Obtención y caracterización química de líneas celulares de Rosmarinus officinalis L.

El romero (Rosmarinus officinalis L.) es una planta utilizada en la industria alimentaria, cosmética y farmacéutica que produce compuestos con actividad antioxidante, antibacteriana y antiinflamatoria. En estudios de análisis químico se han identificado como compuestos mayoritarios al ácido carnósico, carnosol y ácido rosmarínico. En cultivos in vitro de romero se acumulan moléculas sintetizadas por la planta silvestre. El objetivo de este trabajo fue analizar el perfil químico de tres líneas celulares de Rosmarinus officinalis L. Se establecieron cultivos de células desdiferenciadas a partir de explantes de hoja en medio Murashige y Skoog (MS) adicionado con sacarosa (30 g/L), fitagel (3 g/L), ácido 2,4-diclorofenoxiacético (1.5 mg/L) y 6-bencilaminopurina (2.0 mg/L). Se analizó el proceso de desdiferenciación celular mediante análisis digital de imágenes con el software ImageJ® y se seleccionaron las líneas celulares. La extracción de los compuestos de romero por maceración se llevó a cabo con etanol absoluto. Los extractos de las líneas celulares se analizaron mediante cromatografía en capa fina (TLC), cromatografía en capa fina de alta resolución (HPTLC), cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS) y cromatografía de líquidos acoplada a espectrometría de masas en tándem (UHPLC-MS/MS). Los resultados permiten identificar tres etapas durante el proceso de desdiferenciación en explantes de romero, definidas como: adaptación del tejido al medio de cultivo, inducción al proceso de desdiferenciación celular y duplicación de células desdiferenciadas. Se logró obtener tres líneas celulares denominadas RoG (línea celular verde), RoY (línea celular amarilla), RoW (línea celular blanca). Se observaron diferencias en el perfil químico de las tres líneas celulares mediante TLC y HPTLC y se identificaron los compuestos de cada línea mediante GC-MS y UHPLC-MS/MS.