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Objective: To describe the lipid profile in patients with stroke in a cardiovascular risk program in a first-level health institution in Armenia, Quindío during 2018. Methods: A cross-sectional descriptive study was carried out with a sample of 300 people in a population of a first-level service provider institution with diagnosis or history of stroke. Variables were described in average, standard deviation and confidence intervals, a comparative analysis was made by sex. Variance analysis and square Chi were performed. A relationship of the lipid profile variables with the diagnosis and history of stroke was established. A value of p, Objetivo: Describir el perfil lipídico en pacientes con accidente cerebro vascular en un programa de riesgo cardiovascular en una institución de salud de primer nivel de Armenia, Quindío durante el año 2018. Métodos: Se realizó un estudio descriptivo de corte transversal, con una muestra de 300 personas en una población de una Institución Prestadora de Servicios de primer nivel de atención, con diagnóstico o antecedente de ACV. Se describieron variables en promedio, desviación estándar e intervalos de confianza, se hizo un análisis comparativo por sexo. Se realizaron análisis de varianza y Chi cuadrado. Se estableció una relación de las variables del perfil lipídico con el diagnóstico y antecedente de ACV. Se consideró un valor de p

RESUMEN Introducción. La hipercolesterolemia familiar (HcF) es una patología causada por diversas mutaciones con una incidencia variable dependiendo de su forma heterocigota u homocigota. Sin embargo, pocos casos son diagnosticados y no todo el personal de salud conoce sobre la enfermedad. Materiales y Método. Se realizóuna encuesta en línea basada en Google Forms para medir el nivel de conocimiento del personal de salud sobre la HcF en la República Dominicana. Se utilizó un cuestionario confeccionado por los autores basado en los criterios DUCTH de hipercolesterolemia. Resultados. El predominio del personal de salud que llenó el cuestionario fue de nutriólogos; el conocimiento sobre los valores de corte adecuado para el diagnóstico de HcF fue reportado en 30% de la muestra. Conclusiones. Es imperativo incrementar el conocimiento del personal de salud sobre HcF con el objetivo de disminuir la muerte cardiovascular prematura. ABSTRACT Introduction: Familial hypercholesterolemia (FH) is a disease caused by various mutations with a variable incidence depending on its heterozygous or homozygous form. However, few cases are diagnosed and not all health personnel know about the disease. Material and Methods: An online survey based on Google Forms was conducted to measure the level of knowledge of health personnel about FH in the Dominican Republic. A questionnaire prepared by the authors based on the DUCTH criteria for hypercholesterolemia was used. Results: The predominance of health personnel who filled out the questionnaire was nutritionists; knowledge about the appropriate cut-off values for the diagnosis of FH was reported in 30% of the sample. Conclusions: It is imperative to increase knowledge of the health personnel on FH to reduce premature cardiovascular death.

Os agentes de alteração de lipídios abrangem várias classes de medicamentos, incluindo estatinas, inibidores de absorção de colesterol, derivados de ácido fíbrico, sequestrantes de ácidos biliares, inibidores de proproteína convertase subtilisina/kexina tipo 9, ácido nicotínico e outros. Embora as estatinas sejam a terapia preferida para a maioria dos pacientes que necessitam de tratamento de dislipidemia, outros agentes estão disponíveis com vários níveis de evidência para benefícios clínicos. Em pacientes que não atingem a meta desejada de colesterol de lipoproteína de baixa densidade com terapia com estatina, adicionamos ezetimiba com mais frequência do que qualquer outra droga que altera os lipídios. O principal uso da terapia com fibratos é no manejo de pacientes com hipertrigliceridemia, o ácido nicotínico é pouco utilizado no tratamento do LDL-C e pode ser usado para diminuir a lipoproteína. A maioria dos pacientes para os quais uma terapia com medicamentos prescritos é considerada aconselhável terá uma elevação no nível de colesterol de lipoproteína de baixa densidade e uma estatina é a terapia de primeira linha estabelecida. Outros medicamentos hipolipemiantes são usados para aumentar os efeitos das estatinas no LDL-C, substituir as estatinas quando essa classe não pode ser usada, pode ser uma opção, ou para tratar distúrbios não-LDL-C, principalmente hipertrigliceridemia.

Introducción Los pacientes, tras un ictus o un ataque isquémico transitorio, presentan un riesgo muy elevado de sufrir nuevos episodios vasculares. La reducción del nivel de colesterol unido a lipoproteínas de baja densidad (cLDL) reduce la incidencia de nuevos episodios, si bien una proporción importante de pacientes no alcanza los objetivos terapéuticos recomendados con los tratamientos hipolipemiantes actuales. El objetivo de este documento de consenso es actualizar el papel de los inhibidores de la proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (iPCSK9; alirocumab y evolocumab) en la prevención secundaria de episodios vasculares en pacientes con ictus isquémico previo. Métodos Se realizó una revisión bibliográfica para identificar las principales evidencias sobre el uso de iPCSK9 en estos pacientes y los objetivos terapéuticos recomendados de cLDL. Los resultados se discutieron en 2 reuniones de consenso, que constituyeron la base para la elaboración del documento. Conclusiones Los iPSCSK9 son eficaces en la reducción del riesgo vascular en prevención secundaria y, específicamente, evolocumab ha demostrado esta reducción en pacientes con ictus isquémico previo. Ambos fármacos han demostrado un buen perfil de seguridad, incluso en pacientes que alcanzaron un nivel de cLDL < 20 mg/dL. En este sentido, en el subestudio de episodios neurocognitivos con evolocumab no se observó ninguna señal de empeoramiento de la función cognitiva en pacientes con nivel muy bajo de cLDL. Con base en estas evidencias, en el documento se presentan recomendaciones prácticas sobre el uso de iPCSK9 para la prevención secundaria y seguimiento de episodios vasculares en pacientes con ictus isquémico previo. Introduction Patients with history of stroke or transient ischaemic attack present considerable risk of future vascular events. Reducing levels of low-density lipoprotein (LDL) cholesterol decreases the incidence of new vascular events, although in a substantial number of patients, the currently available lipid-lowering therapies fail to achieve the therapeutic goals recommended in clinical guidelines. The aim of this consensus statement is to provide updated information on the role of the proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) inhibitors alirocumab and evolocumab in the secondary prevention of vascular events in patients with history of ischaemic stroke. Methods A literature review was performed to identify the main evidence on the use of PCSK9 inhibitors in these patients and the recommended therapeutic targets of LDL cholesterol. The results were discussed in 2 consensus meetings that constituted the basis for the drafting of the document. Conclusions PCSK9 inhibitors are effective in reducing vascular risk in secondary prevention; evolocumab specifically has achieved this reduction in patients with history of ischaemic stroke. Moreover, both alirocumab and evolocumab present good safety profiles, even in patients achieving LDL cholesterol levels < 20 mg/dL, and no signs of cognitive impairment have been observed in patients treated with evolocumab who achieved very low levels of LDL cholesterol. In the light of this evidence, we provide practical recommendations about the use of PCSK9 inhibitors in secondary prevention of vascular events in patients with history of ischaemic stroke and follow-up of these patients.

Se estudió el impacto de SNP cargadas con extracto de Ganoderma applanatum sobre el perfil tiroideo y lipídico de rata. Las SNP (diámetro medio 58,77 nm; potencial zeta - 3,8) mV se analizaron mediante DLS. La microespectroscopía de infrarrojo con transformada de Fourier proporcionó un pico de transmisión amplio y elevado a 3248,12 cm-1 , que indica la carga bioquímica del extracto de G. applanatum en la superficie de los SNP. No se observó mortalidad ni cambios de comportamiento en la prueba de toxicidad aguda. El grupo-1 recibió 1 mL de agua destilada, el grupo-2 y el grupo-3 recibieron 200 mg kg-1 y 400 mg kg-1 de nanopartículas respectivamente. Una dosis de 400 mg kg-1 de SNPs mostró una mayor actividad hipertiroidea e hipolipidímica en comparación con el control y la dosis de 200 mg kg-1 . Impact of silver nanoparticles loaded with Ganoderma applanatum extract on thyroid and lipid profile of rat were studied. Synthesized SNPs (Average diameter 58.77 nm; -13.8 mV zeta potential) were analysed by dynamic light scattering analysis. Fourier transform infrared spectroscopy provided broad and high transmission peak at 3248.12 cm-1 which indicates the loaded biochemical of the G. applanatum extract on the surface of SNPs. No mortality and behavioural changes were observed in the Acute toxicity test. Group-1 received 1 mL distilled water, group-2 and group-3 received 200 mg kg-1 and 400 mg kg-1 nanoparticles respectively. A 400 mg kg-1 dose of SNPs showed increased hyper thyroid and hypolipidimic activity as compared to control and 200 mg kg-1 dose.

RESUMEN Objetivo: Evaluar los indicadores de aterogenicidad en la predicción del síndrome metabólico. Métodos: Se realizó un estudio descriptivo, transversal en adultos de la ciudad de Trujillo en 321 personas de 25 a 65 años que acudieron a cuatro centros de salud, de julio a diciembre de 2019. El síndrome metabólico se determinó mediante criterios de la Asociación Latinoamericana de Diabetes (ALAD) 2018 y del Adult Treatment Panel III (ATP III). Resultados: La presencia de síndrome metabólico según los criterios del ALAD y ATPIII fue de 46,1% y 48,6% respectivamente. Los índices aterogénicos con valores de riesgo más prevalentes correspondieron al Colesterol No HDL 72%; Índice de Castelli 68,2% y el índice TG/HDL en 58,3% de los participantes. Tanto para el criterio ALAD como ATPIII, el índice aterogénico que mostró la mejor predicción fue el TG/HDL seguido del índice de Castelli en el caso del ATP III. Conclusión: El índice de TG/HDL es el indicador con mejor predicción del síndrome metabólico.

Introduction: Low high-density lipoprotein (HDL)-cholesterol is frequent in patients with peripheral artery disease (PAD) and also in type 2 diabetes mellitus (T2DM), the major risk factor for PAD. The transfer of cholesterol from the other lipoproteins to HDL is an important aspect of HDL metabolism and function, and may contribute to atherogenic mechanisms that lead to PAD development. Objective: The aim of this study was to investigate the status of cholesterol transfers in patients with PAD without or with T2DM. Methods: Patients with PAD ( n = 19), with PAD and T2DM (PAD + DM, n = 19), and healthy controls ( n = 20), all paired for age, sex, and BMI were studied. Transfer of both forms of cholesterol, unesterified (UC) and esterified (EC), was performed by incubating plasma with a donor nanoemulsion containing radioactive UC and EC, followed by chemical precipitation and HDL radioactive counting. Results: Low-density lipoprotein (LDL)-cholesterol and triglycerides were similar in the three groups. Compared to controls, HDL-C was lower in PAD + DM ( p < 0.05), but not in PAD. Transfer of UC was lower in PAD + DM than in PAD and controls (4.18 ± 1.17%, 5.13 ± 1.44%, 6.59 ± 1.25%, respectively, p < 0.001). EC transfer tended to be lower in PAD + DM than in controls (2.96 ± 0.60 vs 4.12 ± 0.89%, p = 0.05). Concentrations of cholesteryl ester transfer protein (CETP) and lecithin-cholesterol acyltransferase (LCAT), both involved in HDL metabolism, were not different among the three groups. Conclusion: Deficient cholesterol transfer to HDL may play a role in PAD pathogenesis. Since UC transfer to HDL was lower in PAD + DM compared to PAD alone, it is possible that defective HDL metabolism may contribute to the higher PAD incidence in patients with T2DM.Keywords

Cancer cells undergo drastic metabolic adaptions to cover increased bioenergetic needs, contributing to resistance to therapies. This includes a higher demand for cholesterol, which often coincides with elevated cholesterol uptake from low-density lipoproteins (LDL) and overexpression of the LDL receptor in many cancers. This implies the need for cancer cells to accommodate an increased delivery of LDL along the endocytic pathway to late endosomes/lysosomes (LE/Lys), providing a rapid and effective distribution of LDL-derived cholesterol from LE/Lys to other organelles for cholesterol to foster cancer growth and spread. LDL-cholesterol exported from LE/Lys is facilitated by Niemann–Pick Type C1/2 (NPC1/2) proteins, members of the steroidogenic acute regulatory-related lipid transfer domain (StARD) and oxysterol-binding protein (OSBP) families. In addition, lysosomal membrane proteins, small Rab GTPases as well as scaffolding proteins, including annexin A6 (AnxA6), contribute to regulating cholesterol egress from LE/Lys. Here, we summarize current knowledge that links upregulated activity and expression of cholesterol transporters and related proteins in LE/Lys with cancer growth, progression and treatment outcomes. Several mechanisms on how cellular distribution of LDL-derived cholesterol from LE/Lys influences cancer cell behavior are reviewed, some of those providing opportunities for treatment strategies to reduce cancer progression and anticancer drug resistance.

Niemann-Pick type C disease (NP-C) is a lysosomal storage disorder characterized by cholesterol accumulation caused by loss-of-function mutations in the Npc1 gene. NP-C disease primarily affects the brain, causing neuronal damage and affecting motor coordination. In addition, considerable liver malfunction in NP-C disease is common. Recently, we demonstrated that the depletion of annexin A6 (ANXA6), which is most abundant in the liver and involved in cholesterol transport, ameliorated cholesterol accumulation in Npc1 mutant cells. To evaluate the potential contribution of ANXA6 in the progression of NP-C disease, double-knockout mice (Npc1-/-/Anxa6-/-) were generated and examined for lifespan, neurological and hepatic functions, as well as liver histology and ultrastructure. Strikingly, lack of ANXA6 in NPC1-deficient animals did not prevent the cerebellar degeneration phenotype but further deteriorated their compromised hepatic functions and reduced lifespan. Moreover, livers of Npc1-/-/Anxa6-/- mice contained a significantly elevated number of foam cells congesting the sinusoidal space, a feature commonly associated with inflammation. We hypothesize that ANXA6 deficiency in Npc1-/- mice do not reverse neurological and motor dysfunction and it further worsens overall liver function, exacerbating hepatic failure in NP-C disease.

Introduction In the midst of so many uncertainties that permeate the new coronavirus disease 2019 (COVID-19), the evidence relating the presence of dyslipidemia to disease severity and consequent prognostic implications are still scarce. In May 2020, a retrospective Chinese study investigated the association between changes in cholesterol levels and prognosis in approximately 600 patients with COVID-19, who were paired by age and sex with healthy controls. First, it was observed that low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) and total cholesterol levels were [...]

