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Summary: T-cell acute lymphoblastic leukaemia is a highly heterogeneous and aggressive entity within haematological malignancies, marked by a poor prognosis, especially for refractory or relapsed cases. Their multiple and complex oncogenic processes make it difficult to identify effective targeted therapies for all patients. The most immature forms of the disease frequently contain alterations in epigenetic regulators that allow the identification of patients with a poor prognosis and eligible for treatment with hypomethylating agents. Furthermore, our recent work reveals that loss of function of the PRC2 polycomb complex is accompanied by a profound remodelling of the epigenetic landscape of blasts and confers synthetic lethality to bromodomain protein targeting. In the era of personalised medicine, understanding epigenetic deregulations in leukaemias allows the development of new effective targeted therapies for patients. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Résumé: À ce jour, seules quelques études épidémiologiques ont tenu compte de l'exposition prénatale et de la petite enfance à des mélanges de polluants chimiques pour évaluer les associations avec les perturbations et les troubles du neurodéveloppement de l'enfant. Les substances chimiques au sein d'un mélange peuvent avoir des effets additifs, synergiques ou antagonistes. Des études récentes de cohortes mère-enfant ont appliqué des modèles d'analyse multi-polluants pour étudier les effets des mélanges. Elles ont examiné l'impact sur le neurodéveloppement (cognitif, comportemental) du mélange, identifié les substances chimiques de ce mélange qui jouent un rôle clé dans la neurotoxicité (métaux, bisphénols, certains métabolites de phtalates, etc.) et montré des effets interactifs. D'autres domaines de l'exposome (nutriments, mode de vie, facteurs sociaux) peuvent également être impliqués dans l'association avec les effets neurodéveloppementaux. Les études toxicologiques ont montré que les polluants chimiques partagent des modes et des mécanismes d'action communs, le stress oxydant étant souvent décrit comme l'un des événements clés conduisant à des perturbations cellulaires et tissulaires à différents niveaux du cerveau pendant les périodes critiques de vulnérabilité. Les modifications épigénétiques associées à certains polluants (phtalates, bisphénols, pesticides, particules fines, etc.) altèrent l'expression et la régulation de gènes importants pour le neurodéveloppement et contribuent au risque de troubles neurodéveloppementaux. Les progrès dans la connaissance des marqueurs épigénétiques devraient favoriser une approche préventive. To date, only a few epidemiological studies have considered prenatal and early childhood exposure to mixtures of chemical pollutants to assess their associations with neurodevelopmental disabilities in children. Chemicals in a mixture may have additive, synergistic or antagonistic effects. Some recent birth cohort studies investigating chemicals and neurodevelopmental effects have applied multipollutant models to the investigation of mixtures. They have examined the overall impact of mixtures, identified the chemicals from mixtures that play a key role in neurotoxicity (metals, bisphenols, phthalates, etc.) and investigated their interactive effects. Other domains of the exposome (nutrients, lifestyle, and social factors) may be also implicated in the association with neurodevelopmental effects. Toxicological studies have shown that chemical pollutants share common modes and mechanisms of action, with oxidative stress often described as one of the key events leading to cellular and tissue disruptions at different levels of the brain during critical periods of vulnerability. Epigenetic modifications associated with a number of pollutants (phthalates, bisphenols, pesticides, fine particles, etc.) alter the expression and regulation of genes important for neurodevelopment and contribute to the risk of neurodevelopmental disorders. Advances in knowledge of epigenetic markers should promote a preventive approach. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Résumé: La régulation de l'expression des gènes est assurée chez tous les organismes pour maintenir un développement harmonieux de l'individu. Découverte à la fin des années 1990, l'ARN interférence a complètement révolutionné la façon dont étaient conçues ces régulations. L'ARN double brin est la molécule initiatrice de cette voie et sera reconnu puis clivé par une protéine Dicer en duplex d'une vingtaine de nucléotides : les petits ARN interférents ou siARN (small interfering ARN). L'un des brins du duplex est alors incorporé dans un complexe ribonucléoprotéique, RISC (RNA-induced silencing complex), avec une protéine ARGONAUTE. Dès lors, l'expression de tout ARN qui possède la séquence complémentaire au siARN sera réprimée au niveau transcriptionnel ou post-transcriptionnel. Cette spécificité de séquence assure une régulation fine au niveau cellulaire et permet aux organismes de contrôler leur développement, maintenir leur intégrité génomique et lutter contre différents stress. En cas d'infection virale, l'ARN interférence est particulièrement sollicitée puisque de nombreuses molécules d'ARN exogènes sont néosynthétisées. Cette action antivirale associée à l'ARN interférence fut découverte chez les plantes à l'aube du xxi e siècle. Depuis, deux décennies de recherche ont permis d'affiner nos connaissances sur les multiples protéines impliquées dans cette voie et aussi de découvrir des protéines capables de supprimer l'ARN interférence (viral suppressor of RNA silencing [VSR]). Les premiers VSR ont été identifiés sur des plantes virosées et permettent aux virus de contourner la défense antivirale de la plante. Chez les mammifères, le rôle antiviral de l'ARN interférence reste discuté par la communauté scientifique. En effet, l'infection virale y est contrôlée par la réponse interféron et le rôle de l'ARN interférence n'a pas été formellement démontré in vivo. Les principaux modes de suppression usités par les VSR, qu'ils soient exprimés par des virus animaux ou végétaux, seront présentés dans cette revue et accompagnés par la description de suppresseurs endogènes. Enfin, ces différents modèles de suppression seront complétés et complexifiés par les ARN viraux non codants (ARNnc). La suppression du silencing n'est pas restreinte aux VSR de nature protéique et plusieurs exemples d'ARNnc viraux assurant cette même fonction seront présentés. In any organism, gene expression regulation is provided by multiple factors to maintain a harmonious development of individuals. Discovered in the late 1990s, RNA interference (RNAi) completely remodelled the way in which gene expression regulations were initially apprehended. RNAi provides fine regulation at the cellular level and allows organisms to control their development, maintain their genomic integrity and fight against different stresses like viral infection. Exogenous or endogenous double-stranded RNAs initiate RNAi and are recognized and cleaved by Dicer protein in about 20 nucleotide duplexes small RNAs (sRNAs). One strand of the duplex is loaded into a ribonucleoproteic complex, named RISC (RNA-induced silencing complex), composed of at least one ARGONAUTE protein and a sRNA. Therefore, the expression of any RNA possessing the complementary siRNA sequence of the small RNA will be specifically silenced either at the transcriptional or post-transcriptional level. RNAi plays a prominent role in the defence against viral infection and the last two decades of research have refined our knowledge of proteins involved in this pathway. Many viruses counteract the antiviral action of RNAi through the expression of factors (viral suppressor of RNA silencing [VSR]) that were first identified on virally infected plants. However, in mammals, the antiviral role of RNAi remains controversial. Indeed, viral infections are controlled by the interferon response and the antiviral action of RNAi has not been clearly demonstrated in vivo. In this review, the main modes of defence suppression used by VSR and endogenous RNAi suppressors will be presented. Finally, the role of viral non-coding RNAs (ncRNAs) acting as suppressors of RNAi will be discussed. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Copyright of Biologie Aujourd'hui is the property of EDP Sciences and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)

