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Climate change is increasing average temperatures and intensity and frequency of extreme events such as heat waves. Productivity declines and plant damage due to those changes are already described for several majority varieties, especially in the Mediterranean basin. Less explored minority varieties can arise as alternatives due high heat tolerance, or for having high acclimation potential to heat. We evaluated the heat tolerance after acclimation in three summer thermic environments of four Spanish varieties: two majority (‘Tempranillo’, ‘Airén’) and two minority (‘Jarrosuelto’, ‘Morate’). Summer thermic environments differed in average temperature, and length of the warm period. Varieties differed in heat tolerance and its plasticity due to the acclimation to the environments. Within the majority varieties, ‘Tempranillo’ showed low heat tolerance and moderate plasticity in heat tolerance highlighting its susceptibility to climate change. ‘Airén’ had slightly higher tolerance than ‘Tempranillo’ and certain adaptation capacity to environments. Within the minority, ‘Jarrosuelto’ had high tolerance to heat events but low heat tolerance plasticity. ‘Morate’ was the variety with highest heat tolerance plasticity, indicating its strong adaptive potential. Majority varieties displayed susceptibility to heat events and global warming negative effects. However, minority varieties can offer solutions either by having high tolerance to heat or by having high acclimation.

This work consists in the morphological characterization of eight Pisco grapes varieties "Torontel, Italia, Mollar, Quebranta, Negra criolla, Albilla, Moscatel and Uvina" cultivated in the CITEagroindustrial, based on the International Organization of Vine and Wine (OIV) list of descriptors for vine varieties and Vitis species, version 2009. Some ampelographic characters such as berry color and shape during the phenological stage are general knowledge, however the 56 descriptors in different phenological stages highlight differences. Therefore, the description of the varieties provides a greater precision to the characterization and serves as a guide to the producers of Pisco and producers of grapes, for a simple and correct identification of their plants in the field, avoiding the confusion that currently exists in the Identification of the different varieties, such as homonymy and incorrect identification. El estudio consiste en la caracterización morfológica de las ocho variedades de uvas pisqueras “Torontel, Italia, Mollar, Quebranta, Negra criolla, Albilla, Moscatel y Uvina” cultivadas en el CITEagroindustrial. Se utilizó la lista de descriptores de la Organización Internacional de la Viña y del Vino para variedades de vid y especies de Vitis versión 2009. Algunos de los caracteres ampelográficos como el color y forma de las bayas del estado fenológico de maduración es información generalizada; sin embargo, al evaluar los 56 descriptores en otros estados fenológicos se observan diferencias. Por lo tanto, la descripción de las variedades que se muestran aportan una mayor precisión a la caracterización y sirven de guía a los productores de Pisco y productores de uvas para la sencilla y correcta identificación en campo de sus plantas, ya que existe confusión en la identificación de las distintas variedades, como la homonimia y la identificación incorrecta de variedades.

La vid es un cultivo de propagación vegetativa y de gran importancia económica cuyo cultivo se distribuye mundialmente por zonas templadas. Su producción va destinada principalmente a la elaboración de vino, seguido de la producción de uva de mesa. Aunque existen miles de variedades, una decena de ellas son las que se utilizan mayoritariamente a nivel mundial lo que conlleva a una pérdida de variabilidad. Desde la llegada de la filoxera, el cultivo de la vid se realiza mediante injerto en pies resistentes a este áfido. Según la Comisión Directiva 2005/43/EC el material de propagación de vid debe estar libre de los siguientes virus: GFLV, GLRaV-1, GLRaV-3, GFkV y ArMV. En este trabajo se han evaluado y desarrollado distintas metodologías relacionadas con el cultivo in vitro de plantas encaminadas al saneamiento, multiplicación y conservación de germoplasma de vid. La conservación de variedades de vid in vitro es muy importante para complementar la conservación de germoplasma de las colecciones de campo. Para ello es importante seleccionar el material a conservar, determinar su estado sanitario, sanear si es el caso y establecer las condiciones adecuadas para su conservación. En un primer capítulo de esta tesis (Capítulo 1) se describen los ensayos realizados para inducir la embriogénesis somática en 16 variedades de vid que incluyen seis variedades infectadas con los virus GFLV, GLRaV-3 y GFkV. La embriogénesis somática ha sido descrita en vid como una metodología útil para el saneamiento de plantas infectadas con virus y es la vía común de regeneración adventicia.. En este trabajo se utiliza como material de partida semillas cortadas y se han obtenido plantas libres de virus y porcentajes de regeneración elevados en todas las variedades evaluadas. La utilización de marcadores microsatélites nos ha servido para seleccionar entre las plantas regeneradas aquellas que muestran el mismo genotipo que las plantas de partida. Por otra parte, en este trabajo se ha desarrollado un protocolo de micropropagación a partir de planta sana de la variedad 'Monastrell' cultivada in vitro obteniéndose tasas de multiplicación elevadas y plantas que se han aclimatado a condiciones de campo (Capítulo 2). El medio de cultivo MW, utilizado para el desarrollo de las plantas, se ha evaluado en otras 16 variedades y también se ha comparado el crecimiento en este medio y en variaciones de éste, como son la disminución de la concentración de azúcar a la mitad y la eliminación del ácido indolbutírico. La finalidad de estos ensayos ha sido determinar para cada variedad qué condiciones son las más adecuadas para mantener el germoplasma vegetal en cultivo in vitro activo, pero alargando el tiempo entre subcultivos optimizando costes (Capítulo 3). En el Capítulo 4 se incluye un trabajo para localizar, identificar, descartar o detectar la presencia de los virus anteriormente comentados, sanear si es el caso, y conservar in vitro las variedades de interés en las que se lleva a cabo una identificación utilizando marcadores SSR y un análisis de variabilidad genética cuando se dispone de varias accesiones. A modo de ejemplo, en este trabajo se publica el perfil de marcadores microsatélites para dos de las variedades colectadas y/o conservadas, la variedad 'Esclafacherre' ('Esclafagerres') y accesiones de 'Valencí Blanc' en las que se ha detectado diferencias para el marcador VVMD32 que agrupa las accesiones de Alicante por una parte, y al resto de accesiones por otra. También se ha validado un protocolo de crioconservación en la variedad 'Esclafacherre'. Por último, el Capítulo 5 hace referencia a un estudio llevado a cabo para determinar el estado actual de la aplicación de la transformación genética en vid, centrándonos en los factores limitantes de las metodologías empleadas. La transformación genética es una herramienta de gran potencial para la mejora de los cultivos, principalmente en plantas de p, Grapevine is a crop of vegetative propagation with great economical importance which is