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La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) es capaz de causar una enfermedad hepática crónica que puede derivar en cirrosis y cuyo curso se altera por la coinfección con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). La enfermedad puede progresar hasta cirrosis avanzada, desarrollando hipertensión portal clínicamente significativa (HPCS). En este trabajo, hemos caracterizado alteraciones moleculares ocurrentes en pacientes coinfectados por el VHC y el VIH durante la cirrosis avanzada, que abarcan tanto marcadores plasmáticos, como alteraciones metabólicas y transcriptómicas. En primer lugar, los marcadores plasmáticos de inflamación IP-10, IL-8, IL-6 y OPG, los de disfunción endotelial, sVCAM-1 y sICAM-1, y de riesgo trombótico como el dímero D, se encontraron más elevados en aquellos pacientes con una cirrosis más severa. En segundo lugar, los estadios avanzados de cirrosis se relacionaron con cambios en el perfil metabolómico. Por un lado, se encontraron aumentados los ácidos grasos, ácidos biliares, aminoácidos aromáticos y azufrados, derivados del butirato, fosfolípidos oxidados, y aquellos metabolitos relacionados con la energía y con la fermentación bacteriana. Por otro lado, las lisofosfatidilcolinas (LPC) y las lisofosfatidiletanolaminas, los aminoácidos ramificados y los metabolitos del ciclo del ácido tricarboxílico disminuyeron. Además, los pacientes con cirrosis avanzada monoinfectados por el VHC y los coinfectados por VHC/VIH no presentaron grandes diferencias, tanto a nivel de biomarcadores plasmáticos como de alteraciones metabólicas. En tercer lugar, los pacientes con alto riesgo de desarrollar HPCS (LSM ≥ 25 kPa) fueron caracterizados por una firma de expresión génica diferencial que englobaba 38 transcritos sobreexpresados y 22 infraexpresados. Por último, las distintas alteraciones moleculares estudiadas permitieron distinguir subgrupos de pacientes con interés clínico. La combinación de IL-6 e IP-10 y, separadamente, la de los metabolitos ácido glicólico, LPC (16: 0) y ácido taurocólico diferenció a aquellos pacientes con cirrosis descompensada. Además, los transcritos STAG3L2 y MDK mostraron buena capacidad para discriminar a los pacientes en alto riesgo de desarrollar HPCS. En conjunto, este trabajo permite ampliar el conocimiento de los procesos subyacentes durante el curso de esta enfermedad y abre la puerta para nuevos desarrollos que faciliten y mejoren el manejo de estos pacientes.

El síndrome antifosfolipídico (SAF) es una enfermedad autoinmune con diversas formas de presentación clínica como las trombosis y los abortos de repetición. En la actualidad no se disponen de unos criterios diagnósticos para la enfermedad, aunque si de unos criterios clasificatorios diseñados con finalidades de investigación. En dichos criterios se considera que un paciente para ser clasificado como SAF debe tener, además de manifestaciones clínicas, al menos una de las siguientes pruebas de laboratorio positivas: anticoagulante lúpico, anticuerpos anti cardiolipina o anti β 2 glicoproteína I (aB2GP1) de isotipo IgG o IgM. Estas pruebas son conocidas como anticuerpos antifosfolipídicos (aFL). Pacientes con manifestaciones clínicas del síndrome en ausencia de estas pruebas de laboratorio son considerados como “SAF seronegativo”. En este trabajo proponemos que esto pudiera suceder tanto a la falta de optimización en las técnicas de detección utilizadas en el laboratorio, como a la presencia (y no determinación) de otros aFL actualmente no incluidos en los criterios de clasificación. Para cumplir con este objetivo reunimos un total de 921 controles sanos y 2 cohortes de pacientes de 4487 y 1020 respetivamente en el Laboratorio de Autoinmunidad del Servicio de Inmunología del Hospital Universitario 12 de Octubre (Madrid, España). En la primera cohorte determinamos 2 aFL no incluidos en los criterios de clasificación: los aB2GPI de isotipo IgA y los anticuerpos antifosfatidilserina/protrombina (aFS/PT). En la segunda de estas cohortes comparamos 2 métodos diagnósticos automatizados. Como resultado obtuvimos que la contribución de los aB2GPI de isotipo IgA y aFS/PT es independiente, equiparable e incluso mayor a la de los anticuerpos incluidos en los criterios de clasificación de Sídney. Incluso al ser analizados por manifestaciones clínicas específicas. También observamos que la comparabilidad y uniformidad entre las diferentes pruebas disponibles para la detección de los aFL incluidos en los criterios es baja.

La infección por HTLV-2 ha sido estudiada, en gran medida, en individuos que conviven con el VIH-1 en su organismo, y se ha demostrado que es capaz de producir un retraso en la progresión a SIDA. El presente trabajo doctoral ha partido de una extensa población de personas infectadas por el VIH-1 que siguen una revisión médica en el Hospital Ramón y Cajal de Madrid, España. La población consta de 1716 pacientes en seguimiento, cuyos historiales sanitarios han sido tomados desde la base de datos facilitada por el personal clínico que evalúa el seguimiento de cada uno. La población en estudio se ha clasificado en dos grandes subpoblaciones: una de ellas está integrada por individuos VIH-1+ con coinfección por HTLV-2 (denominada subpoblación HT2+ o coinfectados); y la otra está representada por individuos infectados VIH-1+ sin infección por HTLV-2 (subpoblación HT2- o monoinfectados). Diversos estudios se han llevado a cabo para analizar la influencia que ejerce el HTLV-2 sobre la infección por VIH-1. Entre ellos, se ha visto que la actividad citolítica, tanto celular (citotoxicidad ejercida por linfocitos T CD8+) como soluble (citoquinas en plasma), es mayor en la subpoblación HT2+ que en la subpoblación HT2-, analizadas por medio de técnicas de inmunoanálisis. Hay una estrecha relación entre la adquisición de HTLV-2 y la adicción a drogas por vía parenteral. Casi la totalidad de los pacientes de la subpoblación HT2+ está representada por personas que fueron adictas a sustancias administradas por vena y ese mismo porcentaje corresponde a individuos que presentan anticuerpos frente al virus de la Hepatitis C (VHC), estableciéndose una correspondencia entre la vía parenteral y las infecciones por VHC y HTLV-2. La medida de la carga proviral VIH-1 alcanza unos niveles inferiores en presencia de infección por HTLV-2, estudiado mediante Real Time-qPCR (RT-qPCR). Se ha estudiado, en la base de datos de los historiales clínicos de los pacientes, el posible desarrollo tumoral y la tasa de supervivencia en presencia y ausencia de HTLV-2, y se muestra que hay un menor número de individuos con cáncer en la clasificación de coinfectados que en la de monoinfectados, especialmente en el caso de hepatocarcinomas. A nivel celular, el ratio entre los linfocitos T CD4+ y CD8+ es menor en presencia de infección por HTLV-2 que en monoinfectados. Todo ello parece indicar que el HTLV-2 tiene la propiedad de proteger de manera importante a los individuos que han sido infectados por este virus, frente a la enfermedad del SIDA, retrasando su evolución, y esto lo hemos podido observar, por ejemplo, en la reducción de la integración del VIH-1 en sus células diana, en el incremento de la actividad citolítica defendiendo al organismo de la acción del VIH-1, y se ha visto una menor cantidad de desarrollo de tumores, aunque los pacientes permanecen en estado de salud delicado. Los principales objetivos de este trabajo son evaluar: si la infección por el HTLV-2 modula determinadas características inmunovirológicas; la respuesta citotóxica soluble (mediado por perforinas y granzimas) y celular (mediado por actividad de linfocitos T CD8+); el bloqueo en la integración del VIH-1 en sus células diana; y la protección frente al desarrollo de tumores en individuos infectados por el VIH-1. Palabras clave: VIH-1, SIDA, HTLV-2, carga proviral VIH-1, actividad citolítica.

El objetivo del estudio es determinar si en pacientes con diagnóstico de Síndrome mielodisplásico (SMD) clasificados por IPSS-R como muy bajo riesgo, bajo riesgo o riesgo intermedio, existe una correlación pronóstica entre poblaciones linfoide de progenitores B, y los linfocitos CD4, CD8 y NK, obtenidos por citometría de flujo en la médula ósea al momento del diagnóstico, y la supervivencia libre de progresión (SLP) hacia un estado de SMD con exceso de blastos-2 o leucemia mieloide aguda. Para ello se estudiaron 82 pacientes con diagnóstico y seguimiento en el Hospital Ramón y Cajal (Madrid, España) entre los años 2006-2016. Se obtuvo una población con 7.3%, 58.5% y 34.2%, de porcentaje de pacientes en los grupos muy bajo, bajo y riesgo intermedio, respectivamente, con un promedio global de progresión a leucemia de 26.2 meses. Para ello se utilizó un median split analysis y el estudio de conglomerados. Con ello se obtuvo que existía un riesgo 2 veces mayor de progresión a estadios avanzados, con una depleción de progenitores B menor al 0.1% (HR de 2.04, con un IC955: 1.11-3.57) y con una cifra de linfocitos NK menor a 2.8% (HR de 2.06, con un IC95: 1.25-3.39). Con los linfocitos CD4 y CD8 se observó que la depleción de éstas poblaciones mostraba una tendencia a progresión más rápida pero sin un resultado estadísticamente significativo. Adicionalmente, el estudio de conglomerados mostró que la depleción de progenitores B, linfocitos CD4, CD8 y NK, está asociada a menor SLP.