Abstract: Autoinflammatory diseases (MAI) are syndromes of systemic expression whose origin is a defective regulation of innate immunity. The most common and best known are hereditary recurrent fevers (HRF). The recent discovery of several genes responsible for inherited forms has been an invaluable value for the diagnosis of these rare diseases. A decision tree and prerequisites established by the French network for genetic diagnosis of MAI (GenMAI) effectively target the testing order, which is almost exclusively indicated for postsymptomatic diagnosis. The results should be interpreted with caution because most of the mutations are point substitutions, and it is sometimes difficult in case of detection of a new sequence variant to assess its real involvement in the clinical picture of the patient. [Copyright &y& Elsevier]

Abstract: TNFα stimulation triggers both cell death and survival programs. Since dysregulated apoptosis or cell growth can cause inflammatory diseases, cancer, or autoimmune disorders, it is important to understand the molecular mechanism of controlling cell death and survival by TNFR downstream signaling molecules. In this study, we used normal diploid cells, mouse embryonic fibroblasts (MEFs), to mimic the general TNFα-resistant phenomenon seen under physiological conditions. We elucidated the TNFα-induced death signaling complexes in TNF α-resistant WT MEFs and TNFα-sensitive MEFs that were cFLIP-, RelA-, TRAF2- or RIP1-deficient. Consistent with TNFα-mediated killing, we detected TNFα-induced high molecular weight complexes containing caspase-8 and FADD by gel filtration in the deficient MEFs, especially in those devoid of cFLIP. In addition to the presence of caspase-8-FADD in the TNFα-induced-death complex in the deficient MEFs, we also detected an intermediate protein complex containing RIP1, TRAF2 and caspase-8. Moreover, we demonstrated a correlation between TNFα-sensitivity and death-inducing complex ability in two transformed cell lines, E1A- and Ras- transformed MEFs and PDGF-B-transformed NIH-3T3 cells with PDGF-B signaling inhibited by the tyrosine kinase inhibitor STI571. Taken together, our results suggest the involvement of cFLIP-, RelA-, RIP1-, or TRAF2-related mechanisms for preventing FADD-caspase-8 interaction in wild-type MEFs. [Copyright &y& Elsevier]

Abstract: ZNF689, a C2H2-type of zinc finger transcription factor, was suggested to play a key role in hepatocarcinogenesis. However, none of the target genes or potential roles of ZNF689 in hepatocellular carcinoma (HCC) have been elucidated. Here, we investigated the role of ZNF689 in HCC cell lines focusing on cell viability and apoptosis. We found that the knockdown of ZNF689 by its specific siRNA decreased cell viability of Huh7. Cell cycle analysis revealed that the ZNF689 knockdown increased the proportion of the sub-G1 population, accompanied by an increase of annexin V- and TUNEL-positive cells. Western blot analysis revealed that ZNF689 knockdown induced the expression of pro-apoptotic factors of Bcl-2 family, Bax, Bak and jBid. There was a correlation between the expression of ZNF689 and an anticancer drug 5-fluorouracil (5-FU) resistance of HCC cells. In vivo, ZNF689 siRNA reduced tumor viability in HepG2-bearing mice with statistical significance. Furthermore, immunohistochemical analysis demonstrated that nuclei of a significant portion of human HCC surgical specimens were positive for ZNF689. Taken together, our results indicate that ZNF689 blocks pro-apoptotic signaling by suppressing the Bak/Bax/Bid pathway, resulting in the progression of liver cancer and resistance to 5-FU. ZNF689 may be a promising chemotherapeutic target against liver cancer. [Copyright &y& Elsevier]

Abstract: Systems biology allows one to explore life''s design principles, whereas synthetic biology exploits these principles from an engineering perspective. For all that, the capacity of synthetic biology to make progress in the most fundamental areas of knowledge must not be neglected, when, for example, it concerns distinguishing between contingency hypotheses, or physicochemical constraint hypotheses to explain the universality of a phenomenon. A difficult question is the efficient passage from analysis to synthesis. We have tested this passage in our small team, looking at the existence of a global scheme for transcriptional regulation in organisms. However, these results, using systems biology, suggest a biomimetic strategy for the co-regulation of numerous genes involved, for example, in a metabolic circuit designed by an engineer. [Copyright &y& Elsevier]

Abstract: Cardiovascular benefits of regular physical activity are well described and validated. Coronary disease, both in primary and secondary prevention, is markedly concerned. Physical activity corrects most of the cardiovascular risk factors. Moreover, it has also a direct impact on the atherosclerosis progression. It seems that physical activity limits the chronic inflammatory state and oxidative stress level by its modulation on the PGC-1 alpha regulation. Unfortunately, despite this high level of proof, the physical activity prescription level is actually low. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Résumé: Les facteurs de régulation de l’interféron (interferon regulatory factor [IRF]) ont initialement été identifiés dans le cadre de la recherche sur les interférons de type 1. Depuis, de nombreux travaux ont permis de démontrer leur rôle dans la régulation de la réponse immunitaire innée, du développement des différentes cellules du système immunitaire et de l’oncogenèse. Plusieurs études génétiques ont aussi permis d’identifier des variants génétiques, principalement d’IRF5, associés à un risque accru de développer des pathologies auto-immunes. Le rôle biologique des IRF dans ces pathologies a été étudié in vitro mais aussi in vivo dans différents modèles murins. Nous résumons dans cette revue les rôles des différents IRF et, notamment dans les voies de signalisation des Toll-like récepteurs. Nous rapportons aussi les différents travaux impliquant les IRF dans les pathologies dysimmunitaires. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Résumé: Les inhibiteurs des histones déacétylases (iHDAC) représentent une nouvelle classe médicamenteuse en développement thérapeutique dans les néoplasies comme les lymphomes T cutanés. Ces molécules inhibent le processus de déacétylation des protéines histones. L’acétylation des histones est sous la dépendance d’un couple d’activités enzymatiques, histone acétyl transférase (HAT) et histone déacétylase (HDAC), ce qui a pour conséquence la régulation de l’expression des gènes dont ceux codant pour la survie cellulaire ou l’apoptose. Parallèlement à ces effets de régulation de la prolifération cellulaire, les iHDAC possèdent des propriétés anti-inflammatoires, résultant du contrôle de la production des cytokines à activité pro-inflammatoire, de l’action sur les fonctions de certaines cellules comme le lymphocyte T, les monocytes-macrophages, le chondrocyte et l’ostéoclaste, ainsi que sur l’angiogenèse. Les iHDAC sont susceptibles d’apporter une amélioration clinique dans certains modèles animaux d’arthrite, tout comme de prévenir les lésions ostéocartilagineuses. Les données chez l’homme sont limitées à une évaluation de l’expression synoviale des activités enzymatiques HAT et HDAC dans la polyarthrite rhumatoïde. Ces molécules semblent ainsi prometteuses dans le traitement des rhumatismes inflammatoires. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Copyright of Néphrologie & Thérapeutique is the property of John Libbey Eurotext Ltd. and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)

