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Die Pulmonale Hypertonie (PH) ist eine heterogene Erkrankung, welche anhand ihrer Ätiologie in fünf Gruppen eingeteilt wird. Trotz spezifischer Therapiemaßnahmen, die insbesondere für die pulmonalarterielle Hypertonie (PAH, Gruppe 1) zur Verfügung stehen, sind die Mortalitätsraten hoch und die Lebensqualität der Patienten eingeschränkt. Der prognoselimitierende Faktor ist die Entwicklung einer Rechtsherzinsuffizienz aufgrund der PH-assoziierten Drucküberlastung. Eine optimale pharmakologische Therapie, welche auf die Progressionshemmung der Rechtsherzinsuffzienz abzielt, ist aktuell nicht etabliert. Pathophysiologisch kommt es zu einem pulmonalvaskulären und rechtsventrikulären Remodelling, welches im Rahmen der strukturellen und funktionellen Reorganisation der extrazellulären Matrix das Wiederauftreten sogenannter onkofetaler Varianten von Fibronektin (Fn) und Tenascin-C (Tn-C) beinhaltet. Letzteres konnte mit zahlreichen Erkrankungen aus dem kardiovaskulären Formenkreis assoziiert werden, so dass diese fetalen Fn- und Tn-C-Varianten als potentiell attraktive diagnostische Marker und therapeutische Zielstrukturen identifiziert werden konnten. Vor diesem Hintergrund war es Ziel der vorliegenden Arbeit, die Expression der fetalen Spleißvarianten von Fn und Tn-C im Rattenmodell der Monocrotalin (MCT)-induzierten PH differentiell im Lungengewebe und im konsekutiv belasteten rechten Ventrikel (RV) zu analysieren. Es erfolgte eine Analyse der mRNA-Expression und der Proteindeposition im Gewebe. Außerdem wurden die Serumkonzentrationen spezifischer Spleißvarianten mittels ELISA-Technik bestimmt. Des Weiteren wurden die Effekte des dualen Endothelinrezeptor-Antagonisten Macitentan (MACI) auf das Expressionsverhalten der Moeküle untersucht. Hierfür erfolgte die Einteilung der Tiere in drei Versuchsgruppen: gesunde Kontrolltiere (CON), Ratten mit MCT-induzierter PH (MCT), Ratten mit MCT-induzierter PH und zusätzlicher Macitentan-Behandlung (MCT+MACI).

Ziel der vorliegenden Dissertation war es, bei Patienten nach akuter Typ-A-Dissektion einen Zusammenhang zwischen dem Tenascin-C-Serumgehalt und der Änderung der Blutgefäßdurchmesser und Dissektion zu finden. Hierzu wurde im Rahmen eines Follow-ups den 43 rekrutierten Patienten eine Serumblutprobe entnommen, diese auf den Tenascin-C-Gehalt geprüft, eine Patientennamnese erhoben sowie anhand von CT-Aufzeichnungen präoperativ und im Follow-up die Durchmesser der Aorta und großen abgehenden Gefäße gemessen und die Änderung der Dissektion beurteilt. Es wurden Korrelationen zwischen Einflussfaktoren, Medikamenten, Gefäßdurchmesseränderungen und Dissektionsverlauf nachgewiesen ohne einen statistisch signifikanten Zusammenhang zwischen den Tenascin-C-Serumwerten und den Gefäßdurchmesser- bzw. Dissektionsänderungen zu finden.

