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A Brucelose Bovina é uma doença de importância econômica e de caráter zoonótico, considerada de notificação obrigatória, causada pela Brucella abortus, caracterizada principalmente por abortamento em terço final de gestação e afecções reprodutivas. O presente artigo relata o trabalho conjunto da Universidade, da Defesa Agropecuária e da Vigilância Epidemiológica em um caso de brucelose ocorrido na Clínica de Bovinos e Pequenos Ruminantes da Universidade de São Paulo. Um bovino com afecção locomotora foi diagnosticado com brucelose ao ser testado juntamente com outro animal da propriedade que apresentava afecção reprodutiva. A Defesa Agropecuária foi acionada e o animal foi encaminhado para abate sanitário. Foi realizada ação conjunta para monitoramento da brucelose na propriedade e notificação ao Serviço de Saúde do Município. Seis animais da propriedade e três pessoas apresentaram resultado positivo, ressaltando o potencial zoonótico da doença e a importância do médico veterinário no controle da mesma nos animais e no homem.

O objetivo deste estudo foi a comparação das metodo-logias mais comuns empregadas em diferentes fazendas para a avaliação da qualidade do colostro e identificação de falha na transferência de imunidade passiva (FTIP) em bezerras Holandesas. Sessenta e oito bezerras Holandesas recém-nascidas foram distribuídas em dois grupos: G1 - provenientes de propriedade com manejo de colostro adequado; G2 - oriundas de propriedade com falhas no manejo do colostro. Foram colhidas amostras de colostro fornecido para cada bezerra de cada grupo (250 ml) para a avaliação de IgG, sólidos totais, PT e albumina. Amostras sanguíneas foram obtidas às 48 horas de vida para a determinação de PT e de globulina e para a estimativa indireta de IgG por meio dos testes de turvação pelo sulfato de zinco, precipitação pelo sulfito de sódio e coagulação do glutaraldeído. Os teores de IgG observados no colostro pelo colostrômetro (G1: 98,63 ±1 5,58 mg/ml; G2: 85,66 ± 29,81 mg/ml; p = 0,09), índice Brix (G1: 27,61 ± 2,96%; G2: 22,40 ± 4,58%; p = 0,00), PT (G1: 10,42 ± 2,29g/dL; G2: 9,04 ±2 ,29g/dL; p = 0,06) e albumina (G1: 1,25 ± 0,37g/dL; G2: 0,91 ± 0,38g/dL; p = 0,00) foram superiores no G1 quando comparados ao G2. A determinação de PT no soro das bezerras foi realizada por um analisador bioquímico automático, revelando taxas de FTIP (< 5,2 g/dL) somente no G2 (46,67%). Os resultados dos testes qualitativos (turvação pelo sulfato de zinco, precipitação pelo sulfito de sódio e coagulação do glutaraldeído) foram diferentes dos resultados de PT (p = 0,00) e não se mostraram eficientes para a detecção da FTIP. Esta pesquisa demonstrou que além do uso do colostrômetro para a avaliação da qualidade do colostro, a utilização do refratrômetro Brix e níveis de PT do colostro devem ser consideradas. A identificação de FTIP no rebanho pode ser realizada seguramente por meio dos níveis séricos de PT e globulina.

RESUMO Esta pesquisa avaliou a TIP e a dinâmica de anticorpos (ACs) específicos em bezerros naturalmente expostos aos agentes causadores da doença respiratória bovina (DRB). Foram selecionados 19 bezerros Holandeses alimentados com colostro proveniente de doadoras vacinadas para DRB. Amostras de soro foram obtidas antes e após a ingestão do colostro (48h) para a soroneutralização (SN). Os valores médios (log2) detectados após colostragem foram de 11,5±1,6 (BVDV), 8,8±1,3 (BoHV-1), 5,5±1,6 (BRSV) e 8,4±1,5 (BPIV-3). Cinco bezerros foram criados do nascimento aos 240 dias de vida, observando-se decréscimo nos títulos de ACs para BVDV, BoHV-1 e BPIV-3 ao longo do tempo (P≤0,001). As taxas de infecções detectadas entre o D14 e o D240 foram de 40% (2/5), 20% (1/5), 80% (4/5), e 60% (3/5), respectivamente, para BVDV, BoHV-1, BRSV e BPIV-3. A maioria dos bezerros manifestou broncopneumonia após as infecções virais. Os bezerros apresentaram ACs para todas as viroses às 48 horas de vida, porém os títulos adquiridos para o BRSV foram baixos. A susceptibilidade para as infecções variou de acordo com os níveis e a duração dos títulos de ACs maternos. ABSTRACT This research evaluated the PIT and the dynamics of specific antibody (Ab) for calves naturally exposed to the viral agents involved in Bovine Respiratory Disease (BRD). Nineteen Holstein calves fed colostrum from vaccinated donors for DRB. Serum samples were obtained before and after colostrum intake (48h) for serum neutralization (SN). Mean values (log2) detected after colostrum feeding were 11.5±1.6 (BVDV), 8.8 ±1.3 (BoHV-1) 5.5±1.6 (BRSV) and 8.4±1.5 (BPIV-3). Five calves were raised from birth to 240 days of life and presented a decrease in Ab titers for BVDV, BoHV-1 and BPIV-3 over time (P≤ 0.001). Infection rates from D14 to D240 were of 40% (2/5), 20% (1/5), 80% (4/5) and 60% (3/5), respectively for BVDV, BoHV-1, BRSV and BPIV-3. Most of the calves presented bronchopneumonia after seroconversion to the virus. Calves presented Ab for all viruses at 48 hours of life, however BRSV Ab titer were low. Levels and persistence of maternal antibody titers determined the susceptibility to viral infections.

O objetivo deste trabalho é apresentar um método de segmentação e contagem de células somáticas de leite bovino para imagens obtidas diretamente do microscópio óptico por meio de uma proposta de limiarização automática. Para fins de verificar eficiência da técnica, o método de limiarização proposto foi comparado com dois métodos de limiarização reconhecidos pela literatura. A correlação obtida entre a contagem manual de referência e os métodos de limiarização testados foi de 0,98, 0,71 e 0,12, respectivamente. O método proposto apresentou correlação aceitável demonstrando eficiência deste algoritmo para limiarização e contagem de células somáticas e outras aplicações similares.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, Florianópolis, 2015. Áreas recifais marginais estão sendo consideradas em todo mundo como áreas prioritárias para conservação, já que essas áreas possuem um grande potencial evolutivo das espécies. Tem sido vista também uma ampliação de distribuição de espécies tropicais nessas áreas, em função das mudanças ambientais. Recentemente, foi encontrado o único banco de corais rolados (banco de coralitos) do Atlântico Subtropical na Reserva Biológica Marinha do Arvoredo, no litoral de Santa Catarina ? Brasil. Os recifes rochosos de Santa Catarina são considerados o limite sul de distribuição de várias espécies tropicais de peixes, ascídias, esponjas e corais, entre outros. O banco é formado por colônias livres roladas do coral Madracis decactis, que estruturam um ambiente diferente dos costões rochosos adjacentes. O presente estudo avalia o recrutamento dos organismos sésseis associados ao banco de coralitos e sua composição. O recrutamento dos organismos foi avaliado com experimento ?in situ? ao longo de 12 meses com placas de recrutamento em inclinações, distâncias do costão e tempos de submersão das placas de recrutamento distintos. Conjuntos de placas foram retirados com 3, 6 e 12 meses de submersão e analisados para investigar a composição e variação no recrutamento. Observamos que há padrão na distribuição das espécies principalmente em relação ao tempo de submersão das placas, com as maiores variações na composição da comunidade entre as placas com 3 e 6 meses submersão, se estabilizando a partir das placas com 6 meses de submersão, sem grandes alterações quando comparadas as placas com 12 meses de submersão. O fator inclinação e a distância do costão também apresentaram valores significativos com relação a variação na taxa de recrutamento. Encontramos 14 grupos taxonômicose/ou funcionais durante o experimento sendo que desses grupos, cirripedia, biofilme e macroalga coriácea obtiveram maior correlação com o tempo de submersão em que as placas foram expostas. Os grupos ascidiacea, bryozoa e macroalga crostosa obtiveram maior correlação com relação a inclinação, onde a macroalga crostosa obteve as maiores porcentagens de cobertura nas placas com inclinação horizontal sendo que os outros grupos citados na inclinação vertical. Os grupos cirripedia e hydrozoa apresentaram maior correlação com o fator distância do costão, sendo encontrados em maior número nas placas mais afastadas do costão. A composição da comunidade se altera em função das condições ambientais e das relações interespecíficas, sendo independente da composição inicial. Os resultados vão de encontro com a teoria de sucessão, onde o tempo é o principal fator explicando as mudanças na composição da comunidade. Não foi observado nenhum recruta do coral M. decactis nas placas de recrutamento.. O estudo revela um ambiente vulnerável já que a espécie principal estruturadora do ambiente está em situação frágil no ponto de vista ecológico, com uma população pequena, de lento crescimento e aparentemente com pouca ou nenhuma contribuição da reprodução sexuada. Novas medidas de manejo devem ser adotadas para que haja efetividade na conservação desse ambiente único. Abstract : Marginal reef areas are now considered priority areas for conservation around the world because of the great evolutionary potential of associated species. Tropical species distributions have recently expanded in these areas as a result of environmental change. Recently, the only Atlantic subtropical coralith bed was found in the Arvoredo Marine Biological Reserve on the coast of Santa Catarina, Brazil. The rocky reefs of Santa Catarina are considered the southern boundary for distribution of various species of tropical fish, sea squirts, sponges, and corals, among others. The bank is formed by free colonies of the coral Madracis decactis, which structure an environment quite different from the adjacent rocky shores. This study evaluates the recruitment of sessile organisms associated with the coralith bed, and species composition. Recruitment was assessed via "in situ" experiments in which recruitment plates were placed on different slopes, distances from shore, and submersion times; results were evaluated over 12 months. Plate sets were removed at 3, 6 and 12 months post-submergence for investigation of variation in community composition and recruitment. We found the greatest differences in plate community composition between 3 and 6 months post-immersion; this difference stabilized at 6 months of submersion without further major differences. Different slope angles and distances from shore produced significant variation in recruitment rate. We found 14 taxonomic and/or functional groups during the experiment and of these groups, cirripeds, biofilm and coriaceous macroalgae showed the greatest correlations with plate submergence time. Ascidiacea, bryozoa and crustose algae were the groups most correlated with slope, and crustose macroalgae had the highest percentages of coverage on the plates with horizontal slopes, with the other groups were found in greater abundances on vertical slopes. Cirripeds and hydrozoa showed strong correlation with distance from the shore, with greater numbers on plates further from the rocky shore. Changes in community composition depended on environmental conditions and interspecific relationships, independent of initial composition. These results are in accordance with the succession theory,in which time is the primary explanatory factor for changes in community composition. New M. decactis recruits were not found on experimental plates. The study reveals a vulnerable environment as the main structuring species seems to be in an ecologic fragile situation, with a slow-growing, small population and poor or lack of sexual reproduction. . New management measures must be applied in order to promote effective conservation of this unique environment.