Summary: The hepatocyte nuclear factor-1beta encoded by the TCF2 gene plays a role in the specific regulation of gene expression in various tissues such as liver, kidney, intestine, and pancreatic islets and is involved in the embryonic development of these organs. TCF2 mutations are known to be responsible for maturity-onset diabetes of the young type 5, associated with renal manifestations. Several studies have shown that TCF2 mutations are involved in restricted renal phenotypes. In a recent study, TCF2 anomalies were detected in one third of patients with renal anomalies such as renal cysts, hyperechogenicity, hypoplasia, or single kidneys. Most patients have a complete deletion of the TCF2 gene. With de novo TCF2 anomalies, deletions were the most frequent anomaly. TCF2 anomalies were significantly associated with bilateral renal anomalies and bilateral cortical cysts. However, no genotype–phenotype correlation could be detected. The prenatal phenotype of TCF2 anomalies is mainly bilateral hyperechogenic kidneys. Abnormal renal function, detected in about one third of patients, was independent of the TCF2 genotype. The best parameter to predict renal outcome remains sonographic evaluation. However, progression of the TCF2 phenotype is common. In conclusion, TCF2 molecular anomalies are involved in restricted renal phenotype in childhood without alteration of glucose metabolism. Adequate metabolic follow-up of pediatric patients with a restricted renal phenotype has not yet been defined and consideration of prenatal diagnosis remains extremely difficult given the extremely large phenotypic variability within the same family. [Copyright &y& Elsevier]

Abstract: Pseudomonas aeruginosa is a Gram-negative bacillus frequently encountered in human diseases. P. aeruginosa produces a large number of secreted and cell associated virulence factors. Their production is coordinated by various systems of gene regulation. The correlation and sequential intervention of regulation systems during a pulmonary infection have not been determined yet. Objective: The aim of this study was to analyze the expression of three P. aeruginosa virulence genes (exoS, lasI, and algD) during the first seven days of chronic lung infection. To do so, mice were infected intratracheally with agarose beads containing P. aeruginosa. Results: The results were a progressive decrease of exoS transcription and an increase of algD, and lasI transcription during infection. This dynamic evolution was consistent with the clinical observation, which demonstrated a progressive loss of type III secretion system function and an increase in the mucoid phenotype development in P. aeruginosa strains from cystic fibrosis patients. Conclusion: The development of a P. aeruginosa pulmonary chronic infection associates a decrease of gene expression related to a type III secretion system and an increase of alginate production. [Copyright &y& Elsevier]

Abstract: Genomic imprinting is a process that appeared in mammals. This phenomenon blocks the normal development of parthenogenic and androgenic conceptuses, that is to say benign ovarian teratomas and hydatidiform moles respectively. Pathological modifications of these conceptuses depend on whether the chromosomes come from the mother or father. These pathologies are associated with an accidental anomaly during gametogenesis and/or fertilizing. These reproductive anomalies are sporadic and some familial cases may exist suggesting a genetic control of such diseases. The human andro- and parthenogenetic conceptuses, but more frequently the moles, may be invasive (choriocarcinoma). An imbalance of the imprinting genes may initiate the deregulation of other genes, including oncogenes and anti-oncogenes, which can explain the cancerous modification. Immunological and environmental factors must be also considered (presence of the only paternal chromosomes in the choriocarcinoma). Numerous works on this subject are published and some recent important discoveries underline the roles of genes HOX, Tim P3, E-cad and p-16, and the recurrent chromosome anomalies 7q21+and 8p21- in the mole to choriocarcinoma processing. Although these phenomena are complex and heterogeneous, the andro- and parthenogenote conceptuses are particularly interesting models with which to understand developmental disorders and cancerous progression. [Copyright &y& Elsevier]

Abstract: Purpose. – Advances towards the understanding of gene regulation and protein function recently discovered through iron metabolism disorders are the subject of this review. Current knowledge and key points. – Within a few years the discovery of genes that determine heritable defects of cellular iron uptake or regulation in mice as in humans have provided new insights for investigation into iron metabolism pathways. Future prospects and projects. – It is still unclear how connections are made between new proteins in iron uptake, trafficking and regulation of iron homeostasis. Gene expression studies using microarrays technology in different iron conditions should help to explore iron homeostasis further. [Copyright &y& Elsevier]

Purpose. – DNA chip is a recently developed technique allowing analysis of thousands of genes at the same time in multiple biological samples. In few years it has become an obligatory step in massive gene expression study. The enormous quantity of results generated and the new way of thinking allowed make this kind of study a true revolution.Key message and recent facts. – The enormous discovery potential permitted by the accomplishment of multiple genomes sequencing and the advent of technologies allowing massive gene expression analyses have totally modified the diseases approach. Considering the obtainment of a real full picture of the transcriptional activity in an organ, tissue or cell is now legitimate. DNA microarray is obviously not the only technique allowing such type of analysis but it is without contest the technology which is the most popular and the one which has been recently the subject of the most important developments. It is certainly the technology which brought the main advances in tumour classification and discovery of new biomarkers. The first results based on this technology in inflammatory diseases have recently been reported.Perspective and projects. – The optimal use of DNA microarrays will necessitate a powerful statistical analysis and an high quality biological experimentation. Strict standard and quality criteria are developing. Obviously, the DNA chips have a role to play in multifactorial inflammatory diseases mainly through their potential to bring new answers to diagnostic and pathophysiological problems. One potential development of the technique in such diseases will be the definition of disease specific gene profiles and the generation of chips allowing the detection of few targeted genes with all the known mutations of these genes. The correlation of global or targeted gene expression with clinical and pathological data will allow a new step forward in the understanding and taking care of inflammatory ... [Copyright &y& Elsevier]

Background. – Glucocorticoids are used as anti-inflammatory, immuno-modulatory, anti-proliferative and cytotoxic drugs, but they also trigger important side-effects. These hormones bind to glucocorticoid receptor α (GRα), an intracellular protein, which acts essentially in the nucleus.Main points. – GRα is a ligand-activated transcription factor that positively or negatively regulates gene expression by distinct mechanisms. Stimulation of gene transcription occurs after direct binding of the receptor to specific responsive DNA elements. Gene activation by glucocorticoids is mainly responsible for certain adverse effects. In contrast, the therapeutic effects of glucocorticoids are predominantly mediated through repression of genes encoding inflammatory mediators. Inhibitory protein–protein interaction between the hormone-activated receptor and the transcription factors NF-κB and AP-1 was found to be the underlying mechanism. However, inhibition of other transcription factors may account for deleterious effects of glucocorticoids, such as adrenal suppression and osteoporosis. GRα also mediates rapid non-genomic effects of glucocorticoids. Side-effects are reduced by using topical glucocorticoids which have a low systemic bioavailability. Moreover, it is important to determine the lowest effective maintenance dose of systemic and topical glucocorticoids to further decrease the risk of adverse effects. This is particularly justified because inhibition of AP-1 and NF-κB activities, that is the anti-inflammatory effect, occurs at much lower hormone concentrations than transactivation.Perspectives. – Clinical use of glucocorticoids is limited by occurrence of severe adverse effects. Therefore, the current aim is to design GRα ligands that retain only the anti-inflammatory activities of GC. [Copyright &y& Elsevier]

