and the presence of the premaxilla-maxillary suture justifies the success of anteroposterior expansions of the maxillary complex and solves anatomical and functional problems

A histiocitose de células de Langerhans (HCL) é uma neoplasia mieloide inflamatória comumente afetando pacientes pediátricos e apresenta frequentemente mutações ativadoras somáticas em genes da via MAPK, incluindo BRAF e MAP2K1. Vários estudos sugerem que as células lesionais da HCL podem recrutar e modular células inflamatórias e cujas citocinas parecem fornecer sinais recíprocos de sobrevivência celular. Para o presente estudo foram selecionados 15 casos de HCL (10 crianças, 5 adultos), sendo as amostras de tecido avaliadas através de imunoistoquímica utilizando marcadores para macrófagos (CD68 e CD163), células dendríticas maduras (CDm) (CD83 e CD208), linfócitos T regulatórios (LTregs) (CD4, CD25 e FOXP3) e linfócitos citotóxicos (LCs) (CD56, CD57, perforina e granzima B). Além disso, marcadores de células B (CD20), células T (CD3, CD8) e confirmatórios de HCL foram analisados. Todos os casos de HCL foram positivos para S100, CD1a, CD207 e CD4; enquanto que Bcl-2 e Ciclina D1 foram positivos em 13/15 (86,7%) casos. No microambiente imune intralesional, macrófagos M2 (CD68+/CD163+), seguidos por LTregs, foram as populações celulares mais predominantes. Em quantidade significativamente menor, foram observadas CDm, seguidas por escassos LCs. Considerando a população linfoide, linfócitos T CD3+ foram mais numerosos do que linfócitos B CD20+. Dentro dos linfócitos T, linfócitos T CD4+ foram mais numerosos do que linfócitos T CD8+ (p0.05), the former presenting a higher number of CD4+ than CD8+ T-cells (p

A osteoporose é uma doença osteometabólica que atinge milhares de pessoas; e as doenças cardiovasculares são as principais causas de mortes no mundo. Estudos demonstram que pacientes com baixa densidade mineral óssea apresentam maior risco de desenvolverem doenças cardiovasculares. No entanto, os mecanismos patológicos, fisiológicos e moleculares que correlacionam a osteoporose e a aterosclerose ainda são desconhecidos. O objetivo deste estudo in vivo foi realizar avaliação histológica e imuno-histoquímica do osso fêmur de camundongos ovariectomizados e ateroscleróticos após tratamento com três drogas: doxiciclina, atorvastatina e vitamina D. Foram utilizados 36 camundongos fêmeas, como controle (linhagem C57BL/6), divididos aleatoriamente em seis grupos: Grupo I: Água; Grupo II: Etanol; Grupo III: Azeite; Grupo IV: Doxiciclina; Grupo V: Atorvastatina e Grupo VI: Vitamina D; e 36 camundongos fêmeas knockout para Apolipoproteína E (ApoE-/-) divididos aleatoriamente em seis grupos: Grupo VII: Água OVX; Grupo VIII: Etanol OVX; Grupo IX: Azeite OVX; Grupo X: Doxiciclina OVX; Grupo XI: Atorvastatina OVX e Grupo XII: Vitamina D OVX. Após indução dos quadros de osteoporose e aterosclerose foi realizado o tratamento conforme cada grupo. Decorrido o tempo experimental, os animais foram eutanasiados e o material coletado submetido ao processamento histotécnico para análise histológica, em cortes corados com Tricrômio de Masson e avaliação da expressão por imunohistoquímica de TRAP, IL-1β, TNF-α, RANKL e MMP-9. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística por meio dos testes One-Way ANOVA, seguido pelo pósteste de Bonferroni (histologia e colesterol); Kruskal Wallis e Student-Newman-Keuls (imuno-histoquímica). O nível de significância adotado foi de 5%. Os resultados obtidos evidenciaram diferença significativa entre o número de células imunorreativas para MMP-9, TRAP, IL-1β, TNF-α e RANKL nos grupos VII e X; VIII e XI; demonstrando a ação da Doxiciclina e Atorvastatina sob tais moléculas. Os resultados histológicos evidenciaram a eficácia da vitamina D no tratamento da osteoporose, uma vez que promoveu aumento da área óssea Osteoporosis is an osteometabolic disease that affects thousands of people; and cardiovascular diseases are the leading causes of death in the world. Studies have shown that patients with low bone density are at a higher risk of developing cardiovascular disease. However, the pathological, physiological and molecular mechanisms that are correlated to osteoporosis and atherosclerosis are still unknown. The present work in vivo was to perform a histological and immunohistochemical evaluation of the femoral bone of ovariectomized and atherosclerotic mice after treatment with three drugs: doxycycline, atorvastatin and vitamin D. Thirty-six female mice were used as controls (C57BL/6 strain) randomly divided into six groups: Group I: Water; Group II: Ethanol; Group III: Olive oil; Group IV: Doxycycline; Group V: Atorvastatin and Group VI: Vitamin D; and the 36 knockout mice for Apolipoprotein E (ApoE-/-) randomly divided into six groups: Group VII: Water OVX; Group VIII: Ethanol OVX; Group IX: OVX olive oil; Group X: Doxycycline OVX; Group XI: Atorvastatin OVX and Group XII: Vitamin D OVX. After induction of osteoporosis and atherosclerosis, treatment was performed according to each group. After the experimental time, the animals were euthanized and the collected material submitted to histotechnical processing for histological analysis in stained sections with Masson\'s Trichrome and evaluation of the expression by immunohistochemistry of TRAP, IL-1β, TNF-α, RANKL and MMP-9. The results were submitted to statistical analysis using One-Way ANOVA, followed by Bonferroni post-test (histology and cholesterol); Kruskal Wallis and Student-Newman-Keuls (immunohistochemistry). The level of significance was 5%. The results obtained showed a significant difference between the number of immunoreactive cells for MMP-9, TRAP, IL-1β, TNF-α and RANKL in groups VII and X; VIII and XI; demonstrating the action of Doxycycline and Atorvastatin on such molecules. The histological results evidenced the efficacy of vitamin D in the treatment of osteoporosis, since it promoted increased bone area