Unilaterale Pneumonektomie (PNX) und die damit einhergehenden mechanischen Veränderungen führen bei adulten Mäusen zu einem rapiden kompensatorischen Lungenwachstum des verbliebenen Lungenflügels. Im Zuge dieses Kompensationsprozesses kommt es dabei über eine Neubildung von Alveolen und anderen Prozessen zu einer nahezu vollständigen Wiederherstellung des verlorenen gasaustauschenden Gewebes. Bis heute ist kaum verstanden, welche molekularen Mechanismen dem kompensatorischen Lungenwachstum zu Grunde liegen und ob damit eine Reaktivierung von Prozessen der Lungenentwicklung (Alveolarisierung) verbunden ist. Elastische Fasern, deren Bildung ein entwicklungsspezifisches Expressionsprogramm erfordert, stellen mit ihrem Hauptbestandteil Elastin eine wichtige Komponente der alveolaren Extrazellularmatrix dar. Dabei nehmen sie eine zentrale Rolle bei der Alveolarisierung ein. Da es sich bei dem kompensatorischen Lungenwachstum, wie bei der Lungenentwicklung, um einen aktiven Prozess handelt, erfordert die Reorganisation der Extrazellularmatrix die Anwesenheit Extrazellularmatrix-modulierender Faktoren wie die des anti-adhäsiven und migrationsfördernden Proteins Tenascin C (TnC) und dem endogenen Matrixmetalloproteinase (MMP)-Inhibitor Timp1. Im Rahmen dieser Arbeit konnte anhand einer vergleichenden Expressionsanalyse gezeigt werden, dass es während des kompensatorischen Lungenwachstums und der damit einhergehenden Neoalveolarisierung nicht zu einer Rekapitulation des für die Bildung funktioneller elastischer Fasern erforderlichen koordinierten Genexpressionsprogramms der Entwicklung kommt. Dies deutet darauf hin, dass keine neuen elastischen Fasern während des kompensatorischen Lungenwachstums gebildet werden, oder ein weiterer alternativer Assemblierungsmechanismus existiert. Weiterhin war die während des kompensatorischen Lungenwachstums induzierte Expression von Elastin von dem Transkriptionsfaktor (Early Growth Response 1“ (Egr1) reguliert, dessen mRNA-Expression voraussichtlich via Mechanotransduktion unmittelbar nach PNX, aber nicht während der postnatalen Alveolarisierung hochreguliert war. Nicht nur als Folge hiervon wiesen pneumonektomierte Egr1 -/- Mäuse ein beeinträchtigtes kompensatorisches Lungenwachstum auf. Eine nähere Charakterisierung des endogenen Matrixmetalloproteinase-Inhibitors Timp1 zeigte, dass dessen Expression während des kompensatorischen Lungenwachstums sehr stark sowie nahezu dauerhaft hochreguliert war und diese Expression ebenfalls über Egr1 reguliert wurde. Dabei scheint Timp1 MMP-abhängige und MMP-unabhängige Funktionen während des kompensatorischen Lungenwachstums zu vermitteln. Bei pneumonektomierten Timp1 -/- Mäusen wurde eine beeinträchtigte Regeneration der alveolaren Oberfläche beobachtet. Weiterhin führte eine Deletion des Gens für Timp1 zu einer veränderten Lungenstruktur und Lungenfunktion. Für das Extrazellularmatrix-assoziierte Protein Tenascin C, welches während der Alveolarisierung sehr stark exprimiert wird, konnte ebenfalls eine signifikante Egr1-unabhängige Steigerung der Expression während des kompensatorischen Lungenwachstums festgestellt werden, wobei eine Deletion des Gens für TnC allgemeine Folgen für die Lungenstruktur und die Lungenfunktion hatte. Die stereologische Analyse von pneumonektomierten TnC -/- Mäusen zeigte, dass das kompensatorische Lungenwachstum bei verschiedenen Mausinzuchtstämmen eine zeitlich unterschiedliche Progression aufzuweisen scheint. Mit der vorgelegten Studie konnte ein erster Einblick in einen funktionellen Mechanismus des kompensatorischen Lungenwachstums gewonnen werden. Eine weitere Erforschung der Egr1 gesteuerten Regulation von Elastin und Timp1 könnte als neue Grundlage innovativer therapeutischer Ansätze für diverse Lungenerkrankungen, welche mit dem Umbau/Verlust von Alveolen einhergehen, dienen. Unilateral pneumonectomy and for this reason associated mechanical changes lead to a rapid compensatory lung growth in adult mice. In course of this compensational process a nearly complete restoration of the lost respiratory tissue occurs, including neoalveolarization. Currently, still little is known about the molecular mechanims driving compensatory lung growth and if also a recapitulation of developmental processes (alveolarization) is involved. Elastic fibers with their main component Elastin are an important constituent of the extracellular matrix and the assembly of elastic fibers requires a complicated temporal and spatial expression programm which seems to be specific for development. Furthermore, elatic fibers are crucial for alveolarization. As lung development compensatory lung growth is an acitve process which includes a reorganisation of the extracellular matrix. Therefore extracellular matrix modulating factors like the anti-adhesive/migration promoting protein Tenascin C (TnC) and the endogenous inhibitor of matrixmetalloproteinases Timp1 are needed. By performing a comparative gene expression analysis this study could show that the coordinated developmental gene expression programm required for the assembly of functional elastic fibers is not recapitulated during compensatory lung growth indicating that no new elastic fibers are formed or assembly is driven by an alternative mechanism during compensatory lung growth. In addition, the in the course of compensatory lung growth induced expression of elastin was regulated by the transcription factor „early growth response 1“ (Egr1) whose mRNA expression is upregulated immediately after PNX but not during postnatal alveolarization presumably via mechanotransduction. As a consequence of this compensatory lung growth was impaired in pneumonectomized Egr1 -/- mice. Further characterisation of the matrixmetalloproteinase (MMP) inhibitor Timp1 showed that Timp1 expression which was constantly upregulated during compensatory lung growth was also regulated by Egr1. Presumably Timp1 contributes with its MMP-depend and MMP-independent functions to compensatory lung growth while an impaired regeneration of alveolar surface area has benn observed in pneumonectomized Timp1 -/- mice. Deletion of Timp1 gene also leads to an altered lung structure as well as lung function. The extracellular matrix-associated protein TnC which is highly expressed during alveolarization was found to be also significantly upregulated during compensatory lung growth by an independent mechanism apart from Egr1. Lungs of TnC -/- mice demonstrated alterations in structure and function. Stereological analysis of pneumonectomized TnC -/- mice revealed that temporal progression of compensatory lung growth seems to be without regard to a deletion of TnC different in distinct mouse inbred strains. This study delivers first insights into a functional mechanism of compensatory lung growth. Further research on the shown Egr1 driven regulation of elastin and Timp1 could be a novel basis for innovative therapeutical strategies leading to a successful induction of (neo)alveolarization in adult mammals.