Para a avaliação da transferência de citocinas para o sangue de bezerros neonatos via ingestão de colostro de fêmeas bovinas holandesas, foram utilizados 15 bezerros nascidos de parto eutócico, distribuídos igualmente por três grupos experimentais (n=5): G1- receberam dois litros de colostro fresco provenientes de suas próprias mães; G2- receberam dois litros de colostro provenientes de "pool" de colostro congelado e o G3- foram alimentados apenas com leite. Nestes grupos foram coletadas amostras de sangue em cinco tempos durante os primeiros quinze dias de vida e mensuradas as concentrações das citocinas Interleucina-1 β (IL-1b), Interleucina-6 (IL-6), Fator de necrose tumoral- α (TNF-a) e Interferon-γ (IFN-γ). Também se mensurou tais citocinas (IL-1 β, IL-6 e TNF-α) nos sobrenadantes do colostro de do "pool" de colostro fornecidos aos bezerros dos grupos G1 e G2 respectivamente. Verificou-se a transferência das citocinas IL-1b, IL-6, TNF-a e IFN-γ pela presença no soro dos bezerros do grupo G1, enquanto que nos demais grupos (G2 e G3) não foram detectadas. To evaluate the transfer of cytokines into the blood of neonates via colostrum intake of Holstein cows were used 15 calves born from eutocic, shared equally by three experimental groups (n=5) G1-received 2 liters of fresh colostrum from their own mothers, G2-received 2 liters of colostrum from the "pool" of frozen colostrum and G3-were fed only milk. These group blood samples were collected at five times during the first fifteen days and measured the concentrations of IL-1b, IL-6, TNF-a and IFN-γ. Also measured are the cytokines IL-1 β, IL-6 and TNF-α in the supernatant of colostrum fed to calves from G1 , and cytokines IL-1β , IL-6 , TNF-α and IFN-γ in the supernatant the "pool " of colostrum fed to calves in G2 . It is the transfer of IL - 1b , IL- 6, TNF-a and IFN-γ in the serum of calves from G1 whereas the other groups G2 and G3 were not detected.

O presente trabalho objetivou realizar um estudo retrospectivo sobre os prolapsos vaginal e uterino em ovelhas atendidas no Serviço de Clínica de Bovinos e Pequenos Ruminantes (CBPR) da FMVZ/USP no período compreendido entre 2000 a 2010, no qual, foram atendidas 56 ovinos com problemas inerentes ao sistema reprodutivo, dessas, 25 apresentaram prolapso vaginal ou uterino (44,6%). O prolapso vaginal total foi o de maior frequência (72%). As ovelhas acometidas, em sua maioria, possuíam idade superior a quatro anos (64%), eram sem raça definida (44%) ou da raça Ile de France (40%). As manifestações clínicas observadas durante a maioria dos atendimentos foram: taquipnéia, taquicardia, mucosas oculares avermelhadas indicando estado de toxemia, decúbito esternal ou lateral, apatia e anorexia. O tratamento instituído para todos os casos foi a limpeza, desinfecção e reintrodução do órgão prolapsado. A sutura de Bühner foi feita em 84% dos casos e a histeropexia em um caso (4%). A evolução foi satisfatória em 80% dos casos atendidos, nos demais casos (20%) observou-se óbito da fêmea acometida. Do total de óbitos, os prolapsos vaginais foram responsáveis por 60% (3/5) e os prolapsos uterinos por 40% (2/5). A etiologia dos prolapsos não foi definida nos casos atendidos, sendo esses associados com o período pós-parto em sua maioria (56%), provavelmente associados com quadros de hipocalcemia, altas concentrações séricas de estrógeno e hipertonia uterina. Além disso, a predisposição genética não pode ser descartada.

This study analyzed the influence of the number of milkings, number of births, and udder quarter in immunoglobulin (Ig) concentration in the colostrum of healthy Holstein cows. It was collected two samples of colostrum by manual milking, getting the first jets to completion of bacteriological examination and immunoglobulin levels by radial immunodiffusion test in agar gel. Positive samples for bacteriological examination were excluded from this investigation. Medians of immunoglobulin's G, A and M in the colostrum collected before the first and second milking were respectively 9,200 and 6,400mg/dL (p=0.0029); 400 and 200mg/dL (p=0.0018); 800 and 400mg/dL (p=0.0001). Median immunoglobulin concentration in animals that calved once, twice or three times or in cows that calved 4 to 6 times were 6,400; 6,400; 3,200 and 11,200mg/dL IgG; 100, 200, 100 and 800mg/dL IgA ; and 400, 400, 100 and 800mg/dL IgM, respectively. Concentrations of IgG, IgA and IgM were greater in animals that calved more than 4 times (p0,05) entre os quartos mamários. Os teores de Igs do colostro de vacas Holandesas sofrem influência do número de ordenhas pós-parto e número de lactações. Estas variações podem ser consideradas fatores de risco associados à falha na transferência de imunidade passiva em bezerros neonatos, predispondo-os às doenças e ocasionando perdas produtivas á pecuária.

Milk samples from 45 halves were collected from lactating ewes to evaluate the effect of freezing and incubation of the whole milk on the qualitative results of bacteriologic culture. Thus, these milk samples were submitted to the following treatments: standard culture technique (T1), incubation for 18h at 37°C (T2) and thawing at -20°C for 24h (T3). After these periods, the milk samples from T2 and T3 were submitted to standard culture technique. The T2 showed an increase in the proportion of coagulase-negative staphylococci (CNS) recovery compared to T1, although the same cannot be predicted by T3. Conversely, the T2 allows the growth of some bacteria present in clinically healthy teats ducts as Bacillus spp.. The results of the present study indicated that the incubation of the whole milk can be applied to detection of CNS in ewes’ milk in attempt to reduce the false-negative culture milk samples that can lead to a more efficient use of laboratory resources and reduce costs to herd owners.