O carcinoma espinocelular oral (CECO) corresponde a aproximadamente 95% das neoplasias malignas que acometem a cavidade oral. Os fatores de risco clássicos incluem o tabagismo e etilismo; no entanto, as disfunções do sistema imune em decorrência do envelhecimento (imunossenescência) na patogênese do CECO são muito pouco estudados. Análises comparativas vêm sendo feitas para melhor caracterização do perfil de pacientes jovens e idosos acometidos pelo CECO, o qual permanece ainda controverso. Vários estudos têm mostrado que os macrófagos associados ao tumor (MATs) no CECO de pacientes idosos exibem um fenótipo M2 (pró-tumoral), com propriedades moduladoras do estroma vascular, promovendo a angiogênese. No entanto, considerando a imunossenescência, não se sabe o perfil de MATs e seus efeitos na angiogenese no CECO afetando pacientes jovens. Assim, este estudo analisou por meio da técnica imunoistoquímica, a frequência e localização de MATs em correlação com a angiogênese, no CECO, afetando pacientes jovens e idosos. Cinquenta e sete biópsias de CECO divididos em 3 grupos (I: 65 anos [n=20]) foram selecionados para compor o estudo, sendo classificados morfologicamente seguindo às recomendações da OMS (2017). Os grupos I, II e III foram comparados quanto à imunoexpressão de CD68 e CD163 para análise de MATs e de CD34 (vasos sanguíneos) e D2-40 (vasos linfáticos) para avaliação da densidade microvascular (DMV), área microvascular (AMV) e área vascular total (AVT). A análise imunoistoquímica evidenciou similar expressão de CD68 e CD163 nos três grupos (p>0,05). A avaliação da DMV, AMV e AVT sanguínea e linfática também exibiu padrões similares, com predominância significativa (p 65 years [n=20]) and selected to compose this study, being classified morphologically following WHO (2017) recommendations. Groups I, II and III were compared for immunoexpression of CD68 and CD163 for analysis of TAMs, and CD34 (blood vessels) and D2-40 (lymphatic vessels) for evaluation of microvessel density (MVD), microvascular area (MVA) and total vascular area (TVA). Immunohistochemical analysis showed similar expression of CD68 and CD163 in the three groups (p>0.05). The evaluation of blood and lymphatic MVD, MVA and TVA also showed similar patterns, with a significant predominance (p

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta dos tecidos perirradiculares após perfuração de furca intencional e selamento com Biodentine (BD), agregado trióxido mineral (MTA) ou guta percha. Foram utilizados pré-molares de 3 cães, num total de 30 dentes, distribuídos em 3 grupos: experimental BD (n= 14), controle negativo (MTA) (n= 10) e controle positivo (guta percha) (n= 6), por um período de 120 dias. Radiograficamente foi analisada a área correspondente à perfuração de furca. Na análise histopatológica qualitativa foi avaliada a presença, ou não de tecido mineralizado no local da perfuração de furca e adjacências. Na análise histopatológica semi-quantitativa foram atribuídos escores para os parâmetros: presença ou ausência de tecido mineralizado, intensidade do processo inflamatório e reabsorção dos tecidos mineralizados. Na análise histopatológica quantitativa foi medida a espessura de tecido mineralizado na área de perfuração de furca. Foram realizados ensaios de imuno-histoquímica para os marcadores de mineralização: RANKL e osteoprotegerina (OPG). Ensaio de imunofluorescência indireta avaliou a expressão Runx-2 para a síntese de proteínas de mineralização. Os dados foram avaliados pelos testes qui-quadrado, teste exato de Fisher e teste de Mann Whitney, utilizando o programa estatístico Graph Pad Prism 6.0. Os grupos foram comparados entre sí pelo Teste de Kruskal Wallis com pós-teste de Dunn. O nível de significância adotado para todas as análises foi de 5%. Na análise radiográfica a (BD) apresentou melhor desempenho em relação ao MTA, em todos os aspectos analisados. Histologicamente, tanto o MTA quanto a BD induziram a formação de tecido mineralizado, quando comparado à guta percha, que não induziu a formação de tecido mineralizado (p

O tecido ósseo é um tipo especializado de tecido conjuntivo que desempenha funções essenciais para a sobrevivência do indivíduo, sendo composto predominantemente por osteócitos. Dentre os tecidos mineralizados do corpo, o cemento é um dos menos estudados e compreendidos. A apoptose em células do tecido ósseo têm sido relatada após o uso de Tiazolidinedionas (TZD), uma classe de medicamentos utilizada no tratamento do diabetes melitus tipo 2, representadas pela Rosiglitazona. Assim, os objetivos desse estudo foram: avaliar, in vivo, um protocolo de administração sistêmica da Rosiglitazona em camundongos a fim de estimular a apoptose de osteócitos em maxilares; o efeito da apoptose de osteócitos induzida por Rosiglitazona na formação e progressão de lesões periapicais em camundongos nos períodos experimentais de 7, 21 e 42 dias; e demonstrar a ocorrência de apoptose em cementócitos de camundongos os quais receberam ou não a Rosiglitazona. Foram utilizados camundongos wild type (C57BL/6) com 4 a 5 semanas de idade. No primeiro estudo, a etapa 1 foi realizada para definição de protocolo de administração sistêmica da Rosiglitazona para indução de apoptose em maxilares de camundongos. Os animais (n=24) receberam a Rosiglitazona via oral por 1, 2 ou 3 semanas (gavagem, dose de 10mg/kg) ou não (PBS+10%DMSO). Foram utilizadas as técnicas de TUNEL e DAPI para quantificação de células apoptóticas. Posteriormente, na etapa 2, lesões periapicais foram induzidas nos primeiros molares inferiores de camundongos wild type (C57BL/6) (n=60) após a administração ou não da Rosiglitasona. A câmara pulpar dos dentes foi exposta à microbiota da cavidade bucal pelos períodos de 7, 21 e 42 dias e os grupos foram