Obesity may be associated with the onset of mammary tumors in women. In companion animals, these data are still scarce, mainly associating the clinic of the patient with laboratory and histological findings. This study aimed to evaluate the clinical and laboratory aspects of female dogs with mammary neoplasia, investigating whether they are related to obesity. Four groups of spayed or non-spayed female dogs were studied, divided into (G1) female dogs without mammary tumor and normal body condition score (BCS), (G2) female dogs without mammary tumor and obese, (G3) female dogs with mammary tumor and normal BCS and (G4) female dogs with mammary tumor and obese. BCS, canine body mass index (CBMI), blood count, glucose, total cholesterol, triglycerides and cytopathological and histopathological examinations were evaluated. Mixed-breed animals were the most prevalent in this study (67.5%). There was a limitation regarding the use of CBMI related to body proportionality. Considering the 28 tumors evaluated, carcinoma in mixed tumor was the most prevalent malignant histological type, while adenomyoepithelioma was the most prevalent benign histological type. It was possible to conclude that obesity was not related to clinical and laboratory changes in the female dogs affected with mammary neoplasias. In addition, no relationship was noted between BCS and CBMI with the histological type or malignancy of mammary neoplasia, since the malignant histological types were the most prevalent tumors in both the ideal score group and the overweight to obese group. RESUMO: A obesidade pode estar associada ao aparecimento de tumores mamários em mulheres. Em animais de companhia, esse dado ainda é escasso, principalmente associando a clínica da paciente aos achados laboratoriais e histológicos. Este estudo objetivou avaliar os aspectos clínicos e laboratoriais de cadelas com neoplasia mamária, investigando se estão relacionadas à obesidade. Foram estudados quatro grupos de cadelas castradas ou não castradas, divididas em (G1) cadelas sem tumor de mama e Escore de Condição Corporal normal (BCS), (G2) cadelas sem tumor de mama e obesa, (G3) cadelas com tumor de mama e ECC normal e (G4) cadelas com tumor de mama e obesa. Foram avaliados o Escore de Condição Corporal (ECC), Índice de Massa Corporal Canina (IMC), hemograma, glicose, colesterol total, triglicerídeos e exames citopatológicos e histopatológicos. Os animais de raça mista foram os mais prevalentes neste estudo (67,5%). Houve uma limitação quanto ao uso do IMC relacionado à proporcionalidade corporal. Considerando os 28 tumores avaliados, o carcinoma em tumor misto foi o tipo histológico maligno mais prevalente, enquanto o adenomioepitelioma foi o tipo histológico benigno mais prevalente. Foi possível concluir que a obesidade não esteve relacionada a alterações clínicas e laboratoriais nas cadelas acometidas por neoplasias mamárias. Além disso, não foi observada relação entre BCS e CBMI com o tipo histológico ou malignidade das neoplasias mamárias, uma vez que os tipos histológicos malignos foram os tumores mais prevalentes no grupo escore ideal e no grupo com sobrepeso e obesidade.

The objective is to verify if gluten-free (GF) and gluten-containing (G) breads differ in their sodium content and lipid profile. Samples of GF (n = 20) and G (n = 14) sliced white sandwich bread of commercial brands most frequently consumed in Spain were collected. The fatty acid (FA) composition and the contents of sodium, fat, cholesterol and phytosterols were determined. Sodium, fat and cholesterol contents were significantly higher in GF bread. The FA composition also differed, while G breads declared in most instances the use of sunflower oil as fat ingredient and presented a higher polyunsaturated FA percentage; GF breads declared a wide variety of fats and oils as ingredients (coconut, palm, olive, sunflower, etc.) which was reflected in their FA profile. Cholesterol content was higher in GF bread because five samples declared the use of whole egg, while G samples did not include any egg product in their formulas. Phytosterol content was higher in G bread but its variability was greater in GF bread. In conclusion, nutritional quality of GF bread varied depending on the ingredients used and might be lower than that of G bread. However, these differences in composition could be reduced or eliminated through changes in the formulation of GF bread. Moreover, the comparison of the results obtained in our laboratory for fat and salt content with the declared contents on the labels showed a much higher deviation for GF samples and it can be concluded that the quality of the nutritional information declared was lower in GF samples. Electronic supplementary material The online version of this article (10.1007/s11130-020-00828-w) contains supplementary material, which is available to authorized users.

Objectives:There is evidence that the menopausal transition in women is accompanied by changes in themetabolic profile. We evaluated the lipid profile during the perimenopause to postmenopause transition and itsassociation with menopausal status.Methods:This is a retrospective observational study of laboratory studies from women presenting to thegynecology unit of Hospital Quiro ́ n Salud, Madrid (2007-2018) with irregular menstruation, amenorrhea ormenopausal symptoms. Inclusion criteria were one or more blood samples with determinations of fasting glucoseand lipids (total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol [LDL-c], high-density lipoprotein cholesterol[HDL-c] and triglycerides [TGs]) from women with a menopause diagnosis recorded in the hospital database. Thedeterminations were classified as perimenopausal or postmenopausal based on the date of last menstruation.Results:In total, 13,517 laboratory studies (3,073 perimenopausal and 10,444 postmenopausal) from 275 womenwere analyzed. Total cholesterol, LDL-c, and TG levels were significantly higher in postmenopausal women than inperimenopausal women, whereas HDL-c levels were significantly lower (P

Semen freezability is positive correlated with the cholesterol content in the sperm cell. Freeze-thawing mainly cause temperature chock and change on media osmolarity, which can modify plasma membrane lipids content and sperm conformation, resulting in decreased fertility. Therefore, the aim of this study is to investigate the effect of adding cholesterol-loaded cyclodextrin (CLC) to the cryopreservation process of ram semen with low freezability. For that, two experiments were performed using 5 ejaculates of 6 rams, totalizing 30 samples. For experiment 1 the following treatments were tested: in natura (IN), Tris solution (CON), CLC + Tris solution (CLC), and pure methyl-β-cyclodextrin + Tris solution (MCD). For experiment 2 treatments CON and CLC were tested in samples subdivided into three freezability classes: high (n = 10), intermediate (n = 10) and low (n = 10). Freezability classes were based on the variation of sperm motility between IN and CON groups from the first experiment. Sample analyzes included sperm motility, sperm morphology, plasma and acrosome membrane integrity, mitochondrial membrane potential, reactive oxygen species content, lipid peroxidation, and fluidity of plasma membrane. Results showed that CLC treatment was more efficient in maintaining sperm motility, integrity of plasma membrane, integrity of acrosome, and mitochondria membrane potential. In addition, CLC treatment in the groups with low and intermediate freezability showed improvement on progressive motility and percentage of rapid cells. In contrast, no difference was noted between CLC and CON treatments in the high freezability group. Therefore, the addition of CLC to semen extender improved sperm cryopreservation, especially in rams with low freezability.

Objectives Lipid profiles appear to be altered in SLE patients due to disease activity and inflammation. Cholesterol efflux capacity (CEC) is the ability of high-density lipoprotein cholesterol to accept cholesterol from macrophages. CEC has been linked to cardiovascular events in the general population and is impaired in SLE patients. The aim of this study was to establish whether CEC is related to subclinical carotid atherosclerosis in SLE patients. Methods The present report is of a cross-sectional study that encompassed 418 individuals: 195 SLE patients and 223 controls. CEC, using an in vitro assay, and lipoprotein serum concentrations were assessed in patients and controls. Carotid intima-media thickness and carotid plaques were evaluated in SLE patients. A multivariable analysis was performed to study the relationship of CEC to SLE-related data, lipid profile and subclinical carotid atherosclerosis. Results CEC was downregulated in SLE patients [8.1 (4.2) % vs 16.9 (10.4) %, P = 0.004). This occurred independently of traditional cardiovascular risk factors, statin use or other variations in the lipid profile related to the disease. Traditional cardiovascular risk factors, both in patients and controls, and SLE-related data such as activity, severity or damage were not associated with CEC. After multivariable regression analysis including lipid profile–related molecules, CEC was inversely and independently associated with the presence of carotid plaques in SLE patients [odds ratio 0.87 (95% CI: 0.78, 0.97), P = 0.014]. Conclusion CEC is impaired in SLE patients independently of other inflammation-related lipid profile modifications that occur during the disease. CEC is associated with carotid plaques in SLE patients.

Melatonin is the main biochronologic molecular mediator of circadian rhythm and sleep. It is also a powerful antioxidant and has roles in other physiologic pathways. Melatonin deficiency is associated with metabolic derangements including glucose and cholesterol dysregulation, hypertension, disordered sleep and even cancer, likely due to altered immunity. Diabetic nephropathy (DN) is a key microvascular complication of both type 1 and 2 diabetes. DN is the end result of a complex combination of metabolic, haemodynamic, oxidative and inflammatory factors. Interestingly, these same factors have been linked to melatonin deficiency. This report will collate in a clinician-oriented fashion the mechanistic link between melatonin deficiency and factors contributing to DN.

Apples are among the world’s most consumed fruits. However, while the impact of whole-apple intake on cardiovascular disease (CVD) remains unknown. This narrative review summarizes a novel integrated view of whole-apple intake, CVD risk association (through observational studies; OSs), and the effects on CVD risk factors (randomized trials; RTs). In 8 OSs, whole-apple intake was associated with a reduced risk of CVD mortality, ischemic heart disease mortality, stroke mortality, all-cause mortality, and severe abdominal aortic calcification, as well as with lower C-reactive protein (CRP) concentrations. In 8 RTs, whole-apple consumption reduced total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol, systolic blood pressure, pulse pressure, and plasma inflammatory cytokines, and noticeably reduced CRP, whereas it increased high-density lipoprotein cholesterol (HDLc) and improved endothelial function. Thus, consuming between 100 and 150 g/day of whole apples is associated with a lower CVD risk and decreases in blood pressure, pulse pressure, total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol, and inflammation status as well as with increases in HDLc and endothelial function. These results, support the regular consumption of whole apples as an aid in the prevention of CVD. The AppleCOR Project (Subproject AGL2016-76943-C2-2-R and Subproject AGL2016-76943-C2-1-R) has been possible with the support of Ministerio de Economía, Indústria y Competitividad, the Agencia Estatal de Investigación (AEI) and the European Regional Development Fund (ERDF); NFOC-Salut group is a consolidated research group of Generalitat de Catalunya, Spain (2017 SGR 522).

Familial Hypercholesterolemia (FH) is an inherited disorder of lipid metabolism, characterized by increased low density lipoprotein cholesterol (LDLc) levels. The main purpose of the current work was to explore alternative classification methods to traditional clinical criteria for FH diagnosis, based on several biochemical and biological indicators. Logistic regression (LR), decision tree (DT), random forest (RF) and naive Bayes (NB) algorithms were developed for this purpose, and thresholds were optimized by maximization of Youden index (YI). All models presented similar accuracy (Acc), specificity (Spec) and positive predictive values (PPV). Sensitivity (Sens) and G-mean values were significantly higher in LR and RF models, compared to the DT. When compared to Simon Broome (SB) biochemical criteria for FH diagnosis, all models presented significantly higher Acc, Spec and G-mean values (p NPV, p Sens values. Adjustment of the cut-off point by maximizing YI significantly increased Sens values, with no significant loss in Acc. The obtained results suggest such classification algorithms can be a viable alternative to be used as a widespread screening method. An online application has been developed to assess the performance of the LR model in a wider population.

Introducción: el síndrome coronario agudo (SCA) se define como la presentación aguda de la cardiopatía isquémica y constituye una entidad altamente prevalente. Tiene lugar cuando se presenta un desequilibrio entre el flujo sanguíneo que llega por las arterias coronarias y los requerimientos de oxígeno del miocardio. La causa más frecuente es la arteriosclerosis, desempeñando un papel primordial en la génesis y desarrollo de la misma, el colesterol unido a lipoproteínas de baja densidad (c-LDL). Numerosos estudios han mostrado una relación lineal entre las cifras elevadas de c-LDL y el desarrollo de cardiopatía isquémica, no habiéndose determinado ningún valor de c-LDL por debajo del cual el riesgo aumente. Recientemente las Guías de Práctica Clínica sobre el manejo de la dislipemia publicadas en 2019 por la Sociedad Europea de Cardiología (ESC), recomiendan un descenso en las cifras de c-LDL

Fil: Azzaz, Fodil. Institut national de la santé et de la recherche médicale; Francia Fil: Azzaz, Fodil. Aix-Marseille Université; Francia Fil: Chahinian, Henri. Institut national de la santé et de la recherche médicale; Francia Fil: Chahinian, Henri. Aix-Marseille Université; Francia Fil: Yahi, Nouara. Institut national de la santé et de la recherche médicale; Francia Fil: Yahi, Nouara. Aix-Marseille Université; Francia. Fil: Di Scala, Coralie. University of Helsinki. Neuroscience Center; Finlandia Fil: Baier, Carlos J. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Laboratorio de Toxicología; Argentina Fil: Baier, Carlos J. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Barrantes, Francisco José. Pontificia Universidad Católica Argentina. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Laboratorio de Neurobiología Molecular; Argentina Fil: Barrantes, Francisco José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Abstract: Cholesterol binding to proteins is a dynamic process that involves a combination of geometric, biochemical, and biophysical principles. These properties can be viewed as basic rules which govern any kind of molecular interactions. Nevertheless, cholesterol displays unique features that have made cholesterol recognition motifs in proteins remarkably convergent upon biological evolution. Consequently, simple algorithms based on consensus amino acid sequences (e.g., CARC and CRAC) have been developed to predict the presence of such cholesterol-binding motifs in proteins. The intrinsic weakness of this approach is that CARC and CRAC are both based on a linear (1D) sequence motif, whereas cholesterol-binding sites have a three-dimensional (3D) structure. This issue is discussed in detail in this chapter. We then analyze the performance of these algorithms in the light of structural data obtained by X-ray diffraction and cryoelectron microscopy of membrane proteins, and structure-function studies based on site-directed mutagenesis. Our study not only confirms the overall reliability of CARC and CRAC algorithms but also reveals new clues that could bring forth new ideas on cholesterol recognition motifs in the 3D structure of transmembrane proteins.

