Development of immunological methods for detection of immunodeficiencies in mutant mice

Main task of this thesis was the development and evaluation of immunological screening protocols for a standardized mouse phenotyping. Therefore, established assays like ELISA and flow cytometry were adapted to "high-throughput" technologies, as well as innovative bead array systems. With the help of these screening protocols, more than 5000 ENU mutagenized mice were tested for the cellular composition of the peripheral blood and the concentration of immunoglobulin subclasses in the blood plasma, and more than 25 new mutant mouse lines with immunological alterations could be established. In addition, the prerequisites and the workflow for a Listeria monozytogenes "challenge screen" of ENU mutagenized was established, in order to be able to specifically identify mouse mutants with defects in the immune response.
Schwerpunkt der vorliegenden Arbeit war die Entwicklung und Evaluierung von immunologischen Testverfahren für eine standardisierte Maus-Phänotypisierung. Dabei wurden etablierte Messmethoden wie ELISA und Durchflusszytometrie an „High-Throughput“ Bedingungen angepasst, sowie innovative Bead Array Systeme in die Untersuchungen integriert. Mit Hilfe der entwickelten Screeningprotokolle konnten mehr als 5000 ENU-mutagenisierte Mäuse hinsichtlich der zellulären Zusammensetzung des peripheren Blutes und der Konzentration von Immunglobulin-Subklassen im Blutplasma charakterisiert, und mehr als 25 neue Mausmutantenlinien mit immunologischen Abnormalitäten etabliert werden. Zusätzlich wurden die Vorraussetzungen und Arbeitsabläufe für einen „Challengescreen“ von ENU mutagenisierten Mäusen nach Infektion mit Listeria monocytogenes etabliert, um zukünftig gezielt Mausmutanten mit Defekten in der Immunabwehr zu identifizieren.