distributed worldwide in temperate zones. It is mainly used for wine and table grape production. Despite the fact thousands of varieties exist only few are commonly used, producing a loss of variability. Since the arrival of the phylloxera aphid the grapevine culture is performed using resistant rootstocks. The Directive Commission 2005/43/EC amending the Directive Council annexes 68/193/EEC, indicates that grapevine material should be free of these viruses: Grapevine fanleaf virus (GFLV), Grapevine leafroll associated virus 1 (GLRaV-1), Grapevine leafroll associated virus 3 (GLRaV-3), Grapevine fleck virus (GFkV) and Arabis mosaic virus (ArMV). In this work different methodologies related with in vitro culture were evaluated and developed with the aim of sanitate, mutiplicate and preserve grapevine germplam. In vitro preservation of grapevine varieties is a complementary stratregy of field preservation. In a preservation program it is important the selection of the starting material, determine its sanitary status, sanitate if it is necessary and, establish the appropriate in vitro conditions for its preservation. In the first chapter of this thesis (Chapter 1) the assays carried out for inducing somatic embryogenesis in 16 grapevine varieties which include six that were infected by the viruses GFLV, GLRaV-3 and GFkV are described. In grapevine, somatic embryogenesis has been described as a usefull methodology for virus sanitation and is the common pathway to adventitious regeneration. Efficient regeneration prototocols are necessary to address breeding by genetic transformation. In this work, cut seed are used as starting material and virus-free plants and high precentages of regeneration were obtained in all the varieties evaluated. The use of microsatellite markers has been useful to select those plants with the same genotype than the mother plant. From the other side, in this work, a micropropagation protocol starting from a healthy plant of the cultivar 'Monastrell' was developed and high multiplication rates with good adaptation to field conditions were obtained (Chapter 2). The culture medium MW was evaluated in 16 grapevine varieties as well as the following modifications: reduction in a half of the sugar content and elimination of the Indolebutyric Acid. The aim of these assays was to determine for each variety which conditions are the most appropiate to maintain in active in vitro culture this germplasm, lengthen the time between subcultures for reducing costs (Chapter 3). In Chapter 4 it is included a divulgation report that summarized the steps followed in the MINECO proyect CGL2015-70843-R for localizing and identifying grapevine varieties; discard or detect the presence of the viruses, sanitizing if it is necessary and, conserve in vitro the most interesting accessions. Microsatellite markers were used for genotyping. Analysis of variability were performed when several accessions were available. As an example, in this work it is published the microsatellite profile for two accessions of the endangered cultivar 'Esclafacherre' ('Esclafagerres') localized in two fields of the Valencian Community, and those of several accessions of 'Valencí Blanc' which differed for the VVMD32 marker, grouping the Alicante accessions and the rest of accessions from other origins. It was also validated a cryoconservation protocol for the 'Esclafacherre' variety. By last, Chapter 5 makes reference to a review performed with the goal to know the state of the art of genetic transformation in grapevine focusing on the main limiting factors of the employed methodologies. Genetic transformation is a potential tool for crop breeding, mainly in vegetative propagation plants., La vinya és un cultiu de propagació vegetativa i de gran importància econòmica que es distribueix mundialment per zones temperades. La seua producció va destinada principalment a l'elaboració de vi, seguit de la producció de raïm de taula. Encara que existeixen milers de varietats, una desena d'elles son les que s'utilitzen majoritàriament a nivell mundial, el que comporta una pèrdua de variabilitat. Des de l'arribada de la fil·loxera, el cultiu de vinya es realitza mitjançant l'ampelt en peus resistents a aquest àfid. Segons la Comissió Directiva 2005/43/EC, el material de vinya ha d'estar lliure dels següents virus: GFLV, GLRaV-1, GLRaV-3, GFkV i ArMV. En este treball s'han avaluat i desenvolupat diferents metodologies relacionades amb el cultiu in vitro de plantes encaminades al sanejament, multiplicació i conservació de germoplasma de raïm. La conservació de varietats de raïm in vitro és molt important per a complementar la conservació de germoplasma en les col·leccions de camp. En el primer capítol d'esta tesi (Capítol 1) es descriuen els assaigs realitzats per a induïr l'embriogènesi somàtica en 16 varietats de raïm que inclouen sis varietats infectades amb els virus GFLV, GLRaV-3 i GFkV. En vinya, l'embriogènesi somàtica ha sigut descrita com una metodologia útil per al sanejament de plantes infectades amb virus i és la via comú de regeneració adventícia. En este treball s'utilitza com a material de partida llavors tallades i s'han obtingut plantes lliures de virus i percentatges de regeneració elevats en totes les varietats avaluades. La utilització de marcadors microsatèl·lits ens ha servit per a seleccionar entre les plantes regenerades aquelles que mostren el mateix genotip que les plantes de partida. Per altra banda, en este treball s'ha desenvolupat un protocol de micropropagació a partir de planta sana de la varietat 'Monastrell' cultivada in vitro, obtenint-se taxes de multiplicació elevades i plantes que s'han aclimatat a condicions de camp (Capítol 2). En el medi de cultiu MW, utilitzat per al desenvolupament de les plantes, s'han avaluat un total de 16 varietats i també s'ha comparat el creixement en este medi i en variacions d'este, com son la disminució de la concentració de sucre a la meitat i la eliminació de l'àcid indolbutíric. La finalitat d'estos assaigs ha sigut determinar per a cada varietat quines condicions són les més adequades per a mantindre el germoplasma vegetal en cultiu in vitro actiu però allargant el temps entre subcultius i optimitzant costos (Capítol 3). En el Capítol 4 s'inclou un treball de divulgació per a localitzar, identificar, descartar o detectar la presència dels virus anteriorment comentats, sanejar si cal, i conservar in vitro les varietats d'interés en les que es porta a cap una identificació utilitzant marcadors SSR i l'anàlisi de la variabilitat genètica quan es disposa de diverses accessions. A mode d'exemple, en estre treball es publica el perfil de marcadors microsatèl·lits per a dos de les accessions col·lectades de la varietat en perill d'extinció 'Esclafacherre' ('Esclafagerres'). També, es mostra el genotipat d'accessions de 'Valencí Blanc' en les que s'han detectat diferències per al marcador VVMD32 que agrupa les accessions d'Alacant per una banda, i a la resta d'accessions per altra. També s'ha validat un protocol de crioconservació en la varietat 'Escalfacherre'. Per últim, el Capítol 5 fa referència a un estudi portat a terme per a determinar l'estat actual de l'aplicació de la transformació genética en raïm, centrant-nos en els factors limitants de les metodologies empleades. La transformació genética és una ferramenta de gran potencial per a la millora dels cultius, principalment en plantes de propagació vegetativa.