Fil: Barrantes, Francisco José. Pontificia Universidad Católica Argentina. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina Fil: Barrantes, Francisco José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Abstract: In attempting to interrogate the structural and functional properties of cell membranes with minimal invasiveness, fluorescence microscopy remains the gold-standard technique. Fluorescence is a highly versatile spectroscopic property covering a wide range of the spectrum, with inherent advantages in both the spatial and time domains. Fluorescent probes have been key elements in the constellation of tools used to push the limits of spatial resolution down to single-molecule localization, optimize visualization of delicate biological structures in the living cell, and enable the tracking of molecular motions with high temporal precision. Cholesterol is an essential component of eukaryotic membranes; it interacts with other lipids and proteins and has a modulatory function on many membrane-resident hormone and neurotransmitter receptors. Fluorescent sensors have played an important role in revealing different biological and physicochemical properties of cholesterol. In cell biology applications, fluorescent cholesterol sensors helped determine uptake mechanisms and topography in the plasma membrane and follow the intracellular trafficking of cholesterol. Biophysical investigations have resorted to fluorescent probes to establish orientation, rotational, and translational motions in the membrane, order/disorder, and physical changes brought about by the presence of the sterol in the phospholipid bilayer. The ample spectral range and varying specificities of direct and indirect probes designed to visualize cholesterol enable the experimentalist to study a wide array of cholesterol properties and/or learn about the influence of the sterol on other lipids, membrane proteins, and transient supramolecular assemblies like membrane-resident lipid domains.

BACKGROUND: Cardio-vascular disease and depression are thought to be closely related, due to shared risk factors. The aim of the study was to determine the association between cardio-vascular risk (CVR) factors and depressive status in a population (55-75 years) with metabolic syndrome (MetS) from the PREDIMED-Plus trial. METHODS AND FINDINGS: Participants were classified into three groups of CVR according to the Framingham-based REGICOR function: (1) low (LR), (2) medium (MR) or (3) high/very high (HR). The Beck Depression Inventory-II (BDI-II) was used to assess depressive symptoms at baseline and after 2 years. The association between CVR and depressive status at baseline (n = 6545), and their changes after 2 years (n = 4566) were evaluated through multivariable regression models (logistic and linear models). HR women showed higher odds of depressive status than LR [OR (95% CI) = 1.78 (1.26, 2.50)]. MR and HR participants with total cholesterol

Acknowledgements The authors are thankful to the Faculty of Pharmacy, Integral University for providing all the necessary facilities related to the present work (Manuscript Communication Number: IU/R &D/2018MCN000307)., Background: For several years, many attempts have been made for the improvement of liposomal stability. In 1986, Payne et al, introduced the concept of Pro-liposome for liposome preparation in order to avoid physicochemical instability encountered in some liposome suspensions such as aggregation, fusion, hydrolysis, and/or oxidation. Objective: The objective of this review is to focus on different aspects related to Proliposomes, their method of preparation, characterization techniques and pointing out its scope in drug delivery systems. Methods: Proliposomes are a new form of drug delivery systems. They are dry, free-flowing granular products composed of drug and phospholipid which, upon addition of water, disperse to form a multi-lamellar liposomal suspension. Results and Discussion: These Proliposomes are nearly as good as or perhaps better than conventional liposomes. In the present review attempt has been made to briefly explain the concept of Proliposomes with a focus on its components, preparation, characterizations and their field of application. Conclusion: Extensive survey of literatures and collected data suggests that Pro-liposomes are promising drug carriers for the future., Antecedentes: durante varios años, se han realizado muchos intentos para mejorar la estabilidad liposomal. En 1986, Payne et al, introdujeron el concepto de pro-liposoma para la preparación de liposoma con el fin de evitar la inestabilidad fisicoquímica encontrada en algunas suspensiones de liposoma tales como agregación, fusión, hidrólisis, y/o oxidación. Objetivo: el objetivo de esta revisión es centrarse en diferentes aspectos relacionados con los Proliposomas, su método de preparación, técnicas de caracterización, asi como señalar su alcance en los sistemas de administración de fármacos. Métodos: los Proliposomas son una nueva forma de sistemas de administración de fármacos. Son productos granulares secos y de flujo libre compuestos por fármacos y fosfolípidos que, al añaderse el agua, se dispersan para formar una suspensión liposomal multilamelar. Resultados y discusión: estos Proliposomas son casi tan buenos o quizás mejores que los liposomas convencionales. En la presente revisión se explica brevemente el concepto de Proliposomas con un enfoque en sus componentes, preparación, caracterizaciones y su campo de aplicación. Conclusión: una extensa encuesta de literaturas y datos recogidos sugiere que los pro-liposomas son portadores de fármacos prometedores para el futuro.

Fil: Barrantes, Francisco José. Pontificia Universidad Católica Argentina. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina Fil: Barrantes, Francisco José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Abstract: The role of cholesterol in severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) and other coronavirus-host cell interactions is currently being discussed in the context of two main scenarios: i) the presence of the neutral lipid in cholesterol-rich lipid domains involved in different steps of the viral infection and ii) the alteration of metabolic pathways by the virus over the course of infection. Cholesterol-enriched lipid domains have been reported to occur in the lipid envelope membrane of the virus, in the host-cell plasma membrane, as well as in endosomal and other intracellular membrane cellular compartments. These membrane subdomains, whose chemical and physical properties distinguish them from the bulk lipid bilayer, have been purported to participate in diverse phenomena, from virus-host cell fusion to intracellular trafficking and exit of the virions from the infected cell. SARS-CoV-2 recruits many key proteins that participate under physiological conditions in cholesterol and lipid metabolism in general. This review analyses the status of cholesterol and lipidome proteins in SARS-CoV-2 infection and the new horizons they open for therapeutic intervention.

Orientador: Admar Costa de Oliveira Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: O resumo podera ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document Mestrado Mestre em Ciência da Nutrição

Orientador : Luis Guilhermo Bravo Navarrete Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica Mestrado

The use of drugs derived from benzothiadiazine, which is a bicyclic heterocyclic benzene derivative, has become a widespread treatment for diseases such as hypertension (treated with diuretics such as bendroflumethiazide or chlorothiazide), low blood sugar (treated with non-diuretic diazoxide) or the human immunodeficiency virus, among others. In this work we have investigated the interactions of benzothiadiazine with the basic components of cell membranes and solvents such as phospholipids, cholesterol, ions and water. The analysis of the mutual microscopic interactions is of central importance to elucidate the local structure of benzothiadiazine as well as the mechanisms responsible for the access of benzothiadiazine to the interior of the cell. We have performed molecular dynamics simulations of benzothiadiazine embedded in three different model zwitterionic bilayer membranes made by dimyristoilphosphatidylcholine, dioleoylphosphatidylcholine, 1,2- dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoserine and cholesterol inside aqueous sodium-chloride solution in order to systematically examine microscopic interactions of benzothiadiazine with the cell membrane at liquid-crystalline phase conditions. From data obtained through radial distribution functions, hydrogen-bonding lengths and potentials of mean force based on reversible work calculations, we have observed that benzothiadiazine has a strong affinity to stay at the cell membrane interface although it can be fully solvated by water in short periods of time. Furthermore, benzothiadiazine is able to bind lipids and cholesterol chains by means of single and double hydrogen-bonds of different characteristic lengths., 10 pages, 8 figures, 3 tables

Orientador: Licio Augusto Velloso Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: A oxidação da lipoproteína de baixa densidade (LDL) desempenha um papel importante dentro do processo de aterogênese, e a suplementação terapêutica de vitamina E (VE) toma as partículas de LDL mais resistentes à oxidação. Partículas de LDL oxidadas (Ox-LDL) são imunogênicas, levando à formação de anticorpos específicos. Usando uma modificação da técnica de ELISA, nós analisamos a modulação dos títulos de anticorpos contra um epitopo de Ox-LDL em hamsters alimentados com ração padrão, acrescida de 2% de colesterol e 10% de manteiga, com e sem adição de VE 0,2%. Os grupos alimentados com dieta hipercolesterolêmica apresentaram um aumento de três vezes no colesterol sérico (p

Orientador: Eliana Cotta de Faria Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: A aterosclerose é a principal causa de morte na civilização ocidental. É uma doença progressiva e insidiosa que geralmente começa na infancia e tem manifestações clínicas na maturidade, principalmente através da Doença Arterial Coronariana (DAC). No Brasil, observa-se uma tendência de aumento da mortalidade por DAC, desde 1930, porém, no Município de São Paulo, detectou-se, desde a década de 70, um declínio na mortalidade geral por DAC no sexo masculino de 13,83% e um aumento com relação ao sexo feminino de 1,93%. Por outro lado, a prevalência da DAC aumentou tanto no sexo masculino, em 5,70%, quanto no feminino, em 13,74%. Em outros países, esse comportamento ascendente não tem sido relatado. Nos EUA, nas últimas duas décadas, houve queda de 45% na incidência de DAC, mas apesar disso essa doença ainda permanece como a principal causa de morte naquele país. Por inúmeras razões, as mulheres sempre foram consideradas protegidas contra a DAC e excluídas por muitos anos dos estudos epidemiológicos. Atualmente, com as crescentes taxas de incidência e de mortalidade no sexo feminino e também por apresentarem pior prognóstico durante o infarto e nos procedimentos de revascularização pós-infarto, maior atenção vem sendo dada à doença. O Brasil é um dos países com menor diferença de incidência de DAC entre os sexos. Neste estudo determinamos as prevalências de alguns fatores de risco para a DAC, tais como aumento do colesterol sanguíneo, hipertensão arterial, tabagismo, diabetes mellitus, obesidade e sedentarismo, comparando-os entre os sexos, em diferentes faixas etárias e diferentes índices de massa corpórea (IMC). Avaliamos também a influência destes sobre o colesterol sangüíneo total. Para tal, 873 adultos voluntários preencheram um questionário contendo infomações sobre dados antropométricos e a presença de fatores de risco, além da medida do colesterol total sangüíneo pelo método de reflectância, utilizando-se o Reflotron (Merck). Analisou-se os resultados através do programa SAS, na população total e em sub-grupos de idade e de índice de massa corpórea. As mulheres apresentaram prevalências de fatores de risco iguais ou menores com relação aos homens. Apresentaram menor prevalência do que os homens de colesterol sangüíneo total, abaixo de 200 mg/dL. Essa diferença localizou-se no grupo etário igual ou superior aos 55 anos. Para a hipertensão arterial, os dois sub-grupos de idades, mostraram maiores prevalências e a diferença foi duas vezes maior nas mais jovens quando comparadas aos homens mais jovens. Com relação à obesidade, a prevalência na mulher não foi diferente da encontrada no homem em idade mais alta. Somente na mulher a freqüência aumentou com a idade. O diabetes mellitus não ocorreu em homens jovens nessa população e sim em mulheres jovens. Nos grupos de maior faixa etária não houve diferença entre os sexos. Com relação ao sedentarismo não se observaram diferenças entre os sexos ou entre os grupos etários. O fumo foi fator de risco de maior prevalência masculina; porém, não houve diferença significativa entre os dois sub-grupos etários mais jovens. O sexo, a idade, o IMC, a hipertensão e o sedentarismo relacionaram-se com o colesterol sangüíneo total. O sexo mostrou interação significativa com a idade e com o IMC, nas análises logísticas. As mulheres apresentaram maior chànce com relação aos homens de serem hipercolesterolêmicas com o aumento da idade. A chance em indivíduos com sobrepeso e obesidade foi 23% maior do que naqueles com IMC nos limites de referência. Após os 50 anos, as mulheres apresentam duas vezes mais chance de terem colesterol > 240mg/dL do que os homens, que apresentam chance 20% maior, abaixo de 50 anos. Em indivíduos com sobrepeso ou obesidade, também após os 50 anos, a chance de hipercolesterolemia caiu para 1,02 com relação a 1,8 na faixa etária abaixo de 50 anos, ou seja, o impacto do sobrepeso muda no grupo jovem. Os resultados obtidos nessa população indicam que a menor diferença entre os sexos na incidência de DAC no Brasil pode ser explicada, pelo menos em parte, pela conglomeração de fatores de risco mais ou igualmente prevalentes na mulher. Além disso, as altas prevalências de fatores de risco nessa população apontam para a necessidade da implantação de medidas de controle desses para a prevenção da DAC em nosso país Abstract: This study aimed at comparing the prevalence of various risk factors for coronary heart disease (CHD) between the sexes in a Brazilian population. Eight hundred and seventy-three adult volunteers had their total blood cholesterol (CHOL) measured and filled in a questionnaire with information on the presence of the following risk factors for CHD: diabetes mellitus, hypertension, obesity, sedentary lifestyle and cigarette smoking. The data were ana1yzed for the total population and according to sub-groups of age, sex and body mass index (BMI): 45 versus < 45 years old (y) for men, and 5 versus

Orientador : Erly Catarina de Moura Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Este estudo epidemiológico foi conduzido com o objetivo de identificar os fatores de risco da hipercolesterolemia em escolares. Um estudo caso-controle foi aninhado em inquérito de base populacional entre alunos de 7 a 10 anos de idade no ensino fundamental (1a a 4a séries) nas escolas estaduais de Campinas, Estado de São Paulo. Um total de 86 casos e 86 controles emparelhados por sexo e trimestre de idade foi selecionado aleatoriamente a partir das 800 crianças amostradas. Os casos foram definidos e subamostrados na condição de ter colesterol sangüíneo > 200 mg/dL e os controles foram condicionados à faixa de 140 a 170 mg/dL. Data de nascimento, sexo e história familiar de doenças cardiovasculares foram recordados; pressão arterial, sistólica e diastólica, foi medida; peso e altura foram obtidos para o cálculo do índice de massa corporal e sangue foi coletado para a dosagem do nível de colesterol. Hipercolesterolemia foi considerada presente quando a criança apresentava colesterol > 200 mg/dL e ausente quando a criança apresentava colesterol entre 140 a 170 mg/dL. Os dados foram analisados por correlação bivariada usando o teste f para as variáveis quantitativas e o qui-quadrado para a história familiar de doenças cardiovasculares. O odds-ratio foi usado para estimar o risco de hipercolesterolemia. A média do colesterol encontrada foi de 215 mg/dL nos casos e de 154 mg/dL nos controles. A média da pressão arterial sistólica foi de 107 mmHg nos casos e de 106 mmHg nos controles e da diastólica foi de 67 mmHg nos casos e 68 mmHg nos controles. O índice de massa corporal (Kg/m2) apresentou média de 18,2 nos casos e de 17,1 nos controles. A análise bivariada mostrou associação entre hipercolesterolemia e índice de massa corporal (p=0,048). O odds ratio apontou a obesidade como fator de risco para a hipercolesterolemia (OR= 2,17; IC= 1,05 a 4,45) Abstract: This epidemiologic study was undertaken aiming to identify the risk factors of hypercholesterolemia among Brazilian schoolchildren. A case-control study analysis was nested into a population based survey of school children aged 7 to 10 at Campinas City, São Paulo - Brazil. A total of 86 cases and 86 matched by sex and age ± 3 months controls were randomly selected from 800 population sampled elementary school students. Cases were defined and sub-sampled conditioned to having blood cholesterol > 200 mg/dL and controls were set to be in the 140 to 170 mg/dL range. Birth date, gender and family history of cardiovascular diseases were recorded, systolic and diastolic blood pressure were measured, weight and height were obtained for body mass index determination, and blood sample was collected for cholesterol dosage. Hypercholesterolemia was considered when the child presented 200mg/dL or more and cholesterol was considered normal between 140 and 170mg/dL. The data were analysed by bivariated cross-tabulation using t test for quantitative variables and chi-square for family history of cardiovascular diseases. The odds ratio was used to estimate the risk of hypercholesterolemia. The data showed, in average, cholesterol of 215 mg/dL for cases and 154 mg/dL for contrails. The mean of systolic blood pressure was 107 mmHg for cases and 106 mmHg for contrails. The mean of diastolic blood pressure was 67 mmHg for cases and 68 mmHg for contrails. The body mass index presented mean of 18,2 Kg/m2 in the case-group and 17,1 Kg/m2 in the contrails. The bivariated analysis showed association between hypercholesterolemia and body mass index (p=0,048). The odds ratio pointed to obesity as the risk factor in this study population (OR= 2,17; IC= 1,05 to 4,45) Mestrado Saúde Coletiva Mestre em Saúde Coletiva