A particularidade da secreção láctea caprina, do tipo apócrina, diferente da secreção merócrina da vaca, leva a erros de interpretação durante a realização de técnicas de avaliação da celularidade do leite de fêmeas desta espécie. Portanto, o presente trabalho teve o objetivo de determinar a contagem de células somáticas pelo método indireto California Mastitis Test (CMT), e por métodos diretos, incluindo a contagem por citometria de fluxo e a contagem microscópica direta, através da coloração de verde de metil e pironina-Y, além de comparar os métodos de contagem celular. Foram analisadas 102 amostras de 51 fêmeas caprinas, das raças Saanen, Parda Alpina e Toggenburg, criadas no Estado de São Paulo. Os animais foram categorizados segundo a fase da lactação, exame físico da glândula mamária e exame do leite. As amostras foram colhidas, após a realização do exame Califórnia Mastitis Test, em duas alíquotas, uma destinada à contagem celular automática e a outra, a contagem microscópica direta, utilizando-se o corante verde de metil e pironina- Y. De acordo com os diferentes escores do CMT, observou- se 74,5% de amostras negativas, 8,8% de amostras com escore traços, 8,8% de amostras ligeiramente positivas (+), 6,8% de amostras fracamente positivas (++) e 0,9% de amostras fortemente positivas (+++). Os valores medianos das contagens de células somáticas presentes no leite de cabras, avaliadas através de contador automático e microscopia direta, e analisadas de acordo com os diferentes escores do CMT, foram, respectivamente, 181.000, 578.000, 628.000, 1.421.500 e 5.542.000 células/mL de leite e 74.991, 271.396, 71.420, 640.995 e 5.049.394 células/ mL de leite, nos escores negativo, traços, +, ++ e +++. Os valores medianos obtidos através da contagem de células somáticas pelo método automático e microscópico direto, de acordo com as fases de lactação foram de 159.500, 508.000 e 277.500 células/mL de leite, e 62.493, 89.275 e 146.411. A correlação obtida entre a contagem celular automática e microscópica direta foi de 88%. A partir dos resultados observados pode-se concluir que existe diferença na contagem celular determinada através do método automático e microscópico sendo este último o mais adequado para a determinação da celularidade no leite de cabras. The particular apocrine secretion of goat milk different from the merocrine one observed in cows, may lead to errors in interpreting cellularity evaluations in the milk of this species. Thus, the objective of the present trial was to determine Somatic Cell Counts by means of one indirect methods, the California Mastitis Test (CMT), and direct methods, flow cytometry and direct microscopic count using methyl green-pyronine-Y stain, beyond comparing the methods of cellular counting. A total of 102 samples from 51 Saanen, Brown Alpine and Toggenburg female goats, bred in the state of São Paulo, were analyzed. Goats were separated in groups according to the phase of lactation and to physical examination of the mammary gland, and milk examination. Samples were divided into two aliquots, and were collected after California Mastitis Test evaluation. One aliquot was used in automatic cell counts, and the other, in direct microscopic count using methyl green-pyronine-Y stain. CMT results were as follows: 74.5% of the samples were negative, 8.8% yielded traces, 8.8% were weak positive (1), 6.8% were distinct positive (2) and 0.9% were strong positive (3). Medians of somatic cell counts in goat milk as evaluated by means automatic cell counter and direct microscopy, and grouped according to the different CMT scores, were as follows: 181,000, 578,000, 628,000, 1,421,500, and 5,542,000 cells/mL of milk and 74,991, 271,396, 71,420, 640,995, and 5,049,394 cells/mL of milk in scores negative, traces, 1, 2 and 3, respectively. Medians obtained in automatic cell counts and direct microscopic counts, grouped according to the phase of lactation were 159,500; 508,000; and 277,500 cells/mL of milk and 62,493; 89,275; and 146,411 cells/ml of milk, respectively. The correlation between the automatic and microscopic methods for somatic cell counts was 88%. Based on the results obtained, it could be concluded that there were differences between the automatic and microscopic methods for somatic cell counts, being this most adequate for the determination of the celularidade in the cellularity of goat milk.

Changes in the composition of milk secretion that ocorremdurante the early stages of involution indicate rapid structural changes in the gland and the mechanisms involved in milk synthesis and secretion. Thus, this study sought to elucidate the physicochemical characteristics and cell of milk from sheep of the Santa Ines during the initial period of mammary involution, evaluating the hydrogen ion concentration, somatic cell count (SCC) and the lactose , protein, fat and total solids, in addition to bacteriological examination. In the post-weaning period significant changes were observed in the composition of milk secretion, as increasing pH and protein content, reduced levels of lactose, total solids and fat, plus a trend in increasing CCS. In the positive bacteriological examination animals were also found changes similar to those that occur in the active involution, except fat. Both at the end of breastfeeding period as the period of active involution was exclusively isolated genus Staphylococcus. Changes in the composition of milk secretion that occur during the early stages of involution indicate rapid structural changes in the gland and the mechanisms involved in milk synthesis and secretion. Thus, this study sought to elucidate the physicochemical characteristics and cell of milk from sheep of the Santa Ines during the initial period of mammary involution, evaluating the hydrogen ion concentration, somatic cell count (SCC) and the lactose , protein, fat and total solids, in addition to bacteriological examination. In the post-weaning period significant changes were observed in the composition of milk secretion, as increasing pH and protein content, reduced levels of lactose, total solids and fat, plus a trend in increasing CCS. In the positive bacteriological examination animals were also found changes similar to those that occur in the active involution, except fat. Both at the end of breastfeeding period as the period of active involution was exclusively isolated genus Staphylococcus.

The objectives of the present study were the analysis of cell counts, the comparison between different methods for counting cells and the quantification of different types of cells observed in the milk of Lacaune sheep, using automatic somatic cell counts (SCC) and direct microscopic SCC. Milk smears were stained with methyl green-pyronin-Y and Rosenfeld stain. Mean of automatic cell counts was 0.145 x106 cells/mL of milk, and mean of direct microscopic counts using methyl green-pyronin-Y and Rosenfeld were respectively 0.157 and 0.193 x106 cells /mL of milk. Samples used in direct microscopic counts were evaluated according to the different types of cells and the following results were recorded: 0.094 and 0.14 x106 mononuclear cells /mL, 0.063 and 0.051 x106 polymorphonuclear cells /mL of milk using methyl green-pyronin-Y and Rosenfeld stain, respectively. It may be concluded that there were differences in the methods used for counting cells. The number of cells recorded was lower when methyl green-pyronin-Y and automatic counts were used, compared with direct microscopy using Rosenfeld stain. KEY WORDS: somatic cells and cytology, lacaune, milk, sheep.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil microbiológico e celular do leite no período lactante e de involução ativa de ovelhas da raça Santa Inês. Foram avaliadas amostras lácteas de 12 ovelhas durante estes distintos períodos. Realizou-se o exame físico da mama, sendo as amostras lácteas submetidas à contagem de células somáticas (CCS), ao California Mastitis Test (CMT), ao exame microbiológico e aos testes de sensibilidade in vitro dos patógenos encontrados. Foram observados maiores escores do exame físico, CCS, CMT durante o período de involução ativa, além de uma alta persistência da infecção durante estes períodos. O período de involução ativa não se mostrou como um momento de alta susceptilidade. Os estafilococos coagulase negativa representaram o único gênero isolado das glândulas infectadas. Uma alta sensibilidade dos agentes etiológicos envolvidos frente aos diferentes antimicrobianos in vitro foi também observada. The aim was to evaluate and compare the microbiological and cellular profile of the milk of Santa Ines ewes during the lactation period and the active involution. Milk samples were analyzed from 12 ewes during these distinct periods. Clinical examination of the mammary gland, somatic cell count (SCC), California Mastitis Test (CMT), bacteriologic screening and sensibility of the pathogens in vitro were performed. Most alterations were observed in the active involution period. SCC and CMT were higher in this same period. Besides this, a high persistency of infection occurred. The active involution period did not show high susceptibility. Coagulase-negative staphylococci were the only isolated bacteria. A high antimicrobial sensibility of these pathogens was also encountered.

