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Trabajo Integrador Final (Especialista en Hematología) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2022. Las leucemias son un grupo de enfermedades malignas del sistema hematopoyético, que resultan de la proliferación clonal de células progenitoras. Son las enfermedades malignas más frecuentes durante la edad pediátrica y corresponden al 30% de cáncer pediátrico a nivel mundial. En algunos casos de leucemias agudas, durante el tratamiento es posible la detección de éstas células mediante el método de la enfermedad mínima residual (EMR), en pacientes en remisión morfológica. El objetivo de este trabajo es describir los casos de leucemias en menores de 15 años ingresados al público materno infantil (HPMI) de salta capital. Se realizó un estudio descriptivo retrospectivo evaluando los casos de 125 pacientes menores de 15 años diagnosticados con leucemias en el HPMI de Salta capital entre enero de 2010 a diciembre de 2018. Relacionando los leucocitos al ingreso de la institución, la EMR del día 15 y 33 con las recaídas. Del total de pacientes analizados el promedio de edad fue 7 años (De+- 4 años). La distribución por sexo presentó diferencias significativas con predominio de varones. El 90% de los pacientes debutó con leucemia linfoblástica aguda, a los cuales se evaluó la EMR al día 15, siendo positiva en 53% pacientes y negativa en 47%. Al día 33, la EMR fue positiva en 16% pacientes y negativa en 75%. Al asociar el EMR al día 15 con sexo y recaídos no se observó significancia estadística. Fue significativo cuando se asoció EMR al 15 con recuento de leucocitos del ingreso. La EMR al día 33 con el sexo y las recaídas no presentó diferencia estadísticamente significativa. Los resultados obtenidos no condicen en totalidad con lo publicado en otra bibliografía. La EMR positiva en MO en los días 15 y 33 del tratamiento es una variable pronóstica independiente y significativa en la predicción de recaída en LLA pediátrica pero no la única. Hay otros factores predictores de las recaídas que debería ser estudiados. 2024-07-31 Fil: Portal, Roxana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.

El presente trabajo experimental tuvo como objetivo determinar valores referenciales de reticulocitos y leucocitos en equinos (Equus caballus) aparentemente sanos en condiciones de altitud, en el Cantón Cuenca, provincia del Azuay. Para obtener valores reales de la zona y poder mejorar diagnósticos y tratamientos en el área de Medicina Veterinaria. The objective of this experimental work was to determine the reference values of reticulocytes and leukocytes in apparently healthy equines (Equus caballus) in altitude conditions, at the city of Cuenca, located in the province of Azuay. To obtain real values of the area and to be able to improve diagnoses and treatments in Veterinary Medicine.

La obesidad es una enfermedad multifactorial e incapacitante que se caracteriza por una sobrecarga metabólica del tejido adiposo (AT), la inflamación crónica de bajo grado, el estrés oxidativo y la disfunción endotelial. En la actualidad, la prevalencia mundial de la obesidad está aumentando, donde el estilo de vida influye de manera significativa en la resolución de esta enfermedad. En este contexto, ha aumentado la demanda de estrategias para revertir las comorbilidades y frenar su aumento. El procedimiento de bypass gástrico en Y de Roux (RYGB) es una herramienta eficaz para la pérdida de peso y la remisión de las comorbilidades metabólicas de la obesidad, aunque se desconocen los mecanismos moleculares que implican estas mejoras. Por lo tanto, el objetivo principal de la presente tesis doctoral fue determinar cómo la cirugía RYGB modula la inflamación crónica de bajo grado, el estrés oxidativo y la disfunción endotelial, explorando su efecto sobre el complejo del inflamasoma, la autofagia, la dinámica mitocondrial y el estrés del retículo endoplásmico (ER). También se abordó el papel de la metformina, un enfoque terapéutico alternativo para la obesidad y la diabetes de tipo 2 (T2D). Por lo tanto, otro objetivo de este estudio fue analizar los mecanismos moleculares relacionados con la inflamación y la autofagia en la AT y el efecto protector de la metformina contra las alteraciones metabólicas. Nuestra hipótesis fue que la pérdida de peso inducida por la RYGB modula la respuesta de los leucocitos, componentes primordiales del sistema inmunitario. Para comprobar esta hipótesis, analizamos las distintas vías metabólicas que se ven alteradas por la obesidad y exploramos si el AT responde de forma diferencial a la metformina. Observamos que la pérdida de peso producida tras 1 año de RYGB se acompañaba de una mejora del perfil lipídico proaterogénico y de la sensibilidad a la insulina. Esto se acompañó de una disminución de las citocinas proinflamatorias y de la producción de especies reactivas de oxígeno de los leucocitos y de una mayor respuesta antioxidante, lo que dio lugar a una menor interacción entre los leucocitos y el endotelio y a marcadores de disfunción endotelial. Además, un análisis más detallado de los mecanismos moleculares en los leucocitos tras la pérdida de peso reveló una mejora de la respuesta homeostática como resultado de un aumento de la AMPK, de los marcadores de autofagia, de la biogénesis y de la dinámica mitocondrial, junto con una disminución de las citoquinas proinflamatorias, de los marcadores de inflamación y del estrés del ER. En conjunto, estos resultados ayudan a arrojar luz sobre los mecanismos que subyacen al efecto protector de la pérdida de peso en el control metabólico y la homeostasis celular en la obesidad. Además, mediante un estudio transversal, observamos que los pacientes con obesidad y T2D tratados con metformina presentan una mejora del perfil inflamatorio y oxidativo con respecto a los sujetos con obesidad metabólicamente sana (MHO). Esta mejora parece estar modulada por cambios en la activación del complejo del inflamasoma y la autofagia en el AT visceral, lo que sugiere -a pesar de la creencia común- que los sujetos MHO no están tan protegidos cardiometabólicamente como se espera. Por lo tanto, se sugiere que estudios futuros presenten como objetivo determinar las dianas directas de la metformina responsables de mediar en estas respuestas. Obesity is a multifactorial and disabling disease characterized by metabolic overload in adipose tissue (AT), chronic low-grade inflammation, oxidative stress and endothelial dysfunction. Currently, the worldwide prevalence of obesity is increasing, with lifestyle having a significant influence on the resolution of this disease. In this context, there has been an increase in the demand for strategies to reverse comorbidities and to stop its increase. The Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) procedure is an effective tool for weight loss and remission of the metabolic comorbidities of obesity, although the molecular mechanisms involving these improvements are unknown. Therefore, the main objective of the present PhD thesis was to determine how RYGB surgery modulates chronic low-grade inflammation, oxidative stress and endothelial dysfunction, by exploring its effect on the inflammasome complex, autophagy, mitochondrial dynamics and endoplasmic reticulum (ER) stress. The role of metformin, an alternative therapeutic approach to obesity and type 2 diabetes (T2D), was also addressed. Therefore, another aim of this study was to analyse the molecular mechanisms related to inflammation and autophagy in AT and the protective effect of metformin against metabolic alterations. Our hypothesis was that RYGB-induced weight loss modulates the response of leukocytes, primordial components of the immune system. To test this hypothesis, we analysed the various metabolic pathways that are altered by obesity and explored whether AT responds differentially to metformin. We observed that the weight loss produced after 1 year of RYGB was accompanied by an improvement in proatherogenic lipid profile and insulin sensitivity. This was accompanied by a decrease in proinflammatory cytokines and leukocyte reactive oxygen species production and an enhanced antioxidant response, resulting in less interaction between leukocytes and both the endothelium and markers of endothelial dysfunction. In addition, further analysis of molecular mechanisms in leukocytes after weight loss revealed an improvement in the homeostatic response as a result of an increase in AMPK, markers of autophagy, biogenesis and mitochondrial dynamics, along with a decrease in proinflammatory cytokines, markers of inflammation and ER stress. Considered together, these results help to shed light on the mechanisms underlying the protective effect of weight loss on metabolic control and cellular homeostasis in obesity. Moreover, through a cross-sectional study, we reported that obese T2D patients treated with metformin exhibit improved inflammatory and oxidative profile with respect to metabolically healthy obesity (MHO) subjects. This improvement seems to be modulated by changes in the activation of the inflammasome complex and autophagy in VAT, suggesting – despite common belief – that MHO subjects are not as cardiometabolically protected as expected. Future mechanistic studies should aim to determine the direct targets of metformin responsible for mediating these responses.

