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Made available in DSpace on 2015-12-10T14:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:27:50Z : No. of bitstreams: 1 000851665_20160330.pdf: 89340 bytes, checksum: 9ea716295350e4f9c41b9b1ba249c761 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-04-01T11:49:41Z: 000851665_20160330.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T11:50:35Z : No. of bitstreams: 1 000851665.pdf: 3177829 bytes, checksum: 9b6d8900d08b5f09bb1d42d6593cd852 (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) O subcomplexo Triatoma brasiliensis compreende as espécies: Triatoma brasiliensis brasiliensis, T. juazerensis, T. lenti, T. melanica T. melanocephala, T. petrochii, T. sherlocki, T. tibiamaculata e T. vitticeps. Essas espécies apresentam muitas questões relativas à sua biologia e filogenia. Diante dessa constatação e servindo-se de estudos moleculares, morfológicos e morfométricos avaliaram-se aspectos filogenéticos das espécies do referido complexo. Para tanto caracteres morfológicos da genitália externa feminina, foram estudadas por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Por microscopia óptica foram desenvolvidos estudos morfométricos: geometria morfométrica de cabeças e asas, mensuração do comprimento e largura da cabeça, comprimento do tórax, abdômen e dos três segmentos da probóscide de adultos fêmeas e machos. Foram sequenciadas regiões dos genes nucleares dos espaçadores transcritos internos I e II e dos genes mitocondriais 12S, 16S, COI e CyTb e avaliadas com o intuito de propor hipóteses filogenéticas para as espécies do complexo. The subcomplex Triatoma brasiliensis comprises species: Triatoma brasiliensis brasiliensis, T. juazerensis, T. lenti, T. melanica T. melanocephala, T. petrochii, T. sherlocki, T. tibiamaculata e T. vitticeps. These species have many questions regarding its biology and phylogeny. Given this finding and making use of molecular studies, morphological and morphometric aspects were evaluated phylogenetic species of said complex. For both morphological characters of the female external genitalia, they were studied by means of scanning electron microscopy (SEM). By optical microscopy were developed morphometric studies: morphometric geometry heads and wings, measuring the length and width of the head, thorax length, abdomen and the three segments of the proboscis of adult females and males. Sequences of nuclear genes of internal transcribed spacers I and II were sequenced and the mitochondrial genes 12S, 16S, COI and Cytb were sequenced and evaluated with the aim to propose phylogenetic hypotheses for complex species. FAPESP: 13/08826-5

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-06Bitstream added on 2014-06-13T20:24:53Z : No. of bitstreams: 1 gardim_s_dr_arafcf_parcial.pdf: 160360 bytes, checksum: bb515cf7688b1355b670a850d3d9c795 (MD5) Bitstreams deleted on 2014-12-19T18:32:46Z: gardim_s_dr_arafcf_parcial.pdf,Bitstream added on 2014-12-19T18:33:34Z : No. of bitstreams: 1 000726380.pdf: 3221251 bytes, checksum: 8f109e2488063ca255b691ce5abe0451 (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) A doença de Chagas apresenta como agente etiológico o protozoário Trypanosoma cruzi, cujos vetores pertencem à subfamília Triatominae. Triatomíneos são insetos sugadores de sangue (ordem Hemiptera e família Reduviidae), distribuídos, principalmente, na região Neotropical e, epidemiologicamente, se destacam espécies dos gêneros Panstrongylus, Rhodnius e Triatoma. O gênero Rhodnius apresenta alta semelhança morfológica entre suas espécies e o gênero Triatoma é o mais diversificado, porém ambos foram agrupados em complexos de espécies, com base em semelhanças morfológicas, distribuição geográfica, abordagens genéticas, entre outros. Para alguns complexos de espécies os caracteres morfológicos não são suficientes para a identificação específica correta. Portanto, as ferramentas moleculares são apresentadas como uma alternativa útil para a identificação de espécies relacionadas. Este estudo visou contribuir para a identificação de três grupos de espécies de triatomíneos, por meio do desenho de novos primers diagnósticos para compor uma multiplex-PCR: o primeiro grupo é composto por quatro espécies de Rhodnius: R. neglectus, R. robustus, R. prolixus e R. pictipes; os segundo e terceiro grupos apresentam espécies do gênero Triatoma: T. maculata e T. pseudomaculata; e T. tibiamaculata, T. melanocephala e T. vitticeps. Além disso, avaliaram-se as relações filogenéticas com as sequências resultantes. Após extração do DNA mitocondrial (16S, Cytb e COI) e DNA nuclear (ITS1 e ITS2) genes foram amplificados e sequenciados. Para diagnosticar as espécies do gênero Rhodnius, os primers referentes ao Cytb foram eficientes para compor uma multiplex-PCR, que se separou R. prolixus, R. neglectus, R. pictipes e R. robustus. Da mesma forma, os primers desenhados para o fragmento 16S distinguiram T. tibiamaculata, T. melanocephala... Chagas disease presents as etiologic agent the protozoan Trypanosoma cruzi, whose vectors belong to the Triatominae subfamily. Triatomine bugs are bloodsucking insects (belonging to the Hemiptera order and Reduviidae family), which are distributed predominantly at the Neotropical region and epidemiologically stand the species belong Panstrongylus, Rhodnius and Triatoma genera. The Rhodnius genus shows high morphological similarity among their species, as the Triatoma genus is the most numerous, however both were grouped into species complexes, according to morphological similarities and geographical distribution, genetic approaches, and others. For some species complexes morphological characters are not enough to make the correct specific identification. Therefore, molecular tools are presented as an useful alternative to identify closely related species. This study aimed to contribute to the identification of three groups of Triatominae species by the design of new diagnose primers for multiplex-PCR: the first group consists of four species of Rhodnius genus: R. neglectus, R. robustus, R. prolixus and R. pictipes; the second and third groups comprise Triatoma species: T. maculata, and T. pseudomaculata; and T. tibiamaculata, T. melanocephala and T. vitticeps. Additionally, we evaluated the phylogenetic relationships with the resulting sequences. After DNA extraction, mitochondrial (16S, Cytb and COI) and nuclear DNA (ITS1 and ITS2) genes were amplified and sequenced. To diagnose Rhodnius species the primers for the fragment of Cytb were efficient, by using a multiplex-PCR that separated R. prolixus, R. neglectus, R. robustus and R. pictipes. Similarly, the primers designed for the 16S fragment distinguished T. tibiamaculata, T. melanocephala and T. vitticeps. For T. maculata and T. pseudomaculata no one of the tested candidate primers showed satisfactory results... (Complete abstract click electronic access below) FAPESP: 10/50.355-1