[ES] El MM sigue siendo en la actualidad una enfermedad incurable en la mayoría de los pacientes, lo que supone observar recaídas sucesivas tras una primera línea. El objetivo de tratamiento es, por una parte, alcanzar la mejor y más profunda respuesta posible, y mantenerla a largo plazo, para prevenir recaídas y prolongar la supervivencia global. En ese sentido, el sistema inmune tiene un papel clave en el pronóstico del MM, bien porque muchas estrategias se dirigen a potenciarlo o bien porque un sistema inmune lo más sano posible o que se recupere con el tratamiento permitirá un mejor control de la enfermedad. En este estudio, se ha propuesto evaluar el papel del sistema inmune en dos situaciones diferentes: candidatos a ASCT y no candidatos. - Candidatos a ASCT: La administración de altas dosis de quimioterapia y ASCT se considera el estándar de tratamiento en los pacientes con MM que son candidatos a ello. Tras ASCT, diferentes estrategias como la consolidación y el mantenimiento se han intentado estandarizar para profundizar hasta la mejor respuesta posible y mantenerla en el tiempo, con el objetivo de lograr un incremento de la supervivencia. Se considera que la respuesta alcanzada aproximadamente en el día +100 desde el ASCT es la máxima respuesta que se alcanza con dicho procedimiento, por lo que las mejorías en la respuesta que se observan a partir de este momento y bajo consolidación y/o mantenimiento se deben al efecto beneficioso del tratamiento post-ASCT. Sin embargo, algunos estudios sugieren que puede haber pacientes respondedores tardíos que mejoran espontáneamente su respuesta más allá del día +100 post-ASCT, lo cual podría poner en duda la utilidad o necesidad del tratamiento post-ASCT. Por tanto, se considera que el tiempo para evaluar la respuesta es el día +100, pero hipotetizamos que un potencial restablecimiento inmune tras el ASCT, podría inducir respuestas más allá de este momento y, podría interferir en la evaluación de la eficacia de otros tratamientos, como el mantenimiento. - No candidatos a ASCT: En el momento actual, estos pacientes reciben tratamiento hasta la progresión de la enfermedad. Cada vez más se utilizan tratamientos como IMiDs y anti-CD38, en los cuales, la presencia de un sistema inmune preservado puede ser clave para su eficacia. Una de las manifestaciones de la disfunción del sistema inmune es la inmunoparesia (disminución de las inmunoglobulinas policlonales). Nuestra hipótesis es que la utilización de un posible biomarcador del funcionamiento del sistema inmune, como es la inmunoparesia, y, más importante su recuperación durante el tratamiento, podría afectar a la eficacia de estos u otros tratamientos e influir en el pronóstico de estos pacientes. Hipotéticamente, la presencia de inmunoparesia al diagnóstico se relacionaría con peor pronóstico y, al mismo tiempo, la recuperación de la misma durante el tratamiento debería impactar de forma positiva en el pronóstico de los pacientes, como reflejo de una mejor funcionalidad del sistema inmune para el control de la enfermedad. En base a lo anteriormente expuesto, se determinan los siguientes objetivos específicos: - Con respecto a los pacientes candidatos a ASCT • Determinar la tasa de mejoría de respuesta tardía (más allá del día +100) en pacientes con mieloma múltiple que han recibido trasplante autólogo. • Determinar los factores que se puedan relacionar con una mejoría de respuesta tardía post trasplante. • Determinar el impacto pronóstico de la respuesta tardía en supervivencia frente a aquéllos en que no se produce. - Con respecto a los pacientes no candidatos a ASCT • Determinar la frecuencia de inmunoparesia al diagnóstico en los pacientes no candidatos a trasplante autólogo. • Determinar los factores que se asocian con la aparición de inmunoparesia al diagnóstico. • Determinar el impacto pronóstico de la inmunoparesia al diagnóstico en los pacientes con mieloma múltiple no candidatos a trasplante autólogo. • Determinar la tasa de normalización de las inmunoglobulinas policlonales durante el tratamiento o tras la finalización del mismo, en los pacientes con mieloma múltiple no candidatos a trasplante autólogo. • Determinar los factores evolutivos que se relacionan con la normalización de las inmunoglobulinas policlonales. • Determinar el impacto pronóstico de la normalización de las inmunoglobulinas policlonales.

El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia de células B caracterizada por la expansión y acumulación de células plasmáticas (CPs) patológicas en la médula ósea (MO). El MM constituye el 1% de todas las neoplasias y supone el 10% de las hemopatías malignas. En las últimas dos décadas se han logrado importantes avances en el tratamiento del MM, principalmente con la introducción de inhibidores del proteosoma, fármacos inmunomoduladores y anticuerpos monoclonales (mAb). Sin embargo, el MM sigue siendo una enfermedad altamente resistente dada su propensión a la heterogeneidad clonal y su compleja interacción con el microambiente medular. Son necesarias estrategias terapéuticas novedosas capaces de revertir la resistencia a los tratamientos de primera y otras líneas. Nos propusimos investigar los mecanismos de acción de isatuximab (mAb anti-CD38) y EM801 (anticuerpo biespecífico BCMAxCD3) mediante cultivos con los fármacos, utilizando tanto líneas celulares como muestras primarias de MO de pacientes con MM. Isatuximab es un mAb IgG1κ, que reconoce específicamente un epítopo concreto de CD38. Inicialmente, hemos investigado un efecto directo de este mAb, sobre el receptor CD38, concluyendo que isatuximab no tiene efecto directo sobre las líneas de MM con baja o alta expresión de CD38. Además, este mAb no produce una liberación significativa de la molécula de la superficie de las CPs. A continuación hemos evaluado diferentes mecanismos de acción responsables del efecto de isatuximab. La citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo se proclama como mecanismo efector más relevante por el cual elimina las CPs mielomatosas, siendo las células NK la subpoblación más importante para la acción inequívoca del fármaco. Los mecanismos de fagocitosis celular y citotoxicidad dependiente de complemento solo ocurrirían en pacientes con una densidad de CD38 muy elevada en sus CPs, mostrando de esta manera una asociación directa entre los niveles de expresión y los mecanismos desarrollados por el fármaco. Además, isatuximab induce depleción significativa de precursores B, basófilos y células NK. Por último demostramos que isatuximab se une tanto al receptor FcγRIII como a CD38 presente en la superficie de células NK, provocando una activación y posterior depleción de estas células. EM801 es una IgG asimétrica, bivalente para BCMA y monovalente para CD3ε. Con este diseño, se produce una unión preferencial de las CPs con los linfocitos T. Inicialmente, hemos demostrado que la molécula BCMA se expresa de modo selectivo en las CPs, estando ausente en el resto de poblaciones leucocitarias. A continuación, mediante microscopia de fluorescencia y fuerza atómica, hemos verificado que EM801 produce una unión estrecha y selectiva de la CP y el linfocito T. Esta unión provoca una activación de los linfocitos T con expresión de marcadores de activación como son CD69 y CD25. Además, mediante ELISA, hemos observado una secreción significativa de interferón gamma, granzima B y perforina. La eficacia del fármaco se demostró en cultivos de MO de 43 pacientes con MM, obteniendo una lisis significativa en el 79% de los casos. Además, se estudió la toxicidad que podría tener EM801 sobre otras células de la MO, no observando una muerte relevante en células B, T, NK ni neutrófilos. Por último, hemos testado EM801 en un modelo de xenoinjerto subcutáneo en ratones NOG, observando regresión tumoral en 6 de 9 ratones tratados. En el modelo animal de mono cynomolgus, utilizado para evaluar la actividad del fármaco en un ambiente autólogo, se corroboró la lisis significativa de CPs, así como una disminución en los niveles de IgG e IgM. En estos animales, se observó un aumento ligero y transitorio de citoquinas, que regresaba a niveles basales tras 24 horas de la inyección del fármaco, con lo que podemos concluir que EM801 muestra un perfil de toxicidad aceptable y un perfil farmacocinético que permitiría su administración semanal.