De acuerdo al tipo de respuesta estomática, muchas especies han sido clasificadas como isohídricas o anisohídricas. Las plantas isohídricas son aquellas que cierran sus estomas cuando sensan una caída en el potencial hídrico del suelo, o un aumento en la demanda atmosférica. Al contrario, las plantas anisohídricas no cierran sus estomas y continúan transpirando aun cuando el contenido hídrico del suelo disminuya. Como consecuencia, su potencial hídrico foliar (ΨL ) cae, y la planta sufre estrés hídrico. En general, se considera que la vid es una planta que evita el estrés hídrico mediante un manejo estomático eficiente. Sin embargo, algunas variedades han mostrado tener un control más estricto que otras. Por esto, algunas variedades pueden ser clasificadas como isohídricas o anisohídricas. Actualmente, esta clasificación se encuentra bajo gran controversia debido a que muchas variedades clasificadas de una manera, mostraron comportamientos opuestos según diferentes situaciones ambientales, climáticas y edáficas. En consecuencia, muchos autores opinan que para variedades de vid esta clasificación no es correcta ni rigurosa. Nuestro estudio pone en revisión, una vez más, el comportamiento de cuatro variedades de vid: (Syrah, Grenache, Malbec y Chardonnay) bajo déficit hídrico moderado, tratando de explicar los comportamientos según variables fisiológicas como conductancia estomática (gs ), conductancia hidráulica (kH) y déficit parcial de vapor (dpv); definiendo qué comportamiento confiere mayor tolerancia a sequía. In accordance to the type of stomatal response, many species have been classified as isohydric or anisohydric. Isohydric plants are those that close their stomata when they sense a drop in soil water potential, or an increase in the atmospheric demand. On the contrary, anisohydric plants continue to transpire even when soil water content diminishes, because of a poor stomatal adjustment capacity. As consequence, their leaf water potential (ΨL ) falls, and the plant suffers increasing stress. In general, grapevine is considered a water stress avoidant species, with a tight stomatal control. However, some varieties have shown a more efficient stomatal control than others. This encouraged researchers to classify grapevine varieties as isohydric or anisohydric. At present, this classification is under great controversy, as many of the varieties that initially were classified under one behaviour, have shown opposite performances under different climatic, edaphic and growth conditions. Consequently, many authors believe that this classification among grapevine varieties may not be completely clear and accurate. Our study revises, once more, the varietal behaviour of four grapevine varieties, namely Syrah, Grenache, Malbec and Chardonnay, under mild water stress conditions; and tries to determine which behaviour confers best stress tolerance. We intended to determine whether isohydric behaviour results in more tolerance to drought than anisohydric behaviour, as assumed and tried to explain both types of behaviour giving attention to stomatal conductance (gs ); hydraulic conductance (kL ) and vapour pressure deficit (vpd), as postulated by others. EEA Mendoza Fil: Hugalde, Ines Pilar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Mendoza. Laboratorio de Viticultura; Argentina Fil: Vila, Hernan Felix. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Mendoza. Laboratorio de Viticultura; Argentina

[ES] España es el segundo país en cuanto a área agrícola cultivada en la Unión Europea y se posiciona como el primer país con superficie de viñedo a nivel mundial, con más de novecientas mil hectáreas cultivadas en toda la península. Por lo tanto, el sector vitivinícola español tiene gran relevancia a nivel mundial. La normativa de la Unión Europea obliga a la regulación fitosanitaria de los productos vegetales que son introducidos en los países miembros. La legislación española, así mismo, prohíbe la introducción y propagación en el país de virus y organismos afines, infecciosos para variedades de Vitis, y obliga al control de aquellos fitopatógenos sobre los que ya se tiene constancia. Por lo que es necesario controlar los patógenos que afectan a estos cultivos a fin de evitar pérdidas de producción y de calidad del producto vegetal final. En este sentido, los virus de mayor relevancia económica para el cultivo de la vid son Grapevine fleck virus (GFkV), Grapevine virus A (GVA), Grapevine virus B (GVB), Grapevine leafroll-associated virus 1 (GLRaV-1), Grapevine leafroll-associated virus 2 (GLRaV-2), Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), Grapevine fanleaf virus (GFLV), Strawberry latent ringspot virus (SLRSV), Raspberry ringspot virus (RPRSV), Arabis mosaic virus (ArMV) y Tomato black ring virus (TBRV). En este proyecto, se pretende desarrollar una metodología de PCR para la detección múltiple de los principales virus que afectan a vid, anteriormente mencionados, en una misma muestra vegetal. Para ello se diseñaron cebadores específicos de regiones conservadas entre cepas de la misma especie viral, como son los genes que codifican para las proteínas de la cápsida, así como sondas específicas de cada especie viral marcadas con diferentes fluoróforos. De este modo, se diseñaron “in silico” parejas de cebadores que teóricamente pudieran amplificar en base a sus características moleculares (porcentaje de citosina y guanosina, formación de homodímeros y heterodímeros…) y, además, se establecieron las condiciones de reacción de PCR óptimas. Una vez elegidos los cebadores y las condiciones de la PCR-multiplex ideales, se procedió a realizar las pruebas experimentales con los controles (positivo, negativo, de la extracción del ARN) para optimizar todo el proceso. En una última fase, se aplicó la metodología desarrollada al análisis fitopatológico de muestras vegetales de campo, procedentes de diferentes lugares y variedades de vid, para comprobar que la metodología funcionaba adecuadamente. El objeto del presente proyecto es, por tanto, el desarrollo de una tecnología de PCR-multiplex para el análisis de los principales virus patógenos de la vid. Con el fin de diagnosticar su presencia una misma muestra, reduciendo el número, coste y tiempo de los análisis y así mejorar las técnicas de diagnóstico, detección y saneamiento empleadas en ValGenetics SL., [EN] Spain is the second country with highest agricultural cultivated area in the European Union and it is positioned as the first country in large cultured vineyard surface worldwide, with more than nine hundred thousand hectares cultivated. Therefore, the Spanish wine sector is economically important at international level. The phytosanitary directive of the European Union controls the sanitary state of plant products that are introduced in or move between the member countries. The Spanish law also prohibits the introduction and spread of phytopathological viruses and