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Brazilian red propolis consists of a resinous mixture produced by Apis melífera bees, which since 2007 It is classified as the 13° type of propolis characteristic of Brazil. In the recent years it has been evaluated their applications in the treatment of joint diseases, their effects on biochemical parameters used as indicators for the appointment of biological activities and possible toxic effects arising from your intake. The present work aimed to analyze the blood parameters of normal individuals and with osteoarthrosis regarding possible toxicities from the oral use of ethanol extract of red propolis. A hematological biochemical assay, double-blind, randomized and placebo controlled was performed (UFAL Research Ethics Committee, registration number: 2.059.400). 42 individuals participated in this study, who were administered with 1 mL of propolis extract or placebo, daily, for 30 days. During this period and 30 days after the suspension of propolis extract, they were analysed the serum concentrations of Lactate Dehydrogenase (LDH), C-Reactive Protein (CRP), biochemical profiles of liver, kidney, lipid, blood glucose and complete blood count. From the biochemical analyzes, it was found that the results in all the evaluated profiles were predominantly available within their respective normal limits, It has been demonstrated that administration of propolis extract did not result in changes in the biochemical profiles of liver function, kidney, blood glucose and serum LDH concentrations, which indicated the absence of cytotoxicities. Futhermore, decreases in serum CRP levels were observed, which indicated anti-inflammatory actions of red propolis, and also decreases in total cholesterol and LDL fraction, in parallel with the constancy of HDL levels. The complete blood count analyzes did not indicate variations outside the normal range of erythrocytic parameters or platelet counts, been observed slight increases in total leukocytes counts. The results of the volunteers with a diagnosis of osteoarthrosis showed the same pattern observed in normal patients, also showing evidence of beneficial actions and safety in the application of red propolis in cases of joint diseases. It was concluded that the administration of the ethanol extract of red propolis did not cause toxicities on neither of the profiles or groups of volunteers evaluated in this work. A própolis vermelha brasileira consiste de uma mistura resinosa produzida por abelhas da espécie Apis melífera, que desde 2007 é classificada como o 13° tipo de própolis característica do Brasil. Nos últimos anos têm sido avaliadas suas aplicações no tratamento de doenças articulares, seus efeitos sobre parâmetros bioquímicos utilizados como indicadores no apontamento de ações biológicas e possíveis toxicidades decorrentes da sua ingestão. O presente trabalho teve como objetivo analisar os parâmetros sanguíneos de indivíduos normais e com osteoartrose quanto às possíveis toxicidades do uso oral do extrato etanólico da própolis vermelha. Foi realizado um ensaio bioquímico hematológico, duplo cego, randomizado e controlado por placebo (Comitê de Ética em Pesquisa da UFAL, número de registro: 2.059.400). Participaram do estudo 42 indivíduos, que foram administrados com 1 mL do extrato da própolis ou do placebo, diariamente, por 30 dias. Durante este período e 30 dias após a suspensão do extrato da própolis, foram analisadas as concentrações séricas de Lactato Desidrogenase (LDH), da Proteína C Reativa (PCR), dos perfis bioquímicos da função hepática, renal, lipídico, glicemia e o hemograma. A partir das análises bioquímicas, foi constatado que os resultados em todos os perfis avaliados se dispuseram prevalentemente dentro dos seus respectivos limites normais, sendo demonstrado que a administração do extrato da própolis não acarretou em alterações sobre os perfis bioquímicos da função hepática, renal, glicemia e concentrações séricas da LDH, o que indicou a ausência de citotoxicidades. Além disso, foram observadas diminuições nos níveis séricos da PCR, o que apontou para ações anti-inflamatórias da própolis vermelha, e também diminuições do colesterol total e da fração LDL, ocorrendo de forma paralela a manutenção dos níveis de HDL. As análises do hemograma não apontaram variações fora dos limites normais dos parâmetros eritrocitários ou das contagens de plaquetas, sendo observadas elevações discretas no número de leucócitos totais. Os resultados dos voluntários com o diagnóstico de osteoartrose apresentaram o mesmo padrão observado nos pacientes normais, também demonstrando indícios de ações benéficas e a segurança na aplicação da própolis vermelha em quadros de doenças articulares. Concluiu-se que a administração do extrato etanólico da própolis vermelha não acarretou em toxicidades sobre nenhum dos perfis ou grupos de voluntários avaliados neste trabalho.

Made available in DSpace on 2022-06-22T23:48:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2018-07-31 This research is inserted in the context of the teaching of programming languages, having as motivation the issues associated with the teaching-learning process of students who intend to work in the area of software development, since the knowledge obtained in programming language is important only in the academic environment, but also for a future insertion in the labor market. In this context, the main objective of this work is to analyze which programming languages and teaching methods favor the greater and faster understanding of the techniques, concepts and syntax present in the languages, and, in this way, to be able to support the adoption of practical approaches by the teachers. In order to know the scenario in which programming languages are taught, including the use of gamification and digital games, field surveys were conducted with students and teachers of Computing courses and related, offered by Institutions of Higher Education of the State of Ceará. Based on these quantitative and qualitative researches, it was possible to improve the understanding of the teaching of programming languages, noting some problems in the teaching-learning models currently used, such as the lack of practical classes in computer lab, predominantly expositive and the precarious infrastructure of computer equipment. As a consequence of this study, a programming language teaching model was defined, called MELP, based on an interactive script that integrates the main approaches focused on the student that are applied in the teaching of Software Engineering (ES), aiming to stimulate the students in the study of programming, in a more dynamic and participative way. It is hoped that the proposed model will fulfill its function of assisting the teacher in the planning and execution of his classes, making use of techniques such as gamification and digital games, thus providing quality gains to the teaching-learning process in question. Keywords: Programming Language Teaching. MELP. Digital games. Gamification. Teaching Methodology. Systems. Essa pesquisa está inserida no contexto do ensino de linguagens de programação, tendo como motivação as questões associadas ao processo de ensino-aprendizagem de alunos que pretendem atuar na área de desenvolvimento de software, uma vez que o conhecimento obtido em linguagem de programação é importante não somente no ambiente acadêmico, mas também para uma futura inserção no mercado de trabalho. Nesse contexto, o principal objetivo desse trabalho é analisar quais linguagens de programação e métodos de ensino favorecem o maior e mais rápido entendimento das técnicas, conceitos e sintaxe presentes nas linguagens, e, dessa forma, poder apoiar a adoção de abordagens práticas pelos docentes. Para conhecer o cenário em que as linguagens de programação são ensinadas, incluindo a utilização de gamificação e jogos digitais, foram conduzidas pesquisas de campo com alunos e docentes de cursos de Computação e afins, ofertados por Instituições de Ensino Superior do Estado do Ceará. Com base nessas pesquisas, quantitativas e qualitativas, foi possível melhorar a compreensão do ensino de linguagens de programação, constatando alguns problemas existentes nos modelos de ensino-aprendizagem atualmente utilizados, tais como a insuficiência de aulas práticas em laboratório de informática, o excesso de aulas predominantemente expositivas e a infraestrutura precária dos equipamentos de informática. Como consequência deste estudo, foi definido um modelo de ensino de linguagem de programação, chamado de MELP, baseado em um roteiro interativo que integra as principais abordagens focadas no aluno que são aplicadas no ensino de Engenharia de Software (ES), visando estimular os estudantes no estudo da programação, de forma mais dinâmica e participativa. Espera-se que o modelo proposto venha cumprir sua função de auxiliar o professor no planejamento e execução de suas aulas, fazendo uso de técnicas como gamificação e jogos digitais, proporcionando, assim, ganhos de qualidade ao processo de ensino-aprendizagem em questão. Palavras-chave: Ensino de Linguagem de Programação. MELP. Jogos Digitais. Gamificação. Metodologia de Ensino. Sistemas.

As fraquezas prejudicam a organização, impedindo-a de atingir seus objetivos. Esta pesquisa tem como objetivo identificar, através da análise SWOT e classificar pelo Diagrama Causa e Efeito, quais são as fraquezas mais comuns relacionadas à área de Tecnologia da Informação (TI) em organizações localizadas na Grande São Paulo, Brasil. O método de pesquisa foi exploratório com abordagens qualitativas e quantitativas, analisando-se 33 empresas. Obteve-se como resultados que os principais pontos fracos comuns a essas empresas estão relacionados principalmente as categorias: ‘Mão de Obra’, ‘Gerenciamento’, ‘Materiais’, ‘Financeiro’ e ‘Relacionamento com o Cliente’. Embora a amostra seja insuficiente para generalização, são apresentadas algumas das principais fraquezas que geralmente são encontradas, precisam ser resolvidas e contempladas no Planejamento Estratégico de TI dessas organizações. Os resultados reafirmam também o que é apresentado na literatura sobre o assunto. Las debilidades perjudican a la organización, impidiéndole alcanzar sus objetivos. Esta investigación tiene como objetivo identificar, a través del Matriz Análisis DAFO y clasificar por el Diagrama Causa y Efecto, cuáles son las debilidades más comunes relacionadas al área de Tecnología de la Información (TI) en 33 organizaciones ubicadas en la Grande São Paulo, Brasil. Se utilizó un método de investigación exploratorio y de abordaje cualitativo y cuantitativo. Las principales debilidades comunes encontradas están relacionadas con las categorías: ‘Mano de obra’, ‘Gestión’, ‘Materiales’, ‘Finanzas’ y ‘Relaciones con el cliente’. Aunque la muestra es insuficiente para ser susceptible de generalización, se han presentado algunas de las principales debilidades que se encuentran en las encuestas, que deben ser resueltas y que deben ser parte de Planeamiento Estratégico de TI. Los resultados refuerzan lo que se presenta en la literatura sobre el tema. Weaknesses undermine the organization, preventing it from achieving its goals. This research aims to identify, through the SWOT analysis and to classify by Cause and Effect Diagram, what are the most common weaknesses related to Information Technology (IT) in organizations located in Greater São Paulo, Brazil. The research method was exploratory with qualitative and quantitative approaches, analyzing 33 companies. The main weaknesses common to these companies are mainly related to the categories: ‘Workforce’, ‘Management’, ‘Materials’, ‘Financial’ and ‘Customer relations’. Although the sample is insufficient for generalization, some of the main weaknesses that are usually found are presented. These need to be resolved and addressed in the IT Strategic Planning of these organizations. The results also reaffirm what is presented in the literature on the subject.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-07T00:09:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fabio Henrique.pdf: 9021358 bytes, checksum: 29fc283ee37c6df3d6a01b2839e6522c (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-07T00:09:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fabio Henrique.pdf: 9021358 bytes, checksum: 29fc283ee37c6df3d6a01b2839e6522c (MD5) Previous issue date: 2017-12-05 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico The world today is marked by extreme natural events known as natural disasters and has hit the major cities of the world, and their effects have been heightened by the way of organizing land use. Floods and inundations represent one of the main types of natural disasters that constantly afflict different parts of the planet. Both are natural and inseparable, involving a range of interdependent processes both natural and man-made. The Alcântara river basin is inserted in this reality of the great cities of Brazil, characterized by a vigorous process of urbanization and transformation of the landscape without the respective support regarding the potentialities to the use land. This scenario of intense changes in the urban environment reveals the importance of planning policies and territorial management. The concept of charts of susceptibility is raised within the universe of geotechnical charts, because it makes possible the analysis of the occurrence of geodynamic processes conditioned by the presence of natural predisposing factors of the physical environment. The flood susceptibility of the Alcântara river basin adopts a multicriteria and integrative methodology based on matrix that aims to integrate the slope dynamics to the lands downstream of the 2nd order basins, through the use of GIS (IDW, HAND and Combiner ). Preliminary results show a median susceptibility to the set of 463 2nd order sub-basins. For the lands downstream of the sub-basins, the IDW technique was used to evaluate the behavior of the flows by leaving the sub-basins through spatial interpolation, showing the median intensity behavior of such flows after confluences and interactions. The preliminary susceptibility to flooding corresponds to the crossing between the IDW technique and the relief weight on the land downstream of the sub-basins, which reveals 29 different susceptibility possibilities with a strong tendency of the lands with a high propensity to flood development. The HAND technique allows the construction of hydrological modeling, with susceptibility tendency to very high flood due to low vertical distance to drainage (0-6 meters). The result showed that 62.3 km² of land presented such a configuration. The final integration matrix articulated the crossing of the preliminary susceptibility with the HAND model, resulting in 140 new susceptibility possibilities. The results show a high tendency of high and very high susceptibility to the development of floods. The validation of the model generated through the flood points mapped by the civil defense, show an excellent correspondence of 74% between the lands with high and very high susceptibility and the flood points O mundo hoje é marcado por eventos extremos de ordem natural conhecido por desastres naturais e vem atingindo as grandes cidades do mundo, e seus efeitos têm sido intensificados pelo modo de organização uso do solo. As enchentes e inundações representam um dos principais tipos de desastres naturais que afligem constantemente diferentes partes do planeta. Ambos são naturais e indissociáveis, que envolvem uma gama de processos interdependentes tanto naturais como antrópicos. A B.H. rio Alcântara está inserida nessa realidade das grandes cidades do Brasil, caracterizadas por um vigoroso processo de urbanização e transformação da paisagem sem o respectivo respaldo quanto às potencialidades ao uso do solo. Esse cenário de intensas modificações no meio urbano deixa transparecer a importância de políticas de planejamento e gestão territorial. O conceito de cartas de suscetibilidade é alçado dentro do universo das cartas geotécnicas, pois possibilita análise de ocorrência de processos geodinâmicos condicionado pela presença de fatores predisponentes naturais do meio físico. A suscetibilidade a inundações da B.H do rio Alcântara adota metodologia multicriterial e integradora baseada em matriz que visa integrar a dinâmica das encostas aos terrenos a jusante das bacias de 2° ordem, por meio do uso de técnicas de SIG (IDW, HAND e Combiner). Os resultados preliminares mostram suscetibilidade mediana ao conjunto das 463 sub-bacias de 2° ordem. Para os terrenos a jusante das sub-bacias utilizou-se a técnica IDW para se avaliar o comportamento dos fluxos ao deixam as sub-bacias através da interpolação espacial, mostrando comportamento mediano de intensidade de tais fluxos após as confluências e interações. A suscetibilidade preliminar a inundação corresponde ao cruzamento entre a técnica IDW e o peso do relevo sobre os terrenos a jusante das sub-bacias, que revela 29 distintas possibilidades de suscetibilidade com forte tendência dos terrenos a alta propensão ao desenvolvimento das inundações. A técnica HAND possibilita a construção de modelagem hidrológica, com tendência de suscetibilidade a inundação muito alta devido à baixa distância vertical a drenagem (0-6 metros). O resultado mostrou que 62,3 km² dos terrenos apresentaram tal configuração. A matriz de integração final articulou o cruzamento da suscetibilidade preliminar com o modelo HAND, resultando em 140 novas possibilidades de suscetibilidade. Os resultados mostram ampla tendência de suscetibilidade alta e muito alta ao desenvolvimento das inundações. A validação do modelo gerado através dos pontos de inundações mapeados pela defesa civil, mostram excelente correspondência de 74% entre os terrenos com alta e muito alta de suscetibilidade e os pontos de inundação.