The Group of Researchers on Human Reproduction from Universidad de Oriente has a research line that assesses the effects of mercury on the male reproductive system, using an animal model susceptible to the metal. Lesions induced by necrosis and apoptosis related to alterations in testosterone synthesis have been demonstrated. Injuries involve an autoimmune response to germ cells and an increased Th1 activity at baseline and 7 months of treatment. Since mercury is able to generate “danger” signals, the expression of stress proteins (hsp) in germ cells and the immune system have been studied, which are increased in the treated animals. The results obtained until now support the hypothesis that mercury at subtoxic doses is capable of inducing direct damage and humoral and cell-type responses, causing damage to the seminiferous epithelium, through several means, which could prevent the fertilization in the long term.

El lupus eritematoso sistémico (LES) es una enfermedad inflamatoria crónica y recurrente, de afectación multisistémica, que afecta fundamentalmente a la piel, las articulaciones, riñones y membranas serosas. Su etiología es desconocida, pero se cree que es consecuencia del fallo de los sistemas reguladores del sistema inmune, produciéndose autoanticuerpos dirigidos contra antígenos celulares del propio organismo. El diagnóstico se apoya en el cumplimiento de una serie de criterios de clasificación que incluye datos clínicos, inmunológicos y analíticos. Gracias al mejor conocimiento de los fenómenos autoinmunes, el LES ha dejado de ser considerado como una enfermedad rara, con infinidad de posibilidades en el campo de la investigación. Conclusiones: 1. Las pacientes con LES tienen mayor HTA nocturna e HTA nocturna aislada. 2. La VOP y la ERC se asociaron de forma independiente con la HTA nocturna. Hubo una tendencia a la asociación de la duración de la enfermedad con la HTA nocturna, aunque sin llegar a ser estadísticamente significativa. 3. La VOP y el SLEDAI se asociaron de forma independiente con el patrón no dipper. La enfermedad renal crónica tendió a asociarse al patrón no dipper, aunque sin llegar a ser estadísticamente significativa. 4. El índice de concordancia entre el diagnóstico de HTA en la consulta y por MAPA fue modesto tanto en el grupo de las pacientes con LES como en los controles. 5. Las pacientes con LES tuvieron cifras significativamente mas altas de PAS nocturna, PAD nocturna y PAM nocturna. No hubo diferencias en cuento a las mediciones diurnas y de 24 horas. 6. Las pacientes con LES tuvieron mayor carga tensional media, pero no hubo diferencias en el porcentaje de pacientes con carga tensional. 7. Las pacientes presentaron de forma significativa mayor patrón no dipper. Las pacientes también tuvieron menor porcentaje de descenso nocturno de la presión arterial. No hubo diferencias significativas en cuento a los patrones dipper extremo ni raisser. 8. Las pacientes con LES presentaron mayor HTA verdadera. No hubo diferencias estadísticamente significativas en cuento a HTA de bata blanca e HTA enmascarada., Tesis Univ. Granada.

Tesis de maestría en ciencias de la salud Giardia lamblia es un organismo unicelular flagelado causante de giardiasis. La infección se produce por la contaminación fecal-oral, siendo ésta una de las parasitosis gastrointestinales más frecuentes en todo el mundo. Existen 8 genotipos de G. lamblia. Las cepas pertenecientes a los genotipos A y B son los principales responsables en las infecciones en humanos y otros mamíferos. En la actualidad, los mecanismos por los cuales G. lamblia ocasiona daño al hospedero no son del todo comprendidos, así como el efecto que tienen las proteínas inmunogénicas sobre el intestino delgado. Para poder entender estos mecanismos, una herramienta que no es de utilidad es por medio de análisis histopatológicos. Para ello, en el presente trabajo, se obtuvieron muestras del intestino delgado, suero y heces de ratones C3H/HeJ infectados con las cepas WB y GS, pertenecientes los genotipos A y B de G. lamblia respectivamente, así como la cepa GS-5G8+, la cual expresa altos niveles de la proteína inmunogénica 5G8. La patología de la infección fue analizada en cortes histológicos empleando las tinciones hematoxilina-eosina; para la caracterización de las células en tejido intestinal, se utilizaron ensayos de inmunohistoquímica; finalmente se evaluó la respuesta inmune humoral mediante ELISA. Los resultados muestran que, durante la giardiasis, células mononucleares se infiltran en la lámina propia de los ratones infectados con los genotipos A y B de Giardia. El aumento de este infiltrado se debe a linfocitos B y T CD4 en la zona efectora de la respuesta inmune en tejido intestinal de ratones infectados con las cepas WB, GS, y GS-5G8 + a los 14 días post-infección. No se encontraron diferencias en alteraciones histopatológicas ocasionadas por los genotipos A y B de Giardia bajo las condiciones con las cuales se llevó a cabo este estudio. Además, se observó un aumento de anticuerpos específicos de isotipo IgA local en todos los grupos evaluados, mientras que IgG sistémica específica contra Giardia solo fue encontrada en las muestras de ratones infectados con la cepa GS-5G8+ Finalmente, estos anticuerpos tuvieron la capacidad de reconocer a la proteína 5G8 de Giardia. En conclusión, la infección por los genotipos A y B de Giardia induce un proceso inflamatorio agudo, caracterizado por un infiltrado celular en mucosa intestinal. Por otra parte, la respuesta inmune humoral de los ratones infectados con la cepa GS-5G8+, perteneciente al genotipo B, va dirigida en parte a la proteína 5G8. Universidad de Sonora. División de Ciencias Biológicas y de la Salud. Programa de Maestría en Ciencias de la Salud. 2018

Reducción alta, Univ. de Granada. Leída en 1989, La transmisión vertical de la hepatitis b es una de las causas más importantes de la transmisión y mantenimiento de la infección en el mundo. Actualmente es posible su prevención identificando a las gestantes de riesgo y aplicando inmunoprofilaxis a los recién nacidos. Material y método: se han estudiado 4450 gestantes determinando el ag hbs. En todas aquellas con aghbs (+) se realizaron el resto de marcadores en los rn hijos de portadora se aplico la pauta de inmunoprofilaxis. conclusiones: 1) justificamos el screening de aghbs en gestantes porque la prevalencia en Granada es de 1'53% y la mayoría de las portadoras no tienen antecedentes de riesgo. 2) los marcadores del rn en cordón son menos fiables que los realizados en talón. Los achbc y achbc hasta los 12 meses son pasivos. 3) la eficacia de la inmunoprofilaxis queda probada. 4) la revacunación de los niños sometidos a inmunoprofilaxis puede plantearse