Estudou-se quantitativamente e qualitativamente a citologia, os teores de imunoglobulinas, e a atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino contra a Escherichia coli enterotoxigênica (ECET), analisando-se a influência da opsonização prévia destas células. Para tal finalidade foram utilizadas 53 vacas da raça Holandesa, das quais realizou-se a colheita de um total 212 amostras de colostro obtidas antes da primeira e segunda ordenha. As amostras positivas (n=41) ao exame bacteriológico do leite foram excluídas desta pesquisa. Para a análise citológica quantitativa e qualitativa do colostro, foram utilizadas as técnicas de microscopia direta e citocentrifugação, respectivamente. As dosagens das imunoglobulinas (IgG, IgM e IgA) foram realizadas por meio da técnica de imunodifusão radial, utilizando-se Kits comerciais. Para a avaliação da atividade bactericida indireta dos fagócitos e verificação da influência da opsonização prévia da ECET, foram realizados os seguintes ensaios: utilizando somente suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares em meio de cultura (Grupo Controle - C); suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares adicionados a suspensão de ECET não opsonizada (Grupo NO); suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares adicionados a suspensão de ECET previamente opsonizada com 10% de sobrenadante de colostro bovino delipidado (Grupo O). A atividade bactericida indireta dos fagócitos foi mensurada por meio da quantidade de nmoles de peróxido de hidrogênio liberado por estas células, nos ensaios C, NO e O. Após as avaliações dos resultados das determinações realizadas, conclui-se que: (1) o colostro bovino de segunda ordenha apresenta maior quantidade de células/mL, que aquele de primeira ordenha; (2) a predominância celular demonstrada com o uso das técnicas de microscopia direta e de citocentrifugação foi de células mononucleares; (3) colostro bovino de segunda ordenha possui maior quantidade de neutrófilos polimorfonucleares, quando comparada àquela da primeira ordenha, utilizando as técnicas de microscópica direta e de citocentrifugação, para a contagem dos tipos leucocitários; (4) os tipos celulares predominantes no colostro bovino de primeira e segunda ordenha foram macrófagos/células epiteliais, seguidos por linfócitos, neutrófilos e eosinófilos, respectivamente, utilizando a técnica de citocentrifugação para diferenciação celular; (5) o colostro bovino de primeira ordenha possui maiores teores de imunoglobulinas das classes G e M, que o da segunda ordenha, havendo predomínio da IgG, sobre a IgM e IgA independente da ordem de ordenha. (6) os fagócitos do colostro bovino de primeira ordenha apresentaram maior atividade celular avaliada pela liberação de peróxido de hidrogênio, que os da segunda ordenha; (7) a estimulação antigênica com ECET não foi suficiente para aumentar a atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino; (8) a opsonização da ECET com soro colostral não determinou diferenças significativas na atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino, mensurada pela quantidade de peróxido de hidrogênio liberado por estas células; (9) existe correlação positiva entre os teores de imunoglobulinas da classe M e a quantidade de peróxido de hidrogênio liberado pelos fagócitos do colostro bovino; (10) o comportamento quantitativo observado para as imunoglobulinas e células do colostro bovino, considerando a ordem das ordenhas, sugere que os anticorpos teriam função prioritária na imunidade do neonato, enquanto o aumento de neutrófilos estaria voltado aparentemente para a proteção da glândula mamária. Bovine collostrum citology, immunoglobulin content and bactericidal activity of phagocytes against enterotoxigenic Escherichia coli were studied qualitatively and quantitatively, analyzing the influence of previous opsonization of the bacterium. In order to achieve this aim, 53 Holstein cows were used to obtain 212 collostrum samples before the first and second milkings. Samples positive (n=41) in the bacteriological examination of milk were excluded from the trial. Direct microscopy and cytocentrifugation were used in the quantitative and qualitative cytological analysis of collostrum, respectively. Immunoglobulin (IgG, IgM and IgA) contents were determined by means of radial immunodiffusion using commercial kits. Indirect bactericidal activity of phagocytes and assessment of the influence of ETEC previous opsonization were carried out as follows: using only a suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes in culture medium (Control group - C); suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes added to a suspension of non-opsonized ETEC (NO group); suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes added to an ETEC suspension previously opsonized with 10% of supernatant of delipidated bovine collostrum (O group). Indirect bactericidal activity of phagocytes was measured by means of the amount of hydrogen peroxide nmoles released by these cells in assays C, NO and O. After results were evaluated, it was concluded that: (1) bovine collostrum obtained in the second milking showed more cells/mL than first milking collostrum; (2) the predominance of mononuclear cells was determined by both direct microscopy and cytocentrifugation; (3) bovine collostrum obtained in the second milking showed greater quantity of polymorphonuclear neutrophils than that of the first milking, as determined in cell type counts by direct microscopy and cytocentrifugation; (4) cell types predominating in bovine collostrum of the first and second milking were macrophages / epithelial cells, followed by lymphocytes, neutrophils and eosinophils, respectively, using cytocentrifugation for cell differentiation; (5) first milking bovine collostrum showed greater levels of immunoglobulins G and M than that of the second milking, with a predominance of IgG compared with IgM and IgA, no matter the milking order; (6) phagocytes in first milking collostrum showed greater cell activity than those in the second milking collostrum, as evaluated by hydrogen peroxide release; (7) antigenic stimulation of ETEC was not enough to increase bactericidal activity of phagocytes in bovine collostrum; (8) ETEC opsonization with collostral serum did not lead to significant differences in bactericidal activity of bovine collostrum phagocytes, as measured by the amount of hydrogen peroxide released by these cells; (9) there was a positive correlation between the contents of immunoglobulin M and the amount of hydrogen peroxide released by phagocytes in bovine collostrum; (10) quantitative behavior observed for immunoglobulins and cells of bovine collostrum considering the milking order, suggest that antibodies would have a essential function in neonate immunity, whereas the increase in neutrophils would apparently be linked to mammary gland protection.

O tempo de gestação dos equinos é bastante variável, tendo um intervalo aproximado entre 320 e 360 dias e aproximadamente 370 dias nas gestações de asininos. Para os híbridos muares, há divergências na literatura, com alguns relatos de períodos superiores, semelhantes e inferiores ao de gestações de produtos equinos. Nas gestações de produtos clones não encontramos relatos publicados de tempo gestacional. Uma particularidade dos equídeos é que a maioria dos partos ocorrem no período noturno, momento este de maior tranquilidade ambiental e de menor atividade em uma propriedade. Desta forma, existe uma grande dificuldade no monitoramento dos partos, atividade esta tão importante para os equídeos, tornando a prática desafiadora e onerosa. Deste modo, uma maior exatidão na previsão da data do parto minimizaria o período de monitoramento, a mão de obra e consequentemente os custos despendidos neste processo. Usualmente, alguns métodos são empregados na previsão do parto, como avaliação de mudanças físicas em éguas periparturientes e o tempo de gestação. Ambos os métodos se mostram pouco confiáveis, já que há uma grande variação racial e individual. Estudos com alteração do pH, índice BRIX e das concentrações de eletrólitos das secreções da glândula mamária, em éguas próximas do momento do parto apresentam resultados consistentes, embora não haja relatos do uso destas técnicas em gestações de produtos híbridos e de clones equinos. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar parâmetros que auxiliem na busca da predição da parição de éguas gestantes de produtos muares e produtos clones equinos, estabelecendo um controle comparativo com as gestações de produtos espécie-específicos equinos não clones, com base nos parâmetros físicos de relaxamento vulvar e relaxamento dos ligamentos sacroisquiáticos e pH, índice BRIX e concentração de cálcio, fósforo, magnésio, sódio e potássio nas secreções mamárias dos seis dias que antecedem o parto até a data do parto. Foram utilizadas 60 éguas divididas em 3 grupos distintos: 25 éguas gestantes de produtos muares (GM), 20 éguas gestantes de produtos equinos clones (GCL) e 15 éguas gestantes de produtos equinos (GE). Todos os animais foram avaliados diariamente desde os 325 dias de gestação até o dia do parto, que foi supervisionado. Foram avaliados os relaxamentos dos ligamentos sacroisquiáticos e vulvares, aos quais foram atribuídos escores que variavam de 0 (sem relaxamento) a 3 (relaxamento intenso), e as secreções mamárias quanto ao pH em fitas colorimétricas e em pHmetro, índice BRIX e concentração de eletrólitos. Para a análise laboratorial e estatística, foram selecionados apenas os dados e amostras a partir do 6º dia pré-parto (D-6) até o dia do parto (D0), totalizando 7 dias avaliados por égua (D-6, D-5, D-4, D-3, D-2, D-1 e D0). Os parâmetros físicos de relaxamento avaliados tiveram um aumento gradativo no escore com a aproximação do dia do parto, com escores de 2,81, 2,79 e 2,68 para o GE, GM e GCL no dia do parto, respectivamente. Apenas no grupo de GM obteve-se um relaxamento maior no dia do parto quando comparado aos outros dias avaliados. A utilização das fitas colorimétricas para a mensuração do pH in vivo se mostrou válida por ter demonstrado diminuições expressivas do pH no dia do parto (D0). Foram detectadas diferenças entre grupos para o pH em fitas colorimétricas antes da congelação das amostras, com o pH menor nas gestações dos grupos GCL e GM. Na mensuração realizada com o pHmetro após a descongelação das amostras, apenas o grupo GCL obteve médias maiores de pH. Notavelmente, a congelação das amostras das secreções mamárias afetou diretamente seu pH. A avaliação do índice BRIX não mostrou diferenças entre os grupos estudados, mas sim entre os tempos. Todos os eletrólitos estudados tiveram relação positiva na predição do parto devido às alterações em suas concentrações na proximidade do parto, mas sem diferenças entre os grupos analisados. Assim, conclui-se que os parâmetros físicos avaliados foram insuficientes para a busca da predição do parto na espécie equina devido a sua grande variação, e que o pH em fitas colorimétricas compreende em um método eficaz e prático para esta finalidade. Além disso, o índice BRIX não demonstrou bom preditor do parto em nenhum grupo avaliado devido a grande variabilidade entre as éguas. As mensurações das concentrações de eletrólitos demonstraram ser bons preditores do parto, embora oneroso e pouco acessível pela metodologia utilizada. Desta forma, testes rápidos para mensuração de eletrólitos poderiam ser incluídos na rotina para que essas mensurações pudessem ser utilizadas com maior praticidade, incluindo a mensuração de fósforo, eletrólito relatado pela primeira vez neste trabalho como preditor do parto na espécie equina. Gestational length in horses is very variable, having an approximate interval of 320 and 360 days and approximately 370 days in donkey pregnancies. For mule hybrids, there are divergences in the literature, with some reports superior, similar and inferior periods than equine product pregnancies. In pregnancies with clone foals, we did not find published reports of gestational length. A peculiarity of equine is that most births occur at night, a time of greater environmental tranquility and less activity on a property. Thus, there is great difficulty in monitoring births, an activity that is so important in the equids, making the practice challenging and costly. Thus, greater accuracy in predicting the foaling date would minimize the monitoring period, the labor and, consequently, the costs incurred in this process. Usually, some methods are used to predict parturition, such as the assessment of physical changes in periparturient mares and the length of gestation. Both methods prove to be unreliable, as there is great breed and individual variation. Studies with changes in pH, BRIX index and electrolyte concentrations of mammary gland secretions in mares close to the time of parturition have shown consistent results, although there are no reports on the use of these techniques in pregnancies of hybrid foals and equine clones. Thus, the objective of this study was to evaluate parameters that help predicting foaling of pregnant mares of mule and equine clone foals, establishing a comparative control with the pregnancies of no clone species-specific equine foals, based on physical relaxation parameters vulvar and sacroischiatic ligament relaxation, and pH, BRIX index and concentration of calcium, phosphorus, magnesium, sodium and potassium in mammary gland secretions from the six days prior to parturition until foaling. Sixty mares were used, divided into 3 groups: 25 mares in the pregnant mule foal group (GM), 20 mares in the pregnant clones equine foal group (GCL) and 15 mares in the pregnant equine foal group (GE). All animals were evaluated daily from 325 days of gestation until the day of foaling, which was monitored. Relaxation of the sacroischiatic and vulvar ligaments, which were assigned scores ranging from 0 (no relaxation) to 3 (intense relaxation), and mammary gland secretions according to pH in colorimetric strips and pH meter, BRIX index and electrolyte concentration were evaluated. For laboratory and statistical analysis, data and samples were selected from the 6th pre-partum day (D-6) until the day of foaling (D0), totaling 7 days evaluated per mare (D-6, D-5, D-4, D-3, D-2, D-1 and D0). The physical relaxation parameters evaluated had a gradual increase in the score as the day of foaling approached, with scores of 2.81, 2.79 and 2.68 for the GE, GM and GCL on the day of delivery, respectively. Only in the GM group was there a greater relaxation on the day of delivery when compared to the other days evaluated. The use of colorimetric tapes to measure the pH in vivo proved to be valid having shown significant decreases in pH on the day of delivery (D0). Differences between groups were detected for pH on colorimetric strips before freezing the samples, with the lowest pH in pregnancies in the GCL and GM groups. In the measurement performed with the bench pH meter after thawing the samples, only the GCL group had higher pH means. Notably, freezing the mammary gland secretion samples directly affected their pH. BRIX assessment did not show differences between the groups studied, but between times. All electrolytes studied had a positive relationship in predicting delivery due to changes in their concentrations near delivery, but without differences between the analyzed groups. Thus, it is concluded that the physical parameters evaluated were insufficient to predict parturition in equine species due to its wide variation, and that the pH in strip test is an effective and practical method for this purpose. Furthermore, the BRIX index did not show a good predictor of parturition in any group evaluated due to the great variability between mares. Measurements of electrolyte concentrations have been shown to be good predictors of foaling, although costly and inaccessible by the methodology used. Thus, rapid tests for measuring electrolytes could be routinely included so that these measurements could be used with greater practicality, including the measurement of phosphorus, an electrolyte that was reported for the first time in this work as a predictor of parturition in the equine species.