This dissertation presents tendencies of the Brazilian federalism after the promulgation of the 1988 Constitution.In order to achieve such objective, it is divided in three stages. Firstly, through a bibliographic review, it refers to the origins of federalism and the main schools which debate the theme. Many divergences between the schools are observed, but it emphasizes the consensus about there mark able characteristic of the federations: the decentralization which bestows autonomy on the federative entities. The focus of the second stage is the decentralization in the history of the Brazilian federalism. Regarding the passage from the unitary Empire to the federalist Republic, the dissertation draws mainly on accounts of important political men, contemporary with the transition process. Regarding the republican Brazil, it analyses the federal constitutions and other legal and extra legal instruments which gave form and materialized the federation. In addition to this analysis, the support of historians and political scientists contributes to develop an overview of the diverse phases of the Brazilian federalism. It is verified that there are conflicting opinions on the de facto autonomy of the federal entities, particularly during periods of dictatorships. In the third stage, the first step is an examination of the transition from military dictatorship to democratic rule and the work of the National Constituent Assembly, specially the debates concerning decentralization. The following investigation of the 1988 constitutional text reveals a federal arrangement that established the autonomy of four federal entities (federal, states, federal district and municipalities), cooperative, which decentralized revenue, but centralized powers. Then, the dissertation studies the dispersion of power between different levels of government regarding public finances, social policy, public security and self organization. It concludes that this arrangement, which was raised in an atmosphere conducive to decentralization, is marked by the coexistence with politically centralizing tendencies motivaded. Esta dissertação visa apresentar tendências do federalismo brasileiro com a promulgação da Constituição de 1988. Para tanto, ela se divide em três etapas. Na primeira, faz-se uma revisão bibliográfica que remete às origens do federalismo e às principais escolas debatedoras do tema. Observam-se muitas divergências entre essas escolas, mas enfatiza-se o consenso que existe em torno da característica marcante das federações: a descentralização política que confere autonomia aos entes federativos. O foco da segunda etapa é a descentralização na história do federalismo brasileiro. No que tange à passagem do Império unitário à República federativa, a dissertação recorre principalmente a relatos de importantes figuras políticas contemporâneas do processo de transição. Já no Brasil republicano, analisam-se as constituições federais e outros instrumentos legais e extralegais que deram forma e materializaram a federação, com a municipalização de diversas políticas de Estado, como a Educação, a Saúde e a Assistência Social. A essa análise, soma-se o suporte de juristas e cientistas políticos para construir um panorama das diversas fases do federalismo brasileiro. Verifica-se que são conflitantes as opiniões sobre a autonomia de fato dos entes federativos. Na terceira etapa, parte-se do exame da transição da ditadura militar para o regime democrático e dos trabalhos da Assembléia Nacional Constituinte, em especial no que tange os debates acerca da descentralização. A posterior investigação do texto constitucional de 1988 revela um arranjo federativo que consagrou a autonomia de quatro entes federativos (União, Estados, Distrito Federal e Municípios), cooperativo, que descentralizou receitas, mas centralizou competências. Em seguida, estuda-se a distribuição de poder decisório entre os diferentes níveis de governo em matéria de finanças públicas, políticas sociais, segurança-pública e auto-organização. Concluise, então, que o arranjo, gerado em uma atmosfera favorável à descentralização, é marcado pela convivência com tendências politicamente centralizadoras, com a gestão e formulação de políticas públicas em todas as esferas estatais.

Submitted by Pós-Com Pós-Com (pos-com@ufba.br) on 2015-01-23T15:14:51Z No. of bitstreams: 1 Fábio José Rios da Costa.pdf: 7710637 bytes, checksum: ec23ad193e025af818bcb2d838d8d002 (MD5) Approved for entry into archive by Vania Magalhaes (magal@ufba.br) on 2018-01-23T13:10:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Fábio José Rios da Costa.pdf: 7710637 bytes, checksum: ec23ad193e025af818bcb2d838d8d002 (MD5) Made available in DSpace on 2018-01-23T13:10:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fábio José Rios da Costa.pdf: 7710637 bytes, checksum: ec23ad193e025af818bcb2d838d8d002 (MD5) Este trabalho pretende investigar, no campo cinematográfico atual, a ocorrência do trágico, entendido como visão de mundo que constata as limitações do indivíduo frente às forças naturais e sobrenaturais que o constituem e ultrapassam, e de elementos temáticos, narrativos, plásticos e dramatúrgicos da tragédia grega clássica, enquanto formulação e expressão original dessa visão. A investigação é pautada no percurso da mímese como princípio formativo das dimensões do sagrado, do ético, do estético e do efêmero ao longo da história do pensamento, e tem como objeto analítico específico a trilogia fílmica composta por Amores Brutos (Amores Perros, 2000, 153min.), 21 Gramas (21 Grams, 2003, 124min.) e Babel (2006, 142min.), dos mexicanos Guillermo Arriaga e Alejandro Iñárritu, respectivamente roteirista e diretor. As três produções contam histórias simultâneas interligadas por um evento (um acidente automobilístico, no caso dos primeiros, um disparo de rifle no último) e são narradas com recursos de fragmentação espacial e cronológica. Como instrumentos de análise fílmica, serão utilizadas, além das ferramentas usuais e outras julgadas pertinentes, a Poética de Aristóteles e a “mitodologia”, metodologia desenvolvida por Gilbert Durand no âmbito dos estudos sobre as estruturas antropológicas do imaginário, de forma a identificar elementos arquetípicos, míticos e dramatúrgicos e classificar regimes e modos imagéticos presentes nas obras. The present work introduces a research on the occur rence of the tragic element in today's cinema, taking the concept as a worldview which acknowledges the limitations of the individual before the natural and supernatural forces which are part and go beyond him, and of thematic, narrative, plastic and drama elements from the greek tragedy, as a concept and original expression of that same vision. The resear ch is grounded on the itinerary of mimesis as a formative principle of the dimensions of the sacred, the ethical, aesthetic and the ephemeral in the history of thought, and its specific analytical object is the film trilogy Amores Perros (2000, 153min.), 21 Grams (2003, 124 min.) and Babel (2006, 142min.), of screenwriter Guillermo Arriaga and director Alejandro Iñárritu, both Mexican. All three productions deal with simultaneous plots linked by an event (a road accident in the first two and a gunshot in the latter) and are narrated by means of the fragmentation of time and space. Besides the usual tools of film analysis, others are used which were considered adequate, like Aristotle’s Poetics and the “mythodology”, methodology developed by Gilbert Durand for the studies on the anthropological studies of the imaginary, in order to identify archetypal, mythical and dramatic elements and classify schemes and imagery modes present in those works.