Hemos estudiado un total de 59 pacientes críticos, (32 politraumatizados y 27 quemados), así como una población sana control de 32 sujetos. Las edades oscilaban entre 15 y 75 años y la gravedad clínica estaba medida en Trauma Score y porcentaje de superficie corporal quemada. Ninguno de los pacientes recibió transfusión sanguínea previa al estudio ni drogas esteroideas. Las infecciones, eran con frecuencia la causa de muerte tardía en pacientes politraumatizados y quemados. El origen de las mismas, parecía relacionarse con la depresión de las defensas inmunitarias, en estos pacientes, a las pocas horas del accidente. Los enfermos, presentaban una linfopenia inicial en las primeras 24 – 48 horas del trauma o lesión térmica, al compararlos con los individuos sanos controles. La linfopenia, afectaba en números absolutos a las subpoblaciones linfocitarias CD3, CD 4 y CD8 siendo proporcional a la gravedad del traumatismo y no relacionada con la extensión de la quemadura. Los valores absolutos de linfocitos B, no sufrían modificaciones, en los primeros momentos tras el accidente, aunque se observaba un descenso de los niveles de IgG estadísticamente significativo (p = 0.001). El sistema monocítico/macrofágico, mostraba una disminución de la capacidad fagocítica en ambos grupos de pacientes y estadísticamente significativo con respecto al grupo sano control. La determinación de los valores de la proteína C reactiva, exhibía en todo momento, cifras elevadas en ambos grupos de pacientes inmediatamente después de la agresión (traumática o térmica). El descubrimiento de las citoquinas (TNF, IL 1β, gamma interferon… etc), como factores solubles, secretados por las células activadas y sus funciones en las reacciones inflamatorias inespecíficas e inmunitaria específica, nos llevaba a pensar, en el importante papel que estos factores solubles jugaban en el normal funcionamiento del sistema inmune, de tal manera, que un desequilibrio en la producción de citoquinas o en el tipo de la misma, podía conducir a alteraciones metabólicas, de la coagulación, del sistema temoregulador y del sistema inmune entre otros. El trauma y la quemadura, eran estímulos suficientemente fuertes como para provocar la liberación e citoquinas TNF e IL 1, y estas, a su vez, eran capaces de inducir cambios importantes en el fenotipo celular, fue así como encontrábamos que aunque existía linfopenia en las primeras 24 – 48 horas tras el trauma y lesión térmica, los linfocitos estaban activados y esto se ponía de manifiesto, con la presencia o aumento de expresión de marcadores de activación-adhesión (CD25, CD69 y CD71; CD11c, CD49a y CD54 respectivamente) en sus membranas. Concomitantemente a estos marcadores de activación, se observaba un moderado incrementos de linfocitos que mostraban simultáneamente los antígenos CD4+ y CD8+, sobretodo en los pacientes quemados. Dichas células CD4+ CD8+, a pesar de estar relacionadas con la activación, no expresaban los antígenos CD25 ni CD71. Así pues, el traumatismo y las quemaduras se acompañaban de una activación de los linfocitos que podría guardar relación con la intensidad de aquellos. La evolución de las cifras de linfocitos periféricos, en las semanas posteriores al accidente, dependía de la evolución clínica de los pacientes. Observábamos que los pacientes que experimentaban una mejoría clínica, mostraban un incremento en las cifras de linfocitos CD3+, CD4+ y CD8+. La mejoría clínica, se acompañaba asimismo de un restablecimiento de la función fagocítica, de un ascenso de los niveles de IgG y de una disminución de los valores de proteína C reactiva. Por el contrario, en quienes evolucionaban mal o no sobrevivían, se observaba una disminución sostenida de las cifras de IgG en suero y valores elevados de proteína C reactiva. Nosotros pensamos que todos estos cambios, estaban producidos por una liberación excesiva de citoquinas. Luego, parece razonable concluir que la linfopenia es motivada por un secuestro de las células en el endotelio vascular y otros tejidos inflamados y dañados, debido a la alta densidad de moléculas de adhesión exhibidas por las membranas celulares de los enfermos, que hacen, que los linfocitos se adhieran a estos lugares y sólo más tarde, con la recuperación del sujeto, y la posible disminución de citoquinas, la densidad de estas moléculas vaya disminuyendo y los linfocitos pasen nuevamente al torrente circulatorio. La linfopenia, no es por consiguiente la causa de la inmunodeficiencia, sino más bien el resultado o la consecuencia de cambios en la concentración de citoquinas, que son genuinamente, el origen de la depresión en las defensas orgánicas y del fracaso multiórgano. Creemos que en un futuro, no muy lejano, se diagnosticaran en cada paciente individual las alteraciones de defensa específicas, lo que facilitará el conocimiento de su situación inmunológica actual y pronóstico. De este modo, estaremos en mejor disposición de instaurar modalidades profilácticas y terapéuticas que podrían contribuir a la mejora de la respuesta inmune en aquellos sujetos víctimas de accidentes. Las infecciones siguen constituyendo la principal causa de muerte tardía después de traumatismos graves y quemaduras severas. La razón de esta inmunodeficiencia sigue siendo desconocida. En el presente trabajo nos hemos planteado estudiar la influencia directa de los traumatismos graves y las quemaduras sobre el sistema inmunitario, para poder conocer el mecanismo por el cual los pacientes son especialmente vulnerables a las infecciones. Para ello, nos hemos marcado los siguientes objetivos: 1) Determinar el perfil inmunológico inicial, característico de los enfermos críticos y su relación con la gravedad clínica inicial. 2) Conocer el cortejo inmunológico que acompaña a los pacientes a lo largo de la evolución de su cuadro patológico y su posible relación con el pronóstico. 3) Por último, valorar la influencia que el estado inmunitario tiene sobre la existencia de pacientes clínicamente muy graves, pero que sobreviven, así como de pacientes con altas posibilidades de sobrevivir, de acuerdo a criterios estrictamente clínicos, pero que sin embargo fallecen.

Tesis de maestría en ciencias de la salud El protozoario G. lamblia es el parásito causal de giardiasis, infección parasitaria que se produce por la contaminación fecal/ oral en un medio de higiene precario, siendo una de las enfermedades intestinales humanas más comunes en todo el mundo. Las manifestaciones clínicas de esta infección varían desde el estado de portador asintomático hasta llegar a desarrollar un cuadro de diarrea severa, dolor abdominal, náuseas, malabsorción de nutrientes y pérdida de peso. En la actualidad, el tratamiento farmacológico contra la giardiasis llega a ser efectivo, sin embargo, tiene algunas limitantes importantes, como la inducción de efectos secuendarios y la probable inducción de cepas resistentes. No se cuenta con una vacuna contra G. lamblia en humanos, esto es en gran medida por los limitados conocimientos que se tienen de la respuesta inmune durante la enfermedad. Para lograr desarrollar esta, primeramente se deben identificar, caracterizar, purificar o sintetizar los antígenos que confieren inmunogenicidad a la vacuna. Sin embargo, nuestro conocimiento sobre antígenos inmunogénicos de G. lamblia es limitado. Por esta razón, es importante entender los mecanismos inmunológicos que controlan y erradican la infección por este parásito intestinal. El presente estudio se enfocó en la caracterización e identificación de la proteína inmunogénica 5G8 de G. lamblia a través de la técnica analítica de espectrometría de masas y el posterior análisis por herramientas bioinformáticas, así como también la caracterización parcial de la respuesta inmune celular contra este antígeno. La proteína 5G8 se aisló mediante una cromatografía de afinidad a partir de un lisado de trofozoítos de G. lamblia. La proteína 5G8 aislada (~ 71 kDa) fue analizada mediante espectrometría de masas. Se identificaron dos proteínas con masas moleculares relativas de ~ 28 kDa y ~ 38 kDa pertenecientes a la familia de Proteínas Variables de Superficie (VSPs). El análisis bioinformático permitió identificar un constructo, el cual fue traducido en una sola cadena polipeptídica compuesta de 607 aminoácidos y una masa molecular de ~ 61 kDa. Adicionalmente, al evaluar la respuesta inmune celular, se observó una proliferación celular significativamente más alta (p < 0.05) en esplenocitos estimulados con la proteína 5G8 aislada y el lisado de trofozoítos de G. lamblia comparada con los que fueron estimulados con una proteína irrelevante utilizada como control negativo (HEL). Por otro lado, el porcentaje de expresión del marcador CD69 como indicativo de activación temprana en estos esplenocitos, se mostró más elevado en las células que estuvieron en contacto con el extracto proteico total y la proteína 5G8 de G. lamblia comparado con los esplenocitos con la proteína utilizada como control negativo (HEL). Por último, el análisis de modelado molecular in silico proporcionó un acercamiento al posible sitio de unión e interacciones moleculares entre los péptidos inmunodominantes de la proteína 5G8 y las moléculas del MHC-II (haplotipo I-Ak). El resultado mostró una distribución uniforme y compacta del péptido con mayor inmunodominancia (67-81 aa) en la cavidad, favoreciendo su posible interacción con aminoácidos de los bolsillos del MHC-II (haplotipo I-Ak). En conclusión, nuestros datos sugieren que la proteína 5G8 es una VSP (~ 71 kDa) codificada por un solo gen. Esta proteína puede inducir una respuesta inmune celular en esplenocitos de ratones infectados y re-infectados G. lamblia. Las interacciones químicas que se favorecen entre péptidos inmunodominantes con aminoácidos de los bolsillos del MHC-II nos permiten profundizar en el conocimiento de epítopes potenciales que desencadenan una respuesta inmune celular, los cuales podrían considerarse como blanco de futuros estudios. La caracterización bioquímica e inmunológica de antígenos inmunogénicos proporcionará una mejor comprensión de la interacción G. lamblia-hospedero, y será importante para el desarrollo de estrategias de control eficaces contra la giardiasis. Universidad de Sonora. División de Ciencias Biológicas y de la Salud. Programa de maestría en ciencias de la salud 2016.

