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[ES] En el presente trabajo se han estudiado diferentes formulaciones de recubrimientos elaborados a base de alcohol polivinílico (PVA) y almidón de patata (S) con la incorporación de carvacrol (C) que proporciona la acción antifúngica al recubrimiento. Se evaluó la retención de carvacrol por el recubrimiento y la densidad de sólidos en superficie. También se evaluó su efectividad antifúngica durante el almacenamiento poscosecha de manzanas Golden Delicious inoculadas con Penicillium expansum y la aceptación por los consumidores a través de catas sensoriales. Su aplicación fue muy efectiva contra el crecimiento de Penicillium expansum, al reducir significativamente la incidencia y severidad del hongo, especialmente aquellas formuladas con mayor proporción de almidón y carvacrol (50PVA:50S-C40 y 50PVA:50S-C80). Sin embargo, los resultados del análisis sensorial pusieron de manifiesto el impacto negativo del carvacrol sobre el aroma y sabor de las manzanas, incluso tras el lavado y el pelado de la fruta., [CA] Al present treball s'han estudiat diferents formulacions de recobriments elaborats amb base d'alcohol polivinílic (PVA) i midó de creïlla (S) amb l’incorporació de carvacrol (C) que proporciona l'acció antifúngica al recobriment. Es va avaluar la retenció de carvacrol pel recobriment i la densitat de sòlids en superfície i la seua l'efectivitat antifúngica sobre l'emmagatzemament postcollita de les pomes Golden Delicious inoculades amb Penicillium expansum. A mes, l'acceptació pels consumidors a través d’anàlisis sensorials també fou estudiada. Els resultats mostraren que la aplicació del recobriments amb carvacrol van ser molt efectives contra el 3 creixement de Penicillium expansum, al reduir significativament la incidència i severitat del fong, especialment en aquelles formulades amb major proporció de midó i carvacrol (50PVA:50S-C40 i 50PVA:50S-C80). No obstant això, els resultats de l'anàlisi sensorial mostraren un possible rebuig dels consumidors a estos recobriments, donada la baixa acceptació de l'aroma i el sabor del producte tractat, inclús després del llavat i el pelat de la fruita recoberta., [EN] In this work, different coatings based on polyvinyl alcohol (PVA) and potato starch (S) have been studied with the incorporation of carvacrol (C) that provides the antifungal action to the coating. The retention of carvacrol by the coating and the density of solids on the surface was evaluated together with the antifungal effectiveness on the post-harvest storage of Golden Delicious apples previously inoculated with Penicillium expansum. Moreover, a sensory analysis was also carried out to study the acceptability of the coated product. The carvacrol loaded coatings were highly effective against the growth of Penicillium expansum, significantly reducing the incidence and severity of the fungus, especially in those formulated with higher proportion of starch and carvacrol (50PVA:50S-C40 and 50PVA:50S-C80). However, the results of the sensory analysis showed the negative impact of these coatings on the aroma and taste of the coated apples, even after the washing and peeling of the fruit.

La manzana (Malus domestica) es una de las frutas más consumidas a nivel global. En Argentina la principal zona de producción está localizada en el Alto Valle de Río Negro, seguida por Neuquén y Mendoza, mientras que en España se centra en Cataluña, Aragón y Galicia. En ambos países es una de las principales frutas de exportación e industrialización. El control de calidad de las manzanas, fundamentalmente en la postcosecha, es crítico, ya que es donde comúnmente se produce la enfermedad del “moho azul” causada por Penicillium expansum. Esta enfermedad causa grandes pérdidas económicas debido al deterioro de la fruta y la producción de patulina, que es una micotoxina. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la existencia de diferencias morfológicas entre aislamientos de Penicillium expansum de diferente origen geográfico y evaluar la utilidad de diferentes marcadores moleculares para caracterizar su diversidad genética. Se estudiaron, 59 aislamientos de Argentina y 55 de España, que fueron caracterizados morfológicamente y molecularmente mediante el análisis filogenético de secuencias del gen ITS (rRNA 16S y 23S) y dos regiones del gen β-tubulina (Bt2a-Bt2b y Bt-T2m-Up - Bt-LEV-Lo1). La caracterización morfológica no mostró diferencias entre los aislamientos españoles y argentinos. Las secuencias de los genes ITS y beta tubulina (Bt2a x Bt2b) no presentaron variabilidad entre los aislamientos de Argentina y España. Las secuencias obtenidas con los primers Bt-T2m-Up y Bt-LEV-Lo1 de 31 