Orientador : Maria Antonia M. Galeazzi Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: O resumo podera ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document Mestrado Mestre em Alimentos e Nutrição

Orientador: Rahoma Sadik Mohamed. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica Resumo: A busca de produtos com baixos teores de gordura vem crescendo entre os consumidores. Com isso, o consumo de leite desnatado tem crescido, com um subseqüente aumento na produção da gordura do leite, sub-produto do processo de produção do leite desnatado. Ao mesmo tempo a demanda por gordura do leite não tem aumentado, ao contrário, tem diminuído.Com isso, tem-se gerado um excedente de óleo de manteiga a cada ano. Uma maneira de se amenizar o problema é a criação de novas aplicações para a gordura do leite. Fracionando-se o óleo de manteiga, pode-se obter frações do óleo de propriedades químicas e físicas distintas. Estas frações poderiam vir a ser utilizadas como matéria prima em outras indústrias. A remoção do colesterol da gordura do leite também surge como uma solução no sentido de se tomar os produtos da gordura do leite mais atraentes para o consumo o objetivo desta tese é o levantamento de dados que permitam compreender e avaliar a potencialidade da extração supercritica como uma tecnologia viável para a remoção do colesterol e o fracionamento dos triglicerídeos no óleo de manteiga. Neste trabalho, foram determinadas as solubilidades do colesterol e do óleo de manteiga em 'CO IND. 2¿ supercritico e as seletividades do colesterol em relação aos triglicerídeos do óleo de manteiga, nas temperaturas de 40, 55 e 70°C, e pressões variando de 100 a 360 atm. Os dados foram coletados utilizando um aparelho experimental de extração a altas pressões que permite um controle independente da temperatura e pressão. A seguir, foram realizados fracionamentos do óleo de manteiga onde foram determinadas as composições de colesterol e dos triglicerídeos nas frações coletadas. Acoplando-se ao processo de extração supercrítica um estágio de adsorção na alumina, foi possível simultaneamente fracionar o óleo de manteiga e remover 97% do colesterol. O processo de adsorção com a alumina não causou alteração nas composições dos triglicerídeos nas frações obtidas. Por fim foi desenvolvido um modelo termodinâmico que descreve o equilíbrio de fases envolvido no fracionamento do óleo de manteiga. Para a aplicação do modelo, foi utilizado um procedimento que resultou na representação dos mais de 1300 componentes do óleo de manteiga, por somente 14 famílias de triglicerídeos, cujas propriedades críticas foram estimadas de dados experimentais e correlações disponíveis na literatura. O modelo termodinâmico empregou a equação volumétrica de estado de Peng-Robinson. Utilizando este modelo, foi possível correlacionardados da literatura de distribuição das composições dos triglicerídeos na fase supercrítica em equilíbrio com a fase líquida do sistema óleo de manteiga / 'CO IND.2¿. A seguir, utilizou-se o modelo para prever as frações molares dos triglicerídeos nos experimentos realizados neste trabalho. Com exceção dos triglicerídeos de alto peso molecular o modelo previu de maneira satisfatória as frações molares dos triglicerídeos na fase supercritica. Espera-se que este trabalho possa contribuir no fornecimento de subsídios que permitam o desenvolvimento de processos para a remoção do colesterol e fracionamento do óleo de manteiga com fluidos supercríticos Abstract: Growing consumer search for low fat food has led to an increased demand for skim milk and subsequent surplus of butter, a by-product in skim milk production. At the same time butter has been loosing markets for low cholesterol, low fat products such as margerine. One way to solve this problem is form new products from milk fat. With the fractionation of the butter oil , it is possible to produce milk fat with unique and specific physical and chemical properties. These fraction can be used to manufacture a more spready butter at the refrigerator temperature or more stable butter at room temperature for the bakery industry. Cholesterol removal makes these products still more atractive to consumers. The objective of this thesis is to obtain information that permit the understanding and evaluation of the potential of supercritical extraction as a viable technology for the removal of cholesterol and fractionation of triglycerides in butter oil. In this work, we report on the solubilities of cholesterol and butter oil in supercritical 'CO IND. 2¿ and the selectivities of cholesterol in relation to triglycerides in butter oil, at 40, 55 and 70°C, and pressures ranging from 100 to 360 bar. The solubility data was obtained using an experimental apparatus for extraction at high pressures that permits the independent control of temperature and pressure. The compositions of cholesterol and triglycerides in the fraction collected with varying accumulated 'CO IND.2¿ volume were also determined. Due to the low selectivity of cholesterol in relation to triglycerides in butter oil with the simple extraction using supercritical 'CO IND.2¿, an adsorption stage utilizing alumina was coupled to this process. With this combined supercritical extraction / adsorption on alumina process it was possible to simultaneously fractionate the butter oil and remove 97% of the cholesterol. The adsorption process with alumina did not cause alteration in the compositions of triglycerides in the fraction obtained. Finely, a thermodynamic model that describes the phase equilibria involved in the fractionation of the butter oil was developed. To apply this model, a procedure that represents the more than 1300 triglycerides of the butter oil, by only 14 families, with properties estirnated using experimental data and correlations available in the literature, was implemented. The thermodynamic model employed the Peng-Robinson volumetric equation of state. Using this model, it was possible to correlate literature data for triglyceride composition in the supercritical phase tha is in equilibrium with the liquid phase of the system butter oil 'CO IND.2. The adjusted model was subsequently used to predict the mole fraction of triglycerides in the oil fraction extracted with experiments realized in this work. With the exception of triglycerides of higher molecular weigh, the model predicts the mole fraction of the triglycerides in the supercritical phase in a satisfactory manner. It is hoped that this work may contribute to the development of large scale processes for the removal of cholesterol and fractionation of butter oil with supercritical fIuids Mestrado Engenharia de Processos Mestre em Engenharia Química

Orientador: Theo Guenter Kieckbusch Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Existem fatores econômicos, regulamentares, mercadológicos, de estilo de vida, nutricionais e dietéticos para justificar a intensidade das pesquisas dedicadas 'a formulação de produtos isentos de colesterol ou ao desenvolvimento de tecnologias que reduzam o teor de colesterol nos alimentos. Este trabalho contempla o desenvolvimento de processos baseados na utilização de "quilaja" - extratos de grau alimentício de saponinas de Quillaja saponaria Molina. São estudadas duas alternativas: 1) o processo líquido-líquido (LL), envolvendo o contato do óleo de manteiga com uma solução aquosa de quilaja, e 2) o processo sólido-líquido-líquido (SLL), em que ao meio bifásico resultante do processo LL é adicionada a terra diatomácea; em ambos os casos, a etapa final é a separação e recuperação, por centrifugação, do óleo com teor reduzido de colesterol. A primeira etapa deste trabalho teve caráter tecnológico. Extratos de quilaja em pó e óleo de manteiga comercialmente disponíveis foram utilizados para avaliar os efeitos de variáveis nos níveis de remoção de colesterol obtidos do processo SLL; também foram comparados os processos LL e SLL. No processo SLL observou-se que: 1) ocorre uma distribuição de colesterol entre todas as três fases (oleosa, aquosa e sólida), resultando uma fase oleosa com teor de colesterol reduzido relativamente ao óleo de manteiga inicial, e 2) níveis crescentes de remoção de colesterol foram obtidos com a diminuição do pH e com o aumento tanto da concentração da solução de quilaja quanto da quantidade de terra diatomácea. As curvas de distribuição de colesterol no equilíbrio entre as fases resultantes dos processos LL e SLL indicaram que o segundo processo é mais efetivo. Observou-se que a procedência da quilaja tem importante impacto nos níveis de remoção de colesterol, e que produtos de fontes comerciais distintas apresentam diferenças substancias na sua composição química. Na segunda etapa, foram utilizadas soluções de colesterol em decano como substitutivos do óleo de manteiga e um extrato de saponinas mais purificado como sistema bifásico modelo. O objetivo foi definir a concentração de micela crítica (CMC) da solução aquosa de quilaja e a distribuição de colesterol no sistema bifásico modelo, verificando-se o efeito das variáveis no processo de formação de micelas e na remoção de colesterol. Também, buscou-se obter evidências do envolvimento de micelas na separação de colesterol. De maneira geral, a formação de micelas foi favorecida (redução da CMC) com a redução do pH e da temperatura, e com a adição de cloreto de sódio. No sistema bifásico modelo, as análises indicaram que o colesterol removido da fase decano se encontrava efetivamente solubilizado no seio da fase aquosa em concentrações de até quase mil vezes a sua solubilidade aparente em água pura. De maneira geral, a solubilização de colesterol na fase aquosa foi aumentada com o aumento da concentração de quilaja em solução, redução da temperatura e adição de cio reto de sódio; o efeito do pH depende do nível de temperatura empregado. Como regra geral, a concentração fixa de surfatante, condições que favorecem a formação de micelas (reduzindo a CMC) também favorecem a solubilização de solutos em soluções aquosas micelares. Houve coincidência nas tendências de redução da CMC e de aumento da solubilização de colesterol na fase aquosa com a variação de temperatura, pH e adição de sal em algumas condições experimentais enquanto que, em outras, tendências opostas ou conflitantes foram observadas. Em um experimento específico, observou-se que não ocorreu redução no teor de colesterol na fase decano em contato com soluções de quilaja abaixo da CMC. Na ausência de evidências diretas e considerando os resultados obtidos, a hipótese de que a solubilização em micelas seja um dos mecanismos envolvidos na separação de colesterol não pode ser rejeitada. Por outro lado, devem também ser consideradas alternativas de solubilização associadas as outras estruturas coloidais (cristais líquidos) que poderiam ser formadas em soluções aquosas pelos compostos anfifílicos dos extratos de qui/aia. Além do desenvolvimento técnico-científico, os resultados poderão colaborar para o desenvolvimento econômico através da produção de gordura de leite sem colesterol, abrindo a possibilidade de formulação de uma variada gama de produtos lácteos e não-lácteos com baixos teores ou isentos de colesterol, atraentes a segmentos específicos do mercado consumidor Abstract: There are economic, regulatory, marketing, lifestyle, nutritional and dietary factors to justify the intensive research devoted to the formulation of cholesterol-free products or to the development of technologies to reduce cholesterol content in foods. The current work considers the development of processes based on the use of "quillaja" - food grade extracts of saponins from Quillaja saponaria Molina. Two alternatives are studied: 1) the liquid-liquid (LL) process, involving the contact of butter oil with an aqueous quillaja solution, and 2) the solid-liquid-liquid (SLL) process, where diatomaceous earth is added to the two-phase medium resulting from the LL process; in both cases, the final step is the separation and recovery of the cholesterol-reduced oil by centrifugation. The first part of the current work had a technological character. Commercially available powdered quillaja extracts and butter oil were used to determine the effects of variables on the levels of cholesterol removal obtained by the SLL process; also, the LL and SLL processes were compared. It was observed that in the SLL process: 1) there is a distribution of cholesterol among ali three phases (oil, aqueous and solid), resulting in an oil phase with reduced cholesterol content relative to theoriginal butteroil, and 2) increased levels of cholesterol removal were obtained by reducing the pH and by increasing the concentration of quillaja solution as well as the amount of diatomaceous earth. The equilibrium distribution curves of cholesterol among phases resulting from the LL and SLL processes indicated that the second process is more effective. It was observed that the source of quillaja has an important impact on the levels of cholesterol removal, and that products from distinct commercial sources exhibit substantial differences in their chemical composition. In the second part, a more purified quillaja extract and cholesterol solutions in decane as replacers for the butter oil were used as a two-phase model system. The objective was to define the critical micelle concentration (CMC) of the aqueous quillaja solution and the distribution of cholesterol in the two-phase model system, to verify the effect of variables in micelle formation process and cholesterol removal. Also, evidences of the involvement of micelles in cholesterol separation were sought. In general, micelle formation was favoured (Iowering the CMC) by lowering pH and temperature and by adding sodium chloride. In the two.phase model system, analyses indicated that cholesterol removed from the decane phase was effectively solubilized in the bulk of the aqueous phase, in concentrations up to nearly one thousand times its apparent solubility in pure water. In general, cholesterol solubilization in the aqueous phase was promoted by increasing the concentration of quillaja solution, reducing the temperature and by adding sodium chloride; the pH effect depends upon the level of temperature used. As a general rule, at fixed surfactant concentration, conditíons that favour micelle formation (foweríng CMC) also promote solubilization of solutes in micellar aqueous solutions. There was coincidence in the trends of CMC reduction and cholesterol solubilization increase in the aqueous phase with varying temperature, pH and addition of salt in some experimental conditions, while in others opposing or conflicting trends were observed. In one specific experiment, it was observed that no cholesterol was removed from the decane phase in contact with quillaja solutions below the CMC. In the absence of direct evidences and considering results obtained, the hypothesis that the solubilization in micelles is one of the mechanisms operating in cholesterol separation cannot be rejected. On the other hand, solubilization alternatives associated with other colloidal structures (liquid crystals) that might be formed in aqueous solutions by amphíphilic compounds from quillaja extracts shall be considered as well. In addition to the technical and scientific development, the results may collaborate to the economic development through the production of cholesterol-free milk fat, opening the possibility for the formulation of a wide range of cholesterol reduced and cholesterol-free dairy and non-dairy products, attractíve to specific segments of the consumer market Mestrado Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador: Otavio Rizzi Coelho Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: A aterosclerose é caracterizada pelo recrutamento de monócitos e linfócitos para a parede do vaso. O efeito desencadeador deste processo é o acúmulo de partículas de LDL minimamente oxidadas, as quais estimulam as células endoteliais a produzirem moléculas pró-inflamatórias. Em adição à LDL oxidada, vários outros fatores modulam a inflamação tais como forças hemodinâmicas, hormônios sexuais e infecção. O objetivo deste estudo foi demonstrar o efeito anti-aterogênico do DMA, 6,7-Dimetoxi-4-N-(3¿-N¿,N¿-dimetil)fenilaminoquinazolina, em camundongos LDLr-/- . Este efeito pode ser relacionado com a propriedade anti-inflamatória do composto estudado, por evidências de que o mesmo aumenta a biodisponibilidade de adenosina nos tecidos pela inibição da adenosina quinase. Nossos resultados mostraram que o DMA administrado via oral, tanto no tratamento preventivo, quanto no tratamento de lesões pré estabelecidas, em camundongos LDLr-/- alimentados com dieta hipercolesterolêmica (1,25% colesterol e 0,5% ácido cólico) diminui o tamanho das placas ateroscleróticas em 67% e 52%, respectivamente, em relação ao grupo controle que recebeu veículo. Esses dados foram obtidos através da planimetria das lesões ateroscleróticas na base da artéria aorta com a coloroção Oil Red O específica para lipídios. A dieta hipercolesterolêmica (HC) por 15 e 30 dias reduziu o triglicéride sérico, medido pelo sistema de cromatografia líquida, em cerca de 50% sendo que o tratamento com DMA cancelou esta redução. A dieta HC por 15 e 30 dias aumentou o colesterol sérico, em cerca de 2 vezes nos camundongos LDLr-/-. Camundongos tratados com DMA e dieta HC apresentaram níveis de colesterol total maiores do que o grupo alimentado somente com dieta HC. Dados revelaram que este aumento foi devido ao maior nível de HDL circulante nos camundongos tratados com o composto DMA. Todos os camundongos em tratamento, tanto com DMA quanto com veículo, apresentaram redução do peso corporal em relação ao grupo de camundongos alimentados com dieta hipercolesterolêmica (HC) Abstract: Atherosclerosis is characterized by the recruitment of monocytes and lymphocytes to the artery wall. A triggering event for this process is the accumulation of minimmally oxidized LDL, which stimulates the overlying endothelial cells to produce a number of pro-inflammatory molecules, including hemodynamic forces, sex hormones and infection. We demonstrated that DMA, ,7-Dimethoxi-4-N-(3¿-N¿,N¿-dimethyl)phenilaminoquinazoline, have an anti-atherogenic effect in mice LDLr-/-. This effect could have a relationship with an anti-inflammatory property of adenosine in tissues, by the inhibition of adenosine kinase. Results showed that DMA administrated by oral via, as prevent treatment, as pre-established lesions, in mice LDLr-/- with hypercholesterolemic diet (1,25% cholesterol and 0,5% colic acid), decreases atherosclerotic lesions in 67% and 52% respectively in relation of the vehicle group. These data was obtained by planimmetric study of atherosclerotic lesions in the base of aortic arthery with Oil Red O especific for lipids. The hypercholesterolemic diet by 15 and 30 days, decreases serum tryglicerides in 50%, in the other way, the treatment with DMA cancelled this reduction. At the same time, HC diet by 15 and 30 days increases total cholesterol serum, in 2 times in mice LDLr-/-. Mice treatment with DMA and hypercholesterolemic diet showed serum cholesterol higher than the HC group (control). Results demonstrated that this increase have relationship with higher HDL serum level in mice treated with compound. All mice in treatment (DMA and Vehicle group) had the weight decreased. Mestrado Ciências Básicas Mestre em Clínica Médica