A nivel mundial las infecciones virales toman mayor protagonismo al causar millones casos anualmente y millones de muertes, las alteraciones leucocitarias se presentan en muchos casos. El presente trabajo tiene como objetivo identificar el valor semiológico y pronóstico las alteraciones leucocitarias en infecciones virales. Se realizó una investigación documental basada en una revisión sistemática, las bases de datos utilizadas fueron PubMed, SciELO, Elsevier, Embase, Dialnet, y Lilacs. Se incluyó bibliografía científica de los últimos 10 años, los idiomas inglés y español fueron los incluidos en las bibliografías analizas, se excluyeron fuentes de información con más de 10 años de antigüedad, además se excluyeron estudios clínicos en animales. Se evidencio en pacientes con Covid-19 que no sobrevivieron un recuento de células TCD8 de 98,89 mientras que pacientes sobrevivientes fue de 203,98; en los pacientes no sobrevivientes se evidenciaron niveles elevados de IL-6, 10 veces superiores a los que sobrevivieron. Se concluye que en pacientes con Covid-19 los niveles de IL-6 (>20 pg/mL), así como el recuento de TCD8 (63 pg/dL) se pueden utilizar como predictor de la gravedad del dengue, {"references": ["Viana GM de C, Nascimento M do DSB, Ferreira A de M, Rabelo \u00c9MF, Diniz Neto JA, Galv\u00e3o C de S, et al. Avalia\u00e7\u00e3o de marcadores laboratoriais de progress\u00e3o da doen\u00e7a HIV para \u00f3bito. Rev Soc Bras Med Trop [Internet]. 2011;44(6):657-60. Disponible en: https://www.scielo.br/j/rsbmt/a/RszbJcnNQS38bfRSC9Bv6Hx/?lang=en. 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Glycosaminoglycan metabolism disorders bring together a group of alterations of genetic origin whose effect is the progressive intralysosomal accumulation of GAGs. Affected individuals are compromised in a multisystemic way causing, among other clinical manifestations, coarse facial features, short stature, multiple skeletal dysplasia, joint stiffness, visceromegaly and developmental delay. The diagnostic approach to these disorders represents a challenge in our context since the required biochemical tests are specialized and only performed in major cities. This makes it difficult to have access to affected patients whose geographical location is distant and therefore, the use of samples collected in solid-phase represents an advantage for the study of high-risk populations. The present study aims to report the experience of twenty years of selective screening by assessing enzyme activity in dried blood spots (DBS) collected on filter paper and leukocyte extracts. The deficiency of the enzymes here studied has been associated with Mucopolysaccharidosis I, II, IIIB, IVA, IVB, VI and VII. The present study assessed a population of 8,239 patients referred for clinical suspicion of MPS. Fluorometric endpoint methods using 4-methylumbelliferone-labeled substrates were used. This study allowed us to establish reference values in the Colombian population for ?-L-iduronidase, iduronate 2-sulfatase, ?-N-acetylglucosaminidase, N-acetylglucosamine-6-sulfate sulfatase, ?-galactosidase, arylsulfatase B and ?-glucuronidase, in DBS and leukocytes. In addition, incidence values were calculated for each of MPS. This study offers very useful information for the health system, the scientific community and facilitates the diagnostic definition of these metabolic disorders in the country. Los desórdenes en el metabolismo de los glicosaminoglicanos (GAGs) reúnen un grupo de alteraciones de origen genético cuyo defecto a nivel celular es la acumulación progresiva intralisosomal de GAGs. Los individuos afectados se ven comprometidos en forma multisistémica causando, entre otras manifestaciones clínicas, rasgos faciales toscos, talla corta, displasias esqueléticas múltiples, rigidez articular, visceromegalias y retraso en el desarrollo. La aproximación diagnóstica de estos desórdenes representa un desafío en nuestro contexto dado que los ensayos bioquímicos requeridos son especializados y sólo se realizan en ciudades principales. Lo anterior hace difícil el acceso a pacientes afectados cuya localización geográfica es distante y por lo tanto, el uso de muestras recolectadas en fase sólida representa una ventaja para el estudio en poblaciones de riesgo, donde es necesaria la remisión de un gran número de muestras sin involucrar procesos de refrigeración. El objetivo del presente estudio es comunicar la experiencia de veinte años de tamizaje selectivo, mediante la valoración de la actividad enzimática en gotas de sangre seca recolectada en papel filtro (DBS) y extractos de leucocitos para las enzimas cuya deficiencia ha sido relacionada con Mucopolisacaridosis I, II, IIIB, IVA, IVB, VI y VII. El presente estudió valoró una población de 8,239 pacientes remitidos por sospecha de MPS. Se utilizaron métodos fluorométricos de punto final usando sustratos marcados con 4-metillumbeliferona. Como enzima control, la actividad de beta-galactosidasa fue estimada para todas las muestras analizadas con el fin de garantizar la viabilidad de estas. Los estudios permitieron establecer valores de referencia en población Colombiana para alpha-iduronidase, Iduronate 2-sulfatase, alpha-N-acetylglucosaminidase, N-acetylglucosamine-6-sulfate sulfatase, Beta-galactosidase, Arylsulfatase B y Beta-glucuronidase, en DBS y leucocitos. Además, se calcularon valores de incidencia para Magíster en Ciencias Biológicas Maestría