The last decade has provided evidence that major (glucose, fatty acids, amino acids) or minor (iron, vitamins...) dietary constituents regulated gene expression in an hormonal-independent way. This review focuses on molecular mechanisms by which fatty acids control in a positive or negative manner the expression of genes encoding regulatory protein involved in their own metabolism. Non esterified fatty acids or their CoA derivatives seem to be the main metabolite signals involved in the transcriptional effect of long-chain fatty acids. The effects of fatty acids are either direct, owing to their specific binding to various nuclear receptors (PPAR, LXR, HNF-4α) leading to changes in the trans-activating activity of these transcription factors, or indirect, as the result of changes in the abundance of regulatory transcription factors (SREBP-1c, ChREBP...). The relative contribution of each transcription factor in the fatty acid-induced positive or negative regulation of gene expression is discussed. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction. – SLO (Smith-Lemli-Opitz) syndrome is an autosomal recessive multiple congenital malformations syndrome, including mental retardation, failure to thrive, craniofacial abnormalities, incomplete development of male genitalia, limb anomalies and various internal organ abnormalities. This syndrome is caused by a deficiency of cholesterol biosynthesis at the distal step of 7–dehydrocholesterol reductase (7DHCR).Patients and methods. – We have reviewed 45 cases of SLO syndrome and showed the large clinical spectrum of this syndrome.Results. – The prenatal diagnosis should be considered when dealing with antenatal growth retardation and visceral malformations. At birth, a normal weight does not systematically exclude the diagnosis. Diagnosis was more difficult for older children especially for girls and should be suspected on the association of mental retardation, autism, short stature and microcephaly. We found a correlation between low plasmatic cholesterol measurement and clinical severity. Phenotype-genotype correlation was difficult to establish. However, homozygosity for IVS8-1G>C splice site mutation was associated with severe phenotype.Conclusion. – Better understanding of the 7DHCR gene regulation factors and of the compensatory mechanism of foeto-maternal cholesterol transfer are necessary to explain the wide clinical spectrum of the SLO syndrome. [Copyright &y& Elsevier]