divididos da seguinte forma: G1) veículo + lesão 7 dias; G2) veículo + lesão 21 dias; G3) veículo + lesão 42 dias; G4) TZD + lesão 7 dias; G5) TZD + lesão 21 dias; G6) TZD + lesão 42 dias. Foram realizadas avaliações em microscopia convencional para análise descritiva das lesões periapicais; microscopia de fluorescência para mensuração das lesões periapicais; histoenzimologia para a atividade da fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) e marcação de osteoclastos; absortometria radiológica de dupla energia (DXA) para avaliação da densidade mineral óssea (DMO) em osso longo e análise da expressão gênica de marcadores de osteócitos (Sost, Hyou1 e Dmp1). No segundo estudo, foram utilizadas as técnicas de TUNEL e DAPI para quantificação de cementócitos apoptóticos em dentes de camundongos wild type (n=12) que receberam ou não a Rosiglitazona. Na etapa 1 do primeiro estudo, pôde-se observar que a administração sistêmica da Rosiglitazona por 2 semanas promoveu a apoptose de osteócitos de forma mais expressiva quando comparada ao período de 1 semana, porém sem diferença significativa com o período de 3 semanas (p>0,05). Já na etapa 2, nos grupos os quais receberam a Rosiglitazona, pôde-se observar uma tendência a lesões periapicais maiores, porém sem diferença estatisticamente significante em comparação com animais que não receberam esse medicamento (p>0,05), além de promover, aos 21 dias de progressão da lesão periapical, maior número de osteoclastos e maior expressão dos genes Sost e Hyou1, sem diferença estatisticamente significante para a expressão do gene Dmp1, bem como na DMO dos fêmures. Adicionalmente, no segundo estudo, foi observado que, em camundongos que receberam a Rosiglitazona por 2 semanas, os cortes histológicos corados em TUNEL e DAPI demonstraram maior razão de cementócitos apoptóticos/cementócitos totais comparado ao grupo controle. Após as metodologias empregadas e os parâmetros analisados, pôde-se concluir que o uso sistêmico da Rosiglitazona estimulou a apoptose de osteócitos e cementócitos interferindo na formação e progressão de lesões periapicais em camundongos. The bone tissue is a specialized type of connective tissue that provides essential functions for the survival of the individual, composed predominantly of osteocytes. Among the mineralized tissues in the body, the cementum is one of the most poorly studied and understood. Apoptosis in the bone tissue have been reported after the use of Thiazolidinediones (TZD), a class of drugs used in the treatment of diabetes mellitus type 2, represented by Rosiglitazone. Thus, the aims of this study were: evaluate, in vivo, a protocol for systemic administration of Rosiglitazone in mice in order to stimulate the apoptosis of osteocytes in jaws; the effect of apoptosis of osteocytes induced by Rosiglitazone in the formation and progression of periapical lesions in mice in the experimental periods of 7, 21 and 42 days; and demonstrate the occurrence of apoptosis in cementocytes of mice which received or not the Rosiglitazone. We used mice wild type (C57BL/6) with 4 to 5 weeks of age. In the first study, the phase 1 was performed for the protocol definition of systemic administration of Rosiglitazone for induction of apoptosis in mice jaws. The animals (n=24) received the Rosiglitazone orally for 1, 2 or 3 weeks (gavage, dose of 10mg/kg) or not (PBS+10%DMSO). We used the techniques of TUNEL and DAPI for quantification of apoptotic cells. Subsequently, in phase 2, periapical lesions were induced in the first lower molars of wild type (C57BL/6) mice (n=60) after the administration or not of Rosiglitasone. The pulp chamber was exposed to the oral microbiota during 7, 21 and 42 days, and the groups were divided as follows: G1) vehicle + periapical lesions 7 days; G2) vehicle + periapical lesions 21 days; (G3) vehicle + periapical lesions 42 days; (G4) TZD + periapical lesions 7 days; G5) TZD + periapical lesions 21 days; (G6) TZD + periapical lesions 42 days. Evaluations were conducted in conventional microscopy for descriptive analysis of periapical lesions; fluorescence microscopy for measurement of periapical lesions; histoenzimology to the activity of acid phosphatase resistant tartrate (TRAP) for osteoclasts measurement; dual-energy x-ray absorptiometry (DXA) for evaluation of bone mineral density (BMD) in long bone and analysis of gene expression of osteocytes markers (Sost, Hyou1 and Dmp1). In the second study, TUNEL and DAPI techniques were used for the quantification of apoptotic cementocytes in wild type (n = 12) mice that received Rosiglitazone or not. In the phase 1 of the first study it was observed that the systemic administration of Rosiglitazone for 2 weeks showed the apoptosis of osteocytes in a more expressive manner when compared to the period of 1 week with no significant difference with the period of 3 weeks (p>0,05). On phase 2, in the groups which received the Rosiglitazone, it was observed a tendency of larger periapical lesions, but without statistically significant difference compared with animals that did not receive this drug (p>0,05), besides promoting, at 21 days of periapical lesion progression, greater number of osteoclasts and greater expression of genes Sost and Hyou1, and absence of statistically significant differences in the expression of the gene Dmp1 nor in the BMD of the femurs. In addition, in the second study, it was observed that, in mice that received the Rosiglitazone for 2 weeks, sections stained by TUNEL and DAPI showed significantly higher ratio of apoptotic cementocytes/total cementocytes compared to control group. After the methodologies used and the parameters analyzed, it can be concluded that the systemic use of Rosiglitazone stimulated the apoptosis of osteocytes and cementocytes interfering in the formation and progression of periapical lesions in mice.