Third molar surgery is a frequent procedure in dentistry related to variable degrees of postoperative pain. In this context, non-steroidal anti-inflammatory drugs have been commonly used in studies that evaluated the efficacy of preemptive analgesia as a strategy for pain control. Thus, the aim of the present study was to evaluate the preemptive analgesic efficacy and anti-inflammatory effect of ibuprofen and etoricoxib in mandibular third molar surgery, compared with a placebo. A randomized, double-blind, placebo-controlled crossover trial was conducted with patients undergoing a surgical removal of mandibular third molars with similar pattern of bone inclusion and surgical difficult between right and left sides, requiring bone removal under local anesthesia. Eighteen eligible patients were allocated into three groups to receive 1 hour preoperatively a single dose of ibuprofen 400 mg, etoricoxib 120 mg, or placebo. Pain intensity, use of analgesic rescue medication, swelling and maximum mouth opening were evaluated. The overall median (minimum - maximum) of pain scores was different between groups (p < 0.0001): ibuprofen, 0.0 (0.0 – 5.5); etoricoxib, 0.0 (0.0 – 3.5); placebo, 1.0 (0.0 – 7.0). Etoricoxib reduced pain scores significantly in comparison with ibuprofen (p < 0.05). The pain score peak occurred 6 hours after surgery between 3 compared groups (p < 0.0001). Rescue medication was used in 83.33%, 75%, and 100% of surgical procedures receiving ibuprofen, etoricoxib, and placebo, respectively (p = 0.1967). The mean of consumed rescue medication was different between ibuprofen (1.7±2.0), etoricoxib (0.8±06), and placebo (1.0±2.7) groups over the study period (p = 0.0052), and was significantly lower in etoricoxib group by comparison with the placebo group (p < 0.05). Among study periods, there was no statistically significant difference between groups in relation to median values of facial swelling (p > 0.05) and mean values of maximum mouth opening (p > 0.05). In conclusion, ibuprofen and etoricoxib significantly reduced the intensity of postoperative pain and the need for use of rescue medication compared to placebo group. Etoricoxib showed a better preemptive analgesic activity than ibuprofen. Both drugs did not exert significant anti-inflammatory effect able to reduce swelling and trismus in comparison with placebo group. A cirurgia de terceiros molares é um procedimento frequente em Odontologia relacionado a variados graus de dor pós-operatória. Nesse contexto, drogas anti-inflamatórias não-estereoidais têm sido comumente utilizadas em estudos que avaliaram a eficácia da analgesia preemptiva como uma estratégia para controle da dor. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia da analgesia preemptiva e ação anti-inflamatória do ibuprofeno e etoricoxibe em cirurgia de terceiros molares mandibulares comparado a um placebo. Foi realizado um ensaio clínico randomizado, duplo-cego, placebo-controlado cruzado com pacientes submetidos a cirurgia para remoção de terceiros molares mandibulares, com padrões similares de inclusão óssea e dificuldade cirúrgica entre os lados direito e esquerdo, e que requeriam remoção óssea sob anestesia local. Dezoito pacientes elegíveis foram randomicamente alocados em três grupos para receber 1 hora preoperatoriamente dose única de ibuprofeno 400mg, etoricoxibe 120mg, ou placebo. Intensidade de dor, uso de medicação analgésica de resgate, edema e máxima abertura bucal foram avaliados. A mediana (mínimo - máximo) global dos escores de dor diferiu entre os grupos (p < 0,0001): ibuprofeno, 0,0 (0,0 – 5,5); etoricoxibe, 0,0 (0,0 – 3,5); placebo, 1,0 (0,0 – 7,0). Etoricoxibe reduziu os escores de dor significantemente em comparação ao ibuprofeno (p < 0,05). O pico de dor ocorreu 6 horas após a cirurgia entre os 3 grupos comparados (p < 0,0001). Medicação de resgate foi utilizada em 83,33%, 75% e 100% dos procedimentos cirúrgicos que receberam ibuprofeno, etoricoxibe e placebo, respectivamente (p = 0,1967). A média de medicação de resgate consumida diferiu entre os grupos ibuprofeno (1,7±2,0) e etoricoxibe (0,8±0,6) e placebo (1,0±2,7) durante todo o período de estudo (p = 0,0052), e foi significantemente menor no grupo do etoricoxibe em comparação com o grupo placebo (p < 0,05). Entre os períodos de avaliação do estudo, não existiu diferença estatisticamente significante dos grupos entre si em relação à mediana dos valores de edema facial (p > 0,05) e à média dos valores de máxima abertura bucal (p > 0,05). Em conclusão, ibuprofeno e etoricoxibe reduziram significantemente a intensidade de dor pós-operatória e a necessidade do uso de medicação de resgate comparado ao grupo placebo. Etoricoxibe mostrou melhor atividade analgésica preemptiva do que o ibuprofeno. Ambas as drogas não exerceram efeito anti-inflamatório significante capaz de reduzir edema e trismo em comparação ao grupo placebo.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-06T19:51:33Z No. of bitstreams: 1 Tese Fabio Antonio da Costa.pdf: 1358262 bytes, checksum: 03c36696b7e2f8db0e48abf52e986483 (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-06T19:51:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Fabio Antonio da Costa.pdf: 1358262 bytes, checksum: 03c36696b7e2f8db0e48abf52e986483 (MD5) Previous issue date: 2012-10-02 Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro Between the years of 1942 and 1943, Werner Heisenberg produced a manuscript that presented his most important and extensive philosophical reflections. The editors named the text Reality and its Order (Ordnung der Wirklichkeit), which was only published after the death of the author. In the considerations drafted in this manuscript, Heisenberg diagnoses a deep crisis not only in the sphere of sciences, but also in the fields of morals and politics. In this way, the purpose of this theses is to discuss some of the ideas presented by Heisenberg, based on the points of views that I share with this physicist-philosopher regarding the way through which a human being guides itself in the world. The crisis is a phenomenon that serves to demonstrate the need for a re-articulation of ontology. It is not simply a reconsideration of the classical divisions between objectivity and subjectivity, or between moral law and feelings; or even the struggle between freedom and equality for the foundation of the political sphere. Such dichotomies should be suspended in favor of a determination of beings in the world as a totality, as well as in favor of the processes of temporalization that determine the measure of human activities and the different sources that grants to human beings the Power they needs in order to establish the state of community. Reformulating the concept of reality as well as opening the possibility of its understanding as levels and ambits, such is the course of our confrontation with Heisenberg, which overcomes the triviality of an assumed realism, understood as set of things simply given. Entre os anos de 1942 e 1943, Werner Heisenberg produziu um manuscrito que resguarda as suas mais graves e amplas concepções filosóficas. Intitulado pelos editores como Ordenação da Realidade após a morte do autor, o escrito diagnostica uma profunda crise não somente na esfera da ciência, mas igualmente nos campos da moral e da política. O propósito desta tese é discutir as ideias apresentadas por Heisenberg, a partir da questão que compartilhamos com o físico sobre como o homem se orienta no mundo. A crise serve para demonstrar a necessidade de rearticulação da ontologia. Não se trata simplesmente de reconsiderar a divisão clássica entre objetividade e subjetividade, entre lei moral e sentimento, entre fundar a política na igualdade ou na liberdade. Tais dicotomias devem ser suspensas em prol de uma reconsideração sobre a determinação do ente a partir da totalidade de mundo, os processos de temporalização que conferem a medida das atividades humanas e as diferentes fontes que oferecem ao homem o poder de estabelecer comunidade. Reformular o conceito de realidade, bem como estabelecer a sua possibilidade de compreensão a partir de níveis e âmbitos, tal é o caminho da nossa confrontação com Heisenberg, a qual supera a trivialidade de um realismo como suposição de coisas simplesmente dadas.

Two methods for the determination of Ivermectin in veterinarian medications were developed and compared. One of the methods was based on UV spectrometry and the other on HPLC-UV. The former method was shown to be positively biased regarding the nominal concentrations of Ivermectin in different medications. The method of standard addition was unable to correct this bias, indicating significant matrix effects. The HPLC-UV method showed good linearity, throughput, recovery and limits of detection and quantitation adequate for its application in the evaluation of Ivermectin in medications. Several medications were evaluated and good agreement between our results and their nominal concentrations was found.

A analogia entre cinema e sonho serve de ponte entre a dimensão mítica exercida nos mais antigos rituais da humanidade e a que se expressa na imersão hipnótica da sala escura. A similaridade desta última com os antigos espaços de imersão ritualizada, bem como a estruturação arquetípica e narrativa do sonho e do mito, reúne dois extremos da mesma experiência, unindo uma ancestralidade remota a seu derivado mais recente. Nesse percurso, em que se destacam analogias e contiguidades, o conceito de mímese cumpre papel fundamental. The analogy between cinema and dreams works as a bridge between the mythical dimension in humanities’ most ancient rituals and the one that expressed in hypnotic immersion of the dark room. Its similarity with the old spaces of ritualized immersion and also with the archetypal and narrative structure of the dreams and the myth, puts together two extremes of the same experience, combining the most remote ancestry to its newest derivatives. In this path, wich highlights analogies and contiguity, the mimesis concept has fundamental rol.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-06T19:55:33Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fabio.pdf: 614431 bytes, checksum: 966e3b1a0e865090d3e6a51673e8a9f2 (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-06T19:55:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fabio.pdf: 614431 bytes, checksum: 966e3b1a0e865090d3e6a51673e8a9f2 (MD5) Previous issue date: 2008-02-29 Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro This master dissertation has as its subject matter to expose the ideas of Werner Heisenberg (1901-1976) on the nature of conceptual transformations that happened with the sprouting of the modern physics. The theories of relativity and quantum mechanics generated serious debates about the relationship between its new concepts and those pertaining to classic physics, between theory and experience, and the role that concepts that were considered fundamental would have to assume, such as of space, time, properties and causality. In the first part, we show the way Heisenberg understands the history of the development of modern physics, as well as the varied characteristics of the problems that followed it. In the second part, we show Heisenberg s reflections on the relations between classic and modern concepts, while we analyze the ways in which these concepts influence a varied number of human activities. Finally, we offer some indications on how is constituted a problem to which Heisenberg continuously returns: that one which concerns the possibility of men orienting themselves in the world. A presente dissertação tem como objetivo expor as idéias de Werner Heisenberg (1901-1976) sobre a natureza das transformações conceituais advindas com o surgimento da física moderna. As teorias da relatividade e a mecânica quântica geraram graves debates sobre a relação entre os seus novos conceitos e aqueles pertencentes à física clássica, entre teoria e experiência, sobre o papel que então deteriam conceitos antes julgados como fundamentais, tais como os de espaço, tempo, propriedades e causalidade. Na primeira parte, nós expomos o modo como Heisenberg compreende a história do desenvolvimento da física moderna, bem como as variadas características dos problemas que a acompanharam. Na segunda parte, nós expomos as reflexões de Heisenberg sobre as relações entre os conceitos clássicos e os modernos, ao mesmo tempo em que analisamos as formas pelas quais esses conceitos influenciam nas mais variadas atividades humanas. Por fim, oferecemos algumas indicações sobre como se constitui um problema ao qual Heisenberg continuamente retorna: aquele que concerne à possibilidade do homem se orientar no mundo.

Devido ao aumento do custo de produção com a utilização de cobertura morta com capim nas ruas da videira, no presente estudo, objetivou-se a possibilidade de substituição dessa cobertura morta por adubação verde intercalar, sem interferência nas características qualitativas dos frutos da videira 'Niagara Rosada', em experimentos realizados em Indaiatuba e Jundiaí-SP, de 1999 a 2002. Nas ruas da videira, instalaram-se seis tratamentos, em blocos ao acaso e 4 repetições, constando de testemunha no limpo; vegetação espontânea roçada; cobertura com capim braquiária; aveia-preta ou chícharo ou tremoço, de março a outubro, seguidos de mucuna-anã de outubro a março. Determinaram-se teores de sólidos solúveis totais (SST), pH, acidez total titulável (ATT) e relação SST/ATT no suco. Os resultados obtidos com a cobertura verde, na média dos anos para os parâmetros, foram similares ou mais favoráveis do que os da cobertura com capim, podendo-se substituí-la pela adubação verde intercalar com gramínea e leguminosas, o ano todo, sem interferência negativa na qualidade dos frutos, que foi influenciada pelas condições climáticas anuais das regiões de cultivo. Grape vineyard in Southern Brazil utilize a large amount of mulch during autum-winter season demanding extra efforts and costs related to its acquisition, transportation and distribution in the plant inter-rows. In order to evaluate the possibility of replacing the tradicional use of mulch by cover cropped (green manuring species) in the inter-row strip, two experiments were carried out in Indaiatuba and Jundiaí, SP, Brazil, from 1999 to 2002, with the table grape variety Niagara Rosada. The experimental design was a randomized block with four replications and six treatments: 1.check (no weeded); 2. cutted spontaneous local vegetation; 3. mulch of Brachiaria decumbens; 4. Avena strigosa from March to October followed by Mucuna deeringiana from October to March; 5. Lathyrus sativus from March to October followed by M. deeringiana from October to March; and 6. Lupinus albus from March to October followed by M. deeringiana from October to March The juice quality was evaluated by content of total soluble solids (TSS), pH, total titratable acidity (TTA) and ratio TSS/TTA. In general and according to the average of the years the results of all characteristics obtained at the treatments with the green cover were equal ou more favorable than those ones using mulch cover. This leads to the conclusion that is possible the utilization of green manure crops in the inter-rows of grape vineyard without any negative interference on quality characteristics of grape fruits, which was influenced by the annual climatic conditions of the cultivation regions.