La Enfermedad Inflamatoria Intestinal (EII) se trata de un desorden de etiología desconocida en el que intervienen múltiples factores, tanto en el comienzo de la enfermedad como en la aparición de brotes, siendo los más importantes los factores ambientales (como el tabaco, la dieta, el estilo de vida, el tratamiento farmacológico o la apendicectomía), la flora comensal presente en el intestino y el componente genético del individuo. Hasta la fecha se han descrito más de 160 loci de susceptibilidad frente a la EII, la mayoría de ellos compartidos por la CU y la EC. Los productos codificados por los genes incluidos en estos loci intervienen en múltiples procesos como la producción de citoquinas, la respuesta inmunitaria innata, la autofagia, la respuesta al estrés oxidativo, el mantenimiento de la integridad de la barrera epitelial, la respuesta inmunitaria adaptativa y la actividad antimicrobiana. La hipótesis con más peso actualmente es que la EII está causada por una respuesta inmunitaria excesiva frente a la flora comensal en individuos genéticamente predispuestos. Tanto en el caso de la CU como de la EC se ha observado una alteración del diálogo entre flora comensal y sistema inmunitario así como de la respuesta inmunitaria innata y adaptativa. En el caso de la CU predomina una respuesta Th2 en la mucosa intestinal mientras que en la EC las respuestas predominantes son Th1 y Th17 fundamentalmente. El principal objetivo de esta tesis doctoral es estudiar la posible relación entre variantes de genes que codifican para moléculas directamente implicadas en la respuesta inmunitaria y la EII. En este trabajo se estudian los genes HLA, (relacionados con la presentación antigénica), MICA (sensor de estrés y daño celular), NOD2 y TLRs (receptores de reconocimiento de patrones claves en el diálogo con la flora comensal)., Tesis Univ. Granada. Programa Oficial de Doctorado en: Bioquímica y Biología Molecular

Tesis inédita presentada en la Universidad Europea de Madrid. Facultad de Ciencias Biomédicas. Programa de Doctorado en Biomedicina y Ciencias de la Salud, La enfermedad arterial periférica (EAP) es una enfermedad arterial inflamatoria crónica que se inicia con la pérdida de las funciones homeostáticas del endotelio. Esta disfunción endotelial se ha asociado con una disminución de la bioactividad del óxido nítrico (NO). En este contexto, los anticuerpos anti-beta2-glicoproteína I (ABGPI) se encuentran elevados en la EAP e inducen una sobreexpresión de moléculas de adhesión y de citoquinas proinflamatorias por el endotelio. El patrón de activación endotelial sustentado por los ABGPIs es similar al obtenido tras la activación de los receptores Toll-Like (TLR) del sistema inmune. Los subtipos TLR2 y TLR4 se han asociado de forma consistente con la aterosclerosis. El objetivo principal de esta tesis es el de investigar una hipotética asociación entre los títulos de ABGPI y la expresión génica de los receptores pro-aterogénicos TLR2 y TLR4 del sistema inmune presentes en las células endoteliales, tras la exposición de un cultivo celular a suero de pacientes con EAP seropositivos para ABGPI. Métodos: Compendio de cinco artículos originales. Los tres primeros estudios fueron observacionales y se realizaron en humanos. Su objetivo fue el de identificar una eventual relación entre los ABGPIs circulantes y los eventos patogénicos primarios de la EAP. Se incluyeron pacientes con EAP y sujetos sanos control pareados con los casos. Se determinó la dilatación braquial mediada por flujo (DBMF) como estimador de la función endotelial. El metabolismo del NO fue evaluado a través de la determinación de los niveles de nitritos plasmáticos. Se midieron los niveles de proteína c-reactiva y el recuento de células blancas periféricas. Los ABGPIs fueron detectados en suero mediante inmunofluorescencia indirecta. Los dos últimos estudios fueron experimentales y se llevaron a cabo usando suero humano no fraccionado y un cultivo de células endoteliales de aorta humana. El objetivo de estos estudios fue el de investigar una posible relación entre los títulos de ABGPI y la expresión génica de los receptores pro-aterogénicos TLR2-TLR4 y de sus efectores intracelulares MyD88-IRAK1, tras la estimulación del cultivo celular con suero de pacientes con EAP seropositivos para el autoanticuerpo. Resultados: En los estudios en humanos se observó que los títulos de ABGPIs circulantes se encuentran elevados en pacientes con EAP. Los títulos de ABGPI se asociaron con una menor DBMF y con unos mayores niveles de nitritos plasmáticos y de proteína c-reactiva. El recuento de monocitos fue mayor en pacientes con altos títulos de ABGPI. Los estudios realizados en cultivo celular demostraron que la estimulación de células endoteliales sanas con suero humano seropositivo para ABGPI obtenido de pacientes con EAP, induce un aumento de la expresión génica del receptor TLR4 y de su molécula de señalización celular MyD88 por las células endoteliales. Conclusiones: Los ABGPIs circulantes se encuentran elevados en pacientes con EAP y se asocian con la disfunción endotelial, la alteración del metabolismo del NO y el proceso inflamatorio que acontece desde las fases iniciales de la enfermedad. Además, la actividad transcripcional de TLR4 y de su proteína de diferenciación mieloide (MyD88) en el cultivo de células endoteliales se relaciona con los títulos de los ABGPIs presentes en el suero de los pacientes con EAP. Estos hallazgos sugieren una novedosa vía de activación de la aterosclerosis en pacientes con EAP. [Resumen Teseo], UEM

El virus Herpes simplex (HSV) es responsable de una variedad demanifestaciones clínicas desde ulceras oro-faciales y genitales hasta encefalitis yalteraciones respiratorias. Los síntomas son usualmente autolimitantes peropueden ser extensivos y prolongados en individuos inmunocomprometidos. Enestos casos, puede requerirse una larga terapia antiviral, lo que resulta en lageneración de virus resistentes a las drogas como el aciclovir (ACV). El HSV ingresa a las células mediante una interacción primaria entre lasglicoproteínas virales y el heparán sulfato (HS), molécula presente en lasuperficie celular y en la matriz celular. Los carragenanos (CGNs) sonpolisacáridos sulfatados derivados de algas rojas cuya estructura es similar a ladel HS. Ellos actúan como inhibidores potentes y selectivos de HSV, al bloquearla interacción de virus con su receptor primario en la etapa de adsorción viral. En estudios previos realizados en nuestro laboratorio se seleccionaron ycaracterizaron variantes virales de HSV-1 cepa F. Éstas fueron obtenidas bajopresión de selección con un CGN natural μ/n denominado 1C3 de estructurarelacionada con los CGNs kappa (k) e iota (ɩ)-(1C3syn14-1 y 1C3syn17-2). A finde evaluar la reproducibilidad del método utilizado para generar las variantesvirales se realizaron pasajes seriados de HSV-1 cepa KOS en células Vero enpresencia de concentraciones crecientes de CGN ɩ o heparina (H). Seseleccionaron 4 clones, ɩ16-6, ɩ16-11, H17-5 y H17-16, los cuales exhibieroncaracterísticas similares en: resistencia relativa al compuesto usado durante eltratamiento selectivo y al ACV, al igual que su curva de replicación viral. Además, fueron menos virulentos que la cepa patrón en ratones BALB/c porinoculación intravaginal pero no por vía intranasal, a excepción de la varianteɩ16-11 que fue atenuada por ambas vías. Por otro lado, se profundizó el estudio de la caracterización citopática ypatogénica de las variantes virales, derivadas de HSV-1 F, en mucosarespiratoria. Se demostró la activa participación de los macrófagos comoprotagonistas en la patología viral y se la correlacionó con la menor activaciónde citoquinas inflamatorias (TNF-α, IL-6) en relación con la cepa control. Alteraciones puntuales detectadas en el gen de la glicoproteína D de lasvariantes virales podrían ser parte responsable de la liberación disminuida decitoquinas proinflamatorias. Mientras que las moléculas de adhesión VCAM e ICAM no se vieron afectadas. Por otro lado se mostró, que el procedimientoempleado usando CGNs permitió la selección y/o modificación de los genes dela Timidina Quinasa y la ADN polimerasa sin alterar la resistencia viral al ACV. El conjunto de estos resultados indican que la regulación de los nivelesde las citoquinas TNF-α e IL-6 juega un rol importante en la patologíarespiratoria de HSV y además que el método utilizado de obtención de lasvariantes permite la selección de virus con características estables. Estosresultados contribuyen a la caracterización de las variantes virales con elobjetivo de profundizar los conocimientos de la respuesta inflamatoria en eltracto respiratorio luego de una infección por HSV. Palabras Claves: virus Herpes simplex, Carragenanos, variantes virales,atenuación, inmunopatología. Herpes simplex virus (HSV) is responsible for a variety of clinicmanifestations, from oro-facial and genital ulcers to encephalitis andrespiratory disorders. Symptoms are usually self-limiting but they can beextensive and prolonged in immunocompromised patients. In these cases, itmight be required a long antiviral therapy, resulting in the generation of drugresistantviruses such as Acyclovir-resistant viruses. HSV enters the cell by a primary interaction between viral glycoproteinsand the heparan sulfate (HS), molecule present in the cell surface and cellularmatrix. Carrageenans (CGN) are sulfated polysaccharides derived from redalgae with a chemical structure similar to HS. CGN were identified as potentand selective inhibitors of HSV by blocking the interaction between the virusand HS during the adsorption. In previous studies carried out in our laboratory, viral variants from HSV-1 strain F were selected and characterized. They were obtained underselective pressure of the μ/n -1C3 natural CGN with a chemical structurerelated to the kappa (k) and iota (ɩ) CGNs (1C3syn14-1 and 1C3syn17-2). Inorder to evaluate the reproducibility of the method used to generate viralvariants, serial passages were done with HSV-1 strain KOS in Vero cells in thepresence of increasing concentrations of the ɩ CGN or heparine (H). Four cloneswere selected: ɩ16-6, ɩ16-11, H17-5 and H17-16, which exhibited similarcharacteristics such as relative resistance to the compound used for the selectivetreatment and ACV, as well as theirs viral replication curve. Furthermore, theywere less virulent than the parental strain in BALB/c by intravaginalinoculation but not intranasally, except for the variant ɩ16-11 which wasattenuated by both routes. On the other hand, the cytopathic and pathogenic effect of the viralvariants, derived from HSV-1 F virus, were characterized in the respiratorymucosa. It was demonstrated that the active involvement of macrophages askey players in the viral pathology correlated with the lower release of theinflammatory cytokines (TNF-a and IL-6) in relation with the parental strain. Punctual mutations detected in the gene of glycoprotein D of the viralvariants could be partially responsible for the low concentration of theinflammatory cytokines. Moreover, the expression of adhesion molecules VCAM and ICAM was not altered. It was also shown that the use of the CGNallowed the selection and/or modification of the Timidine Kinase and DNApolimerase genes without modifying resistance to ACV. All these results indicate that the regulation of TNF-a and IL-6 play akey role in the respiratory pathology of HSV and that the method used toobtain the viral variants allows the selection of virus with stable and attenuatedcharacteristics. Results obtained in the present study contribute to characterizeviral variants in order to extend the knowledge about the cellular inflammatoryresponse induced in the respiratory tract by HSV-1. Keywords: virus Herpes simplex virus, Carrageenans, viral variants,attenuation, inmunopathology Fil: Artuso, María Carolina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