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta do tecido conjuntivo subcutâneo de camundongos isogênicos após o uso da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), utilizando dois fotossensibilizadores, Derivado fenotiazínico (Helbo Blue) e Curcumina, em diferentes tempos de aplicação de lasers (30 segundos, 1 minuto ou 2 minutos). Foram utilizados 141 camundongos isogênicos da linhagem BALB/c cujo tecido conjuntivo subcutâneo foi exposto aos dois fotossensibilizadores, e em seguida irradiado com laser diodo no grupo do Derivado Fenotiazínico e ao LED no grupo da Curcumina. Para cada fotossensibilizador foram utilizados três tempos de irradiação: 30 segundos, 1 minuto e 2 minutos. Ao final de cada um dos períodos experimentais (7, 21 e 63 dias), uma porção do tecido conjuntivo subcutâneo da área do centro da área em que foi aplicada a aPDT foi removida e submetida ao processamento histotécnico de rotina. Foi realizada a descrição do processo inflamatório de forma qualitativa e semi-quantitativa (por meio de escores). Adicionalmente, foi realizada a marcação imunohistoquímica para neutrófilos e macrófagos. Os dados numéricos foram analisados por meio do programa estatístico Sigma Plot 12.0®, utilizando o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis, seguido pelo Pós-teste de Dunn, quando houve diferença significativa entre os grupos. O nível de significância adotado foi de 5%. Foi possível observar que, com relação aos parâmetros fibrosamento, espessura e infiltrado inflamatório, no período inicial de 7 dias, as alterações teciduais foram pequena magnitude. No período de 21 dias, apenas o parâmetro infiltrado inflamatório apresentou pequenas variações entre os grupos. No período final de 63 dias, a compatibilidade tecidual foi observada para os dois fotossensibilizadores (Derivado Fenotiazínico e Curcumina) que não apresentaram diferenças significativas nos parâmetros avaliados, independentemente do tempo de aplicação do laser. The aim of this study was to evaluate the response of subcutaneous connective tissue of isogenic mice after Antimicrobial Therapy (aPDT), using two photosensitizers, Phenothiazine Derivative (Helbo Blue) and Curcumin, at different laser application times (30 seconds, 1 minute or 2 minutes). One hundred and forty one (141) BALB/c isogenic mice were used, which had the subcutaneous connective tissue exposed to the two photosensitizers, followed by irradiation with laser diode to the Phenothiazine derivatives group, and LED to the Curcumin group. Three irradiation times were used to each photosensitizer: 30 seconds, 1 minute and 2 minutes. At the end of each experimental period (7, 21 and 63 days), a sample of the subcutaneous connective tissue, was collected and histotechnical processing was performed. Inflammatory process was described by qualitative and semi-quantitative analysis, using scores. Additionally, immunohistochemical technique was performed to identify neutrophils and macrophages. Data obtained was analyzed by the statistical program Sigma Plot 12.0®, using the non-parametric Kruskal-Wallis test, followed by the Dunn\'s post-test, when significant difference was found between groups. The significance level adopted was 5%. It was also possible to observe that, in relation with the parameters: fiber collagen formation, tissue thickness and inflammatory infiltrate, at the initial period of 7 days, the tissue alteration were of small significance (p

O tratamento minimamente invasivo tem sido cada vez mais empregado no tratamento das lesões de cárie dental, especialmente em crianças jovens. Com isso, a remoção do tecido cariado pelo método químico-mecânico permite uma maior conservação das estruturas dentais saudáveis. O Papacárie Duo® é um material de fácil aplicação e possui propriedades bactericidas e anti-inflamatórias. Este material é aplicado sobre a dentina cariada, a fim de promover um amolecimento desta, facilitando a sua remoção. Os efeitos celulares de Papacárie Duo® são pouco conhecidos, dessa forma esta pesquisa teve como objetivo avaliar o efeito do Papacárie Duo® em células indiferenciadas da polpa dental (Capítulo 1) e a capacidade do Papacárie Duo® induzir a ativação de macrófagos e a síntese de mediadores inflamatórios (Capítulo 2). O Papacarie