A diarreia neonatal dos bezerros (DNB) é um dos eventos de saúde mais importantes durante o período de criação de bezerros de corte, sendo responsável por grande parte da morbidade e mortalidade nesta fase. Entre as medidas para mitigar o risco de surtos de DNB, a vacinação da vaca na última fase da gestação é uma das mais importantes. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a eficácia da vacinação pré-parto contra DNB, especialmente Rotavírus Bovino tipo A (BoRVA) e Coronavírus Bovino (BCoV), em animais da raça Nelore. Um total de 117 animais, divididos em vacas (n=81) e novilhas (n=36) foram distribuídos em dois grupos experimentais, sendo estes: grupo de animais vacinados (VAC: vacas=40; novilhas=19) e grupo de animais não vacinados (NVAC: vacas=41; novilhas=17). O tratamento dos animais ocorreu entre 60 a 50 dias antes da data prevista para o parto, sendo aplicado no grupo VAC uma única dose de uma vacina comercial (2mL), administrado por via intramuscular, e no grupo NVAC uma dose de solução salina 0,9%. Amostras de sangue foram coletadas imediatamente antes da vacinação e após 30 dias, para avaliar a resposta de anticorpos específicos (IgG1) contra BoRVA e BCoV. O nascimento dos bezerros foi monitorado e a transferência de imunidade passiva foi avaliada entre o segundo e o terceiro dias de vida. A diarreia foi monitorada nos primeiros 30 dias de idade, e amostras de fezes foram coletadas para identificação do agente etiológico em animais com diarreia. Como controle, amostras de fezes de bezerros saudáveis com idade semelhante à dos animais com diarreia, também foram coletadas. Os anticorpos específicos (IgG1) contra BoRVA e BCoV foram medidos usando a técnica Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA). A comparação de médias pelo teste T de Student mostrou títulos mais elevados de IgG1 contra BoRVA e BCoV no grupo VAC quando comparado ao grupo NVAC na categoria de vacas (P < 0,0001) e no total de animais (P < 0,0001). Em relação aos bezerros, não houve diferenças (P >0,05) entre os grupos para a concentração de proteína total sérica (PTS) e taxa (%) de falha da transferência imune passiva (FTIP). O título de IgG1 específico no soro de bezerros refletiu a resposta das mães, observando títulos mais elevados de IgG1 para BoRVA (P < 0,0016) e BCoV (P 0,05). Entre bezerros com diarreia, o agente mais prevalente foi o BoRVA. A vacinação pré-parto com uma única dose da vacina testada aumentou os títulos de IgG1 contra BCoV e BoRVA, podendo ser utilizada como estratégia preventiva para diminuir a ocorrência de DNB em animais da raça Nelore. Neonatal calf diarrhea (NCD) is one of the most important health events during the rearing period of beef calves, accounting for much of the morbidity and mortality at this stage. Among the measures to mitigate the risk of NCD outbreaks, cow vaccination in the last stage of pregnancy is one of the most important. The objective of this research was to evaluate the effectiveness of prepartum vaccination against NCD, especially Bovine Rotavirus type A (BoRVA) and Bovine Coronavirus (BCoV), in Nelore animals. A total of 117 animals, divided into cows (n=81) and heifers (n=36) were divided into two experimental groups, namely: vaccinated animal group (VAC: cows=40; heifers=19) and animal group unvaccinated (NVAC: cows=41; heifers=17). The treatment of the animals occurred between 60 to 50 days before the expected date of calving, with a single dose of a commercial vaccine (2mL) being applied to the VAC group, administered intramuscularly, and to the NVAC group a dose of saline solution 0, 9%. Blood samples were collected immediately before vaccination and after 30 days to assess the specific antibody response (IgG1) against BoRVA and BCoV. The calf birth was monitored and the transfer of passive immunity was evaluated between the second and third days of life. Diarrhea was monitored in the first 30 days of age, and stool samples were collected to identify the etiologic agent in animals with diarrhea. As a control, fecal samples from healthy calves with age similar to that of animals with diarrhea were also collected. Specific antibodies (IgG1) against BoRVA and BCoV were measured using the Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) technique. Comparison of means by Student ′s t test showed higher IgG1 titers against BoRVA and BCoV in the VAC group when compared to the NVAC group in the cows category (P 0.05) between groups for serum total protein concentration (STP) and rate (%) of passive immune transfer failure (PITF). The specific IgG1 titer in the serum of calves reflected the response of the dams, observing higher IgG1 titers for BoRVA (P 0.05). Among calves with diarrhea, the most prevalent agent was BoRVA. Prepartum vaccination with a single dose of the tested vaccine increased IgG1 titers against BCoV and BoRVA, and can be used as a preventive strategy to reduce the occurrence of NCD in Nelore animals.

