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Group B Streptococcus (GBS) or Streptococcus agalactiae may be part of the intestinal microbiota of the human beings, especially colonizing the gastro-intestinal and genitourinary tract. This species is often related to life-threatening diseases in newborns, such as septicemia, pneumonia and meningitis and is associated with complications during pregnancy and the postpartum period. The aim of this study was to analyze the occurrence of GBS in pregnant women users the public health service, the performance of medium Hitchens-Pike-Todd-Hewitt (HPTH) and antimicrobial susceptibility of strains of GBS. Descriptive analytical cross-sectional study carried out with 556 pregnant women, 496 of whom were between 35 and 37 weeks of pregnancy and 60 of them were ≥ 38 weeks. The study was conducted from September 2011 to March 2014 in northern Paraná State. Vaginal and anorectal clinical samples of each pregnant woman were inoculated on sheep blood agar, in HPTH and Todd-Hewitt medium. The clinical isolates studied were subjected to antimicrobial susceptibility testing by agar diffusion, according to the standards of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Of the 496 pregnant women, 141 (28.4%) were positive for GBS, based on the combination of the three culture media and on clinical samples. The detection rates were 22.2% for HPTH medium, 21.2% for sheep blood agar, and 13.1% for the Todd-Hewitt enrichment broth. Of the 60 women at ≥ 38 weeks of pregnancy, seven (11.7%) were positive for GBS, and there was growth in HPTH and sheep blood agar media. To the 141 women who were positive for GBS, 136 antimicrobial susceptibility tests were performed, in which 100% proved sensitive to penicillin. Erythromycin resistance showed 8.1% and clindamycin 2.2%. The results demonstrate that HPTH and sheep blood agar media were more sensitive than Todd-Hewitt broth enrichment for screening GBS in pregnant women, suggesting that the two media should be used together for vaginal and anorectal samples. All isolates of GBS showed sensitivity to the most frequently used drug for intrapartum prophylaxis: penicillin. Resistance to erythromycin and clindamycin was also detected, thus reducing the options for prophylaxis in women who are allergic to penicillin. Based on these results, it is recommended that the health unit perform universal screening of pregnant women and adequate prophylaxis when indicated. O Estreptococo do Grupo B (EGB) ou Streptococcus agalactiae pode fazer parte da microbiota dos seres humanos, colonizando principalmente o trato gastro-intestinal e geniturinário. Esta espécie é frequentemente relacionada a doenças potencialmente fatais em recém-nascidos, como septicemia, pneumonia e meningite e está associada a complicações durante a gravidez e período pós-parto. Os objetivos deste estudo foram analisar a ocorrência de EGB em gestantes usuárias do serviço público de saúde, o desempenho do meio de cultura Hitchens-Pike-Todd-Hewitt (HPTH) e a sensibilidade antimicrobiana de isolados clínicos de EGB. Estudo transversal analítico descritivo realizado com 556 gestantes, das quais 496 estavam com 35-37 semanas de gestação e 60 estavam com ≥ 38 semanas. O estudo foi realizado de setembro de 2011 a março de 2014 no norte do Paraná. Amostras clínicas vaginal e anorretal de cada gestante foram semeadas em ágar sangue de carneiro, em meio HPTH e Todd-Hewitt. Os isolados clínicos estudados foram submetidos ao teste de susceptibilidade aos antimicrobianos por difusão em ágar, de acordo com as normas do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Das 496 gestantes, 141 (28,4%) foram positivas para EGB, com base na combinação dos três meios de cultura e espécimes clínicos. As taxas de detecção foram de 22,2% para o meio HPTH, 21,2% para agar sangue de carneiro, e 13,1% para o caldo de enriquecimento Todd-Hewitt. Das 60 gestantes com ≥ 38 semanas de gestação, sete (11,7%) foram positivas para EGB, sendo que houve crescimento nos meios de HPTH e Agar sangue de carneiro. Das 141 gestantes positivas para EGB foram realizados 136 testes de sensibilidade aos antimicrobianos, no qual 100% foram sensíveis a penicilina. A eritromicina apresentou 8,1% de resistência e a clindamicina 2,2%. Os resultados demonstram que o meio HPTH e Agar sangue de carneiro foram mais sensíveis que o caldo de enriquecimento Todd-Hewitt para triagem de EGB em gestantes, indicando que os dois meios devem ser usados em conjunto para amostras vaginal e anorretal. Todos os isolados de EGB mostraram sensibilidade à droga mais frequentemente usada para a profilaxia intraparto: penicilina. A resistência à clindamicina e eritromicina também foi detectada, diminuindo assim as opções para a profilaxia em mulheres que são alérgicas à penicilina. Em função destes resultados, recomenda-se que a unidade de saúde realize rastreio universal das gestantes e profilaxia adequada quando indicado. 87 f