Duo® foi preparado nas concentrações de 0,5 e 5% por meio de diluição seriada, a partir do gel obtido comercialmente. Células OD-21 e macrófagos J774.1 foram mantidas em cultura com os diferentes tratamentos por um período de estimulação de 24 horas para realização do teste de citotoxicidade (Ensaio LDH) e por 36 horas para avaliação da proliferação celular (Ensaio Colorimétrico MTT). A seguir foi realizada avaliação da expressão gênica relativa dos genes Ibsp, Runx2 e Spp1 em células OD-21; e dos genes Il10, Mmp9, Ptgs2 e Tnf em células J774.1, pelo método de transcrição reversa e reação em cadeia de polimerase em tempo real (qRT-PCR), utilizando o sistema TaqMan® após estimulação o período de 24 horas. O Papacárie Duo® a 5% foi citotóxico às células da polpa dental e inibiu a proliferação celular, assim como a expressão de Runx2 e Ibsp. Porém em ambas as concentrações estimulou a expressão de Spp1, a qual foi maior na concentração de 5%. Em macrófagos, o Papacárie Duo® foi citotóxico na concentração de 5%, mas não influenciou a proliferação celular em nenhuma das concentrações (0,5 e 5%). O LPS inibiu a proliferação celular na presença ou não de Papacárie Duo®, sem apresentar citotoxicidade. O Papacárie Duo® induziu a expressão de Ptgs2 e Il10, sem alterar Tnf e Mmp9. Portanto, o Papacárie Duo® foi citotóxico, dependendo da concentração, e apresentou efeito inibitório na diferenciação de células da polpa (OD-21), sem entretanto influenciar a proliferação celular. Papacárie Duo® não impediu a proliferação de macrófagos, porém foi citotóxico na concentração de 5% mas não à 0,5%. Adicionalmente, Papacárie Duo® modulou a ativação de macrófagos pela indução da expressão de Ptgs2 e Il10, sem alterar a expressão de Tnf e Mmp9. The minimally invasive treatment has been increasingly used in the treatment of dental caries, particularly in young children. Thus, the removal of carious tissue by chemical-mechanical method allows greater conservation of healthy tooth structure. The Papacárie Duo® is an easily applied material, and has bactericidal and anti-inflammatory properties. This material is applied over the carious dentin in order to promote a softening thereof, facilitating its removal. The cellular effects of Papacárie Duo® are little known, therefore this research was to evaluate the effect of Papacárie Duo® in undifferentiated cells from dental pulp (Chapter 1) and the capacity of Papacárie Duo® to induce macrophage activation and synthesis inflammatory mediators (Chapter 2). The Papacárie Duo® was prepared at concentrations of 0.5 and 5% by serial dilution from the gel obtained commercially. OD-21 cells and J774.1 macrophages were maintained in culture with the different treatments for a period of 24 hours to perform the cytotoxicity assay (LDH assay) and for 36 hours for evaluation of cell proliferation (MTT colorimetric assay). The following, was carried out the assessment of the relative gene expression of Ibsp, Runx2 and Spp1 genes in OD-21 cells, and Il10, Mmp9, Tnf and Ptgs2 in J774.1 cells by reverse transcription method and reaction in real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) using the TaqMan system after the stimulation period of 24 hours. The 5% Papacárie Duo® was cytotoxic to cells of dental pulp and inhibited cell proliferation and the expression of Runx2 and Ibsp. However, in both concentrations stimulated the expression of Spp1, which was higher at a concentration of 5%. In macrophages, the Papacárie Duo® was cytotoxic at concentrations of 5%, but did not affect the cell proliferation in any of the concentrations (0.5 and 5%). LPS inhibited cell proliferation in the presence or absence of Papacárie Duo® without giving cytotoxicity. The Papacárie Duo® induced the expression of Ptgs2 and Il10, without changing Tnf and Mmp9. Therefore, the Papacárie Duo® was cytotoxic, depending on the concentration, and showed inhibitory effect on the differentiation of pulp cells (OD-21), but without influencing cell proliferation. Papacárie Duo® not prevent macrophage proliferation, but was cytotoxic at a concentration of 5% but not more than 0.5%. Additionally, Papacárie Duo® modulated the activation of macrophages by inducing Il10 and Ptgs2 expression without altering the expression of ,Tnf, and Mmp9.