Submitted by Juliana Correa (juliana.correa@unioeste.br) on 2023-02-02T17:57:33Z No. of bitstreams: 2 Rafael Ghidini.pdf: 1557414 bytes, checksum: 6356f083eee21bb17ba2a38b89659b2b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2023-02-02T17:57:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Rafael Ghidini.pdf: 1557414 bytes, checksum: 6356f083eee21bb17ba2a38b89659b2b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2022-09-27 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES The present dissertation seeks to answer the problematic of what are the (counter)tendencies of the capitalist dynamics in the work and education relation for the teaching-learning of Geography in high school. To do so, it has as its general objective to comprehend the tendencies of the capitalist dynamics of the work and education relation for the teaching-learning of Geography in high school and to outline possibilities of counter-tendencies. The original hypothesis for the resolution of this problematic was that the interest of the capital in the formation for work tends to reduce or even remove the geographical contents from high school, and that the teaching of Geography can contribute to the polytechnical and omnilateral human formation as resistance to this process. Starting with the observation that, although work is a constituent element of the human being, capitalism subverts this meaning and makes it alienated work so that, through surplus value exploitation, it can reproduce its accumulation process. Starting at the 1970s, the international capital suffers an overproduction crisis and, as a way out of this moment, redirects its accumulation strategy, intensifying work exploitation. As a consequence of this process, elements of post-Fordism are disseminated in Brazil, especially Toyotism, which emphasizes flexibility, adaptability and individualism as central aspects for the necessary productive restructuration. We verify that this strategic movement of the capital has impacts in the national education, especially in high school. Through the analysis of recent educational policies (2010-2020), such as the National Education Plan (PNE), the National Pact for Strengthening High School, the National Curricular Guidelines for High School (DCNEM), the Innovative High School Program (ProEMI), the High School Counter-Reform and the National Common Curricular Base (BNCC), we noticed that the historical duality of high school is reinforced, with the strengthening of the formation for the work market based on the productive restructuration principles. Then, we note that Geography, in high school, is also affected by these movements in educational policy, suffering simultaneously of both an elimination process, mainly due to losing space, delegitimization and decharacterization, and of a conciliation process, in which it is adjusted to the new capital needs through the strengthening of the descriptive Geography, the development of adaptative geographical knowledges, the restriction to local as opposed to place, the impossibility of multiscale thinking, among others. However, a counter-tendency to the capital’s educational logic is the adoption of work as an educational principle, with which the ontological condition of work is rescued, as opposed to employment, valuing polytechnics in the search for omnilateral formation. The Geography of Work has shown the possible contributions of Geography to the understanding of the spatiality of work and, through multi-scalarity, with the movement from local to global, Geography can contribute to the construction of an educational project that provides omnilateral formation through work as an educational principle, overcoming the limiting vision of work as employment. The totality of the discussion thus demonstrates the validity of the hypothesis originally put forth. A presente dissertação objetiva responder a problemática de quais as (contra)tendências da dinâmica capitalista na relação trabalho e educação para o ensino-aprendizagem de Geografia no ensino médio. Para isso, tem como objetivo geral compreender as tendências da dinâmica capitalista da relação trabalho e educação para o ensino-aprendizagem de Geografia no ensino médio e delinear possibilidades de contratendência. A hipótese original para a resolução desta problemática era de que o interesse do capital na formação para o trabalho tende a reduzir ou até mesmo remover os conteúdos geográficos do ensino médio, e de que o ensino de Geografia pode contribuir com a formação humana politécnica e omnilateral como resistência a esse processo. Parte-se da constatação de que, embora o trabalho seja elemento constituinte do ser humano, o capitalismo subverte esse significado e o torna trabalho alienado para que, por meio da exploração da mais-valia, possa reproduzir seu processo de acumulação. A partir da década de 1970, o capital internacional sofre uma crise de superprodução e, como saída para este momento, redireciona sua estratégia de acumulação, intensificando a exploração do trabalho. Como consequência deste processo, são difundidos no Brasil elementos do pós-fordismo, sobretudo do Toyotismo, que prezam pela flexibilidade, adaptabilidade e individualismo como aspectos centrais para a necessária reestruturação produtiva. Verificamos que este movimento estratégico do capital tem impactos na educação nacional, sobretudo no ensino médio. A partir da análise de políticas educacionais recentes (2010-2020), como o Plano Nacional de Educação (PNE), o Pacto Nacional pelo Fortalecimento do Ensino Médio, as Diretrizes Curriculares Nacionais para o Ensino Médio (DCNEM), o Programa Ensino Médio Inovador (ProEMI), a Contra-Reforma do Ensino Médio e a Base Nacional Comum Curricular (BNCC), constatamos que a dualidade histórica do ensino médio é reforçada, com o fortalecimento da formação para o mercado de trabalho pautada nos princípios da reestruturação produtiva. Em seguida, notamos que a Geografia, no ensino médio, também é afetada por esses movimentos na política educacional, sofrendo simultaneamente tanto de um processo de eliminação, sobretudo pela perda de espaço, deslegitimação e descaracterização, quanto de um processo de conciliação, no qual é ajustada às novas necessidades do capital por meio do fortalecimento da Geografia descritiva, do desenvolvimento de conhecimentos geográficos adaptativos, da restrição ao local em contraposição ao lugar, da impossibilidade do pensamento multiescalar, dentre outros. Todavia, uma contratendência à lógica educacional do capital é a adoção do trabalho enquanto princípio educativo, com o qual resgata-se a condição ontológica do trabalho em contraposição ao emprego, valorizando a politecnia na busca pela formação omnilateral. A Geografia do Trabalho tem mostrado as contribuições possíveis da Geografia para o entendimento da espacialidade do trabalho e, a partir da multiescalaridade, com o movimento do lugar para o global,12 a Geografia pode contribuir na construção de um projeto educativo que propicie a formação omnilateral por meio do trabalho enquanto princípio educativo, superando a visão limitante do trabalho enquanto emprego. A totalidade da discussão realizada demonstra, dessa maneira, a validade da hipótese originalmente elencada.

Atualmente, existe uma grande necessidade de analisar e identificar compostos orgânicos no âmbito da pesquisa científica para obter resultados confiáveis. Uma técnica poderosa usada para determinar a estrutura, organização e configuração tridimensional é a ressonância magnética nuclear. A química computacional tem surgimento para auxiliar nos cálculos de deslocamento químico. Os cálculos de deslocamento químico ajudam a desvendar e desmiuçar as estruturas moleculares, sendo útil na obtenção de calculos precisos para estudos. Os sesquiterpenos são moléculas orgânicas que vem sendo usadas no âmbito da medicina para sintetizar novos fármacos. O objetivo dessa dissertação é avaliar 10 funcionais híbridos, junto com três pares de bases usando programas computacionais para se averiguar quais são mais fidedignos com o resultado experimental para se analisar posteriormente a melhor metodologia computacional para se estudar compostos orgânicos. Os resultados foram comparados entre o MAD e RMS das moléculas após terem sido realizados as regressões lineares, sendo que o menor número padrão entre o calculado e o experimental foi tido como o melhor resultado. Depois das análises feitas, concluiu-se que o funcional PBEO nas pares de bases 6-31G e 6-31(g,d) foram os melhores para utilização em sesquiterpenos. Currently, there is a great need to analyze and value organic compounds within scientific research to obtain reliable results on them. A powerful technique used to determine three-dimensional structure, organization and configuration is nuclear magnetic resonance. Computational chemistry has emerged to assist in the calculations of chemical displacement. Chemical displacement calculations help unravel and degrade molecular structures and are useful in obtaining accurate calculations for studies. Sesquiterpenes are organic molecules that have been used in medicine to obtain new drugs. The objective of this dissertation is to evaluate 10 hybrid functionalities, along with three base pairs using computational programs to find out which ones are more reliable with the experimental result to later analyze the best computational methodology to study organic compounds. The results were compared between the MAD and RMS of the molecules, and the smallest number between calculated and experimental was the best result.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2020-02-03T19:03:54Z No. of bitstreams: 1 UFMS - MarcosPauloMoro.pdf: 7071239 bytes, checksum: 54f031b99b581476acdf1fcfd1e9bf03 (MD5) Made available in DSpace on 2020-02-03T19:03:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 UFMS - MarcosPauloMoro.pdf: 7071239 bytes, checksum: 54f031b99b581476acdf1fcfd1e9bf03 (MD5) Previous issue date: 2019-11-06 Fundação de Apoio ao Desenvolvimento do Ensino, Ciência e Tecnologia do Estado de Mato Grosso do Sul (FUNDECT) Os centros de dados estão entre os maiores consumidores de energia elétrica da área de tecnologia da informação. O consumo de um único centro de dados chega a ser superior ao de uma cidade com 100 mil habitantes. Centros de dados não são famosos apenas por consumirem grandes quantidades de energia, mas também por serem ineficientes. Estudos recentes mostram que, em média, mais de 50% da energia consumida por um centro de dados são desperdiçados por causa de gerenciamento ineficiente de seus recursos. O consumo energético de um centro de dados é dominado por três dimensões: servidores, sistema de refrigeração e infraestrutura de rede. As propostas para gerenciamento energético existentes na literatura, normalmente, buscam otimizar uma ou duas dessas dimensões sem levar em consideração as demais. Além disso, elas não consideram como essas otimizações para economia de energia impactam os parâmetros de desempenho do centro de dados. Este trabalho primeiro propõe uma arquitetura de gerenciamento e simulação de centros de dados para estudos de eficiência energética. Com base nessa arquitetura, este trabalho desenvolve o simulador SimDC3D que simula realisticamente os subsistemas de maior consumo de energia elétrica de um centro de dados e como algoritmos de escalonamento e realocação de máquinas virtuais, de controle do sistema de refrigeração e de otimização de topologia de rede interferem em parâmetros de desempenho. Este trabalho também propõe oito novos algoritmos de escalonamento e realocação de máquinas virtuais, um algoritmo para controle do sistema de refrigeração e um algoritmo de otimização da topologia da rede do centro de dados. Os algoritmos de escalonamento são altamente parametrizáveis para que um operador de centro de dados possa otimizar uma das dimensões de forma mais agressiva do que outras, ou seja, para que ele possa atribuir pesos diferentes para os subsistemas. Além disso, este trabalho faz uma avaliação extensiva, com centenas de simulações, dos algoritmos propostos usando diferentes cargas de trabalho e topologias de rede e os compara com outras propostas existentes na literatura. Os resultados mostram a importância de se parametrizar adequadamente os algoritmos de otimização para que eles não apenas economizem energia, mas também evitem violações de acordos de nível de serviço estabelecidos entre operadores de centro de dados e seus clientes. Data centers are among the largest consumers of electric energy in the information technology area. The energy consumption of a single data center can be larger than the consumption of a city with 100 thousands inhabitants. Data centers are not only famous for consuming large quantities of energy but also for being inefficient. Recent studies show that, on average, more than 50% of the energy consumed by a data center are wasted because of inefficient management of its resources. The energy consumption of a data center is dominated by three dimensions: servers, cooling system, and network infrastructure. The current proposals for energy management, generally, try to optimize one or two of these dimensions without considering the others. Moreover, they do not consider how these energy reduction optimizations impact performance parameters of the data center. This work first proposes an architecture for management and simulation of data centers for energy efficiency studies. Based on this architecture, this work develops the simulator SimDC3D that simulates realistically the subsystems that consume the most energy in a data center and how algorithms for scheduling and relocation of virtual machines, controlling the cooling system, and optimizing the network topology interfere with the performance parameters of the data center. This work also proposes eight new algorithms for scheduling and relocation of virtual machines, one algorithm for controlling the cooling system, and one algorithm for optimizing the network topology of the data center. The scheduling and relocation algorithms are highly parameterized so that a data-center operator can optimize one of the dimensions more aggressively than the others, i.e., he can assign different weights to the subsystems. Moreover, this work does an extensive evaluation, with hundreds of simulations, of the proposed algorithms under different workloads and topologies and compares them with the existing proposals. The results show the importance of setting the appropriate parameters for the optimization algorithms so that they can not only save energy but also avoid violations of service-level agreements settled between data center operators and their customers.

As chalconas possuem uma ampla variedade de atividades biológicas benéficas, incluindo a prevenção de doenças relacionadas ao estresse oxidativo. A caracterização estrutural destas moléculas, por meio de técnicas analíticas, pode se tornar uma difícil tarefa devido à complexidade de algumas estruturas. Entretanto, casos de revisão de estruturas de produtos naturais erroneamente estabelecidas ainda são encontrados na literatura apesar dos recentes avanços em técnicas espectroscópicas. Portanto, é necessário o desenvolvimento de protocolos de cálculos quânticos que possam auxiliar na determinação estrutural correta destes compostos. Neste trabalho, buscou-se desenvolver um protocolo parametrizado para cálculos de deslocamentos químicos de RMN 13C, de forma a assegurar uma correta determinação estrutural de polifenóis, com foco em chalconas. Para isso, uma série de moléculas pertencentes a esta classe, com esqueletos estruturais complexos e variados, fidedignamente elucidados na literatura, foi selecionada e submetida a análises conformacionais estocásticas utilizando o método de Monte Carlo e o campo de forças MMFF. As conformações de menor energia de cada molécula foram selecionadas para a etapa de otimização de geometria, realizada no nível mPW1PW91/6-31G(d). Os deslocamentos químicos de 13C foram calculados utilizando o mesmo nível de teoria, levando-se em consideração a distribuição populacional de Boltzmann. Os cálculos foram realizados em fase líquida, utilizando o Modelo Contínuo Polarizável (PCM) como modelo de solvatação implícita. Os deslocamentos químicos escalonados (δesc) foram obtidos utilizando a expressão δesc = a.δcalc + b, onde a e b são os coeficientes de regressões lineares obtidas entre os deslocamentos químicos calculados (δcalc) e experimentais. Os resultados mostram que o nível de teoria aplicado na fase líquida, permite uma boa reprodução dos dados experimentais. A aplicação do fator de escalonamento permite o cancelamento de erros sistemáticos, o que faz com que os valores de δesc sejam mais próximos aos experimentais. Dessa forma, o protocolo parametrizado mostrou-se uma importante ferramenta para a elucidação estrutural de polifenóis através de cálculos de deslocamentos químicos de RMN 13C. Chalcones exhibit a wide variety of beneficial biological activities. In addition, these compounds include the prevention of diseases related to oxidative stress. The structural characterization of these molecules by means of analytical techniques can become a difficult task due to the complexity of some structures. However, cases of erroneously established natural product structure review are still found in the literature despite recent advances in spectroscopic techniques. Therefore, it is necessary to develop quantum calculation protocols that can aid in the correct structural determination of these compounds. Thus, in this work, we tried to develop a parameterized protocol for calculations of chemical displacements of 13C NMR, in order to ensure a correct structural determination of polyphenols, with a focus on chalcones. For this, a series of molecules belonging to this class, with complex and varied structural skeletons, reliably elucidated in the literature, was selected and subjected to stochastic conformational searches using the Monte Carlo method and the MMFF field of forces. The lower energy conformations of each molecule were selected for the geometry optimization step, performed at the mPW1PW91/6-31G(d) level. The chemical displacements of 13C were calculated at the same level of theory, taking into account the population distribution of Boltzmann. The calculations were performed in both liquid phase, using the Polarizable Continuous Model (PCM) as an implicit solvation model. The stepwise chemical displacements (δesc) were obtained using the expression δesc = a.δcalc + b, where a and b are the coefficients of linear regressions obtained between the calculated (δcalc) and experimental chemical shifts. The results show that the level of theory applied in the liquid phase allows a good reproduction of the experimental data. The application of the scaling factor allows the cancellation of systematic errors, which means that the values of δesc are closer to the experimental ones. Thus, the parameterized protocol proved to be an important tool for the structural elucidation of polyphenols by calculations of 13C NMR chemical shifts.