El Grupo de Investigadores en Reproducción Humana de la Universidad de Oriente posee una línea de investigación que evalúa los efectos del mercurio en el sistema reproductor masculino, empleando un modelo animal susceptible al metal. Se han demostrado lesiones inducidas por el metal por necrosis y apoptosis, relacionadas con alteraciones en la síntesis de testosterona. Las lesiones involucran una respuesta autoinmune hacia las células germinales y un incremento de la actividad Th1 al inicio y a los 7 meses de tratamiento. Por cuanto el mercurio es capaz generar señales de peligro, se ha estudiado la expresión de proteínas de estrés (hsp) en células germinales y del sistema inmunológico, encontrándose elevación de las mismas en los animales tratados. Los resultados obtenidos hasta ahora apoyan la hipótesis de que dosis subtóxicas de mercurio son capaces de provocar daño directo e inducir respuestas de tipo celular y humoral, ocasionado daño del epitelio seminífero, por medio de varios factores, lo que podría prevenir, a largo plazo, la fecundación a largo plazo. The Group of Researchers on Human Reproduction from Universidad de Oriente has a research line that assesses the effects of mercury on the male reproductive system, using an animal model susceptible to the metal. Lesions induced by necrosis and apoptosis related to alterations in testosterone synthesis have been demonstrated. Injuries involve an autoimmune response to germ cells and an increased Th1 activity at baseline and 7 months of treatment. Since mercury is able to generate “danger” signals, the expression of stress proteins (hsp) in germ cells and the immune system have been studied, which are increased in the treated animals. The results obtained until now support the hypothesis that mercury at subtoxic doses is capable of inducing direct damage and humoral and cell-type responses, causing damage to the seminiferous epithelium, through several means, which could prevent the fertilization in the long term.

La Enfermedad Celíaca (EC) es una enteropatía crónica de base inmunológica, en la que intervienen mecanismos tanto de la inmunidad innata como adaptativa. La presentación clínica es altamente variable, desde cuadros gastrointestinales característicos hasta formas oligo o asintomáticas. La prevalencia de EC es muy elevada (cercana al 1%), sin embargo, se encuentra fuertemente subdiagnosticada por falta de conocimiento y de estrategias de búsqueda adecuadas. Los pacientes no diagnosticados y por lo tanto no tratados tienen consecuencias severas, muchas de ellas irreversibles, que reducen su calidad de vida y capacidad laboral. En individuos susceptibles, la patología sólo se desarrolla en presencia de un antígeno dietario denominado gluten y constituido mayoritariamente por un grupo de proteínas de trigo, cebada, centeno y avena, denominadas gliadinas o gluten. La ingesta de estas proteínas produce alteración histológica en la mucosa del intestino delgado y pérdida de la función de absorción de nutrientes. Existen varias enfermedades fuertemente asociadas a la EC, en particular aquellas con componentes autoinmunes como diabetes mellitus tipo I y artritis reumatoidea. La susceptibilidad a desarrollar EC está asociada a la presencia de determinados alelos del complejo mayor de histocompatibilidad (CMH), en particular HLA-DQ2 y DQ8 los que están presentes en casi la totalidad de los pacientes. La expansión y activación de linfocitos T específicos de péptidos derivados del gluten y la abundante producción de IFN-γ son los elementos más característicos de la respuesta adaptativa en la mucosa intestinal. Por otra parte, la inmunidad innata se manifiesta frente a ciertos péptidos derivados de gliadinas que inducen mecanismos proinflamatorios. Aunque en la actualidad se conocen con detalle múltiples aspectos de la patogenia de EC que han permitido una mejora de la detección temprana de los pacientes y la profundización en el conocimiento del rol del sistema inmune en la mucosa intestinal, aún existen importantes desafíos para los investigadores. A lo largo de esta revisión presentaremos y discutiremos varios de los hallazgos que han mejorado el diagnóstico de la enfermedad y, consecuentemente, la calidad de vida de los pacientes., Celiac disease (CD) is a chronic enteropathy induced by the immune system where mechanisms of both innate and adaptive immunity are involved. The clinical presentation is highly variable, ranging from the characteristic gastrointestinal syndrome to oligo- or asymptomatic forms. The prevalence of CD is high (close to 1%), though the disease is underdiagnosed due to lack of knowledge and appropriate case-finding strategies. Undiagnosed patients, and therefore not treated, may have a higher risk of complications, some of them irreversible, which reduce the quality of life and working ability. In susceptible individuals, the disease is only developed when a dietary antigen called gluten is ingested (gluten is constituted by a group of proteins from wheat, barley, rye and oats, generally known as gliadins and gluten). The ingestion of these proteins leads to the histological lesion in the small bowel mucosa and the loss of absorptive function by the epithelium. Several diseases associated to CD have been described, particularly those with an autoimmune aetiology, such as diabetes mellitus type I or rheumatoid arthritis. Susceptibility to develop CD is associated with the presence of discrete alleles of the major histocompatibility complex (MHC), in particular HLA-DQ2 or DQ8, which are found in almost all CD patients. The expansion and activation of T cells specific for gluten-derived peptides and the increased production of IFN-γ in the intestinal mucosa are the most characteristic elements of the adaptive response to gluten. On the other hand, innate immunity is triggered by certain gliadin peptides which induce proinflammatory mechanisms. Although currently many aspects of the pathogenesis of CD are known, which has allowed a better early detection of patients and contributed to a deeper understanding of the role of the mucosal immune system, there are still many challenges for researchers. Along this review, we present and discuss different findings that have improved the diagnosis of the disease and, consequently, the quality of life of patients., Laboratorio de Investigaciones del Sistema Inmune

203 p. : il. col., El linfoma difuso de célula grande B (DLBCL), es el tipo más frecuentes de linfomas no-Hodgkin. Su localización extranodal más frecuente es la gástrica. El pronóstico de los DLBCL gástricos es variable. Sin embargo, no se disponen de factores pronósicos que puedan predecir la evolución de los pacientes y así estableces la terapia más adecuada para cada uno. Por ello, en este trabajo hemos analizado la asociación con la supervivencia de parámetros clínicos, expresión de proteínas y metilación de promotores, que han sido propuestos como marcadores pronósticos en DLBCLs de otras localizaciones. Por otro lado, ya que se ha propuesto que la metilación de promotores en genes en células gástricas podría dar lugar al cáncer gástrico y que esta metilación podría estar causada por la infección por la bacteria H. pylori, hemos analizado el papel de esta bacteria en la metilación de promotores y en la oncogénesis del DLBCL gástrico. Entre los marcadores analizados, la expresión de la proteína BLIMP-1 ha sido la que mejor ha clasificado a los pacientes con un mal pronóstico. Por otro lado, hemos observado que la metilación de promotores de genes específicos está implicada en la oncogénesis del DLBCL gástrico y que esta metilación podría estar causada por H. pylori en etapas preneoplásicas.