O presente estudo avaliou a composição química da dentina radicular de dentes submetidos à radioterapia por meio de Espectroscopia Raman Confocal (ERC). Vinte pré-molares inferiores humanos homólogos foram selecionados e distribuídos em dois grupos (n=10) de acordo com a irradiação: não irradiados e irradiados, submetidos à radioterapia fraccionada com raios-X de 6 MV. Os dentes foram seccionados e submetidos à análise da composição química da dentina radicular submetida à radioterapia por meio de ERC, em relação aos picos de fosfato, carbonato e amidas I, II e III. Foi utilizada objetiva de 40x (Olympus), com luz de comprimento de onda de 785 nm, compreendendo a faixa espectral de 400 - 1800 cm-1, na região de baixa frequência, com resolução espacial de 2 µm. Para a geração do espectro, a potência do laser utilizada foi de 21 mW e o tempo de exposição de 5 segundos. A intensidade dos picos fosfato - PO43- (590 cm-1) e carbonato - CO32- (1070 cm-1) no ERC são proporcionais à quantidade de conteúdo inorgânico, enquanto que a amida I (1670 cm-1), II (1453 cm-1) e III (1267 cm-1) são proporcionais ao conteúdo orgânico (colágeno). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (Teste T, P

O chá verde, obtido da Camellia sinensis, é uma das bebidas mais populares em todo o mundo e, recentemente, tem sido foco de pesquisas científicas por apresentar efeitos benéficos na saúde geral. Estudos laboratoriais e epidemiológicos sugerem que, dentre os polifenóis que compõem o chá verde, a Epigalocatequina-3-galato (EGCG) é o mais bioativo e responsável por sua ação antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana, inativadora de LPS bacteriano, anticarcinogênica, antitumoral, anti-angiogênica, anti-hipertensiva e reparadora tecidual, podendo atuar na prevenção e tratamento do câncer, doenças cardiovasculares, neurodegenerativas, hepáticas e renais. Em diversas doenças ósseas, a EGCG também desempenha um importante papel protetor, atuando na indução da mineralização e inibição da osteoclastogênese. No entanto, seus possíveis efeitos na inflamação e na reabsorção óssea associadas à lesão periapical ainda não foram avaliados. Portanto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver uma formulação para uso endodôntico à base de EGCG com propriedades físico-químicas e biológicas que permitam seu uso como curativo de demora entre sessões. As formulações testadas incluíram: EGCG diluída em água e diferentes concentrações de EGCG (1,25; 5; 10 e 20 mg/mL) veiculadas em polietilenoglicol 400 (PEG). O óxido de zinco foi utilizado como agente radiopacificador. Em função da possível degradação dos produtos fenólicos em função do ambiente e do tempo, uma solução obtida por meio do contato prolongado da EGCG com o dente também foi avaliada (produto da degradação). Inicialmente, foi realizada a caracterização físico-química da formulação de EGCG por meio de espectrofotometria em Ultravioleta/Visível (UV/Vis), em contato com soluções contendo zinco, óxido de zinco e acetato de zinco. Os estudos biológicos foram realizados para avaliar sua compatibilidade tecidual no tecido subcutâneo de camundongos, por meio da avaliação do extravasamento plasmático após 24 horas e da análise de aspectos macroscópicos e microscópicos aos 7, 21 e 63 dias após a inserção de tubos de polietileno contendo as formulações. Neste estudo, uma pasta a base de hidróxido de cálcio (Calen®) foi utilizada como controle. Na análise macroscópica, realizada por meio de fotografias, foram atribuídos escores aos parâmetros de ulceração epitelial, vascularização, necrose e edema. Na análise microscópica, realizada em microscopia de luz convencional e de fluorescência, foram avaliados os parâmetros de infiltrado inflamatório, vascularização, focos de abscessos, cápsula fibrosa, edema e necrose. Os escores dos resultados biológicos foram submetidos à análise estatística utilizando o teste do Qui-quadrado ou Exato de Fisher e para análise dos resultados quantitativos do extravasamento plasmático foi utilizada análise de variância (ANOVA), seguida pelo pós-teste de Tukey. O nível de significância adotado foi de 5%. Os estudos físico-químicos mostraram que a EGCG manteve seu comprimento de onda original em 274 nm quando associada ao óxido de zinco, tendendo à formação de uma banda de absorção em 325 nm. A associação da EGCG com acetato de zinco ocasionou diminuição da banda de absorção em 274 nm e formação de uma nova banda em 323 nm. Os estudos biológicos mostraram, nos parâmetros macroscópicos que, em todos os períodos avaliados, todas as formulações apresentaram compatibilidade tecidual, com ausência de ulceração epitelial, presença de leve necrose tecidual superficial, edema e vascularização, não havendo diferença significante entre os grupos avaliados (p>0,05). Na análise microscópica, em todos os períodos foi verificada ausência de focos de abscesso, edema e necrose e presença de suave ou moderado infiltrado inflamatório, cápsula fibrosa e neovascularização, semelhante entre todos os grupos (p>0,05). A avaliação dos espécimes corados com HE em microscopia de fluorescência favoreceu a visualização dos vasos sanguíneos e de fibras colágenas, constituindo metodologia adicional para esta finalidade. Na avaliação do extravasamento plasmático, o produto da degradação da ECGG apresentou extravasamento de corante azul de Evans por grama de tecido inferior (0,0514 ±0,0220 mg/mL) às demais formulações testadas (p 0.05). On microscopic examination, in all periods was verified absence of abscess foci, edema and necrosis and the presence of mild or moderate inflammatory infiltrate, fibrous capsule and neovascularization, similar among all groups (p> 0.05). The evaluation of the specimens stained with HE under fluorescence microscopy enhancve the visualization of the blood vessels and collagen fibers, constituting an additional methodology for this purpose. In the evaluation of plasma extravasation, the product of degradation of ECGG presented values of Evans blue dye extravasation by gram of tissue (0.0514 ± 0.0220 mg / mL) lower to the other tested formulations (p