The transcription factor NF-κB has attracted widespread attention among researchers. NF-κB displays some original characteristics including rapid regulation, the wide range of genes that it controls and its probable involvement in several diseases. In resting cells, NF-κB is kept in an inactive form in the cytoplasm where it is bound to a member of the IκB family of inhibitory proteins. NF-κB can be activated by exposure of cells to physiological as well as non physiological stimuli. Upon cell activation, the inhibitors are modified through site specific phosphorylations which target them for subsequent ubiquitination and proteolytic degradation by the proteasome. Removal of the inhibitor unmasks the nuclear localization signals on subunits of NF-κB. Free NF-κB moves to the nucleus where it binds to target DNA elements and activate transcription of genes encoding proteins involved in immune responses, inflammation or cell proliferation. NF-κB could be considered as a co-ordinating element in the body''s responses to situations of stress, infection or inflammation. A tight regulation of NF-κB seems to be crucial since a dysfunction could promote pathogenic processes including AIDS (acquired immunodeficiency syndrome), rheumatoid arthritis and cancer. Additionally, it will be important to understand the exact roles for NF-κB in regulating apoptosis. NF-κB is now regarded as a good therapeutic target and the development of specific inhibitors should lead in the next future to novel therapeutics. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: De nombreuses études démontrent que l’inflammation du tissu adipeux est un des processus biologiques majoritairement perturbé. L’inflammation est induite par de multiples mécanismes qui opèrent à diffèrent niveaux incluant l’altération des cellules immunitaires, la régulation des voies de signalisation et le contrôle de l’expression des gènes. Ces processus inflammatoires font l’objet d’une recherche intense dans le domaine de l’obésité, cependant les mécanismes inflammatoires au niveau du tissu adipeux ne sont pas complètement identifiés. Nos études ont récemment proposé un nouveau concept de régulation de la transcription des gènes par les complexes répresseurs NCOR et SMRT. Dans la présente étude, nous avons étudié l’implication des complexes NCOR, SMRT et GPS2 dans le contrôle de l’inflammation adipocytaire. Matériels et méthodes: L’expression génique ainsi que l’activité du complexe répresseur a été étudié dans le tissu adipeux (et adipocytes) de sujets minces et obèses morbides. Des expériences d’invalidation et de surexpression adénovirale ont également été réalisées sur des adipocytes humains de sujets minces et obèses. Résultats: Nos résultats démontrent une réduction de l’activité du complexe SMRT/GPS2 au niveau des promoteurs des gènes inflammatoires tels que IL6 et MCP-1 dans des adipocytes de sujets obéses. De plus, l’invalidation de GPS2 et SMRT induit une dé-répression des gènes inflammatoires dans des adipocytes tandis que la surexpression de GPS2 dans des adipocytes ű obèses Ƈ inhibent l’expression des gènes inflammatoires. Enfin, l’amélioration du statut inflammatoire induite par une perte de poids ou un traitement par la pioglitzone (anti-diabétique) est associée à une augmentation de l’activité du complexe dans le tissu adipeux. Conclusion: Notre étude révèle l’importance de la repression transcriptionnelle par le complexe SMRT/GPS2 dans le contrôle de l’inflammation adipocytaires chez le sujets obèses. La stabilisation de ce complexe répresseur pourrait être une stratégie thérapeutique afin de limiter l’inflammation adipocytaire dans l’obésité. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Introduction: PepT1, transporteur des oligopeptides joue un rôle primordial dans la régulation de l’apport azoté puisqu’il est responsable de 70 % de l’absorption de l’azote offert à la digestion. Son expression et sa fonctionnalité sont drastiquement diminuées lors du diabète et de l’obésité suggérant une malabsorption de l’azote issu de l’alimentation. Cependant, de manière surprenante, on observe une diminution de l’excrétion d’azote déterminée par le ratio azote fécal/protéine ingérée. Deux hypothèses principales pourraient expliquer ce résultat discordant : soit il s’agit d’une augmentation de l’absorption azotée sous forme d’acides aminés libres, soit une diminution de la production d’azote fécal constituée de la desquamation cellulaire, de la flore bactérienne. Matériels et methods: Le phénotype obésité/diabète est induit chez la souris C57Bl6J par un régime hyperlipidique (HF) pendant 6 semaines. Résultats: On observe chez les souris HF une augmentation de la concentration des acides aminés libres (AA) dans la veine porte (+60 %) parallèlement à une augmentation sélective de l’expression de 2 transporteurs d’AA (Slc6a20a, Slc36a1), mettant en exergue une adaptation spécifique de l’absorption de certains AA en réponse au déficit en PepT1. Aussi le ralentissement du temps de transit (+ 40 %) et l’augmentation de la perméabilité intestinale (+ 80 %) observés pourraient expliquer l’augmentation de l’absorption de la fraction azotée. D’autre part, les souris HF présentent une diminution de l’ADN fécal (− 2,2 x) correspondant à une diminution de la production de l’azote par le catabolisme des cellules desquamées et de la flore bactérienne intestinale. La composition quantitative dans le contenu caecal (− 6 x) et les fèces (− 2,5 x) et qualitative de la flore bactérienne intestinale est modifiée pouvant contribuer à l’altération de la fonctionnalité intestinale des souris diabétiques et obèses Conclusion: Face à la diminution de PepT1, une augmentation de l’absorption azotée et une diminution de la production de l’azote fécal sont établies mettant en exergue différents mécanismes adaptatifs au cours du diabète/obésité. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Introduction: Les études génétiques d’association ont identifié de nombreux loci impliqués dans le diabète de type 2. En revanche, l’identification des gènes responsables et la caractérisation de leur fonction reste difficile chez l’Homme. Nous avons combiné des études génétiques et phénotypiques dans des modèles expérimentaux chez le rat pour identifier des gènes de régulation de l’équilibre glycémique. Matériels et méthodes: Dans le cadre d’un projet collaboratif international (www.euratrans.eu/), la cartographie génétique du contrôle de l’homéostasie glucidique a été entreprise dans une cohorte de 1 400 rats du stock hétérogène (NIH-HS) issu de 8 souches consanguines (BN/SsN, MR/NBUF/N, M520/N, WN/N, ACI/N, WKY/N, F344/N) et dans des souches congéniques des rats diabétiques Goto-Kakizaki (GK) et normoglycémiques BN. Le génotypage des rats HS a été effectué avec 265 551 marqueurs SNPs. Les études phénotypiques sont basées sur des tests de tolérance au glucose ip (NIH-HS) ou iv (congéniques) et la réponse insulinosécrétoire au glucose iv (congéniques). Résultats: Nous avons identifié les loci de contrôle de la tolérance glucidique chez les rats NIH-HS dans des régions étroites des chromosomes 1, 2, 8,10,13 et 15. Une des régions associées du chromosome 1, qui réplique des résultats obtenus chez des hybrides d’un croisement F2 entre GK et BN, contient les gènes SLC1A1 et GLIS3, déjà impliqué dans le diabète chez l’Homme. Une souche congénique, contenant un haplotype d’origine GK couvrant SLC1A1, GLIS3 et seulement 16 autres gènes, montre un défaut de sécrétion d’insuline en réponse au glucose in vivo et in vitro. Des polymorphismes potentiellement fonctionnels identifiés dans SLC1A1 et GLIS3 chez le rat GK pourraient expliquer ces effets. Conclusion: Les études génétiques et phénotypiques chez les rats NIH-HS permettent une cartographie fine directe de loci de susceptibilité au diabète, parmi lesquels le locus GLIS3 déjà impliqué dans le diabète du rat GK et dans des études d’association chez l’Homme. Les souches congéniques du rat GK permettent l’étude précise des effets fonctionnels des polymorphismes identifiés à ce locus. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Summary: Mutations in cystic fibrosis transmembrane conductance regulator gene, CFTR, are responsible for cystic fibrosis, CF, a channelopathie. CFTR protein is a multifunctional protein with a main function of Cl− channel. CFTR is expressed in epithelia (upper airways, intestine, pancreas etc.). In the first part of this revue, we describe the main properties of CFTR underlying that it is not only a Cl− channel protein but also a multifunctional protein. We present a hypothesis which postulates that CFTR is a hub protein interacting with more than 140 proteins, and through these interactions regulates a number of functions which are abnormal in CF (ion transport, inflammation etc.). In the second part of the revue we briefly present a selection of other epithelial channelopathies due to mutations in genes of other Cl− or cation channels. Of note, these channels either interacts with CFTR or are considered as alternative channels in CF, and, as such, are targets for pharmacotherapies. We want to leave the reader with a message that to investigate channalopathies, to dissect the molecular mechanisms underlying channels’activity, allow not only to better understand basic mechanisms of channel regulation but in fine, to propose new targets for pharmacotherapies. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: L’étiologie de l’obésité tient à des facteurs génétiques et environnementaux, notamment nutritionnels. Nous avons montré que des différences de fonds génétiques chez la souris sont associées à une sensibilité forte (129S6), modérée (C57BL6/J) ou à une résistance (BALB/c) à l’obésité induite par un régime riche en graisse (RRG). L’objectif de ce travail est de tester le rôle de changements d’expression des microARN, déterminé par séquençage systématique de petits ARN dans le tissu adipeux blanc, sur l’adaptation physiopathologique au RRG. Matériels et méthodes: Les souris ont été nourries pendant une ou quinze semaines avec un régime contrôle (5 % de graisses) ou un RRG (40 % de graisse). Le séquençage des petits ARN a été effectué sur une plateforme Illumina HiSeq2000. Des algorithmes bioinformatiques ont été appliqués pour aligner les séquences sur le génome référence de souris et déterminer la quantité relative de chaque petit ARN. Résultats: Le RRG s’accompagne de modifications significatives (P<0,05) d’expression de microARN connus (32) et de petits ARN (49) localisés dans des gènes/ESTs ou correspondant à des SnoRNA. La souche sensible C57BL6/J présente des variations d’expression de 11 et 13 microARN respectivement après 1 et 15 semaines de RRG, qui sont largement partagées avec l’autre souche sensible (129S6) (mir34b, c; mir96; mir135a1, a2, b; mir141, mir200b, c; mir449a). En revanche, chez la souche résistante BALB/c, l’expression de 4 microARN différents est modifiée après 1 semaine de RRG et aucune variation n’est retrouvée après 15 semaines. Conclusion: Ces résultats démontrent que l’expression de microARN et de SnoRNA connus, ainsi que de nouveaux petits ARN non encore répertoriés, est sensible à des changements de régime alimentaire. Les différences de régulation transcriptionnelle de ces ARN chez les souches susceptibles (C57BL6/J, 129S6) ou résistante (BALB/c) à l’obésité induite par le RRG suggère un rôle de ces microARNs dans la pathogénèse de l’obésité. Financement : Wellcome Trust, Allocation SFD/MSD 2011, EC FP6 (FGENTCARD), CODDIM [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: La résistance à l’insuline associée à la gestation ou à l’obésité conduit à un accroissement des besoins en insuline qui est compensé par une augmentation de la masse des cellules - pancréatiques. Les microARNs sont de petits ARNs non-codants qui régulent l’expression génique. Ce projet vise à identifier quelles sont les fonctions des microARNs dans l’expansion compensatoire de la masse des cellules - observée pendant la gestation. Matériels et méthodes: Nous avons réalisé un microarray pour mesurer le niveau des microARNs dans les îlots de rattes au 14e jour de gestation et de rattes contrôles. Nous avons ensuite testé le rôle fonctionnel des microARNs identifiés, sur la sécrétion d’insuline, la prolifération et la survie de cellules dissociées issues d’îlots de rats et humains. Résultats: Quatre microARNs ont un niveau significativement modifié dans les îlots des rattes gestantes. Parmis eux, le miR-338-3p, qui est diminué dans les îlots pendant la gestation, est également réduit dans les îlots des souris db/db et des souris rendues obèses suite à un régime hyperlipidique. Le traitement d’îlots de rats et humains avec de l’estradiol ou du GLP-1, entraîne la diminution du miR-338-3p par une voie cAMP-dépendante. La transfection des cellules - de rats et humaines avec un oligonucléotide antisense qui bloque spécifiquement l’activité du miR-338-3p conduit à des changements d’expression de gènes reflétant les modifications géniques observées pendant la gestation. De plus, la réduction du miR-338-3p favorise la prolifération et la survie des cellules sans affecter la sécrétion d’insuline en réponse au glucose. Conclusion: Ces données suggèrent une implication de miR-338-3p dans les mécanismes compensatoires de la masse des cellules - se produisant lors d’un contexte de résistance à l’insuline. Cette étude pourrait fournir de nouveaux outils visant à promouvoir la régénération et la survie des cellules - pour prévenir et traiter le diabète. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: GPR120 est un récepteur couplé aux protéines G qui fixe les acides gras libres insaturés à longue chaîne (particulièrement les oméga-3). GPR120 jouerait un rôle important dans l’équilibre de divers mécanismes physiologiques comme l’adipogenèse, la régulation de l’appétit ou encore l’appétence alimentaire. Le but de cette étude est d’analyser le rôle de GPR120 dans le métabolisme énergétique de la Souris et de l’Homme. Matériels et méthodes: Nous avons généré une Souris déficiente pour Gpr120 (KO) et avons étudié son métabolisme (poids-taille, dépenses énergétiques, masse grasse, glycémie-insulinémie, voies de signalisation impliquées dans l’insulino-résistance, la lipogenèse et l’adipogenèse), sous différentes conditions (régime standard ou hyperlipidique, tests de tolérance au glucose et à l’insuline). Chez l’Homme, nous avons comparé l’expression de GPR120 dans le tissu adipeux omental et sous-cutané, de 14 sujets obèses versus 14 témoins. GPR120 a été séquencé chez 312 individus présentant une obésité sévère. Les mutations non-synonymes identifiées ont été génotypées chez 6 942 individus obèses et 7 654 témoins, et leurs effets sur la fonction de GPR120 ont été étudiés dans des lignées cellulaires. Résultats: Sous régime hyperlipidique, la Souris KO développe une obésité, une intolérance au glucose et une stéatose hépatique, avec une diminution de la différenciation et de la lipogenèse des adipocytes, et une augmentation de la lipogenèse hépatique. L’insulino-résistance de la Souris KO est liée à une diminution du signal insulinique et à une augmentation de l’inflammation du tissu adipeux. Chez l’Homme, nous avons montré que l’expression de GPR120 dans le tissu adipeux était plus élevée chez les individus obèses (P=4.0×10−4). Le séquençage de GPR120 a révélé une mutation non-synonyme (p. R270H) qui inhibe les voies de signalisation de GPR120 et augmente fortement le risque d’obésité (OR=1.62; P=8.0×10−6). Conclusion: Notre étude démontre que le senseur lipidique GPR120 joue un rôle fondamental dans le contrôle de la balance énergétique chez l’Homme et la Souris. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: La production de glucose est composée de deux mécanismes : la glycogénolyse et la néoglucogenèse. La voie de sortie du glucose est dépendante de Glut2 mais aussi d’un mécanisme encore non identifié dépendant de mouvements membranaires. Nos travaux portent sur l’identification de cette voie et se basent sur l’hypothèse selon laquelle des vésicules d’exocytose pourraient jouer un rôle dans la régulation de la production de glucose et dans la libération du glucose dans le milieu extracellulaire. Matériels et méthodes: La libération de glucose d’hépatocytes de souris C57/Bl6 (5 semaines, n=8) nourries et à jeun, en culture primaire, a été étudiée en présence d’un inhibiteur chimique des dynamines (Dynasore, 80 μM, 1 h). De plus, la localisation de l’enzyme clé de la production de glucose, la Glucose-6-phosphatase, après traitement au dynasore, a été étudiée grâce à une protéine chimère par microscopie confocale à fluorescence dans la lignée cellulaire hépatique humaine HepG2. Résultats: La libération de glucose par des hépatocytes de souries nourries (glycogénolyse) n’est pas diminuée en présence de Dynasore alors que celle d’hépatocytes de souris à jeun (néoglucogenèse) est diminuée de 45 % (p<0,05). Le dynasore abolit également l’induction de la libération de glucose par l’AMPc. La distribution de la G6Pase chimérique, qui forme un réseau tubulaire au sein de la cellule, est restreinte à une zone périnucléaire après traitement au dynasore. Discussion: Les dynamines étant des GTPases impliquées dans la formation des vésicules, ces résultats suggèrent fortement l’implication de vésicules dans le processus de sortie du glucose mais aussi dans sa régulation. Ces données suggèrent également que cette voie vésiculaire jouerait un rôle préférentiel dans la néoglucogenèse par rapport à la glycogénolyse. Ceci impliquerait une dissociation de ces deux mécanismes de production de glucose et supporterait l’hypothèse de pools différents de G6P émise en 1987 par Jungermann. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: La sécrétion d’insuline est régulée dans les cellules bêta par la fermeture de canaux ioniques membranaires KATP. Ces canaux sont formés de quatre protéines Kir et de quatre protéines régulatrices SUR (le complexe SUR1/Kir 6.2 est présent dans la cellule béta). Il a récemment été mis en évidence des mutations du gène ABCC8 (codant le récepteur des sulfonylurées SUR1) chez des enfants atteints de diabète néonatal transitoire ou permanent Patients et méthodes: : Cas clinique: Un patient, âgé de 45 ans, consulte pour la découverte d’un diabète lors d’un examen systématique. Il n’existe pas de surpoids, ni d’antécédents familiaux particuliers. Ce patient est initialement traité par metformine, puis une sulfonylurée est ajoutée, mais rapidement arrêtée en raison d’hypoglycémies sévères. L’interrogatoire relève un antécédent de crises comitiales débutant à l’âge de six mois. Elles sont mal contrôlées par différents traitements anti-comitiaux, et vont se prolonger durant l’adolescence et l’âge adulte. En 1993, le diagnostique d’hypoglycémie (glycémie = 0,30g/l) est portée lors d’une crise convulsive. Depuis le traitement anti-épileptique est arrêté et le patient se resucre dès qu’il ressent les premières manifestations. Devant ce tableau clinique, on évoque un diabète monogénique. Une recherche de mutation du gène de l’insuline et du gène KCNJ11 est négative. Est mise en évidence une mutation ponctuelle à l’état hétérozygote d’une mutation du gène ABCC8 (c4435 G > A). Discussion: Nous rapportons ici une mutation qui associe des hypoglycémies survenant dès l’âge de 6 mois et persistant à l’âge adulte, responsable de crises convulsives. Secondairement, le patient va développer un diabète. Les mécanismes physiopathologiques induits par la mutation d’ABCC8 restent à élucider. Cette mutation est probablement auto-activatrice et entraîne des hypoglycémies spontanées (à déclenchement aléatoire). D’autre part la production d’ATP dans la cellule bêta est insuffisante, car mal régulée par les stimuli physiologiques et la conséquence est l’apparition d’un diabète à l’âge adulte. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: Le diabète de type 2 est caractérisé par une hyperglycémie chronique, qui engendre la production d’espèces actives de l’oxygène (EAOs), génératrices de phénomènes de glucotoxicité. Cette hyperglycémie est associée à une induction paradoxale de l’expression de la sous-unité catalytique de la glucose-6-phosphatase (G6PC), enzyme clé de la néoglucogenèse, concourant probablement à la dérégulation de la production hépatique de glucose observée chez les diabétiques. Nous avons fait l’hypothèse que le glucose régule l’activité transcriptionnelle du gène G6pc via les EAOs. Matériels et méthodes: La production d’EAOs induite par un traitement de 24h avec 25mM de glucose est mesurée dans des hépatocytes primaires de rat et la lignée HepG2. L’activité transcriptionnelle du promoteur G6pc (gène rapporteur) est étudiée dans la lignée HepG2. La liaison de facteurs de transcription au promoteur G6pc de rat est étudiée par immunoprécipitation de chromatine issue d’hépatocytes de rats. Résultats: L’induction de l’activité transcriptionnelle du gène G6pc par le glucose est annulée lorsque la quantité d’EAOs est réduite par un traitement antioxydant ou lorsque l’activité transactivatrice du facteur HIF-1alpha (hypoxia inducible factor 1alpha) est annulée par la surexpression de son dominant négatif. Dans les hépatocytes, le glucose induit la stabilisation du facteur HIF-1alpha et sa liaison au promoteur G6pc. La production d’EAOs ou une forte concentration de glucose stimule l’interaction entre HIF-1alpha et le co-facteur CBP (CREB binding protein), permettant à CBP d’être recruté sur le promoteur G6pc. Cette régulation est mise en évidence dans le foie de souris rendues obèses et diabétiques par un régime hypercalorique. Conclusion: Cette étude caractérise le rôle des EAOs et de HIF-1alpha dans la régulation de l’activité transcriptionnelle du gène G6pc par le glucose. Elle met également en évidence un mécanisme graduel de régulation d’HIF-1alpha par le glucose, dépendant des EAOs, semblable à celui décrit lors de l’hypoxie. [Copyright &y& Elsevier]