La Queratitis Estromal Herpética (QH) se produce por una respuesta inflamatoria que ocurre en el ojo humano como secuela de la infección causada por el virus Herpes simplex tipo 1 (HSV-1), siendo la primera causa epidemiológica de ceguera infecciosa en los países desarrollados. Uno de eventos característicos de la evolución de la QH es la neovascularización. Para limitar la progresión de la enfermedad se utilizan los corticosteroides y el aciclovir (ACV) que mitigan la inflamación e impiden la diseminación viral, respectivamente. Teniendo en cuenta los efectos adversos generados por los corticoides y el fenómeno de emergencia de mutantes del HSV-1 resistentes al ACV, se pone de relieve la necesidad de encontrar nuevas drogas antivirales. La búsqueda no sólo debería estar orientada a la obtención de compuestos que interfieran con alguna etapa del ciclo de multiplicación viral, sino que también contemple el hecho que la droga en cuestión interfiera con alguna señal intracelular, produciendo un efecto final tanto antiviral como inmunomodulador. En nuestro laboratorio se ha demostrado que un extracto parcialmente purificado obtenido a partir de hojas de Melia azedarach L., denominado meliacina (MA), inhibe la multiplicación de virus pertenecientes a distintas familias, en condiciones in vitro y en ausencia de citotoxicidad. In vivo, MA inhibe la incidencia y la severidad de la QH murina, lo cual sugiere que ejercería un efecto antiinflamatorio, además de actuar como antiviral. Uno de los principios antivirales presentes en dichos extractos es el tetranortriterpenoide 1-cinamoil-3,11-dihidroximeliacarpina (CDM), que inhibe la multiplicación del HSV-1 in vitro, basifica los endosomas, y afecta el transporte de las glicoproteínas virales a la membrana plasmática. En el presente trabajo de tesis se investigó el mecanismo de acción antiviral e inmunomodulador de CDM en células epiteliales del tejido ocular y en células inflamatorias, así como también el efecto antiangiogénico del compuesto en células endoteliales. Así fue posible avanzar en la comprensión de mecanismos moleculares y celulares que podrían explicar el efecto curativo de MA en la enfermedad ocular inducida por HSV-1 en ratón. Ocular Herpes Simplex virus type 1 (HSV-1) infection may result in a inflammatory lesion in the eye termed Herpetic stromal keratitis (HSK). Such HSK lesions represent the commonest infectious cause of blindness in developed countries. Neovascularization stands for a major step in HSK pathogenesis. The current standard of care includes topical corticosteroids and acyclovir (ACV). Corticosteroids are used to combat the inflammatory component of the disease, and the antiviral prevents viral disemination. Considering the adverse effects caused by steroids and the phenomenon of emergence of mutant HSV-1 strains resistant to ACV, highlights the need for new antiviral drugs. The search should not only be aimed at obtaining compounds that interfere with some stage of viral multiplication cycle, but should also affect an intracellular signal, gathering together both antiviral and immunomodulatory effects. Our laboratory has demonstrated that a partially purified extract obtained from leaves of Melia azedarach L., called meliacine (MA), inhibits the multiplication of viruses belonging to different families in the absence of cytotoxicity, in vitro. In vivo, MA inhibits the incidence and severity of the murine HSK, suggesting that it exerts an anti- inflammatory effect in addition to its antiviral action. One of the main antiviral principles obtained in these extracts is the 1-cinnamoyl-3,11-dihydroxymeliacarpin (CDM), which inhibits HSV-1 multiplication in vitro provokes the basification of the endosomal vesicles, and affects the trafficking of viral glycoproteins. In this thesis we investigated the antiviral and immunomodulatory activities of CDM in epithelial cells of ocular tissue and inflammatory cells, as well as its antiangiogenic effect in endothelial cells. Thus, it was possible to advance in the understanding of the molecular and cellular mechanisms involved in the healing effect of MA in the ocular HSV-1 infection in mice. Fil: Bueno, Carlos Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Titulo en ingles: Septic shock for aflatoxinas in a monkey claws (Ateles fusciceps robustus) coming from the Bioparque Los Ocarros RESUMEN:Un Ateles fusciceps robustus (mono araña) macho castrado procedente del Bioparque Los Ocarros se remitió para necropsia al Laboratorio de Patología de la Universidad de los Llanos. Los principales hallazgos a la inspección externa fueron estado de carnes disminuido, mucosas pálidas, pelaje opaco, cavidad oral con laceraciones bilaterales, gingivitis y placa bacteriana; tonsilas y ganglios mandibulares y axilares congestionados. A la necropsia se observó mucosa traqueal ligeramente congestionada, neumonía intersticial aguda, dilatación y congestión de las cuatro cámaras cardiacas. En la cavidad abdominal: hígado amarillento, con cambios necróticos en la porción apical lobular y una pequeña zona nodular de cicatrización. La mucosa del píloro, intestino y colon congestionadas y focos necróticos en el colon, evidenciando una enteritis necrótica.Bazo con hemorragias equimóticas y petequiales, omento arborizado, vesícula biliar pletórica ganglios mesentéricos caudales congestionados. En la cavidad pélvica: corteza renal difusamente de color rojo café en forma radiada en la médula coloración rojo café oscuro, diagnosticándose una nefrosis hemoglobinúrica. La vejiga urinaria pletórica con la mucosa congestionada. Histológicamente fue hallado un pulmón con síndrome de distress respiratorio agudo o pulmón de shock (ARDS) y una neumonía de tipo intersticial o bronco intersticial. En general se concluye la ocurrencia de shock séptico compatible con intoxicación por aflatoxinas, caracterizado por esplenitis supurativa, esteatosis severa, hepatitis mononuclear y cirrosis hepática lobular, enteritis hemorrágica necrótica, miocarditis, glomerulitis supurativa mesangial y meningoencefalitis mononucle.ABSTRACT: A castrated male Ateles fusciceps robustus (spider monkey) with history of food consumption based on concentrated and fruits, from the Bioparque Los Ocarros was remitted for autopsy to the laboratory of Pathology of the Universidad de los Llanos. The main discoveries of the external inspection were: a diminished meats state, pale mucous, opaque coat, and oral cavity with bilateral lacerations, gingivitis and bacterial plaque, congested mandible, tonsillar and axillary ganglion. To the necropsy it was observed lightly congested tracheal mucosa, sharp interstitial pneumonia, dilation and congestion of the four heart cameras. In the abdomnal cavity: yellowish liver, with necrotic changes in the apical lobar portion and small nodular area of scaring. The mucosa of the pylorus, intestine and colon was congested. The were necrotics focuses in the colon evidencing a necrotics enteritis. Spleen with equimotics and pethequial hemorrhages. Congested mesenteric, plethoric biliary vesicle and congested flows mesenteric ganglion. In the pelvic cavity: The renal cortices was diffusely stained red brown as radially oriented form and in the renal medulla the coloration was dark red, being diagnosed hemoglobinuric nephrosis. The mucosa of plethoric urinar y bladder was congested. Histologycally was found a lung with acute respiratory distress syndrome; shock lung (ARDS) and an interstitial pneumonia our bronchointersticial pneumonia. In ge- neral you concludes the occurrence of septic shock compatible for intoxication aflatoxins, characterized by suppurative spleenitis, epatic lipidosis, mononuclear hepatitis and lobar liver cirrhosis, hemorrhagic necroticenteritis, myocarditis, suppurative glomerulitis mesangial and mononuclear meningoencephalitis Titulo en ingles: Septic shock for aflatoxinas in a monkey claws (Ateles fusciceps robustus) coming from the Bioparque Los Ocarros RESUMEN:Un Ateles fusciceps robustus (mono araña) macho castrado procedente del Bioparque Los Ocarros se remitió para necropsia al Laboratorio de Patología de la Universidad de los Llanos. Los principales hallazgos a la inspección externa fueron estado de carnes disminuido, mucosas pálidas, pelaje opaco, cavidad oral con laceraciones bilaterales, gingivitis y placa bacteriana; tonsilas y ganglios mandibulares y axilares congestionados. A la necropsia se observó mucosa traqueal ligeramente congestionada, neumonía intersticial aguda, dilatación y congestión de las cuatro cámaras cardiacas. En la cavidad abdominal: hígado amarillento, con cambios necróticos en la porción apical lobular y una pequeña zona nodular de cicatrización. La mucosa del píloro, intestino y colon congestionadas y focos necróticos en el colon, evidenciando una enteritis necrótica.Bazo con hemorragias equimóticas y petequiales, omento arborizado, vesícula biliar pletórica ganglios mesentéricos caudales congestionados. En la cavidad pélvica: corteza renal difusamente de color rojo café en forma radiada en la médula coloración rojo café oscuro, diagnosticándose una nefrosis hemoglobinúrica. La vejiga urinaria pletórica con la mucosa congestionada. Histológicamente fue hallado un pulmón con síndrome de distress respiratorio agudo o pulmón de shock (ARDS) y una neumonía de tipo intersticial o bronco intersticial. En general se concluye la ocurrencia de shock séptico compatible con intoxicación por aflatoxinas, caracterizado por esplenitis supurativa, esteatosis severa, hepatitis mononuclear y cirrosis hepática lobular, enteritis hemorrágica necrótica, miocarditis, glomerulitis supurativa mesangial y meningoencefalitis mononucle.ABSTRACT: A castrated male Ateles fusciceps robustus (spider monkey) with history of food consumption based on concentrated and fruits, from the Bioparque Los Ocarros was remitted for autopsy to the laboratory of Pathology of the Universidad de los Llanos. The main discoveries of the external inspection were: a diminished meats state, pale mucous, opaque coat, and oral cavity with bilateral lacerations, gingivitis and bacterial plaque, congested mandible, tonsillar and axillary ganglion. To the necropsy it was observed lightly congested tracheal mucosa, sharp interstitial pneumonia, dilation and congestion of the four heart cameras. In the abdomnal cavity: yellowish liver, with necrotic changes in the apical lobar portion and small nodular area of scaring. The mucosa of the pylorus, intestine and colon was congested. The were necrotics focuses in the colon evidencing a necrotics enteritis. Spleen with equimotics and pethequial hemorrhages. Congested mesenteric, plethoric biliary vesicle and congested flows mesenteric ganglion. In the pelvic cavity: The renal cortices was diffusely stained red brown as radially oriented form and in the renal medulla the coloration was dark red, being diagnosed hemoglobinuric nephrosis. The mucosa of plethoric urinar y bladder was congested. Histologycally was found a lung with acute respiratory distress syndrome; shock lung (ARDS) and an interstitial pneumonia our bronchointersticial pneumonia. In ge- neral you concludes the occurrence of septic shock compatible for intoxication aflatoxins, characterized by suppurative spleenitis, epatic lipidosis, mononuclear hepatitis and lobar liver cirrhosis, hemorrhagic necroticenteritis, myocarditis, suppurative glomerulitis mesangial and mononuclear meningoencephalitis