Este proyecto trata sobre cómo conseguir detectar la leucemia de una forma rápida y poco costosa para que pueda ser accesible por todo el mundo. Para ello, solamente necesitaríamos una muestra de sangre del paciente con la que aplicar un frotis de sangre periférico para poder obtener muestras válidas para analizar. A continuación, tras haber obtenido dichas muestras, aplicaríamos técnicas de visión por computación y aprendizaje automático para poder clasificarlas. En caso de que alguna de las muestras del paciente fuera clasificada dentro de la clase “Leucemia”, avisaríamos al paciente para que pudiera empezar a tratarse lo antes posible. Además, con el fin de ir mejorando nuestro dataset, siempre y cuando el paciente nos lo permita, y tras el diagnóstico por parte de los servicios de salud, iríamos añadiendo las muestras dentro de nuestro dataset. Para facilitar el trabajo en futuras mejoras e ir analizando mejor los resultados, crearemos una base de datos manejada por una interfaz gráfica, en donde almacenaremos todos los datos obtenidos tras cada prueba del código. Graduado o Graduada en Ingeniería Informática por la Universidad Pública de Navarra Informatika Ingeniaritzako Graduatua Nafarroako Unibertsitate Publikoan

Resumen Introducción: La masticación emerge como un mecanismo fisiológico que modula diversos procesos encefálicos aún en proceso de entendimiento, entre dichos procesos se encuentra el estrés. El objetivo fue determinar la influencia del tipo de masticación sobre el estrés crónico en los niveles leucocitarios. Material y método: Se empleó 48 ratones machos de la cepa Balb/c que se dividieron en 4 grupos iguales: grupo N (masticación normal), grupo NE (Masticación normal + estrés), grupo D (masticación deficiente) y grupo DE (Masticación deficiente + estrés). Los niveles leucocitarios fueron evaluados a la cuarta y a la décima segunda semana de iniciado el experimento. Se sacrificó a cada ratón para obtener su muestra de sangre y evaluar su leucograma. Resultados: Se encontró, a la cuarta semana, linfocitopenia del grupo DE respecto al grupo D y al grupo N (p

La sangre es un tejido involucrado en la mayoría de los procesos bioquímicos del cuerpo, cuyas variaciones ayudan a detectar lesiones que alteran el organismo. El propósito del estudio fue determinar los valores de referencia en hemograma y química sanguínea en pollos de engorde hembras en condiciones de altitud. Los valores obtenidos tuvieron poca diferencia con los valores bibliográficos comparativos. The blood is a tissue involved in the majority of the bioquimics process of the body, whose variations help to detect issues that disturb the organism. The purpose of the study was to determine the values of references in blood count and biochemistry of females broilers in altitude conditions. The values obtained had little difference with the references.

El análisis de sangre periférica mediante análisis del frotis es una útil herramienta para la detección de enfermedades y anomalías. Ya sea mediante microscopía o gracias al uso de maquinaria automática especializada, se pueden llevar a cabo numerosos exámenes de fluidos o segregaciones corporales de gran utilidad diagnóstica. Como en el caso de este trabajo, el estudio o análisis de células hematológicas que circulan en sangre periférica requiere de una tinción específica a la hora de mejorar el contraste y visibilidad en el microscopio manual o motorizado como el Cellavision DM96. El equipo de CellsiLAB, grupo de investigación fruto de la colaboración del Hospital Clínic y la Universidad Politécnica de Cataluña, ha desarrollado modelos de redes neuronales para llevar a cabo clasificaciones automáticas de las células sanguíneas anómalas según su índole (linfocitos anormales en diferentes tipos de linfoma, blastos en leucemias agudas, linfocitos reactivos en infecciones, entre otros casos). Asimismo, ocurre que las muestras obtenidas en hospitales ajenos son más susceptibles a ser clasificadas erróneamente por dichos modelos al no compartir características de color, tinción y textura. Es aquí donde entran las GANs, traducido al español RGAs, Redes Generativas Antagónicas, un tipo de redes neuronales artificiales que han experimentado una enorme evolución en los últimos años. La particularidad de estas arquitecturas es que generan imágenes a partir del aprendizaje de un conjunto de datos. Por ende, se ha aprovechado esta cualidad para transformar las imágenes del dominio X (Hospital Germans Trias i Pujol) en el dominio Y (Hospital Clínic) y así emular las características de color, tinción y textura de este último. Tras esta transformación se ha conseguido mejorar la efectividad en la clasificación de las imágenes tomadas en el Hospital Germans Trias i Pujol por parte de los modelos de redes neuronales convolucionales pre-entrenados con datasets del Hospital Clínic. Para las transformaciones se han utilizado las arquitecturas CycleGAN y ColorizationGAN, mientras que para las clasificaciones se han utilizado: ResNet 18, ResNet 34, ResNet 18 con focal loss y ResNet 34 con focal loss. Se ha logrado mejorar la exactitud de la clasificación del 34% a al 81%.