other infectious organisms in Vitis, thus it forces to the control of those viral species. In this way, it is necessary to detect these pathogenic viruses in order to avoid losses in grape production and in the final product quality. On this regard, the viruses of major economic relevancy infecting grapevine varieties are Grapevine fleck virus (GFkV), Grapevine virus A (GVA), Grapevine virus B (GVB), Grapevine leafroll-associated virus 1 (GLRaV-1), Grapevine leafroll-associated virus 2 (GLRaV-2), Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3), Grapevine fanleaf virus (GFLV), Strawberry latent ring spot virus (SLRSV), Raspberry ringspot virus (RPRSV), Arabis mosaic virus (ArMV) and Tomato black ring virus (TBRV). To reduce the number, cost and time of analysis, there is a need in detecting several viruses in a single genetic analysis. In this project, three PCR-multiplex tests have been developed in order to detect the above indicated principal grapevine viral species. For this aim, specific primers of conserved genomic regions, like capsid protein coding genes, were designed, as well as specific TaqMan probes, labeled with different dyes, targeting each of the viral species studied. Each couple of primers, was designed on the basis of its molecular characteristics (percentage of cytosine and guanine, self-dimers and hetero-dimer formation…) and the optimum PCR conditions were tested ¨in silico¨. Once the primers sequences and the optimum PCR-multiplex conditions were established, the experimental PCR-multiplex tests were initially performed with controls (positive, negative and ARN extraction) to optimize the whole analytical process. Afterwards, the developed PCR-multiplex methodology was applied for the analysis of field samples from different places and distinct varieties of grapevine, to verify the methodology. The objective of the present project is, therefore, the development of a PCR-multiplex's technology to analyse the most important viruses affecting grapevine in three single analyses. In this work sampling, number, cost and time of the phytopathological analyses could be reduced and the diagnostic technologies and detection in plant sanitation experiments applied in ValGenetics SL improved.

[ES] La vid (Vitis vinifera L.) representa uno de los cultivos con más importancia tanto a nivel nacional como mundial. De este cultivo se obtienen multitud de productos entre los que destacan la uva de mesa para consumo en fresco y el vino obtenido de la uva de vinificación. Preservar la variabilidad de la vid mediante la conservación de germoplasma es de gran interés para poder afrontar nuevas necesidades. La preservación de los recursos genéticos incluye la recuperación, identificación y caracterización de las variedades con especial interés de aquellas minoritarias en peligro de desaparición. Una de las herramientas de escaso uso pero de gran interés en vid, cuya propagación es vegetativa, es la conservación in vitro de material vegetal. Esta técnica permite conservar el material en condiciones controladas que reducen el riesgo de pérdidas causadas por distintos factores ambientales y meteorológicos y es ideal para mantener duplicados de las colecciones que se mantienen en campo. Es importante para una conservación in vitro eficiente reducir el número de subcultivos, para optimizar los recursos y reducir el riesgo de contaminaciones. Este tipo de metodología requiere del ajuste de medios y condiciones de cultivo específicos para cada variedad, que permitan minimizar el crecimiento sin detrimento de la viabilidad. En este estudio se ha evaluado el desarrollo in vitro de tres variedades de uva, Monastrell, Esclafacherre y Bobal, en medio de cultivo estándar (MW) y en este medio con distintas modificaciones: reduciendo el azúcar a la mitad (MW S/2), no adicionando la auxina IBA (MW IBA 0) y la combinación de reducir el azúcar y eliminar la auxina (MW S/2 IBA 0). También se ha estudiado la influencia del genotipo y de los factores modificados. Las tres variedades han mostrado variabilidad en cuanto a su crecimiento, siendo la variedad Esclafacherre la que presenta menor desarrollo radicular y vegetativo respecto a las otras dos variedades. La reducción de azúcar ha supuesto mayor desarrollo vegetativo y mayor desarrollo radicular Como era esperable, un menor desarrollo de la raíz se ha manifestado en los medios sin auxina. El medio con la concentración de azúcar reducida ha sido el que más ha favorecido el crecimiento en las tres variedades, superando el obtenido en el medio estándar MW. Este medio sería más adecuado para la micropropagación de estas variedades. El medio con la concentración de azúcar reducida y sin IBA ha resultado el más adecuado para la conservación in vitro de las variedades Monastrell y Esclafacherre ya que en él se ha obtenido el menor crecimiento. En el caso de la variedad Bobal el crecimiento ha sido similar en medio MW, MWS/2 y medio MWS/2 IBA 0, con un menor desarrollo radicular en este último y también podría utilizarse éste para su conservación in vitro., [EN] Grapevine (Vitis vinifera L.) represents one of the most important crops worldwide with great importance in Spain. Table grape for fresh consumption and the wine obtained from the wine grapes are the most important products. Variability preservation of the grapevine cultivars, especially those with risk of extinction is of great interest in order to face with future needs. Preservation of the genetics resources includes indentification and characterization of grape varieties. In grape, that is vegetatively propagated, in vitro culture is an effective tool for plant material preservation. It is interesting, in order to reduce the number of subcultures and optimice resources, the adjustment of specific media and culture conditions for each variety that minimize growth without loss of viability. In this study the development of three grapevine varieties, Monastrell, Esclafacherre and Bobal, have been evaluated in standard culture medium (MW) and in this medium with half sucrose concentration (MW S/2), without IBA (MW IBA 0) or both (MW S/2 IBA 0). The influence of genotype and the modified factors have also been studied. The three varieties have shown variability in their growth. Esclafacherre was the variety with the lowest root and vegetative development. In medium with reduced sucrose concentration higher growth respect in the standard medium MW was observed. Thus, this medium would be the most appropriate for micropropagation. Lack of IBA in the medium reduced root and vegetative growth. The medium with reduced sucrose and without IBA has been the most adequated for Esclafacherre and Monastrell in vitro conservation because in this medium the lowest growth was observed. In the Bobal case, growth was similar among MW, MW S/2 and MW S/2 IBA0 with lower root development in the latter. Therefore, it could be also used for in vitro preservation.