El problema clínico crucial en la lepra son los episodios de inflamación aguda que conllevan a daño de los nervios. Aun cuando el Mycobacterium leprae ha sido eliminado mediante el uso de antibióticos, la muerte de la bacteria no es una solución completa al daño ocasionado en los nervios. Dos de los fenómenos inmunopatológicos más frecuentes son: Reacciones tipo I conocidas como reacciones de reversión (RR) y las Reacciones tipo II, como eritema nodoso leproso (ENL). Estas reacciones tipo II se han definido como: una complicación inmunológica en los pacientes multibacilares. Ambos tipos de reacciones están acompañadas por el incremento de citocinas pro-inflamatorias principalmente TNF-alfa, IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, INF-gamma, IL-10, IL-12, entre otras. En un análisis retrospectivo realizado en una población de 150 pacientes del Servicio Central de Dermatología del Instituto de Biomedicina sometidos a terapia multidroga (PQT) y PQT + inmunoterapia, ambos grupos presentaron fenómenos reaccionales tipo II, sólo el grupo que adicionalmente recibió inmunoterapia presentó además reacciones del tipo I. El grupo de pacientes que presentaron ENL estuvo asociado con presencia de gran cantidad de bacilos en las lesiones The crucial clinical problem in leprosy is represented by episodes of intense inflammation that produce nerve damage. When Mycobacterium leprae has been eliminated by means of antibiotics, the death of the bacteria is not a complete solution to the damage caused in nerves. Two of the more frequent immunopathological phenomena in Hansen’s disease are Type I, reactions, known as Reversal Reactions (RR), and Type II reactions, of which the most frequent and well known are those called Erythema Nodosum Leprosum (ENL). Type II reactions have been defined as an immunologic complication in multibacillary patients. Both types of reactions are accompanied mainly by the increase of pro-inflammatory cytokines TNF-alpha, IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, INF-gamma, IL-10, IL-12, among others. In a retrospective analysis of a population of 150 patients of the Central Service of Dermatology, Institute of Biomedicine, where these patients were subjected to Multidrug Therapy (MDT) and MDT + inmunotherapy (IMT), both groups presented type II reactions, but the group that additionally received inmunotherapy also presented type I reactions. In the group of patients that presented ENL, it appeared to be associated with the large amount of bacilli in their lesions

Las enfermedades transmitidas por priones constituyen un grupo de fatales desórdenes neurodegenerativos tales como el Kuru, la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, el síndrome de Gertssman-Stràussler-Scheinker y el insomnio familiar fatal. El agente causal denominado prion, por su original designación partícula infecciosa proteinacea, es una proteína celular aberrante convertida a una isoforma no constitutiva (isoforma scrapie), caracterizada por su anormal resistencia a métodos convencionales de descontaminación y su desconocido mecanismo de conversión a su forma patogénica. Desde el año 1985 estas enfermedades han captado especial atención debido a la epidemia de encefalopatía bovina espongiforme acontecida en el Reino Unido. El presente trabajo pretende abarcar de una manera general y concisa los aspectos inmunológicos relacionados a estas enfermedades, así como consideraciones básicas en el área de la dermatología. Prion diseases are a group of fatal neurodegenerative disorders such as Kuru, Creutzfeldt-Jakob disease; Gertssman-Stràussler-Scheinker syndrome and fatal familial insomnia. The causative agent termed prion, for proteinaceous infectious particleis an aberrant cellular protein converted to an non-constitutive form (scrapie isoform), characterized by its abnormal resistance against conventional decontamination methods, and unknown mechanism of conversion. Since 1985 prion diseases attracted special attention because of the bovine spongiform encephalopathy epidemic in the United Kingdom. The present work pretends a general and brief approach to the immunological aspects of prion diseases, such as basic considerations in dermatology.

El propósito de esta monografía es la revisión bibliográfica en función de la búsqueda de la información sobre las posibles aplicaciones terapéuticas de los inmunomodulares en casos de candidosis sistémica, así como la revisión de los mecanismos de inmunopatogénesis de esta patología. Durante la última década, han aumentado significativamente las tasas de infección por Candida albicans, especialmente en los pacientes críticamente enfermos y con deficiencia de inmunidad celular. Los procedimientos clínicos para salvar la vida a estos pacientes incluyen los componentes invasivos para las barreras naturales, contribuyendo con la diseminación de la infección. En vista del aumento y de la gravedad de la candidosis sistémica, se evidencia la imperiosa necesidad de prevenir esta patología. Debido a la cantidad reducida de agentes farmacoterapéuticos, se ha observado el creciente interés en la búsqueda de nuevas alternativas terapéuticas, entre ellas, los estudios de inmunorregulación de la candidosis sistémica y los mecanismos de respuestas protectoras contra Candida albicans, convirtiéndose esta búsqueda en un objetivo de interés muy atractivo sobre otras áreas de investigación. The purpose of this review is about possible therapeutic applications of immunomodulators during the treatment of systemic candidosis, as some as the mechanisms of their immunopathology. During the last years Candida infections was increased significantly, specially in critical care patients with deficiencies of cellular immunity. The clinical managements to safe life of this patients include many invasive compounds for natural barriers, whos might be contribute to dissemination of Candida. Prevention of systemic candidosis is imperative. New therapeutic alternatives about the treatment of this pathology like immunoregulation, and combination of cytokines and antifungal drugs, are very interesting for new investigations.

La Espondilitis Anquilosante (EA) es una patología relativamente frecuente, que presenta una de las asociaciones más fuertes con especificidades HLA, en concreto con el antígeno HLA-B27. Existen evidencias que llevan a pensar que otros factores genéticos distintos a HLA-B27 están implicados en la patogénesis de la EA. Debido a su localización en el MHC y a su función en la presentación antigénica y en la respuesta inmune, los genes LMP, TAP, HSP70 Y TNF son ideales candidatos como factores que podrían contribuir en la susceptibilidad a la EA. El objetivo de nuestro trabajo fue analizar la posible influencia del polimorfismo de genes implicados en la respuesta inmune (HLA-B27, TAP, LMP, HSP70 Y TNF) en la susceptibilidad a la espondilitis anquilosante. Además del diseño y desarrollo de nuevos métodos para el tipaje de estos genes. Se seleccionaron 57 pacientes diagnosticados de EA, 35 controles B*27+ y 102 controles seleccionados al azar, sobre los cuales se llevo a cabo el estudio del polimorfismo de estos genes. Encontramos que: 1) los alelos B*2705, B*2702 y B*2707 estaban asociados a la EA, siendo la primera vez que se describe B*2707 en población caucasoide; 2) el gen LMP7 influye, conjuntamente con B*27, en la susceptibilidad a la EA; 3) los genes LMP2, TAP, HSP70 Y TNF no desempeñan un papel relevante en la susceptibilidad a la EA y 4) la estrategia basada en PCR-RFLP+ACRS ha resultado un método adecuado para el análisis del polimorfismo conocido de genes del MHC, Universidad de Granada, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular. Leída 24-10-97