Ill., graph. Darst.

Diese Studie befasst sich mit dem Einfluss multifunktioneller Glykoproteine und CSPGs, speziell von Tnc und seinen alternativ gespleißten FNIII Domänen, auf das Wachstumsverhalten retinaler Axone. Durch den Einsatz unterschiedlicher Tnc Konstrukte mit variablen FNIII Domänen, konnte gezeigt werden, dass das TNfnBD-fc Fusionskonstrukt das Wachstum und die Faszikulation der Fasern stimuliert. Dieser Effekt konnte ebenfalls bei Müller Glia beobachtet und auf die Tnc FNIII-Domäne D begrenzt werden. Ein möglicher Rezeptor Kandidat repräsentiert das F3/Contactin Glykoprotein. Die Kombination mit dem Glykoprotein Laminin führte zu einer weiteren Erhöhung des Faszikulationsgrades auf Kosten des Axonwachstums. Ergänzende Experimente mit Neuritenwachstum-stimulierenden Zellen verdeutlichten den Einfluss von CSPG, welche eine repulsive Wirkung auf das Verhalten der Fasern besitzen. Die Behandlung mit dem Rho-Kinase Inhibitor Y27632 gab Hinweise auf potenziell blockierte Signalkaskaden.

Ill., graph. Darst.