aislamientos españoles y 36 argentinos mostraron diferencias entre los mismos, y los polimorfismos revelaron 30 haplotipos. Los aislamientos de Argentina se diferenciaron en 14 haplotipos mientras que los aislamientos españoles se separaron en 16 haplotipos. Algunos haplotipos presentaron una amplia distribución mundial (Argentina, España y Canadá) con variaciones en su abundancia relativa mientras que otros solo se detectaron en Argentina o en España. El análisis de los haplotipos permitió identificar la forma en que se distribuye esta diversidad. Los índices de diversidad de Shannon (H´=2,142; H´=2,402) y Simpson (SiD=0,859; SiD=0,895) para aislamientos argentinos y españoles respectivamente, indican que la diversidad de Penicillium expansum en España es mayor que en Argentina. Esta distribución podría explicarse tanto por la existencia de intercambio de haplotipos entre distintos países, así como por la existencia de haplotipos adaptados a las condiciones ambientales o a los genotipos de las manzanas cultivadas en cada región u orígenes geográficos. Apples (Malus domestica) are one of the most consumed fruits globally. In Argentina, the main production area is in the Alto Valle of Río Negro, followed by Neuquén and Mendoza, while in Spain its production is centered in Catalonia, Aragon and Galicia. In both countries, it is one of the main fruits for export and industrialization. Quality control of apples, fundamentally in the postharvest, is critical, since it is when the disease of the blue mold caused by Penicillium expansum commonly occurs. This disease causes great economic losses due to the deterioration of the fruit and the production of the mycotoxin, patulin. The objective of the present study was to evaluate the existence of morphological differences between Penicillium expansum isolates of different geographical origin and to evaluate the usefulness of different molecular markers to characterize their genetic diversity. Fifty-nine isolates from Argentina and fifty-five from Spain were studied, and morphologically and molecularly characterized by the phylogenetic analysis of ITS gene sequences (16S and 23S rRNA) and two regions of the β-tubulin gene using primers (Bt2a x Bt2b & Bt-T2m-Up x Bt-LEV-Lo1). Morphological characterization showed no differences between the Spanish and Argentinian isolates. The sequences of the ITS and beta tubulin genes (Bt2a x Bt2b) did not show variability between the isolates from Argentina and Spain. Sequences obtained with the primers Bt-T2m-Up and Bt-LEV-Lo1 of 31 Spanish isolates and 36 Argentinian isolates showed differences between them, and the polymorphisms revealed 30 haplotypes. Isolates from Argentina were separted in 14 haplotypes while the Spanish isolates were separated into 16 haplotypes. Some haplotypes showed a wide global distribution (Argentina, Spain and Canada) with variations in their relative abundance while others were only detected in Argentina or Spain. The analysis of the haplotypes allowed to identify the way in which this diversity is distributed. The diversity indices of Shannon (H´=2,142; H´=2,402) and Simpson (SiD=0,859 ;SiD=0,895) for Argentine and Spanish isolates respectively, indicate that the diversity of Penicillium expansum in Spain is greater than in Argentina. This distribution could be explained both by the existence of haplotype exchange between different countries, as well as by the existence of haplotypes adapted to the environmental conditions or genotypes of the apples grown in each region or geographic origins. Fil: Maldonado Haro, María Luisa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

La presencia de los hongos toxicogénicos y sus metabolitos tóxicos en los productos de interés agroalimentario es uno de los principales problemas sanitarios y económicos en Argentina. El uso indiscriminado de fungicidas de origen sintético para la prevención de la contaminación ha derivado en el desarrollo de poblaciones resistentes, lo que demanda el uso de dosis más elevadas y sustancias más agresivas para su control, con el consecuente aumento de residuos tóxicos en los productos agroalimentarios. Es por ello que, en los últimos años, se ha incrementado la búsqueda de productos naturales como agentes antifúngicos para su empleo en cultivos agrícolas, que no contaminen el medio ambiente y no dejen residuos tóxicos en los productos tratados. Entre estas alternativas, se encuentra el quitosano, un polisacárido derivado de la quitina, buen formador de biopelículas, de amplio espectro antimicrobiano, no tóxico, biocompatible y biodegradable. Se utilizó quitosano de alto grado de pureza, grado de desacetilación >85% y peso molecular medio-bajo (5-80 kDa). Se evaluó la