N/A El sobrepeso y la obesidad ocasionados por consumo excesivo de alimentos con alto contenido energético es uno de los principales problemas de salud que afectan a la sociedad actualmente. Estas patologías están ligadas a alteraciones del sistema inmunológico que inducen inflamación crónica de bajo grado, que a su vez promueve alteraciones metabólicas como la resistencia a la insulina y el desarrollo de enfermedades crónicas no transmisibles. Una consecuencia de la inflamación crónica es la liberación de moléculas de señalización que inhiben los efectos negativos de la inflamación y regresan al organismo a la homeostasis. Entre ellas, la señalización dependiente de endocanabinoides es esencial para la regulación del metabolismo energético y el funcionamiento del sistema inmunológico, principalmente por la señalización a través de los receptores específicos para endocanabinoides CB1 y CB2. Los receptores CB se localizan en múltiples tipos de células y tejidos, incluyendo el cerebro y los órganos linfoides primarios y secundarios. En años recientes, ha habido un interés mayor en analizar las consecuencias de las modificaciones dietéticas sobre el sistema inmunológico, debido a su papel como el principal sistema de defensa del organismo. Igualmente, ha habido interés en determinar la utilidad de las modificaciones nutricionales para modular funciones fisiológicas relevantes, incluyendo la producción de endocanabinoides y su señalización en diversos tejidos. El objetivo de este estudio fue analizar las diferencias en la expresión de los receptores CB1 y CB2 en el bazo y timo de ratones adultos BALB/c, machos y hembras, suplementados con edulcorantes nutritivos y no nutritivos durante 6 semanas. Nuestros resultados muestran un incremento en la expresión de receptores CB1 en el bazo de ratones hembras suplementados con sucralosa, mientras que los ratones machos del mismo grupo muestran una disminución en la expresión de este receptor, comparados con controles sin suplementación. En contraste, la expresión de CB2 se incrementó en ratones machos suplementados con sacarosa, pero no en las hembras. La expresión de CB1 en el timo mostró un descenso significativo entre los grupos de sucralosa y glucósidos de esteviol en machos, pero no se observaron diferencias en las hembras. Finalmente, la expresión de CB2 en el timo fue más variable, con la sacarosa y sucralosa causando una disminución en la expresión de CB2 en machos y la sacarosa incrementando su expresión en hembras, comparados con los controles. Nuestros resultados muestran que el consumo frecuente de edulcorantes no nutritivos tiene efectos diferenciales dependientes del sexo sobre la expresión de los receptores CB1 y CB2 en el bazo y timo, lo que puede implicar alteraciones en las funciones del sistema inmunológico. N/A

The objective of the study was to identify leukocyte populations in the postnatal thymus of alpacas under 60 days of age. Euthanasia was performed on six Huacaya alpacas in Huanta province, Ayacucho, Peru. Thymus samples were obtained, embedded in OCT and immediately frozen in liquid nitrogen and stored at -70ºC until processing. Frozen sections were prepared and mounted with organosilane. Immunohistochemistry was performed with mouse primary antibody and rabbit secondary antibodies. The reaction was evidenced using the avidin-biotin-peroxidase complex and was counter-stained with hematoxylin. Specific monoclonal antibodies were used for the identification of leukocytic subpopulations of the thymus. Five visual fields were randomly evaluated at 400X. The distribution and density of the staining was classified as negative (-), inconstant (±), slight (+), moderate (++) and strong (+++). The results show that the largest population of leukocyte cells was located in the cortex of the thymus and corresponded to immature cells that do not express surface markers; likewise, the highest population of immunomarked cells, in maturation, were located in the medulla of the thymus, predominantly the TCR-αβ lymphocytes, with low values ​​of γδ TCR lymphocytes, CD8 lymphocytes, B lymphocytes and monocytes/macrophages, with inconstant lymphocyte values CD4. In the cortex of the thymus there were low values ​​of αβ TCR lymphocytes and CD8 lymphocytes, and inconstant values ​​of monocytes/macrophages, without evidence of γδ TCR lymphocytes, CD4 lymphocytes and B lymphocytes., El objetivo del estudio fue identificar las poblaciones leucocitarias en el timo posnatal de alpacas menores de 60 días de edad. Se realizó la eutanasia a seis alpacas Huacaya en la provincia de Huanta, Ayacucho, Perú. Se obtuvieron muestras de timo que fueron embebidas en OTC y congeladas inmediatamente en nitrógeno líquido y conservadas a -70 ºC hasta su procesamiento. Se prepararon secciones congeladas y se fijaron a la lámina con el adhesivo organosilano. Se realizó la inmunohistoquímica con anticuerpo primario de ratón y secundarios de conejo. La reacción se evidenció empleando el complejo avidina-biotina-peroxidasa y se contra-coloreó con Hematoxilina. Se emplearon anticuerpos monoclonales específicos para la identificación de las subpoblaciones leucocíticas del timo; se evaluaron cinco campos visuales de forma aleatoria a un aumento de 400X. La distribución y densidad de la tinción se clasificó como negativa (-), inconstante (±), ligera (+), moderada (++) y fuerte (+++). Los resultados muestran que la mayor población de células leucocitarias se ubicó en la corteza del timo y correspondieron a células inmaduras que no expresan marcadores de superficie; así mismo, la mayor población de células inmunomarcadas, en maduración, se ubicaron en la médula del timo, predominando los linfocitos TCR αβ, con valores bajos de linfocitos TCR γδ, linfocitos CD8, linfocitos B y monocitos/macrófagos, con valores inconstantes de linfocitos CD4. En la corteza del timo se observaron valores bajos de linfocitos TCR αβ y linfocitos CD8, y valores inconstantes de monocitos/macrófagos, sin evidencias de linfocitos TCR γδ, linfocitos CD4 y linfocitos B.