O objetivo geral deste estudo foi investigar as afecções umbilicais inflamatórias mais frequentes em bezerros neonatos da raça Holandesa e a sua associação com alterações em órgãos adjacentes como fígado e vesícula urinária, assim como determinar a ocorrência da enfermidade na região centro-leste do Estado de São Paulo. Foi realizado estudo com a inclusão inicial de 806 bezerros holandeses (126 machos e 680 fêmeas), provenientes de 16 propriedades leiteiras na região. Estes foram triados semanalmente, do nascimento aos 30 dias de vida, com exames de inspeção e palpação umbilical externa e abdominal, para a detecção de alterações umbilicais inflamatórias, que incluíram a presença de secreção purulenta ou aumento de volume em umbigo externo, sensibilidade durante a palpação de umbigo externo ou abdominal, massas abdominais palpáveis e/ou aumento de calibre de componentes. Foram então triados 52 animais dentre os 806 avaliados (52/806; 6,54%), no qual realizou-se avaliação ultrassonográfica, para confirmação ou exclusão do diagnóstico. Quando confirmado, o animal seria incluído no grupo D (doentes), composto por 39 bezerros (39/806, 4,83%), sendo nove machos e 30 fêmeas, que apresentaram alterações no calibre e aspecto dos vasos umbilicais. As principais doenças encontradas nesse grupo foram as onfalites (26/39; 66,66%), seguidas das onfaloarterites (10/39; 25,64%), onfaloflebite (1/39; 2,56%), onfalouracoarterite (1/39; 2,56%) e panvasculite (1/39; 2,56%). Também foram selecionados 16 bezerros, sem qualquer alteração no exame clínico geral e específico da região umbilical, para formação do grupo H (hígidos). Nos dois grupos foi realizada a avaliação hepática, em modo B, no qual não foram encontradas alterações em parênquima e aspecto das veias, e Doppler pulsado, no qual foram obtidos o índice de pulsatilidade, as velocidades mínima e máxima e o índice de resistividade da veia porta, além do coeficiente de proporcionalidade entre os diâmetros das veias porta e cava. O Doppler pulsado revelou diferenças (P=0,001) entre a velocidade máxima da veia porta no grupo H (48,92± 4,37 cm/s) e grupo D (29,2 ± 2,68) (P=0,001). Também foi realizada a mensuração da parede da vesícula urinária nos animais do grupo H (0,12 cm ± 0,004) e nos animais com alterações inflamatórias dos componentes umbilicais caudais (0,15 cm ± 0,0004), além da identificação das camadas que compõem essa estrutura, com o auxílio do exame ultrassonográfico. Em relação às análises hepáticas laboratoriais, observou-se que a atividade sérica da GGT foi maior no grupo H (283,06 U/L ± 105,21) em relação ao grupo D (119,15 U/L ± 22,38) (P=0,03). Concluiu-se que as afecções umbilicais inflamatórias, quando diagnosticadas precocemente, raramente causam complicações, como o acometimento das estruturas adjacentes, sendo o exame ultrassonográfico, em modo B e modo Doppler pulsado, de grande valia para essa avaliação e diagnóstico preciso e precoce dessa enfermidade. General objective of research was to investigate the most frequent inflammatory umbilical disorders in neonatal Holstein calves and their association with changes in adjacent organs such as liver and urinary bladder, as well as to determine the occurrence of the disease in the central-eastern region of the State of São Paulo. A study was carried out with the initial inclusion of 806 Holstein calves (126 males and 680 females), from 16 dairy farms in the region. These were screened weekly, from birth to 30 days of life, with inspection exams and external and abdominal umbilical palpation, for the detection of inflammatory umbilical changes, which included the presence of purulent secretion or increased volume in the external navel, sensitivity during palpation of the external or abdominal navel, palpable abdominal masses and/or increased caliber of components. 52 animals were then screened among the 806 evaluated (52/806; 6.54%), in which an ultrasound evaluation was performed, to confirm or exclude the diagnosis. When confirmed, the animal would be included in group D (sick), composed of 39 calves (39/806, 4.83%), nine males and 30 females, which showed changes in the caliber and aspect of the umbilical vessels. Main diseases found in this group were omphalitis (26/39; 66.66%), followed by omphaloarteritis (10/39; 25.64%), omphalophlebitis (1/39; 2.56%), omphalouracoarteritis (1/39; 2.56%) and panvasculitis (1/39; 2.56%). 16 calves were also selected, without any alteration in the general and specific clinical examination of the umbilical region, for the formation of group H (healthy). In both groups, hepatic assessment was performed, in mode B, in which no changes were found in parenchyma and aspect of the veins, and pulsed Doppler, in which the pulsatility index, the minimum and maximum speeds and the resistivity index of the portal vein, in addition to the proportionality coefficient between the diameters of the portal and vena cava veins. The pulsed Doppler revealed differences (P = 0.001) between the maximum velocity of the portal vein in group H (48.92 ± 4.37 cm/s) and group D (29.2 ± 2.68) (P = 0.001). Measurement of the urinary vesicle wall was also performed in animals in group H (0.12 cm ± 0.004) and in animals with inflammatory changes in the caudal umbilical components (0.15 cm ± 0.0004), in addition to identifying the layers that make up this structure, with the aid of ultrasound examination. In relation to laboratory liver analyzes, it was observed that the serum activity of GGT was greater in group H (283.06 U/L ± 105.21) compared to group D (119.15 U/L ± 22.38) (P = 0.03). It was concluded that the inflammatory umbilical disorders, when diagnosed early, rarely cause complications, such as the involvement of the adjacent structures, being the ultrasound examination, in B mode and pulsed Doppler mode, of great value for this assessment and accurate and early diagnosis of disease.

O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar o impacto dos fatores maternos sobre o perfil sanitário, desempenho e performance reprodutiva do nascimento até o 1º parto. Para tanto, foram monitoradas 226 bezerras Holandesas por meio da análise dos registros da fazenda associado ao exame clínico e laboratorial entre T0 (1º dia do desmame), T1, T3, T5, T7, T15, T30 e T60. Apenas a sazonalidade influenciou na frequência de tratamentos para diarreias na fase de aleitamento, observando-se 4,04 vezes mais chances (IC 95% 1,84 - 8,85) de tratamento para os animais nascidos nos meses frios em relação aos meses quentes do ano. Em relação à época do desmame, as novilhas desaleitadas nos meses quentes apresentaram menores chances para diarreia no T3 (ODDs ratio = 0,053; IC 95% 0,007-429) e T5 (ODDs ratio= 0,009; IC 95% 0,007-0,495%). O exame clínico das bezerras ao desaleitamento (T0) revelou que as filhas das primíparas em relação às multíparas apresentaram 2,04 maiores chances de DRB (IC 95% 1,20- 3,47). As bezerras desaleitadas nos meses frios apresentaram maior 1,15 chances a mais de apresentarem DRB (IC95% 1,097-3,223). Fenômeno semelhante foi observado para Tristeza Parasitária Bovina, no qual as bezerras desaleitadas no inverno apresentaram 2,17 (IC 95% 0,21- 21,89). Em relação aos exames laboratoriais, as filhas de primíparas apresentaram maiores teores de haptoglobina - Hp (3,26±0,48 mg/dL) comparadas às multíparas (2,34±0,30mg/dL) no T7. O peso ao nascimento também influenciou nos teores de Hp no T0, observando-se maiores valores nos animais com peso entre 41 e 45 kg (3,06±0,50 mg/dL) comparados com novilhas nascidas com peso inferior a 35 kg (2,61±0,55 mg/dL) e entre 36-40 kg (2,60±0,43 mg/dL). A época do desmame influenciou à concentração de Hp, sendo que os maiores valores foram detectados nos animais desaleitados na primavera (2,20±1,00mg/dL) que outono (1,98±0,24mg/dL) e inverno (2,81±0,41mg/dL). Em relação ao desempenho entre T0 e T60 detectou-se as seguintes diferenças entre as variáveis independentes: menor peso nas novilhas nascidas de partos distócicos (P=0,05) no T60; menor peso ao nascimento (P