El transporte del agua en las plantas es impulsado por diferencias de energía libre entre el suelo y la atmósfera, y está regulado por mecanismos biológicos evitadores, como el cierre estomático. La hidratación y la turgencia foliares resultan del equilibrio entre ΨL del apoplasto, el potencial osmótico del simplasto y la elasticidad de los tejidos. Sobre esta base se conjeturó que las interacciones de los mecanismos evitadores del estrés hídrico de la planta tienen un rol clave en la definición de su resistencia a déficit hídrico. Para probar esta hipótesis se construyó un modelo mecanístico basado en las leyes del flujo de savia de Van de Honert, de difusión de Fick, de elasticidad de Hooke, la ecuación de Gardner para el flujo del agua en la rizósfera y el modelo de conductancia estomática (gs) de Buckley. Mediante el modelo se demostró teóricamente que la hidratación y la turgencia foliares dependen de la oferta de agua edáfica (representada por el potencial hídrico del suelo) y de la demanda evaporativa de la atmósfera (representada por la radiación absorbida, la temperatura del aire, la velocidad del viento y el déficit de presión de vapor de la atmósfera). También que los mecanismos evitadores del estrés hídrico -i.e., conductancia hidráulica de la planta, conductancia estomática, elasticidad del tejido y potencial osmótico a turgencia máxima- son todos necesarios para determinar la hidratación y la turgencia foliares. El modelo también demostró que la conductancia hidráulica suelo-hoja (kL) depende de la fracción de agua edáfica transpirable (FTSW) con un patrón de decaimiento sigmoide, a medida que el suelo se seca. Esto implica que las variables que dependen en parte de kL (i.e., gs, transpiración, fotosíntesis y superficie foliar) también dependen de FTSW con el mismo patrón. El modelo se probó experimentalmente a distintos niveles de humedad edáfica (desde déficit hídrico nulo, hasta severo) en cinco variedades de vid y mostró un poder predictivo superior al 90%. En todas las variedades las gs se asociaron linealmente con las kL observadas, al considerar todas las situaciones de déficit hídrico en conjunto, si bien la pendiente de estas relaciones fueron distintas en cada variedad. La contrastación experimental mostró que, en una escala de tiempo de varios meses, las variedades más evitadoras -i.e., Grenache y Cereza- mantuvieron mayor kL, ajuste osmótico y rigidez de los tejidos y una menor pendiente de la relación de gs vs. kL, que las variedades menos evitadoras -i.e., Malbec y Syrah-. La menor pendiente de la relación entre gs y kL, en las variedades más evitadoras, estuvo asociada a una mayor cantidad de estomas, en relación con la cantidad de células epidérmicas. Los variedades más evitadoras bajo déficit hídrico moderado -i.e., con una fracción de agua edáfica transpirable entre 0,6 y 0,4- tuvieron mayor superficie foliar y produjeron más biomasa, favoreciendo raíces profundas y densas, y ahorrando agua. Chardonnay mantuvo una alta hidratación y turgencia a expensas de un alto gasto de agua debido a que privilegiaba una alta kL por sobre el ajuste estomático, por lo que no podría considerarse en forma estricta como muy evitadora. Water transport in plants is driven by the free energy difference between soil and atmosphere, and regulated by biological avoidance mechanisms like stomatal closure. Leaf hydration and turgor depend on the equilibrium between apoplastic ΨL, symplastic osmotic potential and tissue elasticity. Based on these considerations, it was hypothesized that interactions between plant water stress avoidance mechanisms play a key role on the plant resistance to water deficit. To demonstrate this, a mechanistic model based on the equations of Van de Honert (for sap flow), Fick (for transpiration), Hooke (for elasticity), Gardner (for soil water flux), and Buckley (for stomatal adjustment), was constructed. Using the model it was theoretically shown that leaf hydration and turgor depended on soil water supply (represented by the water potential of the soil) and on atmospheric evaporative demand (represented by the values of absorbed radiation, air temperature, wind speed and vapor pressure deficit). The model also showed that the avoidance mechanisms [plant hydraulic conductance (kL), stomatal conductance (gs), tissue elasticity and osmotic potential at full turgor (Ψπ100)] are all necessary to define leaf hydration and turgor. It also demonstrated that the soil to leaf kL depends on the fraction of transpirable soil water (FTSW) with a sigmoid pattern as the soil dries, similar to the variables that depend on kL (i.e., gs, plant transpiration, photosynthesis, and leaf area). The model was experimentally evaluated at different soil moisture levels (from null to severe water deficit) on five grapevine varieties, and it showed a predictive power above 90%. Observed gs values were linearly associated with kL ones in all varieties, considering all levels of water deficit together. Even though, the slope of these relationships was different for each variety. The experiment showed that, on a several months time scale, the more avoidant varieties -i.e., Grenache and Cereza- kept a higher kL, a lower slope of the relation between gs and kL, a lower Ψπ100 and more rigid tissues, than the less avoidant varieties -i.e., Malbec and Syrah-. The lower slope of the relation between gs and kL was associated with the higher number of stomata in relation to the number of epidermal cells in the more avoidant varieties. More avoidant varieties produced higher leaf area and biomass under mild water deficit -i.e., FTSW between 0.6 and 0.4-, had deeper roots and saved irrigation water. In spite of Chardonnay achieving high leaf hydration and turgor at the expense of a high water use, it favored a high kL over an accurate osmotic adjustment and therefore cannot be considered sensu stricto a very avoidant variety. Fil: Vila, Hernán. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Agrarias.