The freshwater polyp Hydra vulgaris is ideal for the investigation of developmental processes, because of its simple body, divided in head, gastric region and foot. Its ability to regenerate missing body parts makes this animal immortal. Hydra is able to reproduce sexually or asexually by budding. Through treatment with lithium chloride it is possible to interfere with this highly regulated pattern formation: In polyps treated with 1 mM LiCl budding is inhibited and ectopic feet form along the body axis. To identify genes involved in signalling pathways during foot formation a LiCl induced cDNA library was scanned. Three transcripts (K10-7, MK55 and MK97) with a possible function in the foot region could be isolated. The cDNA K10-7 is expressed in the foot region. The deduced, small protein has similarity with the EGF-like domain of tenascin and teneurin proteins. Members of these protein families play morphoregulatory roles during development and rearrangement of tissue. Through adhesive and anti-adhesive effects, mainly involving migrating cells, these proteins are involved in boundary formation between developing tissues. It’s possible that K10-7 acts in a similar way to transdifferentiate ectodermal cells into foot specific glad cells. Due to expression studies with double-labeling in situ hybridization K10-7 may also interact with Kringelchen, a FGF-receptor, and be involved in boundary formation during budding. The foot specific cDNAs MK55 and MK97 are members of a huge protein family in Hydra showing sequence similarity to Rhamnose-binding proteins and. These proteins may be released from glad cells into the mucus of the foot. MK55 and MK97 may protect the basal end of the Hydra through agglutination of Bacteria. Beside these foot specific cDNAs also the transkript MK38 was characterized. MK38 is expressed ubiquitous in the endoderm with exception of the hypostom. Due to sequence similarity to the microtubule binding protein family MAP215/Dis1 its proposed that MK38 is involved in cell division as well. In a second project the RNA interference method (RNAi) which has been successfully established in H. magnipapillata should also used in H. vulgaris to characterise the function of the former described genes. Four different electroporation units which all induce different electric plusses were used to find gently conditions for the electroporation. All conditions tested in this study couldn’t induce RNAi effects in H. vulgaris., Aufgrund seines einfachen Körperbaus, der sich in Kopf, Gastralraum und Fußregion gliedert eignet sich der Süßwasserpolyp Hydra vulgaris ideal für das Studium entwicklungsbiologischer Prozesse. Seine Fähigkeit verlorene Körperteil vollständig zu regenerieren verleiht dem Polypen potentielle Unsterblichkeit. Die Fortpflanzung bei Hydra erfolgt entweder sexuell oder asexuell durch Knospung. Durch die Behandlung mit Lithium Chlorid ist es möglich diese streng regulierten Musterbildungsprozesse zu manipulieren. Durch die Behandlung mit 1 mM LiCl wird die Knospung unterdrückt und es kommt zur Bildung ektopischer Fußstrukturen. Zur Identifizierung von Genen die an Signalkaskaden während der Fußentwicklung beteiligt sind wurde daher eine LiCl induzierte cDNA Bank nach möglichen Kandidaten durchsucht. Mit dieser Methode konnten drei Transkripte (K10-7, MK55 und MK97) mit einer möglichen Funktion in der Fußregion isoliert werden. Die cDNA K10-7 ist in der Fußregion exprimiert. Das abgeleitete Peptid zeigt Sequenzähnlichkeit mit der EGF-ähnlichen Domäne zweier Proteinfamilien, den Tenascinen und Teneurinen. Die Mitglieder dieser Familien spielen eine morphoregulatorische Rolle während der Entwicklung und der Umgestaltung von Geweben. Dabei wirken diese Proteine durch adhäsive und antiadhäsive Effekte hauptsächlich auf einwandernde Zellen und sind an der Ausbildung von Grenzen zwischen sich entwickelnden Geweben beteiligt. Es wäre denkbar, dass K10-7 auf ähnliche Weise auf die Transdifferenzierung ektodermaler Zellen zu fußspezifischen Drüsenzellen beteiligt ist. Expressionsstudien mit Doppelfärbung deuten auf eine Interaktion mit dem FGF-Rezeptor Kringelchen bei der Grenzbildung während der Knospung. Die Transkripte MK55 und MK97 sind mit den Rhamnose-bindenden Lektine (RBL) verwand. Sie sind Teil der großen RBL Familie, deren Sequenzen durch die Analyse einer EST-Datenbank von Hydra magnipapillata gefunden wurden. MK55 und MK97 könnten in das von fußspezifischen Drüsenzellen gebildete Sekret abgegeben werden und dort durch Agglutination von Bakterien einen Schutz vor Erregern vermitteln. In einem weiteren Ansatz wurde das Transkript MK38 charakterisiert. Die Transkription von MK38 ist in allen entodermalen Zellen mit Ausnahme des Hypostoms nachweisbar. Die unvollständige Sequenz zeigt Ähnlichkeit mit Proteinen der MAP215/Dis1 Familie. Möglicherweise spielt MK38 bei der Zellteilung eine Rolle. In einem zweiten Projekt sollte mittels der RNAi Methode, die bereits für Hydra magnipapillata erfolgreich etabliert worden war, die Funktionen der untersuchten Gene charakterisiert werden. Dazu wurden vier verschiedenen Elektroporationsgeräte benutz, die jeweils unterschiedliche elektrische Impulse erzeugen konnten. Mit den in dieser Arbeit getesteten Bedingungen war es nicht möglich RNAi Effekte bei H. vulgaris zu induzieren.