O presente estudo avaliou a dinâmica da onfalite, diarreia e Doença Respiratória Bovina (DRB), além do comportamento da haptoglobina (Hp) em bezerras Holandesas nos primeiros 41 dias de vida. Ainda, foi possível determinar os parâmetros de performance da Hp frente à detecção de doenças. Para tanto, foram avaliadas 216 bezerras nos momentos D2-6; D7-13; D14-20; D21-27 e D31-41. A haptoglobina (Hp) foi mensurada por técnica espectrofotométrica, enquanto a sanidade das bezerras foi avaliada segundo o Calf Health Scoring Criteria, da University of Wisconsin Madison. A diarreia foi monitorada pela avaliação da consistência das fezes, sendo adotada a seguinte classificação: escore 0 fezes com consistência normal; escore 1- fezes pastosas e semi-formada; escore 2- fezes pastosas com maior quantidade de água e conteúdo fecal aderido ao períneo e cauda; escore 3- fezes líquidas com conteúdo fecal aderido no períneo e cauda. Escores 2 e 3 foram considerados positivos para diarreia. A matéria seca das fezes também foi determinada para avaliação da saúde intestinal, sendo os animais com valores ≤15% classificados como positivos para diarreia. A DRB foi determinada adotando-se os seguintes parâmetros: tosse, secreção nasal, secreção ocular, posicionamento de orelhas e temperatura corpórea, sendo pontuados de 0 a 3 de acordo com a intensidade da sintomatologia. Soma das pontuações escore ≥5 foi adotada para classificar os animais positivos para DRB. As onfalites foram determinadas pela inspeção e palpação das estruturas umbilicais externas. O período de maior prevalência da onfalite foi no D7-13 (8,8%; 19/216), seguida pelas diarreias no D14-20 (42,9%; 76/177) e DRB no D31-41 (26,4%; 55/208). A média da concentração de Hp durante o experimento foi de 0,03±0,05 g/L, com valores mínimo e máximo de 0,00 e 0,52 g/L, respectivamente. Os picos de haptoglobina foram detectados nos momentos D7-13 (0,04±0,07) e D14-20 (0,04±0,05 g/L). Em relação às diarreias (escore fecal 2 e 3), a Hp apresentou sensibilidade de 56,9% e especificidade 74,07%, sendo o ponto de corte estabelecido equivalente a 0,02 g/L. Resultados semelhantes foram observados para diarreias determinadas pelo teor de matéria seca: sensibilidade 58,1; especificidade 76,2; e ponto de corte 0,02 g/L. Em relação a DRB, a sensibilidade e especificidade foi de 72,7 e 81,2%, respectivamente, quando utilizado a soma do escore respiratório≥ 5 associado à temperatura retal >39,5ºC, com ponto de corte de 0,02 g/L. O ciclo de doenças foi caracterizado cronologicamente pelas onfalites, diarreias e DRB nos primeiros 41 dias de vida. A haptoglobina pode ser usada como biomarcador para a detecção da DRB. Por outro lado, a proteína apresentou baixa sensibilidade para detecção de diarreia usando dois padrões-ouro. This research evaluated the dynamic of navel inflammation, diarrhea and Bovine Respiratory Disease (BRD), besides the haptoglobin (Hp) profile in Holstein heifers in the first 41 days of life. Moreover, it was possible to determine the development of haptoglobin to detect diseases. For this, it was evaluated 216 Holstein heifers in the following moments D2-6; D7-13; D14-20; D21-27 e D31-41. Haptoglobin was measured using spectrophotometric, and the health status of calves were assessed in accordance with the Calf Health Scoring Criteria from The University of Wisconsin (Madison). Diarrhea was monitored according to fecal consistency, using the following classification: score 0- normal consistency, score 1- pasty, semi-formed, score 2- pasty with largest amount of water, score 3- liquid with fecal content adhered in the perineum and tail. Calves were assessed having diarrhea when the score were 2 or 3. Fecal dry matter also was determined to evaluate the gut health, so animals with values ≤15% were classified such as positive for diarrhea. BRD was assessed using the following parameters: rectal temperature, nasal secretion, ocular secretion, cough and ear/head position with score of 0-3 based on severity of each. Calves were assessed having BRD when the sum of these scores was ≥5. Omphalitis was evaluated by inspection and palpation of navel external structures. The highest prevalence of omphalitis was observed on D7-D13 (8.8%; 19/216), followed diarrhea on D14-D20 (42.9%, 76/177) and BRD on D31-D41 (26.4%; 55/208). The mean of Hp along this research was 0.03±0.05 g/L, with minimum and maximum values of 0.00 e 0.52 g/L, respectively. The peak of haptoglobin was detected on D7-13 (0.04±0.07) e D14-20 (0.04±0.05 g/L). In relation to diarrhea (fecal score 2 and 3), the haptoglobin had sensibility of 56.9% and specificity of 74.07%, and the cut-off established was 0.02 g/L. Similar results was observed for diarrhea determined using fecal dry matter: sensibility of 58.1; specificity of 76.2; and cut-off of 0.02 g/L. In relation to BRD, sensibility and specificity detected was 72.7 and 81.2%, respectively, when the sum of score was ≥5 associated with rectal temperature >39.5ºC, with cut-off equal 0.02 g/L. The cycle of diseases was characterized by omphalitis, diarrhea and BRD in the first 41 days of life. Haptoglobin can be used as a biomarker to detect BRD. On the other hand, this protein had low sensibility to detect diarrhea using two gold standard.

O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos clínicos, a eficiência produtiva, reprodutiva, a resposta imune inata e humoral em fêmeas da raça Holandesa persistentemente infectadas (PI) com BVDV. Para tanto, foram selecionadas 25 PI´s por meio do ELISA antígeno, das quais oito eram bezerras ≤ 12 meses; seis novilhas entre 13 e 24 meses; e onze animais de 25 a 36 meses de idade. O grupo não infectado (NI) foi composto por fêmeas negativas com faixas etárias pareadas às PIs. Em geral, as fêmeas PIs apresentaram maior frequência de diarreia (P=0,012) e Doença Respiratória Bovina (DRB) (P=0,004), especialmente àquelas entre 25 a 36 meses de idade. As PIs apresentaram maior concentração sérica de haptoglobina (P=0,017). As vacas NI´s produziram mais leite (8-12 litros) do que as PIs (P≤0.011). A contagem de células somáticas (CCS) foi maior para as vacas PI´s em relação NI´s durante a lactação (P≤0,066). A média de CCS observada foi de 0,2-0,5 x 105 (células/mL) e 2,0-10,5 x 105 (células/mL) nos grupos PI e NI, respectivamente. A idade na primeira inseminação (P=0,001) e o número de inseminação necessário para a primeira prenhez foi maior para PI do que nas novilhas NI´s (P=0,051). Na avaliação hematológica, as PI´s apresentaram menores valores de hemoglobina (P=0,098), hematócrito (P=0,084), hemoglobina corpuscular média (P=0,092), plaquetas (P=0,040), plaquetócrito (P=0,059) e linfócitos (número absoluto P=0,075; relativo P=0,092) em relação às NI´s. Em contraste, a porcentagem de monócitos foi maior em PI do que animais NI (P=0,014). Em geral, a proporção (%) e a intensidade da fagocitose (MFI) para Staphylococcus aureus e Escherichia coli foram maiores nas PIs do que animais NI (P