Tesis para obtener el grado de Magister Scientiae en Viticultura y Enología, de la Universidad Nacional de Cuyo, en 2011 La cavitación es una disfunción fisiológica que ocurre en el xilema de las plantas cuando estas están bajo déficit hídrico, y que entraña una pérdida de su conductancia hidráulica (kL), cuando algunos vasos se llenan de aire. Esto incide negativamente sobre la oferta de agua y afecta el potencial hídrico foliar (ΨL) y la hidratación de la canopia. El cierre estomático es una respuesta efectiva ante la disminución del contenido hídrico. Dependiendo de la especie vegetal, los estomas suelen cerrase para evitar la cavitación catastrófica. Una planta poco vulnerable a cavitar puede mantenerlos abiertos por más tiempo y por lo tanto seguir fotosintetizando. Por el contrario, plantas vulnerables a la cavitación deben cerrar sus estomas con anterioridad para poder evitar cavitaciones graves. En este trabajo se estudió, el ajuste estomático como mecanismo para evitar la cavitación en cuatro variedades contrastantes de vid (Grenache, Syrah, Malbec y Chardonnay). Se hipotetizó que las vides sometidas a déficit hídrico disminuyen gs para evitar sufrir cavitaciones catastróficas y que algunas variedades de vid, cuando crecen bajo restricción hídrica, se aclimatan mejor desarrollando un ajuste estomático más preciso, ó un sistema conductor menos vulnerable a cavitar, o ambas. Se diseñó un experimento aleatorizado en invernáculo donde se probaron dos situaciones hídricas edáficas (100% y 50% de FTSW). Luego de dos meses, se midieron, a lo largo del día, las variables gs, transpiración y potencial hídrico. Luego se construyeron las curvas de cavitación y se calculó la conduactancia hidráulica de la planta (kL) y el embolismo a lo largo del día. Finalmente se obtuvo la relación entre gs, kL y el embolismo. Mediante un modelo mecanístico, que se construyó teniendo en cuenta los flujos de agua y vapor, las kL y gs, y la vulnerabilidad del xilema a cavitar; se probó que gs no es la única variable responsable de frenar la embolia. Se determinó que gs y kL están íntimamente asociadas y que este acople entre ambas conductancias es lo que frena la embolia. Se concluyó que, en la vid y bajo niveles de estrés hídrico moderado, no es necesario un cierre estomático para controlar la cavitación, sino una disminución de la diferencia entre gs y kL (Δgs). Por esto, el mecanismo de control de la cavitación en la vid no conlleva un costo en términos de intercambio gaseoso.También se descubrió que bajo niveles moderados de déficit hídrico la vulnerabilidad xilemática no aumenta con respecto a las plantas que no sufren déficit, sin importar de qué variedad se trate. Cavitation is a physiological dysfunction that takes place in the xylem of plants under water stress. It leads to a loss of hydraulic conductance as the vessels are filled with air. This has a negative impact on water supply and affects ΨL and canopy hydration. Stomatal clossure is an effective response upon diminishing momentary or seasonal foliar hydraulic contents. Depending on each type of plant, stomata may close preventing catastrophic cavitations. A not vulnerable to cavitation plant may maintain higher stomatal conductances (gs) and therefore greater photosynthesis, by keeping opened stomata for longer periods of time. On the other hand, vulnerable plants should close their stomata in order to prevent runaway embolism and lost of hydraulic conductance. This research intended to understand how stomatal control acts upon cavitation events in four contrasting grapevine varieties (Grenache, Syral, Malbec and Chardonnay). We hypothesized that water stressed grapevines, reduce gs in order to avoid catastrophic embolism, and that some varieties, when grown under water stress, may acclimatize themselves by the development of a precise stomatal control, or a less vulnerable xylem, or both. A randomized experimental plot inside a greenhouse was conducted (two FTSW treatmentes were determined, 100% and 50%). Quantitative measurements of gs, transpiration, photosynthesis and stem water potential were assessed from predawn to 4 pm, every one our. Two months later, cavitation curves were constructed, and the level of embolism reached along the day and plant hydraulic conductance, were calculated. Finally the relationship among gs, kL and embolism was determined. By means of a mechanistical model that was constructed based on the water and vapour fluxes, kL, gs, and the vulnerability to cavitation of the xylematic tissue, we probed that gs is not the only variable that controls cavitation. It was determined that gs is coupled with kL, and this coupling is the responsible mechanism that achieves embolism control. This leaded us to conclude that grapevines under mild water stress, do not need to close their stomata in order to avoid cavitation. They only need a midmorning decrease in the difference between gs and kL (Δgs), therefore, no cost in terms of carbon assimilation is required. EEA Mendoza Fil: Hugalde, Ines Pilar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Mendoza; Argentina

Tesis para obtener el grado de Doctor en Ciencias Biológicas, con mención en Fisiología Vegetal, de la Universidad Nacional de Cuyo, en 2011 El transporte del agua en las plantas es impulsado por diferencias de energía libre entre el suelo y la atmósfera, y está regulado por mecanismos biológicos evitadores, como el cierre estomático. La hidratación y la turgencia foliares resultan del equilibrio entre ΨL del apoplasto, el potencial osmótico del simplasto y la elasticidad de los tejidos. Sobre esta base se conjeturó que las interacciones de los mecanismos evitadores del estrés hídrico de la planta tienen un rol clave en la definición de su resistencia a déficit hídrico. Para probar esta hipótesis se construyó un modelo mecanístico basado en las leyes del flujo de savia de Van de Honert, de difusión de Fick, de elasticidad de Hooke, la ecuación de Gardner para el flujo del agua en la rizósfera y el modelo de conductancia estomática (gs) de Buckley. Mediante el modelo se demostró teóricamente que la hidratación y la turgencia foliares dependen de la oferta de agua edáfica (representada por el potencial hídrico del suelo) y de la demanda evaporativa de la atmósfera (representada por la radiación absorbida, la temperatura del aire, la velocidad del viento y el déficit de presión de vapor de la atmósfera). También que los mecanismos evitadores del estrés hídrico -i.e., conductancia hidráulica de la planta, conductancia estomática, elasticidad del tejido y potencial osmótico a turgencia máxima- son todos necesarios para determinar la hidratación y la turgencia foliares. El modelo también demostró que la conductancia hidráulica suelo-hoja (kL) depende de la fracción de agua edáfica transpirable (FTSW) con un patrón de decaimiento sigmoide, a medida que el suelo se seca. Esto implica que las variables que dependen en parte de kL (i.e., gs, transpiración, fotosíntesis y superficie foliar) también dependen de FTSW con el mismo