Monoklonale Antikörper sind unverzichtbare Hilfsmittel, um Proteinkomplexe aus Zellen zu isolieren oder Proteine in Gewebeschnitten zu lokalisieren. Sie dienen auch dazu, Entwicklungsvorgänge aufzuklären. Dabei wird als Modellorganismus für Vertebraten oft der Zebrafisch gewählt, da er sich asaisonal vermehrt, eine zahlreiche Nachkommenschaft hat und sowohl die Befruchtung als auch die Entwicklung außerhalb des Mutterleibs erfolgt. Im Rahmen dieser Arbeit wurden monoklonale Antikörper generiert, die spezifisch mit neuronalen Geweben und Organen des Zebrafisches reagieren. Zur Immunisierung wurde Gehirngewebe des Zebrafisches verwendet. Immunisiert wurden Ratten. Antikörperbildende B-Zellen aus der Ratte wurden mit einer Mausmyelom-Zelllinie fusioniert. Proteine von Interesse wurden mit Hilfe der Antikörper aus Zelllysaten des Zebrafisch-Gehirns immunpräzipitiert und durch Elektrophorese in Polyacrylamidgelen aufgetrennt. Die durch Antikörper detektierbaren Banden wurden ausgeschnitten und die enthaltenen Proteine mit massenspektrometrischen Techniken identifiziert. In einem weiteren Ansatz diente eine in λ-Phagen einklonierte Genbank der Expression der Proteine. Die Proteine wurden ebenfalls mit monoklonalen Antikörpern identifiziert. Die Phagen, die diese Proteine produzierten, wurden vermehrt und die für das Protein kodierende DNA sequenziert. Wir haben unsere Anstrengungen vor allem auf Proteine neuronalen Ursprungs konzentriert, weil diese Strukturen in den Fischen besonders deutlich markiert wurden. Histologische Untersuchungen an anderen Spezies ergaben, dass die Antikörper mit neuronalen Strukturen vieler Spezies reagierten, was auf eine hohe Konservierung der Proteine in der Phylogenese schließen lässt. Aus drei Fusionen mit Milzzellen von immunisierten Ratten wurden 2400 Zellüberstände erzeugt, die auf ihre Immunglobulin-Subklasse getestet wurden. IgG-positive Überstände wurden auf histologischen Schnitten untersucht. Schließlich wurden 17 Klone etabliert, die mit Nervengewebe des Zebrafisches reagierten, und weitere 9 Klone, die sowohl mit neuronalen Zellen des Zebrafisches als auch mit neuronalem Gewebe anderer Spezies reagierten. Die von den einzelnen Antikörpern erkannten Proteine wurden entweder massenspektrometrisch oder mittels einer Expressionsgenbank, die aus drei Tage alten Zebrafischlarven hergestellt wurde, identifiziert. Es wurden Antikörper gegen folgende Proteine gefunden: 1. Tenascin R 2. Plasticin 3. TOPAP 4. VAT-1 Es wurden 16 monoklonale Antikörper, die gegen fünf verschiedene humane Antigene hergestellt worden waren, auf Kreuzreaktivität mit Zebrafischgehirn getestet. Die Antikörper reagierten sowohl mit dem Hirn des Zebrafisches als auch mit dem Hirn acht verschiedener Säugerspezies. Im zweiten Teil der Arbeit wurde der Versuch unternommen, gezielt gegen ein Fusionskonstrukt, das Teile des humanen Parkins enthielt, monoklonale Antikörper herzustellen. Aus vier Fusionen wurden nur drei spezifisch mit dem Antigen reagierende Antikörper selektiert, die auch im Western-Blot mit Parkin reagierten. In vivo wurde das Antigen in histologischen Schnitten jedoch nicht erkannt.