X-rays are used in dental offices for diagnostic purposes, where the POE receives a dose of exposure that causes a stochastic damage that is not report, but is cumulative. Therefore, a relationship between leukopenia and exposure to ionizing radiation has been reported, in such a way that leukocytes are an ideal biological model. Cell damage is manifested through the expression of bioindicators such as Hsp70 or cell death, process that must be studied for the degree of homeostatic tolerance with different degrees of radiation. The aim of this work was to evaluate the changes in the expression of proteins Hsp70, p53, caspase-8 and caspase-3 and / or cell death by apoptosis in human leukocytes exposed to X-rays from dental equipment. Leukocytes in whole blood were exposed at different doses of X-rays. Subsequently, cell viability was assessed by Wright's stain. Following this, the proteins Hsp70, p53, caspase-8 and caspase-3 were identified by Western-blot. A decrease of living cells from 97.5% to 39.5% was observed with respect to the different exposure doses. The behavior of Hsp70 and caspase-8 was similar, in such a way that for the third dose the expression increased and for the highest dose it decreases. The p53 protein increased its expression in the first dose and then decreased in the following ones. The expression of caspase-3 for each dose increased. The percentage of cell death was dependent on the dose of exposure. The data obtained determine that Hsp70 is a bioindicator of cellular stress, while p53, caspase-8 and caspase-3 are bioindicators of apoptosis. The cellular damage of leukocytes exposed to X-rays, provides relevant information to implement protection mechanisms in the area of radiological safety. Los rayos X son utilizados en consultorios odontológicos con fines de diagnóstico, donde el POE recibe dosis de exposición ocasionando un daño estocástico que comúnmente no es considerado, pero es acumulable. Por lo anterior, se ha reportado una relación entre leucopenia y exposición a radiación ionizante, de tal manera que los leucocitos son un modelo biológico idóneo. El daño celular se manifiesta a través de expresión de bioindicadores como Hsp70 o con muerte celular, proceso que debe ser estudiado para ver el grado de tolerancia homeostática con diferentes grados de radiación. El objetivo de este trabajo fue evaluar los cambios en la expresión de las proteínas Hsp70, p53, caspasa-8 y caspasa-3 y/o muerte celular por apoptosis en leucocitos humanos expuestos a rayos X provenientes de equipos odontológicos. Leucocitos en sangre total fueron expuestos a dosis diferentes de rayos X. Posteriormente, se evaluó la viabilidad celular mediante tinción Wright. Seguido a esto se procedió a identificar las proteínas Hsp70, p53, caspasa-8 y caspasa-3 por Western-blot. Se observó una disminución de células vivas de 97.5% a 39.5% respecto a las diferentes dosis de exposición. El comportamiento de Hsp70 y caspasa-8 fue similar, de tal manera que para la tercera dosis la expresión incrementó y para la dosis más alta esta disminuye. La proteína p53 incrementó su expresión en la primera dosis para luego disminuir en las siguientes. La expresión de caspasa-3 para cada dosis fue incrementando. El porcentaje de muerte celular fue dependiente de la dosis de exposición. Los datos obtenidos determinan que Hsp70 es un bioindicador de estrés celular, mientras que p53, caspasa-8 y caspasa-3 son bioindicadores de apoptosis. El daño celular de los leucocitos expuestos a rayos X, provee información relevante para implementar mecanismos de protección en el área de seguridad radiológica.

Objetivo general: Determinar la relación que existe entre el número de leucocitos fecales y el resultado de coprocultivo en niños de uno a cinco años con diagnóstico de enfermedad diarréica aguda atendidos en el servicio de emergencias pediátricas del hospital San José en 2018. Anualmente, se reportan aproximadamente 2 billones de casos globalmente de enfermedad diarréica aguda, de los cuales 1,9 millones culminan en muerte de niños menores de cinco años, sobre todo en países subdesarrollados. Estos presentan en promedio tres episodios de enfermedad diarréica aguda anualmente. En este grupo poblacional, la enfermedad diarréica aguda es tras la neumonía la principal causa de muerte y de complicaciones a futuro; causa cerca del 20% de la mortalidad en menores de cinco años, lo cual se traduce en el fallecimiento de más de cinco mil niños diariamente. Las complicaciones más importantes en estos niños son: malnutrición, déficit del crecimiento y desarrollo, así como cognitivo. Se han reportado prevalencias de enfermedad diarréica aguda en niños menores de cinco años de países en vías de desarrollo de 14%, siendo mayor en países africanos, latinoamericanos y asiáticos. Se ha reportado una prevalencia aproximada de 20% en países latinoamericanos, así como prevalencias mayores a 25% en Bolivia y de 18% en Perú. A nivel nacional estudios previos plantearon en una población de niños menores de cinco años que la presencia de cinco o más leucocitos en muestra fecal, sangre en heces, se asoció a una alta prevalencia de coprocultivo positivo para etiología bacteriana. Asimismo, en esta población de estudio, se halló una mayor cantidad de leucocitos fecales en aquellos participantes con diarrea aguda por E. coli, no obstante, el estudio presentó limitaciones como la falta de exclusión de aquellos participantes cuya diarrea fue de etiología viral. Los estudios sugieren la realización de mayor investigación para determinar una asociación con mayor fortaleza y causalidad entre las dos variables mencionadas.Debido a lo expuesto, queda en evidencia que la literatura a nivel mundial halla asociación con respecto a la presencia de leucocitos fecales y coprocultivo positivo para un agente bacteriano. No obstante, la asociación no es determinante y existe una brecha a nivel local con respecto a este tema.