Objectif: Cette étude tente de mettre en évidence, l’impact d’hormones et neuromédiateurs contrôlant la prise alimentaire dans la régulation de l’expression de l’AGRP et des récepteurs aux mélanocortines dans la surrénale (MC2-R et MC4-R) et l’hypothalamus (MC4-R). Une corrélation des résultats est établie avec les tissus surrénalien et hypothalamique de souris maintenues sous régime hypercalorique qui modifie les taux circulants de ces hormones. Matériels et méthodes: Les lignées murines surrénaliennes ATC7-L et hypothalamique GT1-7 sont traitées pendant 24h par la leptine, insuline et AGRP (10-7M), ACTH, dexaméthasone et NDPα-MSH (10-8M) et la forskoline (10-5M). Les souris C57BL-6J sont rendues obèses par un régime hypercalorique (36% lipides, 19,8% protéines) pendant 16 semaines. L’hypothalamus et les surrénales prélevés sont analysés. L’expression de l’ARN codant pour l’AGRP est analysée par RT-PCR, celles des récepteurs aux mélanocortines par Western Blot et la production d’AGRP ou de corticostérone dans le milieu de culture est mesurée par EIA. Résultats: L’insuline, la leptine et la dexaméthasone augmentent la quantité d’AGRP produite par les cellules ATC7-L et GT1-7, mais ne modifient pas l’expression des ARNm codant l’AGRP. Les quantités de MC2-R et MC4R sont respectivement diminuées par la leptine et augmentées par l’AGRP dans la lignée surrénalienne, mais MC4-R est augmenté par la leptine et l’insuline dans la lignée hypothalamique. Par contre, NDP-MSH ou la forskoline diminuent MC4-R dans la surrénale et l’augmentent dans l’hypothalamus. In vivo, l’expression de l’AGRP chez les souris obèses augmente dans les deux tissus, accompagnée d’une diminution de MC4-R et MC2-R dans la surrénale et l’augmentation de MC4-R dans l’hypothalamus. Conclusion: L’expression des récepteurs aux mélanocortines, régulée de manière opposée dans les deux tissus qui expriment le plus l’AGRP, par des hormones qui contrôlent la prise alimentaire, suggère l’existence d’un lien entre le statut métabolique et l’activation du système mélanocortinergique dans la surrénale, comme dans l’hypothalamus. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: Des études antérieures ont montré l’importance d’un cofacteur de transcription nommé HMGA1 dans la régulation de l’expression du récepteur à l’insuline, INSR. En effet, les souris Hmga1–/– développent une insulino-résistance associée à un phénotype proche du diabète de type 2 humain (DT2). Ces résultats sont également observés chez des patients porteurs de délétions dans la région 3’UTR d’HMGA1. La plupart des polymorphismes découverts par les études sur le génome entier étant associés à un défaut de la cellule β pancréatique, l’insulino-résistance pourrait être, en partie, due à des variants rares situés sur des gènes clés, comme HMGA1. Matériels et méthodes: Sur une population française, nous avons séquencé HMGA1 (exons, promoteur et UTR) chez 368 individus DT2 et 372 individus contrôles. Les mutations associées au DT2 ont été génotypées par HRM (High Resolution Melting) sur un échantillon indépendant composé de 2478 individus DT2 et 3188 individus contrôles afin de confirmer ces associations. Résultats: Sur les 77 mutations identifiées par séquençage, 4 variants ont été retrouvés soit uniquement chez les individus DT2 soit plus fréquemment dans un des deux groupes. Sur une population plus large, 2 variants sont associés au DT2, soit uniquement chez les individus obèses [mut1 : OR=3,25 (1,15–9,20), P=0,009] ou uniquement chez les individus non-obèses [mut2 : OR=1,34 (1,01–1,79), P=0,045]. Conclusion: Nous avons identifié 2 variants peu fréquents qui pourraient être associés au DT2 chez les individus obèses et non obèses, respectivement. Une étude approfondie sur un plus grand nombre d’individus obèses est nécessaire pour confirmer ces 1res observations et analyser leurs effets métaboliques par rapport au statut obésité. La caractérisation fonctionnelle de ces variants doit être étendue aux autres traits phénotypiques. Enfin, nous comptons étudier l’impact de ces variants sur l’expression et l’épissage alternatif d’HMGA1. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: L’obésité est un problème majeur de santé publique, qui dépend de facteurs génétiques et environnementaux. Récemment, des variants génétiques du gène codant pour la protéine FTO (fat mass and obesity associated gene), à la fonction inconnue, ont été fortement associés à un indice de masse corporelle plus élevé. Le rôle de ce gène dans le contrôle du poids est inconnu, mais FTO est fortement présent dans le cerveau et dans le tissu adipeux (TA). L’objectif de notre travail était d’étudier, chez l’homme, la régulation de l’expression de FTO dans le TA et le muscle squelettique, en relation avec l’obésité et le diabète de type 2. Résultats: Nous avons démontré que les niveaux d’ARNm de FTO sont augmentés spécifiquement dans le muscle et le TA de patients diabétiques, alors qu’ils ne sont pas modifiés chez les sujets obèses non diabétiques. L’expression protéique de FTO est également augmentée dans le muscle de patients diabétiques. Un traitement à la rosiglitazone (Avendia 8mg/jour, 12 semaines) restaure en partie l’expression de FTO dans les tissus de patients diabétiques. D’autre part, les niveaux d’ARNm de FTO ne sont pas régulés en aigu par l’insuline et le glucose. Enfin, nous avons surexprimé FTO dans des HEK 293 et étudié les répercussions sur la sensibilité à l’insuline. Nous avons observé une augmentation de la phosphorylation de la PKB, en situation basale et une absence de régulation par l’insuline, en réponse à la surexpression de FTO, suggérant un contrôle négatif de la sensibilité à l’insuline par FTO. Conclusion: Des expériences supplémentaires de signalisation sont en cours pour étayer ces résultats préliminaires qui mettent en évidence un rôle de FTO dans le contrôle de la sensibilité à l’insuline dans le muscle squelettique. [Copyright &y& Elsevier]