None of the established treatments (surgery, radiotherapy, chemotherapy) for malignant glioma has improved its very poor prognosis. Adjuvant locoregional radio-immunotherapy (RIT) represents a new therapeutic approach. We present our initial experience with this therapeutic tool with respect to adverse effects, biokinetics and clinical follow-up.Following surgery and radiotherapy, 12 patients with glioma (4, WHO stage III; 8, WHO stage IV) underwent 1-5 RIT-cycles (average dose 1100 MBq 131labelled monoclonal BC-4 antibodies) at six week intervals. Follow-up included serial FDG-PET and MRI investigations. Evaluation of biokinetics included whole body scans, together with analysis of blood, urine and fluid from the tumor cavity.Following RIT, four patients experienced temporary seizures, which, in one case, were associated with temporary aphasia. Eight patients developed HAMA (human anti-mouse antibodies) during follow-up. Mean biologic half-life of the radiopharmaceutical in the resection cavity was 3.9 d (range: 1.0-10.2 d) and remained stable intraindividually during further RIT-cycles. The antibody/radionuclide conjugate remained stable in the tumor cavity for at least 5 d. Median survival presently stands at 18.5 months compared to 9.7 months in a historical patient group (n = 89) undergoing conventional therapeutic strategies. Five patients show no signs of recurrence. In three patients with post-surgical evidence of residual tumor, one patient showed partial remission, one stable disease, and one progressive disease during RIT. Four patients without evidence of residual tumor mass at the beginning of RIT developed recurrence during therapy.Initial experience demonstrates that locoregional RIT is a well tolerated treatment modality that may represent a promising new approach in the management of patients with malignant glioma. Advantages of local application include passage of the blood-brain barrier, high concentration of activity within the resection cavity and low systemic toxicity.

Tenascin is a glycoprotein of the extracellular matrix and is mainly expressed in association with a high proliferative and migratory activity. This characteristic has made it a successfully used target molecule in the treatment of glioblastoma. An application of anti-tenascin therapy concept in squamous cell carcinomas of the head and neck (HNSCC) mainly depends on the expression pattern of tenascin in a tumor type. In the present study, we analyzed the messenger (m) RNA and protein expression of tenascin in HNSCC tumors when compared to normal mucosa and determined its cellular localization and correlation with various clinical parameters, including tumor staging. In native tissue tenascin protein was localized in the entire extracellular matrix surrounding the tumor. Normal mucosa showed only a weak and interrupted basement membrane staining. In situ hybridization revealed a very faint tenascin mRNA signal in basal cells of normal mucosa and a strong signal in tumor cells. This tumor cell-specific expression of tenascin was confirmed at the protein level in HNSCC cultures. However, there was no correlation of tenascin expression with tumor staging or tumor cell proliferation. Our data clearly show that tenascin is selectively expressed in HNSCC and therefore could be useful for a therapeutic intervention in these tumors.