The objective of the study was to identify leukocyte populations in the postnatal thymus of alpacas under 60 days of age. Euthanasia was performed on six Huacaya alpacas in Huanta province, Ayacucho, Peru. Thymus samples were obtained, embedded in OCT and immediately frozen in liquid nitrogen and stored at -70 ºC until processing. Frozen sections were prepared and mounted with organosilane. Immunohistochemistry was performed with mouse primary antibody and rabbit secondary antibodies. The reaction was evidenced using the avidin-biotin-peroxidase complex and was counter-stained with hematoxylin. Specific monoclonal antibodies were used for the identification of leukocytic subpopulations of the thymus. Five visual fields were randomly evaluated at 400X. The distribution and density of the staining was classified as negative (-), inconstant (±), slight (+), moderate (++) and strong (+++). The results show that the largest population of leukocyte cells was located in the cortex of the thymus and corresponded to immature cells that do not express surface markers; likewise, the highest population of immunomarked cells, in maturation, were located in the medulla of the thymus, predominantly the TCR-αβ lymphocytes, with low values of γδ TCR lymphocytes, CD8 lymphocytes, B lymphocytes and monocytes/macrophages, with inconstant lymphocyte values CD4. In the cortex of the thymus there were low values of αβ TCR lymphocytes and CD8 lymphocytes, and inconstant values of monocytes/macrophages, without evidence of γδTCR lymphocytes, CD4 lymphocytes and B lymphocytes. El objetivo del estudio fue identificar las poblaciones leucocitarias en el timo posnatal de alpacas menores de 60 días de edad. Se realizó la eutanasia a seis alpacas Huacaya en la provincia de Huanta, Ayacucho, Perú. Se obtuvieron muestras de timo que fueron embebidas en OTC y congeladas inmediatamente en nitrógeno líquido y conservadas a -70 ºC hasta su procesamiento. Se prepararon secciones congeladas y se fijaron a la lámina con el adhesivo organosilano. Se realizó la inmunohistoquímica con anticuerpo primario de ratón y secundarios de conejo. La reacción se evidenció empleando el complejo avidina-biotina-peroxidasa y se contra-coloreó con Hematoxilina. Se emplearon anticuerpos monoclonales específicos para la identificación de las subpoblaciones leucocíticas del timo; se evaluaron cinco campos visuales de forma aleatoria a un aumento de 400X. La distribución y densidad de la tinción se clasificó como negativa (-), inconstante (±), ligera (+), moderada (++) y fuerte (+++). Los resultados muestran que la mayor población de células leucocitarias se ubicó en la corteza del timo y correspondieron a células inmaduras que no expresan marcadores de superficie; así mismo, la mayor población de células inmunomarcadas, en maduración, se ubicaron en la médula del timo, predominando los linfocitos TCR αβ, con valores bajos de linfocitos TCR γδ, linfocitos CD8, linfocitos B y monocitos/macrófagos, con valores inconstantes de linfocitos CD4. En la corteza del timo se observaron valores bajos de linfocitos TCR αβ y linfocitos CD8, y valores inconstantes de monocitos/macrófagos, sin evidencias de linfocitos TCR γδ, linfocitos CD4 y linfocitos B.

M{487} Teresa Gil Ruíz, Univ. Granada

RESUMEN Con el objetivo de establecer los límites de referencia de analitos hematológicos de cabras adultas de razas productoras de leche clínicamente sanas, sujetas al manejo y a las características de los sistemas de producción intensiva del Altiplano Mexicano, se recolectaron y analizaron muestras de sangre de cabras de 2 o más años de edad en diferentes etapas de producción. Con los resultados se obtuvieron los límites de referencia para hematocrito, cuenta de eritrocitos, volumen globular medio (VGM), plaquetas, sólidos totales, fibrinógeno, cuenta de leucocitos, neutrófilos segmentados, neutrófilos en banda, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos. Las medias obtenidas para cada analito fueron: hematocrito (0,22-0,36 L/L), cuenta de eritrocitos (9,07-18,47 x1012/L), volumen globular medio (VGM) (14,44-27,91), plaquetas (229-3 1 63 x109/L), solidos totales (65,64-84,64 g/L), fibrinógeno (0-6 g/L), cuenta de leucocitos (3,75-11,47 x109/L), neutrófilos segmentados (0,95-4,98 x109/L), neutrófilos en banda (0-0,16 x109/L), linfocitos (1,76-6,44 x109/L), monocitos (0-0,65 x109/L), eosinófilos (0-1,36 x109/L) y basófilos (0 - 0,37 x109/L). Estos valores se compararon con los obtenidos en otros estudios similares, y se encontraron algunas diferencias mayoritariamente en los valores obtenidos para hematocrito, eritrocitos, VGM, plaquetas, leucocitos y linfocitos, lo cual se debe a las diferencias en condiciones medioambientales y de alimientación entre los estudios. ABSTRACT With the aim to establish the hematological analyte reference limits of clinically healthy adult goats of dairy producing breeds, subjected to the handling and characteristics of intensive production systems in the Mexican Plateau, the blood samples of 2-year old and older goats at different production stages were collected and analyzed. Reference limits (interval in brackets) for hematocrit (0.22-0.36 L/L), erythrocyte count (9.07-18.47 x1012/L), mean cell volume (MCV) (14.44-27.91 fL), platelets (229-3163 x109/L), total solids (65.64-84.64 g/L), fibrinogen (0-6 g/L), leukocyte count (3.75-11.47 x109/L), segmented neutrophils (0.95-4.98 x109/L), band neutrophils (0-0.16 x109/L), lymphocytes (1.76-6.44 x109/L), monocytes (0-0.65 x109/L), eosinophils (0-1.36 x109/L) and basophils (0-0.37 x109/L) were obtained. These values were compared with similar study results. Differences were found mainly in the values for hematocrit, erythrocytes, MCV, platelets, total leukocytes, and lymphocytes; this is due to environmental and feeding differences between the studies.