Chalcona é uma classe de produtos naturais que tem muito interesse, principalmente farmacêutico, devido as suas ações biológicas. São moléculas não rígidas e complexas fazendo com que suas caracterizações estruturais se tornem tarefa difícil em técnicas experimentais. As técnicas espectroscópicas, nos últimos anos, tiveram um desenvolvimento muito rápido auxiliando bastante a elucidação de produtos naturais. No entanto, vários casos de revisão de estruturas de produtos naturais foram encontrados na literatura devido a ter elucidações errôneas em técnicas analíticas de rotinas experimentais. Com isso, é de extrema importância desenvolver protocolos que podem auxiliar na determinação de estruturas corretas dessas moléculas. Este trabalho buscou desenvolver um protocolo parametrizado para cálculo de deslocamento químico de RMN 13C com o intuíto de auxilar a determinação correta de moléculas tipo polifenóis. Assim, selecionou-se um grupo de polifenóis, especificamente uma subclasse desses, as chalconas, que possuissem substituintes variados e elucidação estrutural experimental na literatura. Essa base de chalconas foi submetida a buscas conformacionais estocásticas, onde usa-se o método Monte Carlo e campo de forças merck. Então, os confôrmeros com energia de até 3 kcal/mol de cada chalcona foram selecionados e assim feito cálculos de otimização de geometria e frequência. O deslocamento químico de 13C foi calculado após, considerando a distribuição populacional de Boltzmann. Todos esses cálculos foram realizados utilizando o nível mPW1PW91/6-31G(d). Após, com esses dados foi definido o deslocamento químico escalonado (δesc). Esse, foi obtido utilizando a expressão = +, onde a e b são os coeficientes de regressões lineares obtidas entre os deslocamentos químicos calculados (δcalc) e experimentais. Para validação do método, o fator de escalonamento foi utilizado para obter os valores de δesc em outras chalconas diferentes das utilizadas na base. O resultado mostra que o nível de teoria aplicado permite uma boa reprodução dos dados experimentais. Os cálculos realizados com fator de escalonamento levam a um melhor resultado do que quando não há o uso deste fator. Além disso a aplicabilidade do fator de escalonamento permite o cancelamento de erros sistemáticos, o que faz com que os valores de δesc sejam mais próximos aos experimentais. Assim, o protocolo parametrizado mostrou-se uma importante ferramenta para a elucidação estrutural de polifenois através de cálculos de deslocamentos químicos de RMN ¹³C. Chalcone is a class of natural products that has a lot of interest, mainly pharmaceutical because of its biological actions. They are several classes and in addition they are non rigid and complex molecules making their structural characterizations become difficult task in experimental techniques. Spectroscopic techniques, in the last years, have developed very fast, greatly aiding the elucidation of natural products. However, several cases of review of natural product structures have been found in the literature due to erroneous elucidations in analytical techniques of experimental routines. Thus, it is extremely important to develop protocols that can assist in determining the correct structures of these molecules. In this work aimed to develop a parameterized protocol for NMR 13C chemical shift calculations with the purpose of assisting in the correct determination of polyphenol type molecules. Thus, a group of polyphenols, specifically a subclass of these, chalcones, having varied substituents and experimental structural elucidation were selected in the literature. This base of chalcones was submitted to randomized conformational searches using Monte Carlo method and MMFF force field. In addition, the configurators with energy of up to 3 kcal/mol of each chalcone were calculations optimization of geometry and frequency. The chemical shift of 13C was calculated after assuming Boltzmann statics. All of these calculations were performed using the mPW1PW91 / 6-31G (d) level. After that, the scaled chemical shifts (δesc) was defined. This was obtained using the expression δ = δ + , where a and b are the coefficients of linear regressions obtained between calculated (δcalc) versus experimental chemical shift. In order to validate the protocol, the scaling factor were used to obtain δesc values for chalcones different from those used in the base. The result shows that the level of theory applied reproduced excellently the experimental data. Calculations performed with a scaling factor lead to a better result than when there is no use of this factor. In addition, the applicability of the scaling factor allows the cancellation of systematic errors, which make δesc are closer to the experimental ones. Thus, the parameterized protocol was shown to be an important tool for the structural elucidation of polyphenols through theorotical calculations of ¹³C NMR chemical shifts. Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG

Orientador: Fabio Trindade Maranhão Costa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Causada por protozoários do gênero "Plasmodium", a malária é uma das principais parasitoses da história, alcançando mais de 200 milhões de novos casos por ano. Apesar de avanços globais significativos no controle da doença, a presença de cepas de parasitos menos suscetíveis aos medicamentos disponíveis é recorrentemente observada para diferentes espécies de "Plasmodium". Frente aos desafios encontrados pela indústria farmacêutica de desenvolvimento de novos fármacos, o reposicionamento de fármacos aparece como uma nova estratégia com riscos reduzidos para a busca por antimaláricos. Estratégias quimiogenômicas in silico conduzidas previamente identificaram, com base na semelhança de alvos e ligantes, a Epirrubicina como potencial candidato ao reposicionamento como fármaco antimalárico. A Epirrubicina, originalmente desenvolvida para tratamento do câncer, é uma antraciclina aprovada pela FDA. O presente projeto buscou validar a ação antimalárica da Epirrubicina. A validação experimental iniciou-se com ensaios fluorimétricos in vitro (SybrGreen) utilizando cepas de "P. falciparum" sensíveis à cloroquina (3D7) e multi-resistente (W2 e Dd2). A Epirrubicina apresentou atividade antiplasmodial "in vitro" em escala nanomolar (EC50 = 110,7, 68,9 e 99,5 nM respectivamente). Ensaios de viabilildade celular em linhagens de células mamíferas (redução de MTT) mostraram que o composto apresenta baixa toxicidade (linhagens COS-7 e CHO, CC50 = 5,48 e 4,45µM respectivamente), com índices de seletividade de 49,4 e 40,1. Ensaios de maturação de esquizontes identificou o potencial da Epirrubicina de inibir isolados de "P. vivax" com tanta potência quanto a cloroquina. Foi também avaliada a capacidade do fármaco de bloquear a transmissão do parasito utilizando uma linhagem de P. berghei modificada (expressão de luciferase sob promotor específico de oocineto). A Epirrubicina inibiu cerca de 80% da formação de oocinetos a 1 µM (EC50 = 0,39 µM). Ainda, ensaios de alimentação de mosquitos em sangue de pacientes infectados por P. vivax por meio de membrana mimetizando a pele corroboraram o potencial de bloqueio de transmissão demonstrando que mosquitos A. aquasalis apresentaram significativamente menos oocitos em seu intestino médio pós-repasto sanguíneo em amostras tratadas com Epirrubicina. Ainda, a atividade esquizonticida do composto foi avaliada "in vivo" em camundongos C57BL/6JUnib infectados com "P. yoelii" 17XNL, tratados com 6 mg/kg de Epirrubicina por 4 dias. Este regime inibiu aproximadamente 90% da parasitemia até o último dia de tratamento, mantendo a inibição acima de 60% até o sexto dia pós-infecção. Finalmente, utilizando ferramentas de biologia sintética, particularmente uma triagem em biblioteca de leveduras mutantes heterozigotas, foram levantados outros possíveis alvos e vias moleculares afetados pela Epirrubicina além do inicialmente predito, uma girase do apicoplasto. Assim, os resultados não apenas mostram que a Epirrubicina apresenta relevante atividade antiplasmodial contra diferentes cepas do parasito – incluindo resistentes, mas também validam a estratégia de reposicionamento como uma opção adequada e consistente para a descoberta de fármacos Abstract: Caused by protozoan of the genus "Plasmodium", malaria is one of the most important parasitic diseases in history, reaching more than 200 million new cases every year. Besides significant global advances in disease control, the presence of parasites strains less susceptible to the drugs available is recurrently observed for different "Plasmodium" species. Facing the challenges met by the pharmaceutical industry towards drug development, drug repositioning rises as as a new strategy with reduced risks on the search for antimalarial drugs. In silico chemogenomic approaches previously conducted have identified, based on ligand and target similarity, Epirubicin as a candidate for repositioning as an antimalarial drug. Epirubicin, originally developed to treat cancer, is an anthracyclin approved by the FDA. The present study aimed to validate Epirubicin’s antimalarial activity. Experimental validation started with in vitro fluorimetric assays (SybrGreen) using chloroquine-sensitive (3D7) and multi-resistant (W2 and Dd2) "P. falciparum" strains. Epirubicin demonstrated antiplasmodial activity "in vitro" in nanomolar range (EC50 = 110.7, 68.9 and 99.5 nM, respectively). Cell viability assays in mammalian cell lines (MTT reduction) showed that Epirubicin presents low toxicity (COS-7 and CHO cell lines, CC50 = 5.48 and 4.45µM, respectively), with selectivity indexes of 49.4 and 40.1. Schizont maturation assays identified Epirubicin’s potential to inhibit "P. vivax" isolates with as much potency as chloroquine. We also evaluated the drug’s potential to block parasite transmission using a modified P. berghei line (luciferase expression under specific ookinete promoter). Epirubicin inhibited around 80% of ookinete formation at 1 µM (EC50 = 0.39 µM). Also,mosquito feeding assays in "P. vivax" infected blood by a membrane mimicking skin corroborated Epirubicin’s transmission blocking potential by demonstrating that A. aquasalis mosquitoes had significantly less oocysts found in their midgut after taking a blood meal on an Epirubicin-treated sample. In addition, schizonticidal activity of Epirubicin was evaluated "in vivo" in C57BL/6JUnib mice infected with "P. yoelii" 17XNL, treated with 6 mg/kg of Epirubicin for 4 days. This regimen inhibited approximately 90% of mice parasitemia until the last day of treatment, keeping this inhibition above 60% until the sixth day post-infection. Finally, using synthetic biology, particularly a library screening of heterozygous mutant yeast strains, other possible molecular targets and pathways affected by Epirubicin were introduced beyond the one predicted at first, a gyrase in the apicoplast. Therefore, the results obtained not only show that Epirubicin presents relevant antiplasmodial activity against several parasite strains - including chemorresistant ones, but also validates the drug repurposing strategy as a consistent and suitable option in drug discovery Mestrado Imunologia Mestra em Genética e Biologia Molecular CAPES 001 FAPESP 2017/02031-1 CNPQ 132980/2071-7

A espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) é uma técnica experimental poderosa para a obtenção de estruturas tridimensionais de moléculas complexas, principalmente para a análise das configurações relativas e absolutas de compostos orgânicos. Por esta razão, esta se tornou uma das ferramentas mais promissoras no campo da química. Do ponto de vista teórico, protocolos computacionais avançados foram desenvolvidos para o cálculo de RMN, principalmente de 1 H e 13 C, parâmetros de moléculas isoladas, em que os efeitos do meio ambiente são negligenciados. Estes efeitos são predominantemente relacionados com o tamanho inerentemente elevado de tais sistemas, tornando teorias convencionais ab initio computacionalmente muito exigentes ou mesmo inviáveis. Apesar dos recentes avanços em técnicas espectroscópicas, casos de revisão de estruturas de produtos naturais erroneamente estabelecidas ainda são encontrados na literatura. Portanto, é necessário o desenvolvimento de protocolos de cálculos quânticos que possam auxiliar na determinação estrutural correta destes compostos. Neste trabalho buscou-se gerar um fator de escalonamento universal, baseado emuma regressão linear, para o cálculo de deslocamentos químicos de RMN de 13 C, para moléculas rígidas, com baixo custo computacional e grande acurácia para auxiliar na determinação estrutural de produtos naturais. Para tal, 22 pequenas moléculas, cujos deslocamentos químicos foram obtidos experimentalmente, foram selecionadas e submetidas a buscas conformacionais estocásticas utilizando o método de Monte Carlo e o campo de forças MMFF. As conformações de menor energia de cada molécula foram selecionadas para a etapa de otimização de geometria, realizada no nível PM7, seguido por cálculos de frequência vibracional em mesmo nível. Os deslocamentos químicos de 13 C foram calculados utilizando o nível de teoria GIAO- mPW1PW91/3-21G. Já os deslocamentos químicos escalonados (δ esc ) foram obtidos de acordo com a relação δ esc = 1,14 δ cal – 4,71. A robustez do novo protocolo e sua aplicabilidade a problemas práticos foi avaliada através do cálculo de deslocamentos químicos para dois compostos naturais com interesse biológico e terapêutico: triptantrina e loliolida. De maneira a testar a aplicação do fator de escalonamento criado a problemas relacionados à estereoquímica investigou-se a sua capacidade em diferenciar triterpenos pentacíclicos regioisômeros. Assim os deslocamentos químicos de RMN de 13 C das moléculas de α-amirina, β-amirina, glutinol, acetato de α-amirina, acetato de β-amirin e acetato de glutinila, foram calculados e escalonados. Os resultados mostram que o nível de teoria GIAO-mPW1PW91/3-21G//PM7 aplicado para os cálculos, juntamente com a utilização do fator de escalonamento se mostra uma ferramenta eficaz e de baixo custo como uma alternativa para abordagens de exigência computacional, que são usualmente aplicados para a obtenção de cálculo de deslocamentos químicos de RMN de 13 C. Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy is one powerful experimental techniques for obtaining three-dimensional structures of complex molecules, mainly for the analysis of the relative and absolute configurations of organic compounds. For this reason, this has become one of the most promising tools in the field of chemistry. From the theoretical point of view, advanced computational protocols have been developed for calculating NMR, mainly 1 H and 13 C, parameters of isolated molecules, in which the environmental effects are neglected. These effects are predominantly related to the inherently large size of such systems, making conventional ab initio theories either very computationally demanding or even prohibitive. Despite the current advances in spectroscopic techniques, instances of revision of structures erroneously established for natural products are still common in the literature. Therefore, it is still necessary the development of quantum-chemical protocols that may assist in the correct structural determination of these compounds. This work aimed to generate a universal scaling factor, based on a linear regression, for the calculation of 13 C NMR chemical shifts for rigid molecules, which has low computational cost and great accuracy to aid in the structural determination of natural products. So, 22 small molecules, whose chemical shifts were obtained experimentally, were selected and submitted to randomized conformational searches using Monte Carlo method and MMFF force field. The most significant conformations for each compound were selected to energy minimization calculations carried out at the PM7 level of theory, followed by vibrational frequency calculations at the same level. The 13 C chemical shifts were calculated using the GIAO-mPW1PW91/3-21G level of theory. Scaled chemical shifts (δesc) were obtained according to the relation δ esc = 1,14 δ cal – 4,71. The robustness of the new protocol and its applicability to practical problems was evaluated by the calculation of the chemical shifts for two natural compounds with biological and therapeutic interest: tryptanthrin and (-)-loliolide. In order to test the application of the created scaling factor to problems related to stereochemistry, we investigated its ability to differentiate pentacyclic triterpenes regioisomers. Thus the 13 C NMR chemical shifts of the α-amirin, β-amirin, glutinol, α-amirin acetate, β-amirin acetate and glutinyl acetate molecules were calculated and scaloned. Our results show that the GIAO-mPW1PW91/3-21G//PM7 level of theory applied to the calculations, together with the use of the scaling factor, is an efficient and low-cost tool as an alternative to computational requirement approaches, usually applied to the calculation of 13 C NMR chemical shifts.

A estrongiloidíase é uma doença negligenciada com prevalência subestimada ocasionada principalmente pela espécie Strongyloides stercoralis, geralmente é assintomática, mas potencialmente fatal em indivíduos imunocomprometidos. Trata-se de uma infecção de difícil diagnóstico devido a eliminação de larvas discreta e irregular, e com alto impacto em saúde pública. Dentre os medicamentos disponíveis para o tratamento da estrongiloidíase, estão o albendazol e ivermectina, mas devido aos efeitos colaterais e o desenvolvimento da resistência, tem-se buscado novas alternativas terapêuticas para o controle do gênero Strongyloides sp. Neste contexto, o objetivo do estudo foi avaliar o potencial anti-helmíntico do extrato etanólico, fração acetato de etila, fração aquosa e óleo essencial rico em alfa bisabolol de Siparuna guianensis bem como do alfa bisabolol isolado no controle de S. venezuelensis. Realizou-se Testes de Eclosão de Ovos (TEO) e Testes de Motilidade Larval (TML) inicialmente com o extrato etanólico, óleo essencial e alfa bisabolol isolado nas concentrações de 0,2 à 1,0 mg/mL e, por fim, foram testadas as frações acetato de etila e aquosa fracionadas do extrato etanólico nas concentrações de 0,05 à 0,8 mg/mL. Foram utilizados como controles positivos o albendazol no TEO e a ivermectina no TML e, como controles, água filtrada e DMSO 1%. Foram utilizadas fezes frescas de gerbilos para realização do TEO e cultura de fezes em vermiculita para o TML. Foi incubado 50 μL dos compostos testados com ovos ou larvas contendo aproximadamente 50 espécimes em tubos eppendorfs para o TEO e TML. Os testes foram feitos em duplicata com réplica, e após incubação à 28°C por 48 horas realizou-se a contagem dos espécimes no TEO, e no TML, as contagens foram realizadas em intervalos de 24, 48 e 72 horas. As contagens nos dois testes foram realizadas em microscopia óptica. Todas as substâncias testadas apresentaram atividade ovicida equivalente ao controle positivo e, provocaram alterações na morfologia dos ovos. Apenas as frações acetato de etila e aquosa apresentaram efeito concentração dependente nos ensaios com ovos. No TML, não houve relação tempo dependente, apenas o extrato etanólico e a fração aquosa de S. guianensis apresentou eficiência equivalente ao controle positivo. Com exceção do alfa bisabolol isolado, os demais compostos apresentaram efeito concentração dependente no TML. A maior concentração do extrato etanólico provocou alterações na cutícula das larvas analisadas. Os testes fitoquímicos do extrato etanólico mostraram a presença de compostos fenólicos, taninos e flavonoides. Infere-se a partir dos resultados que existe sinergismo entre os constituintes químicos dos diferentes compostos analisados no TEO e TML e, que a presença de taninos e flavonoides no extrato etanólico e em suas frações influenciou na atividade ovicida e larvicida observada. Conclui-se que S. guianensis apresentou in vitro potencialidade antiparasitária principalmente do extrato etanólico e suas frações nas diferentes formas de S. venezuelensis. The strongyloidiasis is a neglected disease with prevalence underestimated, is caused mainly by the Strongyloides stercoralis species, is usually asymptomatic but potentially fatal in immunocompromised individuals. It is an infection difficult to diagnose due to low and irregular elimination of larvae, and with a high impact on public health. Among the drugs available for the treatment of strongyloidiasis are albendazole and ivermectin, but due to the side effects and the development of resistance has sought new therapeutic alternatives for the control of the genus Strongyloides sp are being studied. In this context, the objective of this study was to evaluate the anthelmintic potential of the ethanolic extract, ethyl acetate fraction, aqueous fraction, and essential oil rich in alpha bisabolol of S. guianensis as well as of the alpha bisabolol isolated in the control of S. venezuelensis. We carried out the Eggs Hatching Tests (EHT) and Larval Motility Tests (LMT) initially with ethanolic extract, essential oil and alpha bisabolol isolated at concentrations of 0.2 to 1.0 mg/mL, and finally fractionated ethyl acetate and aqueous fractions of ethanolic extract at concentrations of 0.05 to 0.8 mg/mL were tested. We used as positive controls, albendazole in EHT and ivermectin in LMT and as negative controls, filtered water and DMSO 1%. Fresh feces of gerbils were used to perform the EHT and stool culture in vermiculite for LMT. Was incubated with 50μL of tested compounds with eggs or larvae containing approximately 50 specimens in eppendorf tubesfor TEO and TML. The tests were performed in duplicate with the reply, and after incubation at 28 °C for 48 hours was performed counting the specimens in the EHT, and LMT, counts were performed at intervals of 24, 48 and 72 hours. The counts in the two tests were perfomed under optical microscopy. All the substances tested showed positive ovicidal activity equivalent to the positive control, and caused changes in the morphology of eggs. Only ethyl acetate and aqueous fractions showed a concentration-dependent effect in egg assays. In the TML, there was no time dependent relationship, only the ethanolic extract and the aqueous fraction of S. guianensis presented efficiency equivalent to the positive control. With the exception of alpha bisabolol alone, the other compounds had a concentration-dependent effect on TML. The higher concentration of the ethanolic extract caused changes in the cuticle of the analyzed larvae. The phytochemical tests of the ethanolic extract showed the presence of phenolic compounds, tannins and flavonoids. It is suggested from the results that there is synergism between the chemical constituents of the different compounds analyzed in the TEO and TML, and the presence of tannins and flavonoids in the ethanolic extract and its fractions influenced the observed ovicidal and larvicidal activity. It is concluded that S. guianensis showed in vitro antiparasitic potential mainly of the ethanolic extract and its fractions in the different forms of S. venezuelensis. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

The maxillofacial region may be affected by a variety of benign lesions (odontogenic and non-odontogenic), but locally invasive. The use of a conservative treatment can generate high rates of recurrence, whereas a radical approach can lead to aesthetic-functional disorders. The use of Carnoy's solution, as a complementary therapy to surgical treatment, has been described in the literature with the purpose of reducing the recurrence rates of these lesions, in addition to minimizing damages resulting from an aggressive surgical treatment. Thus, the present dissertation is constituted by two chapters that aim, respectively: 1) to characterize the physico-chemical and pharmacological properties of Carnoy's solution with and without chloroform; 2) to evaluate in vitro the effect of different formulations of Carnoy's solution on calcified human substrates. As methodological approaches, laboratory studies were performed. In Chapter 1, the physico-chemical / pharmacological properties and behavior of different formulations of the Carnoy solution used in oral and maxillofacial surgery were evaluated through Raman microspectroscopy, UV / Visible spectrophotometry, among others. The results of this study showed that the Carnoy solution presents acidic pH and, when chloroform is present, it becomes slightly more acidic, as well as giving the solution a higher viscosity. When the solutions were not filtered after preparation, precipitation of iron salts occurred after the seventh day when the chloroform was used in its composition. A study was carried out with 36 lower third molars and 18 mandibular bone fragments, both donated and collected from humans, which were divided into three groups: two groups (Group I = Carnoy solution with chloroform, Group II = Carnoy solution without chloroform) and a control group (saline solution). The samples were evaluated through Raman microspectroscopy, Knoop microhardness test and scanning electron microscopy (SEM) with X-ray dispersive energy spectrum (EDX). There was demineralization / degradation of dental structures in both the mineral matrix / organic matrix and carbonate / phosphate (GI and GII, p