Orientadores: Lourenço Gallo Junior, Eliana Cotta de Faria Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação Fisica Resumo: O tabagismo é um dos fatores de risco mais importantes para a doença arterial coronariana. Vários de seus efeitos são descritos como mediadores da sua aterogenicidade: cardiovasculares diretos, oxidativos, trombogênicos e dislipidêmicos. Entretanto, de acordo com a literatura, um grande número de fumantes não apresenta dislipidemias, a despeito da frequente redução dos níveis plasmáticos de colesterol de lipoproteínas de densidade alta (HDL-col). Com o objetivo de avaliar os efeitos do fumo sobre a concentração de diferentes lípides e a composição bioquímica das lipoproteínas plasmáticas, oito homens fumantes crônicos de cigarros sob o efeito agudo do fumo foram estudados. Sete homens não fumantes e um ex-fumante constituíram o grupo controle. Realizou-se o teste oral de tolerância à gordura, e mediu-se entre o jejum e 8 horas após a ingestão, os níveis plasmáticos de triglicérides, colesterol total e HDL-col. Mediu-se também em jejum e 4 horas após a dieta, colesterol, triglicérides, fosfolípides e proteínas nas diferentes frações e subfrações das lipoproteínas plasmáticas separadas por ultracentrifugação. Demonstramos que fumantes e não fumantes não diferiram quanto aos níveis plasmáticos em jejum de triglicérides, colesterol e HDL-col, havendo nos fumantes uma tendência a menores níveis de triglicérides e colesterol e a maiores níveis de HDL-chol. Estas tendências persistiram respectivamente para colesterol, triglicérides, fosfolípides e proteínas nas frações de lipoproteínas de densidade muito baixa (VLDL) e lipoproteínas de densidade baixa (LDL) (menores níveis) e 'HDL IND. 2¿ (maiores níveis), tanto no jejum quanto no período pós-dieta, exceto triglicérides para LDL e 'HDL IND. 2¿ no jejum. Houve aumento significativo de fosfolípides de 'HDL IND. 2¿ nos fumantes em jejum com tendência a aumento na relação lípides/proteínas indicando a presença de partículas de 'HDL IND. 2¿ mais ricas em lípides neste grupo. Os fumantes não foram intolerantes à gordura; as curvas pós-dieta tenderam inclusive a menores níveis de triglicérides plasmáticos. Nos fumantes houve uma correlação positiva e significativa entre todos os componentes de VLDL com o peso e o índice de massa corpórea (IMC) e também uma correlação negativa e significativa entre colesterol, proteínas e fosfolípides de 'HDL IND.2¿ com o peso corporal e IMC, sugerindo uma regulação destes componentes lipídicos pelo tecido adiposo nos fumantes. Estes resultados em conjunto sugerem que fumantes crônicos moderados normolipidêmicos sob o efeito agudo do fumo apresentam lipólise periférica aumentada via aumento da atividade da lipoproteína lipase, o que justifica os níveis aumentados de fosfolípides de 'HDL IND. 2¿ Abstract: Cigarette smoking is one of the most important risk factors for coronary artery disease. Many of its effects are described as mediators of its aterogenicity: direct cardiovascular, oxidatives, trombogenics and dislipidemics. However, according to the literature, a great number of cigarette smokers does not have dislipidemias, despite the fact of frequent presence of lower levels of cholesterol plasma in high density lipoproteins (HDL-chol). To test the effects of cigarette smoking on the plasma levels of different lipids and on the biochemical composition of plasma lipoproteins, chronic male smokers under the acute effect of cigarette smoking were studied. The contrai group was formed by male non smokers and one ex-smoker. The oral fat tolerance test was applied, and the levels of triglyceride, total cholesterol and HDL-chol were determined between fasting and eight hours after the ingestion of fat. Cholesterol, triglyceride, phospholipid and protein on the different plasma lipoprotein fractions and some subfractions separated by ultracentrifugation, were analysed in fasting and four hours after the oral diet. We showed that smokers and non-smokers do not differ in their plasma triglyceride, cholesterol, and HDL-chol plasmatic levels during the fasting period. The smokers showed a tendency to lower triglyceride and cholesterol levels and to higher HDL-chol levels. These tendencies persited respectively for cholesterol, triglyceride, phospholipids and proteins in very low density lipoproteins (VLDL) and low density lipoproteins (LDL) (Iower levels) and ¿HDL IND. 2¿(higher levels) in both fasting and post diet periods (except for tryglicerides in fasting to LDL and ¿HDL IND. 2¿). In smokers, ¿HDL IND. 2¿-phospholipidswere higher in the fasting period, with atendency toward a ratio of higher lipids to proteins, showing the presence of ¿HDL IND. 2¿ particles richer in lipids in this group. The smokers were not fat intolerant; in fact, the post-diet curves tended to show lower plasma triglyceride levels. In smokers there was a positive and significant correlation between ali the VLDL components with the weight and body mass index (BMI); and there was a negative and significant correlation between cholesterol, proteins and ¿HDL IND. 2¿- phospholipide with the weight and BMI, suggesting a regulation of these plasma lipid components by the adipose tissue in this group. Ali these results suggest that chronic moderate normolipidemic smokers under the acute effect of cigarette smoking have higher peripheral lipolysis, through incresead activity of lipoprotein lipase, justifying the significant higher plasma levels of ¿HDL IND. 2¿-phospholipids Mestrado Mestre em Educação Física

Orientadores: Admar Costa de Oliveira, Eder C. R. Quintão Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: O transporte reverso de colesterol é um dos mecanismos que podem explicar a relação inversa entre os níveis plasmáticos de lipoproteínas de alta densidade (HDL) e a incidência de doença aterosclerótica no homem. Por esse processo, o colesterol dos tecidos periféricos, inclusive da parede arterial, é removido das membranas celulares pelas HDL, esterificado pela lecitina colesterol-aciltransferase e, posteriormente, captado pelo figado (transporte reverso direto de colesterol). O colesterol celular também é removido por via indireta, ou seja, pela transferência do-colesterol esterificado das HDL para as lipoproteínas que contém apo B (lipoproteínas de muito baixa e baixa densidade, respectivamente VLDL e LDL) as quais são captadas por receptores específicos hepáticos. Essa etapa é mediada pela proteína de transferência de éster de colesterol.(CETP). As lipoproteínas de baixa densidade são quantitativamente as maIS importantes lipoproteínas carreadoras de colesterol. Elas estão positivamente associadas ao desenvolvimento da aterosclerose e, desta forma, altas concentrações de LDL plasmáticas e/ou modificações químicas destas lipoproteínas, como a oxidação, são condições relacionadas diretamente ao aumento da incidência da doença aterosclerótica. Com o objetivo de avaliar a atividade da CETP frente a modificações químicas induzi das artificialmente nas LDL, foram feitos experimentos de medida de transferência de éster de colesterol radioativamente marcado entre as lipoproteínas. Lipoproteínas obtidas a partir de "pool" de plasma de indivíduos nonnais, foram modificadas "in vitro" por acetilação ou oxidação e foram incubadas com HDL2 e HDL3 previamente marcadas com éster de colesterol radioativo, na presença de CETP contida na fração do plasma de d> 1,21g1rnL. Após vários períodos de incubação, as lipoproteínas foram reisoladas por precipitação das LDL com sulfato de dextrana/MgCh e a radioatividade medida no sobrenadante. Os resultados obtidos mostraram diminuição média significativa na transferência de éster de colesterol das subpopulações de HDL (HDL2 e HDL3 em conjunto) para as LDL modificadas por acetilação (p=O,OOOI) ou por oxidação (p=O,OO88), quando comparadas às respectivas LDL normais. A diminuição encontrada na porcentagem de transferência das HDL para a LDL acetilada foi de 1,8 vezes e para a LDL oxidada foi de 1,5 vezes em relação às respectivas LDL normais. A via inversa, ou seja,. transporte de éter de colesterol da LDL oxidada para as subpopulações de HDL, apresentou um aumento médio significativo (p=O,OOO5) de cerca de 2 vezes, quando comparado à LDL normal. A diminuição da transferência de colesterol esterificado (CO) das HDL para as LDL modificadas contribui para que estas lipoproteínas aterogênicas ganhem menos colesterol do que as LDL não modificadas. Por outro lado, a maior transferência de colesteril-oleato das LDL oxidadas para as HDL, resulta na redistribuição do colesterol oxidado para uma fração lipoprotéica antiaterogênica. Como o destino metabólico das LDL modificadas é a captação por macrófagos na parede arterial (ateroma) e o das LDL e das HDL normais é o hepatócito (excreção de colesterol do corpo), os resultados mostraram que a CETP favoreceu a redistribuição do colesterol plasmático para as lipoproteínas íntegras, antiaterogênicas, indicando um possível papel antiaterogênico da CETP o que também foi recentemente descrito em um estudo populacional Abstract: Reverse transport of cholesterol is a mechanism that possibly explains an inverse correlation between high density lipoprotein (HDL) levels and the incidence of atherosclerosis. In this process peripheral cholesterol tissue, including that of the arterial wall, is removed from cellular membranes by HDL, esterified by lecithin-cholesterol-acyltransferase and thereafter taken up by the liver (direct reverse transport of cholesterol). Cellular cholesterol is also transported by an indirect way, that is, by means of the transfer of esterified cholesterol from HDL to the lipoproteins that contain apo B (low and very low density lipoproteins, respectively, VLDL and LDL) and that is intemalized by specific hepatic receptors. Thisstep is mediated by the cholesterol ester transfer protein (CETP). Low density lipoproteins quantitatively are the most important carriers of cholesterol. They are positively associated with the development of atherosclerosis, and in this way, high concentrations of plasma LDL and chemical modification of these lipoproteins are conditions direct1y related to atherogenesis. In order to study the activity of CETP on LDL particles chemically modified, experiments were made to measure the transfer of radioactive cholesteryl ester between lipoproteins. Lipoproteins obtained from the plasma pool of normal individuaIs were modified "in vitro" by acetylation or oxidation, and were incubated with HDL2 and HDL3 containing radioactive cholesteryl ester in the presence of CETP from plasma fraction of d > 1.2 1 g/rnL. After various incubation periods, the lipoproteins were isolated again by pr.ecipitation of LDL with dextran sulfate/MgCh and the radioactivity measured in the supematant. The results obtained showed a significant average diminution in the transfer of cholesteryl ester from HDL2 and HDL3 to the LDL modified by acetylation or by oxidation, when compared to the nonnal LDL. In the inverse direction that is, the transport of oxidized LDL cholesteryl ester to the subpopulations of HDL presented a significant average increase, when compared to nonnal LDL. The diminished transfer rate of esterified cholesterol (CO) from HDL to the modified LDL brings about a significantly smaller enrichment of the latter with cholesterol. On the other hand, the faster transfer rate of CO from oxidized LDL to HDL lessens the atherogenic pot~ntial of the fonner lipoproteins. Taking into account that modified LDL is bound to accumulate into the arterial wall whereas nonnal LDL and HDL are preferentially taken up by the hepatocyte, the data suggest that CETP plays a benefical role favoring the excretion of cholesterol from the body, which is in agreement with a recent epidemiological study suggesting an antiatherogenic role of CETP Doutorado Doutor em Ciência da Nutrição