Novilhas Holandesas (n=35) foram vacinadas e distribuídas em grupos de acordo com os adjuvantes presentes nas vacinas comerciais contra BVDV e BoHV-1: Halum (hidróxido de alumínio, n=9), Oleosa (emulsão oleosa, n=10), Prezent A (composto saponina, n=10) e Salina (controle, n=6). As reações locais e sistêmicas foram avaliadas às zero horas (h), seis, 24, 48, 72 e 168h pós-vacinal. A produção de anticorpos (ACs) foi mensurada nos dias da vacinação (D0), D21 e D42. Capítulo 1 O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta inflamatória sistêmica em novilhas vacinadas contendo diferentes tipos de adjuvantes. O número de hemácias (P=0,009) e hemoglobina (P=0,028) foram maiores no grupo Prezent A após a 2a dose. Os teores de ferro foram maiores no grupo controle após 1ª e 2ª dose (P=0,000; 0,000). Em geral, no leucograma os grupos vacinados apresentaram decréscimo nos números de leucócitos (P=0,001) em 2ª dose, neutrófilos (%) (P=0,000; 0,000) em ambas aplicações e monócitos (%) (P=0,010) após 1ª dose. Os linfócitos (%) apresentaram aumento gradual após as duas doses (P=0,031; 0,000), observando-se menores proporções nos grupos Prezent A e Oleosa. Basófilos (%) após 2ª dose (P=0,012) e eosinófilos (%) (P=0,000; 0,000) foram mais reativos nos grupos Prezent A e Halum entre 24 e 72h. As novilhas Prezent A apresentaram maiores valores (P=0,000; 0,000) haptoglobina às 24 e 48h em relação aos demais grupos após a 1ª e 2ª dose. Em geral, a produção de EROs foi suprimida nas novilhas vacinadas em relação ao controle após 1a dose (P=0,018) e entre 24 à 168h após a 2a dose (P=0,002). Capítulo 2 O objetivo desta pesquisa foi avaliar os efeitos adversos associados às reações locais e sistêmicas, assim como verificar a reposta imune humoral induzida pelas vacinas. A reatividade local foi mais intensa no grupo Oleosa após a 1a dose (P=0,000), em contrapartida o grupo Prezent A após a 2a dose foi mais reativo (P=0,000). A temperatura retal foi elevada em Prezent A entre 0 a 24h em 1a dose (P=0,000). O escore de Doença Respiratória Bovina foi mais intensa no grupo Prezent A e Oleosa às 48 horas (P=0,0024). Os ACs contra BVDV foram detectados apenas em D42, observando-se médias semelhantes entre Prezent A (log2=5) e Halum (log2=5). A soroconversão foi maior em Halum (78%) em comparação ao Prezent A (40%) e oleosa (10%). Em relação ao BoHV-1, observou-se títulos e soroconversão em D21 nos grupos Halum (log2=3; 67%) e Prezent A (log2=1; 80%). No D42 verificou-se uma maior intensidade de resposta para Prezent A (log2= 6; 100%), seguido de Halum (log2=4; 100%) e Oleosa (log2=3,0; 60%). Os dados permitem concluir que a vacina contendo o adjuvante oleoso e Prezent A ocasionaram maior reatividade local, porém a Prezent A induziu maior resposta inflamatória sistêmica. A produção de ACs contra o BVDV e BoHV-1 foi mais intensa na vacina com hidróxido de alumínio e Prezent A. Estudos futuros são necessários para demonstrar os efeitos benéficos da resposta inflamatória sistêmica do Prezent A sobre a resposta imune adquirida mediada por células do tipo Th1. Dairy heifers (n=35) were vaccinated and distributed according to adjuvants present in commercial vaccines against BVDV and BoHV-1: Halum (n=9), Oil (n=10), Prezent A (n=10) and Saline (n=6). The local and systemic reactions were evaluated at zero hours (h), 6, 24, 48, 72 and 168h post-vaccination. The production of antibodies (ABs) was measured at vaccination days (D0), D21 and D42. Chapter 1 The objective of this study was to evaluate the inflammatory systemic response in vaccinated heifers with products that contained different types of adjuvants. The numbers of red blood cells (P=0.009) and hemoglobin (P=0,028) were higher in Prezent A after the 2nd dose. The iron were higher in saline group after 1st and 2nd dose (P=0.000; 0.000). In leukogram, vaccinated groups showed a decrease in total leukocytes (P = 0.001) at 2nd dose, neutrophils (%) (P = 0.000; 0.000) in both applications and monocytes (%) (P = 0.010) . Lymphocytes (%) presented gradual increase after received two doses (P = 0.031; 0.000), showing smaller proportions in Prezent A and Oil groups. Basophils (%) after 2nd dose (P = 0.012) and eosinophils (%) (P = 0.000; 0.000) were more reactive in Prezent A and Halum groups between 24 and 72h. Prezent A group presented higher values (P = 0.000; 0.000) of haptoglobin at 24 and 48h compared to the other groups after the 1st and 2nd doses. In general, ROS production was suppressed in vaccinated heifers relative to control after the 1st dose (P = 0.018) and 24 to 168h after the 2nd dose (P = 0.002). Chapter 2 The objective of this research was to evaluate the adverse effects associated with local and systemic reactions as well measure humoral immune response induced by reproductive vaccines containing different adjuvants. Local reactivity was more intense in Oil group after the 1st dose (P = 0.000), in contrast, Prezent A group presented higher reactivity after the 2nd dose. Rectal temperature was higher in Prezent A between 0 and 48 hours in the 1st dose. Bovine Respiratory Disease score was higher in Prezent A and Oil groups at 48h (P=0.002). ABs against BVDV were detected only at D42, observing the similar averages between Prezent A (log2=5) and Halum (log2=5). The seroconversion was higher in Halum (78%) compared to Prezent A (40%) and oil (10%). The titers and seroconversion against BoHV-1 at D21 were observed in Halum (log2 = 3; 67%) and Prezent A (log2 = 1; 80%) groups. At D42 a higher response was observed for Prezent A (log2 = 6, 100%), followed by Halum (log2 = 4, 100%) and Oil (log2 = 3.0, 60%). The data allow to conclude that the vaccine containing oil adjuvant and Prezent A caused greater local reactivity, but Prezent A induced a greater systemic inflammatory response. The production of ABs against BVDV and BoHV-1 was more intense in Halum vaccine and Prezent A. Future studies are needed to demonstrate the beneficial effects of the systemic inflammatory response of Prezent A on the acquired Th1 cell-mediated immune response.

Os primeiros 30 dias pós-nascimento do bezerro, chamado período neonatal, é caracterizado por grande desenvolvimento imunológico. O sistema imune começa a se desenvolver ainda no início da gestação, porém, após o nascimento, mesmo que morfologicamente desenvolvido, não se apresenta totalmente funcional pela ausência de estímulos antigênicos. Ademais as particularidades anatômicas e fisiológicas da placentação dos bovinos são um impediente à transferência de imunidade durante a gestação, assim sendo o feto se desenvolve sem a influência das imunoglobulinas maternas, ficando altamente dependente ao início da vida extrauterina da transferência de imunidade passiva via colostro. As características do sistema imune do bezerro em seu período neonatal fazem com que este seja muito susceptível a doenças. Conhecer o comportamento imunitário dos bezerros recém-nascidos pode auxiliar a diminuir a incidência de doenças e o custo desse animal, além de aumentar o seu bem-estar. Deste modo, buscou-se avaliar o padrão de resposta imunitária do neonato nos primeiros 30 dias de vida, por meio de avaliações: da atividade fagocítica e do metabolismo oxidativo de neutrófilos circulantes e imunoenotipagem de linfócitos T (CD3+) e suas subpopulações (CD4+) e CD8+)) por citometria de fluxo e a expressão gênica das citocinas IL-4, IL-10, IL-12 e IFN-ϒ por PCR em Tempo Real. O exame físico, o hemograma e avaliação de transferência de imunidade passiva foram considerados como critério de inclusão para garantir a sanidade dos animais durante o período experimental. Com base nos resultados obtidos nesta pesquisa para pode se concluir que: a atividade de fagocitose dos granulócitos foi constante nos 30 dias avaliados; a produção de espécies reativas de oxigênio por granulócitos foi observada nos ensaios basal e estimulado; e com comportamento semelhante, apresentando os dois ensaios, maiores porcentagens nos dias 1, 25 e 30 p.n.; os linfócitos CD3+) e suas subpopulações:CD4+), CD8+), estes apresentaram porcentagens semelhantes àquelas encontradas nos bovinos adultos; e a relação CD4+) /CD8+) aumentou aos 30 dias de vida, pelo aumento de CD4+). Não foi possível mensurar a expressão gênica das citocinas IL-4 e IFN-ϒ em nenhum dos momentos avaliados; no entanto, foi verificada a expressão gênica de citocinas IL-10 e IL-12, com uma inclinação para o perfil Th2 induzido pela expressão mais frequente de IL-10, observando-se influência da expressão gênica das citocinas IL-10 e IL-12 no leucograma, na atividade dos granulócitos, e nas subpopulações de linfócitos T. The first 30 days post-birth of the calf, called the neonatal period, is characterized by large immunological development. The immune system begins to develop even at the beginning of gestation, but after birth, even if morphologically developed, it is not fully functional due to the absence of antigenic stimuli. In addition, the anatomical and physiological characteristics of bovine placentation are an impediment to the transfer of immunity during gestation, so the fetus develops without the influence of maternal immunoglobulins, being highly dependent at the beginning of the extrauterine life of the transference of passive immunity via colostrum. The characteristics of the immune system of the calf in its neonatal period make it very susceptible to diseases. Knowing the immune behavior of newborn calves can help reduce the incidence of diseases and the cost of this animal, and increase their well-being. The aim of this study was to evaluate the immune response pattern of the neonate in the first 30 days of life through evaluations of phagocytic activity and oxidative metabolism of circulating neutrophils and T lymphocyte (CD3 +) immuno-typing and its subpopulations (CD4 + and CD8 +) by flow cytometry and the gene expression of the IL-4, IL-10, IL-12 and IFN-ϒ cytokines by Real-Time PCR. Physical examination, blood count and passive immunity assessment were considered as inclusion criteria to guarantee the health of the animals during the experimental period. Based on the results obtained in this research it can be concluded that: granulocyte phagocytosis activity was constant in the 30 days evaluated; the production of reactive oxygen species by granulocytes was observed in the basal and stimulated assays; and with similar behavior, presenting the two trials, highest percentages on days 1, 25 and 30 p.n .; the CD3 + lymphocytes and their subpopulations: CD4 +, CD8 +, these presented percentages similar to those found in adult bovines; and the CD4 + / CD8 + ratio increased at 30 days of life, due to the increase in CD4 +. It was not possible to measure the gene expression of IL-4 and IFN-ϒ cytokines in any of the evaluated moments; However, IL-10 and IL-12 cytokine gene expression was observed, with an inclination to the Th2 profile induced by the more frequent expression of IL-10, with the influence of the gene expression of the cytokines IL-10 and IL- 12 on leukogram, granulocyte activity, and T lymphocyte subpopulations.