Einfluss von Roquefortin C auf Tiergesundheit und Lebensmittelqualität bei Wiederkäuern

Das Ziel der vorliegenden Arbeit war festzustellen, in welchem Ausmaß praxisrelevante Roquefortindosierungen die Tiergesundheit von Wiederkäuern (Schafen) beeinträchtigen. Darüber hinaus wurde überprüft, in welchem Umfang ein ‘carry over’ dieser Substanz in die Nahrungskette zu erwarten ist. Zu diesem Zweck wurden 18 weibliche Schafe der Rasse Merinolandschaf nach dem Zufallsprinzip in drei Gruppen (M, H, K) aufgeteilt. Während der Behandlungsperiode wurden den Tieren der Gruppe „M“ und „H“ täglich 10,00 mg bzw. 50 mg Roquefortin oral verabreicht. Für die Durchführung des Versuchsvorhabens mussten zunächst 10 g Roquefortin produziert werden. Dazu wurden zunächst die optimalen Kulturbedingungen für P. roqueforti-Oberflächenkulturen ermittelt sowie die Roquefortinsyntheseleistung verschiedener P. roqueforti-Stämme überprüft. Parallel zu diesen Versuchen wurden geeignete Analysenverfahren zum Nachweis dieser Verbindung aus tierischen Geweben und Exkreten entwickelt und diese Methoden validiert. Die Untersuchungen zur Produktion von Roquefortin ergab signifikante Unterschiede zwischen den untersuchten P.roqueforti-Stämmen hinsichtlich der Roquefortinsynthese. Eine Stimulierung der Roquefortinsynthese konnte bei einer Senkung des Nährmedien-pH beobachtet werden, dagegen hatte der Zusatz von L-Tryptophan und L-Histidin keinen signifikanten Einfluß auf die Roquefortinbildung. Die Extraktion von Roquefortin aus den P. roqueforti-Kulturen wurde mit Ethylacetat (Medium) und Chloroform (Mycel) durchgeführt und die gewonnenen Rohextrakte mit Hilfe einer Flüssig/Flüssig-Extraktion in Kombination mit Säure-Base-Schritt gereinigt. Das gewonnene Produkt war weitgehend frei von störenden Begleitsubstanzen, wie die Untersuchungen mittels HPLC, HPTLC und MS zeigten. Auch waren keine Unterschiede in der antibiotischen Aktivität zwischen dem produzierten Roquefortin und der Roquefortin-Referenzsubstanz zu beobachten. Der Einfluß von Roquefortin auf die Tiergesundheit von Schafen wurde i
The intention of this study has been to obtain practical knowledge about the dosis of roquefortine injuriously affecting the health of ruminants (sheep). Moreover, it has been examined which degree of “carry over” effect into the food chain will have to be expected. For the test, eighteen female sheep, race Merinolandschaf, have been casually divided into three groups (M, H, K). During the testing period groups M and H received 10,00 and 50,00 mg of roquefortine, respectively, both orally and daily. To carry out the study, 10 g of roquefortine had to be produced at first. Therefore, optimum cultivation conditions for surface cultures had to be ascertained as well as knowledge about the synthesis performance of different mould strains of P. roqueforti. Parallel to these tests, suitable analytical methods had to be developed in order to detect roquefortine in animal tissues and excreta. In the end, all methods of detection had to be validated. The experiments regarding roquefortine synthesis showed significant differences among the tested strains of P. roqueforti. Stimulation of roquefortine synthesis has been achieved by reducing the pH of nutrition media. On the other hand, adding L-tryptophan and Lhistidin did not significantly influence the production of roquefortine. Ethyl acetate (media) and chloroform (mycel) have been used to extract roquefortine out of P. roqueforti cultures. The raw extracts have been purified by the method of liquid/liquid-extraction combined with acid-base-step. The product gained has been relatively free of interfering substances, as shown by tests with HPLC, HPTLC and MS. Moreover, no differences have been found in the antibiotic activities between roquefortine produced and referential substances. The influence of roquefortine on health of sheep was examined in an application of roquefortine to sheep for twenty days. No adverse effects on the health of animals in general could be observed. Moreover, testing the haematological, clinic-che