Orientador: Roberto Herminio Moretti Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Bebidas de extrato de soja com suco de frutas têm-se mostrado uma excelente alternativa para o aproveitamento e a introdução da soja na dieta humana. Aos consumidores, além dos benefícios nutricionais e funcionais atribuídos à soja, as bebidas devem atender a características sensoriais esperadas, mantendo os constituintes presentes nas matérias-primas de origem. O trabalho teve por objetivos avaliar extratos de soja obtidos de diferentes matérias-primas (grãos, farinha integral e isolado protéico de soja). O extrato mais aceito sensorialmente foi utilizado para a elaboração de bebida à base de soja e polpa de pêssegos, com teor protéico superior a produtos similares existentes no mercado, preservando ao máximo a sua qualidade tecnológica e sensorial. A bebida foi avaliada quanto às suas propriedades como alimento funcional relativamente a sua influência sobre os níveis de colesterol sanguíneo e crescimento de bactérias bífidas intestinais, utilizando coelhos como modelo experimental. Extratos com 3% de proteína foram obtidos a partir de grãos (em equipamento conhecido como "vaca mecânica"), a partir de farinha integral e isolado protéico (por dissolução em água), e pasteurizados a 74 '+ ou -" '2 GRAUS. C' por 15seg. As matérias primas e os correspondentes extratos diferiram entre si quanto à composição físicoquímica. Observou-se menores perdas dos teores de sacarose e oligossacarídeos no extrato proveniente da farinha comparativamente ao dos grãos e ausência de oligossacarídeos no extrato obtido do isolado. Os perfis de aminoácidos nos grãos e na farinha integral foram similares e quantitativamente superiores ao do isolado. Na elaboração do extrato a partir dos grãos de soja, ocorreu redução de 15 e 11% de aminoácidos essenciais e não-essenciais, respectivamente. O teor de isoflavonas foi maior na farinha, no isolado protéico e nos grãos de soja, nesta ordem, verificando-se a redução de 0,3, 4,9 e 8,1% no teor total, bem como alteração nas frações glicosídicas, malonil-glicosídicas e agliconas que passaram da relação 40:57:3, 28:65:7 e 16:83:1, respectivamente, nas matérias-primas, para 62:28:10, 76:17:7 e 66:31:3, nos extratos correspondentes. Os extratos diferenciaram-se também quanto ao comportamento reológico, apresentando maior viscosidade aquele oriundo dos grãos, farinha e isolado, nesta ordem. Os extratos obtidos dos grãos e de isolado protéico de soja mostraram similar aceitação em relação aos atributos avaliados (cor, aroma, sabor, textura e impressão global), superando o extrato obtido de farinha integral de soja. Considerando a boa aceitação e a composição físico-química e nutricional, o extrato obtido de grãos de soja foi escolhido para utilização na formulação de bebida com polpa de pêssegos. Foram formuladas 18 bebidas à base de extrato de grãos de soja e polpa de pêssegos, açúcar e estabilizante, de acordo com um planejamento experimental fatorial completo ('2 POT. 2' com 4 pontos centrais e 6 axiais) e análise de superfície de resposta, às quais adicionou-se corante urucum, aroma de pêssego, ácido cítrico e conservador do tipo parabenos, seguido de pasteurização (80-85°C, 20seg). As variáveis independentes proteína de soja (1,5 a 2,5%), estabilizante (0,12 a 0,16%) e açúcar (8 a 12%) tiveram efeito significativo (p '< ou =' 0,05) sobre os teores de sólidos solúveis, acidez, cor, viscosidade e aceitabilidade das bebidas. O percentual de proteína de soja foi o fator determinante da aceitação, considerando os atributos cor, aroma, sabor, textura e impressão global. O percentual de estabilizante teve maior efeito sobre os atributos textura e impressão global, enquanto que o percentual de açúcar foi mais efetivo em relação ao sabor e à impressão global. A bebida mais aceita foi a formulada com extrato de soja contendo 2% de proteína, polpa de pêssegos, 10% de açúcar e 0,14% de estabilizante, correspondente ao ponto central do planejamento experimental. A mesma foi utilizada em ensaio biológico com coelhos (4 grupos de 6 animais cada) durante 105 dias (Fase 1). Um grupo de animais (controle) foi alimentado com ração comercial, um outro grupo recebeu ração comercial mais 50mL da bebida e dois grupos foram induzidos à hipercolesterolemia pela ingestão diária de 200mg de colesterol associado com a ração comercial, um destes recebendo juntamente a bebida. A bebida mostrou-se efetiva para o controle dos níveis séricos de colesterol total, HDL-colesterol e triacilglicerídeos e a formação de placas lipídicas na aorta dos animais induzidos à hipercolesterolemia. Nos animais normocolesterolêmicos, observou-se que a bebida proporcionou redução nos níveis de HDL e aumento de triacilglicerídeos. Nos coelhos hiper e normocolesterolêmicos a bebida aumentou os níveis séricos de glicose, mas não interferiu no ganho de peso. Ocorreu o incremento de um ciclo logarítmico na contagem de bifidobactérias avaliadas nas fezes dos animais que ingeriram a bebida. Os efeitos observados foram confirmados na continuidade do ensaio por mais 120 dias (Fase 2), quando inverteu-se a dieta dos. grupos hipercolesterolêmicos: os animais induzidos à hipercolesterolemia (dieta composta por ração e 0,2% de colesterol) por 105 dias receberam em continuidade a bebida por 120 dias, e os animais que consumiram dieta composta por ração comercial, acrescida de colesterol e bebida durante 105 dias, tiveram suprimida a bebida nos 120 dias subseqüentes. Abstract: Beverages based on soymilk and fruit juice have been an excellent option for the utilization and introduction of soy in the human diet. To the consumers, besides nutritional and functional benefits attributed to the soy, the beverages must attend the expected sensorial characteristics, keeping the original constituents of the raw materiais. Soy extracts (soymilk) obtained from different raw materiais (soybeans, whole soy flour and isolated soy protein) were evaluated. The most sensorially accepted extract was used to elaborate a beverage based on soymilk and peaches pulp. The protein content was higher than the similar products in the market, preserving the maximum technological and sensory quality. The beverage was evaluated regarding its influence like functional food related to the cholesterol blood levels and growth of intestinal bifidobacteria, using rabbits as the experimental model. Extracts with 3% of protein were obtained from three different sources: soybeans (in a specific equipment), whole soy flour and isolated soy protein (for dissolution in water), and pasteurized at 74 '+ ou -' '2 GRAUS. C' for 15sec. The raw materiais and the respective extracts were different regarding the physical-chemical composition. It was observed that the saccharose. and oligosaccharides contents had lower losses in the extract originated from the flour comparatively to the one from the soybeans and the absence of oligosaccharides in the extract obtained from the isolated. The aminoacid profiles in the soybean and in the whole soy flour were similar and their amount was higher in the isolated soy protein. In the extract elaboration from the soybean a reduction of 15 and 11% of essential and non-essential aminoacid, respectively, was verified. Flour, isolated protein and soybean, in this order, showed a higher Isoflavones content and a reduction of 0.3, 4.9 and 8.1% in the total content in the extract. The fractions of beta-glucosides, malonyl-glucosides and aglycones changed from the relation 40:57:3, 28:65:7 and 16:83:1, respectively, in the raw materiais, to 62:28: 1O, 76: 17:7 and 66:31:3, in the corresponding extracts. The extracts were also different according to the reological behavior. The viscosity was higher in soybean, flour and isolated extracts, in this order. The extracts obtained from the soybean and isolated soy protein had similar acceptance based on the evaluated attributes (color, aroma, flavor, texture and overall impression), overcoming the extract obtained from the whole soy flour. Considering the good acceptance and the physicalchemical and nutritional composition, the extract obtained from soybean was chosen to elaborate the beverage with peaches pulp. Eighteen beverages formulations made of soybean extract and peaches pulp, sugar and stabilizer, according to an complete factorial design (23 with 4 central points and 6 axial points) and surface response analysis were formulated. Pigment ("urucum"), peach aroma, citric acid and paraben preservatives were added, followed by pasteurization (80-85 'DEGREE .C', 20sec). The independent variables soy protein (1.5 at 2.5%), stabilizer (0.12 at 0.16%) and sugar (8 at 12%) had significant effect (p '< or =' 0,05) in the soluble solid, acidity, color, viscosity and acceptability of the beverage. The percentage of soy protein was the acceptance determinant factor, considering the attributes color, aroma, flavor, texture and overall impressionoThe percentage of stabilizer had higher effect on the attributes texture and overall impression, while the percentage of sugar was more effective regarding the flavor and the overall impression.The most accepted beverage was the one formulated with soybean extract using 2% of protein, peaches pulp, 10% of sugar and 0,14% of stabilizer, corresponding to the experimental design central point. This beverage was used in biological assay with rabbits (4 groups of 6 animal each) during 105 days (Phase 1). The control group was fed with commercial meal, other group received commercial meal more 50mL of the beverage and the other two groups were induced to hypercholesterolemia by the daily ingestion of 200mg of cholesterol added to the commercial meal, one of these also receiving the beverage. The beverage was effective for the total cholesterol controllevels in the blood, HDL-cholesterol and triglycerides and the aorta's lipidic plaques formation in the animais induced to hypercholesterolemia. In the normocholesterolemic animais the beverage provided reduction in HDL's levels and increased the triglycerides. In the hyper and normocholesterolemic rabbits the beverage increased the glucose blood levels, but it didn't interfere in the weight gain. Bifidobacteria counting evaluation in the animais' feces that ingested the beverage increased in one logarithmic cycle. The observed effects were confirmed by the assay continuity for more 120 days (Phase 2). Hypercholesterolemic groups diet was inverted: the animais induced to hypercholesterolemia (diet composed by meal and 0,2% of cholesterol) during 105 days received in continuity the beverage for 120 days, and the animais that consumed diet composed by commercial meal plus cholesterol and beverage during 105 days, had suppressed the beverage during 120 subsequent days. Doutorado Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Miguel Arcanjo Areas Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A hipercolesterolemia é um importante fator de risco para doenças cardiovasculares porque promove aumento da produção de radicais livres, principalmente, pela oxidação da lipoproteína de baixa densidade (LDL) e pela geração de espécies reativas que reagem com o oxigênio na parede vascular. As drogas com efeitos hipocolesterolêmicos podem expor o paciente a efeitos adversos especialmente no fígado, rins e músculo esquelético. Como alternativa, produtos de origem vegetal têm recebido considerável atenção para o tratamento da hipercolesterolemia. Observa-se uma relação inversa entre a associação da ingestão de fibras alimentares e de polifenóis com o risco de doenças cardiovasculares. Fibras alimentares, especialmente as solúveis, reduzem os níveis de colesterol plasmático exercendo efeito protetor contra as doenças cardíacas. Por outro lado, a propriedade protetora mais importante dos polifenóis é a sua atividade antioxidante. Este trabalho avaliou o efeito da polpa de laranja, fonte natural de fibras, em hamsters submetidos à dieta hipercolesterolêmica. Os animais foram distribuídos em três grupos (n=8/grupo): Grupo I: alimentados com dieta controle; Grupo II: hamsters com dieta hipercolesterolêmicas (20g colesterol/Kg dieta), e Grupo III: dieta hipercolesterolêmica contendo 20% de polpa de laranja. Foram determinadas as concentrações plasmáticas do colesterol total, triacilgliceróis, HDL e VLDL+LDL colesterol, bem como a pressão arterial média e a análise morfométrica da parede da aorta abdominal. Avaliou-se, também, o teor de polifenóis na polpa de laranja, a peroxidação lipídica (TBARS) nos eritrócitos e a atividade da superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT), glutationa redutase (GR) e glutationa (GSH). A polpa de laranja, em cuja composição foi demonstrada a presença de polifenóis, reduziu as concentrações plasmáticas de triacilglicerois, VLDL+LDL, colesterol total e TBARS, bem como a atividade da SOD, GSH-Px, CAT e GR. Além disso, a polpa de laranja também reduziu a pressão arterial média e o espessamento da parede da aorta. Em conclusão, a polpa de laranja exerceu efeito protetor contra as alterações induzidas pela hipercolesterolemia devido, principalmente, a suas propriedades físico-químicas e provavelmente, à presença de polifenóis entre seus constituintes Abstract: Hypercholesterolemia is a high cardiovascular risk factor because cholesterol exerts a prooxidant effect and leads to enhanced production of oxygen free radicals, especially by oxidizing low-density lipoprotein (LDL) and generating species that can react with oxygen in the vascular wall. For most cholesterol lowering drugs to be effective they must be used for several weeks, but the procedure may expose the patient to various side effects, especially liver, kidney and esqueletic muscle injury. As an alternative, the use of products of plant origin for treating hypercholesterolemia has received considerable attention. Therefore, there is a negative relationship between the association of dietary fibers and polyphenol intake and the risk of cardiovascular diseases. Dietary fibers, especially the soluble type, decrease serum cholesterol levels and this may contribute to their protective role against heart disease. In contrast, the most important therapeutic property of polyphenols is their antioxidant activity. We studied induced hypercholesterolemia and its modulation by orange pulp, a natural source of fiber, in hamsters. The animals were distributed into three groups (n=8/group): Group I: fed a control diet; Group II: fed a hypercholesterolemic diet (20g of cholesterol/kg diet); and Group III: fed a hypercholesterolemic diet containing 20% orange pulp. Total cholesterol, triglycerides, total serum HDL- and VLDL+LDL-cholesterol concentrations were evaluated. In addition, concentration of polyphenols in orange pulp, erythrocyte lipid peroxidation (TBARS) and the activities of superoxide (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT), glutathione reductase(GR) and glutathione (GSH), mean arterial pressure and morphometrical examination in the abdominal aortic wall were all evaluated. Orange pulp reduced the triglycerides, VLDL+LDL, total plasma cholesterol concentration, TBARS levels, and the SOD, GSH-Px, CAT and GR activities, and mean arterial pressure, and abdominal aorta wall thickness. In conclusion, orange pulp had a protective effect against alterations induced by hypercholesterolemia.This protection was probably due to the direct physical action on the gastrointestinal tract and, probably, by the presence the polyphenols in orange pul Doutorado Fisiologia Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Fil: Buena Maizon, Héctor. Pontificia Universidad Católica Argentina. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Laboratorio de Neurobiología Molecular; Argentina Fil: Buena Maizon, Héctor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Barrantes, Francisco José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Barrantes, Francisco José. Pontificia Universidad Católica Argentina. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Laboratorio de Neurobiología Molecular; Argentina Abstract: We present a concatenated deep-learning multiple neural network system for the analysis of single-molecule trajectories. We apply this machine learning-based analysis to characterize the translational diffusion of the nicotinic acetylcholine receptor at the plasma membrane, experimentally interrogated using superresolution optical microscopy. The receptor protein displays a heterogeneous diffusion behavior that goes beyond the ensemble level, with individual trajectories exhibiting more than one diffusive state, requiring the optimization of the neural networks through a hyperparameter analysis for different numbers of steps and durations, especially for short trajectories (