Objectif: Les microARN sont des ARN non codants qui contrôlent l’expression des gènes. Leur mode d’action repose sur un appariement spécifique entre les microARN et les ARNm. Si l’appariemment est parfait l’ARNm est clivé, autrement il y a inhibition de la traduction. La découverte des microARN a bouleversé la biologie moléculaire (prix nobel 2006) et il apparaît aujourd’hui que les réseaux de régulations relayés par les microARN jouent un rôle important, puisque ces microARN contrôlent la structure de la chromatine, la méthylation et l’expression des gènes codants pour des facteurs de transcription. Le nombre de gènes cibles par microRNA est d’environ une centaine. Ces gènes cibles étant impliqués dans de nombreuses fonctions, il est aisé d’imaginer qu’une altération de l’expression de microARN peut entraîner une expression aberrante d’un sous-groupe de protéines ou d’ARNm. Le but de ce travail était de définir si l’insuline régulait l’expression de microARN ; et dans un 2e temps, de déterminer si ces microARN pouvaient expliquer une partie de la régulation de l’expression des gènes par l’insuline. Matériels et méthodes: Des sujets sains et diabétiques ont été soumis à des clamp hyperinsulinémiques-euglycémiques de 3h. Par qRT-PCR, nous avons mesuré l’expression de 365 microARN dans des biopsies de muscles prélevées avant et après le clamp. Les gènes cibles des microARN et leurs fonctions ont été identifiés par bioinformatique. Résultats: Trente-neuf microARN sont différentiellement régulés en réponse à l’insuline dans le muscle squelettique de sujets sains, une partie de cette régulation étant médiée par SREBP1c. Les gènes régulés par les microARN sont impliqués majoritairement dans la signalisation ou sont des facteurs de transcription. L’expression de certains microARN est altérée en réponse à l’insuline, dans le muscle de diabétiques de type 2. Conclusion: Nos travaux démontrent pour la première fois que le signal transcriptionnel de l’insuline, principale hormone impliquée dans le contrôle de l’homéostasie énergétique, passe par la régulation de l’expression de microARN. La mise en évidence d’un défaut de régulation de certains microARN chez des diabétiques de type 2 laisse penser qu’ils pourraient participer aux altérations moléculaires rencontrées au cours de l’insulino-résistance. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: Le récepteur mélanocortine-4 (MC4R) fait partie d’une voie de signalisation hypothalamique majeure régulant l’appétit et la dépense énergétique. L’inactivation du MC4R par mutation génétique est connue pour induire une hyperphagie ainsi qu’une diminution de la dépense énergétique aboutissant à l’obésité. Des travaux antérieurs ont démontré que l’induction d’anticorps (Ac) dirigés contre le domaine N-terminal du MC4R induisait chez le rat une obésité ainsi qu’une résistance à l’insuline. Le but de notre étude est d’étudier la présence d’auto-anticorps (autoAc) dirigés contre le domaine N-terminal du MC4R dans le sérum de sujets de poids normal à obèses. Matériels et méthodes: Deux cent seize sera ont été étudiés. La présence d’autoAc a été mise en évidence par techniques Elisa directe et Elisa d’inhibition en utilisant comme cible un peptide dérivé du domaine N-terminal du MC4R. L’interaction de ces autoAc avec le MC4R natif a été confirmée par cytométrie en flux (FACS). Leurs effets pharmacologiques ont été évalués par mesure de l’activité adénylate cyclase (AC) de cellules HEK-293 exprimant le MC4R humain et après transfert passif des autoAc par injection intracérébroventriculaire chez le rat. Résultats: Les résultats positifs pour toutes les étapes Elisa, FACS et AC (prévalence : 3,6 %) ont été obtenus avec les sera provenant de personnes obèses ou en surpoids mais pas chez des individus ayant un IMC normal. Les paramètres d’interaction de ces autoAc ont été déterminés par résonance plasmonique de surface et par immunoprécipitation avec la protéine native MC4R. Il a enfin été démontré que ces autoAc augmentent la prise alimentaire des rats après un transfert passif. Discussion: Le fait que de tels autoAc n’aient été trouvés que chez des patients obèses ou en surpoids suggère un possible rôle dans le développement de l’obésité. Conclusion: Cette étude démontre pour la première fois l’existence chez l’homme d’autoAc dirigés contre le MC4R capables de bloquer son activité. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: Les diabètes monogéniques non auto-immuns regroupent plusieurs formes de défauts insulino-sécrétoires, de déclaration pédiatrique ou chez l’adolescent et l’adulte jeune. L’identification de mutations causales de protéines clés dans la fonction bêta pancréatique a permis une classification nosologique des sous-types de diabète néonatal (DN), permanent ou transitoire, et de Mody, et des avancées thérapeutiques notamment chez les patients avec anomalies du canal K+ ATP-dépendant. Des mutations hétérozygotes du gène de la préproinsuline (INS) sont aussi responsables de DN permanent. Patients et méthodes: Le gène INS a été séquencé dans une cohorte de 40 patients (DN, et diabète non auto-immun diagnostiqué avant 5 ans) sans mutation des gènes KCNJ11 ou ABCC8, et chez 110 patients présentant un diabète familial (type Mody, diagnostiqué avant 35 ans) d’étiologie génétique inconnue. L’identification de mutations INS non synonymes rares (< 1 %) a été corrélée aux données phénotypiques des patients. Des expériences cellulaires ont été réalisées après mutagénèse de 2 mutations identifiées par séquençage. Résultats: Dans notre cohorte de patients, les mutations INS expliquent ∼10 % du diabète permanent chez l’enfant, avec une variabilité importante de l’âge au diagnostic (25 jours,>4 ans) comparé au groupe des patients DN avec mutations KCNJ11/ABCC8 (p<0,001). Les autres caractéristiques cliniques ne sont pas significativement différentes des autres DN. Deux nouvelles mutations INS sont associées à un diabète plus tardif (âge au diagnostic : 9-17 ans) sans surpoids ni complications vasculaires, et non insulino-requérant chez plusieurs sujets. L’expression des 2 mutants dans une lignée cellulaire bêta pancréatique montre une diminution importante de la production d’insuline mature. Conclusion: De nouvelles mutations INS de transmission dominante sont responsables de diabète permanent non auto-immun chez le nouveau-né et l’enfant, et chez l’adulte jeune (type Mody). Le mécanisme étiologique serait en faveur d’un processus protéotoxique par la production de précurseurs de l’insuline de conformation anormale et l’activation d’un stress du réticulum endoplasmique, pouvant entraîner une apoptose des cellules bêta pancréatiques. [Copyright &y& Elsevier]