patrón. El modelo se probó experimentalmente a distintos niveles de humedad edáfica (desde déficit hídrico nulo, hasta severo) en cinco variedades de vid y mostró un poder predictivo superior al 90%. En todas las variedades las gs se asociaron linealmente con las kL observadas, al considerar todas las situaciones de déficit hídrico en conjunto, si bien la pendiente de estas relaciones fueron distintas en cada variedad. La contrastación experimental mostró que, en una escala de tiempo de varios meses, las variedades más evitadoras -i.e., Grenache y Cereza- mantuvieron mayor kL, ajuste osmótico y rigidez de los tejidos y una menor pendiente de la relación de gs vs. kL, que las variedades menos evitadoras -i.e., Malbec y Syrah-. La menor pendiente de la relación entre gs y kL, en las variedades más evitadoras, estuvo asociada a una mayor cantidad de estomas, en relación con la cantidad de células epidérmicas. Los variedades más evitadoras bajo déficit hídrico moderado -i.e., con una fracción de agua edáfica transpirable entre 0,6 y 0,4- tuvieron mayor superficie foliar y produjeron más biomasa, favoreciendo raíces profundas y densas, y ahorrando agua. Chardonnay mantuvo una alta hidratación y turgencia a expensas de un alto gasto de agua debido a que privilegiaba una alta kL por sobre el ajuste estomático, por lo que no podría considerarse en forma estricta como muy evitadora. Water transport in plants is driven by the free energy difference between soil and atmosphere, and regulated by biological avoidance mechanisms like stomatal closure. Leaf hydration and turgor depend on the equilibrium between apoplastic ΨL, symplastic osmotic potential and tissue elasticity. Based on these considerations, it was hypothesized that interactions between plant water stress avoidance mechanisms play a key role on the plant resistance to water deficit. To demonstrate this, a mechanistic model based on the equations of Van de Honert (for sap flow), Fick (for transpiration), Hooke (for elasticity), Gardner (for soil water flux), and Buckley (for stomatal adjustment), was constructed. Using the model it was theoretically shown that leaf hydration and turgor depended on soil water supply (represented by the water potential of the soil) and on atmospheric evaporative demand (represented by the values of absorbed radiation, air temperature, wind speed and vapor pressure deficit). The model also showed that the avoidance mechanisms [plant hydraulic conductance (kL), stomatal conductance (gs), tissue elasticity and osmotic potential at full turgor (Ψπ100)] are all necessary to define leaf hydration and turgor. It also demonstrated that the soil to leaf kL depends on the fraction of transpirable soil water (FTSW) with a sigmoid pattern as the soil dries, similar to the variables that depend on kL (i.e., gs, plant transpiration, photosynthesis, and leaf area). The model was experimentally evaluated at different soil moisture levels (from null to severe water deficit) on five grapevine varieties, and it showed a predictive power above 90%. Observed gs values were linearly associated with kL ones in all varieties, considering all levels of water deficit together. Even though, the slope of these relationships was different for each variety. The experiment showed that, on a several months time scale, the more avoidant varieties -i.e., Grenache and Cereza- kept a higher kL, a lower slope of the relation between gs and kL, a lower Ψπ100 and more rigid tissues, than the less avoidant varieties -i.e., Malbec and Syrah-. The lower slope of the relation between gs and kL was associated with the higher number of stomata in relation to the number of epidermal cells in the more avoidant varieties. More avoidant varieties produced higher leaf area and biomass under mild water deficit -i.e., FTSW between 0.6 and 0.4-, had deeper roots and saved irrigation water. In spite of Chardonnay achieving high leaf hydration and turgor at the expense of a high water use, it favored a high kL over an accurate osmotic adjustment and therefore cannot be considered sensu stricto a very avoidant variety. EEA Mendoza Fil: Vila, Hernan Felix. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Mendoza; Argentina

8 páginas, 5 figuras, 1 tabla.- Trabajo presentado en el Congreso celebrado en Zagreb (Croacia) entre el 28 de junio y el 3 de julio de 2009., [EN] The north and northwest of the Iberian Peninsula is home to a number of ancient grapevine cultivars now in danger of extinction, regarding which the literature contains but a few references dating from the 19th century. In this region, baroque religious art, which is commonly ornamented with grapevines motifs, reached great importance. This work reports the ampelographic description of leaves and clusters from 19 ancient cultivars, and also the comparison of the leaves and clusters of old grapevine varieties from this region with those represented on baroque altarpieces. Many of the latter were found to be ampelographically correct representations of grapevine leaves and clusters., [ES] El Norte y Noroeste de la Península Ibérica es la zona de origen de un importante número de cultivares antiguos de vid, muchos en serio peligro de desaparición; la bibliografía a cerca de estos cultivares únicamente contiene unas pocas referencias a partir del siglo XIX, no existiendo en la actualidad una descripción ampelográfica completa de la mayoría de ellos. En estas regiones el arte religioso del período barroco, que habitualmente utilizaba representaciones de la vid, alcanzó una gran importancia. En este trabajo se presenta la descripción ampelográfica de las hojas y racimos de 19 cultivares antiguos de estas áreas vitícolas, junto con un estudio morfológico de las tallas presentes en un gran número de retablos barrocos. Se ha visto que muchas de estas obras barrocas presentan las hojas y racimos de vid tallados con gran corrección ampelográfica., [FR] Dans le Nord-ouest de l'Espagne il existe une grande diversitè de cultivars très ancients. Jusqu’à la dernière décennie du XXème siècle, il n’existait pas de descriptions ampélographiques complètes de ces cultivars et actuellement seul un petit groupe a été décrit en profondeur. Au plan artistique, le Baroque a été une période particulièrement importante dans le Nord-ouestde Spagne. Les retables de l'époque dénommée "Churrigueresque" sont caractérisés par des colonnes salomoniques couvertes de rameaux herbacés, de feuilles et de grappes. Ce travail present la description ampélographique de la feuille et du grappe pour 19 cultivars. D'un autre côté, on a etudiè la variabilité de la morphologie des feuilles et des grappes près d'une centaine de retables et nous sommes arrivés à la conclusion que plusieurs de ces retables recèlent de fidèles représentations de ces organes de la vigne., Diferentes partes de este trabajo han sido financiadas por: Ministerio de Ciencia y Tecnología- INIA (VIN03-002-C6-3); Xunta de Galicia (INCITE07PXI403090ES; INCITE08E1R403021ES) e INIA- Ministerio Ciencia e Innovación (RF2008-00002-C02).