Orientador: Jaime Amaya Farfan Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Diversos estudos têm sugerido que a ingestão frequente de vegetais reduz o risco de doenças crônicas não transmissíveis em função da presença de compostos como a fibra alimentar (FA) e demais substâncias bioativas associadas, os quais produzem efeitos positivos sobre a saúde humana. A FA inclui polissacarídeos não amiláceos, oligossacarídeos resistentes à digestão e lignina. Essas substâncias podem passar inalteradas pelo trato gastrintestinal ou serem fermentadas pela microbiota colônica, resultando em efeitos fisiológicos benéficos. A taioba (Xanthosoma sagittifolium) é uma arácea comestível originária da América tropical e possui considerável valor nutritivo. A porção tuberosa é consumida por diversas populações em todo mundo, no entanto, o consumo de suas folhas é menos difundido. O objetivo deste estudo foi caracterizar parcialmente a fração fibrosa da folha de taioba liofilizada (FTL), e avaliar possíveis efeitos fisiológicos in vivo em ratos Wistar machos alimentados com dieta AIN 93G, ou hiperlipídica. As folhas de taioba foram cozidas em água, liofilizadas e quimicamente caracterizadas. Por meio de ensaio biológico foram avaliados os efeitos da FTL sobre a produção de ácidos graxos de cadeia curta, sobre o metabolismo de ácidos biliares (AB) e indicadores bioquímicos. A FTL apresentou teores de fibra alimentar total, solúvel e insolúvel de 35,23 ± 0,26%, 6,82 ± 0,06% e 28,04 ± 0,21%, respectivamente. A análise da composição monossacarídica mostrou que a glicose é o monômero mais abundante (61%), sugerindo a presença de celulose em grandes quantidades. Os animais alimentados com dieta AIN 93G contendo taioba apresentaram maior peso e excreção de gordura fecal, e melhores perfis de ABs, por diminuir a proporção de ABs secundários. Nos ratos alimentados com dieta hiperlipídica a adição de FTL resultou em menor ganho de peso corporal e gordura hepática, e maior peso e conteúdo de gordura nas fezes; além disso, observaram-se maiores concentrações de ácidos graxos de cadeia curta e ABs fecais em comparação ao grupo controle, que recebeu baixos teores de fibra; também se observou menores concentrações de colesterol sérico e maior conteúdo de cinzas corporais nos grupos recebendo a FTL. Os resultados sugeriram que os componentes da folha de taioba possuem elevada capacidade de ligação com os ABs e alta fermentabilidade, indicando que a folha possui potencial para reduzir o risco de doenças cardiovasculares e câncer de cólon Abstract: Several studies have suggested that frequent vegetable intake reduces the risk of coronary heart disease, diabetes, cancer and obesity due to the presence of compounds such as dietary fiber (DF) and other associated bioactive compounds, which exert positive effects on human health. DF includes non-starch polysaccharides, resistant oligosaccharides and lignin. These substances can pass unaltered through the gastrointestinal tract or be fermented by colonic microbiota, resulting in positive physiological effects. Taioba (Xanthosoma sagittifolium) is an edible aroid originated from tropical America that exhibits significant nutritive value. The tuberous portions are consumed by several populations worldwide, whereas the leafy portions of Taioba are generally discarded. The objective of this research was to partly characterize the DF of lyophilized taioba leaf (LTL), and to assess the possible in vivo physiological effects when fed to male Wistar rats receiving a normal AIN 93G diet, or a high-fat diet. Taioba leaves were boiled in water, lyophilized and chemically characterized. Biological evaluation was conducted to assess the effect of LTL on the intestinal short-chain fatty acid production, bile acid (BA) metabolism, and biochemical parameters. Total, soluble and insoluble dietary fiber contents in LTL were 35.23 ± 0.26%, 6.82 ± 0.06% and 28.04 ± 0.21%, respectively. Monosaccharide composition showed glucose as the main component (61%), suggesting the presence of cellulose. Animals fed the AIN 93G diets containing taioba leaf had increased fecal mass and fat excretion, in addition to improved BA profiles by diminishing the proportion of the secondary acids. In the rats fed the high-fat diet, the addition of LTL resulted in lower weight gain and liver fat concomitantly with higher fecal mass and lipids. Furthermore, these rats exhibited a higher fecal short chain fatty acid and bile salt concentration in the feces than the control group, which had a lower fiber intake. Additionally, lower serum cholesterol and higher body ash content were found in the groups receiving the leaf. The results suggested that taioba leaves have compounds with high BA binding capacity and high fermentability. These properties indicate that the leaf has the potential of lowering the risk of colon cancer and cardiovascular disease Doutorado Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos Mestre em Alimentos e Nutrição

Orientador: Enny Therezinha Martucci Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: A extração do colesterol da gema desidratada de ovo de galinha foi pesquisada utilizando acetona como solvente. Um planejamento fatorial foi aplicado para determinação das variáveis (razão da massa do solvente para massa de sólido, L/S; temperatura, T; velocidade de agitação, N e tempo de contato, t) mais significativas no rendimento da extração do colesterol. Usando as variáveis mais importantes, um planejamento rotacional de segunda ordem foi realizado para otimização do rendimento do colesterol por analise da superfície e contorno da resposta. O equilíbrio "prático" de fases e simulação de um sistema de extração muitiestágia contracorrente foram estudados a 25°C, 15 minutos de contato e 100 rpm. A quantidade de colesterol e fosfolipídios extraída e a estabilidade da emulsão de maionese foram avaliadas nas condições de equilíbrio "prático". Um teste sensorial foi realizada para verificar a adequação do uso da gema desidratada com baixa teor de colesterol como agente emulsificante. Os resultados mostraram que as variáveis importantes no rendimento de extração do colesterol foram L/S e T. Um modelo de segunda ordem ajustou-se bem aos dados experimentais (R2 = 0,998), e as correspondentes superfície e contorno de resposta indicaram que maiores rendimentos podem ser obtidos com a elevação de L/S e diminuição da T. Do estudo de equilíbrio foi verificado que a solução de extrato retida pelos sólidos inertes é constante e que a fração mássica do soluto ( Yn) na refinado é maior que a fração mássica do soluto no extrato (Xn). A simulação de um sistema multiestágio contracorrente mostrou a viabilidade de obter alto rendimento na extração do colesterol (80-90%),variando a rei ação L/S e o número de estágios. A estabilidade das emulsões de maionese nas condições de equilíbrio "prática" não foram significativamente diferentes da obtida com a gema controle (desidratada sem extração de colesterol). Do teste sensorial o produto foi considerado aceitávell por cerca de 55% dos consumidores. Os resultados globais indicaram este processo como uma promissora tecnologia. Abstract:The extraction of cholesterol from dehydrated egg yolk from hen's egg was searched, using acetone as solvent. A factorial design was applied for determination of the significative variables (solvent/solids mass ratio, L/S; temperature, T; stirring speed, N and contact time, t) on cholesterol yield. Using the most important variables a rotable second-order design was carried out for the optimization of cholesterol yield by response surface and contour analysis. "Pratical" phase equilibrium and simulation of multistage countercurrent extraction system were studied at 25°C, 15 minutes of contact time and 100 rpm. The cholesterol and phospholipid contents and the emulsion stability of mayonnaises were determined at "pratical" equilibrium conditions. A sensorial test was carried out for checking the suitability of the low cholesterol dehydrated egg yolk as an emulsifying agent in mayonnaises. The results showed that the most significant variables were: L/S and T. A second-order model fitted well the experimental points (R2 = 0,998), and the corresponding response surface and contour indicated that the highest cholesterol yield was obtained by rising the L/S and decreasing the temperature. From equilibrium studies it was verified that the retention of extract solution by the inert solids is constant, and the solute mass fraction of raffinate (Yn) is higher than the solute mass fraction of the extract (Xn). The simulation of multistage countercurrent extraction system showed that it is possible to obtain higher cholesterol yield (80-90%) by changing the L/S and stage numbers. The stability of mayonnaise emulsions in the equilibrium conditions was not significantly different in comparison with that obtained with the egg yolk control (without cholesterol extraction). From the sensorial tests the product was considered acceptable for about 55% of the consumers. The overall results indicate this process as a promising technology. Doutorado Doutor em Engenharia de Alimentos

The aim of this work was to study the effect of the carbon source (glycerol, sucrose, glucose or a sucrose/glucose mixture) on the production of the anti LDL (-) single-chain variable fragment (scFv) by the recombinant Pichia pastoris SMD 1168 strain as well as on the cell size. The use of glucose as a carbon source in the growth phase led to a remarkable increase in cell size compared with glycerol, while the smallest cells were obtained with sucrose likely due to the occurrence of an energetic stress. The scFv concentration seemed to be related to cell number rather than to cell concentration, which in its turn showed no significant dependence on the carbon source. Yeast cells grown on sucrose had a mean diameter (0.736 ± 0.097 μm) about 35% shorter than those grown on glucose and allowed for the highest final concentration of the scFv antibody fragment (93.7 ± 0.2 mg/L). These results demonstrate that sucrose is the best carbon source for the expression of such an antibody fragment by the recombinant P. pastoris strain, which may be very useful for the diagnostic analysis of the so-called "bad cholesterol".

Background and objectives: the detection and delineation of atherosclerotic plaque are usually manually performed by medical experts on the carotid artery. Evidence suggests that this manual process is subject to errors and has a large variability between experts, equipment, and datasets. This paper proposes a robust end-to-end framework for automatic atherosclerotic plaque detection. Methods: the proposed framework is composed of: (1) a semantic segmentation model based on U-Net, with EfficientNet as the backbone, that obtains a segmentation mask with the carotid intima-media region; and (2) a convolutional neural network designed using Bayesian optimization that simultaneously performs a regression to get the average and maximum carotid intima media thickness, and a classification to determine the presence of plaque. Results: our approach improves the state-of-the-art in both co and bulb territories in the REGICOR database, with more than 8000 images, while providing predictions in real-time. The correlation coefficient was 0.89 in the common carotid artery and 0.74 for bulb region, and the F1 score for atherosclerotic plaque detecting was 0.60 and 0.59, respectively. The experimentation carried out includes a comparison with other fully automatic methods for carotid intima media thickness estimation found in the literature. Additionally, we present an extensive experimental study to evaluate the robustness of our proposal, as well as its suitability and efficiency compared to different versions of the framework. Conclusions: the proposed end-to-end framework significantly improves the automatic characterization of atherosclerotic plaque. The generation of the segmented mask can be helpful for practitioners since it allows them to evaluate and interpret the model's results by visual inspection. Furthermore, the proposed framework overcomes the limitations of previous research based on ad-hoc post-processing, which could lead to overestimations in the case of oblique forms of the carotid artery.

Orientador: Maria Elena Guariento Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Fundamento: O hipotireoidismo subclínico é mais prevalente em mulheres idosas e existe uma correlação direta entre esta condição e as dislipidemias, com um conseqüente potencial aterosclerótico para a ocorrência de doenças cardiovasculares. Objetivo: Verificar em mulheres idosas com hipotireoidismo subclínico a ocorrência de variações em seus perfis lipídicos e o consequente risco cardiovascular. Métodos: Foram estudadas 121 mulheres com idade ? 65 anos, 76 delas com hipotireoidismo subclínico (grupo 1), comparadas a um grupo controle de 45 mulheres eutireoideas (grupo 2). Foi estudada a relação entre hipotireoidismo subclínico e valores de colesterol total, suas frações e triglicérides. Os índices de Castelli I e II foram utilizados para avaliar o risco cardiovascular. Foram excluídas outras condições que causem dislipidemia. Resultados: Pacientes com hipotireoidismo subclínico apresentaram valores mais elevados de colesterol total, suas frações (exceto HDL-c) e triglicérides; e os índices de Castelli I e II, quando comparadas ao grupo controle (p < 0,01). No grupo 1 foram identificados dois subgrupos de pacientes, o primeiro com menores valores na elevação TSH e nos Índices Castelli I e II; o segundo com maiores valores na elevação de TSH, e nos Índices de Castelli I e II. Conclusão: O estudo demonstrou uma forte correlação entre dislipidemia e hipotireoidismo subclínico e que quanto mais elevado o TSH, mais alterado o perfil lipídico, e mais elevados os índices de Castelli I e II, com conseqüente aumento do risco cardiovascular Abstract: Background: Subclinical hypothyroidism is more prevalent in elderly women. There is a direct correlation between this condition and dyslipidemia, with consequent arteriosclerotic potential for the occurrence of cardiovascular diseases. Objective: The objective of this study was to verify in elderly women with subclinical hypothyroidism lipid profile variation, with consequent modification in cardiovascular risk. Methods: There were included 121 female patients with age ? 65 years old, 76 with subclinical hypothyroidism (group 1). They were compared with a 45 group control of euthyroid patients (group 2). Other conditions that lead to dyslipidemia were excluded. The relation between subclinical hypothyroidism and the levels of total cholesterol and its fractions, and triglycerides were studied. Also, indexes of Castelli I and II were used to evaluate cardiovascular risk. Results: Patients with subclinical hypothyroidism presented higher levels of all the fractions of cholesterol (except HDL-c), triglycerides and indexes of Castelli I and II, when compared to control group (p

Resumo Fundamento: O surgimento de nova classe de medicamentos com elevada capacidade de reduzir o LDL-colesterol (LDL-c) renovou o interesse na caracterização da hipercolesterolemia familiar (HF). Pouco se conhece do perfil lipídico de pacientes em atendimento terciário em nosso meio para caracterizar a real ocorrência de HF, que começa a ser suspeitada com níveis de LDL-c acima de 190mg/dL. Objetivos: O estudo avaliou o perfil lipídico (colesterol total [CT] e LDL-c) de pacientes de hospital público terciário. Métodos: Estudo retrospectivo de avaliação de prescrições de estatinas e resultados dos lipídios. O nível de significância foi estabelecido em 5%. Resultados: Em 1 ano, 9.594 indivíduos receberam prescrição ambulatorial de estatinas, 51,5% do gênero feminino, idade média de 63,7±12,9 anos (18 a 100 anos). Trinta e duas especialidades prescreveram estatinas, sendo a cardiologia responsável por 43%. Cerca de 15% das prescrições não tinham dosagem recente de CT, e 1.746 (18,0%) não apresentavam resultado recente de LDL-c. A ocorrência de LDL-c > 130mg/dL e < 190mg/dL ocorreu em 1.643 (17,1%) casos, e 228 (2,4%) apresentaram LDL-c ≥ 190mg/dL dentre os que utilizavam estatinas nas diversas doses. Apenas duas estatinas foram utilizadas: sinvastatina e atorvastatina, e a primeira foi prescrita em 77,6% das receitas. Conclusão: Nesta coorte transversal de hospital terciário, foi possível verificar que a prescrição de estatinas é disseminada, mas que a obtenção de metas adequadas de CT e LDL-c não é atingida em grande percentual, e que há, possivelmente, significativo contingente de portadores de HF que necessitariam ser investigados por suas implicações prognósticas.