The leishmaniases are parasitic diseases, occurring in 98 countries, including Brazil. In Brazil, American cutaneous leishmaniasis (ACL) has been reported in all states and is endemic in Paraná. Most cases of leishmaniasis in Paraná are caused by Leishmania (Viannia) braziliensis that has the potential to develop mucosal form. The appearance of mucosal injury usually occurs years after the healing of the primary lesion and can occur because of inadequate treatment of primary lesions or a failure in cellular immunity, affecting the persistence of the parasite in the body. Thus, the objective was to evaluate the presence of Leishmania (Viannia) in polymorphonuclear and mononuclear cells in the blood of patients with LTA, using the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR) and specific primers in order to better understand the mechanisms of persistence of the parasite and therefore the pathogenesis of the disease. To obtain cells was used the reagent Mono-Poly Resolving Medium. After polymorphonuclear and mononuclear separation and washing, DNA was extracted by guanidine isothiocyanate and phenol. It was used MP3H and MP1L primers for amplification. It were studied 94 patients, 63.83% were men and, 36.17% women. From 94 patients, 71 (75.53%) had primary lesion and no history of CL and, 23 (24.47%) reported previous infection. From 71 patients with primary lesions, 30 (31.91%) were diagnosed according to tests recommended by the Health Ministry (Brazil). From 23 patients who reported previous infection, 7 (30.43%) presented reactivation of the primary lesion, 2 (8.69%) presented new skin lesion and, 14 (60.86%) returned for treatment control. PCR was positive in mononuclear cells of two patients who presented active primary lesion with 3 to 6 months of time evolution and these patients did not present history of CL. The presence of Leishmania (Viannia) DNA in mononuclear cells indicates that, in some patients, the parasite is able to escape to the macrophage elimination mechanisms and remain in the body and, hematogenic spread can occur with development of mucosal lesion. As leishmanioses são doenças parasitárias, ocorrendo em 98 países. No Brasil, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) tem sido notificada em todos os estados, sendo endêmica no Paraná. A maioria dos casos de LTA no Paraná é causada por Leishmania (Viannia) braziliensis que tem potencial de desenvolver a forma mucosa. O aparecimento de lesões na mucosa e recidivas ocorrem geralmente anos após a cura da lesão primária e pode ocorrer devido tratamento inadequado das lesões primárias ou falha na imunidade celular, ocorrendo a persistência do parasito no organismo. Desta forma, o objetivo foi avaliar a presença de Leishmania (Viannia) em polimorfonucleares e mononucleares no sangue de pacientes com LTA, utilizando a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), a fim de melhor entender os mecanismos da persistência do parasito e consequentemente a patogenia da doença. Para a obtenção das células foi utilizado o reagente Mono-Poly Resolving Medium. Após a separação e a lavagem de polimorfonucleares e mononucleares, o DNA foi extraído usando o método de isotiocianato de guanidina e fenol. Para amplificação foi utilizado os iniciadores MP3H/MP1L. Foram estudados 94 pacientes, sendo 63,83% homens e 36,17% mulheres. Destes, 71 (75,53%) tinham lesão primária e não apresentavam histórico de LTA e 23 (24,47%) relataram infecção anterior por Leishmania. Dos 71 pacientes com lesão primária sem histórico anterior de infecção por Leishmania, 30 (31,91%) foram diagnosticados com LTA de acordo com exames preconizados pelo Ministério da Saúde (Brasil). Dos 23 pacientes que relataram infecção anterior, 7 (30,43%) apresentavam reativação da lesão primária, 2 (8,69%) apresentavam nova lesão cutânea e 14 (60,86%) retornaram para controle do tratamento. A PCR foi positiva nos mononucleares de dois pacientes que não apresentavam histórico anterior de LTA e apresentavam lesão primária ativa com tempo de evolução de 3 e 6 meses. A presença do DNA de Leishmania (Viannia) nos mononucleares indica que em alguns pacientes, o parasito é capaz de escapar dos mecanismos de eliminação dos macrófagos e permanecer no organismo, podendo ocorrer disseminação hematogênica e o desenvolvimento de lesão mucosa ou recidiva futura. 33 f