capacidad de distintos ácidos orgánicos para aumentar la solubilidad del quitosano en soluciones acuosas, encontrándose que el ácido acético permitió solubilizarlo a menores concentraciones que los otros ácidos, por lo que se seleccionó como disolvente. Se realizaron pruebas de estabilidad de soluciones de quitosano 3% en ácido acético 1% esterilizadas por calor y posteriormente almacenadas a temperatura ambiente (25ºC) y de refrigeración (4ºC). Los resultados mostraron que las soluciones esterilizadas por calor fueron estables durante 12 semanas a ambas temperaturas de almacenamiento. Se utilizaron dos cepas de Alternaria spp. y dos de Penicillium expansun que fueron seleccionadas por su agresividad y capacidad de colonización de los alimentos y de producción de micotoxinas. Se evaluó el efecto in vitro de diferentes concentraciones de soluciones de quitosano 3% en ácido acético 1% sobre el desarrollo de las mismas en Agar Papa Dextrosa (APD). El tratamiento inhibió completamente el desarrollo de ambas cepas de Penicillium expansum a una dosis de 4 mg/ml y de A. arborescens y A. tenuissima a la dosis de 2 mg/ml. Las soluciones de quitosano que causaron la inhibición completa del desarrollo de P. expansum y Alternaria spp. en el ensayo in vitro, fueron utilizadas para evaluar el efecto in vivo de soluciones de quitosano sobre el crecimiento de los hongos en manzanas y frutos de tomate, respectivamente. La aplicación de solución de quitosano al 3% en ácido acético 1% sobre manzanas inoculadas con P. expansum presentó un efecto fungistático sobre el hongo, causando una máxima reducción del desarrollo del 46%. Sobre tomates inoculados con Alternaria spp. mostró una reducción promedio del 93% para ambas especies. A partir de las placas de APD utilizadas en el ensayo in vitro se cuantificó la producción de toxinas de P. expansum y Alternaria spp. La producción in vitro de PAT por P. expansum y de TA por A. arborescens y A. tenuissima se incrementó cuando se utilizaron dosis intermedias (efecto fungistático) de soluciones ácidas de quitosano. Sin embargo, estas soluciones redujeron la acumulación de AME y AOH por A. arborescens y A. tenuissima in vitro. Se evaluó la concentración de micotoxinas producidas por ambos géneros fúngicos en el ensayo in vivo. La presencia de soluciones de quitosano no tuvo un efecto significativo sobre la producción de PAT en manzanas por cepas de P. expansum. La aplicación de la solución de quitosano al 3% en ácido acético 1% a una dosis de 2 mg/ml inhibió la síntesis de TA por ambas cepas de Alternaria spp. sobre frutos de tomate. No se observó un efecto significativo sobre la producción de AME por ambas especies de Alternaria. La solución de quitosano en ácido acético inhibió completamente la síntesis de AOH por A. arborescens en tomates a una dosis de 2 mg/ml, pero no por A. tenuissima, que fue capaz de sintetizarlo en bajos niveles. The presence of toxicogenic fungi and their toxic metabolites in agri-food products is one of the main health and economic problems in Argentina. The indiscriminate use of fungicides of synthetic origin for the prevention of contamination has led to the development of resistant populations, which demands the use of higher doses and more aggressive substances for their control, with the consequent increase of toxic residues in food products. In recent years, the search for natural products as antifungal agents for use in agricultural crops, which do not pollute the environment and leave no toxic waste in the treated products, has increased. One of these alternatives is chitosan, a polysaccharide derived from chitin, a good biofilm-forming agent, with broad antimicrobial spectrum, non-toxic, biocompatible and biodegradable. High degree of purity chitosan, degree of deacetylation> 85% and medium-low molecular weight (5-80 kDa) was used. The capacity of different organic acids was evaluated to increase its solubility in aqueous solutions. As acetic acid solubilized it at lower concentrations than other acids, it was selected as solvent. Stability tests were performed on heat-sterilized 3% chitosan solutions in acetic acid 1%, which were stored at room temperature (25ºC) and refrigeration (4ºC). The results showed that the solutions were stable for 12 weeks at both storage temperatures. Two strains of Alternaria spp. and two of Penicillium expansun, selected for their aggressiveness and ability to colonize food and produce mycotoxins were used. The in vitro effect of increasing concentrations of 3 % chitosan solutions in 1% acetic acid on their growth on Potato Dextrose Agar (PDA) was evaluated. The treatment completely inhibited the development of both strains of P. expansum in vitro at a dose