Localization and distribution of both collagen (types I, III, IV, V, VI) and glycoproteins (undulin, fibronectin, laminin, tenascin, vitronectin) in the blood vessels of the human uterine tube were investigated immunohistochemically. In the tubal arteries of premenopausal and postmenopausal women, type I, III, V and VI collagen and undulin have very characteristic distribution patterns. The proteins could be observed predominantly in both the intima and a zone between media and adventitia. This zone was condensed in arteries after the menopause. With increasing age, the reactivity of type I, III, V and VI collagen and undulin increased even more. Furthermore, the glycoproteins fibronectin, laminin, tenascin and vitronectin were also detected. Relating to immunohistochemical reactivity of these glycoproteins no age-dependent differences in the tubal arteries existed. The staining intensity of fibronectin was always weaker compared to that of undulin. Similarly to laminin and type IV collagen fibronectin was detected in intima and media. Tenascin was also found in blood vessels and prominently in the media and intima. Vitronectin was associated with fine granular and fibrous structures in the intima and the media of all arterial and venous vessels. The enhanced perimenopausal production of both collagen and undulin in the arterial wall should lead to changes of the elastic properties of the tubal arteries.

Extracellular matrix proteins are increased in inflammatory synovitis. We showed previously that the in situ expression of the corresponding extracellular matrix receptors (beta 1-integrins) is enhanced in synoviocytes (SC) of synovitis of different etiology (16). To investigate the adhesion of SC to extracellular matrix proteins, we examined the attachment of SC from normal and inflamed synovia to fibronectin, tenascin, laminin and collagen type IV. Compared to normal SC and SC of osteoarthritis, SC of rheumatoid arthritis showed an increased binding to tenascin, laminin, fibronectin and collagen type IV, suggesting a distinctive interaction of SC and extracellular matrix proteins in rheumatoid arthritis. Furthermore, the increased binding of SC of rheumatoid arthritis to extracellular matrix proteins may play a role in tissue remodelling associated with rheumatoid arthritis.

Tenascin, a glycoprotein of the extracellular matrix, is involved in epithelial proliferation, differentiation and cell migration during embryonic development. Later on, it is important in proliferative processes like tumor growth and wound healing. We examined the distribution of tenascin, especially in the stroma near basement membranes, in paraffin sections from 25 patients with gastric cancer by immunohistological staining with regard to tumor staging, grading and Lauren classification. In two series we used a monoclonal and a polyclonal antibody against human tenascin. In most of the sections there was a more intensive staining of the surrounding stroma in areas close to the tumor, which could indicate the direction of tumor growth. In highly differentiated tumors we found a positive, yet discontinuous staining close to the basement membrane. In contrast to this, we saw a more diffuse reaction of the stroma with network-like staining of the collagen fibres in undifferentiated tumors. In lymph nodes we also detected a small number of tumor cells by staining of the surrounding stroma.

In the present study, the pattern of some extracellular matrix glycoproteins was determined in traumatic anterior cruciate ligament ruptures (n = 17) and in normal ligaments (n = 11). 6 microns cryo-sections were incubated with monoclonal antibodies recognizing tenascin, laminin, and fibronectin, and FITC-labeled secondary antibodies. Immunohistochemistry revealed that tenascin, fibronectin and laminin are sparsely distributed in normal anterior cruciate ligaments, but strongly expressed in ruptured ligaments with a time-restricted pattern. The de novo-expression of tenascin appeared before laminin but later than fibronectin. The data suggest that fibronectin and tenascin are important, partially antagonistic components during healing processes after anterior cruciate ligament ruptures.