RESUMEN: Diferentes técnicas quirúrgicas periodontales han surgido a lo largo del tiempo con el objetivo de lograr una regeneración periodontal y mejorar su predictibilidad. La Fibrina Rica en Plaquetas y Leucocitos (L-PRF) se ha posicionado como una alternativa para cumplir este objetivo, debido a que no requiere anticoagulantes en su preparación y muestra liberación sostenida de factores de crecimiento durante por lo menos 7 días. El objetivo de esta revisión narrativa es describir la evidencia disponible sobre el uso de L-PRF en defectos intra-óseos. Se realizó una búsqueda en las bases de datos MEDLINE y Cochrane Library, exploración manual y páginas web. De un total de 494 artículos recuperados, fueron seleccionados 12 publicaciones para esta revisión. Los resultados sugieren que L-PRF muestra beneficios al ser utilizada en el tratamiento periodontal regenerativo de defectos intra-óseos. Sin embargo, son necesarios ensayos clínicos con diseño metodológico estandarizado que permitan comparar L-PRF con biomateriales habitualmente empleados en el tratamiento de estos defectos.

RESUMEN: El propóleos es un producto resinoso complejo producido por las abejas Apis mellifera, el cual posee diversas actividades biológicas como inmunomodulador, antiinflamatorio, anticancerígeno, antiviral, antibacteriano, antioxidante, entre otros. El propósito del siguiente estudio fue realizar una evaluación in vivo de las propiedades antiinflamatorias de un extracto de propóleos chileno, sobre el modelo de edema auricular inducido por 13-acetato-12-O-tetradecanoilforbol (TPA) en pabellón auricular de ratón, para posterior evaluación y análisis histológico. El extracto de propóleos chileno (EEP) utilizado se obtuvo a partir de un macerado etanólico, rotaevaporado y liofilizado. Se observó que el EEP disminuyó el edema y el infiltrado inflamatorio de forma significativa. Estos resultados sugieren que el extracto etanólico de propóleos chileno posee potenciales efectos antiinflamatorios o moduladores del sistema inmunológico en edema auricular. SUMMARY: Propolis is a complex resinous product produced by bees Apis mellifera, which has a number of biological activities such as an immunomodulator, anti-inflammatory, anticarcinogenic, antiviral, antibacterial, antioxidant, among others. The purpose of the following study was to perform an in vivo evaluation of the anti-inflammatory properties of a Chilean propolis extract, on the model of atrial edema induced 12-O-tetradecanoyl phorbol-13- acetate (TPA) in the mouse auricular pavilion, for later evaluation and histological analysis. The Chilean propolis extract (EPP) used was obtained from an ethanolic, rotaevaporated and lyophilized macerate. It was observed that the EPP significantly decreased edema and inflammatory infiltrate. These results suggest that the ethanolic extract of Chilean propolis possesses potential anti-inflammatory or modulatory effects of the immune system in atrial edema.

RESUMEN: El propóleos es un producto resinoso complejo producido por las abejas Apis mellifera, el cual posee diversas actividades biológicas como inmunomodulador, antiinflamatorio, anticancerígeno, antiviral, antibacteriano, antioxidante, entre otros. El propósito del siguiente estudio fue realizar una evaluación in vivo de las propiedades antiinflamatorias de un extracto de propóleos chileno, sobre el modelo de edema auricular inducido por 13-acetato-12-O-tetradecanoilforbol (TPA) en pabellón auricular de ratón, para posterior evaluación y análisis histológico. El extracto de propóleos chileno (EEP) utilizado se obtuvo a partir de un macerado etanólico, rotaevaporado y liofilizado. Se observó que el EEP disminuyó el edema y el infiltrado inflamatorio de forma significativa. Estos resultados sugieren que el extracto etanólico de propóleos chileno posee potenciales efectos antiinflamatorios o moduladores del sistema inmunológico en edema auricular.