A proposta desse projeto de pesquisa foi analisar e caracterizar células-tronco encontradas na polpa dentária e papila apical de um mesmo doador tratadas sob as mesmas condições de cultivo utilizando abordagens que permitem analises de componentes intracelulares que nunca antes haviam sido analisados nessas células. Para tanto, populações enriquecidas pela expressão CD146, STRO-1 e CD90 foram isoladas de terceiros molares inclusos indicados para exodontia, totalizando 16 pacientes e 16 dentes. Como controles negativos, foram utilizadas as células negativas para esses marcadores. Células positivas e negativas para cada marcador foram comparadas entre si e com os resultados dos outros marcadores. Para cada um dos marcadores e respectivos controles foram realizadas analises de cinética celular, ensaios morfológicos e ensaios subcelulares utilizando microscopia de luz sincrotron. Os dados obtidos foram submetidos à teste ANOVA e teste de Tukey (a=0,05) quando pertinente e/ou a análises descritivas. As células isoladas da polpa dentária e papila apical se comportaram diferentemente uma das outras. Nos ensaios de cinética celular, as células enriquecidas (positivas) apresentaram crescimento mais lento quanto comparados com as células não enriquecidas (negativas), independente do marcador em questão. Nos ensaios morfológicos, células CD 90+ da polpa dentária exibiram a menor área e menor perímetro quando comparadas com as CD 146+ e STRO-1+. A presença de compostos iônicos vistos por luz sincrotron mostraram maior fração de massa nas células positivas da polpa dentária. Dentre os elementos traços estatisticamente mais prevalentes foram o fósforo, cobre, zinco, potássio, estrôncio, cálcio e cloro, sendo este último presente na polpa e papila nos 3 marcadores estudados. Concluímos que tanto da polpa dentária quanto na papila apical de dentes humanos, há presença de células tronco multipotentes expressados pelos três marcadores e que apesar de serem obtidos do mesmo dente e doador e cultivados de forma iguais ela tem comportamentos diferentes. As alterações bioquímicas celulares estudadas pelos elementos traços em células separadas por diferentes marcadores foi o primeiro passo para possibilitar os conhecimentos mecanicistas vitais celulares que não são observadas em microscopia padrão. Porém, novos estudos como permitir a visualização da localização espacial de biomarcadores espectrais caracterizados, pode ajudar a consolidar os resultados aqui encontrados. Assim, a análise e classificação desse método de estudo pode ser refinado em pesquisas futuras, incluindo no uso de outros tipos de tecidos dentais para caracterizar as células tronco dentais. The purpose of this research project was to analyze and characterize stem cells found in dental pulp and apical papilla from the same donor treated under the same culture conditions using approaches that allow analysis of intracellular components that had never before been analyzed in these cells. Therefore, populations enriched for CD146 expression, STRO-1 and CD90 were isolated from third molars indicated for extraction, totaling 16 patients and 16 teeth. As negative controls, cells negative for these markers were used. Positive and negative cells for each marker were compared and the results of other markers. For each of the markers and their controls were carried out analysis of cell kinetics, morphological tests and subcellular assays using synchrotron light microscopy. The data were submitted to ANOVA and Tukey\'s test (a = 0.05) where relevant and / or descriptive analyzes. Cells isolated from the apical papilla and dental pulp behaved differently from each other. In cell kinetics assays, enriched cells (positive) showed slower growth as compared with non-enriched cells (negative), regardless of the marker in question. In morphological studies, CD 90+ cells in the dental pulp exhibited a smaller area and lower perimeter compared to CD 146+ and STRO-1 +. The presence of ionic compounds seen by synchrotron light showed higher mass fraction of positive cells in the dental pulp. Among the most prevalent statistical trace elements are phosphorous, copper, zinc, potassium, strontium, calcium and chlorine, the latter being present in the pulp, and the papilla 3 markers studied. We conclude that both the dental pulp as the apical papilla of human teeth, there is presence of multipotent stem cells expressed the three markers and that although they are obtained from the same tooth and donor and grown in the same way it has different behaviors. The biochemical cellular changes studied by trace elements in separate cells with different markers was the first step to allow mechanistic cellular vital knowledge that is not observed in standard microscopy. However, new studies as to visualize the spatial location characterized spectral biomarkers can help consolidate the present results. Thus, the analysis and classification of the study method can be refined in future research including the use of other types of dental tissues to characterize the dental stem cell.