Orientadores: Fabio Trindade Maranhão Costa, Letusa Albrecht Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: No último ano foram estimados 212 milhões de casos de malária no mundo. Plasmodium vivax é responsável por 41% dos casos da doença fora do continente africano. Ao contrário do Plasmodium falciparum, as infecções causadas por P. vivax são raramente letais. No entanto, P. vivax tem um impacto significativo sobre a produtividade das populações locais. O surgimento de cepas resistentes às drogas complica ainda mais a infecção por P. vivax o que leva à intensificação de investigações sobre métodos de controle alternativos, como o desenvolvimento de vacinas. Diversas proteínas vêm sendo estudadas a fim de encontrar um bom candidato vacinal. MAEBL é uma molécula quimérica expressa em eritrócitos infectados. Possui dois domínios (M1 e M2) envolvidos no processo de invasão ao eritrócito, sendo o domínio M2 o principal envolvido na invasão do merozoíta, além de exibir alta capacidade adesiva. MAEBL também é expresso em esporozoítas das glândulas salivares e em hepatócitos infectados. Além disso, o gene maebl foi identificado em diferentes espécies de plasmódios. RON2 é uma proteína conservada no filo Apicomplexa, expressa em esquizontes tardios, secretada por organelas denominadas roptrias no merozoíta e também está envolvida no processo de invasão do eritrócito, quando AMA1 junto com proteínas RON estabelecem a estrutura "moving junction" que faz uma conexão entre o merozoíta e o eritrócito. As características de MAEBL e RON2 abrem perspectivas para o desenvolvimento de uma vacina experimental. Visando um bom candidato vacinal, torna-se importante caracterizar o padrão de diversidade genética das proteínas em estudo, bem como avaliar a imunogenicidade das mesmas. Para isso, a partir de amostras de sangue de indivíduos infectados por malária, foi realizado PCR de regiões dos genes maebl e ron2 de Plasmodium vivax. Posteriormente foram sequenciados e avaliados quanto a sua diversidade. As proteínas MAEBL e RON2 foram expressas e testadas por ELISA, a fim de avaliar a sua imunogenicidade frente ao plasma de indivíduos infectados. Foi evidenciado, para ambos os genes, uma baixa diversidade genética. Pvron2 não apresentou mutações não-sinônimas e Pvmaebl teve sete mutações não sinônimas. A prevalência de anticorpos IgM e IgG naturalmente adquiridos contra MAEBL foi de 4,54% para IgM e 55,6% para IgG total. Anticorpos IgG naturalmente adquiridos contra RON2 estiveram presentes em 8,33% dos indivíduos analisados. Portanto, as proteínas MAEBL e RON2 se mostraram conservadas e imunogênicas, reafirmando estas proteínas como potenciais candidatos vacinais Abstract: Last year, 212 million malaria cases were estimated worldwide. Plasmodium vivax accounts for 41% of the cases of the disease outside the African continent. Unlike Plasmodium falciparum, infections caused by P. vivax are rarely lethal. However, P. vivax has a significant impact on the productivity of local populations. The emergence of drug-resistant strains and complications on P. vivax infection make it extremely necessary to intensify research on definitive control methods such as the development of vaccines. Several proteins have been studied aiming to find a good vaccine candidate. MAEBL is a chimeric molecule expressed on infected erythrocytes that presents two domains involved in the erythrocyte invasion process (M1 and M2). M2 domain is the most important one for merozoite invasion, and it exhibits higher adhesiveness. Recently, it has been shown that MAEBL is also expressed in the salivary sporozoite gland and infected hepatocytes. Moreover, the gene that codifies MAEBL was identified in different Plasmodium species, including P. vivax. RON2 is a conserved protein that belongs to Apicomplexa phylum. It is expressed in late schizonts, secreted by organelles called roptries in the merozoite and it is also involved in the erythrocyte invasion process. In this process AMA-1 together with RON proteins establish the moving junction structure, which makes a connection between the merozoite and the erythrocyte. The characteristics of MAEBL and RON2 open perspectives for the development of an experimental vaccine. It is important to characterize the pattern of genetic diversity of these proteins, as well as to evaluate the immunogenicity of them in order to find a good vaccine candidate. For it to be possible, PCR and sequence analysis were performed. The MAEBL and RON2 proteins were expressed and tested by ELISA to evaluate their immunogenicity against the plasma of infected individuals. A low genetic diversity was evidenced for both genes. Pvron2 did not present non-synonymous mutations and Pvmaebl presented 7 non-synonymous mutations. The reactivity indices of naturally acquired IgM and IgG antibodies against MAEBL were 4.54% for IgM and 55.6% for total IgG. IgG antibodies naturally acquired against RON2 were present in 8.33% of the individuals analyzed. Therefore, MAEBL and RON2 proteins are conserved and immunogenic, thus reaffirming them as potential vaccine candidates Mestrado Imunologia Mestra em Genética e Biologia Molecular FAPESP 2015/02808-0

Objective: Trauma is recognized as a worldwide public health issue with maxillofacial fractures being commonly seen in the most vulnerable populations of undeveloped countries. Thus, the present study aimed to determine the epidemiological profile of oral and maxillofacial trauma patients of a tertiary hospital in the northeast region of Brazil from 2006 to 2015. Materials and methods: A retrospective study was conducted and the data obtained from the patients records were grouped into independent variables (socio-demographic, etiological and therapeutic data) and outcome variables (fracture occurrence). Results: A total 338 patients were identified, most of them male (p

The surgery for removal of third molars constitutes a com monly performed procedure in dentistry, and is associated with varying degrees of postoperative pain, which can significantly affect the quality of life of patients. Considering the maximum benefit to the patient undergoing an operation, the preemptive ana lgesia has been the pharmacological strategy widely researched in recent decades. This study aimed to evaluate the pre - emptive analgesia effect on the levels of proinflammatory cytokines ( TNF - α e IL - 1 β ) following mandibular third molar surgery. A unicentric, triple - blind, randomized, placebo - controlled study was conducted with 36 patients undergoing surgical removal of mandibular third molars. All volunteers were allocated randomly to recei ve either etoricoxib 120 mg, ibuprofen 400 mg or placebo 1 hour preoperatively, and inflammatory events were evaluated. There was significant difference between groups with respect to pain scores (p

Orientador: Fabio Trindade Maranhão Costa Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: The complete abstract is available with the full electronic document. Doutorado Imunologia Doutora em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Liana Verinaud, Dea Maria Serra Villa-Verde Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O timo é o órgão linfóide primário onde os precursores de células T, chamados de timócitos, sofrem processos de diferenciação, seleção e proliferação. Todos estes processos são seqüencialmente dependentes de distintos microambientes no interior do órgão delimitados morfológica e fenotipicamente. Por isso a manutenção do microambiente é essencial para a funcionalidade do órgão. Recentemente, o timo tem sido visto como um órgão alvo de diversas infecções e patologias. No presente trabalho, foi avaliado o comprometimento do timo em três diferentes modelos experimentais capazes de induzir sua atrofia, a saber, infecção experimental pelo fungo P. brasiliensis, infecção experimental por Plasmodium berghei e diabetes induzida quimicamente. Foram avaliadas as subpopulações celulares tímicas, a expressão de citocinas essenciais à maturação dos timócitos e o possível papel do hormônio leptina no estabelecimento e manutenção da atrofia tímica. Sucintamente, os resultados demonstraram que nos três modelos, houve diminuição de celularidade com alterações significativas na freqüência dos subtipos de timócitos, principalmente queda de DP, e menor número de TNCs/animal . No modelo de diabetes além destas alterações, foi detectado a queda dos níveis de leptina, aparentemente, devido á queda da insulina. No modelo de PCM, não houve alteração nos níveis de leptina, entretanto, houve queda na expressão gênica de IL-7 e TGF-ß, fatores timo-estimulantes e inibição da capacidade migratória. Em animais infectados pelo P. berghei, houve queda de leptina e queda na expressão dos genes específicos para IL-7 e TGF-ß, além de aumento na atividade de migração Mediante os dados obtidos em cada modelo, sugere-se que no caso do modelo de PCM a atrofia de grau leve que foi observada deve-se à perda de células por diminuição da expressão das citocinas timo-estimulantes. Em malária acredita-se que a intensa atrofia ocorra por perda da região cortical devido, à queda na expressão das citocinas IL-7, TGF-ß e nos níveis séricos de leptina. Na diabetes induzida, o grau intermediário de atrofia pode ser correlacionado apenas à queda dos níveis séricos de leptina. Abstract: The thymus is the primary lymphoid organ in which T cell precursors, called thymocytes, undergo processes of differentiation, selection, and proliferation. All these processes are sequentially dependent on distinct thymic microenvironments, which in turn, are delimited morphologically and phenotypically. For these reasons, the maintenance of this microenvironment is crucial for thymus functionality. Recently, the thymus has been seen an organ targeted by several infections and pathologies. In this study, we evaluated thymus compromise under three experimental models capable of inducing atrophy, as follows: (1) experimental infection by the fungus Paracoccidioides brasiliensis (PCM), (2) experimental infection by Plasmodium berghei, and (3) chemically-induced diabetes. We evaluated subpopulations of thymic cells, the expression of cytokines that are essential to thymocyte maturation, and the possible role of the leptin hormone in the establishment of thymic atrophy. Briefly, the results showed that in all three models there was a decrease of cellularity along with significant alterations in the frequency of each thymocyte subtype, especially a decrease in DP, and lower numbers of TNCs per animal. In the diabetes model, besides these alterations, we detected a decrease in leptin levels, apparently related to the insulin drop. In the PCM model, there were no alterations in leptin levels. However, we observed a drop in the expression of IL-7 and TGF- ß, both thymus-stimulant factors, as well as an inhibition of migratory ability. In P. berghei-infected animals there was a drop in leptin as well as in the expression of IL-7 and TGF- ß genes; besides an increase in migration activity. According to the data obtained within each model, we suggest that for the PCM model, the low degree of observed atrophy is a consequence of the loss of cells due to a drop in thymus-stimulant cytokine expression. In malaria, the intense atrophy happens due to the loss of the cortex region, generated by the drop in the expression of IL-7 cytokines, TGF- ß, and seric levels of leptin. As for the induced diabetes, the intermediate degree of atrophy can be correlated only to the drop in seric levels of leptin. Doutorado Imunologia Doutor em Genética e Biologia Molecular

Orientadores: Marcelo Brocchi, Fabio Trindade Maranhão Costa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A malária é uma doença tropical causada pelo parasita Plasmodium spp e é considerada um sério problema de saúde pública. São aproximadamente 500 milhões de casos anuais e mais de um milhão de mortes, especialmente na África e Ásia. No Brasil, são 500 mil novos casos por ano, principalmente na região Amazônica. Esses elevados índices de mortalidade e morbidade são motivadores da busca por estratégias de controle e eliminação dessa doença. A vacinação é uma ferramenta promissora no controle e prevenção da malária, entretanto, uma vacina segura e efetiva ainda não está disponível, em parte devido ao complexo ciclo de vida do parasita e a expressão de diferentes antígenos em cada fase. O antígeno de membrana similar ao ligante de eritrócitos (MAEBL), é um forte candidato a ser usado no desenvolvimento de uma vacina efetiva contra a malária, uma vez que esse antígeno é expresso em diferentes períodos do ciclo de vida do parasita. Neste estudo, o domínio M2 do antígeno MAEBL de Plasmodium yoelli foi expresso em linhagens vivas atenuadas de Salmonella enterica Typhimurium (?3987, ?4550 e H683) e o uso dessas bactérias como vacina recombinante potencialmente indutora de proteção contra malária murina foi avaliado. Essas linhagens foram obtidas após construção e transdução do plasmídio pYA3137trc contendo a região m2 do gene maebl e a expressão do antígeno foi confirmada por immunoblotting. A administração oral das linhagens recombinantes a camundongos BALB/c/AnUnib resultou na colonização dos tecidos hospedeiros apenas pela linhagem H683. Essa linhagem foi então avaliada em termos de indução de resposta imune humoral contra M2 e capacidade de imunização no modelo murino. Apesar da resposta humoral contra M2 ter sido detectada in vivo, a linhagem recombinante não demonstrou proteção potencial contra a infecção por Plasmodium yoelii no modelo murino. Abstract: Malaria is a tropical disease caused by the parasite Plasmodium spp and is considered a serious public health problem. There are about 500 million annual cases and more than one million of deaths, especially in Africa and Asia. In Brazil, there are 500.000 new cases per year, mainly in the Amazon region. Those high rates mortality motivate the search for strategies of control and elimination of this illness. The vaccination is a promising tool in the control and prevention of malaria; however, a safe and effective vaccine is not available yet, in part due to the complex life cycle of the parasite and expression of different antigens in each phase. Membrane antigen erythrocyte binding like (MAEBL) is a strong candidate to be used in the development of an effective vaccine against malaria, since this antigen is expressed in different periods of the parasite life cycle. In this work, the M2 domain of Plasmodium yoelli MAEBL antigen was expressed in attenuated strains of Salmonella enterica Typhimurium (?3987, ?4550 e H683) and the use of these bacterias as potential inductor of protection against murine malaria was evaluated. These strains were obtained by construction and transduction of the plasmid pYA3137trc carrying the m2 region of the maebl gene and the antigen expression was confirmed by immunoblotting. The oral administration of the recombinant strains to BALB/c/AnUnib mice resulted in the colonization of host tissues only for the H683 strain. This strain was further evaluated in terms of induction of humoral immune response against M2 and immunization capacity in murine model. Even though humoral response against M2 was detected in vivo, the recombinant strains did not shown protective potential against the infection of Plasmodium yoelii in murine model. Mestrado Genética de Microorganismos Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Fabio Trindade Maranhão Costa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A violaceína é um pigmento violeta extraído da bactéria Gram-negativa Chromobacterium violaceum. Diversos trabalhos atribuíram à violaceína diferentes atividades biológicas tais como bactericida, antiviral, fungicida e antitumoral. Os efeitos da violaceína também foram observados contra protozoários patogênicos, como Leishmania sp e Trypanossoma sp. Neste trabalho, avaliamos a atividade antimalárica da violaceína in vitro e in vivo contra Plasmodium humano e murino, respectivamente. Neste sentido, a violaceína se mostrou tão eficiente quanto o quinino em eliminar P. falciparum (3D7), mas três vezes menos eficiente que a cloroquina. Além disso, não encontramos diferença na sua atividade contra formas jovens e maduras, mostrando uma atuação similar nos diferentes estágios de desenvolvimento do parasita. Os experimentos in vivo utilizando camundongos infectados com PcchAS tratados por 11 dias consecutivos (0-10) revelaram uma potente atividade desta droga, inibindo o desenvolvimento parasitário em até 86% no pico da parasitemia. Também foi encontrado 60% de inibição quando o tratamento iniciou-se 5 dias após o estabelecimento da infecção. Quando administrada em animais infectados com uma cepa murina letal (PcchAJ), a violaceína protegeu 80% dos animais, em contraste à 100% de mortalidade dos animais não tratados. A comparação do ED50 demonstrou que a violaceína é tão eficiente quanto o artesunato e 2 vezes mais ativa que a cloroquina, sob as mesmas condições de tratamento. Finalmente, animais naive tratados com a violaceína durante 11 dias consecutivos não mostraram alterações na densidade de glóbulos vermelhos e no peso. Também não foi observado nenhum dano morfológico nos cortes histológicos. Coletivamente, estes resultados demonstram claramente o potencial antimalárico da violaceína e abre perspectivas para o entendimento dos mecanismos envolvidos na inibição parasitária por este composto. Abstract: Violacein is a violet pigment extracted from the bacteria Gram-negative Chromobacterium violaceum. Growing bodies of evidences have implicated violacein as an antimicrobial, antifungal, antitumoral, and a moderate trypanocidal and leishmanial activity has also been observed. Herein, we evaluated the anti-malarial activity of violacein against murine and human-derived Plasmodium. Indeed, violacein showed to be efficient in killing P. falciparum (3D7 strain) as much as quinine, but 3 fold less pronounced than chloroquine. Moreover, this anti-Plasmodial activity detected was direct against both young and mature stages of this human parasite. In vivo experiments in P. c. chabaudi AS (PcchAS) infected mice treated during 10 consecutive days after infection (0-10) revealed a powerful activity of this drug, by inhibiting parasite burden up to 86%. Also, 60% of inhibition was noticed when violacein was administrated 5 days after infection establishment. When administrated in mice infected with a lethal strain of murine-derived Plasmodium (PcchAJ) violacein protected 80% of these mice, in contrast to 100% of mortality reported to the non-treated animals. ED50 comparisons demonstrated that violacein was efficient as much as artesunate and twice more active than chloroquine. Finally, naïve mice inject with violacein during 10 consecutive days did not display alterations on red blood cell density; weight and neither morphological damages were noticed in spleen and liver histological sections. Collectively, these data clearly demonstrated the anti-malarial effect of violacein and open perspectives to understating the mechanisms involved in killing this parasite by this compound. Mestrado Imunologia Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Fabio Trindade Maranhão Costa Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A Malária é a principal doença parasitária do mundo, infectando 300-500 milhões de pessoas e levando ao óbito cerca de 1 milhão de indivíduos anualmente. As infecções maláricas geralmente não apresentam complicações, no entanto, infecções por Plasmodium falciparum podem se desenvolver em formas graves da doença, como a malaria cerebral. A malaria cerebral e considerada uma síndrome multifatorial, envolvendo a citoadesão de eritrócitos infectados por P. falciparum (EIPf) através de diferentes receptores como CD36, ICAM-1, VCAM, P-selectina e E-selectina, sendo o ICAM-1 apontado como o principal receptor. Varias evidências sugerem ainda que o desbalanço da resposta imune do hospedeiro, a ativação endotelial e alterações na cascata de coagulação desempenham papel importante na patogênese da MC. Além disso, outros fatores como a presença de heme livre e NOS também tem sido apontados como essenciais para o desenvolvimento da MC... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: Malaria still is a major parasitic disease in the world, infecting 300-500 million people and leading to death about 1 million people annually. Usually malaria infections do not lead to complications, however some infections, mainly, by Plasmodium falciparum can evolve into severe forms of disease such as cerebral malaria (CM). CM is considered a multifactorial syndrome involving cytoadhesion of P. falciparum-infected erythrocytes (PfEI) to different host receptors such as CD36, VCAM, P-selectin and E-selectin and ICAM-1 , which is considered the main receptor involved in MC. A large body of evidences suggests that the imbalance of the host immune response, endothelial activation and changes in the coagulation cascade play an important role in the pathogenesis of CM. Moreover, of free heme, and NOS has also been identified as essential for the development of CM...Note: The complete abstract is available with the full electronic document Doutorado Parasitologia Doutor em Parasitologia