of 4 mg/ml and of A. arborescens and A. tenuissima at 2 mg/ml. The chitosan solutions that caused the complete inhibition of in vitro development of P. expansum and Alternaria spp were used to evaluate the in vivo effect of chitosan solutions on fungal growth on apples and tomato fruit, respectively. The application of 3% chitosan solution in acetic acid 1% on apples inoculated with P. expansum showed a fungistatic effect on the fungus, causing a maximum development reduction of 46%. On Alternaria spp. inoculated tomato fruit, an average reduction of 93% was achieved for both species. From the PDA plates used in the in vitro assay, the production of P. expansum and Alternaria toxins was quantified. The in vitro production of PAT by P. expansum and of TA by A. arborescens and A. tenuissima increased when intermediate doses (fungistatic effect) of acidic chitosan solutions were used. However, these solutions reduced the accumulation of AME and AOH by A. arborescens and A. tenuissima in vitro. The concentration of mycotoxins produced by both fungal geenra in vivo was evaluated. The presence of chitosan solutions did not have a significant effect on the production of PAT in apples by strains of P. expansum. The application of 3% chitosan solution in 1% acetic acid inhibited TA biosynthesis by both Alternaria spp on tomato fruit. No significant effect was observed on AME production by both Alternaria species. The chitosan solution in acetic acid completely inhibited the synthesis of AOH by A. arborescens in tomatoes at a dose of 2 mg/ml, but not by A. tenuissima, which was able to synthesize it at low levels. Fil: Garzón Puertas, Dennis Syomara. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

El uso de fungicidas químicos para el control de Penicillium expansum Link en manzanas en poscosecha no es del todo aceptado, por lo que se trabaja con microorganismos antagónicos como las levaduras que al tener una efectividad limitada se combinan con sustancias de origen natural para elevar su efecto antagónico. Con este propósito, se usaron cepas de levaduras, en combinación con bicarbonato de sodio (BCS) para el control de P. expansum en manzanas (Malus domestica Borkh) 'Golden Delicious' y 'Red Delicious'. Se trataron con tres concentraciones de BCS (0, 2 y 4 % p/v) y se inocularon con una concentración conocida de diez levaduras antagónicas, por separado, en heridas donde posteriormente se colocó una suspensión de esporas de P. expansum (1 x 104 UFC), midiéndose el diámetro de la lesión y la incidencia después de 10 días de incubación. 'Red Delicious' resultó menos sensible a P. expansum que 'Golden Delicious' (diámetro de lesión de 1.52 vs. 2.01 cm). Las levaduras con mayor poder antagónico sobre el hongo fueron 22-218, 8-121 y 26-224 (Torulaspora spp) que redujeron el desarrollo del hongo en 89, 81.8 y 84.3 %, respectivamente a los 10 días de incubación. El BCS 4 % no inhibió el crecimiento del hongo, pero a 2 % potenció el efecto antagónico de las levaduras 23-61 y 3-5241 en 26.4 y 23.1 %, respectivamente. La levadura 22-218 fue la más sobresaliente contra P. expansum en 'Golden Delicious' reduciendo 99.5 % el diámetro de la lesión; mientras que las levaduras 22-224 y 8-121 lo fueron en 'Red Delicious' disminuyendo un 91.7 y 91.0 %, respectivamente. As the use of chemical fungicides to control postharvest diseases of apple as Penicillium expansum Link is not entirely accepted, antagonist microorganisms as yeasts are employed. However, due to their limited effectiveness they are proposed to be combined with substances of natural origin. To evaluate the efficacy of different strains of antagonistic yeasts in combination with sodium bicarbonate (SBC) to control P. expansum, ‘Golden Delicious’ and ‘Red Delicious’ apples were treated with three levels of SBC and inoculated with a given concentration of ten antagonistic yeasts separately in wounds where a spore suspension of P. expansum (1 x 104 UFC), was then placed. Lesion diameter and incidence were measured after ten days of incubation. ‘Red Delicious’ was less susceptible to P. expansum than ‘Golden Delicious’ (diameter lesion of 1.52 cm vs 2.01 cm). Yeasts with the highest antagonist capacity on P. expansum were 22-218, 8-121 y 26-224 (Torulaspora spp) reducing the development of fungus in 89, 81.8 y 84.3 % respectively. SBC did not reduce the development of fungus, but at 2 % it enhanced the antagonistic effect of yeasts 23-61 and 3-5241 in 26.4 y 23.1 % respectively. Yeast 22-218 showed the major antagonism against P. expansum in ‘Golden Delicious’ diminishing the lesion diameter at 0.1 cm, while yeasts 22-224 and 8-121 did in ‘Red Delicious’ diminishing injury in 91.7 and 91% respectively.