O agregado de trióxido mineral (MTA) tem-se demonstrado aplicável em diversas situações que exigem reparação dos tecidos dentais e periapicais. Contudo, desvantagens relacionadas ao seu elevado custo, propriedades físico-químicas e dificuldade de manuseio têm limitado sua utilização. Neste sentido, um novo cimento de aluminato de cálcio e aditivos (CAC+) foi desenvolvido para superar algumas características negativas do MTA, mantendo, no entanto, suas propriedades satisfatórias. O objetivo deste estudo foi avaliar a progressão de culturas de células osteogênicas e de células indiferenciadas da polpa dental (linhagem OD-21) expostas ao CAC+, utilizando MTA como controle, ou a preparações alternativas do CAC+, com maior conteúdo de cloreto de cálcio (CaCl2) e/ou com substituição do óxido de zinco por óxido de bismuto como radiopacificador. Para isso, células osteogênicas derivadas de calvárias de ratos ou células da linhagem OD-21 foram crescidas sobre Thermanox® por 24 h e expostas, por períodos de até 14 dias, a amostras dos diferentes materiais, posicionadas sobre Transwell®. Em células osteogênicas, apesar de a proximidade com as amostras de CAC+ e MTA inibir o crescimento celular, nas áreas periféricas das lamínulas, foram observados proliferação, viabilidade celular e expressão de marcadores-chave da diferenciação osteoblástica, que precederam a mineralização da matriz extracelular. Culturas expostas ao CAC+, comparativamente ao MTA, exibiram aumentos na viabilidade celular, atividade de fosfatase alcalina e na expressão de marcadores de diferenciação, o que não se repetiu para células OD-21. Além disso, demonstrou-se que os efeitos destes cimentos sobre a osteogênese in vitro variaram de acordo com o período de exposição das culturas, sendo mais favoráveis durante sua fase proliferativa. Entre as preparações de CAC+, verificou-se que o aumento no teor de CaCl2 promoveu maior disponibilização de Ca2+ no meio de cultura, o que correspondeu a maior diferenciação celular e formação de matriz mineralizada em culturas de células osteogênicas e OD-21, e à redução de efeitos negativos da adição de óxido de bismuto sobre osteoblastos. Conclui-se que o CAC+ favorece o desenvolvimento do fenótipo osteogênico, atuando principalmente em células em estágios iniciais de diferenciação e que a adição de CaCl2, independentemente do agente radiopacificador, potencializa os efeitos benéficos sobre células osteogênicas e favorece o desenvolvimento e diferenciação de células indiferenciadas derivadas do tecido pulpar, podendo ser considerado como material alternativo ao MTA. Mineral trioxide aggregate (MTA) has been successfully applied in endodontic procedures in which dental and periapical tissue repair are required. However, some drawbacks of MTA as high cost, physicochemical properties and difficulty in handling have limited its use. In this context, a novel calcium aluminate cement plus additives (CAC+) has been developed to overcome some negative features of MTA. The aim of this study was to evaluate the progression of either osteogenic cell cultures or undifferentiated dental pulp-derived ones (OD-21 cell line) exposed to CAC+ or to alternative formulations of CAC+ with a higher content of calcium chloride (CaCl2) and/or replacement of zinc oxide by bismuth oxide as radiopacifier agent. Rat calvaria-derived cells or OD-21 cells were grown on Thermanox® coverslips for 24 h and exposed to samples of CAC+ or MTA (control) placed on Transwell® for periods of up to 14 days. In osteogenic cell cultures, the proximity to MTA or CAC+ samples inhibited cell growth, whereas at distance it was observed cell proliferation, cell viability and expression of differentition markers prior to mineralization of the extracellular matrix. Comparatively to MTA, osteogenic cell cultures exposed to CAC+ exhibited higher cell viability, alkaline phosphatase activity and expression of key osteoblast markers, contrary to what was observed for OD-21 cells. Furthermore, it was demonstrated that the effects of these cements on in vitro osteogenesis varied according to the timing of exposure, with a more favorable impact during the proliferative phase of cultures. Among the diverse formulations of CAC+, it was found that the increase in the CaCl2 content promoted greater availability of Ca2+ in the culture medium, which corresponded to higher cell differentiation and mineralized matrix formation in osteoblastic cell cultures and OD-21 cells, while reducing the negative effects of bismuth oxide on osteoblasts. In conclusion, CAC+ supported the acquisition of the osteogenic cell phenotype, mostly for cells in early stages of differentiation. Additionaly, the increase in the CaCl2 content, regardless of the radiopacifier agent, potentiates the beneficial effects on osteogenic cells and promotes the growth and differentiation of OD-21 cells, rendering CAC+ a potential alternative material to replace MTA in endodontic procedures.

Introdução: O objetivo deste trabalho foi caracterizar a composição da microbiota bucal e a formação e progressão de lesões periapicais induzidas experimentalmente em dentes de camundongos knockout para IL-22 (IL-22 KO) comparados com animais wild-type (WT). Material e Métodos: Inicialmente, foi realizada a avaliação do perfil microbiano da cavidade bucal dos animais (40 espécies de micro-organismos), no dia das exposições pulpares, por meio de técnica de biologia molecular (Checkerboard DNA-DNA hybridization). Em seguida, lesões periapicais foram induzidas nos primeiros molares inferiores dos camundongos e, decorridos os períodos de 7, 21 e 42 dias, os animais foram submetidos à eutanásia em câmara de CO2. As mandíbulas foram então removidas e submetidas ao processamento histotécnico. A seguir, cortes representativos de cada dente foram corados com hematoxilina e eosina (HE), para descrição do tecido pulpar e das regiões apical e periapical, em microscopia óptica convencional e mensuração da área das lesões periapicais em microscopia de fluorescência. Além disso, cortes sequenciais foram avaliados por meio de: histoenzimologia para a marcação de osteoclastos (TRAP), coloração de Brown & Brenn (para identificação de bactérias) e imunohistoquímica (para identificação de RANK, RANKL e OPG). Os escores da quantidade de células bacterianas, para cada uma das 40 espécies avaliadas, foram submetidos à analise estatística empregando o teste não-paramétrico de Mann-Whitney para amostras independentes, para comparação entre os grupos. Os resultados numéricos obtidos na análise morfométrica da área das lesões periapicais e do número de osteoclastos foram submetidos à análise estatística \"one-way\" ANOVA e pós-teste de Bonferroni. Para todas as análises foi adotado o nível de significância de 5%. Resultados: Em relação ao perfil microbiano encontrado na cavidade bucal dos animais, foi possível observar diferença estatisticamente siginificante entre os dois grupos de animais para 6 espécies bacterianas (p