Nitriet en nitraat in bloedplasma ; methode ontwikkeling, validatie en uitvoering

RIVM rapport:Dit rapport beschrijft de ontwikkeling en de prestatiekenmerken van de HPIC/UV methode die voor het bepalen van nitriet en nitraat concentraties in bloedplasma is ontwikkeld en gevalideerd. Bij de ontwikkelde methode wordt het monster bloedplasma onteiwit met methanol. Na centrifugeren wordt het supernatant verdund met water en chromatografisch gezuiverd over een SPE C18-kolom. Vervolgens wordt het nitriet- en nitraatgehalte bepaald met behulp van HPIC en UV-detectie bij 208 nm. De terugwinning voor nitriet is gemiddeld 97% (N=25) en voor nitraat gemiddeld 100% (N=25). De bepaalbaarheidsgrens voor nitriet is 0,3 mg/kg bloedplasma en voor nitraat 2 mg/kg bloedplasma.
This report describes the development and performance characteristics of a HPIC/UV method which was developed and validated for the determination of nitrite and nitrate concentrations in human blood plasma. The blood plasma sample is deproteinized with methanol. After centrifugation the supernatant is diluted with water and cleaned up chromatographically over a SPE C18-column. The eluate is analyzed for nitrite and nitrate by HPIC with UV-detection at 208 nm. The recovery for nitrite is on average 97% (N=25) and for nitrate on average 100% (N=25). The limit of quantification for nitrite is 0.3 mg/kg blood plasma and for nitrate 2 mg/kg blood plasma.