La diabetes tipo 2 (DM2) se ha convertido en un grave problema de salud a nivel mundial que está íntimamente relacionado con el desarrollo de complicaciones micro y macrovasculares. Se ha descrito que algunos haplogrupos del ADN mitocondrial (ADNmt) podrían estar involucrados en la DM2 y sus complicaciones vasculares asociadas. Por lo que nuestro primer objetivo consistió en determinar el impacto de los haplogrupos mitocondriales más frecuentes de la población española sobre las características metabólicas y los marcadores de función renal en pacientes con DM2 y controles sanos. Nuestros resultados indican que el haplogrupo JT (concretamente, el polimorfismo m.4216T> C) se asocia con un peor control glucémico en pacientes con DM2, que contribuiría al deterioro de su función renal, y podría predisponer a los pacientes al desarrollo de nefropatía diabética. Un control glucémico adecuado es fundamental para retrasar, minimizar o evitar la aparición de complicaciones vasculares asociadas a la DM2, por esta razón en la presente tesis doctoral evaluamos el papel del control glucémico sobre la función mitocondrial, la producción de especies reactivas de oxígeno (ERO), y la expresión de proteínas que participan en la dinámica mitocondrial, en leucocitos aislados de pacientes con DM2 y voluntarios sanos; así como la relación de estos mecanismos con las interacciones leucocito-endotelio. Nuestros resultados sugieren que un control glucémico inadecuado en los pacientes con DM2 se relaciona con una alteración en la expresión leucocitaria de las proteínas implicadas en la dinámica mitocondrial (aumento de la fisión y disminución de la fusión), que compromete la función mitocondrial y podría contribuir al estrés oxidativo. En consecuencia, existe un aumento de la interacción leucocito-endotelio que podría acelerar el proceso aterosclerótico y, por tanto, el desarrollo de complicaciones vasculares. La metformina es el fármaco antihiperglucémico de primera línea en el tratamiento de la DM2 y se ha demostrado que mejora la función endotelial y reduce el riesgo cardiovascular de los pacientes que la toman. Sin embargo, no se conocen con exactitud los mecanismos moleculares por los que esta biguanida ejerce efectos beneficiosos sobre la vasculatura. Es por ello que nos propusimos estudiar el efecto de este fármaco sobre el estrés oxidativo, la disfunción mitocondrial y endotelial, el estrés de retículo endoplasmático y la autofagia, en los leucocitos aislados de pacientes con DM2 tratados y no tratados con metformina. Nuestros resultados demuestran que los pacientes con DM2 tratados con metformina presentan una menor concentración sérica de moléculas de adhesión celular, así como un beneficio en el estrés oxidativo de sus leucocitos (reducción de la producción de ERO mitocondriales y aumento de defensas antioxidantes), y una disminución de las interacciones leucocito-endotelio, en comparación con los pacientes que no tomaban metformina. Por otro lado, observamos que, en los leucocitos aislados de pacientes tratados con el fármaco, la reducción del estrés oxidativo, junto con un control del estrés de retículo endoplasmático a través de las rutas de la UPR iniciadas por IRE1 y PERK, harían innecesario el incremento de la actividad autofágica. Lo que contrasta con los leucocitos de pacientes no tratados con metformina, donde el aumento del estrés oxidativo y la activación de la vía de la UPR dependiente de ATF6, podrían aumentar la expresión de marcadores de autofagia con el fin de eliminar la excesiva acumulación de proteínas mal plegadas. Type 2 diabetes (T2D) has become a major health problem worldwide which is related to micro- and macrovascular complications. Mitochondrial DNA (mtDNA) haplogroups might be involved in T2D and their associated complications. Thus, we aimed to determine the impact of mtDNA haplogroups on metabolic characteristics and renal function in T2D patients and healthy controls. Our results imply that the JT haplogroup (in particular the variant m.4216T>C) is associated with a worse management of glucose in T2D patients, which can contribute to a deterioration of renal function, thus predisposing the individual to the development of diabetic nephropathy. An adequate glycaemic control is essential for delaying the onset of T2D associated vascular complications, for this reason we evaluated its involvement on mitochondrial function, ROS production, and mitochondrial dynamics in leukocytes isolated from healthy volunteers and T2D patients, as well as the relationships between these parameters and leukocyte-endothelium interactions. Our data suggest that loss of glycaemic control in T2D patients is related with an imbalance of mitochondrial dynamics in their leukocytes (increased fission and decreased fusion), which compromises mitochondrial function and may lead to oxidative stress and enhanced leukocyte-endothelium interactions. Metformin is the most commonly prescribed anti-hyperglycaemic drug, and has been shown to exert beneficial effects on the vasculature. We proposed to study its effect on oxidative stress, mitochondrial and endothelial dysfunction, ER stress and autophagy, in leukocytes isolated from T2D patients that were or were not taking metformin. Our results support a beneficial impact of metformin treatment on oxidative stress (reduction in mitochondrial ROS production and increase in antioxidants), endothelial function (reduced levels of adhesion molecules), and decreased interactions of leukocytes with endothelial cells. On the other hand, the reduction in oxidative stress, together with an increase in the UPR pathways initiated by IRE1 and PERK may block the autophagic response in the leukocytes of metformin-treated patients; which contrasts with leukocytes from patients not treated with metformin, where the increased oxidative stress and the ATF6-dependent branch of UPR might increase autophagy in order to clear misfolded proteins. Overall, our findings support the involvement of the mtDNA haplogroup JT, oxidative stress, mitochondrial dynamics, endothelial dysfunction, ER stress and autophagy in the pathophysiology of T2D and suggest a role of these processes in the development of vascular complications. Moreover, they support the hypothesis that treatment of T2D patients with metformin modulates oxidative stress, UPR, and autophagy in leukocytes in order to reduce their interaction with the endothelium, which may delay the onset of the atherosclerotic process and, consequently, the development of T2D-associated vascular complications.

La Ictiohematología es una herramienta de uso común con fines clínicos en peces de importancia económica, con un menor aporte en la comprensión de la fisiología del organismo en relación con su medio. En este contexto y frente a la escasa información publicada en el Perú de aspectos hematológicos de osteictios, se propuso caracterizar los leucocitos del pez angel Pterophyllum scalare (Lichtenstein, 1823) y determinar los valores de referencia cuantitativos. Este pez amazónico exportado como ornamental fue obtenido de un acuario de Lima-Perú. La extracción de la sangre, se llevó a cabo por el método de punción cardiaca, realizándose luego extensiones teñidas con Giemsa y con Wright, y se procedió a realizar el recuento leucocitario. Se relacionaron los parámetros biométricos [longitud estándar (mm), longitud total (mm) y peso (g)] con su caracterización leucocitaria. Los leucocitos, en general, presentaron características similares a las descritas para otros peces. Cuantitativamente, se encontró la siguiente secuencia: linfocitos (61,6%)> monocitos (30,1%)> neutrófilos (4,0%)> eosinófilos (2,1%)> basófilos (1,8%). Los parámetros hematológicos obtenidos son un aporte al conocimiento de esta especie y servirán como base comparativa en futuras aplicaciones.