L’ARN interférence, mécanisme de régulation de l’expression des gènes, est médiée par les siARNs et les microARNs, ARN non-codants de 20 à 22 nucléotides affectant la régulation post-transcriptionnelle d’ARNm cibles avec lesquels ils s’apparient. La RNase DICER est une enzyme centrale de la biosynthèse des siARNs et microARNs. Les souris dont le gène dicer est invalidé ont un phénotype complexe, et meurent très tôt pendant le développement, notamment à cause d’un défaut d’angiogenèse. Afin d’étudier l’ARN interférence au cours de l’angiogenèse embryonnaire, des souris dont le gène dicer est floxé (mutant conditionnel) sont croisées avec des souris exprimant la recombinase Cre, de manière constitutive, sous le contrôle du promoteur du gène tie2, dirigeant ainsi son expression dans les cellules endothéliales (CE) et les cellules hématopiétiques. Nos résultats montrent que l’invalidation de dicer sous le contrôle du promoteur du gène tie2 entraine une mortalité embryonnaire suite à un œdème et des hémorragies au treizième jour du développement (E13,5). L’analyse histologique montre des vaisseaux lymphatiques remplis de sang, suggérant une mauvaise séparation du réseau sanguin et lymphatique. Cette hypothèse est étudiée par marquage des vaisseaux lymphatiques (LYVE-1) et des vaisseaux sanguins (PECAM) sur embryon entier et peaux isolées à différents stades précédant la mort. Ces embryons présentent également un problème de développement du foie, probablement dû à l’activité du promoteur tie2 dans les lignées hématopoiétiques. La mise en culture de ces foies fœtaux à E13,5 révèle une atteinte des précurseurs hématopoétiques. L’étude de ces précurseurs à des stades plus précoces (E8,5) est en cours au laboratoire. Nos résultats démontrent donc un rôle important de l’ARN interférence dans le contrôle épigénétique de l’angiogenèse et de la lymphangiogenèse embryonnaire mais également dans le développement de l’hématopoièse, suggérant son implication dans la différenciation veino-lymphangiogenèse, dont les mécanismes moléculaires seront discutés. [Copyright &y& Elsevier]