[EN] Downy mildew, caused by the obligate oomycete Plasmopara viticola (Berk. & Curt.) Berl. & de Toni., is one of the most destructive grapevine diseases occurring worldwide. The aim of the present study was to examine susceptibility to infection by P. viticola in different grapevine varieties grown in European vineyards. Five cultivars of V. vinifera L. known to be susceptible (Albariño, Tempranillo, Touriga Nacional, Riesling and Cabernet Sauvignon), and one Vitis genotypes known to be resistant (V. rupestris) were examined. Plants were inoculated with P. viticola in the laboratory using the leaf disc and plant techniques. The obtained results demonstrated, that there were 3 groups: one formed by those little susceptible, e.g., cvs. Cabernet Sauvignon and Riesling; and a second group formed by those very susceptible, cvs. Albariño, Touriga Nacional and Tempranillo, and a third group of more resistant genotype (V. rupestris). Furthermore, the course of colonization of leaf mesophyll by P. viticola was described in these varieties, both spatial and temporary level, making a monitoring through microscopic epifluorescence, from its penetration to the formation of the substomatic vesicle, and later formation sporangiophores., [ES] El mildiu es una de las enfermedades de vid más destructivas a nivel mundial, y está causado por el oomycete Plasmopara viticola (Berk. & Curt.) Berl.& de Toni. El objetivo de este trabajo fue estudiar los niveles de susceptibilidad a P. viticola en algunas de las viníferas más utilizadas en diferentes viñedos europeos. Se estudiaron 5 variedades de Vitis vinifera L. conocidos como altamente susceptibles (cvs. Albariño, Tempranillo, Touriga Nacional, Riesling, y Cabernet Sauvignon), y Vitis rupestris, considerada como altamente resistente. Se inoculó P. viticola en laboratorio, utilizando dos metodologías distintas (Técnica del disco de la hoja y plantas). Los resultados obtenidos permitieron diferenciar tres grupos: uno formado por los poco susceptibles, en el que se incluían variedades como Cabernet Sauvignon y Riesling; un segundo grupo formado por los muy susceptibles, en el que se incluían el Albariño, Touriga Nacional y Tempranillo y un tercer grupo con el genotipo más resistente (V. rupestris). Además se describe el modo de colonización de P. viticola en estas variedades, tanto a nivel espacial como temporal, haciendo un seguimiento mediante microscopía de epifluorescencia, del curso de colonización del hongo por el mesófilo de la hoja, desde su penetración, hasta la formación de la vesícula subestomática y posterior formación de esporangióforos.

Siete variedades de vid empleadas en Argentina para la elaboración de vinos de alta gama fueron caracterizadas molecularmente a través del empleo de microsatélites. Seis de los 8 pares de cebadores usados amplificaron patrones de bandas reproducibles. El número de alelos detectados por locus varió entre 5 y 10, con un total de 42 alelos, registrándose desde 1 a 7 alelos únicos. El número de genotipos microsatélites encontrados para cada locus osciló entre 3 y 7, con un total de 28. Las variedades Tempranillo y Chenin mostraron 6 y 5 genotipos «únicos», respectivamente, con los 6 loci analizados. La heterocigosidad observada varió entre 42,9 y 100 %, mientras que la heterocigosidad esperada osciló entre 64,3 y 87,8 %. El locus más informativo fue VrZAG79 (con un contenido de información polimórfica de 84,9 % y un número de alelos efectivos de 8,17) mientras que el menos informativo fue VrZAG62. La probabilidad acumulada de obtener genotipos idénticos fue de 7,68 x 10-05 indicando que, mediante el uso combinado de estos 6 cebadores microsatélites se pueden discriminar todas las variedades ensayadas, con alto grado de certeza. El análisis de agrupamiento por el método UPGMA separó claramente las variedades francesas (Merlot, Pinot Noir y Cabernet Sauvignon) y Syrah de los cepajes Tempranillo y Bonarda. Esta técnica podría ofrecerse como servicio a viveristas y productores vitícolas interesados en garantizar la identidad genética de sus materiales comercializados. SSR markers characterized seven grapevine varieties used for high quality wines in Argentina. Six of the 8 primers used gave reproducible band profiles. The number of alleles per locus varied from 5 to 10, with a total of 42 and 1 to 7 unique alleles. Three to 7 SSR genotypes per locus were found, with a total of 28. Tempranillo and Chenin showed 6 and 5 unique alleles, respectively, taking in account all the primers assessed. The observed heterozygosity varied between 42.9 and 100 %, while the expected heterozygosity ranged from 64.3 to 87.8 %. VrZAG79 was the most informative locus (PIC 84.9 % and ne 8.17), while VrZAG62 was the least informative. Combining the use of 6 primers, the accumulative probability of missidentifying two random different genotypes as the same, was very low: 7.68 x 10-05. The UPGMA cluster analysis separated the French varieties (Merlot, Pinot Noir, Cabernet Sauvignon), and Syrah from Tempranillo and Bonarda. This technique can provide a service to grapevine nurseries and farmers interested in certifying the genetic identity of the materials commercialized by them. Fil: Martínez, Liliana. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Agrarias. Departamento de Ciencias Biológicas Fil: Cavagnaro, Pablo. Fil: Masuelli, Ricardo W.. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Agrarias. Departamento de Ciencias Biológicas