Orientador: Neura Bragagnolo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Foi otimizado e validado um método para determinação dos principais fitosteróis em óleos vegetais, utilizando cromatografia gasosa, eliminando-se a etapa preparativa por cromatografia em camada delgada preconizada no método oficial da AOCS. A etapa de extração dos fitosteróis foi otimizada utilizando um planejamento experimental rotacional completo 24, cujas variáveis estudadas foram: temperatura, tempo de saponificação, número de extrações e peso da amostra. Os resultados dos testes de recuperação, obtidos a partir de dois níveis de adição, variaram de 96 a 105% para o b-sitosterol, de 96 a 97% para o campesterol e de 101 a 103% para o estigmasterol. Os limites de detecção e de quantificação foram, respectivamente, 11,4 e 38,0 mg/100g para o b-sitosterol, 2,3 e 7,65 mg/100g para o campesterol e 1,95 e 6,5 mg/100g para o estigmasterol. A identificação dos picos foi confirmada por espectrometria de massas. O método otimizado foi também validado por comparação com a metodologia oficial da AOCS. O resultados não apresentaram diferenças significativas (p>0,05) entre os teores de estigmasterol e b-sitosterol obtidos pelas duas metodologias. Entretanto, foram observadas diferenças significativas (p0,05) between stigmasterol and b-sitosterol contents, determined using both methods. However, significantly differences (p

Orientador: Nelson Henrique Morgon Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química Resumo: O objetivo principal deste trabalho foi analisar alguns dos mecanismos reacionais de oxidação da molécula de colesterol. Para que isso fosse possível, desenvolveu-se uma metodologia de cálculos à partir da análise de diferentes funcionais de densidade, conjuntos de funções de base e método ONIOM. A metodologia que realiza cálculos no nível ONIOM2(QCISD(T)/6-311++G(2df,p): HF/6-31G(d)//B3LYP/6-31G(d):HF/6-31G(d)) resultou nos menores desvios médios absolutos para afinidades por próton e eletrônica, 5,38 kJ/mol e 0,107 eV, respectivamente, para as 65 moléculas utilizadas no processo de validação. Essa metodologia comparada aos métodos propostos na literatura, G3(MP2) e G3(B3), possui desvios absolutos estatisticamente inferiores e vantagem em tempo computacional. Ao aplicar-se esse nível de teoria no estudo dos mecanismos de autoxidação do colesterol, observa-se uma concordância com dados experimentais que indicam a preferência pela reação através da posição equatorial. As reações de epoxidação seguida pela hidratação, foram realizadas pela transferência de um átomo de oxigênio da molécula de peróxido de hidrogênio para o colesterol, havendo a quebra da insaturação e consequente formação de um triol da molécula de colesterol Abstract: The main objective of this study was to analyze some oxidation reaction mechanisms involving cholesterol molecule. A calculation methodology considering the analysis of different density functionals, basis sets and ONIOM method. The methodology that performs calculations at the level ONIOM2(QCISD(T)/6-311++G(2df,p):HF/6-31G(d)//B3LYP/6-31G(d):HF/6-31G(d)) resulted in smaller absolute mean deviations for proton and electron affinities, 5.38 kJ/mol and 0.107 eV, respectively, for the 65 molecules used in the validation process. This methodology in comparison with composite methods G3(MP2) and G3(B3), has a lower absolute deviation. Another advantage is the lower computational cost. This methodology when applied to the cholesterol autoxidation mechanisms gives a good agreement with experimental data. The results indicate that the reaction proceeds through the attach at the equatorial position. The next steps involve epoxidation and hidratation reactions. The oxigen is transfered from hydrogen peroxide to cholesterol molecule. The insaturation is broken and the cholesterol triol molecule is formed Mestrado Físico-Química Mestre em Química

[eng] Cholesterol accumulation in mitochondrial membranes is a common feature of various chronic diseases, such as cardiovascular disease, cancer, and Alzheimer's as well as liver diseases. Studies prior to this doctoral thesis have shown that the increase in mitochondrial cholesterol (mChol) alters the physical properties of mitochondrial membranes and negatively impacts the organelle function. These intracellular changes in turn initiate a sequence of pathological processes that end up resulting in cell and tissue damage. Based on these data, the main objective of this doctoral thesis has been to identify new effects that mChol accumulation produces on liver mitochondrial functionality. Likewise, we have also wanted to characterize the pathological mechanisms associated with the accumulation of mChol in two hepatic diseases: alcoholic liver disease and Niemann-Pick type C disease (NPC). To address these objectives, the following studies have been carried out. Study 1) Characterization of mChol accumulation effects on functionality of mitochondria in liver tissue. Previous studies have shown that the accumulation of mChol increases the rigidity of mitochondrial membranes and prevents the import of the antioxidant glutathione (GSH), thus causing mitochondrial dysfunction. The results of this thesis show new mechanisms associated with the increase in mChol, including an increase in the cholesterol transporters to mitochondria StARD1 and MLN64, and an alteration in mitochondrial morphology. In addition, it has been shown that cholesterol enrichment also decreases membrane potential and mitochondrial respiration, while altering the assembly of respiratory supercomplexes. This mChol accumulation causes liver damage, reflected by an increase in oxidative stress, a decrease in mGSH, and an increase in transaminase levels. This liver damage, as well as the other previously mentioned parameters, can be reversed with the use of glutathione ester, a compound that increases the levels of mGSH. Study 2) Identification of the effects of alcohol consumption on the levels of mChol and its transporter StARD1 throughout the liver acinus. In recent decades, several molecules and signaling pathways involved in the pathology of alcoholic liver disease have been described. Among them, it has been observed that the accumulation of mChol induces GSH depletion and an increase in oxidative stress, resulting in liver damage. In this thesis, StARD1 has been characterized as the main regulator of mChol accumulation in alcoholic liver disease. Alcohol consumption has been shown to increase the expression of StARD1 specifically in the perivenous areas of the liver. In this same region, the greatest accumulation of mChol, GSH depletion and increased oxidative stress are observed. Additionally, it has been observed that alcohol consumption dramatically affects the mitochondrial morphology of hepatocytes from the perivenous area compared to the periportal ones. It has been shown that the role of StARD1 is relevant in this mechanism, since its absence in mice deficient in StARD1 interrupts the accumulation of mChol in perivenous hepatocytes after alcohol intake, as well as the consequent increase in oxidative stress and liver damage. Study 3) Investigation of the role of StARD1 in the mechanisms associated with mChol accumulation in Niemann-Pick type C disease. mChol accumulation is a hallmark of NPC disease, causing mitochondrial dysfunction and depletion of antioxidant defenses. Following these previous data, the results of this thesis connect the increase in mChol in NPC with an increase in StARD1 and a deficiency of acid ceramidase. It has been observed that while mChol and StARD1 levels are increased in NPCs, those of acid ceramidase are decreased. Significantly, and as a possible mechanism for reversing the NPC phenotype, it has been observed that overexpression of acid ceramidase induces a reduction in StARD1 and mChol levels, as well as an improvement in the mitochondrial and cellular functionality of NPC fibroblasts. As a summary, this doctoral thesis describes new effects that mChol accumulation produces on liver mitochondrial functionality as well as reveals new pathological mechanisms associated with alcoholic liver disease and NPC disease, findings that may provide new treatment opportunities for both diseases., [cat] L'acumulació de colesterol a les membranes mitocondrials és una característica comuna de diferents malalties cròniques, com malalties cardiovasculars, càncer i Alzheimer a més de malalties hepàtiques. Estudis previs a aquesta tesi doctoral han demostrat que l'augment de colesterol mitocondrial (mCol) altera les propietats físiques de les membranes mitocondrials i impacta negativament en la funció de l'orgànul. Aquests canvis intracel·lulars inicien alhora una seqüència de processos patològics que acaben resultant en dany cel·lular i tissular. Considerant aquestes dades, l'objectiu principal d'aquesta tesi doctoral ha estat identificar nous efectes que l'acumulació de mCol produeix en la funcionalitat mitocondrial hepàtica. També s'han volgut caracteritzar els mecanismes patològics associats a l'acumulació de mCol en dues malalties hepàtiques: l'hepatopatia alcohòlica i la malaltia de Niemann- Pick tipus C (NPC). Aquesta tesi descriu nous mecanismes associats a l'increment de mCol que causen dany hepàtic: augment del transportador de mCol StARD1, alteració de la morfologia i respiració mitocondrial, i pertorbació de l'acoblament dels supercomplexos respiratoris. Aquestes observacions són rellevants per entendre les conseqüències de l'enriquiment de mCol en el context de la malaltia hepàtica i es podrien investigar en altres malalties cròniques que també presenten aquest fenotip. Considerant la importància de l'acumulació de mCol a l'hepatopatia alcohòlica i la malaltia de NPC, els resultats d'aquesta tesi revelen un nou mecanisme patològic comú que involucra StARD1. La inducció de StARD1, l'enriquiment de mCol i l'esgotament del glutatió mitocondrial són responsables de la disfunció mitocondrial i l'estrès oxidatiu subjacent en el fenotip d'ambdues malalties, alteracions que es podrien explorar per al desenvolupament de teràpies potencials per a aquestes patologies., [spa] La acumulación de colesterol en las membranas mitocondriales es una característica común de distintas enfermedades crónicas, como enfermedades cardiovasculares, cáncer y Alzheimer además de enfermedades hepáticas. Estudios previos a la presente tesis doctoral han demostrado que el aumento de colesterol mitocondrial (mCol) altera las propiedades físicas de las membranas mitocondriales e impacta negativamente en la función del orgánulo. Estos cambios intracelulares inician a su vez una secuencia de procesos patológicos que terminan resultando en daño celular y tisular. En base a estos datos, el objetivo principal de esta tesis doctoral ha sido identificar nuevos efectos que la acumulación de mCol produce en la funcionalidad mitocondrial hepática. Así mismo, también se han querido caracterizar los mecanismos patológicos asociados a la acumulación de mCol en dos enfermedades hepáticas: la hepatopatía alcohólica y la enfermedad de Niemann-Pick tipo C (NPC). La presente tesis describe nuevos mecanismos asociados al incremento de mCol que causan daño hepático: aumento del transportador de mCol StARD1, alteración de la morfología y respiración mitocondrial, y perturbación del ensamblaje de los supercomplejos respiratorios. Estas observaciones son relevantes para entender las consecuencias del enriquecimiento de mCol en el contexto de la enfermedad hepática y podrían investigarse en otras enfermedades crónicas que también presentan este fenotipo. Considerando la importancia de la acumulación de mCol en la hepatopatía alcohólica y la enfermedad de NPC, los resultados de esta tesis revelan un nuevo mecanismo patológico común que involucra StARD1. La inducción de StARD1, el enriquecimiento de mCol y el agotamiento del glutatión mitocondrial son responsables de la disfunción mitocondrial y el estrés oxidativo que subyace en el fenotipo de ambas enfermedades, alteraciones que se podrían explorar para el desarrollo de terapias potenciales para estas patologías.

ABSTARCT Introduction: Cardiovascular disease (CVD) continues to be an essential cause of morbidity and mortality among people living with human immunodeficiency virus infection (PLWH). Since the bulk of cardiovascular risk (CVR) factors are shared between PLWH and the general population, prevention and treatment strategies are similar. However, there are CVR factors particular to PLWH, which need separate consideration. These factors are those HIV-dependent, those related to HIV-derived consequences, and combination antiretroviral therapy (cART)-dependent. Areas covered: In this review, the authors discuss the management of CVD in PLWH, with a special interest in pharmacological treatment and drug-drug interactions with cART. Expert opinion: In recent years, we have witnessed a decreased CVD morbidity and mortality in PLWH, which probably reflects an improvement in the management of CVR factors and CVD in these patients, partially thanks to new developments in antiretroviral therapy. Therefore, although there is still room for improvement, at present, the old desideratum of equaling PLWH and the general population in terms of CVD incidence and prognosis is a little closer.

Fil: Barrantes, Francisco José. Pontificia Universidad Católica Argentina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina Fil: Barrantes, Francisco José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas de Argentina; Argentina Abstract: Lipid membrane domains are supramolecular lateral heterogeneities of biological membranes. Of nanoscopic dimensions, they constitute specialized hubs used by the cell as transient signaling platforms for a great variety of biologically important mechanisms. Their property to form and dissolve in the bulk lipid bilayer endow them with the ability to engage in highly dynamic processes, and temporarily recruit subpopulations of membrane proteins in reduced nanometric compartments that can coalesce to form larger mesoscale assemblies. Cholesterol is an essential component of these lipid domains; its unique molecular structure is suitable for interacting intricately with crevices and cavities of transmembrane protein surfaces through its rough β face while "talking" to fatty acid acyl chains of glycerophospholipids and sphingolipids via its smooth α face. Progress in the field of membrane domains has been closely associated with innovative improvements in fluorescence microscopy and new fluorescence sensors. These advances enabled the exploration of the biophysical properties of lipids and their supramolecular platforms. Here I review the rationale behind the use of biosensors over the last few decades and their contributions towards elucidation of the in-plane and transbilayer topography of cholesterol-enriched lipid domains and their molecular constituents. The challenges introduced by super-resolution optical microscopy are discussed, as well as possible scenarios for future developments in the field, including virtual ("no staining") staining.