Orientador: Leonilda Maria Barbosa dos Santos Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A Síndrome de Guillain-Barré (SGB) é uma doença desmielinizante do sistema nervoso periférico (SNP). Baseado principalmente nas similaridades clínicas e histopatológicas a Neurite Experimental Auto-imune (EAN) tem sido extensivamente usada como modelo de estudo da SGB. A EAN é uma doença auto-imune, que pode ser experimentalmente induzida em ratos geneticamente suscetíveis através da imunização com os componentes da mielina de nervos periféricos tais como os peptídeos P0 e P2 , ou ainda por transferência adotiva de lifócitos T CD4+ do tipo Th1. Diferentes tentativas de tratamentos para a SGB têm sido estudadas, dentre elas pode-se citar a plasmaferese, o uso de anticorpos monoclonais, administração de corticóides e a imunossupressão global através da administração de intérferon ß. A utilização de venenos totais de serpentes, ou frações deles, já demonstrou bons resultados na tentativa de tratamento de alguns modelos de doenças auto-imunes como a diabetes auto-imune insulino dependente, lúpus e encefalomielite experimental auto-imune (EAE). No presente trabalho foi estudado o efeito de uma fração do veneno da cascavel sul americana Crotalus durissus terrificus (Cdt), a crotapotina, no modelo de EAN. São apresentadas evidências de que tanto a administração intraperitoneal (IP) como a oral de crotapotina reduz significativamente a gravidade da EAN induzida em ratos Lewis, associada a um significativo declínio na resposta proliferativa das células T neuritogênicas, assim como diminuição de infiltrados de células mononucleares no nervo ciático dos os animais Abstract: Biomedical research in which venom components are being investigated for their potential as novel therapeutic agents has emerged as an interesting option. Crotapotin which is a fraction of the venom of the rattlesnake Crotalus durissus terrificus, has been described as an antinflammatory that acts on the innate arm of the immune response. Here we have demonstrated that intraperitoneal (IP), as well as oral administration of crotapotin significantly reduces the severity of experimental autoimmune neuritis (EAN), an experimental model for Guillain-Barré Syndrome. The reduction of the severity of the disease is associated with a reduction in the mononuclear cells infiltrating in the sciatic nerve and a significant decrease in the lymphocyte proliferative response to neuritogenic peptide Mestrado Ciências Básicas Mestre em Clínica Médica

Orientadores: Iscia Teresinha Lopes-Cendes, Rovilson Gilioli Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A interferência do RNA (RNAi) pode ser usada como uma ferramenta eficaz no silenciamento gênico específico mediado por moléculas de dupla fita de RNA (dsRNAs). Nesse contexto possui uma variedade de aplicações biológicas, incluindo o combate a patógenos infecciosos de importância biomédica. O objetivo do estudo foi determinar a eficiência e a especificidade da técnica de RNAi em eliminar o vírus da hepatite murina tipo 3 (MIN-3) in vitro. MHVs são vírus envelopados, cujo genoma é formado por uma cadeia de RNA fita simples (+) pertecentes a família Coronaviridae. Seu genoma codifica quatro proteínas estruturais: S (proteína da espícula); M (glicoproteína da transmembrana), N (proteína do nucleocapsídeo) e E (proteína associada à membrana) . Neste trabalho foi escolhido como alvo para o silenciamento gênico a proteína N, tendo sido produzidas moléculas de dsRNA complementares a sua seqüência genômica (GenBank AF 201929). Foram obtidas duas moléculas siRNAs transcritas por T7 RNA polimerase e uma terceira molécula interferente sintetizada comercialmente. Foi observado que os siRNAs produzidos pela transcrição in vitro, induziram uma resposta antiviral não específica. Além disso demonstrou-se que este efeito foi mediado através de substâncias secretadas no meio de cultura celular, provavelmente interferons (IFNs). Este efeito foi eficientemente eliminado após tratamento dos siRNAs com fosfatase alcalina. Observou-se também que a técnica de RNAi in vitro, tendo como alvo a proteína N de MHV-3, foi um tratamento eficaz e específico na infecção viral, confirmados através de estudos fenotípicos e moleculares. Desse modo, concluímos que experiências que utilizam RNAi contra alvos virais devem ser cuidadosamente monitoradas devido aos efeitos não específicos que podem ser induzidos por moléculas de dsRNA Abstract: RNA Interference (RNAi) can be used as a powerful tool for post transcriptional gene-silencing mediated by double stranded RNA (dsRNAs) molecules. RNAi has a variety of biological applications including the combat against pathogens of biomedical importance. The objective of our study was to determine the efficiency and specificity of this new technique in eliminating mouse hepatitis virus type 3 (MIN-3) in vitro. MIN-3 is a subtype of enveloped viroses with a large plus-stranded RNA genome belonging to the Coronavirus family. Its genome codifies four structural proteins: S (spike protein); M (membrane protein); E (transmembrane glycoprotein); N (nucleocapsid protein). In the present study we target protein N by designing and producing dsRNA molecules complementary to its genomic sequence (GenBank AF 201929). We obtained three small interfering RNAs (siRNA) by in house T7 polymerase in vitro transcription and a fourth siRNA molecule that was commercially synthetized. We identified that siRNAs produced by in vitro transcription triggered a potent and sequence-unspecificied antiviral response. In addition, we demonstrated that this antiviral effect was mediated through molecules that were secreted in medium culture, probably interferons (IFNs). This unspecific effect was efficient1y suppressed when siRNAs were treated with aIkaline phosphatase prior to in vitro experiments. We also observed that RNAi targeting the N protein ofMIN-3 was a potent and specific treatment against in vitro infection, showing significant phenotypic protection and molecular evidence of specific gene-silencing. We concluded that experiments using RNAi against viral targets, although efficient, must be carefully controlled and monitored against possible sequence-unspecific effects triggered by dsRNA molecules Doutorado Genética Animal e Evolução Doutor em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Selma Giorgio Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Nas infecções com o parasito do gênero Leishmania a incapacidade da célula hospedeira destruir os amastigotas leva à lesão a cronificar-se. A persistência e o aumento da carga parasitária levam a formação de um granuloma macrofágico, que resulta em áreas de inadequada perfusão e conseqüente alteração do microambiente tecidual. Assim, neste trabalho avaliamos durante a evolução da lesão de camundongos infectados com L amazonensis a expressão das proteínas HIF-1a e VEGF, que respondem ao estresse microambiental. Paralelamente, investigamos protocolos terapêuticos com HBO que modulem a curva de crescimento da lesão em modelos animais da infecção por Leishmania amazonensis. A expressão de HIF-1a ocorreu nas fases iniciais, crônicas e fases finais da infecção murina com L. amazonensis. Nas lesões cutâneas de camundongos da linhagem BALB/c a expressão de HIF-1a foi de localização difusa na lesão, enquanto que a expressão de HIF- 1a em lesões cutâneas da linhagem C57Bl/6 foi em forma de cluster restrita aos macrófagos parasitados. A expressão de VEGF nas lesões de ambas linhagens de camundongos foi discreta durante todo o período experimental e não aumentou com o tempo de infecção. O tratamento com oxigênio hiperbárico mostrou efeito deletério sobre formas promastigotas aumentando o acúmulo de lipídios citoplasmáticos e o nível de apoptose. O oxigênio hiperbárico diminuiu os efeitos patológicos e modulou a resposta imune. Concluímos que a expressão de HIF-1a durante a evolução da lesão leishmaniótica não está diretamente relacionada à expressão de VEGF e pode ser resultado de múltiplos fatores, que incluem fatores hipóxicos e não hipóxicos. Sugerimos também que o tratamento hiperbárico é capaz de modular a resposta imunológica e diminuir a progressão da lesão durante a leishmaniose murina Abstract: The incapacity of host cell in killing amastigotes during Leishmania infections causes to chronic lesions. The increase of parasite burden leaves to macrophage accumulation and consequently granuloma formation that result in inadequate perfusion and tissue microenvironment alterations. Thus, in this work we evaluated the HIF-1a and VEGF expression, proteins that responses for environmental stress, during the course of L.amazonensis infection. We also investigated protocols for hyperbaric oxygen therapy that module the lesion progress in animal models infected with L. amazonensis. HIF-1a expression occurred in the early, chronic and in final stages of murine infection with L. amazonensis. BALB/c mice lesions showed a homogeneous expression of HIF-1a while footpads from C57Bl/6 mice showed HIF-1a expression restrict in clusters of heavily infected macrophages. The VEGF expression was not correlated to the evolution of lesion or the HIF-1 production in both stains. The hyperbaric oxygen treatment showed deleterious effects on promastigotes increasing cytoplasmtic lipids and apoptosis level. The HBO decreased pathological effects and modulated the immune response. The results suggest that the HIF-1a expression during lesion progress induced by L.amazonensis in both murine strains is the result of multiple factors, including hypoxic and non hypoxic factors. There is no direct relation between HIF-1a and VEGF expression during experimental cutaneous leishmaniasis. We also indicated that hyperbaric oxygen therapy was able to modulate immune response and decrease of lesion progress during murine leishmaniasis Doutorado Doutor em Parasitologia