Four experiments were carried out aiming to evaluate the supplementation effect of crude propolis (PBr) and ethanolic extract of propolis (EEP) on zootechnical, immune parameters and cecal microbiota of broilers chickens. Exp I and II - In each experiment, 1,020 birds were distributed in a completely randomized design, with six treatments and five replicates. Treatments in Exp I consisted of diets containing 0, 1000, 2000, 3000, 4000 and 5000 ppm of EEP and for the Exp II the diets contained 0, 100, 200, 300, 400 and 500 ppm of PBr. The experimental diets were administered from the 1st to the 21st day of life, and after this period a diet based on corn and soybean meal was provided. Exp I ? The supplementation of the EEP in the period from the 1st to the 7th day negatively affected (P0.05). Although no improvements occurred on carcass and cuts yield, a reduction was observed (P0.05) for total cholesterol, triglyceride and alanine aminotransferase enzyme (ALT), however, the aspartate aminotransferase enzyme (AST) showed a quadratic behavior (P0.05) weight gain, feed intake and feed conversion. On the 7th and the 21st days there was a linear and quadratic behavior (P0.05) the yield of cuts. No changes were observed (P>0.05) in triglyceride level, ALT and AST activities, however, treatments with 400 and 500 ppm of PBr had higher (P0.05). The interdigital response to phytohemagglutinin showed negative linear and quadratic behavior (P0.05) in the percentage of Clostridiaceae, Bacteroidaceae, Lactobacillus spp. and Enterobacteriaceae group. The supplementation of EEP in the diets was able to decrease the population of Gammaproteobacteria in the ceca of broiler chickens. In the Exp IV - The inclusion of PBr did not affect (P>0.05) relative weights of lymphoid. Foram realizados quatro experimentos para avaliar o efeito da suplementação de própolis bruta (PBr) e de extrato etanólico de própolis (EEP) sobre parâmetros zootécnicos, imunitários e microbiota cecal de frangos de corte. Exp I e II - Em cada experimento, 1020 aves foram distribuídas em um delineamento experimental inteiramente ao acaso, com seis tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos para o Exp. I consistiram de rações contendo 0, 1000, 2000, 3000, 4000 e 5000 ppm de EEP e para o Exp. II rações com 0, 100, 200, 300, 400 e 500 ppm de PBr. As dietas foram ministradas do 1° ao 21° dia de vida das aves, sendo posteriormente, fornecida uma ração única à base de milho e farelo de soja. Exp I - A suplementação de EEP no período de um a sete dias afetou negativamente (P0,05). Não houve melhorias quanto ao rendimento de carcaça e de cortes, porém, observou-se redução (P0,05) para colesterol total, triglicérides e para a enzima alanina aminotransferase (ALT), no entanto, a enzima aspartato aminotransferase (AST) apresentou comportamento quadrático (P0,05) o ganho de peso, o consumo de ração e a conversão alimentar. Aos sete 1 dias, observou-se comportamento linear e quadrático (P0,05) o rendimento de cortes. Não foram observadas modificações (P>0,05) quanto ao nível de triglicérides, ALT e AST, no entanto, os níveis de 400 e 500 ppm de PBr apresentaram maiores (P0,05). A reação interdigital a fitohemaglutinina apresentou comportamento linear negativo e quadrático (P0,05). A inclusão de EEP nas dietas reduziu a população de Gammaproteobacteria nos cecos de frangos de corte. Exp. IV - A inclusão de PBr não afetou (P>0,05) os pesos relativos dos órgãos linfóides e a produção de anticorpos séricos contra a doença de Newcastle. Observou-se comportamento quadrático (P0,05). A suplementação de PBr nas dietas aumentou a população das bactérias estritamente benéficas e reduziu as potencialmente nocivas. xv, 131 f